Sunteți pe pagina 1din 6
PRODUKSI ANTIBODI MONOKLONAL TERHADAP ISOLAT LOKAL Escherichia coll ‘O1ST:H7 UNTUK PENGEMBANGAN DAN IDENTIFIKAST ‘Vereytotoxigenie Escherichia coli DENGAN ELISA. PRODUCTION OF MONOKLONAL ANTIBODIES TOWARD Escher: colt, ‘O1S7:H7 LOCAL ISOLATE TO DEVELOP AND IDENTIFICATE ‘Vroeytionigeie Escherichia coll USING ELISA ‘Bambang Siar Sava Bune’ Wy ames dan Sabrent Proloarjons? "nan Kan Mayas etry agen Mabe Bagien Feyet Dalem,Feaes Keds ewes ‘sr Cat Mada, Seip DAT, Yorba ABSTRAK, ‘uj peelan adalah pengbangan anos monokional soa lola col 0157347 yng prods ‘erhap baker uth an baer vrs Hal enzyme inked imnoorben ase (ELBA) dtuadiagian dengan tna ation! tke trade stgen cll 0137 dan H. asl penalitan menanakian babs da dus aca ‘tigen yang guna, stge ake soils menghasikan atibos yang lb bak dpa baer wh, ya ‘membeckan si absorbant yang lebih ge dan menghaaitan cura aes yang lbh banyak Hal ELISA ‘Benggunaan abo baler soaks menberianKesesnin yang bak (appa 0,6) degan ji aghtns acks. ‘Kata kane: scherihiacoll 0157.47, ELISA, Stas Kappa AnSTRACT. “The pupoe ofthis study was to develop monoclonal antibody, rom locate of ecerchia colt 157.17, ‘rodaced conventionally bared onthe whole bacteria a Wella the soiatedbactera wed aELISA. There wast {etwotypes ofthe angen wed inthe assy, antigen of the sonicated bacteria ieded beter gait ofthe atody tan thatthe whole bacteria aside by tact hat ts absorbance levels werchiger and sc igi produced was ‘more voluminous than tos ofthe whol acer. The Kappa sas analy etween ELISA procedure using the ‘onoclondl antiody ofthe sslated bacterial antigen and latex agghtnation et indicated thet es showed a Kapp cooficenof 06 Imeanthltetwo tsi provides goodlevlofapreemet ‘Key words: echerichiacof0STHT, ELISA, The Kapa statistic 54 ssn 2040 }200) PENDAMULUAN Escherichia coll (Ecol) O157:H atau verooyoosigenc . col (VTEC) merupaan taker plogeak pede manila, meagakbatkan dae berair Sang al ire brah, deal sei sas dk ema dan diwal dengankejang pens. icherichia fall OLS7:HT kena sebapahpenyebab ums Jemorshage cots (HC), hemolic wemle symdrome (GUS), dan rambo trombocye pepure (TTP) pads msn Griinand Tue, 1991). Beberaps penlian tla isutan te smondeekt co OS7H7 dk makanan den hows, {ebul abvamakanan el hevsamerapan umber falls! Ecol! O1S7H7 pads mmosaPeryian {endap wash pada mans dapaan bbws ead Iubungan ars nfl col O1ST:H? dan Roos ngng spt cansusu menu, Infekt col O157-7 kermngkioan de apa ides sears Kini. Metodesendvick ‘enzyme-linked immunosorbent assay telah “ikembangkan untuk ments verofrin and 2dr coll O1ST:HT. Penggoman ELISA yang eat san rmcoghaslkaa peagujian yang seat, apes, pedi, dan pakts unk stmpel yang bnyak Keandalio peoguian tecba sangut bak untuk pelanepidemiloi Pukeral, 199). ‘Tujuan penelitin ini adalah untuk smemprodukstsntiod! moooklonal Boll O1ST:7 FolatTokal Antibod oaeoosl but Gr uns dengan anigenbaker vuh dan sonikas “MATERI DAN METODE Ecchorichia coll OST (VTEC) Spei20 iol oka Buda dan Amara, 2000) dgwakan tak peeltion in. Pru! anid monskocal Ginkulan ment metoe Peers dan Basmgsten (0992) Anigen baked uh iperoleh dengan Imembunuh coll O1S7HT dengan foals 10%, Sedanpkan angen taker oaks iperten dengan meson cof O1S77 lalla 3 det, Produk tinfxt imun_dilaaian dengan smengimunisat\Sckormenc Dube betins arb 10 tings berate Kesoltran Universitas Gah Mada," Masingrmasing 8 shor. ment limanss dengan 20g Garang lebih 210) agen Ecol O157:7 baker nh din sos, Inia dn ose kaka sebunjok 6 al sla 2 alan Aegan angen dit advent Linfoit mun yang diperoleh kemodian isan dengan mloma NS-1 dengan pean Pobethpene gyo! 4357-0) vk memperleh el Sti. Set fd cenga sgl sboburs eh et 1000 cipi, duntitian, dap iptiare dengan eum persia Sl ibid yang pith Remon dikumputhan tok dauntkna pede ment Dalle Anbodt ‘monoklonaldipeolch apis seni meni aie. Produlst aatbod! monoklona diselekal- dengan menguj antibod monoklonal txtadap olf O15? yang diperleh dengan antigen cll OLSTAH7 lost ‘Ametka Serikat (AS), slat lolal Ecol! O1S7H7 ‘Spe120, da agen nie VTEC, si seesi yang dpeieh kemudian dit spesitasiy dengan dh banding kezeuaany (ah ‘Kappa (Bonet, 1990) tehadyppeengkt kone Scrip enka 6 co O15) dant? yaghaonsh Inte LHASIL. DAN PEMBAHASAN unis Meacit. asi imnisast dengan antigen alts wth jn sonas menus respon imum bike Reson sun dapat ditt pads a ELISA menu ‘enkan ang absotbans dar sel mnie fmmussas Ket, dan iminieake-€. (Tal) Penyuntitan angen kan mantnlast jms luna yang peti rhadapmsing-masing agen t,00,Kolnihiigoma di Kemal dan fail engin tps 12 on bibeidoma dat ntgen ‘ker dn 0 kon hima dat ange alert Salta Dua puluh dus Alon hibrdoms tescbt Kemudian dikfon Kembali (rekloning) seperti presenta pada Taba Hasil rekloning 22 lon hibridoma ‘enusjba angka sbuomans yang tng dan sa ‘Masingmaing ‘lon tensbut anges absorbsnsinys ‘ender menngkt esl eval amps ong ‘Yang pra. Paints int menunjlean et bed ang ian da fs antaraimfoitimn dal tmcloma reli stabil Kio yang benarmenurt Baron (2992) adalsh ‘Klon.yangnormal tubs dan Julai vndah (10, sabi, daya Bupaye gal, ‘utel2 Pertnbuhan dan pongujan ELISA lon hibidoma has fs angen bie uth dan soniast “Re niges Tana pat Toa samoran dengan Tuna suman dengan angio silrtter ion ido shsorinl 1,000| T Baits 386 suman ‘7 somuran sur wu 70%) eh0%) 2 Bake 336mm 128 suman 12 suman seal 81%) 52%) Jomish 672 suman 185 sumuran 148 one st) stg 56 sine 200)2009 ‘abe 3. Kon ibridoms yang di nuk redoing ager 1 Bates uh 1PSVIT 2psvia Siesvia Spsvia S.rsvis SPsvis TPsvi7 RPsvie 8. PSvi9 IPSVII0 iPsvily RLPSviia 1 PSVaI 2psvea 3psv psvaa S.rsvas 6.Psv96 reesva7 RPsvan 9. psv29 10, FSV210 Bakes soolast sea mempeodulsl anubodi moacklonal dengan Kontetasiangmeningat asi penguin ists mele ds alt ‘etloning dipeole 6 Hon sl hibeidorsa de antigen alert wh dan 4 Aa wel iidoma dar ntgen ‘ake sonkai(Tbel). Ponilbas Goa dar sotigenbater wah dan onda antigea bake suas didsuan ats aga seotbansinya yang cendrug meningkat sek sles {al sampei Moning ke-2. Aga saoebane snibodt ‘oookonal hada etgen wi dai Ecol O157.H7 lei tinggi pada nical OLST7. Has! ik imenunjtdan taka “ongonc Binding ste yang Tue. Has reoning libris yang tub dan nigh tethadap Bol OST “Faiigen Klos yang api Aagl aaa — iii oleh antibod manokenl yang dibssan Imampu membedalsa eto stigen yng brea da coll OISPHT sehinggn dag diguslsn Ute mendetstsiE coll 0157447. Nene Roi (1991), ening ecraBerlag-alang san mong ot {yang sabil dan memprodustwalbods mosolons dengan koasestal yang mening, Peng i kena dalam proses Laing tasebut exmpuan sl ‘yang memponjal sila dak ikebendak akan termine Kon hibridoma dart angen bates suas, smemberkan agha absorbs! yang ei balk (2.262 34278) dacpad asigen baler ui (1.361 - 2556) sbsorbansi ELISA menggunakar antibod! moocKlonl "Ro Antigen Rion ibidoma Angi aboot 1 Bakes SVE 2556 wah 2. PSVIS 2a 3 rsvie tots 4 svis 2088 5. rsviio 2348 © Psviiz 1361 2 Bate 1 FSVaL rae senilasi 2 PSV22 321 3. Psvas 2s & psvae ars 37 4a ee 02009 “Thbel 5. Nila dan SD basil penguin antibod! nonokonal baker wh dan sonia dengan beberapa mace aotigen Wo ea epi tas Aiba monatonal Andi mnokioat ake th ler soa! vi PvE ‘Koauol nei Gola), SIAC a2 equi ni-O157, dn 5 ais nevTlavT2 2 AaigenSpett (loka), MAC 13 969+ ops 1z38+ egaifai-O157,dan VTIVTZ = SOTTO ton 3 Antigen 091 osiss ost sme ona7s (AS) SMAC nea, 0157, SG 05” on7” 0256 aVT1VT2 4 Antigen Spe120 (ka), SMAC 193% osme gee sors ‘ees 0157, dan VTTBEVTE 5 O2m OMe 0526 891 5 Antigen o1S7317 (AS) MAC neg, 0157, 4 ales oe Lows Ls3t saVTIAVE2 238 ose 3190s (Habel 4), Hai ink emul dengan bast peneliion Harlow dan Lane (1988) sera Sith (1988) yang ‘membuktikan baba antigen yang dpe slay (Grote) adalah ang bi iguana ans ‘enc i dalam pembutan sted moookional Hal ‘eaebt Karena protein yang mempunyai bert moskal ei esr at 3000 mera aogen yang kat Gimadiaghakied uh, ‘Produks dan Antibodi Monona Kesepulu Klos yang diasilkanditumbubion dan ‘Masing-masing hibridoms (huang Jebin 1 1040.3 ml medion) disuntiion pada rong peritoneal menst Bale etna untuk menginbos Sinai, asi penettan mmpstibatan baw 4 dar 10 ekormenet (409%) yg dale eng et bbe rmenghasiian cian atts, Don chor mee inbul Gain sts 2-minggu sella nfs! hbidomat (@SVI2 dan PSV28) dan? chor meact imbul ean ‘tes minggu sea intima (PSV IN da pevan, Anitod! monaloal (se) yang dpe ‘basal dao, ait 2nd angen ater th (PSVI2 dan PSVILO), dan ow dat antigen bake sonikasi(PSV2 dan PSV), ‘Tate 6 Peshitungan kappa atr uj BLISA antibod monoklonl PSV2S dan uaa teks co!O1ST dan HT ‘ada 15 umpellapangun oat colt ‘Uf Agltinas Lateks TH 1 18 Monohlonal T= 5 By 13] a 20 38 sine 2019200) Pengelian Antibod Menoklon Antiod monokonalkemaian dixie tbeberapa co lat al dan Amerie Serikt (AS), era di Kesessinnya (yi appa) antral ELISA’ menggunakan antibod? monotlonal dan gun lteks Ecol! O154dan 87 (Tabel 5), Vasil pengyjian Tabel 5) eta babwa antiodi monoklonl PSVI2 dan PSV2S samasama teens fmt (angka absonas >1,000)terhadap tigen Bol! O157 Spe120 lt kal dan sign ‘oll O157H7 iolat AS, tapi antibod! monolorl 328 disenproduls! aes lebih banja Baron (1982) mengatakan baka antibod monakooal yang ‘iguaian bere dat antibod! monakooal yang ‘produkt sear cepa sta volume don knsentas srngtogs Ujitappo digunsanuotuknengyjkesersin ‘utara yf ELISA abd monoklonal FSV28 dn ‘alts Lets col! O157 din HT. Uj BLISA ‘Sengananibosk monadoot PSV2S dn yh aia Ines colt O157 dan HY sear independen dja ‘ads 151 toa baert wth ol uel pang Fhatel6, Has! perhiungen tappa antrawjh BLISA snibod! mooklonl PSV dan alta Ike al O1S7 dan H7 adalh 600 %. Ment Bonnet (990), kappa antra 806 % senunulan tng Sesesuuian yang brik anor dn pengjan. Hal Penguin astiod mopoklonlPSV2S angen baker Sonikas) pada 131 sampel lapangan coll ‘menuajlan respon pengjan yng bak tk coll {ker uth. Respon engutan yng balkmenajukan Taka onigent nding site yang. dink oleh snstbod! monalonal P3V28 (angen bate soikss) yang dissilan mampa mengenalepiop agen yang esl el colfO1S7:H7 baler ah LUCAPAN TERIMA KASIH, Penis, mengucapkan_terima ash, kepada, Universiy Research for Graduate Education (UROB) Project Batok It 19971958, Directorate General of Higher Education, yang els ‘member bayapeneisan DAFTAR PUSTAKA, Antezak, DF, 1982, Monoclonal_ antibodies: "Technclogy and potetal use. Ame Te Med. Asso. 181 (1): 1005-1010 Bares, D., 1992. Production of hybridomas. In Monoclonal anbods. ed by Peter std Baumgarten, Springer-Verlag, Berlin, Germany, 137-148, Boast, BLN. 1980. ntpretstion of dagnost et ‘Skiltorpectceandresearch Proceeding of The Annual Meeting, Society Jor Phartogentoy, 14 Buiara, 8. and Asmara, W, 2000, tslaton ‘identification, and_