COMPARAREA DE HIDROLIZ ACID I ENZIMATIC A

TUTUNULUI
TULPIN XILAN PENTRU PREPARAREA DE
XYLOOLIGOSACCHARIDES
Ozlem Akpinar o, *, Kader Erdogan o, Ufuk Bakir b, Levent Yilmaz b
un Universitatea Gaziosmanpasa, Departamentul de Inginerie Alimentar, Tasliciftlik
60250, Tokat, Turcia
Universitatea Tehnic Orientul Mijlociu, Departamentul de Inginerie Chimica,
Ankara, Turcia
CUVINTE CHEIE:
Xylooligosaccharides
tulpin de tutun
prebiotice
lignoceluloz
ABSTARCT
Tulpina de tutun ( TS ) , este un deeu agricol major n regiunea Mrii Negre din
Turcia , a fost folosit pentru producia de xylooligosaccharides ( XOs ) . Acesta
conine aproximativ 22 g/100 g xilan a crui compoziie a fost determinat ca 93,5
g/100 g xiloz , 6,54 g/100 g glucoz i 11,2 g/100 g de acid uronic dup acidul
complet hidrolizat . XO producie a fost realizat prin hidroliz enzimatic i acid a
xilanului care a fost obinut prin extracie alcalin din tulpin de tutun . n hidroliza
enzimatic , xilan fost hidrolizat utiliznd o xilanaz pregtirea i efectele
concentraiilor de pH , temperatur , perioada de hidroliz , substrat i enzimatice
asupra randamentului xylooligosaccharide i gradul de polimerizare au fost
investigate . pentru enzimatic hidroliz n condiii optime de randament XO cu
privire la tutun tulpin xilan ( TSX ) a fost de 8,2 g/100 g dup 8 h i 11,4 g/100 g
dup perioada de 24 de ore de reacie . n hidroliza acid , acidul sulfuric a fost
utilizat i hidrolizat de coninut sum diferit de oligozaharide i monozaharide .
Pentru hidroliz acid n condiii optime , randamentul XO cu privire la TSX a fost de
13,0 g/100 g . obinut enzimatic oligozaharide au fost purificate prin ultrafiltrare ,
utiliznd 10 i 3 membrane kDa . Dup dou etape prelucrare membran , permeat
care conine cea mai mare parte oligozaharide a fost obinut ingineering , Ankara ,
Turcia
1 . Introducere
Tutun ( Nicotiana sp . ), Este o cultur important produse n Regiunea Mrii Negre
din Turcia . Dupa ce sunt recoltate toate tulpinile, frunzele sunt n general
ncorporate n sol sau arse n domeniu . Utilizare a tulpinii n scopuri industriale nu
rezolva nu numai problema de eliminare inproper , dar , de asemenea, ofer venituri
suplimentare pentru productorii de tutun i genereaz locuri de munc . din cauza
natura sa lignocelulozice ( celuloz , hemiceluloz i lignin ) , tulpin de tutun ( TS )

poate fi transformat ntr- o varietate de substane chimice , cum ar ca alcool ,

ndulcitori
,
oligozaharide
prebiotic
,
materiale
plastice
etc
Deoarece componenta principal a fraciunii hemicelulozice de TS este xilan , acesta
ar putea fi un material de pornire adecvat pentru xylooligosaccharides ( XOs ) de
producie
.
Motivul de a produce XOs const n utilizarea lor poten iale n produsele alimentare
produse. XOs au efecte prebiotice atunci cand sunt consumate ca o parte a dietei . Ele
nu sunt hidrolizate sau absorbite de ctre om prin tractul gastro-intestinal
( oligozaharide non- digerabile ) , i afecteaza gazda prin stimularea selectiv a
creterii
sau
activitatea
probiotice n colon ( Roberfroid , 1997) . Ei au diferit importan fiziologic , cum ar
fi reducerea colesterolului , meninnd sntate gastro-intestinale , mbuntirea
disponibilitii biologice a calciu , reducerea riscului de cancer de colon , cu efect
citotoxic.
Compoziia i structura XOs depind de surs i procesul de produc ie . XOs poate fi
preparat din xilan reziduuri agricole bogate cu aburi sau degradrii hidrolitice a
xilan , cunoscut sub numele de autohydrolysis implicat deacetilare xylans pentru a
produce acid acetic care hidrolizeaz hemiceluloza sau pot fi preparate prin
enzimatic sau prin hidroliz acid.
Procesul hidrolizat elimin utilizarea de substane chimice corozive pentru extrac ia
i hidroliza xilan . Cu toate acestea ,hidrolizatul din acest proces con ine o varietate
de componente nedorite cum ar fi lignin solubile , cantitate mare de monozaharide
i
deshidratarea produselor , astfel nct este nevoie de procesele de purificare
extensiv. n plus , distribuia greutii moleculare a Xos arata prezen a in parte
semnificativ a gradului ridicat de polimerizare ( DP ) compui .
Pentru a obine XO n intervalul DP 2-6 , produs de la autohydrolysis are nevoie de
un tratament suplimentar cu un reactiv hidrolitic , cum ar fi o enzim sau un acid.
Alternativ , XOs pot fi produse prin hidroliz enzimatic sau acid de xilan . In
general , n biomas lignocelulozic , xilan exist ntr -un complex xilan - lignin i
devine
rezistent la hidroliz . Prin urmare , producia prezent XO este efectuat n dou
etape : extracia alcalin de xilan de biomasa lignocelulozice, urmat de hidroliza
xilanaz avnd exoxylanase sczut i / sau activitatea b - xylosidase sau acidul
hidrolizat.
Hidroliza enzimatic nu produce produse secundare indezirabile, sau cantitate mare
de monozaharide . Cu toate acestea xilanaze cu diferite specificit i de substrat
produce diferite end hidroliz produse i este dificil de a controlaproduc ia de XOs cu
gradul dorit de polimerizare ( DP ) . Pe de alt parte , acidul hidrolizeaz legturile
glicozidice , n mod aleatoriu ntre adiacente uniti de xiloz . Aceast metod este
practic pentru prepararea Xos n gama DP de doi la cincisprezece ( Sun i colab . ,
2002) . Ca autohidroiz , principalul dezavantaj al acestei metode este producerea

zaharuri
monomere
i
nedorite
de
produse
.
Produse alimentare i alte industrii cheltuiesc sume considerabile de timp i / sau
bani pentru a obine XOs . Creterea rapid a alimentelor functionale de pia i
numrul tot mai mare de alte aplicaii industriale( Moure et al . , 2006 ), for eaza
cercetatori de a explora diferite surse i tehnologii pentru producerea XO cu
distribuie
DP
definit
.
Din moment ce tulpini de tutun reprezint un regenerabile abundent i ieftin resurs
pentru producia de XO , prezenta anchet se ocup cu XO produc ie de tulpin de
tutun i purificarea oligozaharidelor . Studiul se concentreaz pe studiul de
optimizare de dou metode diferite ( hydrolyis o enzimatice i o hidroliz acid )
pentru producia XO , compararea metodelor i membrana de frac ionare de XOs
produs .
2.Rezultate i discuii
Caracterizarea de tulpin de tutun i tutun tulpin xilan
Compoziia de tulpin de tutun dat : cenu , xilan , celuloz i con inut lignin n
raport cu greutatea uscat de tulpin de tutun s-au msurat ca aproximativ 6 , 22 , 44
i 24 g/100 g , respectiv . La fel ca cele mai multe dintre fibrele care nu sunt din
lemn , coninutul de cenu deb tulpin de tutun a fost semnificativ mai mare dect
cea a speciilor de lemnb ( Agrupis & Maekawa , 1999 ) .
Dup bsepararea de celuloz , lignin i xilan , compozi iab din xilan tulpin de tutun
( TSX ) a fost determinat . Dup cum s-a observat,componenta major a fost TSX
xiloz , aproximativ 93,5 g/100 g mpreun cu 6,5 g/100 g glucoz i 11,2 g/100 g de
acid
uronic
.
Grupri acetil nu a putut fi detectat deoarece xilan pierde acetil saleb grupuri n
timpul
extraciei
alcaline
(
Ebringerova
&
Heinze
,
2000)
.
Raportul de glucoza la xiloz fost gsit foarte sczut ( 0,06 ) . Rezultatele acestea
au artat c compoziia chimic a TSX a fost similar cu xilan lemn de esenta tare.
3 . Concluzii
Tulpina de tutun xilan cu structur simpl i liniar poate fi convertit la
xylooligosaccharides fie prin acid sau hidroliz enzimatic . Hidroliza acid este mult
mai rapid dect hidroliz enzimatic , dar suma furfural i ridicat al produc iei
monozaharide sunt principalele dezavantaje . Evaluare comparativ a artat c tipul
de agent hidrolitice ( enzim sau acid ) , concentra ia acesteia i perioada de reac ie
determin
randamentul
i
concentraia
fiecrui
oligozaharide, din hidrolizat . Randamentul maxim obinut au fost de aproximativ 11
% i 13 % , folosind 24 de ore hidroliz enzimatic i 30 de minute hidroliza acid ,
respectiv , care sunt nc prea mici i ar trebui s fie crescut pentru produc ia la scar

larg XO . Pentru a crete randamentele Xos prin hidroliz enzimatic , alte xilanaze
i ndeprtarea de grup lateral enzimele pot fi folosite , de separare a produsului i
purificare poatet fi mbuntit ; pentru hidroliza acid diferit, acizi mai slabi pot fi
utilizati n diferite condiii i n final hidroliza acid i enzimatic pot fi combinate .
Fracionarea XOs ntr-un interval DP dat poate fi uor realizat prin utilizarea
ultrafiltrare pentru a indeparta oligozaharide ntr- un interval de nedorite DP pentru
hidroliza
enzimatic
.
Cu toate acestea , un alt sistem de membran, cum nanofiltrare sau osmoza inversa
trebuie utilizat dup hidroliz acid pentru ndeprtarea monozaharide i furfurol .
Aceasta cercetare a demonstrat c tulpin de tutun , care a avut nici o valoare
economic , prea s fi potrivite pentru productia de serie diferit de XOs care au
multe aplicaii poteniale n industria alimentar i farmaceutic ca bine n produc ia
de
energie
din
surse
regenerabile
.
Aceasta lucrare a fost sustinut financiar de Comitetul
Consiliul de Cercetare Tehnologic din Turcia ( 104O359 ) .

tiinific

REFERINE
1.Agrupis, S. C., & Maekawa, E. (1999). Industrial utilization of tobacco stalks (I)
preliminary evaluation for biomass resources. Holzforschung, 53, 2932.
2.Akpinar, O., Ak, O., Kavas, A., Bakir, U., & Yilmaz, L. (2007). Enzymatic production
of xylooligosaccharides from cotton stalk. Journal of Agricultural and Food
Chemistry, 55, 55445551.
3.Akpinar, O., Erdogan, K., & Bostanci, S. (2009a). Production of
xylooligosaccharides by controlled acid hydrolysis of lignocellulosic materials.
Carbohydrate Research, 344, 660666.
4.Akpinar, O., Erdogan, K., & Bostanci, S. (2009b). Enzymatic production of
xylooligosaccharide from selected agricultural wastes. Food and Bioproducts
Processing, 87, 145151.
5.Ando, H., Ohba, H., Sakaki, T., Takamine, K., Kamino, Y., & Moriwaki, S. (2004).
Hot-compressed-water decomposed products from bamboo manifest a selective
cytotoxicity against acute lymphoblastic leukemia cells. Toxicology in Vitro, 18, 765
771.
5.ASTM. (1993). Annual book of ASTM standards, in American Society for Testing
and Materials Phidelphia, PA, 04.09.
6.ASTM. (2003). Annual book of ASTM standards, in American Society for Testing
and Materials Phidelphia, PA, 11.05.
7.Bailey, M. J., Biely, P., & Poutanen, K. (1992). Interlabratory testing of methods for
assay of xylanase activity. Journal of Biotechnology, 23, 257270.

8.Chen, C., Chen, J., & Lin, T. (1997). Purification and characterization of a xylanase
from Trichoderma longibrachiatum for xylooligosaccharide production. Enzyme and
Microbial Technology, 21, 9196.
9.Ebringerova, A., & Heinze, T. (2000). Xylan and xylan derivatives-biopolymers
with valuable properties, Naturally occurring xylans structures, isolation procedures
and properties. Macromolecular Rapid Communications, 21, 542556.
10.English, B., Chow, P., & Bajwa, D. S. (1997). Processing into composites. In R. M.
Rowell, R. A. Young, & J. K. Powell (Eds.), Paper and composites from agro-based
resources (pp. 269299). New York: CRC Lewis Publishers.
11.Freixo, M. R., & Pinho, M. D. (2002). Enzymatic hydrolysis of beechwood xylan in
a membrane reactor. Desalination, 149, 237242.
12.Garrote, G., Dominguez, H., & Parajo, J. C. (1999). Mild autohydrolysis: an
environmentally friendly technology fro xylooligosaccharide production from wood.
Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 74, 11011109.
13.Melton, L. D., & Smith, B. G. (2002). Determination of the uronic acid content of
plant cell walls using a colorimetric assay. In R. E. Wrolstad, T. E. Acree,
14.E. A. Decker, M. H. Penner, D. S. Reid, S. J. Schwartz, C. F. Shoemaker, D. Smith,
& P. Sporns (Eds.), Current protocols in food analytical chemistry. New York: John
Wiley & Sons, Inc.
15.Miller, G. L. (1959). Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of
reducing sugar. Analytical Chemistry, 31, 426428.
16.Moure, A., Gullo n, P., Domnguez, H., & Parajo , J. C. (2006). Advances in the
manufacture, purification and applications of xylo-oligosaccharides as food additives
and nutraceuticals. Process Biochemistry, 41, 19131923.
17.Nabarlatz, D., Ebringerova, A., & Montane, D. (2007). Autohydrolysis of
agricultural by-products for production of xylooligosaccharides. Carbohydrate
Polymers, 69, 2028.
18.Pellerin, P., Gosselin, M., Lepoutre, J., Samain, E., & Debeire, P. (1991). Enzymatic
production of oligosaccharides from corncob xylan. Enzyme and Microbial
Technology, 13, 617621.
19.Roberfroid, M. B. (1997). Health benefits of non-digestible oligosaccharides.
Advances in Experimental Medicine and Biology, 427, 211219.
20.Sun, H., Yoshida, S., Park, N., & Kusakabe, I. (2002). Preparation of (1->4)-b- Dxylooligosaccharides from an acid hydrolysate of cotton-seed xylan: suitability of
cotton-seed xylan as a starting material fro the preparation of (1->4)-b-D
xylooligosaccharides. Carbohydrate Polymers, 337, 657661.
21.Vazquez, M. J., Alonso, J. L., Dominguez, H., & Parajo, J. C. (2002). Enzymatic
processing of crude xylooligomer solutions obtained by autohydrolysis of eucalyptus
wood. Food Biotechnology, 16, 91105.
22.William, S. (1997). Furfural in distilled liquors (9.097), in AOAC official methods
of analysis Arlington, VA, 0.097.

23.Yoon, K. Y., Woodams, E. E., & Hang, Y. D. (2006). Enzymatic production of

pentoses from the hemicellulose fraction of corn residues. LWT Food Science and
Technology, 39, 388392.
24.Yuan, Q., Adachi, T., Takenaka, S., Murakami, S., Tanaka, M., & Aoki, K. (2008).
Production and accumulation of xylooligosaccharides with long chains by growing
culture and xylanase of a mutant strain of Bacillus pumilus X-6-19. Chinese Journal
of Biotechnology, 24, 12211227.
25.Zilliox, C., & Debeire, P. (1998). Hydrolysis of wheat straw by a thermostable
endoxylanase: adsorption and kinetic studies. Enzyme and Microbial Technology, 22,
5863.