Obiectul microbiologiei

ef lucrri Dr. Delia Berceanu

Microbiologia

este tiina care se ocup cu

studiul organismelor microscopice.
Ramuri: microbiologia medical, farmaceutic,
industrial, alimentar, a mediului, a solului, a
plantelor etc.
Studiaz:
Biologia agenilor infecioi
Relaiile dintre aceti ageni i organismul uman
Diagnosticul etiologic al infeciilor
Bazele terapiei antiinfecioase
Bazele profilaxiei infeciilor

LOCUL AGENILOR INFECIOI N

SISTEMATICA MICROORGANISMELOR

Microorganismele difer n mod fundamental

unele de altele, fiind ncadrate n 3 regnuri:

1. protista
2. procariotae
3. vira.

1. Regnul Protista

- microorganisme a cror celule

sunt evoluate, de tip eucariot, cu nucleu i organite celulare
nespecifice: reticul endoplasmatic, ergastoplasma, mitocondrii etc.

are toate caracterele

celulelor evoluate
nucleu
organite celulare
comune
nu are perete celular
se divide direct sau
prin mitoza

Celula de tip eucariot

1. Regnul Protista
Algele - microorganisme acvatice, fotosintetizante, de

dimensiuni microscopice pn la forme gigante,

pluricelulare, filamentoase.
Nu prezint interes medical propriu-zis, cu excepia agaragarului din care se obine agarul, polizaharid care
servete la prepararea mediilor de cultur solide.
Mycetele (ciupercile microscopice) - grupate n 4 clase.

-12.000 de specii, din care 100 sunt de interes medical.

Protozoarele

- microorganisme unicelulare eucariote,

evoluate structural i n general mobile, asemnndu-se cu
celulele animale. Cele de interes medical se ncadreaz n
4 clase: flagelata, rhizopoda, sporozoa i ciliata.

2. Regnul Procariotae
- cuprinde microorganisme a cror celule sunt
primitive, de tip procariot, lipsite de nucleu
adevrat i de organite celulare nespecifice, dar
cu un nveli suplimentar numit perete celular.
nu au nucleu adevrat - cromozom haploid format dintr-o

molecul circular de ADN

lipsite de organite celulare
ribozomilor
au un perete celular rigid
se divid direct

comune,

cu

excepia

nu au nucleu adevrat au un
cromozom haploid format dintr-o
molecul circular de ADN
au perete celular rigid
se divid direct
lipsite de organite celulare
comune, cu excepia ribozomilor

Celula de tip procariot

3. Regnul Vira - entiti infecioase de natur

subcelular (acelular): virusurile i viroizii.
Virusurile se deosebesc fundamental de formele
celulare de via:
sunt formate dintr-un singur acid nucleic (ADN sau ARN),

nvelit de o capsid proteic (nucleocapsida); unele

prezint un nveli suplimentar anvelopa (peplosul);
prezint parazitism intracelular obligatoriu;
sunt particule inerte n stare extracelular, dar dup ce
ptrund ntr-o celul vie, deviaz metabolismul acesteia
n scopul propriei replicri.

Structura virusurilor
entiti infecioase acelulare,
cu parazitism intracelular
obligatoriu
un singur acid nucleic (ADN
sau ARN)
inerte n afara celulei gazd
paraziteaz celula la nivel
genetic, deviaz metabolismul
acesteia n scopul propriei
replicri

 Viroizii - structur i mai simpl, fiind alctuii

doar dintr-un acid nucleic cu GM mic. Unii
produc boli transmisibile la plante.
Virusurile i viroizii alctuiesc mpreun
regnul VIRA.
Prionii - entiti infecioase de dimensiuni foarte
mici (5 nm), de natur proteic.
Se presupune c stau la baza unor boli degenerative
ale SNC: boala Jacob-Creutzfeld, Kuru, scrapia oilor etc.

Caractere difereniale ntre bacterii i virusuri

Caracter

Bacterii

Virusuri

Dimensiuni

110 MO

20300 nm ME

Structur

Celular tip procariot Subcelular (acelular)

Coninutul n ac.
nucleici

ADN i ARN

ADN sau ARN

Multiplicare /
cultivare

Diviziune direct / pe
m. de cultur inerte

Replicate de ctre cel.

gazd / anim. de lab.,
CC, OE

Prezena enz.
metabolice
Sens la A. uzuale

Da

Nu

Da

Nu

 La agenii infecioi microscopici se

adaug paraziii multicelulari, cum

sunt helminii i artropodele, cu
structur complex i cu studiul
crora se ocup parazitologia.

MORFOLOGIA I STRUCTURA
BACTERIILOR

MORFOLOGIA I STRUCTURA
BACTERIILOR
Dimensiunea bacteriilor: 1-10 (1=10-3 mm),
Dimensiunea, forma i aezarea bacteriilor se apreciaz
prin MO, iar detaliile morfologice i structurale prin ME.
Forma bacteriilor st la baza clasificrii lor.
Form i aezare. n raport cu forma lor deosebim
4 categorii de bacterii:
- rotunde (cocii),
- alungite (bacili),
- ncurbate (spirili, spirochete, vibrioni) i
- filamentoase (actinomycete).

 cocii - bacterii rotunde, aezate n grmezi (genul

Staphylococcus),
- ovalare, aezate n lanuri (genul Streptococcus),
lanceolate,
- n diplo ca dou flcri de lumnare (specia
Streptococcus pneumoniae)
- reniforme, dispuse ca dou boabe de cafea ce se
privesc fa n fa (genul Neisseria),

bacilii - bacterii cu form alungit de bastona,

cocobacilii - forme intermediare ntre coci i bacili (Yersinia
pestis, Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae);

 vibrionii - bacterii ncurbate, n form de virgul (Vibrio

cholerae);

spirilii - bacterii spiralate cu 1-2 spire rigide (Spirillum

volutans);

spirochetele - bacterii spiralate cu corpul flexibil i 12-20

de spire (Treponema pallidum), foarte multe spire strnse

(Leptospira) sau 2-3 spire (Borrelia);

actinomicetele - bacterii foarte asemntoare fungilor i

formeaz filamente sau hife lungi i ramificate care se rup,
rezultnd forme bacilare (Actinomyces).

STRUCTURA CELULEI BACTERIENE

Componente

obligatorii:
1. peretele celular
2. membrana citoplasmatic
3. materialul nuclear
4. citoplasma

Componente

neobligatorii:
1. capsula
2. cilii sau flagelii
3. pilii bacterieni
4. sporii

Structuri celulare obligatorii

1. peretele celular
2. membrana citoplasmatic
3. materialul nuclear
4. citoplasma

Structuri celulare obligatorii

1. Peretele celular

Peretele celular
nconjoar membrana citoplasmatic, este o

structur rigid, specific bacteriilor.

format: - un strat bazal sau peptidoglican
(mureina), asemntor la toate bacteriile i
- un strat al structurilor superficiale,
foarte difereniat, n funcie de care bacteriile
manifest caractere tinctoriale diferite:
- bacterii gram-pozitive,
- gram-negative i
- acido-alcoolo-rezistente.

 Peptidoglicanul sau mureina - asigur forma,

rigiditatea i rezistena mecanic a bacteriei.

Prezent la toate bacteriile, el const dintr-un schelet, format din molecule

lungi paralele polizaharidice de N-acetil-glucozamin i acid N-acetilmuramic. Moleculele de acid N-acetil-muramic din lanurile vecine sunt
legate ntre ele prin puni polipeptidice, transversale.

- La bacteriile gram-pozitive, peptidoglicanul

este mai gros (15-30 nm).
Stratul structurilor speciale este redus i
alctuit din polimeri hidrosolubili - acizii theicoici.
Ei reprezint antigenele de suprafa ale
bacteriilor gram-pozitive.
Peretele celular al bacteriilor gram-pozitive este sensibil la
aciunea lizozimului, care rupe legturile dintre acidul N-acetil-muramic
i N-acetil-glucozamin.

- La

bacteriile gram-negative, peptidoglicanul

este mai subire (4-5 nm).

Stratul superficial este ns mult mai complex
dect la bacteriile gram-pozitive fiind alctuit din:
Membrana extern - format dintr-un strat dublu
fosfolipoproteic.
Deasupra membranei externe a bacililor gramnegativi se afl lipopolizaharidul de perete (LPZ)
sau endotoxina bacililor gram-negativi.

Lipopolizaharidul de perete (LPZ) sau endotoxina

bacililor gram-negativi este alctuit din:
lipidul A partea activ,
miezul sau core, numit i antigen R, comun tuturor

bacteriilor gramnegative,
uniti monozaharidice repetitive (15-40) - specifice de
specie i tip, care constituie antigenul O al bacteriilor
gram-negative.
Spaiul periplasmic - se ntinde de la membrana celular pn

la membrana extern. El conine peptidoglicanul. Aici sunt

prezente enzimele de inactivare ale unor antibiotice (betalactamazele i cefalosporinazele).

 Bacteriile acido-alcoolo-rezistente de interes

medical sunt bacilul tuberculos i bacilul leprei.
Peretele celular se aseamn cu cel al bacteriilor
gram-pozitive, dar structurile speciale conin acid
micolic i o cear, ce confer acestor bacterii caractere
tinctoriale deosebite i rezisten crescut la factorii de
mediu.
Ele se coloreaz la cald prin tehnica ZiehlNeelsen.

Funciile peretelui celular:

asigur forma, rezistena mecanic i osmotic a bacteriei;

regleaz traficul molecular de perete n ambele sensuri;
sediul antigenelor de suprafa;
sediul unor factori de patogenitate;
rol n diviziunea bacterian i n procesul de sporulare.

Structuri celulare obligatorii

1. peretele celular
2. membrana citoplasmatic
3. materialul nuclear
4. citoplasma

2. Membrana citoplasmatic

Membrana citoplasmatic
Membran fin (6,5-7nm), elastic, lipsit de rezisten

mecanic.
Structur trilaminat - fosfolipoproteic.

Mezozomii - structuri membranare care se formeaz prin

invaginarea membranei citoplasmatice sub form de

buzunar, prezente la bacteriile gram-pozitive i ocazional
la cele gram-negative.
Ei sunt n contact direct cu materialul nuclear fiind implicai
n diviziunea cromozomului.

Funciile membranei citoplasmatice:

permeabilitate selectiv - barier osmotic ce regleaz

schimburile celulei bacteriene.

secret enzime hidrolitice n mediul nconjurtor,
ndeplinete rolul mitocondriilor de la celulele eucariote,
fiind centrul energogenezei celulare,
este sediul sintezei acizilor grai, a fosfolipidelor,
este implicat n sinteza peretelui celular, al
polizaharidelor capsulare, participnd activ la creterea i
diviziunea celulei bacteriene i la formarea sporului
bacterian.

Structuri celulare obligatorii

1. peretele celular
2. membrana citoplasmatic
3. materialul nuclear
4. citoplasma

3. Materialul nuclear

nucleoid (echivalent nuclear) - structur primitiv

n comparaie cu nucleul celulelor eucariote.

format dintr-o molecul circular de ADN, organizat
sub forma unui cromozom haploid care este n contact
direct cu citoplasma datorit lipsei membrane nucleare.
Molecula de ADN dublu spiralat este la rndul ei
suprahelicat n jurul unui miez de ARN, dispoziie
necesar funcionalitii materialului nuclear.
Funcia nucleului bacterian const n depozitarea
informaiei genetice. ADN suportul material al ereditii.

 n afar de ADN-ul cromozomial, la unele

bacterii sunt prezente n citoplasm

molecule circulare de ADN plasmide,
care se replic independent de
cromozomul bacterian i care au rol n
rezistena bacteriilor la antibiotice.

Structuri celulare obligatorii

1. peretele celular
2. membrana citoplasmatic
3. materialul nuclear
4. citoplasma

4. Citoplasma
situat ntre materialul nuclear i faa intern a

membranei citoplasmatice,
sistem coloidal alctuit din 80% ap, n care se
gsete o cantitate mare de molecule organice,
ioni anorganici, enzime, ARN, vacuole i incluzii,
este lipsit de organitele celulare prezente la celulele

eucariote, cum sunt reticulul endoplasmatic, aparatul Golgi,

mitocondriile, centrul celular, ergastoplasma.

 Ribozomii. O celul bacterian are aprox. 20.000

de ribozomi ce conin 80-90% din ARN-ul

citoplasmatic.
Reprezint sediul sintezelor proteice din celul.
Incluziile citoplasmatice - formaiuni structurale

inerte, temporare, de diferite dimensiuni, variind n

funcie de specia bacterian i condiiile de mediu.
Reprezint un material de rezerv care poate fi
folosit ca surs de energie.

Structuri celulare neobligatorii

1. capsula
2. cilii sau flagelii
3. pilii bacterieni
4. sporii

Structuri celulare neobligatorii

1. Capsula
Capsula - nveli compact, care apare ca un halou

clar ce nconjoar bacteria (nu se coloreaz Gram).

Dpv. chimic, capsula bacteriilor de interes medical este de

natur polizaharidic (Streptococcus pneumoniae,

Klebsiella etc.), cu excepia capsulei bacilului crbunos
care este polipeptidic.

Asigur rezistena bacteriilor la fagocitoz, fiind un

factor de virulen. Variantele necapsulate ale acelorai

specii sunt nepatogene.
- ex. S. pneumoniae capsulat produce la oarecele de laborator o
septicemie mortal, pe cnd varianta necapsulat nu este patogen.

Este sediul antigenelor capsulare K - permit diferenierea

unor serotipuri n cadrul speciei.

Funciile capsulei:
factor de aderen i colonizare a bacteriilor pe

suprafee;
protejeaz bacteriile de diferii ageni antibacterieni
din mediu, cum sunt: bacteriofagii, colicinele,
complementul,
lizozimul
sau
alte
enzime
bacteriolitice;
protejeaz bacteriile de aciunea fagocitelor, fiind un
factor de virulen;
reprezint sediul antigenelor capsulare K, importante
n identificarea acestor bacterii.

Structuri celulare neobligatorii

1. capsula
2. cilii sau flagelii
3. pilii bacterieni
4. sporii

2. Cilii sau flagelii bacterieni

apendici filamentoi ai speciilor bacteriene mobile,

ce servesc ca organe de locomoie. Ei sunt

prezeni mai ales la bacili.
dispoziia i numrul cililor sunt caracteristice
speciei.
S-au descris bacterii:
- atriche (fr cili),
- monotriche - cu un cil polar (Vibro cholerae),
- lofotriche - cu un smoc de cili situat la unul din polii bacteriei
(Pseudomonas fluorescens),
- amfitriche - cu cilii situai la ambii poli ai bacteriei (genul Spirillum) i
- peritriche - cu cilii dispui pe ntreaga suprafa a bacteriei
(Salmonella, E. coli, Proteus etc.).

Cilii bacterieni

 Cilii / flagelii sunt sediul antigenelor flagelare H,

importante n identificarea bacteriilor.

Structuri celulare neobligatorii

1. capsula
2. cilii sau flagelii
3. pilii bacterieni
4. sporii

3. Pilii bacterieni
Se gsesc la suprafaa unor bacterii gram-negative.
- Sunt apendici filamentoi, rigizi, mai scuri dect flagelii, n
numr mare (100-500/celul) i cu dispoziie n general
peritrich.
- Se evideniaz numai prin ME.

Din punct de vedere funcional, se mpart n:

sex pili - rol n transferul de material genetic ntre bacterii.
pili comuni sau pili de aderen (fimbrii) - servesc la
fixarea ferm a bacteriilor pe mediul de cultur sau pe
suprafaa celulelor, constituind un important factor de
virulen. n afar de aderen, pilii comuni mai au i
proprieti antifagocitare.

Structuri celulare neobligatorii

1. capsula
2. cilii sau flagelii
3. pilii bacterieni
4. sporii

4. Sporii
Unele bacterii se transform n spori, care sunt

forme de rezisten la factorii de mediu i care

apar endocelular n condiii nefavorabile de via.
Au un nveli rezistent, format din mai multe
straturi datorit cruia rezist n mediul extern
zeci de ani.
Sporogeneza se ntlnete numai la 2 genuri de

bacterii gram-pozitive de
Clostridium i Bacillus.

interes

medical:

Poziia sporului bacterian constituie un caracter

taxonomic.
Poate fi: central, terminal i subterminal.

STUDIUL MORFOLOGIC AL
BACTERIILOR
Examinarea microscopic este frecvent primul

pas n identificarea unor bacterii. Caracterele

morfologice i tinctoriale ncadreaz bacteriile n
unul din grupurile majore, stabilind conduita
diagnosticului bacteriologic.

Elementele
morfologice
importante
n
identificarea unei bacterii sunt: dimensiunea,
forma, aezarea, prezena unor structuri
speciale ca, de pild, endospori, flageli, capsul
sau incluzii intracelulare.

 Microscopul cu cmp luminos

Microscopul cu fond ntunecat
Microscopul cu contrast de faz
Microscopul cu raze UV (imunofluorescen)
Microscopul electronic

V
MULUMESC !!!