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Autores:
Gamboa Gonzlez Mauricio Alfonso
Gonzlez Navarrete Cecilia de Jess
Milln Sarabia Martha Daniela
Vivanco Osuna Vernica Berenice
Asesores:
MVZ EPAB. Carlos Osuna Ezquer
Dr. Miguel Alberto Luque Agundez
Agradecimientos
Al MC Martin Lpez Valenzuela, por el apoyo para la realizacin de este trabajo,
por su tiempo y esfuerzo.
A la QFB Beatriz y a la MVZ Fabiola por su apoyo y tiempo y por compartir sus
conocimientos.
A nuestros compaeros: Daniela Itzel Franco Salinas, Luis Miguel Gonzlez
Luqun y Francisco Javier Mendivil Garca, por su apoyo incondicional y sobre todo
por su colaboracin para la toma de muestras.
A los mdicos responsables de cada uno de los establos lecheros, por sus
atenciones, ayuda y el permiso para realizar la investigacin en sus respectivos
lugares de trabajo.
A nuestros docentes por su apoyo y por sus concejos para hacernos ms fcil la
investigacin.
A nuestros padres, por el apoyo, tanto moral como econmico, por alentarnos
cuando nos sentamos cansados.
Gracias a todos ellos, ya que sin su apoyo y colaboracin no hubiese sido posible
realizar esta investigacin.
ndice
I. Introduccin...4
II. Antecedentes...5
III. Objetivo..10
IV. Materiales y mtodos.............11
V. Resultados y discusin.12
VI. Conclusiones.15
VII. Bibliografa...16
Introduccin
La mastitis es una inflamacin de la glndula mamaria y sus tejidos secretores, que
reduce la produccin del volumen de leche, alterando su composicin, incluso su sabor,
adems de elevar su carga bacteriana normal es un problema poblacional multifactorial
imposible de erradicar; por consiguiente, su control depende de la aplicacin de un
sistema integral de medidas cuyos objetivos son: reducir la tasa de nuevas infecciones y
reducir el tiempo de infeccin de cada caso de mastitis. En general, las mastitis causan
entre un 40 a 50% de disminucin en los mrgenes econmicos netos por vaca, con la
mayor parte de estas prdidas debidas entre 5 a 7% por disminucin en la cantidad de
leche por lactancia. Las estimaciones de las prdidas causadas por un menor rendimiento
fluctan entre 100 a 500 kg/vaca por lactancia. Cuando las mastitis clnicas ocurren, los
gastos adicionales se presentan por: eliminacin de leche anormal, las compras de
medicinas y los honorarios por la atencin veterinaria. Cada caso de mastitis clnica ha
sido estimado como produciendo gastos comprendidos entre 100 a 200 USD por vaca en
una lactancia. El objetivo del presente trabajo fue identificar los agentes patgenos que
producen mastitis subclnica en diferentes establos lecheros de Culiacn, Sinaloa, Mxico,
determinar su prevalencia y su resistencia a antimicrobianos.
Antecedentes
Es una requisitoria de las poblaciones de distintos pases, que los alimentos, incluidos la
leche y los productos lcteos, sean seguros para la salud, nutritivos y de sabor fresco y
agradable. Por este motivo, los programas preventivos de mastitis y de calidad de leche
que se llevan a cabo en las lecheras deben tener como objetivo la produccin de leche
de ptima calidad en su composicin, provenir de vacas sanas y bien alimentadas, con la
mxima calidad higinica posible, y sin la presencia de sustancias adulterantes de ningn
tipo. La calidad de leche que llega a la planta de industrializacin no puede ser mejorada
en la misma, aun considerando el proceso de pasteurizacin, por lo tanto, es
determinante para el futuro proceso de la leche en la industria, la calidad con la que se
produce en las lecheras (Chaves, 2010).
La mastitis es una inflamacin de la glndula mamaria y sus tejidos secretores, que
reduce la produccin del volumen de leche, alterando su composicin, incluso su sabor,
adems de elevar su carga bacteriana normal (Gasque, 2008).
Se caracteriza por la entrada de clulas somticas, principalmente neutrfilos
polimorfonucleares (PMN), en la glndula mamaria y por un aumento en el contenido de
proteasa en la leche (Kerr y Wellnitz, 2003). (Mtodos de deteccin)**
La mastitis bovina continua siendo una de las enfermedades que causa mayor impacto
econmico en las ganaderas orientadas a la produccin de leche por ser una de las
enfermedades ms significativas desde el punto de vista de la produccin de leche y
salud pblica (Rodrguez, 2006).
La mastitis es un problema poblacional multifactorial imposible de erradicar; por
consiguiente, su control depende de la aplicacin de un sistema integral de medidas
cuyos objetivos son: reducir la tasa de nuevas infecciones y reducir el tiempo de infeccin
de cada caso de mastitis (Andresen, 2001).
En general, las mastitis causan entre un 40 a 50% de disminucin en los mrgenes
econmicos netos por vaca, con la mayor parte de estas prdidas debidas entre 5 a 7%
por disminucin en la cantidad de leche por lactancia. Las estimaciones de las prdidas
causadas por un menor rendimiento fluctan entre 100 a 500 kg/vaca por lactancia.
Cuando las mastitis clnicas ocurren, los gastos adicionales se presentan por: eliminacin
de leche anormal, las compras de medicinas y los honorarios por la atencin veterinaria.
Cada caso de mastitis clnica ha sido estimado como produciendo gastos comprendidos
entre 100 a 200 USD por vaca en una lactancia (Concha, 2008).
La Mastitis bovina es un complejo singular de enfermedades, que causa una gran
cantidad de perdidas a nivel mundial y en especial en las regiones con una produccin
lechera intensiva. La causa ms comn para un sacrificio temprano de las vacas lecheras
son los problemas de salud de la glndula mamaria, adems de problemas de Fertilidad.
El 26.5% de las vacas lecheras sacrificadas en el continente americano es debido a
trastornos ocasionados por la mastitis (Wolter y col., 2000).
La mastitis bovina es muy persistente en el ganado lechero (Wellenberg y col., 2002),
usualmente es tratada o prevenida con antibiticos intramamarios; representando una
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carga econmica muy alta a los productores de leche en todo el mundo. Las prdidas
mundiales, anuales debido a la mastitis, se han estimado en 35 billones de dlares
americanos (Wellenberg y col., 2002; OFlaherty y col., 2005). Revision bibliografica***
Esta enfermedad, econmicamente, es la ms importante en la industria lechera de los
Estados Unidos, ya que afecta a la mitad de las vacas infectadas con algn tipo de
mastitis. Se considera que esta enfermedad representa el 70% de los gastos totales para
los ganaderos lecheros, resultando en una prdida de billones de dlares cada ao
(Bradley y Green, 2001; dos Santos et al., 2002).***
La constitucin anatmica de la ubre, la expone constantemente a lesiones y agentes
patolgicos de diversos orgenes (Bez, 2002). El propsito de la respuesta inflamatoria
es destruir o neutralizar al agente causal y preparar la forma de sanar y retornar a su
funcin normal (Philpot y Nickerson, 2000; Bez, 2002).*** La Federacin Internacional de
Lechera (1999), define a la mastitis bovina como una enfermedad inflamatoria de la
glndula mamaria, que tiene por objetivo la eliminacin del agente patgeno y la
restauracin de la funcionalidad del rgano.
Todos los mtodos comerciales para producir leche tienden a proveer condiciones
favorables para la diseminacin de microorganismos contagiosos de vaca a vaca en el
momento del ordeo; y la diseminacin de organismos ambientales durante el intervalo
entre ordeos. La mayora de los factores involucrados en la diseminacin de
microorganismos causantes de mastitis estn bajo el control directo de los dueos del
hato y sus empleados (Philpot, 2001).
Los patgenos contagiosos viven y se multiplican en la glndula mamaria y la piel del
pezn, se transmiten de animal a animal principalmente durante el ordeo e incluyen a
Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis y a especies de
Mycoplasma. Los patgenos ambientales son aquellos cuyo reservorio primario es el
lugar donde viven las vacas. Estos organismos constituyen un grupo heterogneo de
gneros y especies bacterianas, siendo los ms frecuentemente aislados los
estreptococos y las bacterias coliformes. Los estreptococos ambientales (EA) causantes
de mastitis bovina incluyen Streptococcus uberis, Streptococcus dysgalactiae,
Streptococcus equinus (anteriormente caracterizado como Streptococcus bovis),
Streptococcus equi, Streptococcus parauberis y Streptococcus canis. Dentro de estos, S.
uberis y S. dysgalactiae son los ms prevalentes, causando infeccin intramamaria (IIM)
cuando se dan condiciones favorables. Streptococcus dysgalactiae puede comportarse
tanto como un patgeno ambiental como contagioso (Rodrguez,. 2000).
Se han identificado ms de 130 especies, subespecies y serovares de bacterias
causantes de la enfermedad; sin embargo, ms del 75% de los casos se deben a
microorganismos GRAM Positivos, particularmente especies de los gneros
Staphylococcus y Streptococcus. La enfermedad tiene dos formas bsicas de
presentacin: clnica y subclnica que, por lo general, no son ms que fases del proceso
inflamatorio. En la forma clnica se presentan evidentes signos de inflamacin como
tumefaccin, rubor, dolor, cambios notables en la secrecin y eventualmente, signos
sistmicos como fiebre, prdida del apetito y depresin. La forma subclnica se caracteriza
por la existencia de inflamacin sin los signos macroscpicos que permiten reconocerla,
6
Cloro en leche.
En la leche la relacin lactosa: cloro, es influenciada por: a) estado lactacional y b)
presentacin de mastitis.
En casos de mastitis el contenido de cloro en la leche tiende a incrementarse en
proporcin a la lactosa, lo que ocasiona en la leche un sabor ligeramente salado.
Determinacin de pH en leche.
El pH identificado en el calostro es de 6.4, en tanto que en la leche es de 6.5-6.8, cantidad
que a media lactacin es de 6.6-6.7, y al final de 6.8 o mayor.
Se ha considerado que en la leche proveniente de glndulas mamaria afectada por
mastitis, el pH es alcalino, lo que se atribuye a la disminucin de la lactosa e incremento
de sales que pasan de la sangre a la leche.
N-acetyl-beta-d-glucosaminidasa (nagasa).
Recientemente se ha empezado a popularizar una prueba en la leche de vacas con
mastitis llamada NAGASA, esta es una enzima que ha demostrado altas correlaciones
entre su presencia y el numero de clulas somticas en la leche. Esta correlacin no vario
entre los diferentes agentes etiolgicos, tampoco tuvo influencia el numero de recadas de
mastitis de las vacas.
Objetivo
El objetivo del presente trabajo fue identificar los agentes patgenos que producen
mastitis subclnica en diferentes establos lecheros de Culiacn, Sinaloa, Mxico,
determinar su prevalencia y su resistencia a antimicrobianos.
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Material y Mtodos
El presente trabajo se realizo en el rancho El Torito ubicado en el poblado los
becos, rancho La Herradura ubicado en el poblado la laguna colorada, rancho RS
ubicado en el limn de los ramos y rancho Los Peascos ubicado en el Salado.
Se realizaron visitas los das lunes y martes para hacer la toma de muestras.
Para la muestra de leche se uso gel desinfectante, torundas y vasos estriles,
para tomar la muestra primero se desinfectaron las manos con el gel y un poco de
algodn, se limpio y desinfecto el pezn de la vaca con la torunda, se tiraron los
primeros chorros de leche y se colecto la leche en los vasos estriles, cuidando de
no contaminar la muestra.
Las muestras fueron puestas en refrigeracin y posteriormente se trasladaron al
laboratorio de microbiologa de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia,
donde inmediatamente se realizaron los cultivos en los diferentes medios; agar
sangre, EMB, saborou y sal y manitol. Se encendi el mechero, se esterilizo el asa
bacteriolgica, se tomo una muestra de leche y se colocaron de una a dos gotas
de leche en cada uno de los medios, se extendi la muestra haciendo estrias en el
agar y terminado el procedimiento se esterilizo el asa y los cultivos fueron puestos
en la incubadora a 37.5C por 24 horas.
Pasadas las 24 horas se realiz la lectura de los cultivos, los positivos fueron
observados al microscopio para identificar el microorganismo, los que dieron
positivos a Staphilococcus se les realizo la prueba de la coagulasa para identificar
si eran Staphilcoccus aureus o staphilococcus spp.
Posteriormente se realizo el antibiograma a todos los cultivos positivos, utilizando
una muestra del cultivo y realizando otro cultivo en un medio liquido, que fue soya,
se puso en la incubadora durante 1 hora y posteriormente se realizo un cultivo y
se coloco el disco con 12 antibiticos, se colocaron nuevamente en la incubadora
a 37.5C durante 24 horas y se realizo la lectura de los mismos.
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Resultados y Discusin
Los resultados fueron los siguientes:
De 20 muestras recolectadas para cultivo, solo 9 (45%) presentaron crecimiento
(Cuadro 1). De las muestras observadas al microscopio todas fueron positivas a
Staphylococcus, se realizo la prueba de la coagulasa a las 9 muestras positivas,
de las cuales 6 (66.66%) fueron coagulasa positiva, determinando asi que son
Staphylococcus aureus y 3 (33.33%) son Staphylococcus spp. (Cuadro 2 y 3). En
el antibiograma realizado a las 9 muestras positivas se determino la resistencia o
sensibilidad a 12 diferentes antibiticos, encontrando solo resistencia en 3
(33.33%) de las muestras (Cuadro 3).
Cuadro 1. Cultivos
Cultivos bacterianos
Negativo
55%
Positivo
45%
12
No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Coagulasa (+)
Coagulasa (-)
70.00%
60.00%
50.00%
40.00%
30.00%
Staphylococcus
aureus, 66.66%
20.00%
Staphylococcus
spp., 33.33%
10.00%
0.00%
Staphylococcus aureus
Staphylococcus spp.
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Amikacina (AK)
Ampicilina (AM)
Cefalotina (CF)
Ceftriaxona (CRO)
Cloranfenicol (CL)
Dicloxacilina (DC)
Enoxacina (ENX)
Eritromicina (E)
Gentamicina (GE)
Netilmicina (NET)
Penicilina(PE)
Trimetroprimsulfatometoxasol(SXT)
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Conclusiones
Con la realizacin de este trabajo se llega a la conclusin de que la principal causa
de mastitis en Mxico y en el mundo es la falta de higiene y el mal manejo al
momento de la ordea, lo que ocasiona grandes prdidas econmicas en la
industria lechera debido a que esta enfermedad provoca una notable disminucin
en la produccin de leche, y en casos mas graves el cuarto afectado llega a
perderse por completo. Tambin se concluye que el principal agente causante de
mastitis subclnica es el microorganismo gram positivo: Staphylococcus aureus;
gnero del cual existe muy poca resistencia a los antibiticos, teniendo un gran
porcentaje de sensibilidad a ellos.
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