Boifizca

Fenomene de suprafa. Tensiunea superficiala

Existena tensiunii supereficiale explic multe fenomene din lumea vie. Dou
picturi mai mici, cnd se ating tind s se contopeasc. Pictura mai mare va avea o
suprafa total mai mic, deci o energie superficial mai mic. Forma sferic a celulelor
libere este, de asemenea, condiionat de tensiunea superficial. Deci fenomenele
superficiale arat evoluia unui sistem spre starea de echilibru care este starea
caracterizat printr-un minim energetic.
S considerm un lichid aflat ntr-un vas. O molecul aflat n interiorul lichidului
este atras de celelalte molecule aflate n vecittate cu fore egale ca mrime astfel nct
rezultanta acestor fore este nul (Fig.I.12).

Fig.I.1 Tensiunea superficial

Dac ns se consider o molecul din stratul superficial (stratul de grosime egal
cu raza de aciune molecular), atunci forele de atracie care se manifest din partea
gazului sunt mai mici dect cele din partea lichidului i rezultanta acestora va fi nenul.
Corespunztor acestei fore rezultante, apare o presiune care este exercitat de stratul
superficial asupra lichidului, denumit presiune suplimentar.
Ca urmare lichidul tinde s reduc dimensiunile stratului superficial, se comport
ca o membran elastic.
Forele care apar tangent la conturul suprafaei libere a lichidului tinznd s-i
micoreze aceast suprafa sunt forele de tensiune superficial.
Deci fora de tensiune superficial poate fi scris sub forma:
F l
(I.1)
Coeficientul de proporionalitate se numete coeficient de tensiune superficial i n
SI se msoar n N/m.
Coeficientul de tensiune superficial poate fi definit i n funcie de energia
consumat pentru a menine neschimbat suprafaa liber a lichidului. Lucrul mecanic
consumat n acest scop va fi, dup definiie:
d L Fdl
(I.2)
Inlocuind (I.1) n (I.2) se obine:
d L ldl dS
(I.3)
Coeficientul de tensiune superficial reprezint energia consumat pentru a mri cu
o unitate suprafaa liber a lichidului. In SI se msoar n J/m 2.

Datorit tensiunii superficiale care tinde s micoreze suprafaa liber a lichidului,

acesta se comport ca o membran elastic. Deoarece forma sferic este forma care,
pentru un volum dat, are suprafaa minim, din acest motiv picturile de lichid sunt
sferice. Forma celulelor libere i a unor fiine unicelulare este determinat de asemenea
de tensiunea superficila, acestea cptnd forme ce corespund unor suprafee minimale.
Coeficientul de tensiune superficial este influenat de o serie de factori: temperatur,
concentraie de sruri etc.
Solviii modific tensiunea superficial a solventului. In cazul apei, solviii
minerali(acizi, baze, sruri minerale) mresc uor tensiunea superficial. Solviii organici,
ns, reduc tensiunea superficial.
Foarte importante sunt substanele tensioactive care au proprietatea de a micora
tensiunea superficial: alcooli, acizi organici, detergeni.
Moleculele acestor substane au proprietatea de a micora forele de coeziune
dintre moleculele solventului. Lichidele din organismele vii au, n majoritatea cazurilor,
coeficieni de tensiune superficial mai mici dect ai apei.
Tensiunea superficial mare a apei, proprietile asemntoare unei membrane
elastice favorizeaz meninerea i deplasarea unor insecte marine pe suprafaa apei
(Hidrometa). Ele prezint la extremitile membrelor ramificaii fine unse cu grsimi care
face ca ele s nu se ude.

Larvele narului anofel se prind de suprafaa apei. Stropind apa

cu petrol se poate lupta mpotriva malariei pentru c petrolul scade
tensiunea superficial a apei iar larvele cad la adncime i mo

Fenomene de contact.Capilaritatea.
-apar la contactul unui lichid cu vasul in care se afla
-datorita interactiunii moleculelor lichidului cu vasul in care se afla=> fenomene spcifice:
a) Dac fora de coeziune dintre moleculele lichidului este mai mare dect fora de
adeziune (ce se manifest ntre moleculele de solid i cele de lichid) se spune c
lichidul nu ud vasul n care se afl. Astfel de lichide formeaz meniscuri
convexe (Fig. I.13). => liofobe (/2 = 90 grade)

Fig.I.2 Fenomene de contact

b) Dac fora de adeziune este mai mare dect cea de coeziune, lichidul ud vasul
n care se afl i formeaz un menisc concav.=> liofile

c) Fa=Fc => nu formeaza menisc (indiferente) =90 grade

In raport cu lichidele, o suprafa solid poate fi:
liofil dac este udat de un lichid
indiferent
liofob, dac nu este udat de lichid.
Un solid poate fi liofil pentru un lichid i liofob pentru alt lichid.
De exemplu sticla este liofil pentru ap (hidrofil) dar liofob pentru mercur
(mercurofob).
Aceste fenomene de contact explic fenomenul de capilaritate care este fenomenul
de urcare a lichidelor n capilarele liofile i coborare n cele liofobe, abtndu-se de la
principiul vaselor comunicante (Fig.I.3)

Fig.I.3 Capilaritatea
Tuburile capilare sunt tuburi care au diametrele foarte mici (de ordinul milimetrilor
sau mai mici).
Inlimea la care urc sau coboar lichidul este dat de legea lui Jurin:
h

2 cos
rg

(I.4)

unde este densitatea lichidului, r este raza tubului, g este acceleraia gravitaional,
coeficientul de tensiune superficial iar este unghiul de racordare (Fig.I.4)

Fig.I.4 Ilustrarea legii lui Jurin

O coloan de lichid, aflat ntr-un tub capilar dar care este fragmentat prin bule de
gaz, opune o mare rezisten la naintare deoarece trebuie nvins, n afar de fora de
adeziune i fora de tensiune superficial ce apare la nivelul fiecrui menisc realizat de
bulele gazoase.
Capilaritatea joac un rol fundamental i pentru viaa plantelor n special din dou
motive:

- capilaritatea asigur circulaia sevei brute la plante,

- capilaritatea solului, ca factor pentru meninerea apei folosit apoi de plante. Un
sol cu capilare i pierde apa foarte repede. De aceea trebuie aplicate msuri agrotehnice
prin care capilarele formate n sol sunt distruse (prit).

Vascozitatea
Def: fenomenul care apare atunci cand moleculele de lichid se misca cu viteze
diferite si se manifesta ca o forta de frecare interna care se opune miscarii.
-daca la contactul a 2 solide, forta care se opune este forta de trecare, in cazul
lichidelor se numeste vascozitate
-deoarece apare cand moleculele se misca cu viteze diferite, tendinta lichidului
este de a uniformiza vitezele pentru a ajunge la sarea de echilibru. Fenomenul se numeste
de transport pt ca are loc un transport de viteza\ impuls p=m*v ca sa se ajunga la aceeasi
viteza.
-vascozitatea este forta de frecare interna intre straturile de lichid care are drept
scop sa unformizeze viteza straturilor de lichid.
-cresterea vascozitatii sangelui este un aspect negativ care impreuna cu
colesterolul duce la ingrasarea capilarelor => accidente vasculare
Expresia (I.5) reprezint forma analitic a legii lui Newton S considerm un fluid
vscos plasat ntre dou suprafee plane A i B dispuse paralel, suprafaa A fiind fix iar
suprafaa B se afl ntr-o micare de translaie cu viteza v. (Fig. I.5)

Fig.I.5 Micarea particulelor de lichid vscos

Diferitele straturi de fluid dintre cele dou suprafee se pun n micare datorit
forelor de frecare, cu viteze cuprinse ntre 0 i v. Deci ntre diferitele straturi apare o
variaie de vitez (gradient de vitez ), n direcie perpendicular pe direcia de micare.
Dac se noteaz cu S aria comun a celor dou suprafee, fora de frecare intern (fora de
vscozitate) este:
F

dv
S
dx

(I.5)

semnul - artnd c fora de frecare este de sens opus micrii fluidului

Factorul de proporionalitate este coeficientul de vscozitate dinamic. Unitatea de
msur n sistemul internaional este decapoisul (daP) = 1 Kg/m.s
Lichidele care respect legea lui Newton se numesc lichide newtoniene(ex: urina, lich
cefaforahidian, plasma) iar cele care nu respect aceast lege, lichide nenewtoniene.
(sangele)
In practic se folosete i vscozitatea cinematic, dat de relaia:

(I.6)

fiind densitatea fluidului. Unitatea de msur n S.I pentru vscozitatea cinematic

este decakilostokesul (dakSt) definit prin relaia:
=

m2
1dakSt
s

Se definete i vscozitatea relativ

r

(I.7)

s fiind vscozitatea dinamic a unui fluid de referin.

Notiuni de hemorologie
Reologia = parte a biofizicii care se ocupa de vascozitate
Hemorologia = parte a biofizicii care se ocupa de vascozitatea sangelui(arata dc
sangele este un lichid nenewtonian)
Sangele = suspensie de elemente figurate intr-o solutie apoasa care s.n plasma
Masuratori
1. vascozitatea plasmei
2. hematocrit H% = raportul dintre volumul globulelor rosii si volumul sangelui
3. concenntratia celulara
4. agregabilitatea eritocitara
5. deformabilitatea eritocitara- gl rosii au o membrana vasco-elastica si de aceea
se pot deforma , alungi, a.i sa treaca prin vase de diametre mai mici decat
diametrul lor
6. efectul Fahraeus-Lindqvist= dependenta vascozitatii sangelui de dimensiunea
capilarului prin care trece. Vascozitatea sangelui se micsoreaza pe masura ce
dimensiunea capilarului scade pt ca inima sa nu faca un efort prea mare.
7. taxotropia =prop de deviatie a vascozitatii sangelui cu timpul de aceea
masurarea vascozitatii sangelui trb facuta imediat dupa recoltare
8. starea de sanatate
9. consumul de cafea, alcool, grasimi.
10. stresul de forfecare.

Curgerea lichidelor vascoase

Def: prin curgere laminara se intelege curgerea in care particulele de lichid au
viteze paralele
Def: curgerea turbulenta este curgera in care vitezele particulelor se intretaie,
formeaza un vartej
Curgerea lich in organismul animal si uman este in cea mai mare parte laminara
dar sunt si cazuri in care poate fi turbulenta ce arata afectiuni in acel loc.
Debitul de sange: dQ

dV ldS

vdS
dt
dt

Difuzia

Difuzia este fenomenul de ptrundere a moleculelor unei substane printre

moleculele altei substane sau a moleculelor proprii cnd distribuia moleculelor n spaiu
este neomogen.
-este aproape instantanee in cazul gazelor
-inobservabila dar se realizeaza si in cazul solutiilor
- in lichide se realizeaza atunci cand exista o diferenta de concentratie.
Este asemanatoare vascozitati, si fenomenului de conductibilitate termica
Fenomene de transport: - vascozitatea diferenta de viteza
- difuzia diferenta de concentratie
- conductibilitate termica- difereneta de temp.
Flexul de difuzie: nr de molecule care trec dintr-o parte in alta prin unitatea de suprafata
in unitatea de timp
Prima lege a lui Fick : j
j D

dc
dx

N
St

fluxul de suprafata difuzata este proportionala cu gradientul de

concentratie.
dc- gradient de concentratie
D coeficient de difuzie

Osmoza

Fenomenul de osmoz este fenomenul de difuzie printr-o membran semipermeabil.

Mermbranele: -impermeabile
- permeabile
- semipermeabile trec doar moleculele mici ex: membrana celulara

Dac n vasul A se pune o soluie concentrat iar n vasul B o soluie mai puin
concentrat, atunci moleculele solventului din vasul B vor trece prin membrana
semipermeabil, n vasul A.
Osmoza continu pn ce nivelul lichidului din vasul A produce la manometru
denivelarea h cnd se realizeaz echilibrul. Acest echilibru se realizeaz cnd presiunea
hidrostatic a coloanei de lichid cu nlimea h egaleaz presiunea exercitat de fluxul
osmotic, care este presiunea osmotic.
Osmoza se realizeaza de la concentratie mai mica la concentratie mai mare (invers fata de
difuzie)
-diferenta de nivel a coloanei de mercur masoara presiunea osmotica, presiune cu care
apasa moleculele pe membrana, se masoara in mm coloana de mercur
Legea gazului ideal : pV

m
RT : V => = Cm/*RT
M

Legile presiunii osmotice au fost stabilite de Vant Hoff

1) La temperatur constant, presiunea osmotic este proporional cu
concentraia masic sau molar a soluiei.
2) Presiunea osmotic a unei anumite soluii de concentraie constant (CM=const.,
pentru M dat) crete cu temperatura absolut a soluiei.
3) Pentru temperatur constant i concentraie constant (C M=const., T= const),
presiunea osmotic este invers proporional cu masa molar a substanei
-membrana semipermeabila, permite in general trecera solventului si nu a solvidului spre
deosebire de difuzie unde se intampla invers
-aceste legi au fost verificate experimental prin determinarea masei moleculare a celor
mai importante macromolecule din organismul uman/animal : M

CRT
(M=)

Adair a determinat pe a hemoglobinei din sangele de cal masurand a unei solutii de

hemoglobina (70000 unitati)

-2 solutii care prezinta aceeasi presiune osmotica s.n izoosmotice.

-presiunea osmotica () este f importanta pt organism pt ca celulele nu pot trai decat
atunci cand se afla intr-o solutie izoosmotica cu presiune din interiorul celulei
- in cazul lichidelor celulare este de cca 7-8 atm chiar pana la 10 de aceea poate fi
explicat de ce in cazul plantelor pt care apa este lichidul care este permanent si in f mare
cantitate transportat prin membrana.
-in practica, in locul presiunii osmotice se foloseste o marime care s.n tonicitate si care
este proportionala cu a.i 2 solutii care au aceeasi s.n izotone
- daca o celula este introdusa intro solutie hipotona ( ext < int) atunci moleculele de
apa patrund in celula => volumul celulei se mareste, fen s.n turgescenta
-in cazul globulei rosii daca o introducem intr-o solutie hipotona => patrunde apa, iar
neavand cea de a 2 a membrana, plasmalema se distruge, fen s.n hemoliza
- daca o celula este introdusa intr-o solutie hipertona atunci apa iese din celula iar celula
se zbarceste.
- aceasta diferenta de tonicitate / face imposibila viata animalelor intr-un alt mediu decat
cel ioztom. Acesta este motivul pt care pestii de apa dulce nu pot trai in apa sarata si
invers.

II. MEMBRANE BIOLOGICE

II.1.1. Celula
Lewis Thomas spune c Pmntul este o celul vie, de culoare albastr.
Pmntul i-a constituit propria sa membran, cea mai mare membran din lume,
atmosfera, care s protejeze viaa pe Pmnt. Membrana de ozon apr vieuitoarele de
radiaiile ultraviolete i face astfel posibil viaa pe Pmnt.
Prin celula ns nelegem, de obicei, cea mai mic formaiune unitar n care
mai poate exista viaa.
Membrana celular reprezint primul organit difereniat. Existena membranei a
fost semalat nc din secolul al XIX-lea. Denumirea de membran vine de la latinescul
membrana care nseamn nveli, coaj. Membrana, creia i s-a acordat doar un rol
pasiv, de izolare fa de mediul exterior, are o structur complex i ndeplinete
numeroase funcii legate de procesele metabolice fundamentale.
Membranele vii au caracter de selectivitate, sunt semipermeabile
II.1.2. Structura membranei
In prezent este unanim acceptat c membranele celulare sunt alctuite dintr-un strat
dublu fosfolipidic n care sunt mplntate proteinele. Moleculele fosfolipidice sunt
dispuse ntr-un strat dublu, prile lor hidrofobe venind n contact iar cele polare rmn
libere epre exteriorul, respectiv interiorul celulei. Poziia proteinelor este arbitrar, ele se
afl din loc n loc, unele traversnd complet membrana, iar altele nu.
Membrana hematiilor este una din din cele mai studiate membrane i structura
acesteia este dat n Fig.II.2.
Schematic structura membranei este urmtoarea:
Dublul strat fosfolipidic
Proteinele care sunt:
Integrale, care trec prin stratul bilipidic

 Periferice
Proteinele integrale, la rndul lor sunt:
care traverseaz bistratul cu un singur segment (glicoforina)
care formeaz canale i servesc drept transportori (banda 3 care este un
canal pentru anioni)
Proteinele periferice, la rndul lor sunt:
localizate pe suprafaa extern sau intern a bistratului, multe fiind enzime (de
exemplu acetilcolina)
care interacioneaz cu partea citoplasmatic, este constituit dintr-o reea de
proteine i formeaz scheletul membranar (citoscheletul) format din:
Spectrin
Actin
Banda 4.1
Banda 4.9
Aducina

Fig.II.2 Structura membranei eritrocitului

Acest model de membran a fost publicat n anul 1972 n revista Science de ctre S.J.
Singer i G.L.Nicolson i denumit modelul mozaicului fluid al structurii membranei
celulare.
Modelul const dintr-o mare ce constituie stratul dublu lipidic, pe care plutesc
proteinele asemeni unor aisberguri. Dublul strat fosfolipidic formeaz o matrice de circa
60-80 A0 grosime.
Membranele biologice iau natere prin autoasamblare pe baza interaciunii
hidrofobe.
Lipidele formeaz spontan n soluii apoase straturi bimoleculare pe care proteinele
se adsorb tinznd s-i ascund propriile lor poriuni hidrofobe.

Faptul c aceast dispunere a lipidelor se realizeaz de la sine n virtutea tendinei

oricrui sistem de a atinge stri ct mai stabile (minim de energie) a sugerat posibilitatea
realizrii de membrane artificiale cu ajutorul crora s se studieze funciile membranei.
Ca urmare structura i funcionarea membranei a putut fi studiat pe baza membranelor
artificiale, a membranelor model.
Lipidele formeaz matricea membranei iar proteinele asigur toate funciile
membranei.
Proteinele confer membranelor permeabilitatea selectiv, asigur diferenierea
celulelor, asigur comunicarea intercelular i contribuie la determinarea formei celulelor.
Unele sunt receptori pentru captarea informaiei din mediu, altele sunt enzime cu o
localizare precis.
Membrana, din punct de vedere biofizic, este un fluid n care au loc micri
laterale la care particip proteinele i lipidele, de rotaie n jurul axei proprii i mai rar
micarea n direcie perpendicular.
Membrana este un fluid structurat care i pstreaz forma general, dar ai crui
componeni sunt n continu micare.
Membranele permit, graie fluiditii, modificri de form ale celulelor, creterea
celulelor, refacerea celulelor lezate.
Fluiditatea membranei se modific n cazuri patologice ca infecia viral, aciunea
unor factori externi, tumorile maligne.
Explicarea modificrii fluiditii se face prin procesul de obstrucionare n
funcionarea normal a proteinelor integrale.
Biomembranele reprezint circa 10-20% din masa celular dar proporia de lipide i
proteine este diferit.
II.1.3. Funciile membranei
Membranele reprezint o structur comun celulelor, ele apar att la celule pentru a
le separa de exterior, ct i n formaiunile din interiorul celulei. In interiorul membranei
au loc foarte multe procese biofizice i biochimice. Membranele nu au numai un rol
static, n delimitarea celulelor i a organitelor celulare, ci au un rol dinamic n diverse
procese fizice.
Membrana care nconjoar celula, plasmalema, (care nchide citoplasma) formeaz
o barier selectiv ce menine integritatea celulei datorit fenomenelor de transport,
active i pasive, care au loc prin ea.
Funciile membranei se mpart n trei mari categorii:
a) rol de frontier fizic; ea pstreaz i menine o compoziie chimic diferit n
interior fa de exterior, datorit difuziei selective.
b) reprezint locul unde au loc reacii chimice, locul unor funcii de baz, din
care o mare parte a reaciilor de conversie a energiei.
c) proteinele constituie receptori n cadrul comunicrii intercelulare
Dei ntre lichidul intracelular i extracelular exist numeroase asemnri, totui exist
o deosebire esenial i anume existena unei concentraii ionice diferite.
Dintre ionii ce se gsesc n mediul intra i extracelular, cei mai importani sunt ionii
anorganici de Na, K, Cl i Ca iar dintre cei organici, proteinele i polipeptidele. Pentru

ionii organici membrana celular este impermeabil i ei rmn n general n interiorul

celulei n care au luat natere.
Ionii de Na, K, Cl pot trece prin membran n ambele sensuri, dar concentraia lor nu
este aceeai de ambele pri ale membranei.
Astfel concentraia ionului de Na este de 10 ori mai mare n lichidul interstiial dect n
cel intracelular, la Cl concentraia ionului este de 14 ori mai mare n lichidul interstiial
dect n cel intracelular, n timp ce pentru K concentraia este mai mare n lichidul
intracelular de 30 de ori dect n lichidul interstiial.
Datorit diferenei de concentraie, ionii difuzeaz prin membran tinznd spre o
egalizare a concentraiilor. Ionii de Na i Cl tind s difuzeze n interiorul celulei, iar ionii
de K i cei organici, spre exteriorul acesteia. Viteza de difuzie depinde att de concentraia
ionilor ct i de permeabilitatea membranei pentru acesti ioni.
In stare de repaos membrana este impermeabil pentru anionii organici, are
permeabilitate mic pentru ionii de Na i prezint permeabilitate mare pentru ionii de K i
Cl. Permeabilitatea mic a membranei pentru ionii de Na se explic prin faptul c acetia
sunt puternic hidratai i au diametrul mai mare dect ionii de K.
II.2. TRANSPORTUL PRIN MEMBRANELE BIOLOGICE
II.2.1. Clasificarea proceselor de transport
Proceselor de transport prin membran se clasific dup diferite criterii.
1. Dup mrimea particulelor ce strbat membrana, transportul poate fi:
macrotransfer pentru macromolecule i particule
microtransfer - pentru ioni i molecule mici
Ionii i moleculele mici trec mai ales prin proteinele intrinseci pe cnd macromoleculele
trec efectiv odat cu poriuni din membran, pentruc sunt transportate n vezicule.
2. Din punct de vedere al mecanismului de transport, acesta poate fi:
transport pasiv care se face n sensul gradientului de concentraie, pentru
moleculele nencrcate i n sensul gradientului electrochimic pentru cele
ncrcate
transport activ care se face mpotriva gradientului de concentraie cu
aport energetic din exterior (cu consum de ATP).
Transportul activ poate fi
- transport activ primar
- transport activ secundar
- translocaie de grup
Microtransferul pasiv se poate face pe urmtoarele ci:
difuzie simpl - prin dublu strat lipidic
difuzie facilitat
canale ionice
Macrotransferul se realizeaz prin:
transport direct al macromoleculelor
transport prin vezicule
Transportul prin vezicule, la rndul lui poate fi:
endocitoz, transportul are loc spre interiorul celulei care este :

a)fagocitoz
b)pinocitoz-dependent de receptori
-independent de receptori
exocitoz (transportul se realizeaz din citoplasm spre exterior)
transcitoz (veziculele strbat toat celula, dintr-o parte n alta)
Datorit faptului c se admite c transportul se realizeaz n cea mai mare parte prin
proteine de transport, transportul se mai poate clasifica i dup numrul speciilor de
substane ce pot fi transportate.
3.Dup numrul speciilor de substane ce pot fi transportate:
uniport-cnd este transportat prin membran o singur substan
cotransport-dac transportul unei substane este cuplat cu al altei substane
Cotransportul poate fi de dou feluri:
-simport-dac trecerea ambelor substane se realizeaz n acelai sens
-antiport- dac trecerea ambelor substane se realizeaz n sensuri opuse
II.2.2 Macrotransportul
Fagocitoza se realizeaz prin ntinderea membranei care nconjoar particula i o
introduce n interior.
Pinocitoza independent de receptori se realizaz prin ptrunderea fluidului din
vecintatea celulei, membrana formnd canale
Pinocitoza mediat se realizeaz astefel: o molecul mare sau o particul se
leag de un receptor specific, formeaz un complex care este absorbit de citoplasm
Exocitoza se realizeaz prin fuziunea unor vezicule din citoplasm cu membrana
i coninutul din vezicule este eliminat n exterior.
Transcitoza realizeaz transportul macromoleculelor prin celulele endoteliului
capilar.
G.E. Palade a observat la microscopul electronic n citoplasma celulelor
endoteliale vezicule ce traverseaz celulele, sugernd rolul veziculelor n transportul
macromoleculelor din plasm n afara patului vascular.
II.2.3. Transportul pasiv
II.2.3.1.Difuzia simpl
In cazul membranelor biologice difuzia simpl se realizeaz pe dou ci:
prin dublul strat lipidic i
prin proteinele intrinseci.
Difuzia simpl prin stratul bilipidic a fost pus n eviden de Overton care a artat
c viteza de ptrundere a substanelor n celul este proporional cu solubilitatea acestora
n lipide.
Difuziunea simpl este guvernat de legea lui Fick (care a fost studiat n capitolul
Fenomene moleculare n lichide). Cantitatea de substan transportat variaz liniar cu
diferena de concentraie.
La nceputul anilor 1900, Albert Einstein a artat c exist o relaie simpl ntre
coeficientul de difuzie D, al unei substane i timpul t necesar pentru difuzia la o distan
medie d, ntr-un mediu fluid:

d 2 2 Dt

Pentru a difuza prin celula intestinului, care este de circa 10m, glucoza are nevoie
de 0,08 secunde.
Pentru celulele protozoarelor, care au lungime foarte mari, timpii de difuzie devin
mari astfel nct, datorit constrngerilor difuziei, se ajunge la o limitare a mrimii
celulelor biologice
Pentru moleculele mici hidrofile i pentru ap aceast explicaie a suscitat
numeroase controverse.
Difuziunea apei este mult mai intens dect a oricrei substane. De aceea s-a admis
c n acest caz transportul se realizeaz prin difuziune simpl mediat de proteine.
De exemplu apa care traverseaz n cele dou sensuri membrana hematiei n timp
de o secund are volumul mai mare de 100 de ori dect volumul hematiei, dar fluxul net
este nul i volumul hematiei rmne constant.
In anumite condiii poate apare o diferen de concentraie transmembranar pentru
ap i atunci exist un flux hidric net ducnd la turgescena celulei. Transportul apei poate
fi blocat prin adugarea substanelor care conin mercur. Adugarea hormonilor
antidiuretici n rinichii mamiferelor i n pielea de broasc crete puternic viteza de
micare a apei n epitelii. In rinichii mamiferelor acest flux de ap este esenial pentru
abilitatea rinichiului de a reine apa n organism n perioade de dezhidratare (n special
pentru animalele care triesc n deert).
Fenomenul de difuziune a apei prin membranele celulare este fenomenul de
osmoz, pus n eviden de Dutrochet n anul 1809, cu mult nainte de a se cunoate
structura membranei celulare. In prezent sunt n studiu i alte fenomene legate de
transportul apei, sub dou aspecte:
a) precizarea strii apei, n special cea intracelular, unde o parte din molecule sunt
n stare liber iar altele legate, ndeosebi la nivelul proteinelor
b) punerea n eviden a structurilor de la nivelul membranei ce concur la transport
c) existena unor pori sau canale specifice apei
d) existena unor canale sau pori de transport pentru ap i unii anioni
e) existena unor transpotori
Tehnicile de mare precizie a msurtorilor vor da probabil rspuns la aceste ntrebri.
Sau poate se va confirma observaia lui Schrodinger dup care materia vie nu eludeaz
legile fizicii, ci poate s implice alte legi ale fizicii, necunoscute nc.
Este deci posibil ca unele cercetri din biologie s antreneze noi cercetri n domeniul
fizicii, aa cum unele fenomene din fizic au impus dezvoltarea unor noi formalisme
matematice care s le poat explica.

II.2.3.2. Difuziunea facilitat

Ca i n cazul difuziunii simple, difuziunea facilitat conduce doar la un transport
de solvit n sensul gradientului de concentraie.
Pentru anumite substane transportul prezint trsturi incompatibile cu difuziunea
simpl i anume:
difuzia are loc mult mai rapid dect n difuzia simpl (chiar de 100.000de ori)
viteza de difuzie prezint saturaie cnd concentraia extern a solvitului crete

 transportul poate fi inhibat prin analogi structurali ai solvitului

Dac se reprezint grafic viteza de difuzie n funcie de concentraie se obine
graficul din Fig.II.5.

Fig.II.5 Transportul pasiv

In cazul difuziei facilitate se consider c la transport particip un constituent al
membranei, cel mai adesea o protein, care recunoate solventul, accelernd transportul.
Substanele sunt transportate prin intermediul unor proteine specifice care se
comport ca nite enzime (se i aseamn cu cataliza enzimatic). Fiecare protein
transportoare prezint un loc specific de legare a substanei transportate; cnd toate
locurile de legare sunt ocupate, viteza de transport ajunge la o valoare maxim,
caracteristic fiecrui transportor, ceea ce explic saturaia.
Extinderea i detaliile cunoaterii transportorilor de glucoz din celulele
organismului animal au permis s se formuleze unele ipoteze privind transportul facilitat.
Mecanismul difuziei facilitate comport dou etape:
a) substana transportat este recunoscut de transportator
b) transportul propriu-zis
O diagram formal a unui model de transport facilitat este modelul carrier.
In acest caz proteinele care se comport ca nite transportatori mobili, (realizeaz
transportul prin mecanismul carrier= transportator), fac naveta prin membran.
(Fig.II.6)

Fig.II.6 Modelul carrier al difuziei facilitate

Modelul cel mai cunoscut este modelul ping-pong.
Etapele corespunztoare pentru schimbrile de conformaie ale proteinelor au viteze
diferite (de la sute la milioane de schimbri pe secund). In multe cazuri schimbrile de
conformaie ale transportorului ncrcat sunt mai rapide dect pentru transportorul
nencrcat.

II.2.3.4. Canale ionice

Dac ionii ar trece prin membranele celulare doar prin difuzie-solubilitate, atunci
viteza lor de difuzie ar fi extrem de mic. Sodiul, potasiul, calciul, protonii, ionii
bicarbonat sunt toi foarte necesari celulelor i intr i ies foarte rapid din celul. S-a gsit
c fluxurile rapide de ioni trec prin canale care sunt molecule proteice.
Canalele ionice sunt proteine, sunt specifice pentru un anumit tip de ioni i prezint
caracteristicile enzimelor: energie redus pentru transportul substanelor i pot fi
blocate.
Difuziunea prin canalele ionice se deosebete de cea facilitat dei i aceasta este
mediat tot de proteine care faciliteaz transportul. Viteza de transport este mult mai
mare dect n cazul difuziei facilitate i, n plus, nu exist saturaie (dup cum se observ
din Fig.II.5). Transportorii de tipul valinomocinei pot transporta circa 10 4 ioni/s n timp
ce prin canale pot trece circa 10 7 ioni/s.
Studiul canalelor s-a fcut folosind un antibiotic care omoar bacteriile grampozitive, denumit gramicidin. Ea acioneaz ca un ionofor, care are afinitate pentru
cationi. Viteza de micare a ionilor prin stratul bilipidic este msurat electric prin
msurtori de conductan, care urmresc intensitatea curentului generat de ioni. Exist o
literatur bogat privind canalele ionice; din pcate ns exist i numeroase aspecte care
nu sunt nc elucidate. Cel mai simplu model de canal ionic este un por cilindric de
seciune uniform care se extinde prin membrana celular, selectnd ionii, n principal
datorit mrimii deschiderii porului. Apar ns aspecte neelucidate legate de
permeabilitatea pentru ioni cu sarcini diferite i de selectivitatea fa de ioni de aceeai
sarcin. Schema unui canal ionic este dat n Fig. II.7

Fig.II.7 Canalul ionic

Nomenclatura canalelor se stabilete n funcie de tipul ionilor pentru care ele au
permeabilitate maxim n condiii fiziologice normale.
Canalele ionice au o proprietate particular: prezint dou stri moleculare
alternative:
permit (prin deschidere) trcerea ionilor
opresc (prin nchidere) trecerea ionilor
Trecerea canalelor dintr-o stare n alta este probabilist.
Canalele ionice sunt bariere de selectivitate (datorit unei grupri electronegative F.S) i
bariere de permeabilitate.
Deschiderea i nchiderea porului, proprietate care se numete gating, se
manifest prin tranziiile aleatoare ntre conformaii conductoare i neconductoare ale
canalelor ionice.
Evolutiv canalele ionice au aprut drept rezultat al necesitii celulelor de a fi
capabile s recepioneze informaii din mediul exterior i de a le transmite ulterior. Din
acest punct de vedere exist dou tipuri de canale ionice:
Canale ionice specializate n codarea informaiei n poteniale de aciune i medierea
acestora
Canale ionice specializate n detecia diferiilor stimuli cum ar fi lumina, temperatura,
stimuli chimici
Canalele implicate n generarea potenialelor de aciune sunt la rndul lor:
1. Canale al cror gating este determinat de interaciunea lor cu molecule
specifice (acetilcolina, histamine, etc.) i se numesc LGIC=ligand gated ion
channel)
2. Canale ar cror gating este determinat de interaciunea cu un cmp electric
transmembranar (VGIC=voltage gated ion channels) canalele de Na, K i Ca.
Poarta este comandat de un senzor, care este o grupare de particule ncrcate,
capabile s se deplaseze n cmp electric. Aceast afirmaie a fost verificat experimental
n anul 1973, prin msurarea curentului de poart.
Cu ajutorul tehnicii patch-clamp s-a reuit efectuarea unor msurtori la nivelul
unui singur canal ionic.

II.2.3.5. Tehnica patch-clamp de studiu a curenilor transmembranari

Tehnica patch-clamp sau single channel recording permite msurarea
curentului electric transmembranar printr-un singur canal ionic.
Aceast metod de msur a fost dezvoltat de Erwin Neher i Bert Sackman la
mijlocul anilor 1970. Pentru metoda de cercetare patch-clamp aceti cercettori au
primit premiul Nobel pentru medicin n anul 1991.
Prin aceast metod se poate izola electric o parte infim (patch=petic) din
membrana celular aplicnd pe suprafaa extern a unei celule o micropipet de sticl
(patch electrod) cu diametrul vrfului de aproximativ 1m (pentru a avea o imagine a
scalei trebuie s ne gndim c nsi celula are un diametru de 20-50m). Se lucreaz la
microscop cu un micromanipulator. Regiunea membranei de aceast dimensiune conine
doar unul sau cteva canale ionice. Prin aplicarea unei depresiuni la gura pipetei se poate
trage o bucic din membran i se poate detaa aceast bucat din membrana nsi. Se
pot msura variaii de curent corespunztoare deschiderii unui canal ionic, mai mici de
0,2 picoamperi.
Prezentm n continuare foarte succint pricipalele rezultate ale metodei de
cercetare, patch-clamp:

Tehnica patch-clamp d informaii despre structura canalelor ionice, funciile lor i

interaciunea acestora cu alte proteine.
Acest tip de experimente dau informaii asupra procesului de transport prin canalele
ionice n scopul elaborrii unui model fizic adecvat pentru difuzia ionilor prin porul
proteinei.
Tehnica patch-clamp d informaii importante legate de probabilitatea de
deschidere a unui canal n anumite condiii.
Pe baza unor programe de calcul se poate evalua timpul ct un canal ionic este
deschis pentru trecerea ionilor.
Una din problemele fundamantale legat de structura i funciile canalelor ionice se refer
la estimarea numrului de stri de tip nchis i deschis pe care le poate asigura un canal
precum i determinarea vitezei de tranziie ntre aceste stri.
Este imposibil de evaluat momentul n care un canal ionic realizeaz tranziia
molecular ntre cele dou stri precum i durata ct se menine n aceast stare.
Dup cum am artat mai nainte, ideea msurtorilor este simpl ns aspectele
tehnologice ridic probleme destul de complicate, avnd n vedere faptul c se urmrete
nregistrarea unor cureni de ordinul picoamperilor cu frecvene mari, care sunt pot fi
foarte uor alterai de zgomotele electrice externe.
II.3. Fenomene bioelectrice celulare
Bioelectrogeneza este fenomenul de producere de electricitate n organismele vii.
Apariia fenomenelor electrice n esuturile vii reprezint una din caracteristicile
fundamentale ale vieii celulelor.
Prezena n citoplasma oricrei celule ct i n fluidele extracelulare a atomilor i
moleculelor ionizate i faptul c activitatea metabolic menine diferena de concentraie
a acestor ioni, face ca fenomenele electrice s fie proprii tuturor celulelor vegetale i
animale.

Bioelectrogeneza se manifest prin existena unor fenomene electrice i comport

dou etape:
Meninerea unei diferene de potenial la nivelul membranei
Schimbarea strii electrice ca rspuns la mediul extern
Bioelectrogeneza se ntlnete la toate nivelele de dezvoltare. De asemenea, toate
celulele vii i manifest starea de activitate prin generarea unor fenomene electrice.
Bacteriile i organismele celulare manifest o evident activitate electric ce depinde de
condiiile de mediu.
Tensiunile electrice ale unor peti (Electrophorus electricus) pot ajunge pn la
500-600V.
Pentru toate organismele vii, unitile de baz ale electrogenezei sunt celulele.
II.3.1. Potentialul de repaos celular
O caracteristic important a oricrei celule vii este existena unei diferene de
potenial electric ntre faa extern i cea intern a membranei celulare.
Deoarece att citoplasma ct i fluidele interstiiale au conductivitate ridicat, n
interiorul lor potenialul este constant, deci potenialul de repaos celular (PR) este
diferena de potenial dintre interiorul celulei i mediul extern (spre deosebire de
potenialul activ din timpul activitii celulelor excitabile).
Posibilitatea msurrii potenialului care se formeaz pe membranele celulelor vii
se datoreaz cercetrilor iniiate de biofizicianul american Keneth Cole i a britanicilor
Alan Hodkin i Andrew Huxley. Aceti cercettori au inventat i perfecionat
microelectrozii de sticl, care sunt pipete (micropipete cu vrful de 0,5m) care nu produc
leziuni membranei la strpungerea ei. Intre microelectrodul de sticl din citoplasm i un
electrod de calomel de exemplu, plasat n soluia extern, apare o diferen de potenial,
interiorul celulei fiind ntotdeauna negativ fa de exterior.
Potenialul de repaos are valori bine determinate pentru fiecare celul, variind ntre
-50V i -100 mV (Fig.II.12). Valoarea PR difer de la specie la specie i de la o celul la
alta. El este supus influenei mediului extern, precum i a hormonilor, astfel c potenialul
de repaos este un bun indicator al funcionrii celulei. Dup moartea celulei diferena de
potenial dintre cele dou fee ale membranei se anuleaz.

Fig.II.12 Potentialul de repaos celular (PR)

Prin definiie s-a considerat c PR este potenialul de echilibru electrochimic ntre
interiorul i exteriorul celulei pentru ionul de K+ care, dup legea lui Nernst este:
RT c Ke
VK
ln i
F
cK
(II.18)
unde V K este potenialul de repaos, c Ke este concentraia de potasiu n exteriorul celulei
i
iar c K este concentraia de potasiu n interiorul celulei.
Deoarece concentraia de potasiu este mai mare n interiorul celulei, deoarece
membrana celular este permeabil n special pentru potasiu, potenialul de repaos este
negativ.
Na ramne mult mai abundent n spaiul extracelular dect n citoplasm dei
gradientul de concentraie tinde s-l introduc n interior. Concentraia sa rmne
constant datorit unui proces de scoatere n afar, care este rezultatul unui proces de
transport activ. Pentru acest transport este necesar, dup cum am artat, energie
metabolic.
Deci prin membrana au loc n permanen fluxuri pasive de ioni, compensate de
fluxuri de sens contrar ce se desfoar cu consum de energie metabolic.
Potenialul de repaos arat c celula nu este niciodat n repaos absolut. Starea de
repaos este o stare staionar; prin membran trec n permanen fluxuri ionice pasive i
active. Ionii vor avea aceeai concentraie de o parte i de alta a membranei doar cnd
celula moare.
II.3.2. Schema electric echivalent a membranei celulare
Schema electric echivalent a membranei celulare neexcitabile este dat n
Fig.II.13.

In Fig.II.13 CM este capacitatea electric a membranei, iar EK, ENa, ECl, sunt
potenialele de echilibru electrochimic ale fiecruia dintre ioni. Din punct de vedere
electric, membrana este un condensator cu capacitatea electric de 1F/cm2.

Fig.II.13 Schema electric echivalent a membranei

Aplicnd legea lui Ohm, obinem:
V IRt

(II.19)

unde rezistena total a circuitului este dat de :

1
1
1
1

Rt
R K R Na RCl

(II.20)

rezistenele fiind legate n paralel, iar intensitatea curentului total debitat de baterie este:
E K E Na ECl

RK R Na RCl

(II.21)

Dac se folosesc conductanele,

gi

1
Ri

(II.22)

mpreun cu relaia (II.20), expresia (II.19) devine:

V

g K E K g Na E Na g Cl ECl
g K g Na g Cl

(II.23)
Formula (II.23) d mai bine dect relaia lui Nernst, valorile potenialului celular
de repaos. Potenialul dat de (II.23) tinde la potenialul de echilibru electrochimic E i al
acelui ion, cnd conductana membranei pentru acel ion este mult mai mare dect pentru
ceilali.