Sunteți pe pagina 1din 55

UNIVERSITATEA ,,VASILE ALECSANDRI BACU

FACULTATEA DE INGINERIE
SPECIALIZAREA: INGINERIE BIOCHIMIC

PROIECT LA DISCIPLINA
" BIOREACTOARE"

Coordonator:

Student:

Prof.dr.ing. NISTOR ILEANA DENISA

Marin Carmen Ioana

.L.drd.ing. URSU ALINA-VIOLETA

Semigrupa 1141B

BACU
2010

UNIVERSITATEA ,,VASILE ALECSANDRI BACU


FACULTATEA DE INGINERIE
SPECIALIZAREA: INGINERIE BIOCHIMIC

TEMA PROIECTULUI
" OBINEREA INDUSTRIAL A ACIDULUI
GLUTAMIC"

Coordonator:

Student:

Prof.dr.ing. NISTOR ILEANA DENISA

Marin Carmen Ioana

.L.drd.ing. URSU ALINA-VIOLETA

Semigrupa 1141B

BACU
2010
2

Cuprins
CAPITOLUL 1 DESCRIEREA PRODUSULUI FINIT......................5
1.1. Acidul glutamic- Generaliti.............................................................................5
1.2. Rolul ndeplinit n organism..............................................................................6
1.3. Surse de acid glutamic......................................................................................11
1.4. Efectele secundare ale consumului acidului glutamic...................................13

CAPITOLUL 2 CARACTERISTICILE PRODUSULUI FINIT.......13


2.1. Proprietile fizice.............................................................................................13
2.2. Proprietile chimice........................................................................................14

CAPITOLUL 3 BIOSINTEZA ACIDULUI GLUTAMIC..................15


3.1. Clasificarea bacteriilor productoare de acidglutamic...................................15
3.2. Metabolismul glucidelor..................................................................................17
3.3. Rolul biotinei n biosinteza acidului glutamic................................................18
3.4. Reglarea biosintezei acidului glutamic............................................................20

CAPITOLUL 4 TEHNOLOGIA OBINERII ACIDULUI


GLUTAMIC.............................................................................................21
4.1. Bioprocesul de obinere a acidului glutamic...................................................21
4.2. Alte metode de obinere....................................................................................22
4.3. Schema tehnologic de obinere a acidului glutamic.....................................23
4.4. Descrierea schemei tehnologice de obinere a acidului glutamic..................26
4.4.1. Pregtirea mediului de cultur i selecionarea microorganismelor......26
4.4.2. Sterilizarea mediului de cultur...............................................................27
4.4.3.Rcirea mediului de cultur i inocularea................................................28
4.4.4. Multiplicarea bacteriilor sau fermentaia................................................28
4.4.5. Filtrarea biomasei.....................................................................................31
4.4.6. Concentrarea soluiei................................................................................31
4.4.7. Cristalizarea soluiei..................................................................................31
4.4.8.Filtrarea cristalelor de acid........................................................................31
4.4.9. Dizolvarea cristalelor i refiltrarea acestora............................................31
4.4.10. Recristalizarea, filtarea i splarea noilor cristale de acid....................32
4.4.11. Uscarea i ambalarea..............................................................................32

CAPITOLUL 5 BILANUL DE MATERILE.....................................33


5.1. Faza de ambalare a produsului finit: pulberea pur de acid glutamic..........33
5.2. Faza de uscare..................................................................................................34
5.3.Faza de splare..................................................................................................34
5.4. Faza de centrifugare secundar......................................................................36
5.5. Faza de cristalizare avansat...........................................................................37
5.6. Faza de filtrare.................................................................................................37
5.7. Faza de dizolvare..............................................................................................38
5.8. Faza centrifugare primar...............................................................................39
5.9. Faza de cristalizare...........................................................................................40
5.10. Faza de concentrare.......................................................................................40
5.11. Faza de filtrare...............................................................................................41
5.12. Faza de multiplicare a bacteriilor..................................................................42
5.13. Faza de inoculare...........................................................................................42
5.14. Faza de rcire a mediului de cultur.............................................................43
5.15. Faza de sterilizare a mediului de cultur......................................................43
5.16. Faza de preparare a mediului de cultur......................................................44
3

Bilanul global de materiale................................................................................45

CAPITOLUL 6 BILANUL TERMIC LA OBINEREA ACIDUL


GLUTAMIC.............................................................................................47
6.1. Bilanul termic pentru operaia de rcire a mediului de cultur proaspt
sterilizat....................................................................................................................47
6.2. Bilanul termic pentru operaia de multiplicare a bacteriilor.........................47
6.3. Bilanul termic pentru operaia de cristalizare...............................................48
6.4. Bilanul termic pentru operaia de dizolvare...................................................49
6.5. Bilanul termic pentru operaia de cristalizare avansat................................50

CAPITOLUL 7 DIMENSIONAREA BIOREACTORULUI DE


FERMENTARE......................................................................................51
CONCLUZII............................................................................................53
BIBLIOGRAFIE.....................................................................................54

CAPITOLUL 1 DESCRIEREA PRODUSULUI FINIT


1.1. Acidul glutamic- Generaliti
Amino-acizii sunt combinaii organice care conin n molecul una sau mai
multe grupri amino i carboxilice. Aminoacizii sunt folosii de catre organism pentru
obinerea proteinelor.
Acidul glutamic (abreviat Glu sau E) este un alfa monoaminoacid dicarboxilic
alifatic, neesenial (deoarecepoate fi sintetizat i da ctre organism). Este codificat de
codonii GAA/GAG din lanul peptidic. Are un pH de 4,1.

L-aminoacizii pot fi obinui, industrial, din hidrolizate proteice (ex. L-cistein


din hidrolizat de pr), dar n urma unor procese laborioase i poluante; sinteza chimic
e o alt cale de producere a aminoacizilor, dar n form racemic (rezult ambele
forme D,L).
n prezent, majoritatea aminoacizilor se produc prin biosintez cu ajutorul
bacteriilor sau al enzimelor, cu avantajul obinerii selective numai a izomerului
asimilabil de ctre organismul uman: L-aminoacid.
Acidul glutamic a fost descoperit i identificat pentru prima dat n gluten de
dr. Karl Ritthausen (Germania, 1866). n 1883 Schultze i Bosshard i-au descris
proprietile, dup ce l-au separat din sucul de sfecl.
Profesorul Kikunae Ikeda (1864-1936) a ntreprins nc din 1907 cercetri
privind corelaia ntre coninutul n acid glutamic natural al unor produse alimentare
japoneze i gustul specific al acestora. Reueste s identifice prezena unui coninut de
peste 1% glutamat n unele tipuri de combu (condiment utilizat n Japonia).
Concomitent vizeaz aspectele practice, nregistrndu-i descoperirea ca patent
industrial (14805 din 1907).
Ikeda fundamenteaz trei aspecte: coninutul natural de acid glutamic din
alimente, determinarea unui gust specific (numit de el umami- dup cuvntul japonez
gustos sau delicios) i stabilirea compusului glutamic cel mai solubil n ap, respectiv
cel mai stabil, anume glutamatul de sodiu.
n 1917, la iniiativa sa, firma Ajinomoto Co. Inc. condus de Saburosuke
Suzuki asimileaz i pune la punct pn n 1920 o producie industrial de glutamat de
sodiu de biosintez obinut prin fermentarea melasei, separat i purificat. Pn n
prezent, aceast companie nc mai produce o treime din cele 1,5 milioane tone ale
produciei mondiale de MSG (glutamat monosodic). n anii 1920 deinea ns
monopolul absolut al acestui produs, care s-a rspndit n perioada interbelic n toat
Asia i a devenit un ingredient de baz al preparatelor culinare japoneze i chinezeti.
Dup cel de-al doilea rzboi mondial MSG este tot mai mult utilizat i n
SUA, ca urmare a rspndirii restaurantelor chinezeti, afluxului de populaie asiatic
pe coasta de est i deprinderilor alimentare ale militarilor americani care i-au efectuat
serviciul n Extremul Orient.
nceput cu acidul L-glutamic, biosinteza microbian de Corynebacterium
glutamicum a realizat, cu mutani ai acestei bacterii, ali aminoacizi importani, ca Llizin i L-treonin.
6

n prezent, utiliznd tehnica RMN cu 13C, s-a reuit descifrarea cilor


metabolice ale biosintezei bacteriene, cunoscnd, astfel, punctele cheie asupra crora
s-ar interveni prin recombinare genetic, supraexprimnd genele relevante (inginerie
metabolic).
Dezvoltarea n ultimii ani a metodelor de secveniere complet a genomului
bacterian a permis cunoaterea genomului Corynebacterium glutamicum.

1.2. Rolul ndeplinit n organism


Acidul glutamic (glutamat) este un aminoacid folosit de organism pentru a
construi proteine. Glutamatul este cel mai frecvent excitator (neurotransmitor) n
sistemul nervos central. Are rol n metabolismul celular i este poteniator de gust.
1.Neurotransmitor
Creierul folosete drept combustibil glucoza. Hipoglicemia (scderea cantitii
de glucoz din snge) duce la utilizarea aminoacizilor ca substraturi energetice
alternative. Exit peste o suta de aminoacizi cerebrali, dintre care doar trei:
glutamatul, acidul -aminobutiric (GABA) i glicina ntrunesc criteriile necesare
pentru

fi

considerai

neurotransmitori.

Glutamatul

este

principalul

neurotransmitor excitator, prevalent la mamifere, n timp ce GABA i glicina sunt


neurotransmitorii inhibitori.
Acidul glutamic are capacitatea de a colecta excesul de amoniac din organism,
care poate inhiba activitatea cerebral, convertindu-l n glutamin. Dat fiind faptul c
glutamina produce o sporire considerabil a nivelului de acid glutamic, un deficit al
acesteia poate determina carena celui de-al dolilea.
Acidul glutamic este un transmitor excitator major de la nivelul creierului.
Aproape toate celulele cerebrale au receptori care i rspund.
Ca neurotransmitor, glutamatul este sintetizat n mitocondria neuronului
presinaptic cu ajutorul glutaminazei mitocondriale din glutamin. Dup sintez, este
stocat n vezicule sinaptice, pentru a fi eliberat n sinaps n timpul neurotransmisiei.
Aciunea sinaptic a glutamatului este oprit prin recaptare, cu ajutorul pompelor
transportoare de glutamat, care se gasesc att presinaptic pe neuron, ct i pe glia

vecin. n glie, glutamatul este convertit n glutamin i la nevoie, neuronul va prelua


glutamina de aici si o va reconverti n glutamat.
Exist patru tipuri de receptori pentru glutamat. Ei rspund i controleaz
canalele cationice cu conductan mare, care sunt permeabile la Ca2+, Na+ i K+. n
cazul depolarizrii cu 20-30mV, din aceste canale ies ioni de Mg2+ i ali ioni,
permind intrarea n celul a Na+ i Ca2+. Aceste canale funcioneaz eficient numai
n prezenta glicinei. Cnd concentraia de glicin este redus, abilitatea glutamatului
de a deschide canalele respective crete. Majoritatea neuronilor care secret glutamat
se gsesc la nivelul cortexului cerebral i n hipocampus.
Cantitatea excesiv de glutamat este toxic pentru neuroni, prin influxul mare
de Ca2+ intracelular. Neurotoxicitatea glutamatului se realizeaz n dou faze, sub
influena acumulrii sale la nivel extracelular. Hipoxia, hipoglicemia, ischemia (lipsa
aportului de snge), convulsiile prelungite i traumatismele cerebrale determin
creterea glutamatului extra-neuronal. Aceste situaii provoac ntr-o prim faz
umflarea i distensia neuronilor, nsotite de creterea influxului de Na+, urmat n a
doua faz de intrarea i acumularea excesiv de Ca2+. Alterrile membranare i
mitocondriale, produse de acumularea de Na+ i Ca2+, provoac fenomene de
depolarizare prelungit i dereglri metabolice multiple intracelulare, ca urmare a
activitatii enzimelor dependente de Ca2+, de tipul fosfolipazei A. Excesul de radicali
liberi i de derivai ai acidului arahidonic rezultai produce o excito-toxicitate care
este ireversibil la nivelul principalelor ultrastructuri neuronale.
Bariera hemato encefalic (BHE), care controleaz tipul de molecule ce intr
n creier, nu permite trecerea glutamatului. Din acest motiv creierul i fabric
propriul su glutamat.
Glutamina este cel mai abundent aminoacid din organism. Este un
diaminoaminoacid monocarboxilic (Gln sau Q) condiionat-esenial, care a fost izolat
pentru prima dat n 1883 i sintetizat abia n 1933. Ea poate fi produs de
metabolism, ns n cazuri speciale: stres fizic i psihic, atacuri asupra sistemului
imunitar, malnutriie, sinteza glutaminei este inhibat, fiind nevoie de un aport extern.
Glutamina este prezent n fiacare celul a organismului uman. n cantitatea
cea mai mare se afl n muchi, snge, lichiul cefalo-rahidian, plmni i n tractul
digestiv.
Este precursorul acidului glutamic care, la rndul su, este precursorul acidului
-aminobutiric (GABA-neurotransmitor).
8

De asemenea, L-glutamina este aminoacidul liber care se afl n cea mai mare
cantitate n snge i n celulele musculare. n structura sa exist dou grupari aminice
(cu azot) dintre care una se elibereaz uor i astfel este principalul crus al
azotului n celule. Se cunoate faptul c 35 % din azotul care accede n celula
muscular este transportat de glutamin. Azotul, odat ajuns n celul, va fi utilizat n
procesele de sintez i cretere.
Concentraia

intramuscular

glutaminei

scade

accentuat

dup

antrenamente extenuante ca urmare a intensificrii proceselor catabolice. De


asemenea, administrarea glutaminei va crete depozitele de glicogen muscular i va
contracara efectele neplcute ale acumulrii acidului lactic, n urma activitilor fizice.
Celulele intestinului subire, celulele renale i cele ale sistemului imunitar sunt
mari consumatoare de glutamin, pe care o folosesc ca substrat energetic. Pe lng
faptul c are un rol important n dezvoltarea inteligenei (ridicnd chiar i coeficientul
de inteligent al copiilor retardai), glutamina s-a dovedit util i n tratamentul
mpotriva alcoolismului. Totodat, s-a descoperit c are rol n vindecarea ulcerelor i
atenuarea oboselii, putnd trata depresiile. n ultimul timp a fost folosit cu rezultate
bune n tratamentul unor boli ca senilitatea i schizofrenia.

2. Poteniator de arom
Acidul glutamic este un poteniator de arom (glutamatul monosodic MSG,
sarea acidului glutamic), obinut prin biosintez din materii prime vegetale sau
animale.
n ultimele decenii s-au desfurat la nivel mondial nenumrate discuii n
contradictoriu cu privire la efectele consumului de MSG , adugat ca aditiv in diverse
alimente. S-a afirmat c acest adaos, devenit aproape universal mai ales n conservele
de carne i pete, sosuri, dressinguri, n unele condimente complexe ( tip Vegeta,
Delikat etc.), are drept scop s atenueze i s mascheze gustul natural i adesea mai
puin savuros al unor preparate. Aceeiai acuzaie s-a adus patronilor de restaurante cu
profil asiatic care funcioneaz pretutindeni n lume, bnuii c exagereaz n folosirea
MSG.

nc de la nceputul secolului trecut (1907-1908), profesorul Ikeda a emis


ideea c ansamblul de compui glutamici, n cantitate mai mare sau mai mic,
imprim i confer un gust specific distinct alimentelor n care se afl.
Treptat s-a confirmat c acesta este un gust distinct, la fel de relevant precum
sunt celelalte patru gusturi de baz, dulce, srat, amar i acru, fiind considerat n
prezent al cincilea gust de baz.
Este totui un gust relativ greu de definit, muli caracterizndu-l prin
calificativele bogat, plin, corpolent, consistent, asociat cu aroma de carne, intensiv,
ntr-un cuvnt-delicios (umami).
Ikeda a fcut o paralel ntre sare, care este produsul specific pentru gustul
srat i glutamatul de sodiu- produsul specific pentru gustul delicios. n prezent s-a
stabilit c doar configuraia L a acidului glutamic liber determin proprietile legate
de gust.
Mai recent, n urma unor studii aprofundate privind fiziologia i biochimia
intim a formrii gusturilor de baz n cavitatea bucal, continuat prin reflectarea lor
la nivel cerebral, s-a confirmat c gustul umami, alturi celelalte gusturi de baz, are
proprii receptori specifici.
Cercettorii Nirupa Chaudhari and Stephen Roper de la Universitatea din Miami
(1997) i-au bazat cercetrile lor asupra receptorului umami pe un cunoscut receptor
proteic din creier: mGluR4 - special pentru glutamat, care joac un rol important ca
neuro-transmitor. ntr-adevr, au reuit s gseasc o protein foarte asemntoare
pe limb, cu singura diferen c este mult mai puin senzitiv dect cea din creier. Ei
au numit receptorul taste-mGluR4. Marea sensibilitate a acestui receptor neural
este explicabil, deoarece concentraia glutamatului n sistemul nervos este mult mai
redus dect n cavitatea bucal, atunci cnd consumm un produs specific mai bogat
n glutamai.
n Food Reviews International, din 2002, ali doi oameni de tiin din SUA, dr.
Ch. S. Zuker i dr. N. J. P. Ryba, au abordat de civa ani un studiu mai general, de
identificare a receptorilor celulari care permit recunoaterea gustului la fiinele
umane. Zuker a stabilit c aceti receptori pot fi deschii (pot opera) pe baza anumitor
coduri sau chei, fiecare corespunztoare unui anumit gust. mpreun, cei doi au
identificat receptorii pentru gusturile dulce i amar. n continuare, au identificat i un
receptor numit T1 R1+3 considerat c este deschis de gustul aminoacizilor.

10

Gustul amar ne permite s recunoatem eventuale substane toxice. Gustul prea


acru ne pune n gard asupra consumului de fructe nc nemature, necoapte. Gustul
srat ne ajut s recunoatem prezena cationilor de Na+, care prezint o mare
importan pentru organism. Gustul dulce este n mod evident asociat cu senzaia de
plcere i cu secreia de endorfine n creier, situaie care apare i atunci cnd
consumm alimente cu gust delicios. Ambele clase de substane, glucidele solubile
i aminoacizii sunt deosebit de importante pentru metabolism. Bernd Lindemann, un
cercettor de la Universitatea Saarland din Germania consider c gustul umami
caracteristic aminoacizilor ne cluzete spre proteine, care nu au un gust propriu.
E621 - Glutamat monosodic, fabricat din melas (care este obinut din zahr)
prin fermentaie, este sarea de sodiu a acidului glutamic. Mai poate fi ntlnit sub
denumirile: glutamat de sodiu, monosodium glutamate, natrium glutaminat.
Glutamatul se folosete cel mai mult n alimentele fabricate artificial i n
semipreparate gen: supe concentrate, sosuri, condimente, mezeluri, ngheat, budinci,
etc. Rolul lui este de a da impresia creierului c acel aliment este foarte gustos.
Glutamatul este interzis n Australia, ns este tolerat n Statele Unite. Majoritatea
persoanelor sunt sensibile la glutamat invocnd simptome ca grea, dureri de cap,
ameeli, palpitaii, slbiciune i oboseal. Toate acestea sunt cunoscute sub denumirea
generic de simptomul mncrii chinezeti.
Folosirea sa pe scar larg n industria alimentar a aprins mari discuii n
rndul medicilor, deoarece acesta suprastimuleaz activitatea celulei nervoase.
Aditivi:
Acidul glutamic E620;
Glutamatul monosodic E621;
Glutamatu monopotasic E622;
Glutamatul dicalcic E623;
Glutamatul monoamonic E624;
Glutamatul dimagnezic E625.
3. Rol n metabolismul celular
Acidul glutamic poate avea efecte protectoare asupra muchiului cardiac la
persoanele cu boli de inim. Preparatele injectabile intravenoase de acid glutamic (ca

11

glutamat monosodic), s-au dovedit a crete tolerana i exercitarea funciei cardiace la


persoanele cu angin pectoral stabil.

1.3. Surse de acid glutamic


n condiii normale, oamenii sunt n msur s ndeplineasc cerinele
organismului pentru acid glutamic fie din hran sau prin sinteza din molecule
precursoare. Din cantitatea total de glutamat ingerat, metabolizat i circulat
n organism, doar circa 4% este eliminat.
Coninutul de acid glutamic din alimente, alturi de coninutul n cistein i
glicin, au un important rol n mecanismul de aprare a corpului, prin producerea
glutationului cu proprieti antioxidante. La mamifere se constat creterea cantitii
de glutamat din laptele mamar de circa 10 ori, de la roztoare i ierbivore la primate
(cimpanzeu i om). Din cei 20 de aminoacizi identificai n laptele uman, acidul
glutamic este cel mai important (peste 20%).
Consumul zilnic de acid glutamic provenit din alimentele proteice variaz
ntre 10-20g, din care 1g glutamat liber. n schimb, n corpul uman se produc 48-50g
de glutamat pe zi. Corpul omenesc conine n medie 1800g de glutamat n proteinele
care l compun, ntre care circa 10g sunt n stare liber. O cantitate de aproximativ
16g este eliminat zilnic.
Studiile actuale au identificat un coninut specific n glutamai la numeroase
alimente de provenien natural, precum i la produsele prelucrate.
Un produs contemporan, este sosul de soia - un condiment de baz al
Extremului Orient, numit shoyu n Japonia i jiang yong n China. El se obine din
urmtoarele componente de baz: soia, gru, ap i sare. Un sos de soia conine circa
0,8% glutamat natural, format prin autoliza proteinelor din soia i din celelalte
ingrediente adugate, accentuat odat cu trecerea timpului. Sarea i condimentele,
microflora format i contactul cu oxigenul accentueaz nchiderea la culoare,
determinnd creterea coninutului n aminoacizi, ntre care predomin acidul Lglutamic.
n gastronomia mondial sunt cunoscute i alte sosuri, mai puin rspndite n
prezent, cu un coninut la fel de important de glutamat natural, Oyster sauce (0,9%
glutamat), sosul de pete Nam pra (0,95%), sosul de anchois-Anchovy sauce (0,63%)

12

i extractele de carne tip Bovril (0,5%). Se cunosc de asemenea anumite tipuri de


brnz (Parmezan, Emmental, Camembert etc.) cu un coninut de circa 0,6-1,2%
glutamat. Pe msura maturrii acestui tip de brnzeturi, coninutul lor n glutamat
crete.
Dintre produsele proaspete, boabele verzi i proaspete de mazre conin circa
0,2% glutamat ; ciupercile (mai ales Lentinus edodes, shitake) ; sparanghelul i
tomatele circa 0,14% glutamat, iar anumite tipuri de porumb ( zaharat) circa 0,13%.
La tomate, coninutul n glutamat sporete pe msura maturrii, fiind maxim la
fructele supramaturate. Prin deshidratare, la ciupercile parfumate Lentinus sporete
cantitatea de glutamat natural la valori supraunitare.
Printre produsele de origine animal, doar carnea de pete conine 0,14%
glutamat natural. Carnea de pasre are 0,044%, carnea de vit 0,033%, iar carnea de
porc conine doar 0,023% glutamat natural. La preparatele din carne, de exemplu la
unc, acest coinut sporete odata cu durata de conservare specific.
Glutamatul se ntlnete i n alimente naturale. Cele mai mari concentraii de
glutamat se gsesc n drojdie, ciuperci, roii, brnzeturi i extracte vegetale. De aceea,
unele semipreparate pot conine valori periculos de mari de glutamat fr a fi
aditivate cu E 621. El este ntlnit n mod natural n corpul uman i este responsabil,
alturi de ali nerotransmitori (ca acidul aspartic), de funcionarea corect a
sistemului nervos.

1.4. Efectele secundare ale consumului acidului glutamic


Consumul acidului glutamic ca supliment este, n general, lipsit de efecte
secundare pentru marea majoritate a oamenilor. Cu toate acestea, persoanele cu
afeciuni renale sau hepatice, ce nu pot consuma o cantitate mare de aminoacizi, nu
trebuie

s utilizeze suplimente de acest gen fr un consult de specialitate n

prealabil. Stimuleaz apetitul. Este neurotoxic i nerecomandat persoanelor sensibile


i copiilor. Poate declana maladiile Huntington, Alzheimer i Parkinson.
Efectele consumului n exces: poate provoca ameeli, grea, dureri de cap,
palpitaii.

13

CAPITOLUL 2 CARACTERISTICILE PRODUSULUI FINIT


2.1. Proprietile fizice
Formula molecular: C5H9NO4 ;
Masa molar: 147.13 g mol1 ;
Densitatea: 1.4601 (20 C);
Punctul de topire: 199 C;
Solubilitatea: Acidul glutamic este solubil n ap;
Se prezint sub form de pulbere alb, cristalin, cu gust acru i fr
miros,avand urmtoarea structur chimic:

Acidul glutamic, ca toi aminoacizii, este o substan amfoter, care dizolvat


n ap poate forma anioni i cationi, alturi de ionii H + i OH- eliberai simultan.
Avnd grupri aminice i carboxilice, formeaz ioni bipolari prin neutralizare intern,
iarpunctul izoelectric este la pH 3,2.
Solubilitatea acidului glutamic crete odat cu deplasarea ph-ului n mediu
acid saumediu bazic. n mediu acid este solubil n ap sub form de clorhidrat, iar n
mediu bazic sub form de sare.

2.2. Proprietile chimice

Reactani

Produi de reacie
14

Enzime

Glutamina + H2O

Glu + NH3

GLS, GLS2

NAcGlu + H2O

Glu + Acetat

necunoscut

Acid -cetoglutaric + NADPH + NH4+

Glu + NADP+ + H2O

GLUD1, GLUD2

Acid -cetoglutaric + -amino acid

Glu + -oxo-acid

Transaminaza

Acid N-formimino-L-glutamic + FH4

Glu + 5-formimino-FH4

FTCD

Tabel 1. Proprietile chimice ale acidului glutamic

UNDE:
NAcGlu acid N-acetil glutamic (C7N11NO5);
Acetat sarea acidului acetic ([CH3COO]);
Acid -cetoglutaric COOH-C-CH2-CH2-COOH;
Acid N-formimino-L-glutamic (C6H10N2O4);
FH4 acidul folic (C19H19N7O6);
GLS, GLS2 glutaminaze;
GLUD1, GLUD2 glutamat dehidrogenaze;

CAPITOLUL 3 BIOSINTEZA ACIDULUI GLUTAMIC


Pn n anul 1950 L-aminoacizii s-au obinut prin izolarea din produsele
naturale. Ulterior s-au pus la punct metode chimice de sintez, utilizate n scopuri
experimentale sau pentru producie restrns.
Descoperirea microorganismului productor de acid L-glutamic, Micrococcus
glutamicus (denumit ulterior Corynebacterium glutamicum), a impulsionat cercetrile
n vederea stabilirii unor metode comerciale pentru producerea aminoacizilor naturali.

3.1. Clasificarea bacteriilor productoare de acidglutamic

15

Au existat confuzii considerabile privind clasificarea bacteriilor productoare


de acid glutamic, din cauza multitudinii denumirilor date speciilor, ca:
Micrococcus glutamicus;
Brevibacterium flavum;
Brevibacterium lactofermentum;
Brevibacterium divaricatum;
Brevibacterium amoniogenes;
Brevibacterium thiogenitalis;
Microbacterium amoniophilum;
Corynebacterium lilium;
Corynebacterium callunae;
Corynebacterium herculis;
Corynebacterium melassecola.
Toate microorganismele enumerate produc acid glutamic cu un randament de
30-50% din glucoza consumat.
Chemotaxonomia reprezint un instrument important pentru clasificarea i
identificarea

microorganismelor

productoarede

acidglutamic.

Denumirea

de

Micrococcus glutamicus, la care este prezent acidul mezodiaminopimelic n peretele


celular, a fost schimbat n Corynebacterium. Tulpinile de Corynebacterium au fost
incluse n 13 grupuri i definite drept Corynebacterium sensum stricto, i anume cele
care conin n peretele celular acid mezodiaminopimelic, arabinoz, galactoz, acid
micotic (22-38 atomi de carbon n lan), MK-8 sau MK-9 ca menakinon major. Au
raportul molar de guanin + citozin n ADN de 51-59%.
Genul Micrococcus
Cuprinde coci cu dimensiuni de 0,3-3,5 m, caracterizai prin capacitatea de a
aprea n frotiuri sub forma unor grupri caracteristice n tetrad sau sarcina, uneori
asemntor stafilococilor.
-germeni aerobi, catalazo-pozitivi;
-au o larg rspndire n natur (sol, aer, ap, pielea omului i animalelor);
-se cultiv pe medii uzuale de cultur, agar cu snge;
-pe mediile solide formeaz colonii de dimensiuni variabile, netede, rotunde, lucioase,
opace, cel mai adesea pigmentate n gri-galben, pn la galben crem sau roz;
16

-micrococii au urmtorul comportament: coagulaz negativ, sensibilitate la bacitracin


i rezisten la furazolidon.
Genul Corynebacterium
- bacterii mici pleomorfe, Gram pozitive;
- bacili fini, forme cocoide sau chiar filamente, n care se pot observa granule
metacromatice;
- dispunerea n grupri caracteristice de palisadsau grupri diplo n V, L sau litere
chinezeti;
- se mpart n 3 grupe:

corinebacterii patogene pentru om i animal;

corinebacterii patogene pentru plante;

corinebacterii nepatogene cu capacitate mare de sintez a


aminoacizilor;

- speciile mai importante:


Corynebacterium diphteriae : produce difteria copiilor;
Corynebacterium pyogenes : produce piobaciloza la animale;
Corynebacterium pseudotuberculosis (C. ovis) : produce limfadenita
cazeoas a oilor i caprelor;
Corynebacterium equi : produce bronhopneumonia enzootic a
mnjilor;
Corynebacterium renale : produce pielonefrita taurinelor;
Corynebacterium glutamicus: producerea de acid glutamic;
- mai cuprinde numeroase specii nepatogene, comensale ale pielii i mucoaselor.
Micrococcus glutamicus are urmtoarele caracteristici:
- bacteriile din aceast specie sunt n form de bacili scuri, cocoidali, dispui
cte 3-7 n lanuri;
- sunt bacterii Gram-pozitive, nesporulate, imobile i aerobe;
- formeaz colonii galbene liniare, cu excepia speciei Corynebacterium
melassecola care prezint coloraie roz;
- au un procent molar de guanin + citozin n ADN de 53-55%;
- au nevoie de biotin ca factor esenial de cretere la 300C;
17

- forma celulelor n mediu este variabil, fiind n funcie de compoziia


mediului de cultur (concentraia biotinei i sursei de carbon), aeraie etc.
Sursele de carbon, frecvent utilizate, sunt : glucoza, zaharoza, acidul acetic i
etanolul.

3.2. Metabolismul glucidelor


Bacteriile productoare de acid L-glutamic au de obicei form de bastonae si
tind spre o form de V n timpul diviziunii. Dac tulpinile sunt cultivate pe un mediu
bogat, nu se observ un pleomorfism accentuat. Alungirea, creterea i ramificarea
areloc frecvent cnd bacteria este cultivat n mediu cu concentraie mic de biotin i
in prezena unui antibiotic.
Corynebacterium glutamicum asimileaz glucoza, fructoza, zaharoza, maltoza
i riboza.
Din studiile efectuate pe acest microorganism s-a stabilit c degradarea
glucozei la piruvat poate avea loc att pe calea Embden Meyerhof Parnas (EMP), ct
i prin unul hexozomonofosfailor (HMP).
n cazul HMP au fost evideniate dou enzime cheie ale unului i anume :
glucozo 6-fosfat dehidrogenaza i 6-fosfogluconat dehidrogenaza, ambele dependente
de NADP. Tulpina biosintetizeaz concentraii ridicate de acid L-glutamic din glucoz
sau D-riboz, ceea ce demonstreaz caceast cale este operativ.
Enzimele cii EMP au fost identificate la Brevibacterium flavum i anume:
hexokinaza, gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaza, triozofosfat izomeraza, fosfogliceratkinaza,enolaza, fosfogliceromutaza i piruvatkinaza.
n condiiile de aerare predomin unul HMP, favoriznd acumularea
glutamatului. n condiiile anaerobe predomin calea EMP, ceea ce duce la
acumularea acidului lactic. De aceea, echilibrul dintre condiiile aerobe i cele
anaerobe esteunul dintre factorii importani care controleaz producia glutamatului.
n ceea ce privete calea de biosintez care pornete dela compuii C 3 ai
ciclului acizilor tricarboxilici (TCA), studii folosind carbonul marcat radioactiv, au
demonstrat pentru Corynebacterium glutamicum c 13CO2 afost fixat n poziia C1 a
glutamatului, n prezena piruvatului i a enzimei malice NADP specifice care
particip la fixarea CO2.

18

Fosfoenolpiruvat carbixilaza (PEP) are rol cheie n intrarea compuilor C 3 n


ciclul TCA. PEP-carboxilaza este supus inhibiiei feed-back severe prin acid
aspartic, dar este activat de fructozo-1,6-difosfat sau acetil CoA. Inhibiia este
nlturat de acetil CoA.

3.3. Rolul biotinei n biosinteza acidului glutamic


Alt factor careinflueneaz biosinteza glutamatului este coninutul de biotin
din mediu. Astfel, la un coninut maxim de biotin, glutamatul sintetizat nu este
excretat n mediu i se acumuleaz intracelular. Prezena unei concentraii ridicate de
glutamat din celul inhib direct sau indirect citrat sintaza, conducnd la o cretere
intracelular a aspartatului. Ca urmare este inhibat PEP-carboxilaza, se acumuleaz
piruvatul, care va fi convertit la lactat sau succinat. Aceti acizi organici au o prezen
tranzitorie n timpul fermentaiei. n final, acizii sunt degradai la CO 2 H2O n ciclul
TCA sau glioxilat.
La un coninut sczut sau la deficien de biotin din mediu este activat unul
HMP, care favorizeaz formarea glutamatului prin aceea c furnizeaz NADPH 2
necesar sintezei acestuia din -cetoglutarat.
Se pare c biotina acioneaz indirect asupra procesului de biosintez,
influenndpermeabilitatea membranei plasmatice n cursul excreiei glutamatului n
mediu.
S-a observat c acidul glutamic se poate acumula i ntr-un mediu bogat n
biotin, dac se adaug penicilin sau derivai ai acizilor grai saturai cu C 16-C18, n
cursul fazei exponeniale de cretere.
Dup cum se tie, biotina catalizeaz indirect biosinteza acizilor grai
nesaturai prin aceea c intr n gruparea prostetic a acetil CoA-carboxilazei, enzim
care particip la sinteza componentelor fosfolipidice din membrana plasmatic.
Pornind de la aceast observaie, cecettorii japonezi au obinut mutante auxotrofe
dependente de acidul oleic de la Brevibacterium thiogenitalis, cu care au reuit s
obin acumularea acidului glutamic din mediu, independent de concentraia de
biotin.
Cercetrile cu aceste mutante au elucidat rolul biotinei n mecanismul
permeabilitii celulare la bacteriile glutamice.

19

Astfel, biotina influeneaz raportul dintre acizii grai saturi i nesaturai din
membrana plasmatic, raport de care depinde permeabilitatea membranei i, deci,
posibilitatea eliminrii glutamatului n mediu. Dac acest raport este mai mare de 1
(cnd acizii grai saturi sunt n cantitate mai mare), are loc eliminarea gluatamatului
intarcelular concomitent cu acumularea acestuia n mediu. Aceast situaie are loc n
cazul unor cantiti suboptimale de biotin.
Rezultatele obinute explic i constatrile cu privire la acumularea
glutamatului independent de concentraia de biotin din mediu, n cazul folosirii
derivailor acizilor grai saturai. Acetia modific echilibrul dintre acizii grai saturai
i cei nesaturai i, respectiv a fosfolipidelordin membrana plasmatic, prin faptul c
inhib activitatea acetil CoA-carboxilazei. Ca urmarea raportul va fi mai mic dect 1.
Adugarea penicilinei n faza lag de cretere inhib sinteza peretelui celular, iar
membrana celular va fi supus variaiilor de presiune osmotic, ceea ce are drpt
rezultat

modificarea

permeabilitii

acesteia,

deci

posibilitatea

acumulrii

extracelulare a glutamatului.

3.4. Reglarea biosintezei acidului glutamic


Biosinteza acidului glutamic a fost studiat n fermantaie cu o tulpin de
Brevibacterium flavum, care trebuie s ntruneasc urmtoarele caracteristici pentru
exprimarea ntregului potenial productiv:
- tulpinile productoare trebuie s aib o activitate sczut sau s fie lipsite de
-cetoglutarat dehidrogenaz, pentru ca acidul -cetoglutaric sintetizat s nu poat fi
transformat n acid

succinic, ci s fie aminat la glutamat de ctre glutamat-

dehidrogenaz. Prin aceasta, ns, are loc o inhibiie a ciclului TCA la nivelul cetoglutarat, succinat. Oxalacetatul necesar desfurrii biosintezei va fi procurat
printr-o reacie anaplerotic, care poate fi cel mai frecvent carboxilarea piruvatului
sau glioxilatului. Au fost evideniate i celelalte enzime implicate n ciclul TCA.
20

Astfel, izocitrat-dehidrogenaza necesit dreptcofactor NADP, iar NADPH + H+ format


reacioneaz cu glutamat-dehidrogenaza pentru a forma glutamatul. Acetatul este
ncorporat n acetil CoA de ctre acetatkinaz i fosfacetil transferaz, dar nu s-a
observat formarea direct a acetil CoA din acetat cu acetil-CoA-sintetaz. Mutantele
care nu asimileaz acetatul nu prezint unele dintre enzimele de mai sus sau izocitratliaza. Acetil CoA format din acetat este metabolizat prin ciclul glioxilat. Izocitratliaza i malat-sintetaza, enzime cheie n ciclul glioxilatului, sunt prezente att la
Corynebacterium glutamicum ct i la Brevibacterium flavum. Sinteza acestor enzime
este stimult pe medii coninnd acetat. Inhibiia izocitrat-dehidrogenazei are loc n
prezena concentrat a oxalacetatului i glioxilatului. Acest fapt joac un rol important
n trecerea TCA n ciclul glioxilat;
- tulpinile productoare trebuie s posede o L-glutamat-dehidrogenaz
insensibil la inhibiia feed-back manifestat de L-glutamat sau s fie inhibat numai
de concentraii mari ale acestuia;
- tulpinile productoare trebuie s aib permeabilitatea membranei plasmatice
alterat, pentru a permite eliminarea n mediu a acidului L-glutamic. Aceasta se
realizez prin folosirea unei concentraii suboptimale de biotin.
Cantitatea de biotin se ajusteaz, n funcie de concentraia sursei de carbon
din mediu, astfel:
1,5-2,0 g/l, pentru 5% zaharoz (sau alt glucid);
2,0-3,0 g/l, pentru 10% zaharoz (sau alt glucid);
4,0-8,0 g/l, pentru 15% zaharoz (sau alt glucid);
7,0-10,0 g/l, pentru 20% zaharoz (sau alt glucid).
Independent de concentaria de biotin din mediu, acumularea acidului Lglutamic se poate obine prin adaos de penicilin sau derivai ai acizilor grai saturai,
sau prin folosirea mutantelor auxotrofe de acid oleic.

CAPITOLUL 4 TEHNOLOGIA OBINERII ACIDULUI


GLUTAMIC
4.1. Bioprocesul de obinere a acidului glutamic

21

pH-ul se ajusteazla 6,8-7 i apoi mediul steril se inoculeaz cu o cultur de


10-15 ore ntr-un raport de 5-10%. n cursul desfurrii procesului, temperaturase va
menine la 310C, cu o bun aerare. pH-ul se menine ntre 6,0-7,5 cu NH 4OH, care se
adaug continuu, n scopul orientrii echilibrului n favoarea aminrii reductive a
acidului -cetoglutaric.
naceste condiii procesul decurge n dou faze. n prim faz (8-12 h) are loc
multiplicarea microorganismului, iar n cea de-a doua faz are loc acumularea
acidului L-glutamic, procesul fiind ncheiat n 30-35 h.
La o concentraie de 100 g/l surs de carbon se obin 50-60 g/l acid Lglutamic.
Aeraia bun reprezint un factor foarte important n desfurarea procesului
cu randament de transformare ridicat.
Producerea de glutamat pe baz de etanol ca surs de carbon s-a realizat cu
specii de Brevibacterium, obinndu-se randamente de 60 g/l glutamat. Tulpinile care
folosesc etanolul necesit biotin n mod similar cu tulpinile carefolosesc glucidele ca
surs de carbon.

4.2. Alte metode de obinere


Producerea de glutamat pe bazde n-parafine se poate realiza cu o tulpin auxotrof
de glicerol, Corynebacterium alkanolyticum, obinndu-se 40 g/l glutamat.
n Romnia s-a pus la punct un procedeu de biosinteza glutamatului. Prin
lucrri de mutagenez cu radiaii , folosind ca tulpin parental Brevibacterium
lactofermentum, s-a obinut o mutant, care produce pe un mediu standardizat, 6070g/l glutamat, n condiii de aeraie puternic:
glucoz 10-12%;
extract de porumb 0,3%;
uree 2-3%;
fosfai mono- i bipotasic cte 0,1 respectiv 0,15%;

22

sulfat de Mg 0,05%;
ap 84,5-87,55%.
Timpul de fermentaie este de 30-36 h.
Ureea este o sare solubil n ap ce conine circa 46% azot din s.u., utiliznduse sub form de soluie, prin diluare cu ap n cantitate de 10-12 litri la 1 kg de
substan.
Sulfatul de magneziu (MgSO4 7H2O), se utilizeaz ca surs de magneziu
la multiplicarea drojdiei. Produsul pulbere trebuie s conin 16,3% MgO i s nu
conin arsen mai mult de 0,0005%.
Extractul de porumb obinut prin concentrarea apelor de nmuiere ale
porumbului i obinerea de amidon poate fi o surs de microelemente i vitamine din
grupul B. n extract se afl aminoacizi cu rol de biostimulatori i vitamine, dintre care
biotina este prezent n cantiti apreciabile (150200 mg/100 g).

4.3. Schema tehnologic de obinere a acidului glutamic

MEDIU DE CULTUR

CAPTURAREA ACIDULUI
GLUTAMIC

STERILIZAREA MEDIULUI
DE CULTUR
23

SEPARAREA ACIDULUI
GLUTAMIC

BIOPROCES

PURIFICAREA ACIDULUI
GLUTAMIC

SELECIONAREA
MICROORGANISMELOR
CONDIIONAREA ACIDULUI
GLUTAMIC

AMBALAREA

24

Glucoz

Extract deporumb

Uree

Fosfai

Sulfai

Ap

Amestecare

Mdeiu de cultur

Sterilizarea mediului
de cultur

Rcirea mediului de
cultur

Aer

Inocul

Inocularea mediului
de cultur
H2SO4

Sterilizare aer

Aer steril

Multiplicarea bacteriilor

Filtrare biomas

Concentrare

Substan
tensioactiv

Cristalizare

Centrifugare primar

NaOH

Ap

Dizolvare

25

Crbune activ

Biomas celular

Ap

HCl

Soluie impur 1

Crbune activ

Filtrare

Reziduu

Cristalizare avansat

Centrifugare secundar

Ap

Soluie impur 2

Splare

Uscare

Ambalare

Acid glutamic,
pulbere pur

26

Ap evaporat

4.4. Descrierea schemei tehnologice de obinere a acidului glutamic


4.4.1. Pregtirea mediului de cultur i selecionarea microorganismelor
Mediu de cultur standardizat, special pentru sinteza acidului glutamic, format din :
glucoz 10-12%;
extract de porumb 0,3% ca substan uscat;
uree 2-3%;
fosfat mono- i bipotasic cte 0,1 respectiv 0,15%;
sulfat de Mg 0,05%;
ap 84,5-87,55%.
Un mediu de cultur = amestec de substane care asigur toate componentele
necesare pentru metabolismul celulei, si anume:
surse de carbon;
azot;
substane minerale;
factori de cretere;
la o concentraie a substantelor dizolvate corespunzatoare presiunii osmotice
celulare;
cu valori de pH optime cresterii i multiplicarii microoranismelor de cultivat.
Mediile

se

folosesc

pentru

izolarea,

multiplicarea

si

conservarea

microorganismelor sau pentru obinerea prin cultivare a produselor de biosintez


microbian. Mediile pot fi procurate de la firme productoare sau pot fi preparate n
laborator.
Cultura microorganismelor este utilizat pentru a crete numrul de celule
care se dorete a fi studiate. Microorganismele sunt adugate n mediul de cultur
care conine nutrieni pentru cretere.
Cultura este incubat una sau mai multe zile, la temperatura optim a fiecrui
organism.

n multe cazuri microorganismele sunt crescute pe plci cu agar.

Microorganismele se multiplic formnd colonii. O colonie crete n locul n care o


singur celul a fost innoculat. O colonie este ca o clon. Ea poate fi pur dac nu
exista n jurul ei alte tipuri de microorganisme n colonii care o pot contamina.

27

Mediile de cultur selective sunt medii definite sau complexe, cu o compoziie


chimic bine definit, care permit dezvoltarea unui numr restrns de microorganisme
sau chiar a unei specii. Aceste medii conin pe lng substane nutritive i inhibitori ai
altor microorganisme nsotitoare din microbiota din care se face izolarea culturii care
se dorete a fi selecionat.
Mediul de cultur, pentru producerea industrial a acidului L-glutamic, trebuie
s conin:
- o surs de carbon reprezentat de obicei de glucoz;
- o surs de azot reprezentat de sruri de amoniu, uree;
- extract de porumb, hidrolizat de soia;
- sruri de Ca, K, Mg, ale anionilor SO42- i PO43-;
- metalele: Fe, Zn, Mn, Co, trebuie s fie sub form de urme;
- biotin.
n prezent, n locul glucozei tehnice se folosete melasa ca surs de carbon sau
un amestec deglucoz i zaharoz, care dau rezultate mai bune dect glucoza pur.
Aceasta se datoreaz prezenei n melas a acizilor organici.
Pentru sinteza acidului L-glutamic se vor utiliza bacterii aparinnd genului
Brevibacterium lactofermentum.

4.4.2. Sterilizarea mediului de cultur


Procesele de cretere a biomasei microbiene impun, n marea lor majoritate,
absena total a sporilor de microorganisme strine, provenite din ap, aer sau materii
prime, care s-ar putea dezvolta n faza de fermentaie, infectnd cultura unic a
microorganismului util. Aceast cerin tehnologic se poate realiza prin sterilizare i,
mai rar, prin pasteurizare.
Sterilizarea este, prin urmare, procesul prin care are loc distrugerea sau
ndeprtarea microorganismelor patogene sau apatogene (att a formelor vegetative,
ct i a sporilor) din substane, preparate, spaii nchise, obiecte etc.
Sterilizarea termic prezint, ns, i o serie de inconveniente, generate, n
special, de reaciile secundare de degradare care au loc n timpul procesului de
sterilizare:
- denaturarea proteinelor i inactivarea lor;

28

- denaturarea vitaminelor i a unor factori de cretere;


- supranclziri care iniiaz reacii de oxidare a fenolilor i a acidului
ascorbic, de polimerizare a aldehidelor nesaturate, de caramelizare a hidrailor de
carbon i brunificare a mediului.
De asemenea, n timpul sterilizrii termice, se produc reacii de condensare a
gruprilor aldehidice, din zaharuri reductoare, cu gruprile aminice libere, din
aminoacizi sau proteine, cu formare de produi asemntori bazelor Schiff (reacia
Maillard), produi toxici pentru majoritatea microorganismelor. Pentru a fi evitat
apariia acestor compui, este recomandat sterilizarea separat a hidrailor de carbon
i a compuilor cu azot.
Sterilizarea mediului de cultur se realizeaz la cald, la o temperatur de
aproximativ 900C. Pe durata sterilizrii pH-ul mediului se meninela o valoare
cuprins ntre 6,8-7.
4.4.3.Rcirea mediului de cultur i inocularea
Dup sterilizare mediul de cultur este supus rcirii n vederea inoculrii cu
bacteriile productoare de acid glutamic. Rcirea mediului se face pn la temperatura
de 29-310C, temperatura optim la care are loc i nsmnarea.
Procesul de inoculare are loc n inoculator, durata acestui proces fiind de 1015h. Mediul de cultur se inoculeaz ntr-un raport de 5-10% inocul fat de cantitatea
mediului.
n cursul desfurrii procesului, temperatura se menine la 30 0C, cu o bun
aerare, iar ph-ul se menine ntre 6,0-7,5 cu NH4OH.
4.4.4. Multiplicarea bacteriilor sau fermentaia
Bioreactorul pentru producerea acidului glutamic este de tipul, acelai cu
inoculatorul.
Fermentaia are loc n dou etape: n prima etap are loc multiplicarea
microorganismului i dureaz ntre 18 i 24 ore, n inoculator; iar n cea dea doua
etap are loc acumularea acidului L-glutamic i are loc n intermediar. Durata fazei
finale este de 12-16 ore, procesul fiind ncheiat n 30-40 ore.

29

n ambele faze fermentaia se consider terminat atunci cnd coninutul de


zahr este consumat pn la aproximativ 0,8-0,9% din valoarea iniial. pH-ul se
menine constant la valoarea de 7,5-8,5, iar temperatura trebuie s fie de 29-310C.
Aeraia bun reprezint un factor foarte important n desfurarea procesului
cu randament de transformare ridicat. Debitul de aer steril administrat este de
aproximativ 1 litru aer/litru mediu de cultur/minut, sub o intens agitare.
Procesele industriale de fermentaie sunt, aproape n totalitate, procese aerobe
i, n marea lor majoritate, aseptice. Necesarul orar de aer steril variaz ntre 60 i 120
m3 aer/m3 mediu de cultur. n sterilizarea acestor debite mari de aer apar dificulti
generate, pe de o parte, de varietatea microorganismelor prezente (virui, bacterii,
spori bacterieni, fungi), iar pe de alt parte, de rezistena lor la temperaturi uscate.
Filtrele-lumnare sistem pentru filtrarea aerului
Carcasa filtrelor poate s includ unul sau mai multe elemente de filtrare
(filtre-lumnare). Filtrarea se realizeaz fie printr-o membran, fie prin trei straturi de
fibre nfurate n jurul unei evi poroase. Avantajele acestor filtre sunt reprezentate de
suprafaa ridicat de filtrare, posibilitatea sterilizrii unor debite mari de aer ntr-un
timp scurt, durat lung de funcionare, ntreinere simpl i schimbare rapid a
elementelor de filtrare (10 -12 minute).

Figura 1. Filtru lumnare pentru sterilizarea aerului


1 carcas; 2 membran; 3 ventil aerisire; 4 garnituri de etanare

30

Sterilizarea acestor filtre se face cu abur direct, iar condensul este ndeprtat
prin suflare cu aer steril. Experiena practic a confirmat durata mare de funcionare a
filtrelor-lumnare, care pot suferi 200 de sterilizri termice n timp de 3,5 - 4 ani.
Schema de principiu a liniei de purificare i sterilizare a aerului prin filtrare pe
material fibros este redat n figura 2.
Conform acestei scheme, aerul, separat de impuriti n filtrul (1), trece prin
compresorul (2), unde este comprimat adiabatic la 3 - 3,5 at, temperatura crescnd la
150 - 160C. Dup rcire n (3), aerul este introdus n separatoral de picturi (4),
filtrul principal cu material fibros (5) (prima treapt de sterilizare), filtrul individual
cu material fibros (a doua treapt de sterilizare), dup care ptrunde n fermentator.

Figura 2. Schema de purificare i sterilizare a aerului


Rcirea aerului n rcitorul (3) se face pn la apariia condensului, iar, dup
separarea lui, aerul saturat se prenclzete cu aer fierbinte pn cnd temperatura
de ieire din filtrul individual (6) depete cu cel puin 12C temperatura punctului
de rou. Stabilirea parametrilor de funcionare ai instalaiei de sterilizare se face
numai n funcie de parametrii termodinamici ai aerului.
Bioprocesul are un randament de 60-70 g acid glutamic/litru mediu de cultur
inoculat.
Dup terminarea fermentaiei, biomasa se aciduleaz cu acid sulfuric la pH 6,5
i se adaug crbune activ (pentru coagularea biomasei) i un adjuvant (pentru
mrirea vitezei de filtare). Se nclzete amestecul la o temperatur de 70-750C, timp
de o or. n tot timpul nclzirii este necesar ca pH-ul s fie mai mic de 7, pentru a se
evita degradarea acidului glutamic. Dup terminarea coagulrii, biomasa se rcete la
50-550C.

31

4.4.5. Filtrarea biomasei


Amestecul obinut n urma fermentrii trebuie filtrat pentru recuperarea
produsului important- acidul glutamic i ndeprtarea biomasei.
Filtrarea se realizeaz pe filtru de pres. Lichidul filtrat treceintr-un rezervor n
vederea acumulrii, iar cnd cantitatea de lichid este suficiet, trece ntr-un alt
rezervor prevzut cu agitare.
4.4.6. Concentrarea soluiei
Lichidul filtrat ajunge n evaporator, unde se concentreaz, n vedereaeliminrii apei,
sub vid. Temperatura la care are loc procesul este de 50-550C, iar pH-ul se menine la
valoarea de 6,5. Procesul este terminat cnd se atinge o densitate a mediului de cultur
de 1,20 g/cm3, n urma acestuia rezult o soluie concentrat de acid glutamic. Apa
evaporat este preluat de un condensator i rcit.
4.4.7. Cristalizarea soluiei
Soluia concentrat ajunge n cristalizator, unde se aciduleaz cu HCl, pn la
punctul izoelectric al acidului glutamic i se adaug o substan tensioactiv care
favorizeaz cristalizarea. Apoi soluia se rcete lent la 10-120C.
4.4.8.Filtrarea cristalelor de acid
Masa cristalin obinut se filtreaz pe centrifug i se ndeprteaz soluia
impur. n urma cristalizrii i filtrrii acidul glutamic, sub form de cristale, nu are
puritatea necesar utilizrii n scop farmaceutic sau alimentar. De aceea cristalele
obinute sunt supuse unor noi metode de purificare.
4.4.9. Dizolvarea cristalelor i refiltrarea acestora
Cristalele obinute se dizolv n ap, se adaug o soluie de NaOH pn la pH
de 6,5 i crbune activ. Soluia se nclzete ulerior la 700C. Masa cristalin purificat
se filtreaz pe filtru de pres. Soluia purificat rezultat se trimite n cristalizator.
32

4.4.10. Recristalizarea, filtarea i splarea noilor cristale de acid


Soluia purificat este acidulat pn la pH de 3,2 (punctul izoelectric al acidul
glutamic) i se rcete la 10-120C timp de 24 h.
Cristalele de acid L-glutamic pur se separ prin centrifugare i se spal cu ap
rece, pentr ndeprtarea total a ionilor de Cl-.
4.4.11. Uscarea i ambalarea
Crsitalele pure de acid gluamic, fiind ude, trebuiesc uscate foarte bine, apa trebuia
ndeprtat n totalitate. Uscarea se poate face n usctor dulap sau usctor n pat
fluidizat. Temperatura aerului la intrarea n usctor este cuprins ntre 100 i1050C.

33

CAPITOLUL 5 BILANUL DE MATERILE


5.1. Faza de ambalare a produsului finit: pulberea pur de acid

glutamic

Cristale de acid glutamic pure i


uscate

Ambalare

Acid glutamic ambalat

CAg pure,uscate = Ag ambalat + P16


Unde:
CAg pure,uscate = Masa de cristale de acid glutamic, pure i uscate;
Ag ambalat = Masa de produs finit, Ag ambalat = 500 kg/arj;
P16 = Pierderile la ambalare, P16 = 0,02%;

CAg pure, uscate 1 0,0002 Ag ambalat


0,9998 CAg pure, uscate Ag ambalat
Ag ambalat
CAg pure, uscate
0,9998
CAg pure,uscate = 500,1 kg/arj

34

P16 = 0,02%

5.2. Faza de uscare


Cristale de acid glutamic pure i
umede

Ap evaporat

Uscare

Cristale de acid glutamic pure i


uscate

CAg pure,umede = CAg pure,uscate + Apev

(rel 1.)

Unde:
CAg pure,umede = Masa de cristale de acid glutamic, pure i umede;
CAg pure,uscate = Masa de cristale de acid glutamic, pure i uscate;
Apev = Masa de ap evaporat, Apev include i pierderile de uscare.

5.3.Faza de splare
.
Cristale de acid glutamic pure
nesplate

Ap rece1

Splare

Cristale de acid glutamic pure i


umede

35

Ap rece2

CAg pure,nesplate + Ar1 = CAg pure,umede + Ar2

(rel 2.)

Unde:
CAg pure,nesplate = Masa de cristale de acid glutamic, pure, nesplate;
CAg pure,umede = Masa de cristale de acid glutamic, pure i umede;
Ar1 = Masa de ap rece utilizat la splarea cristalelor;
Ar2 = Masa de ap rece rmas dup splare;
Cantitatea de ap de splare reprezint jumtate din cantitatea cristalelor
introduse n proces. Apa absorbit de cristalele de acid este de 12,5% din apa utilizat
la splare (Ar1) i este egal cu cantitatea de ap evaporat n procesul de uscare.

Ar1 =

CAg pure, nespalate


2

Apev = 12,5% din Ar1 Apev = 0,125 Ar1


Ar2 = 87,5% din Ar1 Ar2 = 0,875 Ar1

CAg pure, nespalate

CAg pure, nespalate


CAg pure, nespalate
0,875
CAg pure, umede
2
2

Din (rel 1.) i (rel 2.):


CAg pure,umede = 1,0625 CAg pure,nesplate
CAg pure,umede = 500,1 +0,0625 CAg pure,nesplate
1,0625 CAg pure,nesplate = 500,1 +0,0625 CAg pure,nesplate

CAg pure,nesplate =500,1 kg/arj


CAg pure,umede = 531,3563 kg/arj
Ar1 = 250,05 kg/arj
Ar2 = 218,7938 kg/arj
Apev = 31,2562 kg/arj

36

5.4. Faza de centrifugare secundar


Cristale de acid glutamic pure n
soluie

Centrifugare
secundar

Soluie impur 2

Cristale de acid glutamic pure


nesplate

CAg pure, n soluie = CAg pure, nesplate + Simp2


Unde:
CAg pure, n soluie = Masa soluiei impure ce conine cristale de acid glutamic, pure;
CAg pure,nesplate = Masa de cristale de acid glutamic, pure, nesplate;
Simp2 = Masa soluiei impure2, ce rezult n urma separrii i reprezint 10% din
soluia supus centrifugrii secundare;
Pierderile (0,5%) le putem considera ca eliminate odat cu soluia impur.
Simp2 = 0,1 CAg pure, n soluie + 0,005 CAg pure, n soluie
Simp2 = 0,105 CAg pure, n soluie
0,895 CAg pure, n soluie= CAg pure, nesplate

CAg pure, n soluie=

C Ag pure, nespalate
0,895

CAg pure, n soluie= 558,7709 kg/arj


Simp2 = 58,6709 kg/arj

37

5.5. Faza de cristalizare avansat


Soluie purificat

Cristalizare
avnsat

P12 = 0,7%

Cristale de acid glutamic pure n


soluie

Sp = CAg pure, n soluie + P10


Unde:
Sp = Masa soluiei purificate, ce va fi supus cristalizrii avansate;
CAg pure, n soluie = Masa soluiei impure ce conine cristale de acid glutamic, pure;
P12 = Pierderile rezultate la cristalizare, P12 = 0,7%;
Sp(1-0,007)= CAg pure, n soluie
0,993Sp = CAg pure, n soluie

Sp

C Ag pure, in solutie
0,993

Sp = 562,7097 kg/arj

5.6. Faza de filtrare


Soluie cristalin dizolvat

Filtrare

38

Reziduu = 3%

Soluie purificat

Scd = Sp +R
Unde:
Scd = Masa de soluiecristalin dizolvat;
Sp = Masa soluiei purificate, ce va fi supus cristalizrii avansate;
R = Masa de reziduu eliminat la filtrare;
Pierderile sunt incluse n masa reziduului,fiind eliminate odat cu acesta.

Scd (1 0,03) Sp
0,97 Scd Sp
Sp
Scd
0,97

Scd = 580,1131 kg/arj

5.7. Faza de dizolvare


Soluie cristalin filtrat

Ap

Dizolvare

Soluie cristalin dizolvat

Scf +Ap = Scd + P10


Unde:
Scf = Masa de soluie cristalin filtrat;
Scd = Masa de soluie cristalin dizolvat;
P10 = Pierderile rezultate la dizolvarea cristalelor, P10 = 0,02%;

39

P10 = 0,02%

Ap = Masa de ap utilizat la dizolvare, Ap = 10% din amestecul introdus la


dizolvare ;

0,9998 (Scf Ap) Scd


Scd
Scf Ap
0,9998
Scf + Ap = 580,2292 kg/arj
Ap = 58,0229 kg/arj
Scf = 522,2063 kg/arj

5.8. Faza centrifugare primar


Cristale de acid glutamic nepure n
soluie

Centrifugare primar

Soluie impur 1

Soluie cristalin filtrat

CAg nepure, n soluie = Scf + Simp1


Unde:
CAg nepure, n soluie = Masa soluiei impure ce conine cristale de acid glutamic, nepure;
Scf = Masa de soluie cristalin filtrat;
Simp1 = Masa soluiei impure2, ce rezult n urma centrifugrii secundare i reprezint
10% din soluia supus centrifugrii;
Pierderile (0,5%) le putem considera ca eliminate odat cu soluia impur.
Simp1 = 0,1 CAg nepure, n soluie + 0,005 CAg nepure, n soluie
Simp1 = 0,105 CAg nepure, n soluie
0,895 CAg nepure, n soluie = Scf
Scf

CAg nepure, n soluie =


0,895
CAg nepure, n soluie= 583,4707 kg/arj
40

Simp1 = 61,2644 kg/arj

5.9. Faza de cristalizare


Soluie concentrat

Cristalizare

P8 = 0,7%

Cristale de acid glutamic nepure n


soluie

Sc = CAg nepure, n soluie + P8


Unde:
Sc = Masa soluiei concentrate, ce va fi supus cristalizrii;
CAg nepure, n soluie = Masa soluiei impure ce conine cristale de acid glutamic, nepure;
P8 = Pierderile rezultate la cristalizare, P8 = 0,7%;
Sc(1-0,007)= CAg nepure, n soluie
0,993Sc = CAg nepure, n soluie

Sc

C Ag nepure, in solutie
0,993

Sc = 587,5838 kg/arj

5.10. Faza de concentrare


Soluie filtrat

Concentrare

Soluie concentrat

41

Ap evaporat

Sf = Sc + Apev
Unde:
Sf = Masa soluiei filtrate, ce va fi supus concentrrii;
Sc = Masa soluiei concentrate, ce va fi supus cristalizrii;
Apev = Masa de ap eliminat prin concentrarea soluiei;
Apev reprezint 15,5% din Sf Apev = 0,155 Sf

0,845 Sf = Sc

Sf

Sc
0,845 Sf = 695,3654 kg/arj
5.11. Faza de filtrare
Mediu de cultur multiplicat

Biomas celular

Filtrare biomas

Soluie filtrat

Mcm = Bmc + Sf
Unde:
Mcm = Masa mediului de cultur multiplicat;
Bmc = Masa de biomas eliminat, Bmc reprezint 10% din Mcm;
Sf = Masa soluiei filtrate, ce va fi supus concentrrii;

0,9Mcm = Sf

Mcm

Sf
0,9 Mcm = 772,6282 kg/arj

42

5.12. Faza de multiplicare a bacteriilor

Mediu de cultur inoculat

Multiplicare

Mediu de cultur multiplicat

Mci = Mcm
Unde:
Mci = Masa mediului de cultur inoculat;
Mcm = Masa mediului de cultur multiplicat;

Mci = 772,6282 kg/arj

5.13. Faza de inoculare


Mediu de cultur rcit

Inocul

Inoculare

Mediu de cultur inoculat

Mcr +I = Mci
Unde:
Mcr = Masa mediului de cultur rcit;
I = Masa de inocul, I = 5% din Mcr;

43

Mci = Masa mediului de cultur inoculat;


Mcr + 0,05 Mcr = Mci
Mci = 1,05 Mcr Mcr = 735,8364 kg/arj

5.14. Faza de rcire a mediului de cultur


Mediu de cultur steril

P3 = 0,01%

Rcire

Mediu de cultur rcit

Mcs =Mcr + P3
Unde:
Mcs = Masa mediului de cultur steril;
Mcr = Masa mediului de cultur rcit;
P3 = Pierderile rezultate la rcire, P3 = 0,01%;

0,9999 Mcs = Mcr

Mcs

Mcr
0,9999 Mcs = 735,9099 kg/arj

5.15. Faza de sterilizare a mediului de cultur


Mediu de cultur

Sterilizare

Mediu de cultur steril

Mc =Mcs + P2

44

P2 = 0,02%

Unde:
Mc = Masa mediului de cultur proaspt preparat;
Mcs = Masa mediului de cultur steril;
P2 = Pierderile rezultate la sterilizare, P2 = 0,02%;

0,9998 Mc = Mcs

Mc

Mcs
0,9998 Mc = 736,0571 kg/arj

5.16. Faza de preparare a mediului de cultur

Glucoz

Extract de porumb

Uree

Fosfai

Sulfai

Amestecare

Mediu de cultur

Glucoz = 12% Glucoz = 88,3268 kg


Extract de porumb = 0,3% Extract de porumb =2,2082 kg
Uree = 3% Uree = 22,0817 kg
Fosfai = 0,15% Fosfai = 1,1041 kg
Sulfai = 0,05% Sulfai = 0,3680 kg
Ap = 84,5% 621,9683 kg

45

Ap

Bilanul global de materiale


Materiale intrate

Materiale ieite

Nr.
Crt.

Denumire material

U.M.

Cantitat
e

Nr.
Crt.

Denumire material

U.M.

Cantitate

Cristale de acid
glutamic pure i
uscate

kg/arj

500,1

Acid glutamic
ambalat
Pierderi 16

kg/arj

500

kg/arj

0.1

kg/arj
kg/arj

500,1
500,1

kg/arj
kg/arj

31,2562
531,3563

kg/arj

531,3563

kg/arj
kg/arj
kg/arj

218,7938
750,15
500,1

kg/arj
kg/arj

58,6709
558,7709

kg/arj

558,7709

kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj

3,9388
562,7097

kg/arj

580,1131

Total
2

Cristale de acid
glutamic pure i
umede

Total
3

Cristale de acid
glutamic pure
nesplate
Ap rece 1

Total
Cristale de acid
glutamic pure n
soluie
Total
5

Total
6
Total

Soluie purificat

Soluie cristalin
dizolvat

kg/arj
kg/arj

500,1
531,3563

Total
2

kg/arj

531,3563

Total

kg/arj

500,1

kg/arj
kg/arj
kg/arj

250,05
750,15
558,7709

Total
4

kg/arj

558,7709

Total

kg/arj

562,7097

kg/arj
kg/arj

562,7097
580,1131

Total
6

kg/arj

580,1131

Total

46

Cristale de acid
glutamic pure i
uscate
Ap evaporat
Cristale de acid
glutamic pure i
umede
Ap rece 2
Cristale de acid
glutamic pure
nesplate
Soluie impur 2
Cristale de acid
glutamic pure n
soluie
Pierderi 12
Soluie purificat
Reziduu

Soluie cristalin
filtrat
Ap

Total
Cristale de acid
glutamic nepure n
soluie
Total
Soluie concentrat

Total
10
Total
11

Soluie filtrat

Mediu de cultur
multiplicat

Total
12

Mediu de cultur
inoculat

Total
Mediu de cultur
rcit
Inocul
Total
Mediu de cultur
steril
Total
Mediu de cultur

kg/arj

522,2063

kg/arj

58,0229

kg/arj
kg/arj

580,2292
583,4707

kg/arj
kg/arj

Total
Total

Total
8

Total
9

kg/arj
kg/arj

587,5838
695,3654

Total
10

kg/arj
kg/arj

695,3654
772,6282

Total
11

kg/arj

772,6282

Total

kg/arj

772,6282

12

kg/arj
kg/arj

772,6282
735,8364

Total
13

kg/arj
kg/arj
kg/arj

36,7918
772,6282
735,9099

Total
14

kg/arj
kg/arj

Total
Glucoz
Extract de porumb
Uree
Fosfai
Sulfai
Ap

583,4707
587,5838

735,9099
736,0571

Total
15

kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj

736,0571
88,3268
2,2082
22,0817
1,1041
0,3680
621,9683

Total
16

kg/arj
kg/arj

736,0571
10455,76

Total
Total

47

Soluie cristalin
dizolvat
Pierderi 10
Soluie cristalin
filtrat
Soluie impur 1

Cristale de acid
glutamic nepure n
soluie
Pierderi 8
Soluie concentrat
Ap evaporat
Soluie filtrat
Biomas celular

Mediu de cultur
multiplicat
Mediu de cultur
inoculat

Mediu de cultur
rcit
Pierderi 3
Mediu de cultur
steril
Pierderi 3
Mediu de cultur

kg/arj

580,1131

kg/arj

0,1161

kg/arj
kg/arj

580,2292
522,2063

kg/arj

61,2644

kg/arj
kg/arj

583,4707
583,4707

kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj

4,1131
587,5838
587,5838
107,7816
695,3654
695,3654
77,2628

kg/arj

772,6282

kg/arj

772,6282

kg/arj
kg/arj

772,6282
772,6282

kg/arj
kg/arj

772,6282
735,8364

kg/arj
kg/arj
kg/arj

0,0735
735,9099
735,9099

kg/arj
kg/arj
kg/arj

0,1472
736,0571
736,0571

kg/arj
kg/arj

736,0571
10455,76

CAPITOLUL 6 BILANUL TERMIC LA OBINEREA


ACIDUL GLUTAMIC

6.1. Bilanul termic pentru operaia de rcire a mediului de cultur


proaspt sterilizat

900C
800C

Rcirea
mediului de
cultur

200C
300C

Mcs Cp Mcs T Mcs mag Cp ag T ag


90 - 30
T Mcs
30 0 C 303,15K
2
Cp Mcs 3217,35 J/kg K

80 - 20
30 0 C 303,15K
2
Cp ag 4179 J/kg K
T ag

m ag

Mcs Cp Mcs T Mcs 735,9099 3217,35 303,15

566,566 kg/arj
Cp ag T ag
4179 303,15

6.2. Bilanul termic pentru operaia de multiplicare a bacteriilor

300C

850C
Multiplicare

400C

750C

48

Mci Cp Mci T Mci mag Cp ag T ag


75 - 30
T Mci
22,5 0 C 295,65K
2
Cp Mci 3217,35 J/kg K
85 - 40
22,50 C 295,65K
2
Cp ag 1880,75 J/kg K
T ag

m ag

Mci Cp Mci T Mci 772,6282 3217,35 295,65

1321,7149 kg/arj
Cp ag T ag
1880,75 295,65

750C

450C
Multiplicare

550C

65 C

Mci Cp Mci T Mci mag Cp ag T ag


75 - 55
T Mci
10 0 C 283,15K
2
Cp Mci 3217,35 J/kg K

65 - 45
10 0 C 283,15K
2
Cp ag 1868 J/kg K
T ag

m ag

Mci Cp Mci T Mci 772,6282 3217,35 283,15

1330,7363 kg/arj
Cp ag T ag
1868 283,15

6.3. Bilanul termic pentru operaia de cristalizare

550C

20C
Cristalizare

45 C

120C
49

Sc Cp Sc T Sc mag Cp ag T ag
55 - 12
T Sc
21,5 0 C 294,65K
2
Cp Sc 4082,5 J/kg K

45 - 2
21,5 0 C 294,65K
2
Cp ag 4181,55 J/kg K
T ag

m ag

Sc Cp Sc T Sc 587,5838 4082,5 294,65

573,66 kg/arj
Cp ag T ag
4181,55 294,65

6.4. Bilanul termic pentru operaia de dizolvare

120C

800C
Dizolvare

220C

700C

Scf Cp Scf T Scf mag Cp ag T ag


70 - 12
T Scf
29 0 C 302,15K
2
Cp Scf 3875,7 J/kg K

80 - 22
29 0 C 302,15K
2
Cp ag 4179,3 J/kg K
T ag

m ag

Scf Cp Scf T Scf 522,2063 3875,7 302,15

484,27 kg/arj
Cp ag T ag
4179,3 302,15

50

6.5. Bilanul termic pentru operaia de cristalizare avansat

700C
600C

20C
Cristalizare
avansat

120C

Sp Cp Sp T Sp mag Cp ag T ag
70 - 12
T Sp
29 0 C 302,15K
2
Cp Sp 3986,3 J/kg K

60 - 2
29 0 C 302,15K
2
Cp ag 4179,3 J/kg K
T ag

m ag

Sp Cp Sp T Sp 562,7097 3986,3 302,15

536,72 kg/arj
Cp ag T ag
4179,3 302,15

51

CAPITOLUL 7 DIMENSIONAREA BIOREACTORULUI DE


FERMENTARE
Bioreactorul de fermentare pentru obinerea acidului glutamic
Bioreactorul de fermentare are form cilindric, fiind confecionat din oel
inoxidabil;

1Vasul
reactorului; 2- Manta; 3- Izolaie termic exterioar; 4- Plac protectoare; 5- Duz
pentru introducerea inoculului; 6- Senzori de temperatur, de pH, pentru msurarea
nivelului de oxigen; 7- Agitator; 8- Sistem de dispersare aer n mediu; 9- ; 10Reductor de turaie; 11- Motor; 12- Duz de recoltare; 13- conectare manta; 14Supap cu racord de abur; 15- Geam pentru observare; 16- Racord pentru agent
antispumant i corector de pH; 17- Alimentare aer steril; 18- Capac detaabil; 19Duz alimentare mediu de cultur; 20- Evacuare aer; 21-Senzor pentru spum ; 22Palet pentru spargerea spumei ; 23- Geam pentru observare luminat;
CALCUL

Mci 30 o C

1528,8 kg/m 3

52

Mci = 772,6282 kg/arj

V Mci = 0,505 m3
Unde:

Mci 30 o C

Densitatea mediului de cultur inoculat la 300C;

Mci = Masa mediului de cultur inoculat;


V Mci = Volumul mediului de cultur inoculat;
= Gradul de umplere al bioreactorului, = 0,85;
Vt = Volumul total al bioreactorului;

Vt =

Vt =V Mci/

Vt = 0,5941 m3
Raport ntre dimensiuni :
H
2
D

Vt =

3,14 D D 2 D 3
m
4

D = 0,72 m
H = 1.5 m

CONCLUZII
n mod simplificat, am putea conceptualiza funcionarea creierului ca
reflectnd o balan ntre aminoacizii excitatori i cei inhibitori. Exist peste o sut de

53

aminoacizi cerebrali, dintre care doar trei, glutamatul, acidul gabaaminobutiric


(GABA)

glicina

ntrunesc

criteriile

necesare

pentru

fi

considerai

neurotransmitori.
Glutamatul, cel despre care vorbim in aceasta lucrare, este principalul
neurotransmitor excitator, prevalent la mamifere, n timp ce GABA i glicina sunt
neurotransmitorii inhibitori. Neurotransmisia glutamatergic afecteaz fiecare
neuron. Acest aminoacid este implicat n transmisia sinaptic rapid dar induce i
schimbri neuronale pe termen lung intervenind n plasticitate i alte funcii cognitive
superioare, d mari tulburri psihopatologice n cantitati mai mici dect normalul i
este neurotoxic n cantiti excesive.
Aminoacizii se pot sintetiza pe mai multe ci:
sintez chimic: procedeul este unul nu prea de dorit, deoarece n urma
acestuia rezult un amestec racemic de L- i D-aminoacizi, iar separarea
izomerilor

ridic

multe

probleme

tehnologice,

ce

au

ca

efect

scumpireaprodusului sintetizat;
extracie din preparatele enzimatice;
biosintez: cel mai economic procedeu de obinere i tototdat cel mai bine
dezvoltat din punct de vedere tehnologic
n acest proiect am prezentat ntreg procesul de obinere al acidului Lglutamic: schema tehnologic i dezvoltarea ei. Produsul finit obinut: pulbere
cristalin, alb de aminoacid ce servete ulterior altor procese din industria
famaceutic sau alimentar.

BIBLIOGRAFIE
Banu, C. Manualul inginerului de industrie alimentar, vol I, Ed Tehnic,
Bucureti, 1998
Banu, C., Moraru C. Biochimia produselor alimentare, Ed.Tehnic, Bucureti, 1972
54

Dabija Adriana Tehnologii i utilaje n industria alimentar fermentativ, Ed,


Gh. D. Pasat, Maria Turtoiu Bioreactore, Ed PRINTECH, Bucureti, 1998
Gh. D. Pasat, Maria Turtoiu Bioreactore II, Ed PRINTECH, Bucureti, 1999
C. Feofanovici Pavlov Procese i aparate n ingineria chimic, Ed Tehnic,
Bucureti, 1981
Macovei, M.V. Calcule de operaii i utilaje pentru procesarea termic i
biochimic n biotehnologie, Editura Alma Mater, Galai, 2001
Macovei, M.V. Culegere de caracteristici termofizice pentru biotehnologie i
industria alimentar. Tabele i diagrame, Editura Alma Mater, Galai, 2000
Jurcoane tefana Tratat de biotehnologii, vol I, Editura Tehnic, Bucureti 2005

55