CUPRINS

INTRODUCERE - 2

1.

IMPORTANA CULTIVRII PLANTELOR

MEDICINALE - 4
1.1 Menta- istoric, rspndire, taxonomie, descriere,
compoziie chimic i importana - 5

2.

SPECIILE MICROBIENE LUATE N STUDIU - 12

2.1 Staphylococcus aureus - 12
2.2 Escherichia coli 14
2.3 Salmonella - 16
2.4 Klebsiella pneumoniae 19
2.5 Enterococcus faecalis - 21
2.5 Candida albicans 22

3.

STADIUL ACTUAL AL CUNOASTERII N

DOMENIU - 24

4.

MATERIAL I METODE - 26

5.

REZULTATE I DISCUII - 33

CONCLUZII - 38

ANEXE - 39

BIBLIOGRAFIE - 42

INTRODUCERE
Plantele medicinale sunt specii vegetale care acumuleaz n unele pri ale plantei
diverse principii active utile n tratarea diferitelor afeciuni ale corpului uman sau animal.
Omul a folosit resursele naturale de la nceputul existenei sale. El a gsit n lumea
vegetal i animal mijloace de existen, hran, mbrcminte, iar pentru remedierea
suferinelor i-a sporit mereu tezaurul de plante tmduitoare de leac(3).
Pn n urm cu ctva timp, aproape toate leacurile folosite de om erau de origine
vegetal (5). Odat cu dezvoltarea chimiei au aprut i cele de sintez. De cele mai multe ori
efectul folosirii plantelor medicinale este mai lent, necesit un tratament de lung durat, dar
este mai puin riscant i mai ieftin.
Numeroase studii tiinifice au demonstrat c medicamentele de sintez, cu structuri
necunoscute organismului uman, pot declana reacii de respingere, cu toxicitate i uneori,
urmri destul de ntrziate. Agresiunea produselor de sintez asupra organismului uman,
precum i reaciile de respingere a organismului, determin n primul rnd reacii de tip
alergic, da i multe alte efecte (5).
Tot mai muli sunt cei care cunosc efectele dezastruase ale medicamentelor de sintez
asupra sntii i renun la tratamentele aleopate i la medicina convenional, apelnd la
tratamente naturiste i plante medicinale, regimuri alimentare de purificare, programe de
dezintoxicare a organismului de substane chimice.
Ovidiu Bojor susine c cel puin 50% din medicamente pot fi nlocuite cu produse din
plante (6).
Plantele medicinale i aromatice reprezint surse inepuizabile de materii prime pentru
industria alimentar i industria farmaceutic.
Flora spontan nu poate asigura necesarul de materie prim vegetal n continu
cretere i de aceea s-a trecut treptat la cultivarea unui numr nsemnat de specii de plante
(3).
Prin cultura plantelor medicinale se pot valorifica unele terenuri mai puin productive,
asigur cultivatorilor nsemnate venituri, pot fi valoroase plante ornamentale sau melifere, iar
recolta de plante medicinale constituie un important material de export.
Cultura plantelor medicinale este important i prin faptul c acestea sunt, de regul,
culturi ecologice sau chiar biologice. Nu le este permis aplicarea la aceste culturi de pesticide
care s polueze produsul finit care servete la vindecarea oamenilor.
2

n ultimul timp, n industria farmaceutic i cosmetic, se utilizeaz tot mai mult

materie prim vegetal provenit din zone rustice, nepoluate, cum sunt numeroase n ara
noastr. Se tie c marile companii farmaceutice sau cosmetice occidentale cumpr diverse
produse vegetale, mai ales plante medicinale recoltate din flora spontan, din rile n care
nc nu s-a aplicat o chimizare intens a agriculturii.

(6)

n scopul stabilirii efectelor antimicrobiene a extractelor din cele doua specii de ment
au fost preparate 5 extracte din diferite organe vegetale, n cadrul Laboratorului de Chimie
anorganic din cadrul USAMVB Timioara. Aceste extracte au fost testate microbiologic,
utilizand 6 culturi microbiene: Staphylococcus aureus , Escherichia coli, Salmonella,
Klebsiella pneumoniae , Enterococcus faecalis , Candida albicans. Activitatea antimicrobian
a fost stabilit n cadrul laboratorului de Microbiologie, Facultatea de Horticultur i
Silvicultur.

1. IMPORTANA CULTIVRII PLANTELOR MEDICINALE

Plantele medicinale sub diferite forme slujesc sanatatea nc de la nceputurile lumii.
Pe msur ce industria chimic se dezvolt, o parte din remediile populare au primit o alt
form, au fost modernizate. De cele mai multe ori efectul folosirii plantelor medicinale este
mai lent, necesitnd un tratament mai ndelungat, dar este mai putin riscant i mai ieftin.
n trecut preparatele farmautice se numeau droguri ( Drug =doctorie, medicament). n
zilele noastre acest termen se folosete mai mult pentru stupefiante. Plantele medicinale se pot
folosi ca atare, cu uoare preparri, sau pot constitui materie prim n industria farmaceutic
sau alimentar. Sub form de preparate simple i poate face efectul n cteva zile i nu mai
necesit medicaie n paralel pentru afeciuni uoare, ns, trebuie tiut, c n cazul unor
afeciuni severe, plantele medicinale nu trebuie s suprime total medicamentele, ci s le
completeze n ameliorarea simptomelor bolii.
ndelungata folosire a plantelor medicinale n medicin este un indiciu sigur al valorii i
utilitii acestora i n viitor. Se apreciz c pe plan mondial se folosec n prezent n fitoterapie
aprox. 20.000 de specii de plante aromatice i medicinale, dintre care mai utilizate sunt aprox.
300 de specii.
Efectul plantelor medicinale este mai complex, acionnd asupra mai multor organe sau
sisteme concomitent.Plantele medicinale produc mai puine i mult mai reduse efecte
secundare (13).
Plantele din punct de vedere biochimic fiind organisme vii, conin substane analoage
sau compatibile ale corpului uman sau animal. n contrast, cele mai multe dintre
medicamentele de sintez actuale sunt substane inexistente n natur, cu efecte imprevizibile
n organismele vii.
Orientrile actuale n medicin sunt tot mai mult ndreptate spre utilizarea fitoterapiei,
care reprezint o posibilitate n terapeutica modern, ca alternativ la chimioterapie sau alturi
de fizioterapie, electroterapie, igiena alimentaiei etc.
Medicina natural se bazeaz n primul rnd pe Fitoterapie i colaboreaz cu alte
specialiti medicale nrudite cum ar fi: Homeopatia, Dietoterapia, Aromaterapia.
Plantele medicinale i preparatele fcute din acestea ocup un loc important n viaa
sntoas a omului i animalelor. Un mare numr de preparate provin din plante. 77% din
preparatele pentru boli cardiovasculare i 74% din preparatele pentru boli digestive sunt
obinute din plante. Exist peste 1700 de specii de plante medicinale din care mai mult de 50
sunt cultivate.
4

Datorit aplicrii principiilor de via ecologic a oamenilor, o pondere mare n

alimentaie precum i n medicin o au, plantele cultivate ecologic sau biologic fr aplicarea
unor pesticide. Pe de alt parte se urmrete ca exploatarea resursei vegetale spontane s nu
se fac disproporionat, afectnd potenialul de refacere a acestora, care s duc n final la
dispariia acestor specii.

(6)

1.1. Menta - istoric, rspndire, taxonomie, descriere, compoziie chimic i importan

Scurt istoric
Menta este una dintre cele mai vechi plante, cunoscut i utilizat cu milenii n urma
n scopuri aromatizante i pentru vindecare. n credina popular a cretinilor, menta era
considerat o iarb sfnt (27).
n Papyrus Ebers (primul tratat medical antic) se menioneaz faptul c menta a fost
folosit cu 1550 ani naintea erei noastre n Egipt. i japonezii cunoteau i cultivau menta
nc din vremuri ndeprtate, ns ca produs medicinal aceasta este citat mult mai trziu, n
anul 948, fiind recomandat folosirea esenei de ment n apa pentru splatul ochilor.
Totodat, Japonia este menionat ca fiind prima ar din lume care a exportat mentol (n
1883).
Ca plant cultivat n scopuri medicinale menta a fost cunoscut mult mai trziu, n
anul 1760, n Anglia, cnd s-au obinut primele cantiti de ulei volatil, fiind trecut n
farmacopeea englez. De aici cultura mentei s-a rspndit n toat lumea, n Olanda i
Germania, n a doua jumtate a secolului trecut, extinzndu-se apoi n Frana, Italia, SUA,
India, China i Japonia.
n ara noastr prima cultur experimental a fost nfiinat n 1908 la Cluj, pe o
supraf de 88 metri ptrai. Mai trziu, n anul 1926, la Braov apare prima plantaie de 5
hectare cu stoloni adui din Anglia i Italia.

(31)

Rspndire

Genul Mentha cuprinde aproximativ 25-30 specii de plante, distribuite astfel pe plan
mondial: apte n Australia, una n America de Nord i celelalte n Europa i Asia. n afara de
specii exist i hibrizi. Din aceiai familie mai fac parte i alte plante aromatice precum
cimbrul, cimbriorul, mghiranul, salvia i levnica (28).
Cele mai favorabile bazine pentru cultura mentei la noi n ar sunt Banat, Braov,
Prahova, i Buzu. Se mai poate cultiva i n sudul rii, n judeele Teleorman i Giurgiu.
Creste salbatic i n Romania, n special n zonele de deal i de munte. n natura, are
aspectul unei tufe de 40-60 cm naltime (32).

Taxonomie

n secolul al XIX-lea, Lemery a emis ipoteza ca denumirea genului Mentha ar deriva

de la cuvantul latin mens minte, innd seama ca planta are proprietatea de a fortifia
creierul, de a nviora gandirea i memoria.
Carl Linn (1751) descria 10 specii i trei varietati de ment, iar Alphonse de
Candolle a grupat formele de ment n patru subgenuri (Terminalis, Arvenses, Eriodontes,
Pulegium) i a descris 29 de specii i 31 de varieti (27)
Denumirile populare ale mentei sunt: borotin, camfor, dian, ferent, ghiazm,
giazma broatei, giugium, gnint, iarb-neagr, iasm, izm bun, izm de grdin, izm
piprat, mint broteasc, mint de camfor, mint de chicuuri, mint moldoveneasc, mint
de picuuri, mint rece, nint.
Genul Mentha aparine familiei Lamiaceae incluznd un mare numr de specii care
difer prin caracteristici i nivelul de ploidie.
n flora Romaniei sunt prezentate 8 specii i 7 hibrizi, dintre care cele mai rspandite
sunt menta de ap (Mentha aquatica), menta salbatic (Mentha pulegium), menta dulce
(Mentha viridis), menta crea (Mentha crispa) i, mai ales, menta alb sau izma bun
(Mentha piperita).

(27)

Descriere
Menta este o plant anual, erbacee, dar considerat de muli autori peren.
Rdcina este format dintr-un numr foarte mare de rdcini adventive fibroase,
tulpina este anual, patrunghiular, compus din noduri i internoduri, mai mult sau mai puin
erect.
Din mugurii situai pe poriunea lignificat a tulpinii, de sub nivelul solului se
formeaz stolonii. n funcie de locul unde cresc, stolonii sunt de 2 feluri: aerieni i subterani.
Dup cosire din mugurii situai pe nodurile stolonilor aerieni, pe o parte din stolonii
subterani, precum i pe resturile de tulpini netiate se formeaz a doua recolt (otava).
Frunza este ovat lanceolat pn la lanceolat, cu marginea limbului serat. Lungimea
frunzei variaz ntre 3 i 8 cm, iar limea de la 1-3 cm.
Pe partea superioar frunzele sunt netede, iar pe cea inferioar au nervuri proeminente,
sunt colorate n verde nchis i sunt prevzute cu glande oleifere, prezente n numr mult mai
mare pe partea inferioar.
Inflorescena este de forma unui spic alungit, de 4-10 cm lungime. Floarea este
compus dintr-un caliciu cilindric, campanulat iar fructul este format din 4 nucule mici,
acoperite cu caliciul persistent. nflorete n luna iulie.
Menta este o plant care rezist n perioada repausului relativ pn la -10C.
Necesit umiditate potrivit n toat perioada de vegetaie, umiditatea atmosferic ridicat
favorizez atacul de boli.

(9)

Principalele specii de ment luate n studiu

Mentha piperita
Mentha piperita este o plant peren. Att forma cultivat ct i cea salbatic se
gsete n diferite ri ale lumii (1).
Mentha piperita L. este un hibrid ntre Mentha spicata L. i Mentha aquatica L.
n cultur sunt zonate soiurile:

Columna, Cordial i Cristal de Mentha piperita;

Mencris i Record de Mentha spicata.

Fig. 1.2.1. Mentha piperita (46)

Menta spicata var. viridis

Menta spicata este o specie de ment originar din Europa i Asia care crete n condiii
bune n apropierea climatului temperat (29).
Este una dintre cele mai importante plante aromatice cultivate n ntreaga lume ca o
surs pentru uleiurile eseniale i pentru alte componenente bioactive, prezente n pri diferite
ale plantei (18b).

Fig.1.2.3. Mentha spicata var. viridis (47)

Importana
n prezent sunt cunoscute numeroase subgenuri, specii i varieti de ment, fiecare
avand proprieti distincte din punct de vedere biologic i terapeutic.
De la Mentha piperita se folosesc frunzele Folium Menthae, sau herba de ment Herbe
Menthae atunci cnd se utilizeaz la extragerea de ulei volatil.
Astzi sunt mult apreciate unele preparate alimentare din ment i anume salatele i
sosurile din Anglia, cocktailurile din Statele Unite, ruladele din Vietman i salatele din China
(27).
n tradiia popular se foloseau n bolile de stomac se lua plmdit bnd rachiu. Cu
decoctul se fceau splturi contra bubelor i durerilor de cap, iar plantele fierte se puneau n
legturi. Ceaiul se da copiilor contra colicilor, iar dac aveau dureri mari, se punea pe pntece
o cataplasm cald din frunze de izm, leutean (8).
n ultimul timp s-au efectuat mai multe experimente i s-a dovedit c menta ar putea fi
utiltizat n: acnee, accident vascular, adjuvant n cancerul de pancreas, mamar i hepatic,
adjuvant n TBC, aerofagie, afeciuni cronice ale pancreasului, afeciuni renale, ameeli,
angoas, aritmie cardiac, arsuri uoare, astm bronic, atonie stomacal, astenie fizic i
nervoas, ascarizi, astm bronic, balonri, boli de ficat, bronit, calculi biliari, cancer de
colon, cancer pulmonar.
Aciune farmaceutic: antiseptic, bacteriostatic, astringent, sedativ, combaterea
transpiraiei, calmeaz durerile, antidiareic, normalizeaz tranzitul intestinal, calmeaz
nevrozele, carminativ, sudorific, antispasmodic, deodorant i cicatrizant extern, de asemenea
ajut la mancrimile pielii pe care le nltur.

(8)

n literatura de specialitate se scrie c Mentha piperita este folosit intern ca un ceai,

tinctur, ulei sau extracte, i aplicat extern ca un masaj sau alifie. Botanitii consider menta
ca un astringent, antiseptic, proprieti antipiretice, antispastice, anticatarhal, antitimicrobial,
rubefacient, stimulant, i cu proprieti anti-mbtrnire (1).
Mai puin recunoscut e potenialul mentei n controlarea a numeroase probleme
medicale, inclusiv n colonoscopie (21).
Menta spicata e cultivat pentru uleiul esenial aromatic i carminativ. Frunzele de
ment pot fi utilizate ntregi, tiate, uscate i mcinate, ngheate sau conservate n sare, zahr,
sirop de zahr, alcool sau ulei.
n medicina popular, menta a fost utilizat pentru bolile gastrointestinale, probleme
respiratorii, stomacale, mpotriva cderii prului i pentru bronitele cronice.
9

Unii cercettori sugereaz c ceaiul de ment poate reduce creterea excesiv a prului
(numit horsutism, la femeile cu sindromovarian polichistic).
Ultimele cercetri sugereaz c un produs pe baz de plante ce conine i menta
spicata ar putea ajuta la tratarea sindromului intestinului subire.E neclar dac mestecarea
gumei cu arom de ment mbuntete memoria.
La acest moment studiile de nalt calitate privind corpul uman nu accept utilizarea
mentei pentru orice indicaie . Studii clinice bine efectuate, sunt necesare naintea concluziilor
ce pot fi fcute n ceea ce privete administrarea acestui agent pentru orice condiie.
Pacienii cu arsuri la stomac sau cu reflux gastrointestinal (GERD) sunt descurajai de
la consumul produselor cu arom de ment. Menta ar putea cauza probleme rinichilor.
Extractul apos a M. piperita are o important activitate antimicrobian mpotriva
Helicobacter pylori, principalul agent cauzator a gastritelor cronice i a ulcerului peptic.
(11)
Taninurile i flavonoidele au utilizri terapeutice datorit proprietilor lor
antiinflamatorii, antifungice i antioxidante (24).
Antioxidanii naturali i agenii antimicrobieni sunt preferai n industria alimentar i
n cosmetic pentru beneficiile lor poteniale n comparaie cu omologii lor chimici. Frunzele
de ment ar putea fi o posibil alternativ la chimicale dac ar fi valorificate ca i agent
antimicrobian, antioxidant i aromatizant (30).
Compoziia chimica
Toate speciile de ment au, practic, proprieti terapeutice asemanatoare, avnd comun
mentolul (n proporii diferite din componenta uleiului eteric), precum i alte componente
biochimice.
Frunzele recoltate, mpreuna cu prile superioare ale tulpinii, conin, n principal, ulei
eteric i materii tanante. Cantitatea de ulei eteric variaz ntre 0,2-0,6% n frunzele proaspete
i 1-3,5% in frunzele uscate, asigurnd o producie mondial de circa 5.000 de tone anual.
Uleiul contine circa 40 de componente odorante, dintre care 26 compui se gasesc i
n speciile cultivate n ara noastr. Principalul component al uleiului eteric este mentolul.
n menta cultivat n Romania, mentolul reprezint circa 40-60%, n timp ce n menta
japonez (Mentha canadensis var. piperascens) exist peste 80% din cantitatea de ulei volatil.
Pe langa ulei eteric, exist i alte substane biochimice cu aciuni specifice n
tratamentele medicale:
10

- taninuri (5-8%), substante amare, compui antibiotici;

- flavonoide (hesperidina), polifenoli, tocoferoli, carotenoizi;
- acizi organici (cafeic, fenolic, ursolic, clorogenic, nicotinic, piruvic);
- acizi grai (oleic, linoleic, oleanolic);
- glucide (galactoza, fructoza, rafinoza, zaharoza, glucoza);
- vitamine (A, C, D, PP);
- sruri minerale (8-12%) cu K, P, Ca, Mg, Fe, Mn, Cu, Zn.

(27)

Constituenii principali activi din Mentha piperita sunt uleiurile eseniale, care
cuprind cam 1% din plant. Uleiurile sunt dominate de monoterpene, n principal, mentol,
menton i derivaii acestora (de exemplu, isomenton, neomentolul, mentol), (21).
Kezemi i M. Rostami. i Shafiei (2012) au ajuns la concluzia c principalele
componente n uleiul de Mentha piperita sunt mentolul, limonene, 1,8-cineol, metil acetat i
mentona, n uleiul de Mentha spicata carvona, mentolul, limonene i mentona.

11

2. SPECIILE MICROBIENE STUDIATE

2.1 Staphylococcus aureus

ncadrare taxonomic
Staphylococcus aureus a fost ncadrat sistematic de ctre numeroi cercettori tinifici
n ncrengtura Eubacteria, ordinul Eubacteriales, familia Micrococcaceae, genul
Staphyloccocus.
ncrengtura Eubacteria, cuprinde bacteriile propriu-zise i este structurat n
numeroase clase i ordine.
Unul din cele mai importante ordine este Ordinul Eubacteriales care cuprinde
bacteriile tipice cunoscute sub diferite forme: coci, bacili, vibrioni, specii imobile, dar i
mobile, Gram-pozitive i Gram-negative, specii aerobe, facultativ anaerobe i specii anaerobe.
Bacteriile acestui ordin sunt att specii saprofite cat i patogene pentru om, animale,
plante, producnd diferite boli i cuprinde mai multe familii dintre care cele mai importante
sunt:
Familia Micrococcaceae din care fac parte bacteriile de form sferic (cocii), Gram-pozitive,
dispuse n grmezi caracteristice regulate i neregulate.
Familia Micrococcaceae este mprit n 3 genuri:
-genul Micrococcus
-genul Planococcus
-genul Staphylococcus, gen din care face parte specia Staphylococcus aureus.
Genul Staphylococcus cuprinde bacterii patogene care produc infecii deosebit de
periculoase pentru om.
Denumirea genului vine din limba greac (staphylo=strugure) i semnific dispunerea
cocilor n grmezi a cror form este asemntoare unui ciorchine de strugure.
Din cele 27 de specii i 7 subspecii care fac parte din acest gen (Staphylococcus
epidermus,

Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus schleiferi, Staphylococcus

haemolyticus), Staphylococcus aureus este agentul patogen cel mai virulent.

12

Habitat
Colonizeaz nrile i colonul de unde poate contamina tegumentul. Exist i starea de
purttori sntoi ai acestei specii, portajul nazal fiind ntalnit, n proporie de 10-40% n
colectiviti i pn la 40-70% n spital. Rezervorul principal este reprezentat de mamifere i
psri care contamineaz mediul. Suportul material al transmiterii este reprezentat de sol,
nisip marin, apa de mare i apa dulce, plante, fructe, alimente, mbrcminte, mobilier,
covoare, praful i aerul din ncperi.
Morfologie i caractere culturale
Stafilococii sunt coci Gram-pozitivi, nesporulai, necapsulai. Pe frotiu efectuat din
cultur pe mediu solid stafilococii apar dispui n grmezi neregulate asemntoare cu
ciorchinii de strugure. Pe frotiul efectuat din cultur n mediu lichid sau din produs patologic
stafilococii sunt dispui extracelular, n lanuri scurte, perechi sau coci izolai.
Sunt germeni nepretenioi care pot fi cultivai pe medii nutritive simple, pe medii
complexe ca i pe medii hiperclorurate (Chapman). Mediile se incubeaz timp de 18-24 ore,
la temperatura de 35-37C, n aerobioz.
Crete sub form de colonii S pe medii solide; n medii lichide produce turbiditate
uniform cu depozit moderat la fundul tubului.
Stafilococii produc pigment nedifuzibil, care coloreaz doar colonia bacterian nu i
mediul de cultur. Culorile coloniilor pot fi: galben-auriu (S.aureus), alb (S.epidermidis) sau
galben citrin (S. saprophyticus). Pigmentogeneza (caracter variabil) este mai intens la
temperatura camerei i n prezena oxigenului.
Pe mediile cu snge apare hemoliza.
Caractere biochimice i de metabolism
Sunt germeni catalazo-pozitivi, oxidazo-negativi. Fermenteaz glucoza, manitolul,
lactoza, zaharoza etc. cu producere de acid. Hidrolizeaz proteinele animale native:
hemoglobina, fibrina, cazeina, gelatina etc. i descompun fosfolipoproteinele.
Rezistena fa de factorii fizici, chimici, biologici
Stafilococii sunt rezisteni fa de condiiile din mediul extern. Rezist n culturi, la
frigider cteva luni; n puroi uscat2-3 luni. Sunt relativ rezisteni la antiseptice i
dezinfectante (30 la alcool 70; 10 la fenol 2%), la radiaii gamma, la aciunea coloranilor
(violet de genian, fuxina acid, verde malachit etc.). Pot fi distrui n 60 minute la
temperatura de 60C, sunt sensibili la bacteriofagi si la radiaiile UV.
13

Urmtoarele produse: suc de lmie, mr, ananas, caise, piersici, ciocolat, cacao au
efect bacteriostatic asupra tulpinilor stafilococice.
Stafilococii sunt deosebit de rezisteni la antibiotice. Peste 95% din stafilococi sunt
rezisteni la penicilin.
Tulpinile de stafilococi rezistente la meticilin (oxacilin) sunt tulpini polirezistente
exterioriznd rezisten concomitent fa de cefalosporine, eritromicin, clindamicin. Sunt
nc sensibili la vancomicin dei n unele ri precum Frana au fost semnalate deja tulpini
rezistente i fa de acest antibiotic de rezerv.

(25)

2.2. Escherichia coli

ncadrare taxonomic
Familia Enteriobacteriaceae cuprinde 5 genuri:
Genul Escherichia
Genul Shingella
Genul Salmonella
Genul Proteus
Genul Yersinia
Genul Escherichia este genul tip al familiei Enterobacteriaceae. Denumirea genului a
fost dat dup numele cercettorului Th. Escherich, care a izolat specia tip a genului i singura
de interes medical dintre cele cinci specii: E.coli.
Escherichia coli (nume abreviat: E. coli) este o bacterie care triete n intestinele
organismelor cu snge cald. El face parte din grupa enterobacteriilor care triete ca epifit n
tractusul digestiv. n unele cazuri de dezechilibrare a microflorei intestinale, aceste bacterii
pot produce mbolnviri, printr-o nmulire masiv sau apariia unor tulpini toxicogene (26).

14

Habitat
Colibacilii sunt rspndii n mediul nconjurtor, odat cu coninutul intestinal al omului
i al animalelor. Numarul acestor germeni pe unitatea de volum n ap i alimente reprezint
indicele coli, care este un criteriu de apreciere a gradului de poluare a apei, mediului i
alimentelor, cu materii fecale (14).
Sunt bacili gram-negativi, scuri cu capetele rotunjite, nesporulai, necapsulai (rareori
unele tulpini pot avea o pseudocapsul), n general mobili (cu cili peritrichi).
Sunt germeni aerobi, facultatavi anaerobi, nepretenioi din punct de vedere nutritiv. Se
dezvolt att pe mediile uzuale, ct i pe mediile selective lactozate, pe care formeaz colonii
lactozo-pozitive. Coloniile sunt de tip S, iar tulpinile pseudocapsulate formeaz colonii cu
aspect mucos.
Morfologie i caractere de cultur
Bacteriile de Escherichia coli se prezint sub forma unor bastonae cu capetele
rotunjite, de dimensiuni variabile, cuprinse ntre 2-6 micrometri lungime i 1-1,5 micrometri
lime.Avnd un polimorfism accentuat, poate lua uneori form filamentoas de 6-10
micrometri n culturile vechi sau chiar forme scurte cocoide (fig. 2.2.1).
Bacili pot fii singulari sau se pot agrega n perechi (formele filamentoase).
Sunt specii mobile, mobilitatea fiind dat de 2-6 bacili peritrichi, dar exist i variante
puin mobile sau chiar imobile.Sunt Gram-negative, capsulate, unele specii fiind
pseudocapsulate sau necapsulate.
Bacteriile cresc pe medii de cultur obinuite, fiind puin pretenioase.Sunt specii
aeorbe,facultativ anaerobe care se comport diferit fa de aceste medii.n bulion tulbur
uniform mediul cu formarea unui depozit care se disperseaz uor.
n culturile vechi pot forma un inel aderent i foarte rar o pelicul.Pe geloz se
dezvolt colonii rotunde, opace, convexe, cu margini regulate, de tip S.Formele R, sunt
reprezentate de colonii uscate, turtite, cu margini dinate, aderente la mediu.Coloniile au un
diametru de 2-3 mm i degaj un miros specific de amoniac.
Pe mediul de cartof se dezvolt culturi uor pigmentate.
Caracere biochimice i de metabolism
Escherichia coli fermenteaz gluoza, lactoza, maltoza, trehaloza, manitolul i alte
zaharuri cu producere de gaz.Acidific i coaglueaz laptele, produce -galactozidaz i lizin
decarbozilaz,nu degaj H2S i nu lichefiaz gelatina.
Rezistena la ageni fizici, chimici i biologici
15

Escherichia coli poate supravieui luni de zile n mediul extern (sol, materii fecale de
la om i roztoare etc.)
Suport variaii lungi de temperatur i reacie chimic, dar temperatura optim este de
37C i pH-ul optim cuprins ntre 7,2 i 7,6
Factori de virulen
Secret diferite substane biologice active, de tipul :
- enterotoxine, hemolizine, enzime care asigur rezistena la antibiotice,
- lipopolizaharidul sau endotoxina, comun tuturor membrilor familiei, particip la distrugerile
tisulare, fiind responsabil de creterea sintezei de TNF macrofagic, aflat la originea ocului
septic
- capsula (antigenul K1) este de natur polizaharidic, are rol antifagocitar, realiznd un
veritabil camuflaj imunologic al bacteriei, deoarece posed determinani antigenici care se
regsesc la suprafaa celulelor eucariote.
Tratament
n cazul infeciilor tubului digestiv manifestate prin diaree, nu esre recomandat un
tratament antibiotic datorit riscului dezvoltrii sindromului hemolitic, uremic, dupa
administrarea de antibiotice : aminoglycoside, ciprofloxacin.
Pe lng antibiotice se administreaz acciunurile anticolibacilare, foarte eficiente n
tratarea bolnavilor, mai ales cnd antibioticele nu dau rezultate. Aceste vaccinuri sunt
preparate fie numai din culturi de Escherichia coli inactive (vaccinurile monomicrobiene), fie
din asociaii de germeni Escherichia coli cu alte specii : Clostriduim perfrigens, Pseudomonas
aeruginosa, Salmonella etc. (vaccinurile polimicrobiene) (4).

2.3 Salmonella
Familia Enterobacteriaceaelor cuprinde un numr foarte mare de bacterii implicate n
patologia infecioas a omului dar i bacterii comensale cu habitat intestinal.
Denumirea genului provine de la medicul veterinar american Daniel Salmon, care la
sfritul secolului XIX a izolat din intestinul porcului prima tulpin aparinnd acesti grup
taxonomic (14).
Salmonella este un gen de bacterie patogen intestinal care cauzeaz unele boli
infecioase (febr tifoid, paratifos, intoxicaii alimentare etc.). Salmonella este cauza celor
mai rspndite toxiinfecii alimentare, contaminnd omul prin ingestia de mncare sau de ap
16

infectat.
Exist mai multe tipuri ale acestei bacterii: Salmonella typhimurium i Salmonella typhi.
ncadrare taxonomic
Prin metode moderne de taxonomie molecular sunt recunoscute n prezent n cadrul
acestui gen 2 specii :
- Salmonella enterica cu 6 subspecii : enterica, salamae, arizonae, diarizonae, houtenae i
indica.
- Salmonella bongori.
99% din tulpinile de Salmonella implicate n patologia uman aparin speciei S. enterica
subspecia enterica.
Pe baza antigenului somatic O (antigen cu specificitate de grup), au fost descrise
numeroase grupe serologice notate cu literele mari ale alfabetului, de la om fiind izolate
tulpini aparinand n special grupelor A-E. Antigenul H (antigen cu specificitate de tip), n
faz 1 i 2, permite individualizarea n cadrul aceluiai grup a serotipurilor- peste 2000- crora
iniial li s-a acordat denumirea de specie. n prezent s-a acceptat pstrarea acestor denumiri ca
de exemplu Slmonella typhi, Salmonella enteritidis.

Habitat
Toate serotipurile de Salmonella enterica subsp. Enterica sunt parazite pentru om i
mamifere (germeni nalt patogeni), n timp ce celelalte subspecii i Salmonella bongori se
ntlnesc preponderent la psri i animale cu snge rece.
Cele dou surse majore, omul i animalele, sunt responsabile de poluarea solului i a
apelor, n care pot suparavieui mult timp.
Exist serotipuri de Salmonella cu specificitate de gazd, prezente numai la om (S.
typhi, S. paratyphi), la animale (S. typhisuis la porci , S. abortus ovis-la oi) sau psri ( S.
gallinarum, S. pullorum).
n general exist o distribuie geografic a salmonelelor, n zona noastr fiind izolate mai
frecvent Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis i n unele perioade Salmonella
agona.

Morfologie, caractere culturale

Sunt bacili gram-negativi, cu dispoziie necaracteristic, mobili (excepie fac S.
gallinarum, S. pullorum).
17

Pe medii uzuale, lichide sau solide, formeaz colonii de tip S sau R comune celorlalte
enterobacteriacee. Pe geloz- snge de obicei nu determin hemoliz.
Creterea bacteriilor de tip Salmonella pe medii specifice de cultur:
Pe mediile: Wilson-Blair coloniile sunt negre cu halou; McConey : colonile sunt
transparente necolorate, Leifson ADCL: coloniile sunt roz glbui cu centrul negru metalic,
Istrati-Meitert: coloniile sunt verzi albstrui transparente iar pe mediu AABTL coloniile sunt
verzi.
Prezint caracterele biochimice comune enterobacteriilor. Testele biochimice permit
stabilirea genului, precum i diferenierea speciilor i subspeciilor.

(2)

Caractere biochimice i de metabolism

Prezint caracterele biochimice comune enterobacteriilor (fermenteaz glucoza, reduc
nitraii la nitrii, sunt catalazo-pozitivi i oxidazo-negativi).Fermenteaz lactoza, produc H2S (
cu unele excepii), folosesc citratul ca unic surs de carbon.ncadrarea serologic de grup i
serotip se face pe baza structurii aitentigenice, prin reacii de aglutinare pe lam, conform
schemei Kauffman-White (14).

Patogenitate
Salmonelele sunt germeni nalt patogeni. Salmonelele mai frecvent ntlnite n
patologia uman sunt: Salmonella paratyphi A, B i C dau febre paratifoide.
Salmonella typhi murium este la originea celor mai multe episoade de toxiinfecii
alimentare manifestate prin: diaree, vom i febr. Salmonella enteritidis are o putere
patogen analoag cu precedenta. Salmonelele mai pot da: febre enteritice, gastroenterite
salmonellozice, septicemii salmonellozice, cu leziuni metastatice avnd ca punct de plecare
intestinul, apar mai ales la deficieni imunitari; toxiinfecii alimentare date mai ales de : S.
typhi murium, S. cholerae suis, S. enteritidis.

Tratament
n febrele enterice, n formele septicemice i n salmonelozele enterice la sugari i
adulii tarai, se utilizeaz antibiotice ce penetreaz intracelular: ampicilin, cotrimazol,
cloramfenicol, fluorochinolone, cefalosporine. Toxiinfeciile alimentare sunt tratate
simptomatic.

(2)
18

2.4 Klebsiella pneumoniae

ncadrare taxonomic
Membrii genului Klebsiella sunt bacili Gram-negativi, ncadrai n tribul Klebsiellae al
familiei Enterobacteriaceae. Acest gen cuprinde 7 specii importante din punct de vedere
medical: Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella ozaenae, Klebsiella
rhinoscleromatis, Klebsiella terrigena, Klebsiella ornithinolytica si Klebsiella planticola.
Din cele 7 specii ale genului, 4 sunt importante n patologia uman: K. pneumoniae, K.
oxytoca, K. ozenae i K. rhinoscleromatis. Sugestia cercettorilor de a considera K.
pneumoniae, K. ozaenae i K. rhinoscleromatisca subspecii ale K. pneumoniae nu este
acceptat de microbiologi i clinicieni, acetia tratndu-le ca i cnd ar fi specii separate.

Habitat
Speciile genului Klebsiella sunt foarte rspndite n natur (sol, ape de suprafa,
plante). Sunt germeni condionat patogeni, componeni ai florei intestinale la om i animale,
iar n numr redus se gsesc i la nivelul mucoasei tractului respirator. Se pot izola din ap,
sol, plante.

Morfologie.Caractere culturale
Sunt bacili nesporulai, neciliai, Gram-negativi, scuri i groi, cu capete rotunjite,
dispui n diplo. n produsele patologice apar sub form de cocobacili, nconjurai de capsul.
Nu sunt germeni pretenioi, crescnd foarte bine pe mediile de cultur convenionale.
Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi. Temperatura optim de cretere este de 37C,.
Pe geloz simpl determin formarea de colonii foarte bombate, alb-cenuii, lucioase,
cu aspect mucos (colonii tip M). Se observ deseori apariia de variante ale tipului de colonie:
tipul S i tipul R (colonii plate i uscate). Pe mediile slab selective pstreaz aspectul mucoid
al coloniilor, iar mediile moderat selective induc formarea de colonii cu caracter mucoid mai
puin pregnant dect cel de pe celelalte medii.

Caractere biochimice
Prezint caracterele biochimice comune enterobacteriilor. Fermenteaz lactoza,
zaharoza i glucoza cu eliberare de acid i gaz. Nu produc indol, cu excepia tulpinilor de K.
oxytoca. Produc ureaz, acetil-metil carbinol, folosesc citratul ca unic surs de carbon, dar nu
19

descompun proteinele cu eliberare de H2S.

Rezistena la factorii chimici, fizici i biologici
Tulpinile de Klebsiella sunt omorte de cldura umed (la 55C n 30 minute). La
temperatura camerei i la ntuneric pot supravie ui sptmni i luni de zile. Unele tulpini pot
prezenta o cretere a rezistenei la antiseptice i dezinfectante. Klebsiella spp. este sensibil
la cefalosporinele degenera ia a III-a, floxacine, colimicin i gentamicin.

Caractere de patogenitate
Tulpinile genului Klebsiella sunt patogene prin virulen. Virulena lor este legat de
prezena capsulei de natur polizaharidic, format din D-glucoz, fucoz i acid uronic i a
fimbriilor.
Germenii din genul Klebsiella prezint patogenitate diferit la om, astfel:
-K. pneumoniae (tipurile capsulate 1,2 si 3) d pneumonie i alte infecii
-alte tipuri capsulate de K. pneumoniae i K. oxytoca pot intra n etiologia bolii diareice la
copil i adult
-K. rhinoscleromatis ( tip 3) se izoleaz de la bolnavi cu rinosclerom
-K. ozaenae este agentul ozenei i a unor infecii cronice ale tractului respirator
-n mediu spitalicesc Klebsiella colonizeaz tractul genital, urinar i respirator la adult, ori
intestinal la copil
Klebisella poate fi i la originea meningitelor, otitelor, sinuzitelor sau endocarditelor.
(14)

Tratament
Aproape toi membrii acestui gen sunt rezisteni la antibiotice beta-lactamice: penicilin
ampicilin, amoxicilin. Sunt frecvent sensibile la aciunea cefalosporinelor, ceea ce le
recomand ca tratament de prim intenie n infec iile date de Klebsiella spp.
Totui, n ultimii ani, s-au izolat tulpini de K. pneumoniae rezistente la cefalosporine,
rezisten datorat prezenei unui grup de enzime numit -lactamaze cu spectru larg,
prescurtarea cunoscut fiind SKBLs. Tulpinile de K. pneumoniae care produc SKBLs sunt
notate SKBL-KP. Aceste enzime au capacitatea de a inactiva cefalosporinele prin clivarea
inelului -lactamic al medicamentului. Genetic, producerea acestor enzime este codificat
plasmidic.

20

2.5 Enterococcus faecalis

Face parte din grupa D - este o bacterie gram-pozitiv, comensal care populeaz
tractul gastro-intestinal la oameni i alte mamifere (22).
Speciile de interes enterococice pentru domeniul medical sunt: Enterococcus faecalis,
Enterococcus faecium, Enterococcus Durans, Enterococcus avium.

Patogenitate
Enterococii sunt frecvent implicai n infecii nosocomicale ( ntr-un context postoperator) i bacteriemii cu prognostic revervat la pacienii imunocompromii.
E. faecalis poate provoca

endocardit i bacteriemie, infecii ale tractului urinar

(ITU), meningita, si alte infecii la om. Mai muli factori de virulen sunt gandii s
contribuie la infeciile cu E. Faecalis (16).
n infeciile abdominale, biliare, peritonale, ale plgilor chirurgicale, se asociaz
frecvent enterobacteriilor sau germenilor anaerobi, care pot spori puterea lor patogen.
Rezistena la factorii de mediu
Enterococii sunt rezisteni la temperaturi nalte (45 C), pH 9,6 la concentraii ridicate de
NaCl (6.5%) precum i n medii biliate. Ultimele dou proprieti sunt utile n identificarea
enterococilor.

Epidemiologie
Habitatul natural al enterococilor este reprezentat de intestin i vagin. Sursa de
infecie este endogen (flora normal a organismului) sau exogen, transmiterea fiind de
obicei interpersonal (cadru medical pacient sau ntre pacieni).

Sensibilitatea la antibiotice
Entrococul este n mod natural rezistent la aminoglicozide i relativ rezistent la lactamine. Este un campion al dobndirii rezistenei la antibiotice.

21

2.6 Candida albicans

Habitat
Candida albicans este un microorganism care face parte din microbiota normal a
tractului gastrointestinal, a cavitaii orale i a zonei genitale. n anumite condiii favorizante,
aceasta specie poate deveni patogen ducnd la apariia candidozelor. Candidozele sunt cele
mai intlnite infecii cauzate de fungi, reprezentnd aproximativ jumatate din totalul
infeciilor micotice. Prezena speciei Candida albicans este cauza major a candidozelor
invasive i este cel mai frecvent patogen izolat din sngele pacienilor care au suferit
tratamente postoperatorii.

Morfologie,caractere culturale
Candida albicans este un fung dimorf care are capacitatea de a adopta un spectru de
morfologii: blastospori, pseudohife, tubi de germinaie i hife. Ea se poate reproduce prin
nmugurire, sub form de celule de drojdie (blastospori sau blastoconidia). Producerea de tubi
germinativi rezult din conversia la faza filamentoas hifal, numit i forma de miceliu.
Caractere biochimice i de metabolism
Speciile din genul Candida cresc pe mediul Sabourand simplu, Sabourand cu adaus de
gentamicin i cloramfenicol sau Sabourand cu actidion i rou fenol (mediul Mycoline).
Incubarea se face la 30 C , 24-48 ore.
Candida albicans dezvolt colonii albe, cremoase, mate cu margini regulate.
Pentru Candida Albicans se recomand utilizarea galeriilor Api Candida (fermentri
de zaharuri), care permit identificarea rapid a 14 de levuri.
Candida Albicans fermenteaz glucoza i maltoza, nu fermenteaz zaharoza, lactoza i
rafinoza.
La coloraia Gram, candidele sunt gram pozitive. Celulele levurice sunt sferice sau
ovalare, c muguri multipolari numii blatospori, pseudimicelii formate din celule alungite,
aezate cap la cap.
Se mai pot observa chlamidospori intens colorai, care apar ca celule sferice cu
diametrul mai mare dect cel al clulelor levurice.

Patogenitate
Patogenitatea tulpinilor de Candida albicans depinde de complexitatea unor factori de
virulen. Acetia includ dimorfismul celular, variabilitatea antigenic, adeziunea la esuturile
22

gazdei, caracterul hidrofob al suprafeei celulare precum i producerea de enzime

extracelulare.
Datorit necesitii de combatere a infeciilor cauzate de fungi, studiul substanelor
antifungice este n plin dezvoltare. Cele mai importante clase de compui antifungici sunt
polienele (amfotericina B, nistatin), compuii azolici (imidazoli i triazoli), echinocandine
(caspofungin, micafungin) i 5-fluorocitozina.
Candida albicans prezint dimorfism fungic i este agentul patogen care provoac o
serie de infecii umane (22, 14).

Sensibilitatea la antifungice
Speciile genului Candida sunt sensibile la amfotericin B, nystadin, miconazol,
econazol, ketoconazol i rezistente la 5-fluorocitozin.

23

3. STADIUL ACTUAL AL CUNOASTERII IN DOMENIU

n condiiile medicinei contemporane exist unele bariere n ceea ce privete tratarea
unor afeciuni. O astfel de piedic o reprezint fenomenul de antibiotico-rezisten, semnalat
relativ frecvent n ultimii ani; numeroase studii retrospective evideniaz creterea
semnificativ a numrului de specii bacteriene care sunt capabile s dezvolte mecanisme de
rezisten fa de aciunea agenilor antimicrobieni clasici. Alarmant este faptul c majoritatea
cercetrilor indic o tendin progresiv a nivelurilor de rezisten microbian.
n prezent, studiul extractelor vegetale n vederea izolrii unor compui este o
preocupare larg ntlnit n lumea medical. Astfel, o multitudine de extracte sau constitueni
bioactivi de natur vegetal sunt investigai n scopul valorificarii lor n dezvoltarea unor noi
ageni chimioterapeutici cu aplicabilitate n managementul sau terapia strilor infecioase, n
special n cazul celor determinate de bacterii multirezistente ca Staphylococcus aureus i
Pseudomonas aeruginosa (7, 18a).
Activitatea antimicrobian a extractelor naturale i a componentelor lor bioactive
purificate poate fi determinat pe baza observrii i cuantificrii dezvoltrii bacteriene
consecutiv aducerii n contact a bacteriilor cu agenii cu potenial antimicrobian.
n literatura de specialitate sunt descrise mai multe metode i tehnici de evaluare i
certificare a acestui potenial, dar din pcate sensibilitatea lor nu este constant i
comparabil. Nu exist un protocol standardizat de screening antimicrobian, exista doar
numeroase variante (tehnici preluate i modificate n condiiile de lucru date). Din acest
motiv, rezultatele sunt influenate n mod categoric de metoda aleas (18a).
n anii trecui un numr mare de cercetri au fost realizate la nivel mondial pentru a
dovedi activitile antimicrobiene ale plantelor medicinale (17). Pentru o perioad lung de
timp, plantele au fost o surs valoroas de produse naturale pentru meninerea sntii
umane, n special n ultimul deceniu cu mai multe studii pentru terapiile naturale. Multe
plante au fost utilizate datorit proprietilor antimicrobiene, care sunt datorate compuilor
sintetizai n metabolismul secundar al plantelor.

Aceti produi sunt cunoscui pentru

substanele lor active, cum sunt spre exemplu compuii fenolici, care reprezinta o parte din
uleiurile eseniale (10) precum i taninurile.
Este o necesitate descoperirea de noi substane antimicrobiene cu structur chimic
diferit i noi mecanisme de aciune pentru noi boli infecioase reemergente (21). Bolile
infecioase (majoritatea datorit contaminrii mncarii cu diveri microbi), au devenit o
problem major n lume, n special n societile mai dezvoltate (5). Frecvena tot mai mare
24

a microorganismelor n alimente duce nu numai la scderea volorii nutritive i organoleptice a

produselor alimentare, ci i la generarea mai multor toxine care sunt duntoare pentru
santatea oamenilor.
Dixit i Sharma (2013), au observat c dintre cele cinci tipuri de extracte de
Anisomeles indica i Mentha piperita n mediile: apos, metanolic, etanolic, cloroform i etil
acetat, cel n mediu apos i n acetat de etil au artat cea mai nalt activitate antimicrobian
fa de speciile : Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa i
Klebsiella pneumoniae. Activitatea antimicrobian a extractelor de Mentha piperita este mai
bun fa de Anisomeles indica.
Efectul extractului de menta n acetat de etil este cel mai pronunat faa de specia
bacterian E. coli.
Pentru specia bacterian Klebsiella pneumoniae, extractele din frunzele de Mentha
piperita sunt eficiente doar n prezena metanolului, cloroformului i etil acetat. Extractul de
Mentha piperita n cloroform arat cea mai bun valoare mpotriva K. pneumoniae.
Kazemi i M., Rostami H. i Shafiei S. (2012) au studiat activitatea antibacterian i
antifungic a uleiurilor eseniale din 4 plante medicinale Mentha piperita, Mentha spicata,
Anethum graveolens i Foeniculum vulgare i au determinat compoziia chimic a acestora.
Ei au demonstrat c Mentha piperita are activiti antifungice i antimicrobiene bune,
dar comparativ cu Mentha spicata, acestea sunt mai reduse. Carvona deine cea mai nalt
activitate antifungic i antimicrobian dintre componentele testate. Uleiurile eseniale ale
speciilor de ment posed mare potential anfungic i antibacterian i ar putea fi folosite ca i
conservani naturali i fungicide (12).
S-a demonstrat c activitatea antibacterian i antifungic a extractului metanolic din
frunzele de M. piperita este datorat prezenei taninurilor i flavonoidelor.
Viitoarele studii ar putea fi direcionate spre evaluarea potenialului antimicrobian al
mentei mpotriva unor patogeni gastrointestinali (19).

25

4. MATERIAL I METODE
Obinerea extractelor din Mentha piperita i Mentha spicata.
Extractele alcoolice (fig.
4.2, 4.3) de Metha piperita
(fig.

1.a)

Mentha

spicata (fig. 1.b) au fost

obinute din diferite pari
ale

plantelor

de

ctre

colectivul disciplinelor de
Chimie

anorganic

organic din cadrul Facultii de Tehnologia produselor agroalimentare.

Pentru M. piperita au fost preparate 3 extracte i anume: E2- extract provenit din
rdacini; E3-extract provenit din frunze i E4- extract provenit din flori.
Pentru M. spicata au fost preparate 2 extracte i anume: E5-extract provenit din frunze
i E6-extract provenit din flori. Ca i martor a fost utilizat alcoolul etilic (E1).
n paralel a fost aplicat i antibiograma utilizandu-se antibioticele: ampicilina (E7) i
cefaloxim (E8) pentru speciile bacteriene i cefaloxim (E7), respectiv nystatin (E8) pentru C.
albicans.

Fig. 4.2. Extractele alcoolice de M. piperita

(foto original)
26

Fig. 4.3. Extractele alcoolice de M. spicata

(foto original)
Culturile microbiene i mediul de cultur utilizat pentru testarea activitii
antimicrobiene a extractelor de Mentha piperita i Mentha spicata.
S-a urmrit comportamentul a 6 culturi microbiene (fig. 4.4-4.9) Gram pozitive i
Gram negative n prezenta celor 5 extracte alcoolice de Mentha piperita i Mentha spicata.
Culturile microbiene testate sunt: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella
pneumoniae, Enterococcus faecalis, Salmonella i Candida albicans.

Fig.4.4. Staphylococcus aureus, aspecte macroscopice i microscopice (40, 49)

27

Fig. 4.5. Escherichia coli, aspecte macroscopice i microscopice (40, 48)

Fig. 4.6. Klebsiella pneumoniae, caractere macroscopice i microscopice (42, 43)

28

Fig. 4.7. Enterococcus faecalis, caractere microscopice i macroscopice (38, 39)

Fig. 4.8. Candida albicans, caractere macroscopice i microscopice (44, 45)

29

Fig. 4.9.

Salmonella caractere macroscopice i microscopice (34, 37)

Pentru culturile bacteriene a fost utilizat mediu nutritiv Mueller Hinton (fig. 4.10).
Compoziia mediului nutritiv Mueller Hinton:
Extract de vit

2,0g

Hidrolizat acid de cazein

17,5g

Amidon

1,5g

Agar

17,5g

Ap distilat

1000 ml

pH la temperatura de 25C

7,3 0,2

Fig. 4.10. Mediu nutritiv Mueller Hinton (foto original)

30

Fig. 4.11. Mediu nutritiv Sabouraud (foto original)

Mediul nutritiv Sabouraud (fig. 4.11) a fost utilizat pentru nsmnarea speciei Candida
albicans.
Compoziia chimic a mediului Sabouraud (4)
- Glucoz

40g;

- Pepton

10g;

- Agar

20g;

- Ap distilat

1000ml;

pH = 6.5-7
Mediile nutritive au fost sterilizate prin autoclavare la temperatur de 121C, timp de
15 minute, dup care au fost repartizate n plci Petri sterile. n fiecare plac s-au repartizat
cte 10 ml de mediu. Dup rcirea i solidificarea mediului s-a efectuat operaia de inoculare
cu cele ase culturi microbiene.
Metoda de nsmnare a culturilor microbiene
Suspensile microbiene au fost nsmnate n cte dou repetiii pe mediile nutritive
corespunzatoare aplicnd tehnica diseminrii inoculului (4).
Etapele de lucru ale acestei tehnici sunt:
- suprafaa mediului nutritiv din plcile Petri se zvnt n termostat timp de 30 de
minute la temperatura de 37C;
- 1 ml suspensie microbian, aspirat cu o pipet steril se depune pe suprafaa
mediului solid;
31

Obinerea biodiscurilor si stabilirea concentraiei inhibante prin metoda difuziei

n mediu nutritiv
Biodiscurile cu diametrul de 5 mm, au fost obinute din hrtie de filtru.
Metoda difuzimetric este o metod rapid i eficient de stabilire a rezistenei simple
sau multiple a unui microorganism la aciunea unei substane. Avantajul acestei metode
const n faptul c se poate stabili gradul de sensibilitate sau rezisten la un set larg de
substane.
Pe suprafaa mediului inoculat din plcile Petri s-au depus cu ajutorul unei pense
sterile biodiscurile impregnate cu extractele alcoolice. n paralel a fost studiat i efectul
antimicrobian al solventului (varianta control: E1).
Plcile Petri au fost incubate n termostat timp de 24 ore, la temperatura de 37C.

32

5. REZULTATE I DISCUII
Datele experimentale obinute dup o perioad de incubare de 24 ore sunt cuprinse n
graficele 5.1.-5.6.
Rezultatele experimentale obinute n urma interaciunii microorganism-extract
alcoolic au fost raportate la varianta control (E1). Rezultatele antibiogramei au fost raportate
la testele standard de sensibilitate/rezisten corespunzatoare fiecrei specii microbiene.
Din studiile efectuate pn n prezent se poate afirma faptul c extractele de Mentha
piperita au o activitate antibacterian mai bun mpotriva unor microorganisme implicate n
patologia uman, comparativ cu alte plante (20).

Fig. 5.1. Efectul extractelor de M. piperita i M. spicata asupra speciei bacteriene E. faecalis
La toate extractele testate E. faecalis prezint o sensibilitate mai mult sau mai puin
pronunat comparativ cu E1. La E1 specia bacterian prezint rezistena (fig. 5.1), (anexa1,
fig. 1).
Conform antibiogramei, E. faecalis prezint sensibilitate la ambele antibiotice testate
(fig. 5.1).
De asemenea, se poate observa faptul ca dintre extractele testate, E2 (M.piperita) i E5
(M.spicata), prezint cea mai ridicata activitate antimicrobian fa de E1.
33

Fig. 5.2. Efectul extractelor de M. piperita i M. spicata asupra speciei bacteriene Salmonella

Fig. 5.3. Efectul extractelor de M. piperita i M. spicata asupra speciei C. albicans

ntre varianta control (E1) i rezultatele obinute prin utilizarea extractului E2 de M.
piperita nu exista diferene semnificative n privina rezistenei speciei Salmonella (fig. 5.2),
(anexa 1, fig. 2).
34

n schimb a fost evideniat o sensibilitate pronunat a acestei specii la celelalte

extracte obinute din cele doua specii vegetale: M. piperita (E2, E3) i M. spicata (E4, E5).
Gradul de sensibilitate a speciei bacteriene n prezena celor dou antibiotice este
diferit, fiind mai accentuat n cazul antibioticului E8.
Dintre toate extractele testate, E4 de M. piperita i E6 de M. spicata prezint cea mai
ridicat activitate antimicrobian.
Conform datelor din fig. 5.3, (anexa 2, fig 1), C. albicans prezint rezistena la E1 . De
asemenea, valori apropiate celor nregistrate de E1 au fost remarcate i n prezena extractului
E2.
Dintre extractele testate se poate afirma faptul c E4 de M. piperita i E5 de M. spicata
prezint activitatea biologic cea mai pronunat.
Dintre cele doua antibiotice E8 are efectul antimicrobian cel mai pronunat (fig. 5.2 i
5.3).

Fig. 5.4. Efectul extractelor de M. piperita i M. spicata asupra speciei bacteriene

K. pneumoniae
Specia bacterian K. pneumoniae prezint o sensibilitate crescnd ncepand cu E2
pn la E6. Efectul bacteriostatic cel mai pronuntat l prezint extractele de M. spicata (fig.
5.4). (anexa 2, fig.2).

35

Fig. 5.5. Efectul extractelor de M. piperita i M. spicata asupra speciei bacteriene E. coli

Fig. 5.6. Efectul extractelor de M. piperita si M. spicata asupra speciei bacteriene S. aureus
n general , activitatea bacteriostatic a extractelor de M. piperita i M. spicata este
mai redus n cazul speciei E. coli i S. aureus (fig. 5.5. si 5.6), (anexa 3, fig.1).
Efectul antibacterian cel mai pronunat a fost evideniat prin utilizarea extractului E4
36

de M. piperita (fig. 5.5).

Dintre cele doua antibiotice testate E8 are un impact negativ mai mare asupra speciilor: E.
coli si S. aureus (fig. 5.5 si 5.6), (anexa 3, fig. 2).
Din studiile efectuate de Kazemi i M., Rostami H. i Shafiei S. (2012), cu privire la
activitatea antibacterian i antifungic a uleiurilor eseniale din unele plante medicinale
printre care i Mentha piperita, respectiv Mentha spicata reiese faptul c Mentha piperita
prezint activitate antimicrobian , dar aceasta este mai redus comparativ cu Mentha spicata.

37

CONCLUZII
Activitatea antimicrobian depinde de plant, compoziia chimic a extractelor,
precum i de specia microbian.
Speciile microbiene testate prezint rezistena fa de solventul alcoolic (E1), cu
excepia speciei S.aureus.
n urma antibiogramei, se constat faptul c dintre cele doua antibiotice antibacteriene
se remarc n special E8.
Conform studiilor cuprinse n aceast lucrare nu exist diferene semnificative ntre
speciile microbiene Salmonella i C. albicans i ntre cele doua specii i varianta control n
privina rezistenei nregistrat n urma interaciunii cu solventul, respectiv cu E2.
Dintre toate extractele alcoolice de M. piperita testate, E2, E3, E4 au prezentat
activitate antimicrobian mai accentuat i n special ultimele doua extracte.
Dintre toate extractele alcoolice de M. spicata testate, E5 prezinta efect bacteriostatic
n cazul tuturor culturilor microbiene testate.
n concluzie se poate recomanda utilizarea extractelor cu activitate antimicrobian
pronunat difereniat n funcie de specia microbian.
De asemenea se pot utiliza ambele plante cu specificaia c este de preferat s se in
cont de partea component a plantei din care se obine extractul.

38

ANEXA 1

Fig.1. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei Enterococcus faecalis

(foto original)

Fig.2. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei Salmonella (foto original)
39

ANEXA 2

Fig. Fig.1. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei Candida

albicans (foto original)

Fig. Fig.2. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei Klebsiella

pneumonia (foto original)
40

ANEXA 3

Fig. Fig.1. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei Escherchia

coli (foto original)

Fig. Fig.1. Efectul extractelor de M.piperita i M. spicata asupra speciei

Staphylococcus aureus (foto original)
41

BIBLIOGRAFIE
1. Ali M. A., M. Saleem, W. Ahmad, M. Parvez and R. Yamdagni (2002). A Chlorinated
Monoterpene Ketone, Acy-lated-Sitosterol Glycosides and a Flavanone Glycoside from
Mentha longifolia (Lamiaceae), Phytochemistry, Vol. 59, No. 8, pp. 889-895.
2. Anghelescu Eufimia i colab. (1996). Bacteriologie medical, Editura Mirton Timioara
3. Ba Adrian Gheorghe, (2001). Cercetri privind producerea i valorificarea plantelor
medicinale i aromatice n sistemul agriculturii ecologice pentru zona de sud a Romniei,
Bucureti (Rezumatul tezei de doctorat).
4. Borozan Aurica Breica, (2006). Microbiologie (indrumator de lucrari practice), Editura
Mirton Timisoara, p.62-70.
5. Burt S.A., Reinders, R.D. (2003). Antibacterial activity of selected plant essential oils
against Escherichia coli O157:H7, Letters in Applied Microbiology, pp,36, 162-167.
6. Ctlina Tudora, (2011). Tehnologii de cultivare a plantelor medicinale i aromatice n
zona Clrai-Silistra, Bucureti.
7. Delamare APL, Moschen-Pistorelo IV, Artico L, Atti-Serafini L, Echeverrigary S (2007).
Antibacterial activity of the essential oils of Salvia officinalis L. And Salvia triloba L.
cultivated in South Brazil. Food Chem.,100:603-608.
8. Giurgiu Eugen, Octavian Claudiu Giurgiu (2012). Plante medicinale importante n
tratamentele naturiste, Ediia ilustrat.
9. Imbrea Florin, (2006). Plante medicinale i aromatice,Editura Eurobit, Timioara.
10. Jansenn MA. ET AL. (1987). Antimicrobial ativities of essential oils. Pharmaceutische
Week blad ( Scientific Edition).
11. Juarez Castillo, Gonzalez V, Jaime-Aguilar H, Martinez G, Linares E, Bye R, Romero I.
(2009). Anti-Helicobacter pylori activity of plants used in Mexican traditional medicine for
gastrointestinal disorders. J Ethnopharmacol.
12. Kazemi M., Rostami H. and Shafiei S. (2012). Antibacterial and Antifungal Activity of
some Medicinal Plants from Iran. Journal of Plant Sciences,pp 7: 55-66.
13. Lzureanu Aurel, Agrotehinc, (1994). Editura Helicon, Timioara.
14. Moldovan Roxana i colab., (2008). Curs de Microbiologie Medical, Universitatea de
Medicin i Farmacie Victor Babe Timioara.
15. Muntean Leon S., Tma Mircea, . Duda Marcel M., Vrban Dan I., Florian Simion
(2007). Tratat de plante medicinale cultivate i spontane, Ed. Risoprint Cluj-Napoca.

42

16. Murray, BE. (1990). "The life and times of the Enterococcus.". Clin Microbiol Rev 3 (1):
4665. PMID 2404568.
17. Nascimento G.G.F., Juliana, Locatelli, Freitas, P.C., Giuliana, L.Silva (2000).
Antibacterial activity of plant extracts and phytochemicals on antibiotic-resistant bacteria,
Brazilian Journal of Microbiology, 31:247-256.
18a. Niculae Mihaela , Spnu Maria, Carmen Dana andru, F. Brudac, P. Bolf (2008).
Studii preliminare asupra potenialului antimicrobian al unor extracte vegetale. Analele SNBC
Vol. XIII.
18b. Ponnan Arumugam Rajenderan Murugan .,Mahalingam Subathra Arabandi
Ramesh (2009). Superoxide radical scavenging and antibacterial activities of different
fractions of ethanol extract of Mentha spicata (L.), Boston.
19. Pramila, D. M.1, Xavier, R.1, Marimuthu, K.1, Kathiresan, S.1, Khoo, M. L.1,
Senthilkumar, M.2, Sathya, K.2 and Sreeramanan.(2012). Phytochemical analysis and
antimicrobial potential of methanolic leaf extract of peppermint Mentha piperita: Lamiaceae.
Journal of Medicinal Plants Research Vol. 6(2), pp. 331-335.
20. Preeti Dixit, Dr. K.N.M.I.P.E.R. Cloth Mills, Satish Park, Modi Nagar. (2013). A
comparative screening of antibacterial activity of Anisomeles Indica with Mentha piperita
against human pathogenic microorganisms, vol. 3 (1), pp.85-88.
21. Rojas, J.J., Veronica, J. Ochoa, Ocampo, S.A., Munoz, J.F. (2006). Screening for
antimicrobial activity of ten medicinal plants used in Colombian folkloric medicine: A
possible alternative in the treatment of non-nosocomial infections, BMC Complementary
Medicine, 6:2.
22. Ryan KJ, Ray CG (editors) (2004). Sherris Medical Microbiology (4th ed.). McGraw Hill.
ISBN 0-8385-8529-9.
23. Spirling L. I. and I. R. Daniels (2001).Botanical Perspectives on Health Peppermint:
More than Just an After-Dinner Mint, Perspectives in Public Health, Vol. 121, No. 1.
24. Thiago ASA, Nelson LA, Elba LCA, Ulysses PA. (2008). A new approach to study
medicinal plants with tannins and flavanoids contents from the local knowledge. J.
Ethnopharmacol, 120: 72-80.
25. Toma Felicia Screa, (2006). Bacteriologie Medical. Editura University Pres Targu
Mure.

43

26. http://ro.wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli
27. http://www.farmacia-verde.ro/2011/03/07/tonicul-din-gradina-menta
28. http://ro.wikipedia.org/wiki/Ment%C4%)
29. http://ro.wikipedia.org/wiki/Mentha_spicata
30. http://mymedicalfinder.com/food-herbs-supplements/herbs/spearmint
31. http://www.doctoracasa.ro/plante-a-z/431-izma-menta.html
32. http://www.bioproduct.ro/articole/menta_ideala_pentru_gradini_parfumate.htm
33. http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_albicans
34. http://www.scrigroup.com/educatie/biologie/diagnosticul de laborator
35. http://www.aromaazinternational.com/Mentha-Piperita-93
36. http://mkk.szie.hu/dep/kerteszet/ta/knkt/gyogyn/Mentha%20spicata.html
37. www.google.ro/search?q=salmonella+typhi&hl=ro&source=lnms&tbm=isch&
38. http://www.google.ro/Enterococcus%.2520faecalis
39. www.visualphotos.com/image/1x6040624/coloured_sem_of_enterococcus_faecalis
40. http://prep4md.blogspot.ro/2008/06/staphyococcus-aureus-and-food.html
41.http://www.marlerblog.com/lawyer-oped/e-coli-o157h7-season-is-nearly-upon-us-will-itbe-2005-and-2006-or-2007-and-2008/#.UdWQsawQyZR
42. http://www.tumblr.com/tagged/klebsiella%20pneumoniae
43. http://vetbook.org/wiki/cow/index.php/Klebsiella_spp
44. fineartamerica.com/products/candida-albicans-yeast-sem--poster.html
45. http://thunderhouse4-yuri.blogspot.ro/2009/12/candida-albicans.html
46. http://www.google.ro/search?q=mentha+piperita&hl=ro&source=lnms&tbm
47. http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Mentha_spicata_var._viridis_002.JP
48. http://www.keepourfoodsafe.org/2011/06/
49. http://medchrome.com/mbbs-exams/staphylococcus-aureus-lab-diagnosis-and-dise

44