Sunteți pe pagina 1din 54

UNIVERSITATEA AL. I.

CUZA DIN IAI


FACULTATEA DE BIOLOGIE
SPECIALIZAREA ECOLOGIE I PROTECIA MEDIULUI ID
ANUL II
SEMESTRUL I

HIDROBIOLOGIE
LUCRRI PRACTICE
PREP. DR. GABRIEL PLVAN

IAI
2010

CUPRINS
1. Determinarea proprietilor fizice ale apei...................................................................3
1.1. Msurarea temperaturii apei............................................................................3
1.2. Msurarea transparenei apei..........................................................................4
2. Determinarea proprietilor chimice ale apei...............................................................5
2.1. Msurarea pH-ului.............................................................................................5
2.2. Determinarea aciditii totale a unei ape (aciditatea de titrare)....................7
2.3. Determinarea alcalinitii totale a apei (alcalinitatea de titrare)....................8
2.4. Determinarea amoniacului...............................................................................9
2.5. Determinarea clorului (clorurilor). Metoda a II-a (Volhard)..........................10
2.6. Determinarea substanelor organice. Determinarea oxidabilitii
n prezena permanganatului de K........................................................................11
2.7. Determinarea oxigenului dizolvat n ap prin metoda Winkler...................13
2.8. Determinarea microanalitic a calciului........................................................14
2.9. Determinarea duritii apei. Determinarea duritii totale
(Metoda compleximetric).....................................................................................15
3. Analiza planctonului.....................................................................................................17
3.1. Analiza calitativ a fitoplanctonului..............................................................17
3.2. Determinarea abundenei numerice a fitoplanctonului...............................20
3.3. Determinarea biovolumului fitoplanctonic....................................................24
3.4. Analiza calitativ a zooplanctonului..............................................................25
3.5. Analiza cantitativ a zooplanctonului...........................................................27
4. Analiza nectonului........................................................................................................32
4.1. Analiza calitativ a nectonului.......................................................................32
4.2. Analiza coninutului gastrointestinal la peti...............................................37
5. Analiza bentosului........................................................................................................39
5.1. Analiza calitativ a macrofitobentosului.......................................................39
5.2. Analiza cantitativ macrofitobentosului ......................................................40
5.3. Analiza calitativ a zoobentosului.................................................................43
5.4. Analiza cantitativ a zoobentosului..............................................................46
Bibliografie........................................................................................................................52

1. Determinarea proprietilor fizice ale apei


1.1. Msurarea temperaturii apei
1.1.1. Generaliti
Temperatura apei din bazinele acvatice naturale variaz n funcie de temperatura aerului.
n general, amplitudinea variaiilor de temperatur din apele de suprafa este cuprins ntre -3C
(n mrile polare n timpul iernii) i +45C (n lacurile tropicale n timpul verii).
1.1.2. Principiul metodei
Termometrele obinuite funcioneaz pe principiul contractrii sau dilatrii, n funcie de
temperatur, a unui lichid (mercur sau alcool). Acesta este mpins de-a lungul unui tub capilar care
are marcat diviziuni n grade Celsius.
1.1.3. Materiale i echipamente necesare
1. Termometre cu mercur sau cu alcool, cu domeniul de msurare de cel puin ntre -5 i +45C, cu
diviziuni de zecimi de grad.
2. Termometre digitale, cu precizia de 0,1 sau 0,2C.
3. Recipiente de plastic de diferite dimensiuni.
4. Vas izoterm cu un volum de 5-10 litri.
1.1.4. Modul de lucru
Temperatura apei se msoar la locul recoltrii cu termometre speciale, adecvate acestui
scop. Pentru a obine o imagine ct mai real a situaiei termice a unui bazin acvatic sunt necesare
mai multe msurtori succesive, din diferite puncte (staii) reprezentative i de la diferite adncimi
(la suprafa i la fund). n funcie de scopul determinrilor, de specificul cercetrilor de teren
efectuate i de posibilitile concrete de lucru, se stabilete o anumit frecven n timp a
msurtorilor (zilnic, lunar, sezonier etc). n lacuri, bli i mlatini temperatura se msoar n
zone acoperite cu vegetaie i n zone lipsite de plante, mergnd dup o linie dreapt directoare de
la mal spre centrul bazinului. n mri i lacurile adnci temperatura apei se poate msura din cinci
n cinci metri adncime.
n stratul superficial al apelor stttoare temperatura se msoar n mod direct, de la mal
sau din barc. Operaiunea const n scufundarea termometrului cu rezervorul sub luciul apei,
lsarea lui n ap timp de circa 5 minute i citirea valorilor indicate fr a se scoate termometrul din
ap. n timpul msurrii temperaturii termometrul se ine n poziie vertical, iar n cazul apelor
stttoare acesta se agit continuu prin ap.
n locurile unde accesul la ap este ngreunat temperatura apei se determin prin luarea
probelor de ap cu ajutorul unei glei scufundate cu o sfoar de la mal sau dintr-o ambarcaiune.
Termometrul se introduce n gleat, dup care se scoate din ap i imediat se face citirea
temperaturii. n acest caz msurarea i citirea temperaturii apei se fac n umbr pentru a nu fi
influenate de aciunea razelor solare. Cu toate aceste precauii metoda este susceptibil de erori,
n special n zonele unde temperatura aerului difer considerabil de cea a apei. Pentru msurtori
mai exacte se folosesc recipiente speciale izolate termic.
Msurarea temperaturii la diferite adncimi se poate efectua prin prelevarea unei cantiti
de ap de la adncimea dorit cu ajutorul sticlei batometrice i msurarea imediat a temperaturii
apei prelevate de aceasta. n mod obinuit sticla batometric este o sticl cu o capacitate de 3001000 ml, lestat i fixat pe o tij marcat la intervale de 0,5 m sau legat cu o sfoar ce prezint
noduri la distane de 0,5 m, al crei dop este de asemenea prins cu o sfoar. Sticla se trimite n
poziie nchis la adncimea dorit, unde, printr-o smucitur brusc, se scoate dopul, pentru a
permite ptrunderea apei. n general, sticla batometric poate fi utilizat doar pn la adncimi de
ordinul a 15 m, deoarece la adncimi mai mari presiunea hidrostatic mpiedic scoaterea dopului.
Recoltarea probelor de ap de la adncimi mai mari se poate efectua i cu ajutorul unor dispozitive
speciale denumite batometre. Acestea se imerseaz n stare deschis i se nchid la adncimea
dorit prin intermediul unei greuti metalice inelare, ce poart numele de "mesager", care gliseaz
n jos de-a lungul cablului de care este suspendat instrumentul. Exist numeroase modele
constructive de batometre, dintre care cel mai cunoscut model este butelia Ruttner. Aceasta
3

const dintr-un cilindru din oel inoxidabil sau din plexiglas, prevzut cu capace orizontale mobile la
ambele capete. Butelia se coboar n ap cu un cablu metalic cu capacele deschise, astfel nct
apa circul liber prin ea. Atunci cnd este atins adncimea dorit, mecanismul de declanare,
acionat de ctre mesager, care gliseaz n jos pe cablul de susinere, determin nchiderea
ermetic a cilindrului de ctre valve. n mod obinuit, capacitatea batometrului Ruttner este de 1-8
litri.
Pentru msurarea temperaturii se folosete termometrul (figura 1.1).

Figura 1.1. - Termometru

Temperatura apei curgtoare se msoar la mal n mai multe puncte i n centrul ei. Se
abordeaz diferite zone ale cursului de ap (zone nsorite, zone umbrite, etc). Determinrile
termice se fac la suprafaa apei i pe vertical. Pe timp de iarn se face o copc n podul de
ghea ce acoper apa. Temperatura se poate msura de la suprafa ctre fundul bazinului dup
procedeele menionate anterior.
n prezent se folosesc dispozitive digitale de msurare a temperaturii ce prezint drept
senzori transductori termoelectrici (rezistene de platin sau termistori) i afieaz datele
msurtorii direct pe display-uri cu cristale lichide (LCD). Aceste dispozitive digitale de msurare a
temperaturii prezint avantajul c determinarea se face la faa locului, din aproape n aproape,
eliminndu-se astfel necesitatea de a se preleva probe de la diferite adncimi. De cele mai multe
ori senzorii termoelectrici sunt cuplai printr-un cablu coaxial cu dispozitive de nregistrare continu
a datelor sau cu un calculator. Acest lucru permite urmrirea facil a dinamicii n timp a
temperaturii sau la diferite adncimi.
Rezultatele msurtorilor se consemneaz in situ n carentul de teren, notndu-se totodat
toate datele de identificare a msurtorii (numrul staiei, data, ora, adncimea de prelevare,
starea vremii etc).

1.2. Msurarea transparenei apei


1.2.1. Generaliti
Transparena apei reprezint grosimea stratului de ap prin care se pot observa contururile
unui obiect. Transparena apei depinde foarte mult de cantitatea de particulele gazoase sau solide
foarte fine aflate n suspensie. Aceste suspensii pot fi de origine mineral (argil, nmol fin) sau de
natur organic (detritus fin dispersat, plancton). Totalitatea acestor materii n suspensie poart
denumirea de seston. Cu ct gradul de ncrcare a apei cu suspensii este mai mare, cu att
transparena apei va fi mai mic. Aceasta duce la diminuarea cantitii de lumin ce ptrunde n
4

masa apei, ndeosebi n straturile mai adnci, ceea ce determin n final o productivitate primar
mai mic.
1.2.2. Materiale necesare
Disc Secchi (figura 1.2), care const dintr-un disc metalic greu, cu diametrul de 20-30 cm,
alb sau cu sectoare vopsite alternativ n alb i negru i suspendat de centru cu o sfoar de 4-20 m
lungime, ce prezint marcaje din 10 n 10 cm.

Figura 1.2. Disc Secchi

1.2.3. Modul de lucru


1. Discul Secchi se scufund uor n ap pn cnd contrastul dintre sectoarele de disc colorate n
alb i negru nu se mai desluete clar i se noteaz adncimea la care se afl cu ajutorul
marcajelor de pe sfoar.
2. Discul Secchi se mai coboar un pic i apoi se ridic pn cnd contrastul dintre sectoarele albe
i cele negre redevine iari net i se noteaz din nou adncimea la care se afl cu ajutorul
marcajelor de pe sfoar.
3. Rezultatele celor dou msurtori se noteaz n carnetul de teren.
1.2.4. Calcul
Media celor dou adncimi citite pe sfoara gradat metric reprezint transparena apei
exprimat n metri sau n centimetri. Grosimea aproximativ a stratului de ap n care se
desfoar producia primar poate fi dedus prin nmulirea valorii transparenei msurate cu
discul Secchi cu un factor egal cu 2,5.
1.2.5. Observaii
Pentru a se evita eventualele erori n stabilirea adncimii pn la care este vizibil discul Secchi
datorit strlucirii suprafeei apei msurtoarea se face n partea umbrit a brcii.
Atunci cnd discul rmne vizibil la scufundarea sa pn pe fundul bazinului transparena se
consider ca fiind total", iar ntre paranteze se trece adncimea locului unde s-a fcut
msurtoarea.

2. Determinarea proprietilor chimice ale apei


2.1. Msurarea pH-ului
2.1.1. Generaliti
pH-ul sau reacia activ a unui mediu se definete ca fiind logaritmul zecimal cu semn
schimbat al concentraiei ionilor de hidrogen, exprimate n mol/l:
pH = - lg[H+]
Soluiile apoase pot avea un pH cuprins ntre 0 i 14. n mod practic, un pH = 1-3 se
consider puternic acid, un pH = 3-5, desemneaz un mediu acid, pH = 5-7, mediu slab acid, pH =
5

7, mediu neutru, pH = 7-9, mediu slab bazic, pH = 9-10, mediu bazic i pH = 10-14, mediu puternic
bazic.

2.1.2. Principiul metodei


Se msoar tensiunea electromotoare existent ntre un electrod de sticl (indicator) i un
electrod de calomel - clorur de potasiu (de referin). Diferena de potenial dintre cei doi electrozi
este funcie linear de pH sau, mai exact, potenialul electrodului depinde de activitatea ionilor de
hidrogen din soluie, aa cum reiese din relaia lui Nernst:
E= E0 + 2,3 RT . ln aH+
nF
unde: E = potenialul msurat;
E0 = constant care depinde de natura sticlei electrodului de referin i cea a soluiilor
de electrolit utilizate;
R = constanta gazelor perfecte (J/C);
T = temperatura
absolut (C);
n = sarcina ionului;
F = constanta lui Faraday (= 96.500 coulombi);
aH+ = activitatea ionilor de hidrogen n proba de ap.
2.1.3. Materiale i echipamente necesare
1. pH-metru cu electrozi de sticl i electrozi saturai de calomel, ce msoar n diapazonul pH 011 (ntre -5 i 80C) i cu sensibilitatea de 0,01 uniti de pH sau 1 mV.
2. Recipiente de polietilen de 50-100 ml cu gtul larg (cu diametrul de 27 mm sau chiar mai mult)
i cu capac nurubat, cte unul pentru fiecare prob.
2.1.4. Procedura de prelevare i conservare a probelor
Determinarea pH-ului se face ct mai repede posibil dup prelevarea probei. De regul,
probele pentru pH se iau din batometru imediat dup cele de oxigen (n cazul n care nu se
analizeaz alte gaze dizolvate) prin umplerea complet a recipientelor de polietilen de 50-100 ml
i astuparea lor ermetic cu capacul nurubat. Dac proba nu poate fi analizat imediat, ea poate
fi pstrat maximum 6 ore ntr-un loc ntunecat la o temperatur inferioar temperaturii apei la locul
de prelevare.
2.1.5. Reactivi
1. Soluie-tampon de ftalat monopotasic 0,05M (are pH = 4,00 la 20C): 10,21 g ftalat acid de
potasiu, KHC8H404, de puritate analitic se dizolv n 1000 ml ap distilat. Se pstreaz ntr-un
recipient de sticl. Soluia, n absena evaporrii, este stabil un timp nelimitat.
2. Soluie-tampon de fosfat monopotasic 0,025M + fosfat disodic 0,025M (are pH = 6,88 la 20C):
33,88 g fosfat monopotasic, KH2P04 i 44,28 g fosfat disodic anhidru, Na2HPO4. 2H20 (p.a.), se
dizolv n 1000 ml ap distilat. Se pstreaz ntr-un recipient de sticl nchis ermetic.
Se dilueaz 100 ml din aceast soluie pn la 1000 ml cu ap distilat pentru efectuarea
analizei. Soluia diluat trebuie pstrat ntr-un recipient de polietilen. Ea este stabil timp de
cteva sptmni dac este prevenit evaporarea i este cel mai bine conservat prin adugarea
ctorva picturi de cloroform.
3. Ap bidistilat fiart i rcit: Apa proaspt distilat conine cantiti importante de bioxid de
carbon, din care cauz are un pH cuprins ntre 5,5 i 6,5. De aceea, pentru a obine o ap cu un
pH de 7,0 apa distilat se trateaz cu Ba(OH)2, se fierbe timp de 10-15 minute n prezena unei
cantiti mici de permanganat de sodiu solid, se distileaz din nou i se pstreaz ntr-un vas
prevzut cu un dop de cauciuc prin care trece un tub de sticl plin cu calce sodat.
n prezent se folosesc dispozitive digitale de msurare a pH-ului (figura 2.1) i afieaz
datele msurtorii direct pe display-uri cu cristale lichide (LCD). Aceste dispozitive digitale de
msurare a pH-ului prezint avantajul c determinarea se face la faa locului.
6

Figura 2.1. pH-metru digital

2.1.6. Modul de lucru


1. Se echilibreaz aparatul conform instruciunilor de utilizare a aparatului.
2. Se etaloneaz aparatul folosind soluiile-tampon cu pH cunoscut i se corecteaz cu ajutorul
butonului de corectare a abaterii.
3. Se spal electrozii cu ap bidistilat i se cltesc cu apa de analizat.
4. Se introduc electrozii n apa de analizat i se citete valoarea pH-ului direct pe afiajul
aparatului.
5. Se repet operaiunea nc de 2 ori i se ia ca valoare a pH-ului media celor 3 citiri.
2.1.7. Observaii
Temperatura soluiilor-tampon trebuie s fie cuprins ntre 20 i 25C.
Temperatura probei trebuie s fie meninut la 20C cu variaii de 0,5C.
Pentru a grbi echilibrarea electrozilor apa de analizat se amestec uor de 1-2 ori.

2.2. Determinarea aciditii totale a unei ape (aciditatea de titrare)


2.2.1. Generaliti
Spre deosebire de aciditatea actual (real), datorat prezenei ionilor de hidrogen aflai la
un moment dat liberi ntr-o soluie, aciditatea total sau de titrare se datoreaz cantitii totale de
hidrogen ionizabil evideniat de acizii: carbonic, alumino-silicilic, fero-silicilic, sulfuric, clorhidric,
sulfuros, azotos, dar i clorului, fenolului, .a., dup cum i marilor cantiti de CO 2 coninute n
apa de ploaie i n zpad.
2.2.2. Principiul metodei
Cantitatea total a hidrogenului ionizabil din ap este reprezentat de cantitatea format
din ionii de hidrogen prezeni in ap i din cei care apar prin disociaie dup neutralizarea celor
dinti cu ajutorul NaOH, i constituie aciditatea total. Aceasta este echivalent cu cantitatea de
hidroxid de sodiu n/10 necesar s neutralizeze 100 cm3 ap.
Aciditatea de titrare se va exprima ns prin numrul de cm 3 NaOH n/1 necesar s
neutralizeze 1 litru de ap.
7

2.2.3. Materiale i echipamente necesare


1. Vase Erlenmayer: 3-4 buci
2. Capsule de porelan: 4 buci
4. Biuret: 1 bucat
5. Baghet: 1 bucat
2.2.4. Reactivi:
1. Soluiei de fenolftalein
2. Soluie de NaOH n/10
3. Indicator universal
4. Indicator metiloranj
2.2.5. Modul de lucru
ntr-un balon de titrare se iau 100 cm3 de ap de cercetat, se adaug 2-3 picturi soluie de
fenolftalein i se titreaz cu o soluie de NaOH n/10 pn la apariia unei culori roz slab, care
persist cteva secunde.
Cantitatea de NaOH n/10 folosit la titrare este echivalent cu cantitatea de acid coninut
n 100 cm3 de ap de analizat.
Aciditatea total se va exprima prin numrul de cm3 NaOH n/1 pentru un litru de ap. Din
aceast cantitate se poate calcula necesitatea de calciu a apei respective.
Se tie ca 1 cm3 NaOH n/10 corespunde la 4 mg NaOH sau la 2,8 mg CaO, sau la 5 mg
CO3Ca.
2.2.6. Calculul
De exemplu: 100 cm3 ap au fost titrai cu 0,4 cm3 NaOH n/10, cu factorul 0,9500. Numrul
3
de cm se va nmuli cu factorul i se va obine exact cantitatea de NaOH n/10 care a neutralizat
100 ap.
Pentru a analiza 1 litru ap, se va nmuli rezultatul cu 10:
Aciditatea = 0,4 x 0,9500 x 10 = 3,8 cm3 NaOH n/10, sau exprimat n NaOH n/1:
Aciditatea = 0,38 cm3 NaOH n/1 la litrul de ap.
2.2.7. Observaie
Se va determina aciditatea de titrare a unei ape numai dac reacia apei este acid. Pentru
a ti acest lucru se face proba calitativ: 50 100 cm3 din apa de cercetat, se trateaz cu 2-3
picturi de fenolftalein.
Dac apa rmne incolor, nseamn c exist prezeni: acidul carbonic, eventual ali acizi
minerali, acizi humici sau ali acizi organici.
Dac apa devine roie-violet, ea este alcalin i are un pH mai mare dect 8,2.
ntr-o alt prob de ap se adaug 5-10 picturi de indicator universal: dac soluia e roie
sau roie-glbuie, apa este acid; dac este verde, apa este neutr, iar dac se albstrete sau
devine violet, ea este alcalin sau puternic alcalin.
n cazul cnd acidul carbonic este prezent, pentru a-l ndeprta, se fierb 100 cm3 ap timp
de 10 min. Dup rcire se adaug dou picturi de indicator metiloranj: dac soluia se nroete,
nseamn cu sunt prezeni acizii minerali; dac apa se nglbenete ea este alcalin.

2.3. Determinarea alcalinitii totale a apei (alcalinitatea de titrare)


2.3.1. Principiul metodei
Alcalinitatea apelor naturale, datorat prezenei cantitii totale de elemente alcaline i
alcalino-pmntoase (se formeaz cu ioni OH-): K, Na, Ca, Mg i care sunt legai n mare parte ca
bicarbonai i carbonai, n mic parte ca fosfai, azotai, sulfai .a., se msoar prin cantitatea de
HCl n/10 necesar neutralizrii a 100 cm3 ap.
Se numete alcalinitate total numrul echivalenilor de acid, folosii pentru neutralizarea
unui litru din soluia de cercetat, pn la punctul de echivalen al srii care rezult.
8

Exprimat n ioni, alcalinitatea de titrare exprim totalitatea n ioni de oxidril pe care bazele
din ap i pun treptat n libertate, n timpul neutralizrii, la adugarea de acid, cnd, pe msur ce
ionii disociai sunt neutralizai, se disociaz o nou cantitate de baz.
2.3.2. Materiale i echipamente necesare
1. Borcane a 100 cm3: 3 buci
2. Biurete: 2 buci
3. Plnie: 1 bucat
2.3.3. Reactivi
1. HCl n/10
2. Ap distilat
3. Soluie de fenolftalein 1%
4. HCl n/1
2.3.4. Modul de lucru
ntr-un balon de titrare se iau 100 cm3 ap de cercetat, se adaug 2-3 picturi soluie 1%
fenolftalein i se titreaz cu o soluie de acid clorhidric n/10, pn exact n momentul decolorrii.
Cantitatea de acid clorhidric n/10 folosit la titrare este echivalent cu cantitatea de baze coninute
n 100 cm3 ap de analizat.
Alcalinitatea se va msura prin numrul de cm3, HCl n/1 corespunztori la 1 litru de ap de
analizat.
Din aceast cantitate se poate calcula cantitatea de CaO corespunztoare, care trebuie s
fie n concordan cu duritatea total.
2.3.5. Calculul
100 cm3 ap s-au titrat cu 0,35 cm3 HCl n/10, cu factorul 1,005. Se nmulete numrul de
3
cm cu factorul i se obine numrul de cm3 de HCl exact n/10 care a neutralizat 100 cm3 ap de
cercetat.
Pentru a neutraliza un litru de ap, rezultatul se va nmuli cu 10.
Alcalinitatea = 0,35 x 1,005 x 10 = 3,517 cm3 HCl n/10 sau exprimat n HCl n/1:
Alcalinitatea = 0,3517 cm3 HCl n/1 la litru.

2.4. Determinarea amoniacului


2.4.1. Principiul metodei
Amoniacul cu o soluie alcalin de reactiv Nessler formeaz aminoiodura mercuric, dup
reacia:
Hg
[2 HgI4]-2 + 3 OH- + NH3 [O
NH2] I + 7 I- + 2H2O
Hg
Aminoiodura mercuric este un complex de culoare galben. La concentraii mai mari de
amoniac se produce chiar precipitarea.
2.4.2. Determinarea colorimetric prin comparare cu scara de NH4Cl
2.4.2.1. Reactivi
1. Reactiv Nessler (tetraiodomercuriat de potasiu),
2. Tartrat dublu de sodiu i potasiu (sare Seignette),
3. Soluie etalon de clorur de amoniu (NH4Cl-)
2.4.2.2. Pregtirea scrii de comparare
Soluia etalon de clorur de amoniu, cu un coninut de 0,05 mg NH4+ ml-1 se repartizeaz
ntr-o serie de tuburi Nessler i se completeaz cu ap bidistilat conform tabelului 1.

Tabelul 1. Prepararea scrii etalon pentru determinarea amoniacului

Corespunde la mg NH4+ l-1


0
0,05
0,1
0,2
0,4
0,6
0,8
1

Ap, ml
50
49,95
49,90
49,80
49,60
49,40
49,20
49

NH4Cl, ml
0
0,05
0,1
0,2
0,4
0,6
0,8
1

2.4.2.3. Modul de lucru


La 50 ml prob limpede i incolor, se adaug 2 ml soluie de tartrat dublu de Na i K i 2
ml reactiv Nessler. Dup 10 minute, proba de analizat se compar cu tuburile scrii colorimetrice
de comparare.
n condiiile determinrii, metoda asigur o sensibilitate de 0,05 mg NH4+ l-1.
2.4.2.4. Observaie
Scara colorimetric de comparare de clorur de amoniu se pregtete simultan cu proba de
analizat.
n fiecare tub, care formeaz scara de comparare, se introduc cte 2 ml de soluie de tartrat
dublu de Na i K i 2 ml reactiv Nessler. Introducerea acestor reactivi se face simultan cu
introducerea lor n proba de analizat.
2.4.3. Determinarea colorimetric prin comparare cu scara de cromat-cobalt
Tabelul 2. Determinarea colorimetric prin comparare cu scara de cromat-cobalt

Soluie etalon
cromat cobalt, ml
3
8,1
13,2
23,4
33,6
43,8
54

Ap,
ml
51
45,9
40,8
30,6
20,4
10,2
0

Corespunde la
mg NH4+ l-1
0
0,1
0,2
0,4
0,6
0,8
1

2.4.3.1. Modul de lucru


Soluia etalon de cromat-cobalt se repartizeaz ntr-o serie de tuburi Nessler i se
completeaz cu apa bidistilat cu cantitile date n tabelul 2. Tehnica de lucru este asemntoare
cu cea descris mai sus.
2.4.3.2. Observaie
n cazul apelor tulburi acestea se floculeaz cu sulfat de aluminiu nainte de determinare i
se filtreaz. Cnd coninutul de amoniac depete 5 mg l-1 este preferabil s se foloseasc
metoda distilrii.

2.5. Determinarea clorului (clorurilor). Metoda a II-a (Volhard)


2.5.1. Generaliti
n apele dulci se gsesc cantiti mici de cloruri 0-10 mg NaCl l-1; n bli srate precum:
Amara, Jirlu, coninutul n cloruri crete la 5,9-6,3 g NaCl l-1.
n rurile nvecinate cu regiunile saline gsim peste 1000 mg NaCl l-1. Crapii de un an pot
tri timp ndelungat ntr-un acvariu a crui ape conin 2-6 g Cl l-1; puietul este mai sensibil.
n heleteiele de iernat, limita superioar de via este de 10 g Cl l-1.
10

2.5.2. Principiul metodei


Clorul este precipitat cu azotat de argint, n prezena indicatorului cromat de potasiu. Dup
ce toat cantitatea de clor este precipitat de azotatul de argint, se formeaz cromat de argint de
culoare brun-rocat, uor de observat.
2.5.3. Materiale necesare
1. Capsule de porelan peste 100 ml: 3 buci
2. Pipet gradat: 1 bucat
3. Biuret: 1 bucat
4. Baghet de sticl: 1 bucat
2.5.4. Reactivi
1. Indicator cromat de potasiu (se dizolv 10 g la 10 cm3 ap distilat)
2. AgNO3 n/50
2.5.5. Modul de lucru
Se msoar 100 cm3 ap piscicol ntr-o capsul alb, de porelan, nou sau n stare nou,
de circa 200 cm3 capacitate. Se adaug 1 cm3 indicator i se titreaz cu AgNO3 n/50, amestecnd
cu o baghet de sticl, pn ce soluia galben la nceput, s-a deschis puin la culoare. Dac
consumul de azotat de argint trece de 7 cm3, se repet determinarea cu o cantitate mai mic de
ap, completnd la 100 cm3 cu ap distilat. Din numrul de cm3 de AgNO3 n/50 ntrebuinai, se
scade, drept corecie 0,10 cm3 pentru 100 cm3 ap distilat.
La 1 cm3 AgNO3 n/50 corespund 0,71 mg Cl.
Rezultatul se exprim n mg l-1 Cl, n cifre rotunjite la 10-1 mg.
2.5.6. Calculul
Cl2 mg l-1 = nr. cm3 AgNO3 x 0,71 x 1000
100
2.5.7. Observaie
Determinarea este stnjenit de prezena n proba de ap a acizilor, compuilor de fier
precipitai, sulfiilor, hidrogenului sulfurat i a substanelor organice. Se ncearc reacia probei de
ap cu hrtie de turnesol. Dup caz, se neutralizeaz fie cu o soluie diluat de carbonat de sodiu,
fie cu acid azotic diluat sau cu CH3COOH diluat.
Dac din ap a precipitat hidrat de fier (sau precipit la neutralizare), se trateaz circa 1 g
oxid de zinc chimic pur (liber de reacia ionilor de Cl-), se agit i se filtreaz.
Sulfiii se ndeprteaz prin adugare de MnO4K n/100 la rece, pn la apariia coloraiei
roz. Se decoloreaz apoi proba cu o pictur de ap oxigenat diluat.
Hidrogenul sulfurat se elimin prin fierberea probei de ap. Substanele organice, cnd sunt
n cantitate de peste 100 mg l-1, se ndeprteaz prin agitare cu hidroxid de aluminiu - Al(OH)3
proaspt precipitat, liber de cloruri. Dup tratare, se filtreaz proba de ap.
Hidroxidul de aluminiu se prepar din 12,5 g sulfat de potasiu i aluminiu, chimic pur,
dizolvat n 100 cm3 ap distilat i precipitat cu amoniac. Dup depunere, se decanteaz i se
spal bine precipitatul, decantnd mereu, pn ce dispare reacia ionilor NH-4 i Cl-.

2.6. Determinarea substanelor organice. Determinarea oxidabilitii n prezena


permanganatului de K
2.6.1. Principiul metodei
Principiul metodei const n oxidarea substanelor organice cu permanganat de potasiu n
mediu acid, n cazul unui coninut de cloruri n ap sub 300 mg l-1 , respectiv n mediu alcalin, n
cazul unui coninut de cloruri n ap peste 300 mg l-1.

11

2.6.2. Pregtirea probelor de ap pentru determinare


Pentru efectuarea determinrii, din proba luat n lucru se preleveaz minimum 300 ml.
Dac de la luarea probei pn la efectuarea determinrii trec mai mult de 2 h, proba rezervat
determinrii substanelor organice se aciduleaz cu cte 5 ml acid sulfuric n raportul 1:3, n
volume, pentru fiecare 100 ml ap de analizat.
2.6.3. Reactivi
1. Acid oxalic 0,01 n, preparat ntr-un balon cotat de 1000 ml n care s-a adugat, nainte de a se
aduce la semn, 5 ml acid sulfuric n raportul 1:3, n volume.
2. Permanganat de potasiu, soluie 0,01 n; factorul permanganatului se verific naintea fiecrei
determinri;
3. Acid sulfuric (H2SO4) diluat n raport 1:3 n volume, adic tratat la rece cu permanganat de
potasiu pn la apariia culorii slab roz;
4. Hidroxid de sodiu, sol. 30% (NaOH 30%).
2.6.4. Modul de lucru
a) n cazul apei cu un coninut de cloruri sub 300 mg l-1, se iau 100 ml ap de analizat i se
introduc ntr-un vas Erlenmayer curat, fr urme de substane organice, de circa 300 ml. Se
adaug 5 ml acid sulfuric i se aduce la fierbere. Dup aceasta, se adaug 10 ml permanganat de
potasiu i se continu fierberea 10 minute, dup care se adaug n soluia fierbinte 10 ml acid
oxalic.
Soluia decolorat se titreaz apoi cu permanganat de potasiu, pn la apariia culorii slab roz
persistente.
Substanele organice se exprim n miligrame permanganat de potasiu la litru.
Substanele organice = [(V + V1) V2] 1000 0,316 = [(V + V1) V2] 3,16 (mg l-1)
100
V = volumul de permanganat de potasiu 0,01 n adugat iniial, n ml;
V1 = volumul de permanganat de potasiu 0,01 n ntrebuinat la titrare, n ml;
V2 = volumul de acid oxalic adugat n soluie n titrare, n ml;
0,316 = cantitatea de permanganat de potasiu (n mg) corespunztoare la 1 ml permanganat de
potasiu 0,01 n.
Substanele organice se pot exprima i n miligrame consum chimic de oxigen, i anume 1 mg
MnO4K corespunde la 0,253 mg O2.
b) n cazul apei cu un coninut de cloruri de peste 300 mg l-1, se introduc 100 ml ap de
analizat ntr-un vas Erlenmeyer de circa 300 ml, ca mai sus.
Se adaug 0,5 ml hidroxid de sodiu i se aduce la fierbere. Dup aceasta, se adaug 10 ml
permanganat de potasiu i se continu fierberea nc 10 minute, dup care se las s se rceasc
la 5060o C i se adaug 5 ml acid sulfuric i 10 ml acid oxalic.
Soluia decolorat se titreaz cu permanganat de potasiu pn la apariia culorii slab roz
persistente.
2.6.5. Observaii
Dac proba de ap a fost acidulat la recoltare, se va stabili mai nti ntr-o prob
cantitatea de hidroxid de sodiu necesar neutralizrii soluiei, n prezen de metiloranj. Aceast
cantitate se adaug la proba de ap mpreun cu numrul de milimetri de hidroxid de sodiu
prescrii n metod.
Calculul substanelor organice este similar cu cel al cazului precedent.

12

2.7. Determinarea oxigenului dizolvat n ap prin metoda Winkler


2.7.1. Generaliti
Oxigenul din ap provine din difuzia oxigenului atmosferic i n urma procesului de
fotosintez a plantelor acvatice. Cantitatea de oxigen dizolvat n ap depinde de micarea apei, de
temperatura apei, de presiunea atmosferic i de coninutul n sruri. De concentraia oxigenului
dizolvat n ap depind intensitatea proceselor de descompunere biochimic a materiilor organice, a
oxidrii unor substane minerale i popularea cu organisme a biocenozelor acvatice. De
asemenea, scderea oxigenului reduce capacitatea de autopurificare a apelor naturale, favoriznd
persistena polurilor cu toate consecinele nedorite. Cantitatea minim de oxigen necesar este de
35 mg l-1.
2.7.2. Principiul metodei
Oxigenul dizolvat n ap este fixat pe hidroxidul manganos, format n prealabil prin reacia
dintre clorura manganoas i hidroxidul de sodiu, rezultnd hidroxidul manganic:
MnCl2 + 2 NaOH Mn (OH)2 + 2 NaCl
precipitat alb
2Mn (OH)2 + O2 + H2O 2Mn (OH)3
precipitat brun
n prezena acidului clorhidric hidroxidul manganic reacioneaz cu iodura de potasiu,
punnd n libertate iodul n cantitate echivalent cu cantitatea de oxigen dizolvat n ap:
2Mn (OH)3 + 6 HCl 2 MnCl3 + 6 H2O
2 MnCl3 + 2 KI 2 MnCl2 + 2 KCl + I2
Iodul se titreaz apoi cu tiosulfat de sodiu n prezena amidonului:
I2 + 2 Na2S2O3 Na2S4O6 + 2 NaI
2.7.3. Materiale necesare
1. Sticlue Winkler sau sticle de recoltare cu volum cunoscut (100-150 ml), cu dop rodat, tiat oblic.
2. Pipete gradate de 1 ml.
3. Pipet de 25 ml sau biuret de 50 ml.
4. Balon Erlenmeyer de 500 ml.
2.7.4. Reactivi
1. Clorur manganoas (MnCl2) 40 %: 40 g MnCl2 . 4 H2O se dizolv n 100 ml ap distilat, fiart
i rcit n prealabil; soluia se pstreaz la rece, ntr-o sticl de culoare brun.
2. Amestec de hidroxid de sodiu (NaOH) i iodur de potasiu (KI): 33 g NaOH i 15 g KI se dizolv
n civa ml de ap ntr-un balon cotat de 100 ml, apoi se completeaz la semn cu ap bidistilat.
3. Acid clorhidric (HCl) concentrat (d = 1,19).
4. Tiosulfat de sodiu (Na2S2O3) 0,01 N: se dizolv 2,9 g Na2S2O3 5 H2O (p. a.) i 0,1 g Na2CO3 n
1000 ml ap bidistilat fiart i rcit, apoi se conserv cu 5 ml cloroform pentru 1 litru soluie sau
1 g NaOH. Factorul soluiei se stabilete fa de o soluie de bicromat de potasiu 0,1 N.
5. Amidon, soluie 1%: 1 g amidon solubil se introduce ntr-un balon cotat de 100 ml i se
amestec cu civa ml ap bidistilat rece pn se obine o past, apoi se completeaz la semn cu
ap bidistilat fierbinte.
2.7.5. Modul de lucru
Sticla Winkler se umple la refuz cu apa de analizat avnd mult grij ca aceasta s nu se
barboteze n timpul manipulrilor. Imediat se introduc cu o pipet pe fundul sticlei 1 ml de clorur
13

manganoas. Se introduce 1 ml (KI + NaOH). Se astup flaconul cu dopul umectat cu ap astfel


ca s nu rmn vreo bul de aer. Coninutul flaconului se omogenizeaz prin rsturnarea lui de
cteva ori.
Dup depunerea complet a precipitatului se deschide flaconul i se introduc pe fundul
sticlei 3 ml de HCl concentrat (fumans). Se pune dopul i se amestec bine, pn ce precipitatul
se dizolv complet.
Se trece coninutul cantitativ ntr-un vas Erlenmeyer i se titreaz cu tiosulfat 0,01 N pn
ce se obine o coloraie galbenpai, apoi se adaug cteva picturi (cca. 0,5 ml) de soluie de
amidon i se continu titrarea pn la decolorarea complet a soluiei.
2.7.6. Calculul
mg O2 / dm3 = V f 0,08 . 1000 = V f 80
V1 2
V1 2
Unde: V = ml soluie de tiosulfat de sodiu 0,01 N folosii la titrare;
f = factorul soluiei de tiosulfat de sodiu 0,01 N
0,08 = echivalentul n mg O2 a unui ml de soluie de tiosulfat 0,01 N
V1 = volumul sticlei, n ml
2 = volumul reactivilor introdui pentru fixarea oxigenului, n ml.
2.7.7. Observaii
Dac apa de analizat conine mult CO2 se vor introduce cte 2 ml de reactani.
Iodul liber se poate determina i spectrofotometric prin msurarea absorbanei la 285,5 nm.
Rezultatul se poate exprima i n ml l-1 innd cont c 1 ml O2 l-1 = 1,42903 mg O2 l-1 ap sau 1 mg
O2 l-1 ap = 0,699 ml O2 l-1.

2.8. Determinarea microanalitic a calciului


2.8.1. Principiul metodei
Calciul se precipit cu oxalat de amoniu, sub form de oxalat de calciu. Acesta se dizolv
n acid sulfuric dnd acid oxalic care se titreaz cu permanganat de potasiu n/100.
2.8.2. Materiale necesare
1. Eprubete de centrifug negradate: 4 buci
2. Pipete gradate: 3 buci
3. Centrifug
4. Biuret: 1 bucat
2.8.3. Reactivi
1. Oxalat de amoniu, soluie concentrat
2. Soluie amoniacal: 5%, 2
3. Acid sulfuric 1:3 (neutru la permanganat)
4. MnO4K n/100
2.8.4. Modul de lucru
Se iau 2 cm3 ap de analizat, ntr-un tub de centrifug, se adaug 3 cm3 ap distilat i 1
3
cm soluie 5% de amoniac, apoi 1 cm3 oxalat de amoniu, soluie saturat la rece. Se las n
repaus timp de 30 (n baie de ap, 60o). Se centrifugheaz 10 ca s se depun precipitatul i se
decanteaz soluia limpede; aceasta se nlocuiete cu 5 cm3 soluie amoniacal 2, se
centrifugheaz i aceasta din nou, ca mai sus. Splarea se repet n total de trei ori, ultima oar cu
5 cm3 ap distilat.
Dup ultima decantare se adaug 5 cm3 acid sulfuric 1:3, se nclzete la 60o70o n baia
de ap, se adaug apoi permanganat de potasiu n/100, dintr-o microbiuret, pn la apariia unei
culori roz, se precipit la temperatura de 60o70o.
14

2.8.5. Calculul
1 cm3 MnO4K n/100 corespunde la 0,0002004 g Ca = 0,2004 mg Ca sau
1 cm3 MnO4K n/100 corespunde la 0,0002803 g CaO = 0,2803 mg CaO;
g Ca la litru cm3 MnO4K n/100 x f(MnO4K) x 0,0002004 x 1000
cm3 ap de cercetat
De exemplu: s-au luat 2 cm3 ap pentru determinare; s-au titrat cu 5 cm3 MnO4K n/100 cu
factorul 1.
g Ca la litru = 5 x 1(f) x 0,0002004 x 1000 = 5 x 0,00002004 x 500 = 0,501 g Ca%
Pentru c de obicei pentru determinare se iau 2 cm3 de ap, formula se poate simplifica:
g Ca la litru = cm3 MnO4K n/100 x f x 0,1002
n exemplul de mai sus s-a titrat cu 5 cm3 MnO4K n/100 cu factorul:
g Ca la litru = 5 x 1 x 0,1002 = 0,501 Ca l-1.
2.8.6. Observaie
Dac n timpul titrrii cu permanganat de potasiu acesta a fost adugat n exces, dnd o
culoare roie, excesul poate fi retitrat cu acid oxalic n/100 pn la obinerea culorii roz care
persist la temperatura de 60o70o. n calcul se va avea grij s se scad excesul de
permanganat.

2.9. Determinarea
compleximetric)

duritii

apei.

Determinarea

duritii

totale

(Metoda

2.9.1. Generaliti
Prin duritatea unei ape se nelege suma concentraiilor tuturor cationilor metalici, cu
excepia metalelor alcaline i a ionului de hidrogen. n mod obinuit, duritatea este dat de
prezena n ap a ionilor de calciu i magneziu, ceilali cationi, din cauza concentraiei lor infime,
neinfluennd duritatea apei.
Deosebim urmtoarele feluri de duritate:
duritate temporar sau carbonatat (DK) care este determinat de prezena n ap a
bicarbonailor de calciu i magneziu. Aceast duritate poate fi nlturat prin fierbere, bicarbonaii
trecnd n carbonai puin solubili care se depun;
duritate permanent sau necarbonatat (DP) este dat de celelalte sruri de calciu i
magneziu (azotai, sulfai, cloruri, fosfai etc.), care persist dup descompunerea carbonailor i
bicarbonailor prin fierberea apei;
duritate total (DT) corespunde sumei duritilor temporare i permanente.
n mod convenional, duritatea unei ape se exprim n grade de duritate, care difer de la o ar la
alta. Astfel, 1 grad francez de duritate = 10 mg CaCO3 l-1, 1 grad german de duritate = 10 mg CaO
l-1 sau 14 mg MgO l-1 de ap.
La noi n ar exprimarea duritii se face n grade germane, notate cu dGH (deutsche
gradenharte).
O ap care are 05o dGH este considerat foarte moale;
5 10o ap moale;
10 20o ap semidur;
20 30o ap dur;
peste 30o dGH ap foarte dur.

15

2.9.2. Principiul metodei


Ionii de Ca2+ i Mg2+ formeaz cu sarea disodic a acidului etilen-diamino-tetraacetic
(complexon III) compleci de tip chelat, incolori, solubili i nedisociabili. Sfritul reaciei este pus
n eviden cu ajutorul indicatorului negru eriocrom T:
HOOC CH2
NaOOC CH2

N CH2 CH2 N

OOC CH2
NaOOC CH2

CH2 - COONa

+ Me2+

CH2 - COOH

N CH2 CH2 N

CH2 COONa2CH2 COO

Me + 2 H+

2.9.3. Reactivi
1. Complexon III, soluie 0,01 M: se cntresc 3,7226 g complexon III, se dizolv n civa ml de
ap bidistilat ntr-un balon cotat de 1000 ml, apoi se completeaz la semn cu ap bidistilat.
2. Soluie tampon: se cntresc 5,4 g de clorur de amoniu care se trec cu civa ml de ap
bidistilat ntr-un balon cotat de 100 ml. Se adaug 35 ml soluie de amoniac concentrat i se
completeaz la semn cu ap bidistilat.
3. Indicator negru eriocrom T, soluie 0,4% n alcool etilic.
4. Acid clorhidric 10%.
2.9.4. Modul de lucru
n cazul n care apa de analizat nu conine carbonai i bicarbonai alcalini, reacionnd
negativ fa de fenolftalein:
Se iau 25 ml ap de analizat i se introduc ntr-un vas Erlenmeyer, de 100 ml. Se
completeaz cu ap bidistilat pn la un volum total de 50 ml.
Proba se nclzete pn la aproximativ 60o C i se adaug 5 ml soluie tampon (pentru a
obine pH-ul 10) i 15 picturi de indicator negru eriocrom T.
Se titreaz cu soluie de complexon III pn ce culoarea vireaz de la rou ca vinul la
albastru net/clar.
Atunci cnd se analizeaz probe de ap care conin carbonai i bicarbonai (reacie
pozitiv cu fenolftalein):
Se iau 25 ml ap de analizat i se introduc ntr-un vas Erlenmeyer, de 100 ml. Se adaug 5
ml HCl i se fierbe pentru ndeprtarea bioxidului de carbon 1 2 minute.
Se rcete pn la aproximativ 60o C, se adaug 25 ml ap bidistilat, 1 ml soluie tampon
i 15 picturi de indicator negru eriocrom T.
Se titreaz cu soluie de complexon III pn ce culoarea vireaz de la rou ca vinul la
albastru net.
2.9.5. Calculul
dGH = 0,561 V1 F . 1000= 56,1 V1 F
25 10
25
V1 ml soluie de complexon, 0,01 M folosii la titrare;
F factorul soluiei de complexon III;
0,563 echivalentul n mg CaO pentru 1 ml de soluie de complexon 0,01 M;
25 ml ap luat pentru determinare;
10 mg CaO corespunztoare unui grad de duritate.
2.9.6. Observaii
Se poate folosi i indicator solid: aproximativ 0,1 g de amestec format din 1 g Negru
eriocrom T i 100 g NaCl.
16

n cazul unui consum de soluie de complexon care depete 5 ml se va lua n lucru o


cantitate mai mic de ap.
Pentru un viraj mai net, se poate nclzi proba de analizat, la maximum 45o C.

3. Analiza planctonului
3.1. Analiza calitativ a fitoplanctonului
3.1.1. Generaliti
Fitoplanctonul este reprezentat de totalitatea organismelor microscopice fotosintetizante
care plutesc mai mult sau mai puin pasiv n masa apei i care nu se pot opune prin micri proprii
aciunii curenilor sau valurilor din cauza lipsei sau a dezvoltrii relativ slabe a organelor de
locomoie.
n compoziia planctonului vegetal intr algele aparinnd urmtoarelor grupe taxonomice
principale:
diatomee
(Bacillariophyceae),
cloroficee
(Chlorophyceae),
cianobacterii
(Cyanobacteria), dinoflagelate (Dinophyceae), crizoficee (Chrysophyceae), euglenoficee
(Euglenophyceae) i xantoficee (Xanthophyceae). Dimensiunile organismelor fitoplanctonice sunt
cuprinse, de regul, ntre 2 i 1000 pm. Microalgele planctonice sunt prezente numai n zona
eufotic, n care pot realiza deplasri pe vertical.
3.1.2. Principiul metodei
Prelevarea probelor de fitoplancton i identificarea organismelor din fiecare grup sistematic
pn la nivel de specie.
3.1.3. Materiale i echipamente necesare
1. Recipiente de sticl sau de plastic de 1-5 litri.
2. Vas cilindric de sedimentare.
3. Pipete Pasteur prevzute cu o par mic de cauciuc.
4. Flacoane de sticl de 10-50 ml.
5. Lame portobiect i lamele pentru microscopie.
6. Microscop cu o putere de mrire de 1000x.
3.1.4. Stabilirea staiilor, adncimilor i periodicitii de prelevare a probelor
Numrul staiilor, orizonturilor i frecvenei de prelevare a probelor de fitoplancton se
stabilete n funcie de scopul cercetrii, de mrimea, forma i particularitile hidrologice ale
bazinului, de resursele materiale i umane disponibile.
Proba de fitoplancton este prelevat, n timpul fiecrei campanii, din stratul eufotic (Zeu)
corespunztor stratului de ap ntre suprafa i de 2,5 ori adncimea disc Secchi. Proba
caracterizeaz ntreaga zon fotic.
- cnd Zeu este ct adncimea lacului (transparen total), proba integrat este
luat de la suprafa pn la 1 m de fundul lacului;
- dac Zeu <3 m, se poate folosi sistemul de prelevare integrat (tip tub);
- pentru Zeu 3-5 m, se poate utiliza un sistem de prelevare tip furtun (se utilizeaz un
furtun siliconic cu un diametru interior de 25 mm i o lungime de 10 - 15 m);
- pentru un lac adnc, cu Zeu > 5 m, se va utiliza un batometru de tip Kemmerer sau
Ruttner, cu o frnghie gradat sau un troliu; eantioanele trebuie s fie luate din 0,5 0,5
m.
n toate cazurile, volumul probei este amestecat ntr-un recipient mai mare de colectare (de
exemplu, o gleat) din care se vor eantiona toate probele destinate analizei fitoplanctonului,
clorofilei a i elementelor fizico-chimice suport.
n timpul i dup prelevare, recipientul de colectare nu trebuie s fie meninut n soare sau
sub ploaie direct, factori care pot modifica proba. Coninutul recipientului trebuie s fie bine agitat
nainte de eantionare.
17

Este important ca, indiferent de tehnica de prelevare a probelor, msurrile de adncime s


fie ct mai precise.
Pentru eantionarea fitoplanctonului se folosete un flacon de 500 ml cu gt larg, din sticl
sau din polipropilen (PP), transparent i curat.
Nu este recomandat utilizarea recipientelor din polietilen (PE), deoarece absoarbe iod
coninut n agentul de fixare (Lugol). De asemenea, flacoanele colorate ar trebui s fie evitate,
deoarece acestea mascheaz observarea culorii dup fixarea cu Lugol i intensitatea culorii ofer
o evaluare direct a calitii de conservare. Flacoanele trebuie umplute cam 80% pentru a facilita
omogenizarea probei.
n general, durata minim a unui program de cercetare este de doi ani succesivi. n cazul
unor studii aprofundate perioada de investigare se poate extinde la 3-4 ani.
3.1.5. Procedeul de colectare a probelor
Deoarece cele mai multe specii de alge planctonice au dimensiuni sub 20 um, acestea nu
pot fi reinute nici de fileurile planctonice cu ochiurile cele mai mici. Din acest motiv fitoplanctonul
se preleveaz prin luarea unei anumite cantiti de ap dup acelai procedeu ca i n cazul
probelor pentru analiza fizico-chimic a apei. Volumul total al probei prelevate pentru analiza
fitoplanctonului variaz n funcie de densitatea populaiei algale ntre 0,5 litri n cazul bazinelor
eutrofe (iazuri, heleteie, bli, estuare, lagune) i 2 I n cazul bazinelor oligotrofe (lacuri de
acumulare, tauri).
De la suprafaa apei proba se colecteaz direct, lund proba de la circa 10-15 cm sub
oglinda apei, n recipientul destinat probei respective. Colectarea probelor de ap de la anumite
adncimi se face cu ajutorul batometrelor de tip Ruttner sau Van Dorn. n cazul unor adncimi mici
se poate utiliza i sticl batometric.
Recipientele pentru colectarea i pstrarea probelor se vor numerota cu un marker
rezistent la ap, iar numerele precum i toate datele referitoare la locul i data colectrii, volumul
iniial al probei se vor nota n carnetul de teren sau ntr-o fi special.
3.1.6. Conservarea i pstrarea probelor
Probele de fitoplancton se fixeaz n teren cu soluie alcalin de Lugol la o concentraie
final de 0,5%, adic de aproximativ 8 picturi la 100 ml (sau 2,5 ml pentru 500 ml prob), ceea ce
va imprima probei fixate o culoare galben maronie (whisky). Pstrarea probelor la lumin sau un
timp mai ndelungat duce la decolorarea acestora. Periodic, probele se verific i dac este nevoie
se mai adaug soluie fixatoare. Nu se ia n considerare volumul de soluie fixatoare n calculele
ulterioare!
Un eantion fixat corespunztor poate fi pstrat pentru cel mult 4 sptmni, la ntuneric
nainte de analiz sau 12 luni n cazul n care se pstreaz la ntuneric i rece - ntre 1 i 4 C.
Pentru perioade de depozitare mai lungi, se adaug fixatori suplimentari: glutaraldehid sau
formaldehid. Folosirea glutaraldehidei este de preferat: aceasta necesit o concentraie final n
eantionul de 0,5%. Utilizarea de formaldehid implic o concentraie final de 5% din eantion.
3.1.7. Prelucrarea probelor n laborator
Toate prile camerei de sedimentare se spal i se cltesc cu alcool nainte de utilizare. O
atenie deosebit necesit curarea lamelei i se recomand o inspectare la invertoscop a
camerei goale nainte de utilizare (urme de ulei de imersie, zgrieturi etc).
Eantioanele conservate i depozitate, camerele de sedimentare i toate echipamentele
utilizate ar trebui s fie aclimatizate la temperatura camerei timp de 24 de ore. Acest lucru s-a
dovedit a fi unul dintre factorii cei mai importani n realizarea unei distribuii aleatorii a celulelor de
alge n aceste camere. Aclimatizarea este de preferat s fie efectuat n ntuneric. De reinut c, o
prob, pstrat ntr-o zon diferit a camerei de lucru, poate avea o temperatur diferit fa de
cea a camerei de sedimentare.
nainte de umplerea camerei, proba trebuie bine omogenizat. Aceast omogenizare se
face timp de aprox. 2 minute printr-o combinaie de micri orizontale i verticale alternative. Nu
se va agita puternic i se va evita formarea de vortex.
Dup omogenizare, se umple camera de sedimentare. Umplerea camerei se realizeaz
dintr-o singur micare, direct din recipientul cu prob. Dup umplerea camerei i fixarea plcii de
18

acoperire, camera nu se mai mic. Locul n care se sedimenteaz probele trebuie sa fie ferit de
razele luminoase, vibraii, surse de cldur i variaii ale temperaturii mediului ambiant. Se
recomand ca aclimatizarea i sedimentarea s se fac n aceeai locaie.
Dac n partea superioar a camerei se observ bule de aer, se repet operaiunea de
umplere. Nu se completeaz camera cu prob.
Se noteaz codul camerei de numrare i a tubului utilizat.
Timpul necesar pentru sedimentare este de minim 12 ore pentru un volum de 10 ml, minim
24 ore pentru 25 ml i minim 48 ore pentru un volum de 50 ml.
O perioad mai lung de decantare conduce la apariia bulelor de aer n camer.
Dac n aproximativ 1-2 ore dup umplerea camerei se observ apariia bulelor de aer la
suprafa, se verific etaneitatea ansamblului camer-tub sau o alt cauz poate fi diferena de
temperatur ntre prob i mediul ambiant unde se face sedimentarea.
Dac dup 1-2 ore se observ vizual apariia de cianobacterii flotante la suprafa, trebuie
pregatit o nou prob. n acest scop golii camera de sedimentare, adugai 5-10 picturi de acid
acetic glacial n recipientul cu prob, apoi umplei din nou camera (prezena cianobacteriilor poate
fi observat i n recipientul cu prob nainte de omogenizare: pelicula de culoare verzuie n partea
superioar a flaconului).
Dup sedimentare, se gliseaz tubul de sedimentare i se acoper camera cu o plac de
acoperire. n cazul apariiei unei mici bule de aer, se pune cu ajutorul unei pipete Pasteur o
pictur mic de ap de la robinet cu soluie Lugol la marginea plcii de acoperire. Utilizai ap la
aceeai temperatur cu eantionul sedimentat. Nu introducei ap distilat (diferenele de
temperatur sau de gradient chimic conduc la formarea de cureni de convecie i la readucerea
algelor n suspensie). Camera de sedimentare se mut uor la invertoscop.
n cazul n care se utilizeaz n mod corect camera, este imposibil de a avea bul de aer n
camer.
Pe ntreaga perioad de numrare a obiectelor algale, camera de sedimentare va fi
acoperit.
La o rezoluie mic (100x) se stabilete dac distribuia unitilor algale este aleatoare.
Aglomerarea algelor ntr-o zon a camerei sau aglomerarea numai n zona central este cauzat
de variaii majore ale temperaturii n timpul sedimentrii, sedimentare pe un plan inclinat sau de
alte cauze.
Dac aceast repartiie aleatoare nu este atins, se pregtete o nou prob (dup
nlturarea cauzelor posibile).
Volumul de prob folosit pentru sedimentare depinde de densitatea algal.
Din considerente statistice, o prob este valid (din punct de vedere a volumului folosit
pentru sedimentare) pentru analiza densitii, dac ndeplinete urmtoarea condiie: n 10-15
cmpuri aleatoare, la o putere de mrire de 400x, sunt observate un numr mediu de 10 uniti
algale. n cazul n care proba nu ndeplinete aceast condiie, se repet sedimentarea folosind un
tub cu volum mai mare sau mai mic.
Nu se recomand folosirea unui volum de prob mai mic de 5 ml ntr-o camer cu diametrul
de 25 mm i nici utilizarea tuburilor de volum mare (peste 50 ml).
Utilizarea ca reper a cantitii de clorofil a nu este recomandat, deoarece nu prezint o
estimare real a densitii algale (clorofila a are valori procentuale diferite pentru fiecare grup de
alge).
Ca recomandare, pentru lacurile din zona montan cu adncimi de peste 10 m se poate
utiliza un volum de sedimentare de 25 ml, pentru zona colinar un volum de 10 ml sau 5 ml. Pentru
lacurile din zona de cmpie este suficient un volum de 5 ml. La fel i pentru ruri.
n cazul n care, dup sedimentarea cu un tub de 50 ml, densitatea este foarte sczut, se
poate utiliza o preconcentrare. n acest scop se sedimenteaz n cilindri de sticl de 250 ml (nu
mai mari se formeaz cureni de convecie i algele nu se sedimenteaz). Dup aprox. 72 ore,
se ndeprteaz supernatantul cu ajutorul unui furtun prevzut cu tub lateral. Nu se recomand
folosirea unei pompei de vid pentru ndeprtarea supernatantului.
Volumul sedimentat se introduce apoi ntr-un nou cilindru pentru o nou concentrare. Se
ndeprteaz supernatantul. Volumul final obinut este introdus ntr-o camer de sedimentare cu
tub corespunztor volumului de prob rmas. (de ex. dup concentrarea a 1 litru prob n 4 cilindri
de 250 ml a rmas un volum total de 80 ml). Acest volum se introduce ntr-un nou cilindru, se las
19

la sedimentat, se ndeprteaz supernatantul i rmne un volum de 37 ml. Acest volum se


introduce ntr-o camer cu un tub de 50 ml. Volumul lips se completeaz cu ap de robinet, ce
conine soluie Lugol. Utilizarea apei de robinet fr soluie Lugol sau a apei distilate conduce la
distrugerea pereilor celulari ai algelor (datorit diferenelor de presiune osmotic). Volumul folosit
la calcul in in exemplu dat este de 1 L (s-a sedimentat 1 litru de prob, nu se folosete nici un
factor de concentrare).
Concentrarea propriu-zis const n sedimentarea probei brute, bine agitat, ntr-un
cilindru gradat de 100 ml, se va ndeprta ulterior cu grij supernatantul i se va concentra proba la
un raport stabilit de executant n funcie de densitatea observat la analiza preliminar. n urma
concentrrii se va calcula un factor de concentrare, egal cu raportul dintre volumul final i
volumul iniial de prob (volumul de prob concentrat, rezultat n urma ndeprtrii
supernatantului i volumul de prob brut; de ex., dac volumul va fi redus la jumtate, de la 100
ml la 50 ml, atunci factorul de concentrare va fi 50/100=0,5 ; de la 100 ml la 25 mlva fi
25/100=0,25, .a.m.d. i se va folosi la calcularea densitii totale); proba concentrat se va agita
bine i se va pune n camer (considerat a avea volumul mult mai mic dect cel al probei
concentrate) i se las la sedimentat n camer, aa cum s-a descris anterior.
Diluarea propriu-zis. n cazul n care densitatea este prea mare (n cazul sedimentrii
unui volum de 3-5 ml) se dilueaz proba. Pentru aceasta, un volum cunoscut din proba bine
omogenizat se introduce ntr-un cilindru gradat i se completeaz cu ap de robinet cu soluie
Lugol pn la volumul dorit. Ulterior se va calcula un factor de diluie, ce reprezint raportul dintre
volumul final i cel iniial (de exemplu: la 100 ml prob i 100 ml ap, factorul rezultat va fi
(100+100)/100=2, la 100 ml prob i 50 ml ap rezult (100+50)/100=1,5)
n general, diluarea sau concentrarea probelor nu sunt recomandate, deoarece sunt
apar foarte multe erori (cumularea erorilor de msurare a volumelor, cumularea erorilor de
omogenizare etc).
3.1.8. Modul de lucru
1. Din proba concentrat i omogenizat prin scuturarea viguroas a flaconului, se ia cu ajutorul
unei pipete o cantitate oarecare i se pune o pictur pe lama microscopic.
2. Lama se acoper cu grij cu o lamel de sticl, astfel nct ntre lam i lamel s nu rmn
bule de aer i se analizeaz la microscop.
3.1.9. Observaii
Lamele i lamelele trebuie s fie ntotdeauna perfect curate. De aceea, dup fiecare utilizare
aceste se vor spla i degresa, dup care se vor terge cu o bucat de tifon sau pnz moale.
Pentru degresare se va folosi ap i detergent sau o soluie format din 9 pri alcool etilic 90% i
o parte acid clorhidric, dup care se cltesc foarte bine cu ap de robinet i ap distilat. Pstrarea
lamelor i lamelelor se va face n vase cu ap distilat amestecat cu alcool etilic i care sunt
acoperite cu un capac pentru a mpiedica ptrunderea prafului.
Dac alga planctonic este poziionat astfel nct nu pot fi observate anumite structuri sau
dac aceasta este parial acoperit de o particul de detritus, prin apsarea uoar a lamelei cu
vrful unui ac sau creion ascuit se poate determina schimbarea poziiei acesteia, astfel nct
identificarea devine posibil.

3.2. Determinarea abundenei numerice a fitoplanctonului


3.2.1. Principiul metodei
Analiza cantitativ descris, include identificarea i numrarea unitilor fitoplanctonice, cu
ajutorul invertoscopului i a camerelor de sedimentare.
Proba conservat este bine omogenizat i un subeantion este introdus ntr-o camer de
sedimentare cu un volum bine determinat. Cnd algele s-au sedimentat n partea de jos a camerei,
acestea sunt identificate i numrate.
Fiabilitatea statistic a analizei depinde de distributia unitilor algale n camera de
sedimentare i presupune c algele sunt distribuite aleatoriu n camera de numrare.

20

Calculul biovolumului fitoplanctonic se bazeaz pe biovolumele individuale ale unitilor


algale msurate n timpul identificrii i ncadrate ntr-o form geometric sau pe baza informaiilor
disponibile pentru biovolumele diferitelor categorii taxonomice i clase de mrime.
3.2.2. Materiale
1. Invertoscop prevzut cu:
- oculare de 10x sau 15x cu ocular micrometric;
- obiective de 4x, 10x 20x 40x si 100x cu distana mare de lucru i NA > 0,5;
- condensator cu NA > 0,5 cu distan mare de lucru;
- contrast de faz sau diferenial (Normarski - DIC);
- camer foto i software analiz imagine
- micometrul ocular (Figura 1) etc.
2. Camer sedimentare prevzut cu tuburi de sedimentare (de preferin detaabile), tuburi de 5,
10, 25 i 50 ml. Nu se vor folosi tuburi de sedimentare de 100 ml.
3. Cilindri preconcentrare de 250 ml.
3.2.3. Reactivi
- soluie alcalin Lugol pentru fixarea probelor in teren;
- ap de diluie - ap de reea (filtrat pentru ndeprtarea algelor prin filtru banda albastr
sau fibr sticl) cu soluie alcalin Lugol, de concentraie identic cu a probelor, aprox 2,5
ml/500 ml ap;
- alcool etilic pentru curare camere sedimentare;
- ulei imersie.
3.2.4. Calibrarea echipamentelor
Fiecare camer de numrare i coloan de sedimentare trebuie s fie identificat de un
marcaj unic.
Pentru stabilirea suprafeei camerei se msoar diametrul camerei i se aplic urmtoarea
formul de calcul: *(d/2)2.
Volumul fiecrei camere de numrare i combinaie cu coloana de sedimentare trebuie s fie
calibrate cu precizie (ex: indicaiile productorului specific un volum de 5 ml dar volumul poate
varia ntre 4,7 i 5,2 ml).

Figura 3.1. Exemplu de micrometru ocular

Se umple camera i coloana cu ap distilat, se pune placa de acoperire i se cntrete.


Se golete camera, se cltete cu alcool etilic, se las s se usuce, apoi se cntrete camera i
tubul gol, mpreun cu placa de acoperire. Se repet operaiunea de 10 ori. Diferena greutii n
grame ntre camera plin i goal reprezint volumul camerei n mililitri.
21

Se calibreaz micrometrul ocular cu ajutorul reelei micrometrice. Se stabilete dimensiunea


cmpului optic pentru toate combinaiile de oculare obiective.
3.2.5. Identificarea taxonomic
Determinarea taxonomic necesit uneori identificri nainte de numrare, care sunt
efectuate cu un microscop n preparat lam-lamel pentru stabilirea unei liste algale. De
asemenea, devine necesar, n cazul unei diversiti mari a diatomeelor, realizarea de preparate
mineralizate n scopul determinrii corecte a acestora (sau determinarea la obiectiv cu imersie
direct pe camera de sedimentare).
Pentru probele de rutin, identificarea taxonomic trebuie s fie fcut pe 400x (600x), la
cel mai nalt nivel taxonomic posibil.
Toate identificrile taxonomice sunt fcute pn la nivel de specie atunci cnd este posibil,
dar n cazul n care aceast identificare este imposibil, se identific pn la un grad superior
taxonomic ce poate fi stabilit cu certitudine.
De reinut c, este mult mai bine s se determine corect la nivel de gen sau ordin, dect s
se determine greit la nivel de specie. n schimb, aceast regul nu trebuie s devin o
obinuin n analiza curent de laborator (nivel maxim acceptat = 20% din totalul taxonilor
identificai).
Exemple de identificare i raportare la nivel taxonomic superior:
Peridinium sp.
Cyanobacteria colonie nedeterminat
Cyanobacteria filamente nedeterminate
Chroococcales nedeterminate
Nostocales nedeterminate
Oscillatoriales nedeterminate
Bacillariophyceae centrice nedeterminate diam <10 m
Bacillariophyceae pennates nedeterminate
Numele operatorului care a fcut identificarea taxonomic va fi inclus n raportare.
3.2.6. Numrarea
O examinare rapid la o putere de mrire de 100x se va face nainte de nceperea
numrrii, pentru a verifica faptul c algele sunt aleator distribuite. n cazul n care distribuia nu
este aleatoare, trebuie s fie pregtit un nou eantion.
Din considerente statistice, o prob este valid pentru analiza densitii dac ndeplinete
urmtoarea condiie: n 10-15 cmpuri aleatoare, la o putere de mrire de 400x, sunt observate un
numr mediu de 10 uniti algale.
La numrare se va ine cont de urmtoarele considerente:
celulele goale nu trebuie luate n calcul; de exemplu, diatomeele goale, peridinee
sau loricele de Dinobryon;
flagelatele mici heterotrofe nu se numr;
diatomeele strict bentice sau litorale n numr redus se numr (n lacurile puin
adnci ele pot reprezenta o proporie semnificativ din prob); prezena n numr mare a
indivizilor din aceast grup ecologic este cauzat de erorile de recoltare - amplasarea
punctului de prelevare a probelor, a vntului, influena afluenilor);
picoplanctonul unicelular (<2 m), nu trebuie luat n considerare;
n plus, se va ine cont de urmtoarele reguli de numrare:
urmtoarele cazuri vor fi considerate o unitate algal:
- coenobiu de Scenedesmus;
- filamentele de cyanobacterii Anabaena, Aphanizomenon, Oscillatoria, Planktothrix;
- coloniile de Aphanocapsa, Aphanothece, Coelomoron, Coelosphaerium,
Cyanodictyon, Cyanonephron, Gomphosphaeria, Microcystis, Radiocystis, Snowella,
Woronichinia, Coelosphaerium, Planktosphaeria, Sphaerocystis;
la taxonii ce pot forma colonii de ex. Aulacoseira, Dinobryon, Melosira, Fragillaria se
numr fiecare individ din colonie;
22

la taxonii la care nu se pot face identificri pn la nivel de specie, pentru calcularea


ulterioar a biovolumelor i datorit uneori a variaiilor mari ale dimensiunilor, se
numr pe grupe de dimensiuni, de ex. Cryptomonadales <16 m, Cryptomonadales
16-26 m, Cryptomonadales >26 m.

Metoda numrrii cmpurilor aleatorii n transecte orizontale, la o putere de mrire de 400x,


pare a fi cea mai rapid i mai precis.
Numrarea unitilor algale
Cmpurile trebuie numrate n mod aleator stratificat dup acelai model n toat camera
de numrare (Figura 3.2). n momentul trecerii la cmpul urmtor, analistul nu trebuie s se uite n
prob - deoarece acest lucru va duce la selectarea subiectiv a unor cmpuri.
Pentru analizele de rutin i aplicarea unei strategii uniforme de numrare se va utiliza metoda
cmpuri aleatorii n transecte orizontale.

Figura 3.2. Numrarea unitilor algale, metoda cmpuri aleatorii n transecte orizontale

3.2.7. Calculul densitii unitilor algale pe unitate de volum


Se utilizeaz urmtoarea formul:

X A d
sav

Unde:
N = numr uniti algale ale taxonului X /unitate volum (ml)
X = numrul total de uniti algale ale taxonului X din toate cmpurile
A = suprafaa camerei de numrare (mm2)
d = factor de diluie sau concentrare (volum final ml /volum initial ml)
s = numrul de cmpuri n care s-a fcut numrarea (50 cmpuri / 400x)
a = suprafaa unui cmp microscopic (mm2)
v = volumul camerei de numrare (ml)
NOT:
- Dac se utilizeaz camera cu tub de sedimentare, volumul v este suma volumelor camerei
i a tubului!!!
- Unitatea de raportare este obiect algal /ml
23

- Calculul densitii pe unitate de volum se va face pentru fiecare unitate taxonomic separat

3.3. Determinarea biovolumului fitoplanctonic


Biovolumele trebuie s fie calculate pentru toate categoriile taxonomice i se face prin
msurarea dimensiunilor corespunztoare i atribuirea de forme geometrice pentru fiecare celul,
filament, clase de diferite dimensiuni sau colonie.
Msurtorile necesare ale dimensiunilor celulei (lungime, lime, diametru) sunt efectuate la o
mrire corespunztoare, folosind un ocular calibrat ce este rotit, astfel nct scara s fie suprapus
pe dimensiunea necesar i msurarea realizat prin nmulirea diviziunilor corespunztoare cu un
factor de multiplicare unic pentru fiecare combinaie de ocular-obiectiv. Msurtori mult mai precise
pot fi fcute cu ajutorul unui program de analiz a imaginii.
3.3.1. Estimarea biovolumului taxonilor unicelulari
Pentru calculul biovolumului unui taxon se msoar dimensiunile necesare pe un numr de
minim 10 taxoni, ideal din aceeai prob.
3.3.2. Estimarea biovolumului pentru filamente
Unele programe de calcul (de ex. Comptage) utilizeaz biovolume gata calculate. De
menionat c acest program foloeste pentru estimarea biovolumului dimensiunile a 100m
filament.
Pentru estimarea biovolumului filamentelor dintr-o prob, se nsumeaz dimensiunile
tuturor filamentelor numrate n cele 50 cmpuri i se mparte la numrul de filamente. Biovolumul
mediu obinut se folosete la calculul biovolumului taxonului prin nmulirea numrului de filamente
cu biovolumul mediu.
3.3.3. Estimarea biovolumului pentru colonii
Difer n funcie de taxon. n general se folosete biovolumul mediu al coloniilor numrate
(ca n exemplu precedent).
NOT:
Un nou standard CEN este n curs de publicare pentru calcularea biovolumelor
celulare a fitoplanctonului. Valoarea biovolumului mediu afiat este pentru 10 uniti algale!
n cazul taxonilor la care nu se poate msura o dimensiune (de exemplu Pediastrum sp. se va
folosi pentru grosime dimensiunea unei celule)
Cemagref i INRA au propus un program de calcul (Comptage, sau versiunea nou
Phytobs) a densitii i biovolumului fitoplanctonului, utiliznd metoda Utermohl. Acest program
permite introducerea datelor n momentul analizei i efectueaz un calcul direct al densitii i
biovolumelor corespunztoare obinute din calcul sau disponibile din literatura de specialitate.
Utilizarea acestui program permite emiterea de rapoarte n format naional unic i permite
transmiterea datelor ntr-un format ce faciliteaz ncrcarea lor ntr-o baz de date.
3.3.4. Calculul
Volumul celular total al fiecrei specii n parte se calculeaz prin nmulirea volumului
celular mediu (exprimat n um3) cu valoarea abundenei numerice a populaiei respective (n nr.
ex./l). Biomasa total a fitoplanctonului se calculeaz dup formula:
S
Bt= (Ai.Bi.10-9)
i=1
unde: Bt = biomasa total a fitoplanctonului, n mg/l;
Ai = abundena numeric a speciei "i", exprimat ca numr de uniti morfologice (celule,
cenobii, colonii sau filamente)/litru;
B i = volumul celular mediu al speciei "i", n m3;
10-9 = factor de conversie a unitilor de volum exprimate n m3 n uniti de greutate
24

exprimate n mg;
S = numrul total al speciilor.
Rezultatele sunt raportate sub urmtoarea form:
densitatea exprimat n numr de uniti algale pe mililitru;
biovolumul corespunztor (termenul de "biomas" este utilizat incorect) exprimat n
milimetri cubi pe litru (mm3 / l = mg / litru).

3.4. Analiza calitativ a zooplanctonului


3.4.1. Generaliti
Termenul de zooplancton definete totalitatea organismelor animale care floteaz n masa
apei i care prezint o mobilitate extrem de redus sau slab, insuficient pentru a contracara
aciunea de transport a curenilor de ap.
Analiza calitativ a zooplanctonului urmrete determinarea principalelor grupe taxonomice
i ntocmirea conspectului faunistic pe grupe taxonomice i grupe funcionale (specii erbivore,
specii prdtoare etc.).
3.4.2. Principiul metodei
Prelevarea probelor de zooplancton cu ajutorul fileului planctonic; sortarea organismelor
sub aparatura optic pe grupe sistematice i identificarea organismelor din fiecare grup sistematic
pn la nivel de specie.
3.4.3. Materiale i echipamente necesare
1. Fileu planctonic.
2. Borcane de sticl cu dop rodat sau bidoane de plastic cu dop nurubat, cu gtul larg i cu un
volum de 250-300 ml.
3. Lup binocular (stereomicroscop) cu o putere de mrire de 100*.
4. Microscop cu o putere de mrire de 1000x.
5. Pipete de sticl prevzute cu o par mic de cauciuc.
6. Cutii Petri.
7. Chei de determinare pentru organismele zooplanctonice.
3.4.4. Stabilirea staiilor, orizonturilor i periodicitii de prelevare a probelor
Alegerea staiilor de colectare a zooplanctonului se face n aa fel nct s cuprind zonele
cele mai reprezentative din punct de vedere ecologic (n general zonele din mijlocul bazinului i
zonele de adncime). Deoarece organismele zooplanctonice prezint o rspndire orizontal i
vertical neuniform, formnd aglomerri cu un pronunat gradient vertical al abundenei, ce
variaz n mod continuu datorit migraiilor circadiene verticale, studiul zooplanctonului se face att
pe orizontal ct i pe vertical. Pentru lacurile naturale, lacurile de baraj i de acumulare sau
iazurile piscicole probele se recolteaz din zona de amonte (de alimentare), din zona de aval (de
evacuare) i din zona central. n general, n zona de alimentare i de evacuare probele se
colecteaz de la orizontul de suprafa (0-0,5 m), iar n zona central de la suprafa, de la diferite
orizonturi de adncime (5, 10, 15, 20, 25, 30 m) i din apropierea fundului bazinului.
Pentru cunoaterea dinamicii zooplanctonului este necesar a se recolta probe lunar pe
ntregul parcurs al unui an sau, cel puin, a se recolta probe sezoniere pe cele patru anotimpuri. La
datele calendaristice fixate probele se vor ridica din acelai loc pentru fiecare staie. n bazinele
piscicole probele se recolteaz cu precdere n sezonul cald (la nceputul, mijlocul i sfritul verii),
dar pentru a avea o imagine ct mai complet asupra zooplanctonului este necesar s se
preleveze probe i toamna i la sfritul iernii.

25

3.4.5. Echipamente de colectare


Pentru recoltarea probelor de zooplancton cel mai frecvent se ntrebuineaz fileul
planctonic (figura 3.3). Acesta const dintr-un sac conic din sit de mtase sau nailon, a crui
deschidere larg, de form circular, este ntrit de un inel metalic. Alegerea diametrul inelului
fileului depinde de densitatea planctonului. Astfel pentru prelevarea probelor din mlatini, bli,
iazuri, heleteie i din zona litoral a lacurilor se folosete un fileu cu diametrul de 10-25 cm, iar
pentru prelevarea probelor din mri i lacurile oligotrofe un fileu cu diametrul de 30-50 cm.
Lungimea conului filtrant se calculeaz n funcie de diametrul deschiderii i trebuie s fie de 4-5
ori mai mare dect diametrul deschiderii fileului. Pentru a conferi fileului planctonic o rezisten mai
mare la traciune, sacul fileului nu se ataeaz direct de rama circular, ci prin intermediul unei
pnze groase de canava. Inelul fileului se prinde de cablul de remorcare prin intermediul a trei sau
mai multe bride. n vrful conului este prins un phrel colector metalic sau din plastic prevzut cu
robinet pentru nchidere i deschidere.

Figura 3.3. Fileu planctonic standard

Sitele utilizate la confecionarea fileurilor planctonice prezint o estur special, de


mtase sau din material sintetic cu fir monofilament, astfel nct ochiurile s nu se deformeze i s
nu-i schimbe dimensiunile. Cele mai bune site sunt cele din estur de nailon cu fir
monofilament, deoarece prezint ochiuri cu dimensiuni uniforme, sunt mai uor de ntreinut i se
colmateaz mai greu. n mod obinuit asemenea site se folosesc n industria morritului i n
funcie de mrimea ochiurilor ele se clasific prin numere.
Dimensiunile ochiurilor plasei fileului planctonic se aleg n funcie de categoria
dimensional a zooplanctonului care urmeaz a fi studiat.
3.4.6. Procedeul de colectare calitativ a probelor
Pentru prelevarea calitativ a zooplanctonului din apele de suprafa fileul planctonic,
imersat complet n ap, se trage ncet n urma ambarcaiunii. Poziia fileului n timpul colectrii
trebuie s fie aproape orizontal. Pentru aceasta de partea inferioar a gurii fileului se leag un
lest, iar de cea superioar un flotor. Apa care intr prin deschiderea fileului se filtreaz prin pereii
sacului, iar organismele i diferitele suspensii inerte, mai mari dect ochiurile plasei, sunt reinute
n sac i antrenate n phrelul colector. Astfel, n urma filtrrii prin fileul planctonic se realizeaz i
o concentrare a zooplanctonului.
Volumul de ap filtrat depinde de gradul de troficitate al bazinului. Astfel, n bazinele
oligotrofe se filtreaz cea. 20-100 litri de ap, n timp ce n cele eutrofe numai 10 litri.
26

Dup tractare fileul se scoate din ap i se cltete prin introducerea lui n ap pn aproape de
inelului metalic i prin agitare puternic sau se spal prin exterior cu ajutorul unui furtun pentru a
antrena organismele rmase pe sit n paharul colector. Materialul adunat n paharul colector (cea.
200 ml) este trecut n borcane de sticl de 250-300 ml, cu gtul larg i cu dop rodat sau n bidoane
din plastic cu dop filetat de aceeai capacitate. Imediat dup aceasta probele se eticheteaz prin
introducerea n recipientul cu proba de zooplancton a unui bileel din hrtie de calc pe care s-a
inscripionat cu cerneal de India data, locul i adncimea prelevrii, dimensiunea ochiurilor i
durata tractrii fileului, precum i alte informaii relevante. Nu se recomand etichetarea prin lipirea
unor autocolante pe recipientele cu prob, deoarece cu timpul acestea se pot desprinde. De
asemenea, inscripionarea suplimentar a recipientelor cu ajutorul unui marker rezistent la ap
duce la o cretere a eficienei n timpul sortrii, deoarece probele concentrate de zooplancton pot
obtura parial sau total eticheta din interior.
3.4.7. Conservarea i pstrarea probelor.
Studiul zooplanctonului este recomandabil a se efectua pe viu. De aceea, probele de
zooplancton trebuiesc examinate ntr-un interval de timp ct mai scurt de la colectarea lui,
deoarece n proba concentrat organismele planctonice consum repede oxigenul i mor. Probele
de zooplancton pot fi meninute n stare vie cel mult 10-12 ore, dac sunt inute la frigider la o
temperatur de circa 4C.
n cazul n care nu exist posibilitatea de a examina imediat probele se recomand fixarea
lor. Aceasta se face cel mai frecvent cu formol 10% (aldehid formic -3,7%), care se adaug n
proporie de 9 pri lichid de conservare la 1 parte biomas planctonic. Deoarece formolul poate
dizolva scheletele calcaroase ale unor zooplancteri, este necesar neutralizarea prealabil a
acestuia cu borax (30 g Na2B4O7-10H2O la 1 litru formaldehid 37-40%). Probele fixate cu formol
pot fi pstrate un timp practic nelimitat.
3.4.8. Modul de lucru
1. Proba concentrat de zooplancton se omogenizeaz energic, dup care se ia cu ajutorul unei
pipete o cantitate oarecare (n funcie de densitatea zooplancterilor) i se introduce ntr-o cutie
Petri.
2. Materialul se triaz sub aparatura optic (microscop sau lup binocular). La triere organismele
sunt separate pe grupe sistematice (de exemplu, rotifere, copepode, cladocere etc).
3. Identificarea zooplancterilor triai, pe ct posibil, pn la nivel de specie cu ajutorul
determinatoarelor.

3.5. Analiza cantitativ a zooplanctonului


3.5.1. Generaliti
Analiza cantitativ a zooplanctonului const n aprecierea numrului de organisme i/sau a
greutii lor dintr-un volum dat de ap. n funcie de abundena zooplanctonului, densitatea i
biomasa se raporteaz la litru sau la metru cub de ap eantionat (ex./l sau ex./m3, respectiv mg/l
sau g/m3). Raportarea rezultatelor se poate face fie separat pe grupe taxonomice, fie pe
zooplancton total.
3.5.2. Principiul metodei
Filtrarea unui anumit volum de ap; numrarea zooplancterilor dintr-un subeantion al
probei concentrate cu ajutorul camerelor de numrare; cntrirea organismelor; extrapolarea
numrului de organisme gsite n subprob examinat la volumul de ap filtrat.
3.5.3. Materiale i echipamente necesare
1. Fileu planctonic prevzut sau nu cu debitmetru.
2. Borcane de sticl cu dop rodat sau bidoane de plastic cu dop nurubat, cu gtul larg i cu un
volum de 250-300 ml.
3. Lup binocular cu o putere de mrire de 100x.
27

4. Microscop cu o putere de mrire de 1000*.


5. Pipete de sticl prevzute cu o par de cauciuc.
6. Cutii Petri.
7. Camere de numrare gradate cu volum cunoscut de tip Sedgewick-Rafter sau Bogorov.
8. Pipet Stempel.
9. Ace de wolfram prinse pe un mner de lemn sau anse Irwin din aliaj nichel-crom cu bucla de 1
mm diametru.
10. Balan analitic cu o sensibilitate de 0,0001 mg.
3.5.4. Echipamente i procedee de prelevare cantitativ a probelor
Pentru prelevarea cantitativ a zooplanctonului este necesar filtrarea unui volum cunoscut
de ap, stabilit n funcie de abundena i talia organismelor recoltate. Aceasta se poate aprecia pe
baza observrii in situ a unor probe orientative.
n principiu, prelevarea cantitativ a zooplanctonului presupune utilizarea a dou mari
categorii de instrumente:
- echipamente care se bazeaz pe colectarea unui volum cunoscut de ap i filtrarea ulterioar a
acesteia (batometre, pompe aspiratoare i sonde tubulare pentru plancton);
- echipamente care se bazeaz pe filtrarea in situ a organismelor planctonice (fileuri planctonice,
planctonometre).
Zooplanctonul de la suprafaa apei (inclusiv hiponeustonul) poate fi colectat cantitativ prin
scoaterea unui anumit volum de ap ntr-un recipient cu capacitate mare (gleat, canistr cu
deschiderea larg) i filtrarea lui prin fileul planctonic. Aceast ultim operaie se poate efectua la
rm sau la bordul ambarcaiunii, fileul fiind introdus parial n ap pentru a evita deteriorarea
organismelor fragile sau trecerea forat a acestora prin ochiurile sitei.
Pentru colectarea cantitativ a probelor de zooplancton de la diferite adncimi se pot folosi
diferite batometre de capacitate mare (5-10 litri)(figura 3.4). Utilizarea batometrelor este indicat
pentru lacurile eutrofe puin adnci, bli i iazuri, deoarece n acest caz abundena mare a
sestonului poate determina o colmatare rapid a ochiurilor fileurilor planctonice, atunci cnd se
urmrete distribuia vertical a zooplancterilor la o scar mic sau atunci cnd se eantioneaz
zona litoral i apa din apropierea fundului. De asemenea, utilizarea batometrelor se preteaz
pentru studiul zooplancterilor de talie mic, cum ar fi protozoarele i rotiferele.

Figura 3.4. Prelevare de probe de zooplancton cu ajutorul batometrului

Probele de ap colectate cu batometrul sunt apoi filtrate printr-un fileu planctonic parial
imersat ntr-o gleat cu ap.
Sondele tubulare, care pot fi considerate ca un fel de batometre lungi, sunt de regul tuburi
flexibile i preleveaz o prob integrat atunci cnd sunt imersate n coloana de ap. Lungimea
28

acestora trebuie s fie egal cu adncimea maxim de eantionare. Diametrul interior al tuburilor
trebuie s fie ct mai mare posibil pentru a diminua pierderile zooplancterilor care se deplaseaz
rapid. Pe de alt parte, tuburile cu un diametru mic pot fi astupate mult mai uor i nu necesit
dispozitive speciale de nchidere. Tuburile flexibile pot fi operate de pe ambarcaiuni mici, dar
trebuie lestate la captul distal pentru a-i menine poziia vertical. Utilizarea tuburilor este indicat
pentru eantionarea ntregii coloane de ap n bazinele puin adnci sau n zona litoral a lacurilor
care prezint o vegetaie abundent. Tuburile rigide transparente pot fi folosite pentru colectarea
unor volume mici de ap din zona litoral a lacurilor, din bli i heleteie. Dezavantajul sondelor
tubulare const n faptul c acestea nu pot furniza date referitoare la distribuia vertical a
zooplanctonului.
3.5.5. Numrarea organismelor
Organismele planctonice de talie mare sunt relativ puin abundente n proba concentrat i
de aceea pot fi numrate integral prin transferarea probei ntr-un vas plat i puin adnc i
examinarea ulterioar cu ochiul liber sau cu o lup de mn. Aceast numrtoare se face
ntotdeauna prima, iar proba este trecut napoi n recipient.
n cazul organismelor zooplanctonice mici, care adesea sunt prezente n probe n numr
extrem de mare, numrarea tuturor organismelor din prob ar fi practic imposibil sau ar necesita
un timp prea mare. De aceea, pentru numrarea lor se recurge la fracionarea probei totale
omogenizate n subprobe mai mici n care organismele se examineaz i se numr n totalitate.
Cel mai simplu mijloc de extragere rapid a unor volume mici din proba total omogenizat este
folosirea pipetei Stempel (figura 3.5). Aceasta const dintr-o siring cu gura larg cu un piston al
crui parte inferioar are forma de clepsidr. Atunci cnd pistonul este ridicat, un volum cunoscut
(de regul de 1 ml) este prins ntre acesta i pereii siringii. Acesta este apoi distribuit n cutii Petri
i examinat la lupa binocular sau la microscop. Pentru a uura numrarea, cutia Petri poate fi
aezat deasupra unei coli de hrtie milimetric, ceea ce permite numrarea sistematic a
organismelor ptrel cu ptrel.

Figura 3.5. - Pipet Stempel: 1 - mner: 2 - piston: 3 - canelur: 4 - plancton (dup Newell & Newell, 1977).

Pentru numrarea direct a zooplancterilor mici sunt folosite nite celule sau camere de
numrare. Dintre diferitele tipuri de camere de numrare o larg utilizare au cptat cele de tip
Sedgewick-Rafter sau de tip Kolkwitz pentru microzooplancton sau tviele de tip Bogorov pentru
macrozooplancton.
Celula de numrare Sedgewick-Rafter const n principiu dintr-o ram de sticl sau de
alam dreptunghiular sudat pe o plac sau lam suport din sticl, delimitnd n acest fel un
volum de ap determinat. Volumul camerei de numrare poate fi de 1, 2 sau chiar 3 ml, n funcie
de concentraia probei luate n lucru. De exemplu, o celul de numrare cu un volum de 1 ml (=
1000 mm3) are 50 mm lungime, 20 mm lime i 1 mm adncime. Suprafaa lamei suport,
respectiv fundul camerei de numrare, sau capacul de sticl cu care se acoper (avnd grosimea
29

de 0,5 mm) poate fi divizat, prin gravare, n ptrele de 1 mm2; reeaua respectiv uureaz
nregistrarea organismelor.
Tvia de numrare Bogorov (figura 3.6) const dintr-o plac de sticl (adeseori este
preferabil sticla neagr) de 13,5 cm lungime i 6,75 cm lime de care sunt lipite fii de sticl
oblic n aa fel nct s formeze trei anuri, cele dou anuri exterioare fiind conectate de cel
median la capete opuse. Pe partea inferioar a plcii de sticl sunt lipite dou baghete subiri de
sticl care acioneaz ca nite ine i mpiedic totodat aderarea plcii de msua lupei
binoculare, chiar i atunci cnd este umezit. Volumul tviei Bogorov este de 10 ml sau chiar mai
mare.

Figura 3.6. Tvia de numrare Bogorov

3.5.6. Modul de lucru


1. Camera de numrare se umple rapid, cu ajutorul unei pipete, cu proba de analizat, dup
omogenizarea prealabil a acesteia, se acoper cu o lamel executnd o micare uoar de
translaie i se analizeaz, n funcie de dimensiunea zooplancterilor fie la lupa binocular, fie la
microscop.
2. Toate organismele cuprinse n masa apei, n pelicula superficial i pe fundul celulei se numr
separat pe specii. Adeseori este necesar a se lua anumite organisme din camera de numrare
pentru a putea fi studiate la o putere de mrire mai mare. Acest lucru se poate face cu ajutorul unei
pipete de sticl prevzut cu o par de cauciuc sau cu ajutorul unei anse de wolfram montate n
vrful unui beior de lemn.
3.5.7. Calcul
Numrul de organisme gsit n volumul de ap de analizat se raporteaz la cantitatea
iniial de ap luat n lucru, folosindu-se relaia:
A= a.n
V.v
unde: A=densitatea zooplanctonului, exprimat ca nr. ex./m3 (proba iniial);
a = numrul de organisme nregistrate n camera de numrare;
n = volumul probei concentrate, n ml;
3
V = volumul de ap trecut prin fileul planctonic, n m ;
v = volumul camerei de numrat, n ml.
3.5.8. Determinarea biomasei zooplanctonului
Determinarea biomasei zooplanctonului se poate face n mod direct, prin cntrirea
organismelor la o balan, sau n mod indirect, prin msurarea volumului realizat de zooplancteri i
transformarea unitilor de volum n uniti de greutate. Valorile biomasei pot fi exprimate
volumetric, sub form de volum sedimentat sau volum dezlocuit, gravimetric (n mg), ca greutate
umed, greutate uscat sau greutate calcinat (organic), sau calorimetric (n cal) pe unitatea de
volum (litru sau m3).
O metod direct de estimare aproximativ a biomasei const n msurarea volumului
sedimentat. Pentru aceasta coninutul recipientului cu proba concentrat de zooplancton se vars
30

ntr-un cilindru gradat, se amestec uor cu o baghet de sticl, se las un timp suficient pentru ca
tot planctonul s se depun complet pe fundul cilindrului (~24 ore) i se msoar volumului realizat
de zooplancton. Considernd c densitatea organismelor planctonice este apropiat de cea a apei
(adic ceva mai mult de 1 g/cm3), unitile de volum sunt convertite n uniti de greutate (106 m3
~1 g).
n mod alternativ, biomasa poate fi estimat prin determinarea volumului dezlocuit de ctre
plancton. Pentru aceasta mai nti se msoar volumul total al probei concentrate mpreun cu
lichidul conservant, dup care planctonul este filtrat ntr-o plnie cu hrtie de filtru i se msoar
din nou volumul lichidului rezultat. Volumul planctonului se calculeaz pe baza diferenei dintre
cele dou volume. Dezavantajul determinrii volumului sedimentat i a volumului dezlocuit const
n faptul c acestea iau n calcul i apa dintre organisme.
Determinarea direct a greutii umede a zooplanctonului se face dup ce a fost nlturat
tot excesul de ap. Pentru aceasta proba total de zooplancton se filtreaz prin hrtie de filtru, iar
planctonul reinut pe filtru se tamponeaz cu o hrtie de sugativ pentru a absorbi apa care ader
la suprafaa organismelor. Hrtia de sugativ se nlocuiete pn cnd ea nu mai absoarbe ap
din masa de plancton. Trebuie avut grija ca organismele zooplanctonice s nu fie strivite, ceea ce
ar duce la pierderea apei de constituie. Apoi zooplanctonul se cntrete la balana analitic.
Pentru determinarea greutii uscate se procedeaz n felul urmtor:
1. O hrtie de filtru Whatman GF/G se cntrete i se umezete cu ap distilat n plnia
dispozitivului de filtrare cuplat la o pomp de vid.
2. Pe hrtia de filtru se introduce proba de zooplancton i se filtreaz la o presiune de aproximativ
250 mm col. Hg pn la eliminarea total a apei.
3. Dup eliminarea apei, filtrul mpreun cu organismele pe care le conine se usuc n etuv la
60-70C pn la o greutate constant. Pn la cntrire filtrul proba se va ine n exicator.
4. Filtrul se cntrete din nou i se calculeaz greutatea uscat a zooplanctonului ca fiind
diferena dintre greutatea obinut i greutatea iniial a filtrului.
Pentru determinarea greutii calcinate (organice) mai nti se determin greutatea uscat
zooplanctonului. Apoi proba de zooplancton se introduce ntr-un creuzet de porelan i se
calcineaz ntr-un cuptor electric la 450-500C pn la o greutate constant. Dup calcinare
materialul se rcete n exicator i se cntrete din nou. Greutatea calcinat se calculeaz prin
scderea greutii probei dup calcinare din greutatea uscat.
Determinarea indirect a greutii. Din cauza dimensiunilor foarte mici ale organismelor
zooplanctonice, determinarea biomasei prin cntrire este adeseori dificil. Din acest motiv,
estimarea biomasei zooplanctonului se face cel mai frecvent n mod indirect, pe baza unor corelaii
dintre dimensiunea organismelor i volumul sau greutatea lor. Relaia dintre greutatea
organismului i lungimea sa poate fi exprimat cu ajutorul urmtoarei formule empirice:
W=aLb

sau

log W = log a + b log L

unde: W = greutatea uscat a organismului, n ug;


L = lungimea corpului, n mm;
a i b = constante (cel mai frecvent b ~ 3).
Lungimea corpului se msoar cu exactitate cu ajutorul unui micrometru-ocular montat pe
un microscop. Organismele de ordinul ctorva milimetri pot fi msurai sub lupa binocular dup ce
au fost plasai pe o lam de sticl care prezint o rigl fin (de aproximativ 20 mm lungime).
Animalele cu corpul curbat trebuiesc ntinse. Dac organismul este deteriorat, astfel nct
msurarea lungimii totale a corpului este imposibil, estimarea lungimii corpului se poate face prin
msurarea lungimii anumitor pri ale corpului (de ex. a carapacei sau uropodelor, care sunt uor
de msurat i prezint o cretere proporional cu lungimea corpului) i prin folosirea unui factor de
conversie adecvat.
Pentru determinarea biomasei se pot folosi, de asemenea, tabele speciale care conin
greutile medii ale zooplancterilor din anumite regiuni geografice (vezi Surugiu V., 2007, 2008).
Conversia biomasei zooplanctonice n energie se poate face conform relaiei: 1 g substan uscat
= 5000 cal.
31

3.5.9. Observaii
Proba total se omogenizeaz prin scuturare viguroas i nu prin agitarea recipientului n
plan orizontal. nvrtirea flaconului ntr-un singur plan va produce un curent circular al lichidului
care va avea un efect de sortare a planctonului datorit forei centrifuge. Astfel, organismele mai
mici vor avea tendina de a fi antrenate de vrtej la periferia lichidului, n timp ce organismele mai
mari vor tinde s rmn n apropierea centrului.
Pentru numrarea organismelor zooplanctonice se consider ca satisfctoare subproba
care conine ntre 100 i 400 exemplare. n cazul numrrii a 100 de organisme ntr-o camer de
numrare limita de confiden (ncredere) de 95% este de aproximativ 20%. n cazul numrrii a
400 de organisme limita de confiden de 95% este de aproximativ 10%.
Dac numrul de organisme din camera de numrare este mai mare de 400 se recomand
diluarea subprobei de un numr corespunztor de ori pn ce numrul de indivizi din camera de
numrare va fi de aproximativ 100 sau 400. n acest caz rezultatul numrtorii se multiplic cu
numrul de cte ori a fost diluat subproba.
Determinarea greutii uscate sau a greutii calcinate trebuie s se fac pe organisme vii,
deoarece n cazul organismelor fixate cu formol volumul i greutatea probelor de zooplancton
scade odat cu timpul. n cazul n care exist numai organisme fixate, determinarea greutii
uscate sau a greutii calcinate se va face la aproximativ o lun dup fixare, atunci cnd greutatea
oarecum se stabilizeaz.

4. Analiza nectonului
4.1. Analiza calitativ a nectonului
4.1.1. Generaliti
Petii reprezint componenta cea mai important a nectonului, avnd n acelai timp i cea
mai mare importan economic. Studiul compoziiei i structurii ihtiocenozelor prezint anumite
dificulti n ceea ce privete eantionarea, att din cauza naturii mediului acvatic, ct i datorit
faptului c petii sunt organisme de dimensiuni extrem de variabile i sunt nzestrate cu o
mobilitate foarte mare.
4.1.2. Principiul metodei
Capturarea petilor prin diferite metode. Stabilirea compoziiei specifice, a abundenei i
structurii pe vrste a populaiilor de peti. Numrarea i msurarea parametrilor biologici
(dimensiuni, greutate).
4.1.3. Materiale necesare
1. Ustensile pentru colectarea petilor.
2. Containere pentru transportul petilor.
3. Chei de determinare pentru peti.
4. Rigl gradat n milimetri sau ubler.
5. Balan tehnic cu o sensibilitate de 0,01 g.
6. Lup binocular cu o putere de mrire de 50*.
7. Pensete.
8. Lame pentru microscopie.
9. Soluie de amoniac 3-5%.
10. Soluie de albastru de metil 5%.
4.1.4. Stabilirea numrului i mrimii staiilor de prelevare a probelor
Strategia de eantionare selectat trebuie s ofere o imagine adecvat asupra strii de
sntate a ihtiocenozelor pentru momentul i locul dat. Pentru asigurarea repetabilitii, efortul de
pescuit, tipul de echipament de colectare i procedeul de eantionare trebuie s fie acelai de
fiecare dat. n vederea obinerii unor date relevante asupra compoziiei i structurii ihtiofaunei
este necesar ca numrul de stailor eantionate s fie suficient. Numrul de staii eantionate ( n )
32

depinde de variaia spaial dintre diferitele staii. Aceasta din urm se exprim prin coeficientul de
variaie a abundenei petilor n fiecare staie:

CV = S D
X
unde: CV = coeficientul de variaie a abundenei;
SD = deviaia standard dintre staii;
X = abundena medie a populaiei de peti.
Staiile de eantionare alese trebuie s fie reprezentative pentru bazinul acvatic respectiv. n
cazul apelor stttoare staiile de colectare se fixeaz la coada lacului, n zona central i la baraj.
Mrimea staiilor de prelevare depinde de mrimea bazinului i de diversitatea habitatelor. n apele
curgtoare n cadrul fiecrei staii se va pescui pe un tronson al crui lungime este de cel puin 20
ori mai mare dect limea albiei minore. Pentru rurile mari, n care condiiile de mediu sunt relativ
uniforme, este suficient a se eantiona o lungime a cursului de ap de 10 ori mai mare dect
limea. n cazul rurilor care prezint gradieni ai vitezei curentului de ap este important ca
eantionarea s se fac pe ntreaga lime a staiei sau pe o lime ct mai mare cu putin. n
apele stttoare aria eantionat trebuie s fie de cel puin 100 m2, dar n general o captur de
200 de peti se consider ca fiind satisfctoare.
Stabilirea perioadei de colectare a petilor trebuie s in cont de ciclurile de biologice ale
speciilor-int. n majoritatea cazurilor eantionarea se face ctre sfritul perioadei de cretere,
atunci cnd juvenilii ating o talie suficient de mare pentru a putea fi capturai. Colectarea probelor
ealonate n timp din acelai loc se face la aceleai date calendaristice i n condiii hidrologice
asemntoare. Colectarea activ a petilor se face n general ziua.
4.1.5. Ustensile i procedee de eantionare a petilor
Metodele i uneltele de eantionare a petilor variaz n funcie de scopul tiinific urmrit,
de tipul de ecosistem cercetat i de dimensiunile i comportamentul speciilor care urmeaz a fi
capturate, n principiu, metodele de eantionare a petilor n scopuri tiinifice pot fi grupate n
dou mari categorii: metode bazate pe colectarea petilor i metode bazate pe observaii in situ. n
categoria metodelor bazate pe capturarea petilor se pot distinge metode active de capturare i
metode pasive de capturare a petilor.
Eficiena uneltelor active de colectare (pescuitul electric, nvodul, volocul) poate varia
considerabil n funcie de perioada zilei n care sunt utilizate.
Pescuitul electric (electronarcoza) (fig. 4.1) se folosete n special n apele curgtoare cu
adncime i lime redus. Principalul avantaj al acestei metode este acela c n cazul apelor
curgtoare mici colectarea este aproape integral (se captureaz ntreaga populaie). De
asemenea, aceast metode este non-letal, petii revenindu-i rapid la starea fiziologic normal,
fr efecte duntoare. n praie i rurile mici pescuitul electric se face de la mal sau n vad. n
apele a cror adncime este mai mare de 0,5-0,7 m pescuitul electric se face din barc.

33

Figura 4.1. Pescuit electric cu aparat fix

Sculele filtratoare (plasele) se folosesc n cazul lacurilor naturale i artificiale (de acumulare
sau de baraj) cu o suprafa i o adncime foarte mare. Dezavantajul sculelor filtratoare const n
costul lor ridicat i manipularea greoaie i uneori chiar dificil. Dimensiunile ochiurilor sculelor
filtratoare sunt variabile n funcie de specia-int, fiind reglementate prin legislaia n vigoare, dar
n general pentru pescuitul tiinific sunt permise plase cu ochiurile mai mici dect pentru pescuitul
industrial. Din categoria sculelor filtratoare pentru capturarea petilor se folosesc att unelte de
pescuit activ, ct i unelte de pescuit pasiv.
Colectarea activ se face cu ajutorul nvoadelor i volocului.
Nvoadele tractate utilizate n pescuirile experimentale (tiinifice) sunt de dimensiuni mici,
fiind formate dintr-o plas dreptunghiular de 2-2,5 m nlime i 50 m lungime, ale crei ochiuri au
dimensiunea de 9 mm. Nvoadele mai mari (100-200 m lungime) se utilizeaz n pescuitul
industrial. Din punct de vedere al modului de lucru, nvoadele pot fi pelagice sau de fund.
Nvoadele de fund pescuiesc speciile de peti care triesc n mod obinuit n apropierea fundului
(ca de ex. somnul, mihalul, mreana, porcuorul), iar nvoadele pelagice se folosesc pentru
capturarea petilor n apropierea suprafeei apei (ca de ex. obletele, sabia, fufa). Eficacitatea de
colectare a nvoadelor este dat de selectivitatea acestora.
Volocul este o unealt filtratoare activ asemntoare cu nvodul, dar de dimensiuni mai
mici. Se folosete n zona litoral, lipsit de vegetaie, a rurilor mari i lacurilor. Pentru colectarea
petilor volocul se trage de ctre dou persoane pe fundul apei ctre mal, unde cei doi pari se
aduc mpreun.
Din categoria uneltelor de pescuit pasiv fac parte setcile, avele, carmacele i capcanele.
Setcile se folosesc pentru prinderea petilor migratori n apele stagnante i lin curgtoare. Acestea
difer prin mrimea ochiurilor plasei, prin lungime, nlime, grosimea firelor i prin prezena unei
singure sau mai multor pnze. n principiu setcile constau dintr-un perete de plas cu ochiurile mai
mici dect circumferina speciilor de peti care urmeaz a fi capturate. Setcile sunt meninute n
poziie vertical cu ajutorul unor flotori de plut prini din loc n loc n partea superioar prin
intermediul unei frnghii (codul) i de greuti sub form de mrgele de plumb n partea
inferioar. Setcile se instaleaz pe pari sau se ancoreaz n locurile prin care se realizeaz
migraiile petilor.
Pentru capturarea scrumbiei de Dunre n timpul migraiilor sale pentru reproducere se
folosesc setcile in deriv. Acestea sunt formate, de obicei, din 60-100 plase, fiecare de 25-30 m
lungime i 6-10 m nlime, cu ochiurile de 25-32 mm. Aceste setei sunt prinse cap la cap, fixate cu
un capt de barc, iar cu cellalt capt de un flotor mare. Barca cu instalaia este purtat de
cureni mai multe ore n ir, iar petii care noat contra curentului se ncurc n plas.
Avele sunt unelte fixe asemntoare cu setcile, dar care, pentru a mri eficiena, prezint
de o parte i alta a plasei principale una sau dou plase adiionale (sirecuri) cu ochiurile mai mari
34

i firul mai gros. Avele se prind mai multe cap la cap, se fixeaz cu greuti de fund i se menin n
poziie vertical cu ajutorul unor plutitori. Avele se folosesc mai ales pentru prinderea sturionilor
mai mici. Vintirul este o unealt pasiv tip capcan, conceput n aa fel nct petele odat intrat
s nu mai poat iei. Pentru dirijarea petelui ctre intrarea n sacul vintirului, care poate avea mai
multe ncperi, aceasta prezint una pn la trei aripi (canaturi) sub forma unor plase
dreptunghiulare lungi. Gura sacului, care este meninut deschis de nite cercuri din lemn de
esen tare sau din srm groas de oel, are forma literei V, cu unghiul ndreptat spre interior.
Petele capturat este scos din sac prin dezlegarea unui nur din partea posterioare a acestuia.
Vintirul se fixeaz pe fundul bazinului prin intermediul unor rui de lemn ascuii la un capt.
Pentru prinderea sturionilor se folosesc instalaii fixe speciale denumite carmace. Acestea
sunt formate dintr-o frnghie lung, de 20-25 mm grosime, de care se prind la intervale de 25-30
cm corzi verticale mai subiri, la captul crora se afl cte un crlig de oel foarte ascuit de circa
10 cm lungime. ntreaga instalaie este susinut de flotori i ancorat de fund cu greuti.
Carmacele se instaleaz mai ales n faa gurilor Dunrii, n calea migraiilor sturionilor, fie n masa
apei, fie pe fund i se verific zilnic dac exist sturioni prini n crlige.
Din categoria metodelor de eantionare fr capturarea efectiv a petilor fac parte
tehnicile acustice (sonarul) i observaiile directe realizate prin scufundare n apnee (snorkeling)
sau cu scafandrul autonom (SCUBA).
Sondajul acustic se bazeaz pe estimarea indirect a abundenei populaiilor piscicole prin
emiterea unui impuls sonor care se propag n ap i nregistrarea i analiza undei reflectate de
petii din ap. Se folosete cu precdere n bazinele cu o ntindere i o adncime foarte mare.
Sonarul se monteaz pe o ambarcaiune n micare, iar pentru controlul i prelucrarea datelor este
nevoie de un computer. Aceast metod nu permite recunoate speciilor de peti prezente n
bazinul cercetat, de aceea ea este adesea combinat cu una dintre metodele bazate pe
capturarea petilor.
Metoda observaiilor vizuale directe prin scufundare n apnee sau cu scafandrul autonom
se practic pentru identificarea i numrarea petilor n apele care prezint o transparen ridicat
Colectarea integral a petilor din bazinele mici se poate face prin eliminarea total a apei
prin scurgere sau pompare.
4.1.6. Conservarea i pstrarea probelor
Petii se fixeaz pentru cel puin 24 ore n formol 10% neutru tamponat (100 ml
formaldehid 37% + 900 ml ap + 4g fosfat monobazic de sodiu NaH2P04H20 + 6,5 g fosfat dibazic
de sodiu Na2HP04). Volumul lichidului fixator trebuie s fie de aproximativ 10 ori mai mare dect
cel al petilor. Petii se conserv ntregi, dar pentru o ptrundere mai bun a fixativului n esuturi
cavitatea abdominal se deschide printr-o incizie ventral de la oficiul anal pn la arcurile
branhiale. Exemplarele mai mari se injecteaz cu formol n cavitatea visceral i n musculatura
dorsal. Dup cteva zile de la formolizare exemplarele se transfer n etanol 70-80%. Pentru
pstrarea petilor conservai este indicat a se folosi recipiente de sticl care se astupa etan cu un
capac.
Probele prelevate se eticheteaz, fiind consemnate numrul de identificare a probei, data,
ora i locul recoltrii, tipul de unealt cu care s-a fcut colectarea, numele celui care a efectuat
recoltarea, precum i alte date relevante.
4.1.7. Identificarea, msurarea i cntrirea petilor
Procedura de identificare a speciilor de peti const n observarea formei, dimensiunii i
culorii corpului, a numrului nottoarelor, vertebrelor i solzilor, a numrului i felului radiilor etc.
Pentru o determinare ct mai exact a petilor colectai acetia se vor compara cu desene i
fotografii sau cu exemplare din coleciile tiinifice determinate n prealabil de ctre specialiti.
Pentru biometria petilor cel mai des se utilizeaz urmtoarele msurtori (figura 4.2):

35

Figura 4.2. Diagrama msurtorilor la indivizii studiai n vederea stabilirii uniformitii loturilor
(dup Voican et. al., 1974, 1975) (Lt=lungime total; Ls=lungime standard; Lc=lungimea capului; Hd=nlimea la
nivelul nottoarei dorsale; Ha=nlimea la extremitatea posterioar a pedunculului caudal; C=circumferina)

Lungimea total a corpului (Lt) reprezint lungimea dintre vrful botului i extremitatea
lobilor nottoarei caudale (dac acetia sunt inegali se ia lobul cel mai lung); Lungimea standard
(Ls) reprezint lungimea dintre vrful botului i baza nottoarei caudale; nlimea maxim a
corpului (Hd) se msoar n partea cea mai nalt a corpului (de obicei, la nivelul primei radii a
nottoarei dorsale); nlimea minim a corpului (Ha) reprezint nlimea pedunculului caudal
puin nainte de baza caudalei; Grosimea corpului sau limea maxim (Gr) este distana maxim
dintre flancuri (n general, ntre punctele de inserie a nottoarelor pectorale); Lungimea capului
( L c ) se msoar de la vrful botului la marginea posterioar a operculului; Lungimea pedunculului
caudal ( p ) se msoar de la verticala marginii posterioare a bazei nottoarei anale pn la baza
nottoarei caudale.
Stabilirea greutii individuale a petilor se face prin cntrirea la balana analitic a
exemplarelor proaspete, congelate sau conservate n formol. n orice caz, trebuie inut cont de
faptul c greutatea petilor poate varia rapid n limite destul de largi (pn la 20-30% n decurs de
4 ore) din cauza pierderilor de ap din corp. De aceea, pentru a compara biomasele obinute pe
material proaspt sau conservat se impune utilizarea unor factori de conversie.
n cazul exemplarelor adulte se poate determina sexul i gradul de maturare a gonadelor. La unele
specii stabilirea sexului este nlesnit de prezena unui dimorfism sexual exprimat printr-o coloraie
deosebit, dimensiuni diferite sau prezena unor structuri morfologice speciale.
4.1.8. Marcarea petilor
Marcarea petilor se folosete n special pentru urmrirea migraiilor, dar poate fi utilizat i
pentru estimarea indirect a efectivelor unei populaii piscicole.
Marcarea se efectueaz cu mare atenie, tiut fiind faptul c marcajele intens colorate pot atrage
prdtorii, iar cele foarte mari ngreuneaz notul sau se pot aga de diferite obiecte submerse,
fiind posibil i infectarea zonelor de fixare. De asemenea, marcajele trebuie s persiste un timp
ct mai ndelungat.
n practica curent se folosesc numeroase tipuri de marcaje i modaliti de fixare a
acestora. Marcarea poate fi n grup, cnd aceasta se realizeaz numai prin folosirea unor regiuni
corporale sau organe ale indivizilor, sau individual, cnd de anumite pri ale corpului petilor se
ataeaz plci metalice sau din plastic gravate cu numere de identificare.
Marcarea n grup se face prin amputarea parial sau total a unor nottoare, prin
practicarea de orificii n opercule sau nottoare, prin cauterizarea sau tatuarea subepidermic a
unor semne distinctive, prin injectarea subcutanat a unor substane fluorescente colorate (sulfit
de mercur, albastru alean, compui ai tetraciclinei) sau prin tratarea cu un colorant vital (de
exemplu, cu o soluie de Rou Neutru 1:300.000 sau negru Sudan).
36

O generaie recent de marcaje individuale o constituie chip-urile magnetice de form


cilindric (10x2,1 mm), ncorporate n sticl i care se injecteaz n cavitatea abdominal. Ele se
citesc cu ajutorul unui dispozitiv portabil care identific codul inclus n chip, pe o perioad de timp
de ordinul anilor.
4.1.9. Determinarea vrstei i ratei de cretere
Stabilirea vrstei i ratei de cretere a petilor este util pentru evaluarea efectului calitii
mediului acvatic asupra populaiilor de peti. Metoda de stabilire a vrstei petilor const n
individualizarea i numrarea zonelor de cretere de pe solzi. Aceste zone se formeaz cte una
pe an i sunt numite inele anuale. Ele reprezint perioade alternative de cretere rapid sau lent
n funcie de anotimp.
Inelele anuale se formeaz pe partea extern a solzilor prin depunerea unor plci
calcaroase numite sclerite, al cror numr se mrete odat cu creterea, concomitent cu
reducerea dimensiunilor lor.
Pentru determinarea vrstei petilor se procedeaz n felul urmtor:
1. De la fiecare pete se recolteaz cel puin 20-30 de solzi deasupra i dedesubtul liniei laterale,
n dreptul primei nottori dorsale, unde acetia sunt mai mari i dispui simetric.
2. Solzii se spal cu ap distilat, se degreseaz prin introducere ntr-o soluie de amoniac 3-5%
timp de 2-3 minute, dup care mucusul se ndeprteaz cu o bucat de tifon.
3. Solzii se introduc apoi ntr-o soluie de albastru de metil 5% i se las pentru colorare 1-2
minute.
4. Solzii se spal cu ap distilat, se monteaz n glicerin-gelatin pe o lam de sticl i se
observ sub lupa binocular (citoplast) la o mrire de 8-25 x.
n funcie de vrst, petii sunt mprii n urmtoarele categorii: Clasa 0+ pentru petii cu o vrst
sub un an complet; Clasa 1+ pentru petii cu vrsta cuprins ntre 1 i 2 ani; Clasa 2+ pentru petii
cu vrsta cuprins ntre 2 i 3 ani; Clasa 3+ pentru petii cu vrsta cuprins ntre 3 i 4 ani .a.m.d.
4.1.10. Observaii
Pentru a evita tulburarea lichidului conservant, nainte de trecerea petilor formolizai n
alcool acetia se vor spla bine cu ap de robinet.
De la fiecare individ se vor recolta mai muli solzi din aceeai zon a corpului deoarece la
anumii solzi zonele de cretere sunt mai puin evidente, iar n cazul unor specii solzii crescui n
urma regenerrii nu prezint zone de cretere.
Pentru o mai bun vizualizare a inelelor de cretere solzii se vor aeza cu suprafaa
ornamentat ctre sursa de lumin i cu partea anterioar n sus.

4.2. Analiza coninutului gastrointestinal la peti


4.2.1. Generaliti
Prin investigarea calitativ i cantitativ a coninutului tubului digestiv se poate stabili nia
trofic a petilor. Unele date asupra modului de hrnire a petilor pot fi obinute prin observarea
acestora n acvarii. Aceast metod ns nu ofer o imagine veridic asupra preferinelor de
hrnire n condiii naturale. Rezultatele cele mai bune asupra niei trofice a unor specii de peti se
pot obine prin investigarea calitativ i cantitativ a coninutului tubului digestiv. Mai nou, metodele
observaiei directe cu ajutorul scafandrului autonom deschid noi posibiliti pentru studiul nutriiei i
comportamentului alimentar al petilor n mediul lor natural de via.
4.2.2. Principiul metodei
Sacrificarea petilor capturai, extragerea i conservarea tubului digestiv. Analiza
coninutului gastrointestinal sub lupa binocular prin disecia tubului digestiv, identificarea
componentelor ingerate i calcularea raporturilor cantitative dintre acestea.
4.2.3. Materiale necesare
1. Rigl sau rulet gradat milimetric.
2. Balan analitic cu o sensibilitate de 0,001 g.
37

3. Bisturiu.
4. Cutii Petri.
5. Pensete cu vrful fin.
6. Lup binocular (stereomicroscop) cu o putere de mrire de 100*.
4.2.4. Modul de lucru
1. Din captura de pete se ia un anumit numr de exemplare i se triaz pe specii.
2. Petii din fiecare specie se msoar i se cntresc individual, dup care fiecrui individ i se
aplic cte o incizie n tegumentul i musculatura liniei medio-ventrale de-a lungul ntregului corp,
se extrage tractusul digestiv i se conserv n formol 4%.
3. Fiecare stomac se disec la rndul lui i se spal cu ap ntr-o cutie Petri, iar bolul alimentar se
cntrete n ntregime la o balan analitic.
4. Coninutul gastrointestinal se analizeaz sub lupa binocular, iar organismele sau fragmentele
de organisme care pot fi identificate se separ i se conserv n alcool 70%.
5. Pentru fiecare stomac organismele consumate se numr i se cntresc separat pe specii. De
asemenea, se noteaz numrul stomacurilor goale i numrul stomacurilor care conin hran
neidentificabil
4.2.5. Calcul
Indicele de frecven (F) evideniaz n procente numrul de stomacuri n care s-a gsit o
specie dat i numrul total de stomacuri analizate conform relaiei:

unde: n, = numrul de stomacuri n care s-a gsit specia I;


N = numrul total de stomacuri analizate. Preferinele de hrnire se evideniaz prin
calculul proporiei ponderale (D) a fiecrui organism prdat (gi) fa de greutatea total a bolului
alimentar cu ajutorul formulei:
gi
D = .100
GS
unde: gi = greutatea total a indivizilor speciei / din coninutul gastrointestinal;
Gs = greutatea ntregului coninut gastrointestinal. Coeficientul de hrnire (CH) estimeaz
gradul de umplere a tubului digestiv i se calculeaz dup formula:
C= GS .10000
GP
unde: Gs = greutatea coninutului gastrointestinal;
GP= greutatea petelui.
4.2.6. Observaii
Pentru a reduce la minim aciunea enzimelor digestive asupra organismelor ingerate i
dup moartea petilor, eviscerarea i conservarea tractusurilor gastrointestinale trebuie efectuat
imediat dup capturare. n cazul n care aceast operaiune nu se poate realiza ct mai repede,
pentru a mpiedica procesele de digestie i fermentaie din tractusul gastrointestinal, imediat dup
capturare petii se vor injecta cu formol pe gur i anus.
Deoarece organismele ingerate sufer deja un nceput de digestie de ctre sucul gastric,
adeseori este foarte dificil a se determina apartenena specific sau chiar cea generic a acestora,
mai ales n cazul nevertebratelor cu corpul moale (n special oligochete).

38

5. Analiza bentosului
5.1. Analiza calitativ a macrofitobentosului
5.1.1. Generaliti
Macrofitobentosul este alctuit din totalitatea plantelor vasculare acvatice (cormofite), a
muchilor (briofite) i algelor macroscopice (talofite), care pot fi observate cu uurin cu ochiul
liber. Macrofitobentosul este rspndit numai n zona litoral a bazinelor acvatice, unde acesta
poate realiza procesul de fotosintez.
Analiza calitativ a macrofitelor acvatice const n elaborarea listelor floristice, precum i
compararea florei din diferite sectoare ale bazinului acvatic sau dintre diferite bazine.
5.1.2. Principiul metodei
Colectarea macroflorei acvatice prin diverse mijloace (manual sau cu ajutorul greblelor i
drgilor trtoare); sortarea plantelor pe grupe sistematice i identificarea lor pn la nivel de
specie.
5.1.3. Materiale i echipamente necesare
1. Deplantator sau cuit.
2. Glei de plastic sau cristalizoare de 5-10 litri.
3. Pungi rezistente de polietilen de diferite dimensiuni.
4. Tvie albe de plastic cu dimensiunile de 40x30 cm.
5. Chei dihotomice pentru determinarea plantelor acvatice.
6. Pensete cu vrful fin.
7. Ace simple sau spatulate.
8. Plci de sticl lefuit sau din material plastic cu dimensiunile de 30x20 cm.
9. Hrtie cretat sau velin cu dimensiunile de 30x20 cm.
10. Coli de ziar sau sugativ.
11. Tifon.
12. Pres.
13. Coli de ierbar speciale cu dimensiunile de 42x29 cm.
14. Lup de mn cu o putere de mrire de 10x sau 20x.
15. Lup binocular cu o putere de mrire de 100x.
5.1.4. Procedee de colectare calitativ
Recoltarea calitativ a macroflorei bentonice n apele puin adnci se poate face cu ajutorul
unei greble. Mult mai indicat, ns, este colectarea manual, deoarece aceasta permite
desprinderea plantelor mpreun cu partea lor bazal de fixare. n cazul plantelor acvatice
vasculare colectarea manual se realizeaz prin scoaterea din sediment a rizomilor i rdcinilor
cu ajutorul unui deplantator sau cuit. Recoltarea algelor macroscopice de la adncimi mici se face
prin desprinderea talului de pe substrat cu ajutorul unui cuit. n apele adnci se poate utiliza o
drag trtoare, care smulge de pe substrat unele plante n timp ce acesta este trt n urma
ambarcaiunii. Pentru colectarea manual a macrofitelor acvatice de la adncimi mai mari este
nevoie de utilizarea scafandrului autonom.
Cormofitele acvatice sau algele macroscopice colectate se introduc n pungi de plastic cu
puin ap. n interior se introduce i o etichet din hrtie de calc pe care se noteaz cu un creion
negru sau cu un pix cu cerneal rezistent la ap codul probei, precum i data, locul, adncimea
colectrii i tipul de substrat.
5.1.5. Conservarea i pstrarea probelor
Conservarea macrofitelor acvatice se face cu o soluie de formaldehid 5% sau cu alcool
etilic. Plantele se pot pstra n lichidul conservant n recipiente de plastic sau de sticl nchise cu
un capac etan. Pstrarea macrofitelor n alcool etilic este indicat pentru plantele mici, cu frunze
fin divizate, deoarece la uscare acestea devin fragile. Lichidele conservante prezint ns
dezavantajul c n timp acestea produc decolorarea plantelor. Mult mai indicat este erborizarea
macrofitelor, deoarece exemplarele pstreaz culoarea i aspectul lor natural un timp mult mai
39

ndelungat. Dac este necesar pstrarea plantelor n stare vie, iar temperatura ambiental este
ridicat, acestea pot fi transportate i pstrate un timp oarecare n lzi frigorifice la o temperatur
de1-5C.
5.1.6. Prelucrarea probelor
n laborator macrofitele se spal foarte bine de impuriti n glei de plastic sau n
cristalizoare de sticl. Materialul splat se introduce n tvi de plastic cu ap curat, se sorteaz pe
grupe sistematice i se determin pn la nivel de specie. Este recomandat a se alctui o colecie
de referin din plante presate sau conservate n alcool pentru identificrile ulterioare sau pentru
compararea datelor.
5.1.7. Etalarea, uscarea i presarea plantelor
Pentru erborizarea algelor macroscopice i a cormofitelor acvatice suculente se ia cte un
exemplar dintr-o specie determinat i se aeaz ntr-o tav care conine un strat de ap care s
ocupe cam trei sferturi din nlimea tvii. Sub planta din tav se introduce uor o plac rigid de
sticl lefuit sau din material plastic i pe care s-a aezat n prealabil o bucat de hrtie cretat
sau velin de aceleai dimensiuni. Cu ajutorul unei pensete sau a acelor spatulate se rsfir
ramificaiile i se potrivesc toate prile componente ale plantei, astfel nct aceasta s ia o form
cat mai apropiat de cea din mediul su natural de via. Placa, meninut n poziie orizontal, se
ridic ncet din ap astfel nct planta s se fixeze de hrtie n poziia pe care a avut-o n ap.
Placa scoas din ap se aeaz pentru cteva momente pe un plan nclinat pentru ca excesul de
ap s se scurg. Pentru scurgerea complet a apei, foaia de hrtie pe care se afl prins planta
se desprinde cu grij de pe plac i se lipete pe un suport vertical (perete de faian sau geam)
unde se las timp de 10-15 minute.
Dup ce apa s-a scurs n totalitate, hrtia cu planta fixat de ea se aeaz ntre coli de ziar
sau sugativ. Pentru a mpiedica lipirea plantelor de foliile de ziar sau sugativ n timpul presrii
acestea se vor proteja cu bucele de tifon. Teancurile de coli ntre care se afl hrtiile cu plantele
acvatice se introduc apoi n pres, care se strnge cu ajutorul uruburilor sau peste acestea se
aeaz greuti de cteva kilograme, avnd grij ca greutatea s fie uniform distribuit pe ntreaga
suprafa. Dup aproximativ 30-40 minute colile de ziar i bucile de sugativa se nlocuiesc cu
altele uscate. Peste 2-3 ore colile de ziar i bucile de sugativa se vor nlocui din nou, dup care
aceast operaiune se repet la fiecare 24 de ore, pn la uscarea complet a plantelor. Plantele
astfel uscate, n special algele, vor rmne lipite de hrtia pe care au fost etalate. Plantele mai
suculente i mai groase, care nu se lipesc de hrtie, se fixeaz prin benzi subiri de hrtie lipite la
capete cu clei transparent sau cu o band de scotch transparent.
Hrtia cu planta presat i uscat se lipete apoi pe o coal de ierbar. n colul din dreapta
jos al colii de ierbar se lipete o etichet pe care se va nota denumirea tiinific complet a
plantei, denumirea popular, data i locul recoltrii, tipul de substrat, adncimea de la care a fost
colectat i numele celui care a efectuat recoltarea.
5.1.8. Observaii
Ridicarea plcii se face cu mult grij, deoarece, dac placa se nclin prea mult sau se
scoate din ap prea repede, plantele pot aluneca de pe hrtie sau ramificaiile se pot suprapune.

5.2. Analiza cantitativ macrofitobentosului


5.2.1. Generaliti
Analiza cantitativ a macrofitobentosului const n aprecierea numrului de plante i a
biomasei acestora pe o unitate de suprafa cunoscut. Densitatea macrofitobentosului se exprim
ca numr de plante la metru ptrat de suprafa bental. n ceea ce privete biomasa macrofitelor
bentonice, aceasta se poate exprima sub form de greutate umed (greutatea masei verzi),
greutate uscat sau greutate calcinat (greutatea cenuii). n toate cazurile, rezultatele se exprim
n g/m2 sau n kg/m2.
5.2.2. Principiul metodei
40

Eantionarea unei suprafee de fund cunoscute, fie prin metoda ptratelor, fie prin metoda
transectelor; numrarea i cntrirea macrofitelor acvatice identificate; determinarea densitii i
biomasei realizate de ctre plante prin extrapolarea rezultatelor obinute la metru ptrat.
5.2.3. Materiale i echipamente necesare
1. Carotier din clorur de polivinil (PVC) de 16 cm diametru i 80 cm lungime, cu muchia de jos
oblic i ascuit sau zimat, prevzut n partea de sus cu un dop etan i cu un mner de 45 cm
lungime (figura 5.1).

Figura 5.1. Carotier O'Connor: 1 - tij metalic; 2 - inel de prindere; 3 - cmaa metalic a tubului de plastic; 4 inel de oel ascuit (dup Southwood, 1966, din Gomoiu & Skolka, 2001).

2. Glei de plastic sau cristalizoare cu o capacitate de 5-10 litri.


3. Pungi rezistente de polietilen de diferite dimensiuni.
4. Tvi de plastic adnci.
5. Chei dihotomice pentru determinarea plantelor acvatice.
6. Site dreptunghiulare cu ochiurile de 2 mm i cu dimensiunile de 60x40x10 cm sau saci din plas
cu ochiurile de 2-4 mm.
7. Balan analitic cu o sensibilitate de 0,001 g.
8. Etuv termostatat, care permite uscarea la o temperatur de 45, 60 sau 90C.
9. Exicator.
10. Cuptor de calcinare, care permite incinerarea la o temperatur de 500-600C.
5.2.4. Utilaje i procedee de colectare cantitativ
Pentru analiza cantitativ a macrofitelor se va stabili o locaie care este cea mai
reprezentativ pentru bazinul acvatic luat n studiu. n cazul ideal, n fiecare locaie se vor fixa cel
puin dou staii. Una dintre staii se va alege acolo unde macrofitele prezint dezvoltarea cea mai
luxuriant, n timp ce cealalt staie va fi selectat acolo unde dezvoltarea plantelor poate fi
considerat ca fiind medie pentru zona cercetat. n fiecare din cele dou staii se vor alege dou
sub-staii care trebuie s fie situate la o distan de cel puin 10 m una fa de cealalt i care
trebuie s fie echivalente n ceea ce privete dezvoltarea plantelor.
Metoda ptratelor. Pentru prelevarea cantitativ a macrofitobentosului se va folosi o ram
metalic sau de lemn de form ptrat cu latura de 0,5 sau 1 m i prevzut n cele 4 coluri ale
ptratului cu dini ascuii ce se nfig n substrat. Aceasta se aeaz pe substrat, iar toate plantele
care se gsesc n interiorul suprafeei delimitate de ptrat (0,25 m2 sau, respectiv, 1 m2) se extrag
i se introduc n pungi de polietilen.
Eantionarea cantitativ a macrofitelor acvatice care prezint densiti mari se face cu
ajutorul carotierelor (figura 5.1). Pentru aceasta carotier se introduce forat n sediment pn la o
adncime de cel puin 40-50 cm pentru a obine peste 90% din rizomii i rdcinile plantelor.
Pentru o mai bun penetrare a carotierei printre rdcinile i rizomii plantelor, micarea de
mpingere va fi completat de una de rsucire brusc n dreapta i n stnga n jurul axului su. n
cazul sedimentelor foarte tasate introducerea carotierei n sediment se poate face cu ajutorul unui
ciocan. Pentru o mai bun extracie a carotei partea de sus se va astupa cu un dop etan. Fiecare
41

carot este transferat apoi n cte o gleat. Dac prelevarea cantitativ se face sub ap,
caratele pot fi introduse n saci din plas, dup care se scot la suprafa.
Evaluarea cantitativ a macrofitobentosului se poate efectua i prin observaii directe
asupra macrofitelor cu ajutorul echipamentului de scufundare. Astfel, se pot numra in situ toate
plantele macrofite de pe o anumit suprafa, delimitarea fcndu-se, de asemenea, cu ajutorul
unei rame ptrate cu latura de 0,5 m. Pentru uurarea numrrii se poate folosi o ram care
prezint sfori la intervale de 10 cm. Acest lucru permite examinarea unor suprafee mai mici (de
0,01 m2) i reducerea erorii cauzate de omiterea sau, din contra, numrarea de mai multe ori a
unuia i acelai exemplar. Utilizarea metodei ptratelor permite calculul gradului de acoperire, a
densitii i frecvenei plantelor.
Procentul de acoperire a substratului se estimeaz prin numrarea ptratelor (sau a
fraciunilor acestora) acoperite de fiecare specie n parte.
Pentru calcularea frecvenei unei specii numrul de ptrate n care specia dat este prezent se
mparte la numrul total de ptrate cercetate.
Metoda transectelor lineare. O alt metod const n numrarea tuturor plantelor ntlnite
de-a lungul unei sfori de 10 m lungime. Pentru aceasta n fiecare staie se vor realiza transecte a
cte 10 m lungime fiecare. Transectele se stabilesc n mod aleatoriu, evitndu-se pe ct posibil
alegerea sau omiterea intenionat a anumitor locuri. Pentru realizarea transectului sfoar de 10 m
lungime se ntinde imediat deasupra suprafeei fundului ntr-o direcie perpendicular pe linia de
rm. Trebuie avut grij ca sfoara s fie tot timpul bine ntins. Aproximarea procentului de
acoperire a substratului de ctre plantele acvatice se face prin parcurgerea transectului i
nregistrarea prezenei speciilor care se gsesc sub fiecare diviziune de 10 cm. Dac n dreptul
unei diviziuni de 10 cm plantele lipsesc, se va consemna acest fapt. Calculul gradului de acoperire
n procente de ctre macrofite a suprafeei investigate se face conform urmtoarei formule:
% acoperire = N 100
100
unde: N = numrul nregistrrilor unei plante date;
100 = numrul total de nregistrri (=1000 cm/10 cm);
100 = factor pentru raportarea procentual. Gradul de acoperire se stabilete pentru
totalitatea plantelor sau separat pe specii.
5.2.5. Prelucrarea probelor i numrarea plantelor
Probele aduse n laborator se spal de sediment i alte impuriti n glei de plastic sau n
cristalizoare. Probele colectate n saci din plas se vor scutura nc atunci cnd sunt sub ap
pentru a ndeprta cea mai mare parte a sedimentului. n lipsa acestora splarea probelor se va
face pe o sit dreptunghiular. Particulele mai grosiere reinute (fragmente de cochilii, detritus) se
vor nltura cu mna una cte una.
Sortarea pe specii i nlturarea fragmentelor fine se face cel mai bine ntr-o tav adnc
de plastic. Plantele din fiecare specie se numr separat, iar numrul lor se raporteaz la metru
ptrat.
5.2.6. Determinarea biomasei
Pentru stabilirea greutii umede plantele colectate de pe o suprafa cunoscut se spal
cu ap de robinet pentru a ndeprta toate corpurile strine i se tamponeaz cu hrtie de filtru
pentru a ndeprta excesul de ap. Acestea se cntresc separat pe specii la o balan analitic.
Pentru o estimare adecvat a biomasei se vor cntri macrofitele din cel puin 15 ptrate cu o
suprafa de 0,25 m2.
Pentru determinarea biomasei uscate plantele colectate de pe o anumit suprafa se
aeaz pe o hrtie de filtru cntrit n prealabil i se usuc n etuv la 60C pn la o greutate
constant. Dup uscare plantele se cntresc, mpreun cu hrtia de filtru, la balana analitic. Se
face diferena prin scdere dintre greutatea obinut i greutatea hrtiei de filtru.
Pentru determinarea greutii calcinate a plantelor mai nti se determin greutatea uscat
a acestora, dup care plantele se introduc ntr-un cuptor de calcinare i se incinereaz la o
42

exicator i se cntrete la balana analitic. Greutatea calcinat se calculeaz prin scderea


greutii cenuii rezultate din greutatea uscat a plantelor.
5.2.7. Observaii
Se vor evita transectele stabilite deja de coechiperi, precum i zonele cu schimbri brute
ale pantei sau tipului de sediment.
Determinarea exact a speciilor aparinnd unor taxoni dificili, n special alge sau hibrizi de
Potamogeton sp., presupune un grad oarecare de experien. De cele mai multe ori determinarea
algelor prin metoda transectului se va face pn la nivel de gen.

5.3. Analiza calitativ a zoobentosului


5.3.1. Generaliti
Zoobentosul reprezint gruparea ecologic alctuit din totalitatea organismelor animale
care i duc viaa, n totalitate sau parial, n strns legtur cu substratul bazinelor acvatice.
Studiul biocenozelor bentonice se poate realiza att prin metode de analiz calitativ (bazate pe
simple liste de prezen/absen a speciilor), ct i prin metode de analiz cantitativ (bazate pe
date numerice ale abundenei i biomasei speciilor). La rndul ei, analiza cantitativ poate fi de
dou tipuri: cantitativ de proporie, cnd nu se face referire la o anumit suprafa de substrat
(dominan sau abunden relativ i biomas relativ) i cantitativ de densitate, care implic n
mod obligatoriu raportarea la o anumit suprafa de fund (densitate i biomas).
Analiza calitativ const n identificarea speciilor dintr-un anumit ecosistem acvatic i ntocmirea
conspectului faunistic, precum i compararea listelor de specii ntre diferite ecosisteme acvatice
(date de prezen/abunden).
5.3.2. Principiul metodei
Prelevarea probelor de zoobentos cu ajutorul ciorpacului limnologic sau al dragilor
trtoare; sortarea nevertebratelor sub aparatura optic pe grupe sistematice i identificarea
organismelor animale din fiecare grup sistematic pn la nivel de specie.
5.3.3. Materiale i echipamente necesare
1. Ciorpac limnologic sau drag trtoare.
2. Borcane cu dop rodat sau recipiente de plastic cu dop nurubat, cu gtul larg, cu un volum de
250-500 ml i avnd diametrul egal cu cel al recipientului.
3. Tvi dreptunghiulare albe emailate sau din plastic, cu dimensiunile de 30x15 cm.
4. Cutii Petri.
5. Pensete cu vrful fin.
6. Lame i lamele pentru microscopie.
7. Lup binocular cu o putere de mrire de 100x.
8. Microscop cu o putere de mrire de 1000x.
9. Chei dihotomice pentru identificarea speciilor de nevertebrate bentonice.
5.3.4. Stabilirea staiilor de prelevare a probelor
Strategia de eantionare aleas trebuie s furnizeze informaii corecte i complete asupra
strii macrozoobentosului pentru locul i momentul dat. n ceea ce privete numrul i localizarea
staiilor de prelevare a probelor se va ine cont de scopul urmrit, de eterogenitatea habitatelor, de
viteza de curgere a apei i de precizia cerut analizei.
Pentru stabilirea corespunztoare a punctelor de colectare a zoobentosului adeseori este
util efectuarea unor prelevri prealabile de probe orientative. n cazul analizei calitative probele se
vor colecta din habitate ct mai variate. La stabilirea periodicitii de prelevare a probelor se va ine
cont de ciclurile de via ale diferitor specii de organisme bentonice.
n cazul ecosistemelor lotice, n general, probele se colecteaz din aval spre amonte, pentru a nu
perturba habitatele cercetate.

43

5.3.5. Echipamente i procedee de colectare calitativ a probelor


Pentru prelevarea calitativ a probelor de zoobentos se folosesc diferite metode i
echipamente n funcie de scopul cercetrii, de tipul ecosistemului acvatic (stagnant sau curgtor),
de natura fundului (substrat dur sau sedimente mobile), de adncimea apei, de viteza curentului de
ap, de felul i dimensiunea organismelor colectate i de tipul probei (calitativ sau cantitativ).
Cel mai simplu i cel mai uzual instrument pentru colectarea calitativ i semi-cantitativ a
organismelor acvatice este ciorpacul limnologic (figura 5.2). Acesta se folosete pentru prelevarea
macronevertebratelor de pe substrat mlos, nisipos sau printre plantele acvatice n cazul apelor
puin adnci (de pn la. 1,5 m), curgtoare sau stttoare (praie, ruri, bli, heleteie, zona
litoral a lacurilor i mrilor). Acesta se compune dintr-un sac de pnz, un cadru metalic i un
mner. Sacul are o form conic cu vrful rotunjit i este confecionat dintr-o pnz de sit de
moar, cu ochiurile de 0,5 sau 1 mm. De regul, adncimea sacului este de 40-50 cm. Sacul nu se
fixeaz direct pe cadrul metalic, ci prin intermediul unei benzi de pnz mai deas i mai
rezistent, lat de 10-12 cm. Cadrul metalic care susine sacul are o grosime de 5-6 mm i poate
avea diferite forme: semicircular, triunghiular sau dreptunghiular. Dintre aceste variante este
preferat forma dreptunghiular (n mod obinuit, de 20-40 cm lime i 20-30 cm nlime).
Mnerul poate fi confecionat din metal, din lemn sau din plastic tare i flexibil, de 2-3 cm diametru
i de aproximativ 1,5 m lungime. Acesta poate fi eventual detaabil.

Figura 5.2. Ciorpac limnologic

Pentru prelevarea de probe ciorpacul limnologic se trage prin intermediul mnerului pe


fundul apei sau printre plantele acvatice. n apele curgtoare micarea ciorpacului se face contra
curentului de ap pentru a evita tulburarea zonei unde nu s-a fcut prelevarea i pentru ca
organismele dislocate s poat fi antrenate de curent n sac. Organismele ntlnite sunt duse de
curentul de ap ctre fundul sacului. Dup ce n sac s-a adunat o cantitate suficient de material
ciorpacul se scoate din ap cu gura n sus, se scutur uor innd sacul n ap pentru a ndeprta
particulele de ml sau nisip i se golete ntr-o tvi de plastic sau ntr-un borcan cu gtul larg.
Pentru colectarea calitativ i semi-cantitativ a epifaunei de pe substrat mobil de la
adncimi mai mari se folosesc diferite tipuri de dragi trtoare (figura 5.3). Acestea se folosesc
pentru colectarea calitativ a endofaunei i epifaunei sesile din apele stttoare i lent curgtoare.
Draga trtoare este format dintr-un cadru metalic dreptunghiular, de 50-60 cm lime i 20-25
cm nlime, de care se ataeaz, prin intermediul unei fii de pnz rezistent, un sac din pnz
de fileu cu ochiurile de 1 mm, avnd adncimea de 50-60 cm. n fiecare col al cadrului exist un
inel metalic, de care se prinde o vergea metalic, printr-un crlig nchis cu arc (carabin); capetele
opuse ale verigilor sunt strnse ntr-un inel de care se prinde un cablu metalic sau o parm
rezistent.
Pentru colectarea unei probe draga se lanseaz ncet dintr-o barc n micare i se trte
pe fundul bazinului prin intermediul cablului n urma ambarcaiunii pe o distan oarecare (10-15 m
sau chiar 50 m n cazul substratului nisipos). Organismele din substrat sunt rscolite de ctre
latura de jos a dragii i antrenate n sac.

44

Figura 5.3. Drag trtoare

n cazul apelor curgtoare de munte puin adnci organismele pot fi colectate manual prin
rsturnarea pietrelor i inspectarea atent a acestora. Nevertebratele acvatice fixate de pietre se
culeg cu o penset.
Pentru eantionarea calitativ a substratului dur de la adncimi mai mari, se preleveaz,
prin scufundri n apnee sau folosind scafandrul autonom, pietre izolate. Pentru a diminua
pierderile din timpul aducerii probelor la suprafa, acestea se vor ambala in situ n pungi de
polietilen. Substratul pietros poate fi studiat, de asemenea, prin observaii directe cu scafandrul
autonom sau din submersibile. Un rol nsemnat n cazul acestui substrat l au fotografierea i
filmarea subacvatic.
n apele lent curgtoare i stttoare adnci (>1 m) prelevarea calitativ a nevertebratelor
bentonice se poate realiza cu ajutorul substraturilor artificiale standardizate. Acestea se introduc n
ap i se las pentru o perioad de cteva sptmni pentru colonizare.
Probele colectate se introduc n recipiente cu gtul larg ce conin ap, iar codul de
identificare a probei se inscripioneaz cu un marker rezistent la ap. Ca o msur de precauie se
recomand introducerea n recipientul cu prob i a unei etichete din hrtie de calc pe care se
noteaz cu un creion sau cu un pix cu cerneal rezistent la ap datele de identificare a probei.
Pentru fiecare prob se completeaz o fi de teren n care se noteaz denumirea bazinul
hidrografic, numrul staiei i codul probei, localizarea staiei de prelevare (poziia geografic), data
i ora prelevrii, tipul probei (calitativ sau cantitativ), modul de colectare a probelor i tipul
echipamentului cu care sa fcut prelevarea, natura sedimentelor (granulometria i cantitatea de
carbon organic), adncimea de la care s-a fcut prelevarea, viteza de curgere a apei, principalele
caracteristici fizico-chimice ale apei din momentul prelevrii (temperatura apei, pH-ul,
conductivitatea, concentraia oxigenului dizolvat, duritatea apei, regimul nutrienilor etc), precum i
observaii speciale (viituri, poluri accidentale, ruperi de mal, exploatri la malul bazinului etc).
5.3.6. Conservarea i pstrarea probelor
Analiza calitativ a organismelor zoobentice este de preferat a se efectua pe organisme vii.
Pentru aceasta organismele colectate se introduc n borcane cu dop rodat sau recipiente de plastic
cu dop nurubat care se umplu cu apa din bazinul respectiv numai pe jumtate. Pan la
efectuarea analizei n laborator probele se vor menine la o temperatur sczut (de cteva grade
Celsius). Adeseori ns nu exist posibilitatea sortrii i analizei pe viu a organismelor. n plus,
animalele prdtoare prezente n prob pot ataca i consuma alte organisme sau ntre timp poate
avea loc fenomenul de emergen. De aceea, atunci cnd intervalul de timp din momentul
prelevrii probelor pn la prelucrarea lor n laborator depete 3-4 ore, se impune conservarea
organismelor n teren.
45

Cel mai obinuit conservarea probelor de zoobentos se face cu formol concentrat (aldehid
formic 37%), care se adaug n prob pn la realizarea unei concentraii finale de 10%
(formaldehid 3-4%). Deoarece formolul dizolv formaiunile calcaroase i ptrunde greu n chitin,
conservarea molutelor i artropodelor este recomandat a se face n alcool etilic 70-80%. n mod
alternativ, formolul poate fi neutralizat n prealabil cu borax (100 g Na2B4O7-10H2O la 1 litru
formaldehid 37-40%).
Pstrarea probelor se face n tuburi mici de sticl n alcool 70-80% n care se introduc i
etichete din calc scrise cu creionul sau cu tu de China.
5.3.7. Prelucrarea probelor
Cu excepia colectrii directe a nevertebratelor acvatice, probele prelevare pe lng
organisme conin mari cantiti de sediment i detritus. De aceea este necesar o extracie a
organismelor din masa de sediment. Cel mai adesea aceast separare a organismelor de
particulele de sediment se face la locul de prelevare, prin splarea probelor n sacul clorpacului
sau al dragii trtoare. O alt metod de extracie calitativ a nevertebratelor bentonice n stare
vie, att din sedimentele grosiere, ct i cele fine, este metoda deteriorrii. Aceast metod const
n lsarea sedimentului s stagneze un timp oarecare n glei sau n cristalizoare de 5-10 litri cu
ap ntr-un loc rcoros i ferit de lumin. Din cauza reducerii cantitii de oxigen din ap, mai ales
n cazul substratului vegetal, organismele vagile vor prsi adposturile i se vor ridica pe pereii
vasului la suprafaa apei, de unde pot fi colectate cu o pensul sau o penset fin. Uneori, pentru
grbirea procesului, se poate recurge la stropirea probelor prelevate cu formol diluat (de cel mult
1%). n laborator materialul concentrat se sorteaz manual n tvie din plastic cu ajutorul
pensetelor sub aparatura optic pe grupe taxonomice majore (ncrengturi, clase, ordine etc),
dup care se trece la Identificarea organismelor din fiecare taxon pn la nivel de specie. Sortarea
pe viu a organismelor prezint avantajul c micrile acestora uureaz cu mult detectarea lor, n
special cnd acestea sunt foarte mici.
5.3.8. Modul de lucru
1. Proba de zoobentos se trece ntr-o tvi alb de plastic i se separ organismele de particulele
de sediment cu ajutorul pensetelor.
2. Materialul se triaz cu ochiul liber sau, dup caz, sub lupa binocular i se separ pe grupe
sistematice (de exemplu, amfipode, hidracarieni, efemeroptere, plecoptere, trihoptere etc).
3. Organismele triate se identific sub aparatura optic (lupa binocular i microscop), pe ct
posibil, pn la nivel de specie cu ajutorul determinatoarelor.

5.4. Analiza cantitativ a zoobentosului


5.4.1. Generaliti
Analiza cantitativ a zoobentosului const n aprecierea numrului de organisme i a
blomasei lor pe o unitate de suprafa cunoscut. n general, densitatea zoobentosului se
raporteaz la metru ptrat de suprafa bental.
n ceea ce privete biomasa, exist mai multe posibiliti de exprimare a acesteia: ca
greutate umed, greutate uscat sau greutate calcinat.
Greutatea umed reprezint greutatea indivizilor vii sau fixai n formol, nesupui n
prealabil unor procedee de deshidratare.
Greutatea uscat reprezint greutatea indivizilor deshidratai n etuv la 60-80C timp de
24-48 ore pn la o greutate constant.
Greutatea calcinat reprezint diferena dintre greutatea uscat a indivizilor i cea a cenuii
rezultate n urma incinerrii lor n etuv la 550-580C timp de 2-4 ore.
5.4.2. Principiul metodei
Eantionarea unei anumite suprafee de fund cu ajutorul utilajelor de prelevare cantitativ;
separarea organismelor de particulele de sediment; numrarea i cntrirea organismelor
zoobentonice identificate; determinarea densitii i biomasei zoobentosului prin extrapolarea
datelor la metru ptrat.
46

5.4.3. Materiale i echipamente necesare


1. Utilaj de prelevare cantitativ a probelor.
2. Set de site cu plasa din inox, alam sau bronz cu ochiurile de 2,0 mm, 1,0 mm, 0,5 mm, 0,25
mm, 0,125 mm i 0,062 mm.
3. Borcane cu dop rodat sau flacoane de plastic cu dop nurubat de 250-500 ml capacitate.
4. Tvie albe de plastic cu dimensiunile de 30x15 cm.
5. Cutii Petri.
6. Pensete cu vrful fin.
7. Lame i lamele pentru microscopie.
8. Lup binocular cu o putere de mrire de 100x.
9. Microscop cu o putere de mrire de 1000x.
10. Chei de determinare a speciilor de nevertebrate bentonice.
11. Balan analitic cu o sensibilitate de 0,001 g.
12. Coulee din staniol, fiole sau creuzete tarate pentru cntrire.
5.4.4. Stabilirea staiilor de prelevare a probelor
Punctele de colectare a probelor se aleg n aa fel nct acestea s fie ct mai
reprezentative pentru ecosistemul acvatic studiat. n cazul unui program de monitorizare biologic
pe termen lung probele se vor recolta ntotdeauna din aceleai puncte, folosind aceleai procedee
lucru i acelai tip de echipament. Pentru a putea urmri dinamica n timp a nevertebratelor
acvatice se recomand ca periodicitatea de recoltare a probelor s fie lunar sau cel puin
sezonier. n cazul n care apar modificri semnificative ale factorilor de mediu (de ex. variaii
brute ale concentraiei oxigenului dizolvat, poluri accidentale, nfloriri" algale etc.) frecvena
prelevrilor trebuie s fie mai mare. Pentru o estimare ct mai precis a variabilitii populaiilor n
fiecare staie se vor preleva n mod aleatoriu (randomizat) cel puin trei probe.
Ecosistemele lotice. n cazul apelor curgtoare se vor stabili cel puin trei staii de prelevare
a probelor: una pentru cursul superior, una pentru cursul mijlociu i una pentru cursul inferior. Dac
de-a lungul cursului de ap exist surse de deversare a apelor poluate, n plus, se recomand
fixarea cte unei staii de colectare n amonte i n aval fa de efluent. n mod asemntor, dac
exist aflueni care provin din zone poluate sau a cror ap prezint proprieti fizico-chimice
diferite fa de cele ale cursului principal (ca de ex. apele care provin din turbrii, din zonele
calcaroase sau cele srturate) se va stabili cte o staie n amonte i una n aval fa de punctul
de confluen. n cadrul fiecrui tronson, de circa 80-100 m lungime, se va alege o zon
reprezentativ de prelevare i se vor cerceta habitatele predominante ca procent de acoperire.
Deoarece n cadrul unui curs de ap cu anumite particulariti se pot diferenia arii restrnse ce
prezint condiii de via deosebite fa de cele generale, acestea vor fi evitate pentru colectarea
probelor bentonice cantitative, nefiind reprezentative pentru biotopul dat. Din aceleai
considerente, se va evita amplasarea staiilor n apropierea barajelor, podurilor, pragurilor sau a
malurilor taluzate, deoarece prezena acestora poate Influena anumii parametri de biotop.
Ecosistemele lentice. n cazul apelor stttoare se vor fixa cel puin trei staii de prelevare a
probelor: una la coada lacului, una n zona de mijloc i una la baraj. n cazul bazinelor mari se pot
fixa anumite staii n golfuri mai mari. Prelevarea probelor se face de-a lungul unor profile
perpendiculare pe mal, din staii situate la intervale regulate. Pentru studii intensive i repetitive se
vor stabili mai multe profile dispuse la intervale regulate de-a lungul malului. n anumite situaii se
impune compararea structurii comunitilor de nevertebrate bentonice din zonele supuse polurii
cu structura comunitilor din zone neafectate de poluare. Atunci cnd recoltarea sezonier a
probelor nu este posibil din cauza unor limitri de ordin financiar sau personal probele se vor
preleva n perioada de maxim stabilitate a stratificrii termice a maselor de ap.
5.4.5. Echipamente i procedee de colectare cantitativ a probelor
Eantionarea cantitativ a substratului dur este deosebit de dificil. n cazul lespezilor sau a
bolovanilor mari pentru prelevarea cantitativ se delimiteaz o anumit suprafa cu ajutorul unei
rame metalice ptrate sau circulare l se rzuiesc toate organismele din interiorul acesteia cu
ajutorul unei raclete. n cazul substratului alctuit din bolovani mici sau pietre prelevarea cantitativ
se face prin delimitarea cu ajutorul unei rame metalice a unei suprafee cunoscute i extragerea cu
47

grij a tuturor pietrelor care alctuiesc substratul din interiorul ramei. n cazul apelor adnci pietrele
sunt extrase cu ajutorul scafandrilor autonomi, introduse n plase sau pungi de polietilen i
transportate la mal. Apoi pietrele sunt splate cu un jet de ap deasupra unei tvi sau glei pentru
a detaa animalele prinse de acestea.
Pentru eantionarea cantitativ a macronevertebratelor bentonice din apele curgtoare
puin adnci i cu substrat pietros se folosete prelevatorul Surber (figura 5.4). Acesta este format
dintr-o ram metalic ptrat cu latura mare de 25 cm i cea mic de 20 cm. Rama trebuie s fie
destul de nalt pentru a preveni eventualele vrtejuri de ap. Perpendicular pe aceast ram mai
prezint un cadru metalic de care este ataat, prin intermediul unei benzi din pnz marinreasc,
un sac din pnz de mtase sau de nailon de 65-70 cm lungime i cu diametrul ochiurilor de 0,5
mm.

Figura 5.4. Prelevator Surber

Pentru prelevare acesta este aezat pe suprafaa substratului cu plasa n direcia de


curgere a apei, apoi se rscolete substratul i se rstoarn cu mna toate pietrele din interiorul
cadrului metalic. Animalele dislocate sunt antrenate de curent n interiorul plasei. Dup ce a fost
investigat toat suprafaa delimitat de cadru, coninutul plasei este rsturnat ntr-o tvi de
plastic. Pentru prelevarea cantitativ a probelor de la adncimi mari din apele stttoare sau cele
lent curgtoare cu substrat moale (ml, nisip, detritus) se folosesc diferite tipuri de dragi
apuctoare sau bodengreifere. Acestea sunt coborte vertical de pe o ambarcaiune staionat i
colecteaz epifauna i endofauna mpreun cu un anumit volum de sediment.
Draga de tip Petersen (figura 5.5) const din dou flci mari, n forma a dou sferturi de
cilindru, articulate mobil ntre ele i prinse de un cablu. n timpul coborrii dragii pe fundul bazinului
flcile sunt meninute ntredeschise de un dispozitiv constnd din dou lanuri care sunt prinse cu
un capt de laturile flcilor i susinute cu cellalt capt de un crlig. Partea superioar a fiecrei
flci prezint o fereastr acoperit cu o sit care permite evacuarea apei n timpul nchiderii
bodengreiferului. n contact cu substratul slbirea tensiunii cablului determin bascularea crligului
i eliberarea flcilor, astfel nct, n momentul ridicrii de pe substrat, bodengreiferul se nchide n
mod automat, decupnd prin "mucare" o suprafa bentonic egal cu suprafaa de deschidere a
gurii dragii (care poate varia ntre 258 i 1000 cm2). Draga nchis se ridic la suprafaa apei, iar
proba colectat este trecut ntr-o tvi sau gleat, deschiznd draga deasupra acesteia.
Datorit greutii sale mari (13-31 kg) draga apuctoare Petersen este preferabil n cazul
sedimentelor mai tasate (argil, lut, nisip fin sau prundi). Dezavantajele bodengreiferului de tip
Petersen constau n nchiderea prematur a flcilor n timpul coborrii datorit slbirii momentane
a cablului ca urmare a sltrii ambarcaiunii pe valuri, adncimea relativ mic de ptrundere n
substrat, pierderile de material cauzate de nchiderea incomplet a flcilor l eantionarea
ineficient atunci cnd, din cauza curenilor de ap, utilajul cade pe fund oblic.

48

Figura 5.5. Bodengreifer de tip Petersen

Sondele tubulare (carotierele) prezint avantajul de a deranja foarte puin interfaa


sediment-ap n momentul acionrii i de a menine succesiunea natural a straturilor de
sediment. De asemenea, utilizarea carotierelor permite analiza unui numr mai mare de replici ca
urmare a volumului mic al unitii de prob, permind astfel reducerea erorii de estimare a
densitii i se poate folosi pe diferite tipuri de substrat. Suprafaa de eantionare este cel mai
adesea de 50 cm2, iar adncimea de prelevare de 10 cm (n funcie de consistena sedimentului).
Un model foarte popular printre hidrobiologi este carotiera de tip Kajak-Brinkhurst. Tuburile se
confecioneaz de regul din plastic transparent (plexiglas), ceea ce permite observarea probei i
obinerea unor seciuni de o anumit grosime pentru a urmri distribuia vertical organismelor din
sediment. Carotierele se folosesc n special pentru eantionarea animalelor mici care prezint n
mod obinuit densiti foarte mari, cum ar fi nematodele, oligochetele sau chironomidele.
Cele mal bune rezultate n eantionarea cantitativ a zoobentosului pot fi obinute cu
ajutorul pompelor hidraulice de suciune. Acestea funcioneaz prin crearea unei diferene de
presiune prin trecerea unui curent de ap sau aer sub presiune printr-o gtuitur (efect Venturl).
Aceast diferen de presiune determin aspirarea sedimentelor mpreun cu fauna pe care o
conine. Aceste pompe prezint o serie de avantaje, cum ar fi: preleveaz un eantion de sediment
care are aceeai suprafa pe toat adncimea de penetrare, are o suprafa de prelevare destul
de mare (pn la 1000 cm2), o profunzime de penetrare n sediment ce poate depi 30 cm, iar
splarea sedimentului se face direct de ctre aparat. Dezavantajele pe care le prezint aceste
utilaje constau n faptul c ele depind de sursa de curent electric pentru funcionarea pompei care
provoac curentul de ap sub presiune, stratificarea sedimentului este perturbat n timpul splrii,
iar organismele de talie mare pot obtura pompa.
Materialul colectat prin unul din procedeele mai sus se trece n pungi de polietilen, n
recipiente de sticl cu dop rodat sau n flacoane de plastic cu dop nurubat de 250-500 ml
capacitate i se eticheteaz. Etichetele trebuie s cuprind numrul staiei, locul, data colectrii,
adncimea, natura substratului, temperatura, transparena, pH-ul apei etc.
5.4.6. Prelucrarea probelor
Dup prelevare se recurge mal nti la o concentrare a faunei, n ntregime sau n cea mai
mare parte, prin reducerea volumului probei prelevate. n cazul probelor prelevate cu ajutorul
bodengreiferelor aceast operaiune se realizeaz aproape ntotdeauna prin splarea probelor n
site speciale.
Ochiurile sitei trebuie dimensionate n funcie de fauna studiat, de scopul cercetrii i de
granulometria sedimentului. Astfel, pentru studiul ciclurilor biologice sau al dinamicii populaiilor se
vor folosi site fine (de exemplu, cu ochiurile de 0,25 mm sau chiar 0,1 mm), n timp ce pentru
studiile generale de monitorizare a calitii apei pot fi folosite site cu ochiurile mai mari (de 0,5 mm
sau chiar de 1,0 mm). n cazul mlurilor i nisipurilor fine se vor folosi site cu ochiurile de 0,5 mm,
dar n cazul nisipurilor grosiere i prundiului vor fi necesare site cu ochiurile de 1,0 mm sau 1,4
mm. n mod uzual, ns, se folosete un set de site suprapuse, care au dimensiunea ochiurilor
49

descrescnd de la sita superioar la cea inferioar. n acest fel pot fi reinute chiar i organismele
foarte mici evitndu-se totodat colmatarea prea rapid a sitelor. Prin splarea probelor n site se
face i separarea dimensional a organismelor.
Dup splare materialele inerte mai grosiere reinute pe site (pietre, buci de lemn, frunze,
cochilii goale de molute), nainte de a fi nlturate din prob, se inspecteaz cu atenie pentru a
vedea dac nu prezint organisme vii prinse de acestea.
Materialul rezultat dup splare se trece n recipiente de sticl cu dop rodat sau din
material plastic cu dopul nurubat. Dopul sau pereii recipientelor coninnd probele se
numeroteaz cu un marker rezistent la ap. Ca o msur de precauie, se recomand introducerea
unei etichete suplimentare din hrtie de calc adnotate n mod corespunztor cu un creion sau cu
un pix cu cerneal rezistent la ap i la fixativ n interiorul recipientului. Codul recipientului,
mpreun cu toate datele de identificare a probei (data prelevrii, locul colectrii, adncimea,
natura substratului, temperatura, duritatea apei, concentraia oxigenului dizolvat etc), se
consemneaz la faa locului n carnetul de teren sau ntr-o fi de analiz a zoobentosului tipizat.
5.4.7. Conservarea i pstrarea probelor
Imediat dup prelevare probele de zoobentos se fixeaz cu formol concentrat
(formaldehld 37-40%), care se adaug n prob i apoi se dilueaz cu ap pn la realizarea
concentraiei dorite, n general, pentru fixarea organismelor se folosete o soluie de formol 10%
(formaldehid -3-4%), dar pentru pstrarea probelor concentraia formolului poate fi redus pn la
2,5 sau 5% cu condiia ca volumul lichidului conservant s fie mult mal mare dect cel al
organismelor. n cazul unor probe voluminoase, care conin o proporie ridicat de sediment,
trebuie avut grija, pe lng faptul c s-a adugat o cantitate suficient conservant, ca amestecul
dintre formol i prob s fie complet. Deoarece formolul cu timpul devine acid i poate dizolva
formaiunile calcaroase ale molutelor i crustaceelor sau poate modifica valorile biomasei prin
solubilizarea lipidelor sau a altor esuturi grase, acesta se tamponeaz cu borax (40 g tetraborat de
sodiu la 1 litru de formol concentrat). Pentru a asigura o fixare complet a tuturor organismelor
acestea se vor menine n formol aproximativ 3 zile.
Anumite organisme cu corpul moale (turbelariate, oligochete) se identific mai uor dac nu
sunt contractate. Pentru aceste organisme se recomand narcotizarea lor naintea fixrii. Cel mai
adesea relaxarea organismelor se face cu o soluie apoas de clorur de magneziu 5-7%, alcool
izopropilic 10% sau propilen fenoxetol 0,15%. Pstrarea organismelor se face n tuburi de sticl n
alcool etilic 70-80%.
5.4.8. Concentrarea i extracia organismelor
n laborator adesea se recurge la o a doua triere a masei de sediment pentru a obine o
concentrare i mai mare a probelor. Pentru separarea ct mai complet a faunei bentonice de
particulele de sediment sau detritusul organic se folosesc urmtoarele metode: flotaia, levigarea i
sortarea manual.
Metoda levigrii (elutrierii) este una dintre tehnicile cele mai bune pentru separarea
organismelor mici din sediment. Pentru aceasta proba este introdus ntr-un recipient mare
prevzut cu o scurgere. Sedimentul este rscolit prin jeturi ascendente de ap. Organismele, fiind
mai uoare dect particulele minerale, sunt antrenate de ctre curentul de ap i reinute pe o sit
plasat sub scurgerea de supraplin. Puterea jeturilor trebuie ajustat n aa fel nct apa s agite
proba i s antreneze organismele mrunte dar nu i sedimentul. n cazul sedimentelor fine
acestea vor fi antrenate mpreun cu apa i vor trece prin ochiurile sitei.
n mod asemntor se poate folosi un uluc lung l puin adnc din tabl, deschis doar la un
capt, care se aeaz orizontal, cu captul deschis deasupra unei site. Peste proba introdus la
captul nchis al jgheabului se toarn ncet ap care va antrena animalele i detritusul de-a lungul
ulucului n sit, n timp ce particulele mai grele (nisip, prundi) vor rmne n jgheab. Coninutul
sitei se transfer apoi n borcane de plastic cu dop nurubat.
Metoda flotaiei se bazeaz pe diferenele n ceea ce privete greutatea specific dintre
organisme i sedimente. Adugarea unui mediu cu o densitate potrivit de mare determin flotarea
organismelor, n timp ce particulele de sediment se depun pe fund. n acest scop se folosesc
tetraclorura de carbon, siropul de zahr, tricloretilena, clorura de zinc etc. Neajunsul acestei
50

metode const n dificultatea recuperrii materialului. De asemenea, n cazul unor organisme grele
(molute, larve de trihoptere n csue) metoda nu este strict cantitativ.
Trierea manual a probelor este la ora actual tehnica cea mai sigur pentru extracia
cantitativ a organismelor din proba de sediment. Principalul dezavantaj al acestui procedeu
const n faptul c este foarte laborios i necesit un timp foarte mare.
Pentru a uura sortarea probelor organismele pot fi colorate cu diferii colorani
protoplasmatici (Roz Bengal, rodamin B, eozin etc). Dintre acetia cel mai utilizat este colorantul
Roz Bengal (200 mg la un litru de formaldehid 37%), care se adaug n soluia de conservare a
probei cu cel puin 24-48 ore naintea sortrii.
Proba se triaz sub stereomicroscop, operaiune n urma creia organismele se separ de
particulele de sediment i se sorteaz pe categorii taxonomice. Dac numrul unor organisme este
foarte mare se recurge la fracionarea probei i trierea integral a organismelor din subprob.
Totodat se urmrete ca formele rare s nu fie omise.
5.4.9. Numrarea organismelor
Numrarea organismelor zoobentonice, separat pe grupe sistematice (ncrengturi, clase,
ordine, familii etc), se face concomitent cu sortarea i identificarea lor. nsumndu-se valorile
abundenei numerice a fiecrui taxon i, inndu-se cont de suprafaa substratului de pe care a fost
prelevat proba, se stabilete densitatea total a organismelor zoobentonice pe 1 m2.
5.4.10. Determinarea biomasei
Determinarea direct a greutii umede se realizeaz n felul urmtor:
1. Dup ce organismele au fost numrate pe specii, acestea se tamponeaz cu o hrtie de filtru
pentru a absorbi apa superficial.
2. Organismele din fiecare specie se cntresc apoi n ntregime la o balan analitic cu o precizie
de 0,001 g.
3. Greutatea obinut se mparte la numrul de exemplare cntrite pentru a stabili greutatea
medie a unui organism.
4. Pentru a afla biomasa speciei respective, n g/m2 sau n mg/m2, greutatea medie a unui
organism se nmulete cu numrul de exemplare gsite pe metru ptrat.
5. Biomasa total a organismelor pe unitatea de suprafa se calculeaz prin nsumarea biomasei
tuturor speciilor prezente n prob.
Determinarea greutii uscate. Procedura de estimare a greutii uscate este urmtoarea:
1. Se determin mai nti greutatea umed a organismelor conform procedeului de mai sus.
2. Organismele se deshidrateaz n etuv la 60-80C pn la o greutate constant i se cntresc
din nou pentru a afla greutatea uscat.
Determinarea greutii calcinate se face n felul urmtor:
1. Se determin mai nti greutatea uscat a organismelor conform procedeului de mai sus.
2. Organismele se incinereaz la 500-600C timp de 2 ore i se cntresc din nou pentru a afla
greutatea cenuii.
3. Se calculeaz greutatea calcinat ca fiind diferena dintre greutatea uscat i greutatea cenuii.
Determinarea indirect a biomasei umede. Biomasa individual poate fi determinat i n
mod indirect, prin msurarea volumului corpului (plecnd de la dimensiunea i forma organismelor)
i transformarea ulterioar a unitilor de biovolum n uniti de biomasa prin utilizarea unor factori
de conversie. Cel mai adesea determinarea indirect a biomasei individuale se aplic atunci cnd
numrul de indivizi este foarte mare sau acetia sunt de dimensiuni foarte mici. Pentru anumite
specii exist deja tabele de corelaie talie-greutate care sunt folosite pentru calculul biomasei. De
asemenea, n mod curent se utilizeaz diferite tabele care prezint greutatea medie a unui
organism din fiecare specie calculat pe baza unui numr mare de cntriri.
5.4.11. Observaii
Deoarece o anumit fraciune de materie organic (variind ntre 1 i 45% n funcie de
specie) se poate dizolva n formol, greutatea umed a organismelor fixate difer ntructva de
greutatea umed real.
51

Pentru animalele care prezint cochilii, greutatea cochiliilor de cele mai multe ori se
determin separat. De asemenea, pentru estimarea biomasei organismelor limivore, a cror
coninut digestiv poate reprezenta o proporie considerabil din cea a greutii umede totale, se
impune aplicarea unor factori de corecie.
n urma deshidratrii n etuv poate avea loc o oarecare pierdere de materie organic, n
special lipide, cauzat de descompunerea carbonailor i bicarbonailor de calciu.
Bibliografie
1. Bnrescu P., 1964 - Fauna Republicii Socialiste Romnia. Pisces-Osteichthyes, Vol. XIII, fasc. 1, Ed. Acad.
R.S.R., Bucureti
2. Burian P.V., 2002 - Lacul de acumulare: Supraveghere biologic, University Press, Trgu-Mure
3. Calitatea apei Standard pentru recoltarea de rutina si pretratarea diatomeelor bentonice din rauri - EN
13946:2003 (E)
4. Curtean-Bnduc, A., 2001 - Practicum de hidrobiologie, Ed. Mira Design, Sibiu
5. Directiva Cadru a Uniunii Europene n domeniul politicii apei (60/2000)
6. Downing, J.A., Rigler, F.H., 1984 - A Manual on Methods for the Assessment of Secondary Productivity in
Fresh Waters, ediia a 2-a, IPB Handbook, No. 17, Ed. Blackwell Scientific Pubications, Oxford
7. Gavrilescu, N., Popovici, P., 1953 - Analiza chimic aplicat la hidrobiologie i ape piscicole, Editura de Stat
pentru Literatura tiinific Bucureti
8. lonescu, T., Constantinescu, , Margoci, G., Motoc, M., Petre, I., 1968 - Analiza apelor (naturale, potabile,
industriale, reziduale), Ed. Tehnic, Bucureti
9. Lamotte, M., Bourlire, F., 1971 - Problmres d'cologie: L'chantillonnage des peuplements animaux des
milieux aquatiques, Ed. Masson et C-ie, Paris
10. Marcoci Simona, 1984 Indrumar metodologic pentru urmrirea evoluiei calitii apelor prin intermediul
analizelor biologice, ICPGA,
11. Malcea I., 1969 - Biologia apelor impurificate, Editura Academiei RSR
12. Musta, G., 1992 - Lucrri practice de hidrobiologie, Fasc. 1, Ed. Universitii "Alexandru loan Cuza" lai
13. Nicoar M., 2002 Ecologie Acvatic, Casa de Editura Venus
14. Nicoar M.,Ureche D., 2008 Ecologie Acvatic, ediia a II-a, Editura PIM
15. Nicoar M., 2008 Biodiversitatea mediilor acvatice, Editura PIM
16. Oros, I., 1977 - ndrumtor pentru lucrri practice de hidrobiologie, Ed. Universitii "Babe-Bolyai" Cluj
17. Oros, I., 1981 - Tehnica de analiz aplicat la hidrobiologie, Ed. Universitii "Babe-Bolyai" Cluj
18. Papadopol, M., Stnescu, R., 1980 - Hidrobiologie. Lucrri practice, partea I, Ed. Universiii Bucureti
19. Ptroiescu, T., Gnescu, I., 1980- Analiza apelor, Ed. Scrisul Romnesc, Craiova
20. Plavan G., 2010 Cercetri privind structura i dinamica comunitilor macrozoobentosului n Lacul de
acumulare Izvoru Muntelui Bicaz, Teza de Doctorat, Univ. Al. I Cuza din Iai
21. Pricope, F., Battes, K., Petrovici, M., 2007 - Hidrobiologie: lucrri practice, Ed. Alma Mater, Bacu
22. Surugiu, V , 2007 - Ecologie marin. ndrumar pentru lucrri practice, Ed. Universitii Alexandru loan
Cuza", lai
23. Surugiu V., 2008 - Limnobiologie i saprobiologie. Compendiu de lucrri practice, Ed. Tehnopress, lai Tait,

52

Anexa 1
UNIVERSITATEA ALEXANDRU IOAN CUZA DIN IAI
FACULTATEA DE BIOLOGIE
LABORATORUL DE HIDROBIOLOGIE
BULETIN DE EANTIONARE PRIMAR
nr.

din
Seciunea

Locul de
eantionare

Adncime prelevare

CONDIII METEO
Senin

Noros

Precipitaii

Perioad secetoas

Perioad ploioas

DISPOZITIV PRELEVARE
Indicatori fizico-chimici determinai n teren (dac este cazul)
Temperatura aer/ap
pH
Transparen/Turbiditate
02 (Sat 02%)
Culoare
Conductivitate
Miros
Clor liber

Alte observaii

INDICATORI FIZICO-CHIMICI ESANTIONAI. MEDIU DE INVESTIGARE: APA


Indicatori
Volum eantion
Fixare/Conservare
Observaii
Indicatori generali
pH
NH4
O2

Executant prelevare
Nume, Prenume, Semntura
53

Anexa 2

INDICATORI FIZICO-CHIMICI ESANTIONATI. MEDIU DE INVESTIGARE: SEDIMENTE


ADNCIMEA
PRELEVARE

DISPOZITIV
PRELEVARE

Volum eantion

Indicatori

Fixare/Conservare

DE

Observaii

INDICATORI BIOLOGICI I METODE DE PRELEVARE


FITOPLANCTON
Volum prelevat
DISPOZITIV PRELEVARE

FITOBENT
OS
Tip substrat

CLOROFILA A
Volum prelevat

calitativ
epilitic

epidendric

suprafaa prelevat aprox.


Adncime de prelevare
epifitic
epipsalmic
epipelic

Semicantitativ
Suprafaa prelevat
ZOOBENTOS Cantitativ
Tip substrat pietre
pietri
material anorganic fin
detritus
vegetaie submers
materiale artificiale (beton)

Tip prelevator ciorpac


limnologic

draga trtoare

MACROFITE

Suprafaa inventariat

IHTIOFAUNA

Suprafaa inventariat

draga Ponar

Executant prelevare
Nume, Prenume, Semntura

54