TEHNOLOGII AVANSATE DE BIOREMEDIERE

Bibliografie
Cristea, V., Simone Denaeyer, 2004. De la biodiversitate la OGM-uri? Colectia Universitas Seria Biologie, Ed. Eikon,
Cluj-Napoca.
Denu I. (Eds.), 2000. Reabilitarea Ecologic si Managementul Siturilor Degradate De Industria Minier. Ed. Univ.De
Nord, Baia-Mare
Elena Gavrilescu, 2006. Evaluarea Ecosistemelor Acvatice. Ed. Sitech, Craiova.
Ghidra V. 2004. Ecotoxicologia Si Monitorizarea Principalilor Poluanti. Ed. Studia. Cluj -Napoca
Kiss t. tefanic Gh., Daniela Pa ca, Dragan-Bularda M., Eva Zborovschi, Cri an R., 1991. Enzimologia Mediului
nconjurtor. Enzimele i Fertilitatea Solului. Vol. I. Ed. Ceres, Bucure ti
Kiss tefan, Dragan-Bularda Mihail, Daniela Pa ca, 1993. Enzimologia Med iului nconjurtor. Enzimologia Solurilor
Tehnogene. Vol. Ii. Ed. Ceres, Bucure ti
Oros V. 2002. Reabilitare Ecologica A Siturilor Degradate Industrial. Ed.Univ.Transilvania, Brasov
Malschi Dana, 2009. Integrated Pest Management In Relation To Environmental Sustainability. Part I. Ecological
Management Of Wheat Pests. Course Notes And Practical Applications. Manual Online. Faculty Of Environmental
Sciences, Babe -Bolyai University, Cluj-Napoca. Bioflux Publishing House, P. 200.
Http://Www.Editura.Bioflux.Com.Ro/Carti-2009/
Malschi Dana, 2009. Biotehnologii Si Depoluarea Sistemelor Ecologice. (Tehnologii De Depoluare
Biologica,Tehnologii De Bioremediere. Reconstructia Ecologica). Note De Curs Si Aplicatii Practice. Manual In Format
Electronic. Facultatea De Stiinta Mediului. Universitatea Babes-Bolyai. Editura Bioflux, Cluj-Napoca. P. 200. 978-60692028-5-2. Http://Www.Editura.Bioflux.Com.Ro/Carti-2009/ .
MALSCHI DANA, 2011, Caiet de practic pentru laboratorul didactic de biotehnologii, format electronic,
http://enviro.ubbcluj.ro/cercetare/laboratoare/Laborator de biotehnologii.php/.
MALSCHI DANA, 2014. Indrumar de lucrari practice Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice, format
electronic, http://enviro.ubbcluj.ro/cercetare/laboratoare/Laborator de biotehnologii.php/

Importanta hidrocarburilor poluante

Hidrocarburile sunt un grup de compu i ce conin H i C. Reprezint cel mai important grup
de substane chimice datorit abundenei lor, importanei industriale, folosirii lor ca surs
primar de energie, dar i datorit toxicitii.
Hidrocarburile petroliere sunt substane chimice naturale folosite de ctre om pentru o
mulime de activiti, incluznd carburani pentru vehicule i nclzirea locuinelor.
Gazul natural, petrolul brut, smoala i asfaltul sunt tipuri de hidrocarburi petroliere ce conin
n proporii diferite
alcani (metan, etan, propan),
hidrocarburi aromatice (ex. benzen, toluen, etilbenzen i xilen, grup cunoscut sub numele
de BTEX) i
hidrocarburi policiclice aromatice (PAH, ex. naftalen, fenantren, antracen, benzo(a)pyren)
(Frick i colab, 1999).
Poluarea cu hidrocarburi este cauzat de erupii, accidente in timpul procesului de extracie i
transport, accidente asupra conductelor de transport a produselor finite (benzin i motorin), etc.
n funcie de direcia de deplasare a poluantului, pot fi identificate trei tipuri de poluare:

poluare descendent, produs de erupii, deversarea din careul sondei, spargerea conductelor i
bazinelor de stocare, etc.;
poluare ascendent, produs de ridicarea nivelului apei freatice ncrcat cu hidrocarburi, i
poluare suprapus, provocat de amestecul celor dou forme de poluare prezentate. Hidrocarburile
formeaz un film impermeabil la suprafaa solului, care impiedic circulaia
apei i schimbul de gaze, provocnd sufocarea rdcinilor i favoriznd procesele de reducere. Pe
msur ce mediul devine mai anaerob, numrul i activitatea metabolic a bacteriilor se reduce.

Existena hidrocarburilor n solurile cultivate afecteaz germinaia seminelor, cre terea

plantelor i producia. La contact, hidrocarburile pot penetra seminele i pot omor embrionul
ori afecta germinaia prin reducerea fluxului de ap ctre semine ori prin descre terea
oxigenului necesar pentru germinare.
Deoarece petrolul este bogat n carbon, raportul C:N din sol cre te, avnd o influen negativ
asupra activitii microbiologice i nutriiei plantelor cu azot (Overcash i Pal, 1979). O
sever salinizare a solului poate avea loc acolo unde apare poluarea cu hidrocarburi i ap srat;
o cre tere alarmant a sodiului schimbabil poate fi nregistrat.
Cercetrile au evideniat c, n condiii climatice normale, fr irigaii, ar trebui 5-10 ani
pentru a putea ndeprta din sol elementele poluante.
n ultimele decenii au fost instalate sute de mii de bazine de stocare subterane ( i bazine de
stocare la suprafaa solului) coninnd produse petroliere i substane chimice periculoase.
Multe din aceste bazine au fost abandonate ori i-au dep it perioada de via activ i sunt
prsite, constituind un risc serios pentru aprovizionarea cu ap de suprafa i subteran, dar i
pentru bunstarea i sntatea public.

La sfr itul anului 1996, in Romnia, 45,1% din populaie tria in zona rural. Pentru ace tia,
aprovizionarea cu ap potabil se fcea din freaticul superficial. Mici cantiti de benzin scurs
din tancurile petroliere subterane sau de suprafa pot contamina milioane de litri de ap freatic
potabil cu substane considerate a fi cancerigene, cum este benzenul.
6

Benzina, exceptnd componenii care conin sulf, oxigen i azot, este un amestec de
hidrocarburi. n orice benzin comercial exist mai mult de 100 de hidrocarburi diferite n
proporii variate. Compu ii aromatici (benzen i toluen), alcanii (n-hexan) i alte molecule cu
mai mult de 8 atomi de carbon sunt componentele principale ale benzinei.
Hidrocarburile aromatice ca benzenul i toluenul au coeficieni de partiie aer- ap mici i vor
tinde s se repartizeze n faza apoas. Alcanii ca n-hexanul au coeficieni de partiie aer - ap
mari, determinnd repartiia lor n aer. Ciclohexanul i 1-hexanul reprezint hidrocarburile cu
coeficieni de partiie intermediari.
n Ordinul Ministrului Apelor, Pdurilor i Proteciei Mediului nr.756 din 3 noiembrie 1997
pentru aprobarea Reglementrii privind evaluarea polurii mediului, sunt prezentate ca valori
ghid pentru coninutul total de hidrocarburi petroliere n sol urmtoarele:
valori normale: mai puin de 100 mg/kg;
valori de alert pentru soluri sensibile: 200 mg/kg;
valori de alert pentru soluri mai puin sensibile: 1.000 mg/kg;
valori de intervenie pentru soluri sensibile: 500 mg/kg;
valori de intervenie pentru soluri mai puin sensibile: 2.000 mg/kg.
Solurile sensibile includ toate solurile din zonele rezideniale i recreaionale, solurile folosite
pentru scopuri agricole i solurile din zonele nedezvoltate.
Solurile mai puin sensibile includ toate solurile cu folosin comercial i industrial i
suprafeele de teren care vor cpta o astfel de folosin n viitorul apropiat.
Estimarea intensitii gradului de ncrcare a solului cu petrol (dup Toti i colab., 1999) este
urmtorul:
sub 0,1%: extrem de slab ncrcat;
0,1-0,2%: foarte slab ncrcat;
0,2-0,4%: slab ncrcat;
0,4-0,5%: slab-moderat ncrcat;
0,5-1,0%: moderat ncrcat;
1,0-5,0%: puternic ncrcat;
5,0-10,0%: foarte puternic ncrcat;
peste 10,0%: excesiv ncrcat.
Biodegradarea poluantilor de tipul hidrocarburi sub actiunea microorganismelor
Producia la scar larg, procesarea i utilizarea chimicalelor au dus la grave contaminri a
suprafeei solului i subsolului cu o gam larg de hidrocarburi periculoase i toxice. Astfel de
hidrocarburi, sintetizate n cantiti mari, sunt:
bifenolii-policlorurai (PCB), tricloretilen (TCE) i alii, care difer foarte mult de compu ii
organici naturali prin structura chimic, i sunt denumite substane xenobionte datorit faptului
c nu pot fi biodegradate u or;
hidrocarburile aromatice policiclice (PAH), care sunt de asemenea toxice i datorit masei
moleculare mari (cu patru sau mai multe cicluri aromatice n structur) sunt nebiodegradabile
sau greu biodegradabile. Hidrocarburile aromatice policiclice (PAH), produse din combustia
incomplet a materialelor organice naturale i a hidrocarburilor, apar n sol ca rezultat al

incendiilor naturale din pduri. Intensificarea proceselor industriale productoare de energie,

inevitabila producere de reziduuri i produse secundare ca PAH, au condus la serioase
contaminri ale solului n zonele industriale.
Cercetarile actuale (dup DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen
GmbH, Braunschweig, Germany) precizeaza numeroase specii de microorganisme
care pot degrada TCE, PCB, PAH:

Bacterii:
Trichloroethylena (TCE): Desulfitobacterium hafniense, Burkholderia cepacia Burkholderia
kururiensis, Desulfuromonas chloroethenica, Janibacter terrae. Pseudomonas putida,
Rhodococcus ruber, Wautersia numazuensis.
Biphenyl: Burkholderia xenovorans, Pseudomonas pseudoalcaligenes, Cupriavidus necator,
Rhodococcus opacus, Rhodococcus ruber, Novosphingobium aromaticivorans, Sphingomonas sp.
, Novosphingobium stygium , Novosphingobium subterraneum , Sphingobium yanoikuyae,
Thamnostylum piriforme,
Biphenyli: Yarrowia lipolytica.
PAH : Mycobacterium vanbaalenii.
Fungi:
PAH : Coriolopsis floccosa, Dichomitus squalens, Fomitopsis spraguei, Ganoderma lucidum,
Irpex lacteus, Lentinus crinitus, Lentinus sp., Oligoporus sp. , Phanerochaete chrysosporium,
Phellinus gilvus, Pleurotus eryngii ,
Stropharia rugosoannulata, Trametes villosa , Trichaptum byssogenus.
(dup www.dsmz.de/strains/degradtn.htm. DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,
Braunschweig, Germany. DSMZ - Degradation (including Fermentation, Oxidation, Utilization)

Produsele chimice organice.

Acumularea n mediu, n special n sol, a produselor chimice organice, are o importan
deosebit datorit toxicitii lor, inclusiv aciunea cancerigen, dar i datorit capacitii de a se
acumula n sistemele vii.
O mare varietate de produse chimice industriale pe baz de azot, se produc pentru industria
petrolier, cea a coloranilor, polimerilor, pesticidelor, explozivilor i medicamentelor.
Principalele grupe de chimicale sunt reprezentate de substane nitro-aromatice, esteri cu azot i
heterocicluri ce conin azot. Multe din aceste chimicale sunt toxice i duntoare omului, fiind
clasate ca i substane periculoase de ctre Agenia de Protecia Mediului/Statele Unite.

1.1.1. Procesele de biodegradare a hidrocarburilor sub actiunea microorganismelor

Interesul pentru bioremedierea solurilor i apelor poluate a crescut n ultimii douzeci de ani, n
primul rnd datorit faptului c s-a descoperit c microorganismele sunt capabile s
descompun compu ii xenobiotici care pn acum s-au considerat a fi rezisteni n faa
proceselor biologice ce au loc n sol.
Degradarea compu ilor organici contaminani poate fi realizat i n cadrul proceselor chimice
i fizice, dar, bioremedierea este considerat o metod mai sigur i mai puin costisitoare pentru
ndeprtarea contaminanilor periculo i i producerea de substane secundare netoxice
(Providenti et al., 1993; Ward et al., 2003/ Raport RESOLMET, 32161/2008).
Microorganismele au un prim rol catalitic n bioremediere, cuno tinele legate de
transformrile din cadrul comunitilor microbiene sunt in continu dezvoltare n procesul de
elaborare a tehnologiilor avansate de bioremediere (Iwamoto i Nasu, 2001; Dua et al., 2002,
citai in Raport RESOLMET, 32161 / 2008).

Poluanii din mediu sunt un rezultat al contaminrii directe produse de centrele industriale n
cre tere, aplicarea pesticidelor, erbicidelor i insecticidelor, i al contaminrii indirecte
rezultate din transportul atmosferic pe distane mari ce contribuie la distribuirea contaminanilor
persisteni ca bifenolii policlorinai (PCB polyclorinated biphenyls) n jurul pmntului.
Caracteristicile poluanilor, condiiile de mediu, tipul vegetaiei i solului, precum i apropierea
de surs, creaz un complex de condiii ce influeneaz circuitul poluanilor.
8

Solurile reprezint rezervoare cheie pentru poluanii din mediu, depozitarea i persistena
poluanilor n sol fiind dependente de o serie de factori: de schimburile atmosferice, de formarea
reziduurilor de grani, de ngroparea poluanilor i de biodegradarea lor.
Biodegradarea implic desfacerea compu ilor organici,
prin intermediul biotransformrii n metabolii mai puin complec i,
prin mineralizarea n minerale anorganice, H 2O, CO2 (aerob) sau CH4
(anaerob).
Att bacteriile ct i fungii au fost intens studiai pentru capacitatea de a degrada o gam larg de
poluani ai mediului, inclusiv hidrocarburi aromatice policiclice, hidrocarburi halogenate i
compu i nitroaromatici.
Enzimele/lanurile biochimice necesare pentru studiile iniiale ale transformrii sunt adesea
specifice pentru anumii contaminani ai mediului, transformndu-i n metabolii care pot fi
asimilai n mai multe lanuri principale desf urate de bacterii.
Gradul i rata biodegradrii depind de mai muli factori cum ar fi pH-ul, temperatura,
oxigenul, populaiile microbiene, gradul de aclimatizare, accesibilitatea la nutrieni, structura
chimic a compu ilor, proprietile de transport celular i degradarea chimic pe medii de cultur.
Unele substane chimice noi, nedegradabile, care arareori apar n natur, pot fi transformate
incomplet, deoarece lipsesc cile microorganismelor pentru degradarea lor complet. ntruct
microorganismele nu au lanuri metabolice pentru mineralizarea anumitor chimicale sintetice
noi, au totu i capacitatea de a dezvolta n timp astfel de sisteme catabolice.
n procesele de bioremediere, se ntlne te des ca obiectiv folosirea tehnologiilor microbiene
pentru a accelera rata de descompunere a poluanilor.
Muli contaminani ai solului se gsesc n condiii anaerobe.
Cu civa ani n urm, prin observaiile asupra declorinrii anaerobe n timp a PCB (bifenolipoliclorurai) din sedimentele Rului Hudson, s-a demonstrat c microorganismele pot
transforma contaminanii n condiii anaerobe.
La sfr itul anilor 80, s-a artat clar c hidrocarburile pot fi degradate i n absena
oxigenului. Acest sistem anaerob de degradare, necesit prezena unor acceptori de electroni
terminali precum fierul (III), oxidul de mangan sau azotat, pentru a nlocui funcia de
acceptor de electroni a oxigenului, din sistemele aerobe.
Sunt foarte intense cercetrile legate de mecanismele catalitice ce faciliteaz catabolismul anaerob
al poluanilor. Procesele anaerobe sunt foarte eficiente pentru ndeprtarea atomilor
clorinai din PCB i n degradarea altor contaminani halogenai.
Incapacitatea microorganismelor de a mineraliza unii contaminani specifici i capacitatea lor de
a-i transforma parial este o dovad c aceste organisme necesit alte substraturi pentru cre tere.
n astfel de situaii, contaminanii sunt transformai, ca exemplu, n cometabolism.
Gama larg de structuri pentru moleculele de PAH- hidrocarburi aromatice policiclice necesit
ca microorganismele degradatoare s posede o gam de enzime capabile s accepte PAH ca i
substrat, sau s posede un numr mic de enzime care s fie specifice fa de substraturile cu
PAH. n timp, ntr-un anumit sistem particular de bioremediere, unele dintre hidrocarburile
aromatice policiclice (PAH) pot s nu se transforme deloc sau pot fi doar parial catabolizate

pn la produ i finali.
Procesele aerobe i anaerobe cometabole particip de asemenea la degradarea compu ilor
organici halogenai.
De i mecanismele degradrii aerobe a contaminanilor chimici sintetici pe baz de azot nu
au fost complet elucidate, multe cercetri se desf oar pentru a determina mecanismele
degradative implicate. Tipurile de reacii catalitice participative cuprind dezaminri,
nitroreduceri, N-dezalchilri, deesterificri, declorinri i hidrolize. n primele etape ale
catabolismului sunt mult implicate monooxigenazele i dioxigenazele, nitroreductazele i
esterazele (Raport RESOLMET, 32161 / 2008).
9

Biotehnologiile joac un important rol n desf urarea proceselor de tratare a solurilor

contaminate. Ca n cazul oricrui proces microbian, optimizarea condiiilor de mediu n cadrul
bioremedierii reprezint un obiectiv important ntruct activitile microbiologic, fiziologic i
biochimic sunt dirijate ctre biodegradarea contaminailor int.
Factorii de mediu care influeneaz cre terea i bioactivitatea microbian, includ coninutul de
umiditate, temperatura, pH-ul, tipul de sol, concentraia contaminanilor i oxigenul
n procesele aerobe sau potenialul redox n degradrile anaerobe.

Modificrile acestor parametri dincolo de valorile optime pot modifica rata de cre tere
microbian precum i substraturile vizate i pot determina ncetarea prematur i nereu ita
procesului de bioremediere.
Potenialul de biodegradare poate fi de asemenea limitat de ctre toxicitatea poluanilor. Unele
specii pot s- i elaboreze sisteme de aprare celular, ceea ce le permite s tolereze concentraiile
mari de contaminani toxici.
Deoarece majoritatea proceselor de bioremediere se bazeaz pe activitatea comunitilor
microbiene complexe, se impune aflarea ct mai multor aspecte despre rolul interactiv i
interdependent jucat de speciile individuale la nivelul acestor comuniti.(Raport RESOLMET,
32161 / 2008).
1.1.2 Bioremedierea cu ajutorul comunitilor microbiene
Printre tehnologiile de remediere a solului disponibile pentru decontaminarea i detoxifierea
solurilor contaminate de hidrocarburi, bioremedierea este una dintre cele mai sigure din punct de
vedere al impactului de mediu i al costurilor de aplicare.
Microorganismele i-au dezvoltat o varietate de ci biochimice pentru a degrada sau detoxifia
hidrocarburile. Hidrolazele i oxigenazele sunt clasele cele mai importante dintre enzime, care sunt
rspunztoare pentru catalizarea reaciilor de biotransformare. Hidrolazele (hidrolaze, esteraze,
amidaze) nu necesit factori i sunt stabile la o variaie mare de pH i temperatur.

Deoarece comunitile microbiene joac un rol important n ciclurile biogeochimice, este

esenial analiza structurii comunitilor microbiene i modificrile ce apar pe parcursul
procesului de bioremediere.
Este necesar cercetarea pentru caracterizarea rolului jucat de organismele ce metabolizeaz
hidrocarburile n degradarea substraturilor petroliere prezente n solurile contaminate cu
hidrocarburi.
n caracterizarea comunitilor microbiene se folosesc att metode culturale ct i cele
independente de cultivare. Schimbrile n timp i spaiale din comunitile microbiene pe
parcursul bioremedierii se pot determina folosind metode moleculare complexe (Stapleton et al.,
1998; Van Elsas et al., 1998; Widada et al., 2002, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008).
Recentele descoperiri din tehnicile moleculare, combinate cu informaiile genomice, aduc ajutor
microbiologilor n aflarea misterelor legate de diversele roluri pe care le au microorganismele n
cadrul comunitilor. Genele pentru catabolism au capacitatea de a se rspndi cu o mare
frecven n cadrul comunitilor microbiene (Top i Springael, 2003; Van der Meer i Senchilo,
2003, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008).

La nceputul secolului trecut, cercetrile erau orientate spre mbunttirea fertilitii solului
i cre terii produciei agricole.
Pn n anii 50, s-au studiat diferite tipuri de microorganisme (fixatoare de azot, nitrificatoare,
sulfo-oxidatoare etc) i relaiile dintre acestea i nutriia plantelor.
n anii 60, cercetrile s-au axat pe corelaiile dintre transformrile solului, populaiile
microbiene i activitile enzimatice pentru sporirea fertilitii solului.

10

n anii 70, investigaiile au avut n plan rezolvarea problemelor cu privire la asigurarea hranei
(inocularea solului cu bacterii fixatoare de azot din genul Azospirillum fiind primul pas important
n acest sens).
Dup anii 70, a avut loc n microbiologia solului un salt de la aplicarea acestei tiine n
agricultur, la folosirea microorganismelor n decontaminarea mediului poluat.
Dup anii 80, bioremedierea solurilor devine din ce n ce mai important. ncepnd cu anii 80,
s-au realizat primele experimente de laborator n care s-a folosit inocularea cu tulpini de
microorganisme cu abiliti degradative ale compu ilor organici.
Pornind de la activitile degradative ale microorganismelor au fost elaborate numeroase
tehnologii de depoluare, care sunt cuprinse generic n termenul de bioremediere (Alexander,
1994, citat in Raport RESOLMET, 32161/2008).
Microorganismele capabile s degradeze substanele xenobiotice sunt prezente, n general, n
respectivele medii poluate, ns biodegradarea naturala are loc cu rate foarte sczute.
De aceea, s-au elaborat diverse tehnologii de bioremediere care presupun:
cunoa terea cilor de optimizare a condiiilor biodegradrii,
cunoa terea comportrii i efectelor substanelor chimice introduse n sol asupra ecosistemului,
selectarea unor microorganisme cu abiliti degradative superioare.
Cercetri privind identificarea i caracterizarea bacteriilor i fungilor ce prolifereaz n
solurile poluate cu petrol i apa srat au fost efectuate de Toti si colab. (1989, 1991, 1992,
1999, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008).
S-au identificat principalele bacterii ce contribuie la degradarea petrolului (specii ale
genurilor Pseudomonas, Flavobacterium, Corynebacterium etc), bacterii care se ntlnesc i n
zcmintele de iei.
De asemenea, s-au stabilit unele condiii n care aceste bacterii prolifereaz sau dispar i modul
cum pot fi stimulate.
S-au efectuat i studii asupra plantelor pionier ce se instaleaz pe terenurile poluate i asupra
speciilor cultivate ce pot fi folosite n cursul ameliorrii.
S-a efectuat un studiu amplu de caracterizare a distribuiei cantitative i calitative a bacteriilor
heterotrofe i fungilor filamento i n solurile afectate de poluare din teritorii apartinnd
schelelor de extractie a ieiului de pe ntreg teritoriul Romniei (Voiculescu Anca i colab.,
2001).
n sol, desi reprezint o fraciune minuscul din greutatea total (0,35%), microorganismele au o
importan esenial, fiind elementul activ, efectorul funciilor de fertilitate a solului (Eliade si
colab., 1983, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008).
Activitatea microorganismelor din sol este influenat de prezena microhabitatelor, de tipul
de sol, de structura i textura acestuia, de asigurarea cu substane organice i nutrieni i de
factorii de mediu. n funcie de multitudinea de factori care acioneaz, activitatea
microorganismelor este variabil, att din punct de vedere biologic (alternana fazelor vegetative
cu fazele de laten), ct i din punct de vedere al activitii metabolice i de nutriie.
Numeroase microorganisme din sol au capacitatea de a utiliza hidrocarburile gazoase, solide

i lichide din seria alifatic si aromatic drept unic surs de carbon i energie,
descompunndu-le la compu i cu greutate molecular mai mic, sau chiar la dioxid de
carbon i ap.
Rspndite larg n mediile naturale, i uneori semnificative numeric, microorganismele active
atac diferii compu i, ca: petrolul, kerosenul, uleiurile minerale, parafina, gazul de iluminat,
gazele de sond, cauciucul natural i sintetic, uleiurile de rcire, suprafeele asfaltate,
conductele subterane i cablurile electrice protejate de coroziune cu ajutorul materialelor
impregnate cu parafin, elastomeri sau diferii derivai ai hidrocarburilor.

11

Primele observaii asupra acestui proces de a degrada hidrocarburile dateaz din anul 1895,
cnd Miyoshi (Geamanu, 2002) a observat c straturile subiri de parafin (considerat
biologic inert) sunt ptrunse de hifele de Bothrytis cinerea.
Ulterior, s-a demonstrat c mai multi microfungi din sol, inclusiv Penicillium glaucum pot ataca
parafina, descompunnd-o si utiliznd-o ca unic sursa de carbon i energie.
Importana fenomenului n natur a fost semnalat pe baza frecvenei ridicate a
microorganismelor active n sol i a incapacitii de acumulare a unor hidrocarburi sintetizate
de plante sau unor ceruri produse de insecte.
Capacitatea de a degrada hidrocarburile este larg raspndit n lumea microorganismelor, fiind
ntlnit la bacterii (inclusiv actinomicete), la levuri, la fungii filamento i, la alge.
Prezente n sol, n apele dulci i marine i n unele sedimente, ntr-o gam larg de condiii de
mediu, aceste microorganisme au capacitatea de a sintetiza un spectru larg de enzime care asigur
degradarea hidrocarburilor individuale i potenialul de ndeprtare sau de conversie a
ieiului din mediu.
n timp ce n ecosistemele nepoluate numrul microorganismelor care utilizeaz hidrocarburile
poate reprezenta doar 0,1% din total, n cele poluate poate ajunge pna la 100% din numarul
microorganismelor viabile. Aceasta se datoreaz faptului c n mediile cu niveluri nalte de
poluare are loc modificarea compoziiei n specii microbiene prin eliminarea acelora sensibile la
poluant.
n ultimele trei decenii s-au identificat peste 200 de specii de microorganisme capabile s
metabolizeze hidrocarburile, microorganisme care au fost numite hidrocarbonoclastice.
n urma analizrii microbiologice a probelor de soluri poluate cu iei unele n concentraii
excesive (>30%), au fost izolate tulpini bacteriene cu o nalt rat de supravieuire n aceste
condiii severe de poluare. Tulpinile bacteriene au fost multiplicate, izolate i purificate prin
cultivarea diluiilor zecimale succesive de sol pe medii nutritive solidificate.
1.1.3 Condiiile de aplicare a bioremedierii hidrocarburilor in situ
Bioremedierea in situ fa de celelalte tehnici de remediere este n mai mare msur dependent
de condiiile locale i de proprietile solului. Astfel, factorii care joac un rol important n
proiectarea cu succes a unui sistem de bioremediere cuprind:
structura chimic a poluanilor
suplimente naturale de macro/micronutrieni,
disponibilitatea acceptorilor,
prezena unor bacterii indigene capabile s degradeze poluanii i
caracteristicile subsolului.
Structura chimic a poluanilor
Biodegradabilitatea produ ilor petrolieri este dependent de structura chimic a
diferitelor componente. Astfel, cu ct hidrocarburile petroliere sunt mai solubile cu att ele sunt
mai biodegradabile. Hidrocarburile cu viscozitate mare sunt mai puin biodegradabile din cauza
dificultilor fizice n stabilirea contactului ntre poluani i microorganisme, sau ntre nutrieni
i acceptori. Exemplu: Gazolina care are o solubilitate ntre 50 i 100 ppm i o viscozitate cuprins
ntre 0,5 i 0,6 cSt; este considerat mult mai u or biodegradabil dect motorina, care are o
solubilitate de 1 ppm i o viscozitate cuprins ntre 40 i 600 cSt.

Structurile chimice simple sunt mai u or de degradat dect structurile ramificate care se
degradeaz mai lent. Degradarea hidrocarburilor de ctre microorganisme este n general atribuit
bacteriilor, ns i ciupercile indigene pot realiza acest lucru.
12

Bacterii i fungi consumatoare de hidrocarburi izolate din sol

(dup Raport RESOLMET, 32161/2008)

Achromobacter sp.

Acinetobacter sp.

Aerobacter aerogenes

Agrobacterium tumefaciens

Alcaligenes dinitrificans

Alcaligenes eutrophus

Alcaligenes xylosoxidans

Arthrobacter sp.

Bacillus brevis

Bacillus cereus

Bacillus circulans

Bacillus coagulans

Bacillus megaterium

Bacillus pumilis

Bacillus subtilis

Brevibacterium sp.

Chromobacterium sp.

Citrobacter freundii

Clostridium pasteurianum

Clostridium michiganense

Clostridium rectum

Corynebacterium sp.

Cytophaga sp.
BACTERII
Erwina sp.

Flavobacterium sp.

Klebsiella pneumoniae

Micrococcus sp.

Mycobacterium sp.

Nocardia sp.

Proteus sp.

Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas cepacia

Pseudomonas diminuta

Pseudomonas melophthara

Pseudomonas putida

Pseudomonas flourescens

Pseudomonas stutzeri

Rhodococeus corallinus

Rhyzobium sp.

Sarcina sp.

Serratia marsescens

Spirillum sp.

Sphingomonas herbicidivorans

Sphingomonas paucimobilis

Streptomyces annomoneus

Vibrio sp.

Xanthomonas sp.
FUNGI
Acremonium sp.

Aspergillus sp.
13

Aureobasidium sp.
Beauveria sp.
Candida sp.
Chrysosporium sp.
Cladosporium sp.
Cochliobolus sp.
Cyathus bulleri
Cylindrocarpon sp.
Debarymyces sp.
Fusarium sp.
Geotrichum sp.
Gliocladium sp.
Graphium sp.
Humicola sp.
Monila sp.
Mortierella sp.
Paecilomyces sp.
Penicillium sp.
Phanerochaete chrysosporium
Phanerochaete sordida
Phorma sp.
Rhodotorula sp.
Saccharomyces sp.
Scolecobasidium sp.
Sporobolomyces sp.
Sprotrichum sp.
Spicaria sp.

Tolypocladium sp.
Torulopsis sp.
Trametes versicolor
Trichoderma viride
Pentru degradarea complet a hidrocarburilor u oare, sunt necesare mai multe specii de
bacterii. Populaiile indigene de bacterii prezente n sol conin amestecul necesar de bacterii
pentru a face posibil degradarea. n cazul hidrocarburilor mai grele, se adaug preparate
comerciale pentru suplimentarea populaiei de bacterii native.
Nutrienii
Nutrienii sunt elementele chimice necesare bunei dezvoltri a microorganismelor, care pot
fi clasificai n micronutrieni i macronutrieni. Pentru o dezvoltare i o reproducere optim a
microorganismelor implicate n procesul de bioremediere trebuie ca la nivelul solului s fie
disponibile cantiti suficiente de nutrieni, iar ace tia s fie n formele i concentraiile
specifice fiecrui proces.
Macronutrienii necesari populaiilor de bacterii sunt reprezentai de carbon, azot i fosfor,
iar raportul optim dintre cei trei compu i C:N:P este de 100:10:1.
n sol exist cantiti suficiente din cei trei macronutrieni. Astfel, sursele cele mai frecvente de
azot sunt amoniacul i srurile nitrate, n timp ce cele mai frecvente surse de fosfor sunt
ortofosfaii i tripolifosfaii. Preparatele comerciale de bacterii disponibile pe pia constau n
amestecurile de azot, fosfor i enzime, componente de neutralizare i soluii tampon sau surse
pure de azot i/sau fosfor.
Micronutrienii necesari la nivelul solului pentru o bun desf urare a procesului de bioremediere
sunt: sulful, potasiul, sodiul, calciul, magneziul, fierul, manganul, zincul i cuprul.
14

n cazul metabolismului anaerob, pe lng microelementele enumerate anterior sunt necesare

cobaltul i nichelul.
La nivelul metabolismului aerob, oxigenul molecular (O2) joac rolul acceptorului de
electroni. Astfel, pentru transformarea a 453,6 g de hidrocarburi n bioxid de carbon i ap sunt
necesare 1360,8 g de oxigen.
n procesul de bioremediere anaerob n locul oxigenului se folosesc substitueni ai acceptorului
de electroni, precum: nitrai (NO3 ), oxizi de mangan IV (MnO2), oxizi de fier III (Fe(OH)3),
2-

sulfai (SO4 ) i dioxid de carbon (CO2). Utilizarea unui anumit acceptor depinde de
disponibilitatea sa, de prezena altor acceptori i de potenialul oxido-reductor al mediului.

Energia produs de microorganismele din metabolismul hidrocarburilor variaz. Astfel, pentru

reacii aerobe este utilizat cu precdere oxigenul, deoarece acesta conduce la obinerea unei
cantiti mari de energie (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Caracteristicile solului
Dintre factorii care condiioneaz buna desf urare a procesului de bioremediere,
caracteristicile solului sunt foarte importante, deoarece exist un control redus asupra condiiilor
de sub pmnt. Astfel, acolo unde exist o deficien a acceptorilor sau a nutrienilor, sistemul
poate fi proiectat astfel nct s ofere ace ti factori. Chiar i acolo unde o anumit specie de
bacterii implicat n procesul de biodegradare este absent, bacteria poate fi cultivat n laborator
i introdus n sol proces denumit biocre tere - bioaugmentare. Cu toate acestea ns, nu se pot
face multe lucruri pentru a compensa condiiile zonei care nu accept procesul de bioremediere
sau care nu ofer condiii ideale pentru implementarea unui sistem de biorestaurare.
Exist multe proprieti ale solului i parametri ai apelor subterane care influeneaz procesul de
bioremediere. Dintre acestea cele mai importante sunt tipul i permeabilitatea solului, distribuia
structurii granulare, coninutul hidratant al solului, pH-ul, temperatura, geochimia apelor
subterane, adncimea apelor subterane i conductivitatea acestora.

Tipul solului este o variabil important n proiectarea procesului de bioremediere. Astfel,

solurile noncoezive, precum pietri ul i nisipul, sunt mai bune pentru aplicarea bioremedierii
dect solurile compacte (dense).
Permeabilitatea solului este un factor cheie n succesul procesului de bioremediere, datorit facilitrii
transportului i distribuiei nutrienilor i acceptorilor. Astfel, cu ct solul este mai permeabil cu att
sunt mai bune condiiile pentru aplicarea cu succes a procesului de bioremediere, acest lucru fiind
valabil att pentru zona nesaturat (vadoas) ct i pentru cea saturat.
Circulaia aerului i apei n sol este influenat de permeabilitatea acestuia. Astfel, n soluri cu
permeabilitate mare este facilitat introducerea i deplasarea aerului prin bioventilaie i, de
asemenea, circulaia i distribuia apelor subterane ntr-o zon saturat. Acest lucru este valabil att
pentru bioremedierea in situ ct i pentru cea ex situ. n afar de facilitarea transportului n subteran,
permeabilitatea are un rol important i n prevenirea colmatrii acvatice excesive. Procesul de
biodegradare nsu i reprezint o surs de biomas microbian, ceea ce influeneaz procesul de
colmatare. Soluia colmatrii este prevenirea sau evitarea fenomenului de biopoluare la scar larg i
precipitarea chimic. Aceste dou procese restricioneaz deplasarea apelor subterane. n aceste
condiii, solul trebuie s fie suficient de permeabil, pentru a preveni ca masa microbian s
determine colmatarea porilor. n acest sens, cercettorii propun ca siturile s aib

o conductivitate hidraulic mai mare de 10-4 cm/s, aceast valoare permind desf urarea

bioremedierii in situ cu rezultate bune. Un rol la fel de important ca i permeabilitatea n

prevenirea biopolurii l joac distribuia structurii granulare a solului. Studiile n acest
domeniu arat c materialele foarte poroase, cu structuri granulare deprtate, sunt mult mai
sensibile la biopoluare dect materialele cu porozitate mrit (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Biodisponibilitatea poluanilor
Pentru a se realiza o degradare microbian eficient a contaminanilor chimici, ace tia
trebuie s fie biodisponibili n faa celulelor responsabile de degradare. Rata de biodegradare a
contaminanilor depinde de rata de preluare a contaminanilor i de transferul de mas.
15

Biodisponibilitatea contaminanilor din sol este influenat de un numr de factori precum

desorbia, difuzia i disoluia.
Scderea biodisponibilitii datorat prelungitei contaminri a solului, este rezultatul reaciilor
de oxidare chimic i a slabei difuziuni chimice a contaminanilor n porii mici care ncorporeaz
contaminanii n materia organic.
Folosirea bio-surfactanilor sau a altor substane chimice pe parcursul procesului de
biodegradare contribuie la cre terea biodisponibilitii (Van Hamme et al., 2003, citat in
Raport RESOLMET, 32161/2008).
Structura molecular a contaminanilor i hidrofobia pot s influeneze de asemenea preluarea
poluanilor de ctre microorganisme.
Celulele microorganismelor pot avea sisteme active sau selective pentru transportarea
contaminanilor n celule. Datorit faptului c ace ti contaminani au o solubilitate sczut n medii
apoase, nelegerea mecanismelor prin care sunt preluate de ctre microorganismele degradatoare i
dezvoltarea strategiilor pentru iniierea sau accelerarea accesibilitii, reprezint aspecte importante
pentru procesul propriu-zis de bioremediere. Hidrofobia sau slaba solubilitate

n ap a hidrocarburilor aromatice policiclice, determin asocierea lor cu compu ii hidrofobi

din sol, astfel limitnd accesibilitatea lor ctre microorganisme. Astfel, un material fr drenaj
este mult mai predispus la bioremediere dect un material bine drenat. Umezeala solului este o
proprietate foarte important n sistemele de tratare a zonei nesaturate (vadoase), deoarece
microorganismele au nevoie de ap ca suport pentru procesul metabolic. n procesul de
bioremediere umiditatea ideal a solului este de 50%. La utilizarea sistemelor de
bioventilaie umiditatea solului sufer o diminuare n timp.
Elementele chimice n apele subterane.
Buna funcionare a sistemului de tratare in situ este influenat n mare msur de prezena

i concentraia unor elemente chimice n apele subterane, cele mai importante dintre acestea
fiind fierul i manganul. n majoritatea sistemelor de ape subterane aflate n condiii anaerobe
sau reductoare, fierul i manganul sunt prezente n forme dizolvate sau reduse.
Potenialul redox al apelor subterane.
Potenialul redox al apelor subterane (Eh), msurat n milivoli este un alt indicator al
condiiilor aerobe/ anaerobe. Potenialul redox este o mrime a strii de oxidare sau reducere
din sistem, astfel c un potenial redox ridicat indic un mediu aerob (condiii oxidante), n
timp ce un potenial redox sczut indic un mediu anaerob (condiii reductoare).
Potenialul redox al apelor subterane poate oferi indicaii asupra tipului reaciei redox care are
loc n zona acvatic. Acest lucru este posibil deoarece reaciile redox mediate de bacterii
urmeaz o secven specific bazat pe potenialul redox al mediului.
Interaciunea microbian cu hidrocarburile.
Interaciunea microbian cu hidrocarburile a fost un important obiectiv de studiu n ultimii

50 de ani. De i cercetrile iniiale s-au axat pe implicarea microorganismelor n formarea

depozitelor de petrol recent studiile s-au redirecionat spre catabolismul microbian al

hidrocarburilor. Acest studiu a fost motivat de nevoia crescnd de remediere a mediilor

contaminate ca rezultat al dispersrii diferiilor combustibili. naintea anilor 1980, studiile asupra
catabolismului microbian al hidrocarburilor s-au desf urat n condiii aerobe, iar degradarea
anaerob a hidrocarburilor de ctre microorganisme nu a fost luat n consideraie (RESOLMET,
32161/2008).
Benzenul, de exemplu, prezint numeroase utilizri i reprezint unul din cele mai importante 20
de substane chimice produse n Statele Unite ale Americii, ceea ce reprezint 35% din
producia global. Pe lng adugarea sa n combustibilii ce au la baz petrol, benzenul se
utilizeaz pentru obinerea diferitelor alte substane chimice, cauciucuri, lubrifiani,
detergeni, droguri i pesticide. Surse alternative ca vulcani, incendii forestiere i fum de igar
contribuie semnificativ la rspndirea benzenului n mediu.
16

Benzenul este considerat unul din cei mai importani poluani organici n apele subterane
(Anderson i Lovley, 1997, citai in Raport RESOLMET, 32161/2008) prezint un factor de risc
ridicat pentru sntatea populaiei datorit toxicitii i solubilitii sale ridicate. Este clasat pe
locul 5 pe lista prioritilor naionale din Statele Unite ale Americii (NPL = National Priorities
List) i s-a gsit n mai mult de 50% din 1428 site-uri ale NPL.
Hidrocarburile cu un singur nucleu aromatic, ca: benzenul, toluenul, etilbenzenul, xilenul,
cunosute sub numele generic de BTEX, sunt de obicei coninute n benzin i sunt substane
foarte volatile. Datorit toxicitii i solubilitii lor ridicate, ace tia reprezint factori de risc
ridicat pentru sntatea populaiei.
Toluenul. n ceea ce prive te biodegradarea toluenului, Geobacter metallireducens a fost
primul organism obinut n cultur pur capabil s oxideze anaerob toluenul, transformndu-l
complet n CO2, cu reducerea Fe III. Specia a fost incapabil s reduc ali compu i BTEX.
Primul pas n catabolismul toluenului este adiia de fumarat la gruparea metil a toluenului, cu
formare de benzilsuccinat (Fig. 1), reacie realizat de enzima benzilsuccinat sintaz.
Benzilsuccinatul liber se ntlne te n bulionul de Thauera aromatica, drept produs intermediar i
se consider a fi cel care determin calea genetic pentru catabolismul toluenului.

Fig. 1
Diferite studii au demonstrat c specii ale genurilor Thauera i Azoarcus degradeaz toluenul.
Thauera aromatica i Azoarcus tolulyticus (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Primele dou microorganisme capabile de degradarea anaerob a benzenului au fost izolate i
descrise de Coates et al., 2001, 2002 citati de Raport RESOLMET, 32161/2008); aceste
microorganisme sunt nrudite i fac parte din genul Dechloromonas; ele oxideaz benzenul la
CO2 n absena O2. Calea biochimic de degradare anaerob a benzenului nu este cunoscut,
dar exist idei pentru reaciile iniiale, incluznd o alchilare cu formare de toluen, o hidroxilare
cu formare de fenol sau o carboxilare cu formare de benzoat (Fig. 2). Studii anterioare
independente, realizate pe sedimente sau pe culturi mbogite, au demonstrat formarea
fenolului i benzoatului ca intermediari extracelulari, n timpul procesului de degradare
anaerob a benzenului. Degradarea anaerob a etilbenzenului. Doar trei microorganisme au
fost descrise ca fiind capabile de acest tip de metabolism (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Biodegradarea anaerob a celor trei izomeri structurali ai xilenului a fost sudiat n condiii
azotat- i sulfat-reductoare. Studii bazate pe sedimente sau culturi mbogite au demonstrat
biodegradarea p-xilenului n absena oxigenului, dar nu exist nici o cultur pur care s
mineralizeze complet p-xilenul, pn la CO 2.
De asemenea, au fost izolate diferite microorganisme capabile s mineralizeze complet meta- i
orto-xilenul. Multe din aceste microorganisme sunt nrudite una cu cealalt, dar i cu cele care
degradeaz toluenul. Reaciile iniiale implicate n oxidarea anaerob a m-xylenul sunt

considerate ca fiind similare cu cele care oxideaz toluenul n condiii azotat-reductoare i

presupun o adiie iniial de fumarat la una din gruprile metil, cu formare de 3metilbenzilsuccinat (sau 2- metilbenzilsuccinat, dup caz) care este rapid oxidat la 3-metilbenzoat
(sau 2-metilbenzoat, dup caz) (Raport RESOLMET, 32161/2008).

17

Fig. 2

Hidrocarburile alifatice saturate (alcanii) sunt larg rspndite n mediul terestru i marin. Ace
tia fie sunt produ i de organismele vii sau rezult din diferite procese. n comparaie cu
numeroase hidrocarburi aromatice, alcanii sunt considerai netoxici, chiar dac cei cu caten
scurt se tie c afecteaz membranele biologice. Prima evideniere a procesului de degradare
anaerob a alcanilor de ctre o cultur pur s-a realizat cu un microorganism sulf-reductor,
nrudit cu specii ale genului Desulfococcus (Raport RESOLMET, 32161/2008).
pH-ul mediului
Procesul de bioremediere se desf oar n condiii optime pentru un pH cuprins ntre 6 i 8,
cu valoarea ideal n jurul valorii 7. n zonele n care activitatea bacterian este intens, exist
posibilitatea apariiei unor soluri u or acide, datorate apariiei de componeni acizi intermediari. n
plus, dioxidul de carbon, un produs final al metabolismului hidrocarburilor, contribuie la
scderea pH-ului deoarece dioxidul de carbon dizolvat formeaz acid carbonic. Majoritatea produ
ilor disponibili n procesul de bioremediere ofer i ageni de neutralizare i soluii tampon.

Temperatura
Este un factor care influeneaz bioactivitatea, astfel c rata de biodegradare a
o

hidrocarburilor aproape se dubleaz, la fiecare variaie de 10 C peste o temperatur medie

cuprins ntre 5 i 25 C. n plus, temperatura apelor subterane poate afecta disponibilitatea
oxigenului, deoarece acesta este dependent de temperatur, astfel c oxigenul este mai solubil n
ap rece dect n ap cald. Un avantaj al bioremediereii in situ este acela c temperatura n
subteran rmne aproape constant n timpul anului.

18

Bioremedierea solurilor contaminate cu hidrocarburi

Metode de tratare a solurilor contaminate cu hidrocarburi
n ultimii ani, o multitudine de metode au fost investigate, dezvoltate i folosite pentru tratarea
solurilor contaminate cu reziduuri petroliere:
vitrifierea,
incinerarea, evacuarea i depunerea selectiv, volatilizarea, ncapsularea,

splarea cu diferii solveni, bioremedierea i

folosirea straturilor absorbante (Preslo i colab.,1989), atenurea natural monitorizat
(Pope and Jones,1999), fitoremedierea (Frick i colab.1999).
Aceste metode difer de la una la alta nu numai prin tratamentul folosit ci i prin cantitatea i
calitatea produselor petroliere pentru care ele sunt pretabile, prin efectele secundare care pot apare
i costuri. Alegerea unei metode de tratare se face n acord cu evaluarea riscului de mediu pentru
zona contaminat.
Atenuarea natural monitorizat
O strategie potenial de remediere a locurilor contaminate o constituie atenuarea natural
monitorizat, care n accepiunea Ageniei de Protecie a Mediului din SUA se refer la sprijinul pe
care procesele naturale l ofer pentru atingerea obiectivelor de remediere specifice locului. Pentru a fi
considerat o alternativ acceptabil, aceast metod trebuie s realizeze obiectivele remedierii ntr-un
timp care este rezonabil prin comparaie cu cel oferit de alte metode mai active (Pope i Jones, 1999).
Atenuarea natural monitorizat este ntotdeauna folosit n combinaie cu controlul sursei, care
const n ndeprtarea sursei de contaminani ct mai mult posibil. Procesele de atenuare natural
includ o varietate de procese fizice, chimice ori biologice, care, n condiii favorabile, acioneaz
fr intervenia oamenilor pentru a reduce masa, toxicitatea, volumul lor, concentrarea
contaminanilor n sol sau n apa freatic. Atenuarea natural se refer i la metodele de tratare
cunoscute sub numele de remediere intrinsec, bioatenuare ori bioremediere intrinsec. Aceste procese
includ: biodegradarea, dispersia, diluia, sorbia, volatilizarea i stabilizarea chimic ori
biologic, transformarea ori destrucia contaminanilor.

Procesele de atenuare natural sunt deseori caracterizate ca distructive i nedistructive. Procesele

distructive distrug contaminantul. Procesele nedistructive nu distrug contaminantul dar produc o
reducere n concentraiile contaminantului. Procesele de atenuare natural pot
reduce masa contaminantului (prin procese distructive cum sunt biodegradarea i
tranformrile chimice);
reducerea concentraiilor contaminantului (prin diluie simpl ori dispersie); ori
legarea contaminantului de particulele solului astfel nct contaminantul nu poate migra prea
departe (EPA, 1996).
Spre exemplu, apa relativ curat de la suprafaa solului ptrunde n apa freatic superficial ncrcat cu
poluani i produce diluarea. Sau apa freatic curat curge printr-o zon poluat i produce dispersia
poluanilor i mpr tierea lor n afara zonei intens poluate reducnd astfel concentraia contaminantului
n zona luat n studiu. Adsorbia apare cnd contaminanii sunt fixai de particulele din sol.

Hidrocarburile din carburani tind s resping apa, la fel ca i cele mai multe substane petroliere. Cnd
ele au posibilitatea s scape din apa freatic se ata eaz de materia organic sau de mineralele argiloase,
ceea ce permite contaminanilor s ias din fluxul de ap freatic i s rmn ntr-o zon n care poate fi

19

mai usor tratat. Sorbia, ca i diluia i dispersia, reduc concentraia i masa contaminanilor n
apa freatic, dar nu distrug contaminanii.
n diferite situaii, atenuarea natural constituie o opiune efectiv, ieftin de curire i cea mai
bun cale de a rezolva unele probleme de contaminare, chiar dac unii autori o eticheteaz ca fiind
lips de aciune. Atenuarea natural este n realitate o abordare activ care se concentreaz
pe confirmarea i monitorizarea proceselor de remediere natural mai mult dect pe
ncrederea total n tehnologiile inginere ti. Hidrocarburile mobile i toxice din carburani scur
i din rezervoare sunt candidai buni pentru aplicarea atenurii naturale. Nu numai c este dificil
s-i prinzi datorit mobilitii ridicate i adncimii mari la care se afl, dar ei sunt i
contaminanii ce pot fi distru i cel mai u or prin biodegradare (US EPA-1996).
Oppelt (1999) recomand ca nainte de a decide ce metod de remediere poate fi folosit s se
trec prin urmtoarele faze:
identificarea poluanilor prezeni n acel loc;
evaluarea riscului pentru oameni i mediu lund n considerare fiecare dintre poluani;

investigarea vitezei i dispersiei apei freatice;

evaluarea cantitii de poluani localizai n acel loc;
analiza metodelor accesibile de degradare fizic, chimic i biochimic ori de atanuare a
poluanilor;
calculul duratei proceselor de remediere pentru fiecare metod n parte;
evaluarea costurilor pentru fiecare metod accesibil;
cercetarea reaciei sociale la metodele propuse;
alegerea i aplicarea celei mai potrivite metode de remediere.
Fitoremedierea
Centrul de Analiz a Tehnologiilor de Curire a Apelor Freatice din Statele Unite ale Americii
recomand pentru curirea solului i apei poluate cu hidrocarburi fitoremedierea, metod care
utilizeaz plantele.
Avantajele majore raportate de fitoremediere n comparaie cu tehnologiile de curire
tradiionale includ posibilitatea generrii a mai puine reziduuri secundare, asociat cu
deranjarea minim a mediului ambiant i abilitatea de a lsa solul pe loc i n condiii folositoare
pentru urmtorul tratament. Dezavantajele citate n literatur includ lungimea mare a timpului
cerut pentru fitoremediere (de obicei mai multe sezoane de vegetaie), adncimea limitat a apei
freatice (90-300 cm) i posibilitatea intrrii contaminantului n lanul alimentar prin consumul
plantelor de ctre animale.
Un interes particular l prezint faptul c diferite plante mpreun cu microorganismele
asociate lor, au fost identificate ca fiind capabile s creasc viteza de ndeprtare a hidrocarburilor
petroliere din solul contaminat.
n majoritatea studiilor gramineele i leguminoasele au fost semnalate pentru potenialul lor de
fitoremediere a locurilor contaminate cu hidrocarburi petroliere. Avantajul acestora l constituie
sistemul radicular fibros i puternic dezvoltat, ce exploreaz un volum mare de sol pn la
adncimea de 3 m. Acestea prezint o diversitate genetic inerent care le poate da un avantaj n
competiia ce apare la instalarea n condiii de sol nefavorabile. n plus leguminoasele ar putea
avea un avantaj fa de plantele neleguminoase n procesul de fitoremediere datorit abilitii
lor de a fixa azotul, nemaifiind astfel n competiie cu microorganismele i celelalte plante

pentru cantitile limitate de azot asimilabil din solul contaminat cu petrol.

Cele trei mecanisme primare prin care plantele i microorganismele cur solul i apa freatic
poluate cu hidrocarburi petroliere sunt:
degradarea,
nmagazinarea i
transferul hidrocarburilor din sol n atmosfer.
20

Plantele i rdcinile lor pot influena indirect degradarea prin alterarea condiiilor fizice i
chimice din sol. Explorarea solului de ctre rdcini ajut n a prinde la un loc, ntr-un contact
strns, plantele, microorganismele, elementele nutritive i contaminanii. Plantele ofer
solului materie organic, att dup moartea lor ct i n timpul vieii prin pierderea celulelor din
vrful rdcinilor i excreiile de mucilagii, substanele gelatinoase fiind un lubrefiant pentru
penetrarea rdcinilor prin sol. Materia organic poate reduce bioaccesibilitatea unor hidrocarburi
petroliere, n special a celor ce sunt lipofile i legate de materia organic.
n accord cu cercetrile efectuate de Dineen i colab. (1989), succesul bioremedierii solurilor
contaminate cu hidrocarburi petroliere depinde de urmtorii 5 factori:
Microbiologia solului. Microorganismele ce degradeaz petrolul vor fi prezente n zonele n care
concentraia hidrocarburilor petroliere dep e te standardele care impun curirea.
Chimia solului. Concentraiile de elemente nutritive (NPK) i oxigen vor fi adecvate meninerii
cre terii microorganismelor, i, n acela i timp, srurile i metalele grele nu trebuie s fie prezente
la nivele toxice.
Fizica solului. Permeabilitatea pentru aer a solului trebuie s fie adecvat pentru a permite o bun
mi care a oxigenului i azotului n solul afectat i a evita cre terea concentraiilor de bioxid de
carbon.
Morfologia solului. Stratificaia solului n zonele afectate va fi bine cunoscut pentru a putea
proiecta un bun sistem de tratare.
Adncimea apei freatice, direcia i gradientul de curgere a apei freatice, prezena sau absena
produselor de flotare i concentraia hidrocarburilor petroliere n apa freatic trebuie s fie
cunoscute nainte de implementarea bioremedierii in situ, n scopul evitrii recontaminrii solului
curat de ctre apa freatic.
n cazul n care solul este poluat att cu reziduuri de petrol ct i cu ap srat, msurile de
bioremediere se mbin cu msuri corespunztoare de desalinizare, respectiv amenajri pentru
splarea srurilor pe profilul de sol i captarea apelor de splare ntr-un sistem de drenaj pentru a
putea fi epurate nainte de deversarea n emisar.
Tratarea cu ajutorul terenului agricol
Tratarea cu ajutorul terenului agricol este o tehnic de bioremediere, aerob, la suprafaa solului
n care
nmolurile din petrol sunt aplicate pe sol ori
solul contaminat este impr tiat n strate subiri, variind de la civa milimetri la zeci de
centimetri grosime. Straturile de sol contaminat sunt amestecate cu ajutorul frezei pentru a distribui i
omogeniza elementele nutritive, umiditatea i microorganismele. Lucrarea periodic a solului cu freza
mre te permeabilitatea i aeraia solului. Deci, hidrocarburile grele sunt reduse prin stimularea
biodegradrii aerobe, iar constituenii u ori ai petrolului sunt volatilizai, deoarece mai mult sol este
afnat cu freza. Tratarea cu ajutorul terenului agricol poate fi aplicat numai n

zonele cu suprafee mari, n care aceste terenuri pot fi rezervate pentru scopuri neagricole (Fan,
Tafuri, 1998).
Tratarea cu ajutorul terenului agricol a fost folosit de industria petrolier pentru

tratarea nmolurilor de rafinrie timp de peste 25 de ani. Metoda a fost de asemenea folosit
pentru
tratarea solurilor contaminate cu produse petroliere grele (gudron, smoal) coninnd
hidrocarburi care variaz de la C10 la C35 (Fan i Tafuri, 1998).
21

Compostarea
Compostarea este procesul prin care materialele reziduale organice sunt degradate n humus
ca produs final. Compostarea implic interaciunea unei varieti de microorganisme incluznd
bacterii, protozoare, actinomicete i ciuperci. n operaiunile de compostare, bacteriile mezofile
i termofile sunt principalele responsabile de descompunerea proteinelor, lipidelor i grsimilor.
Protozoarele consum aceste categorii de compu i organici, care constitue o surs de hran i
pentru bacterii. Abundena protozoarelor n operaiunile de compostare este redus puternic
atunci cnd temperatura este ridicat n domeniul termofil. Actinomicetele i ciupercile sunt
prevalente n timpul fazelor de compostare mezofil i termofil. Ele sunt considerate a fi
responsabile pentru degradarea compu ilor organici complec i, cum sunt carbohidraii i celuloza
(Fan i Tafuri, 1998).
Principiile proceselor de bioremediere a solurilor contaminate cu hidrocarburi
Tehnicile de bioremediere includ un numr de sisteme ori procese care utilizeaz
microorganismele pentru tratarea solurilor i apelor freatice pentru degradarea ori descompunerea
reziduurilor periculoase, inclusiv hidrocarburile petroliere. Populaiile microbiene din siturile
contaminate au fost capabile s degradeze hidrocarburi, solveni clorurai, fenoli, PCB
(bifenil policlorurai) i diferite pesticide. i totu i, bacteriile nu pot degrada toi
contaminanii, sau i pot degrada prea lent. i unii contaminani degradabili pot s nu fie
accesibili pentru microorganisme deoarece, spre exemplu, ei sunt prea strns legai de particulele
solului (Hart, 1996). Citnd pe Bouwer, Hart (1996) arat c bioremedierea a fost folosit cu
succes pentru controlul contaminrii cu hidrocarburi.
Limitele bioremedierii in situ:
-procesul poate fi mai lent dect la tehnicile ex situ, -poate fi greu condus
-poate ca s nu ofere rezultate bune n solurile argiloase, ori n straturile mai profunde ale solului,
acolo unde oxigenul nu poate fi distribuit prin tratamente de suprafa. Sunt frecvent nregistrate
dificulti cu controlul fluxului n zona nesaturat. n plus, n cazul tuturor tehnicilor de
remediere in situ, subprodusele intermediare pot fi mai mobile i periculoase dect componentele
originale (Frick i colab.,1999).
Verstraete i Top (1999) atrag atenia asupra heterogenitii solului, sistemul sol prezentnd o mare
variabilitate spaial a proprietilor sale, care induce restricii n procesul de bioremediere.
Proprietile chimice ce joac un rol important n procesul de adsorbie, cum sunt pH-ul i
coninutul de materie organic, prezint o distribuie variabil ridicat. Aceast heterogenitate
afecteaz puternic cinetica de adsorbie i echilibrul dintre constituenii chimici i substanele
xenobiote. Transportul contaminanilor reactivi, care sunt adsorbii de argil, materia organic a
solului, etc. este de asemenea afectat de heterogenitatea proprietilor fizice i chimice ale solului.
Este important de notat c datorit modului de formare i dezvoltare a agregatelor structurale ale
solului, unii pori sunt n contact cu dinamica mediului ambiant, dar alii sunt inchi i.
Microorganismele sunt separate spaial i destul de puine. Solul reprezint un mediu ambiant ostil
pentru microorganismele selecionate i introduse de om pentru bioremediere, care niciodat nu i
poate menine numrul i activitatea celulelor iniiale dac ele nu au un avantaj selectiv.

Metoda de decontaminare in situ a apei freatice i solului poluate cu hidrocarburi are trei faze
succesive i complementare: decontaminarea hidraulic, drenajul activ cu ajutorul
produselor tensioactive i biodegradarea (Moser, 1997).
Recuperarea hidraulic este aplicat cu prioritate pentru partea de petrol u or mobilizabil i
poate extrage pn la 26% din petrol.

Faza a doua, drenajul activ cu ajutorul produselor tensioactive, se compune din dou pri:
una de infiltrare a tensioactivului specific, biodegradabil i netoxic, i recuperarea petrolului i
tensioactivului n zona nesaturat cu care ocazie se recupereaz circa 12,5 %
22

petrol i 90% tensioactiv, i a doua parte ce const n tratarea lentilelor de petrol din zona de
sprijin orizontal prin injecia de tensioactiv n profunzime, n vederea favorizrii recuperrii
corpurilor de impregnare restante.
Faza a treia biodegradarea const n reabilitarea prin biodegradare a hidrocarburilor reziduale.
Tehnica folosit are n vedere optimizarea aportului de elemente nutritive i de oxigen .
Factori care afecteaz biodegradarea solurilor poluate cu hidrocarburi
Biodegradarea produselor petroliere n sol este influenat de proprietile fizice i chimice ale
produselor petroliere i solului, gradul de poluare, condiiile climatice i prezena populaiilor
microbiene n sol.
Densitatea populatiilor microbiene.
Microorganismele capabile s degradeze hidrocarburile sunt distribuite peste tot n natur. n
soluri, pentru degradarea hidrocarburilor, sunt importante att ciupercile ct i bacteriile.
Pa ii biochimici importani n fragmentarea hidrocarburilor petroliere sunt oxidarea alcanilor cu
catene drepte sau ramificate i desfacerea nucleelor aromatice prin activiti enzimatice. Nici o
plant sau animal superior nu sunt cunoscute ca avnd astfel de posibiliti i relativ puine
microorganisme posed sistemul enzimatic necesar pentru a realiza ace ti pa i cruciali (Dineen i
colab.,1989).
Tipurile actuale i abundena microorganismelor depind de condiiile climatice, vegetaie, sol i
tipul de contaminani la care organismele au fost expuse. Biodegradarea rapid a hidrocarburilor
petroliere cere prezena unui nivel optim de bacterii n sol.
Densitatea nativ a populaiei bacteriene n sol poate fi estimat prin tehnicile de numrare a
microbilor care msoar unitile de colonii formate pentru consumarea petrolului sau prin
6
8
respirometrie, care msoar nivelul de bioxid de carbon eliberat. S-a sugerat c de la 10 la 10
uniti formatoare de colonii pe gramul de sol uscat vor asigura degradarea dorit a
hidrocarburilor petroliere. Totu i, numai densitatea microbian nu este un indicator direct al
activitii bacteriene ori al vitezei de degradare (Fan i Tafuri, 1998).
Orizonturile de suprafa ale solurilor, unde exist oxigen i elemente nutritive n concentraii
7
9
adecvate, conin aproximativ 10 -10 microorganisme/g de sol. Dintre acestea, numai
aproximativ 0,1-1 % sunt microorganisme care pot degrada petrolul. Dup contactul cu
hidrocarburile petroliere, solurile se ajusteaz din punct de vedere microbiologic, astfel nct
6
8
numrul de bacterii capabile de biodegradare cre te de la 10 la 10 (Dineen, 1989).
Uneori, hidrocarburile persist chiar n medii care conin specii capabile de biodegradare,
deoarece organismele nu au acces la compu ii pe care ar putea s-i metabolizeze.
Inaccesibilitatea organismelor poate fi rezultatul nemiscibilitii hidrocarburilor cu apa
sau adsorbiei lor pe sol. Hidrocarburile sunt puternic adsorbite pe sol, ceea ce le reduce
toxicitatea efectiv dar le limiteaz viteza de biodegradare.
n cadrul tehnologiei de bioremediere, un rol esenial l au lucrrile solului, care au nu numai
rolul de a pregti patul germinativ i de ntreinere a culturilor, ci mai ales pe cel de aerare a
solului, de cre tere a capacitii de reinere a apei, de reglare a regimului aerohidric, de rupere a
peliculei de petrol care mpiedic schimbul de gaze ntre sol i atmosfer, de diluie a poluantului
prin amestecarea cu sol nepoluat i reducerea n acest fel a concentraiei poluantului n zona de

dezvoltare a sistemului radicular, de cre tere a suprafeelor de contact dintre sol i poluant i deci
de cre tere a suprafeei de atac de ctre microorganisme, de aerare forat n momentul
efecturii lucrrilor, etc.
Microorganismele din mediul ambiant pot distruge compu ii organici prin degradarea lor la
compu i anorganici. Trei procese de transformare pot apare:
1. detoxifierea, incluznd mineralizarea (spre exemplu, conversia complet a compu ilor
organici in compu i anorganici cu ajutorul microorganismelor) i co-metabolismul (spre exemplu,
conversia compu ilor organici in ali ompu i organici);
23

activarea, care implic transformarea microbian a compu ilor organici n compu i toxici ori
produse persistente n mediul ambiant natural; i
difuzia, un proces care produce un produs netoxic care difuzeaz prin procesele de activare (Fan
si Tafuri, 1998).
ReacTia solului.
Umiditatea i pH-ul solului sunt factori care particip la selecia microorganismelor active n procesul
de bioremediere. Activitatea aerob necesit valori pH ntre 6 i 8. Comparativ cu reacia acid,
reacia slab alcalin asigur viteze mai mari de biodegradare a hidrocarburilor.

Solurile acide vor fi amendate cu carbonat de calciu (piatr de var) sau cu carbonat de calciu
i magneziu (dolomit) pentru cre terea pH-ului, asigurndu-se astfel i o surs de cationi. Solurile
alcaline vor fi amendate cu compu i acidifiani, cum ar fi sulfatul de aluminiu, pentru a-i cobor
pH-ul pn n domeniul dorit (Fan i Tafuri,1998).
Concentraia elementelor nutritive.
n plus fa de sursa de carbon organic i oxigen, bacteriile aerobe cer elemente nutritive pentru
a- i susine cre terea i activitatea metabolic. Solul supus bioremedierii poate fi tratat cu
macroelemente cum sunt azotul, fosforul, calciul, magneziul, i microelemente cum sunt
fierul, cobaltul, nichelul i borul (Fun i Tafuri, 1998).
Nivelele de azot i fosfor cerute pentru cre tere sunt estimate pe baza necesarului biomasei
bacteriene i concentraiei de hidrocarburi. n determinarea raporturilor carbon:azot:fosfor
(C:N:P) i coninutului de ap, raportul C:N:P de 300:10:1 pare a fi adecvat, deoarece
aproximativ o treime din hidrocarburi sunt convertite n mas celular i dou treimi n bioxid de
carbon (Fan i Tafuri, 1998).
Continutul de ap al solului.
Pentru a supravieui, microorganismele au nevoie de ap; prea mult ap poate limita fluxul de
aer prin sol, reducnd astfel oxigenul accesibil. Domeniul optim al coninutului de ap (20-40
procente de greutate sau 40-80 procente din capacitatea de cmp) pentru un loc dat va depinde de
tipul de sol, permeabilitate i saturaia n contaminani (Fan i Tafuri, 1998).

Cap. 2. Extractia biologica a metalelor grele

2.1 Metode biologice pentru determinarea gradului de toxicitate a solurilor
Poluarea apei i solului cu o multitudine de ageni poluani, de la nutrieni i pesticide pn la
metale grele i produse petroliere, provenii din industrie i din agricultur, afecteaz grav
sntatea oamenilor i distrug ecosisteme ntregi. Conform celui de-al 6-lea Program de aciune
n domeniul mediului al Uniunii Europene, solul este identificat ca o resurs neregenerabil,
supus presiunilor antropice i ca urmare sunt definite obiectivele de protejare a solului ca sistem
natural n general i n special mpotriva eroziunii i polurii. Legislaia n domeniul solului
difer pe cuprinsul Europei.

Analiza riscurilor determinate de prezena poluanilor n sol i transferul acestora n cadrul reelelor
trofice este un domeniu aflat n prezent ntr-o accelerat evoluie. n vederea caracterizrii riscurilor
determinate de prezena poluanilor n sol este imperios necesar existena efecturii determinarilor
de ecotoxicologie. Informaiile generate de laboratoare de profil pot avea un impact deosebit n
selectarea tehnologiilor de remediere (fizico-chimice i biologice).

Pe baza datelor obinute se pot fundamenta modele ale transferului i transformrii poluanilor
n mediul edafic, precum i interaciunile solului cu mediul hidric (ape de suprafa i
subterane), atmosferic i biotic (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Problema efecturii unor determinri rapide, ieftine care s stabileasc gradul de risc al reziduurilor
solide este de mare actualitate. Determinrile chimice sunt necesare pentru compararea
24

concentraiilor substanelor cheie periculoase care se gsesc n reziduurile solide cu valorile

limit din legislaia romn i cu cele propuse de Uniunea European.
Clasificarea de eurilor i depozitarea acestora, in conformitate cu Directiva 1999/31/EC
("Directiva Landfill") - Anexa II- si Decizia 2003/33/EC, impun urmtoarele tipuri de testri:
Nivel 1. Caracterizare primar;
Nivel 2. Teste de verificare a conformitii. Nivel 3. Verificri on-site.
Dintre Directivele Europene aflate strns legtur bioremedierea pot fi amintite:
HG nr. 128/2002 modificat i completat prin HG nr. 268/31.03.2005, care a introdus noi limitri
(care le anuleaz pe cele din Anexa nr. 3 a Ordinului MAPPM nr. 462) privind incinerarea de
eurilor care reprezint transpunerea Directivei 2000/76/CE;
HG nr. 95 /2005 Surse staionare majore de metale grele pot fi:
incinerare reziduuri, inclusiv co-incinerarea;
procese metalurgice termice, producia de aluminiu i alte metale neferoase, fier sau oel;
instalaii de ardere care produc energie i care folosesc combustibil solid;
arderi casnice;
procese de producie chimic specific, producnd intermediari i produse secundare.
Organizaia Internaional de Standardizare (ISO) traseaz liniile directoare privind certificarea
managementului reziduurilor i a serviciilor legate de aceste procese. Standardele ISO 9001:2000
privind managementul calitii i ISO 14001:2004 privind managementul de mediu sunt dou
dintre standardele cu un caracter general care precizeaz cerinele privind sistemele de
management care abiliteaz o organizaie s dezvolte i s implementeze o anumit politic i
obiective performante n cadru legal (Raport RESOLMET, 32161/2008)..
Domeniul ecotoxicologiei s-a dezvoltat remarcabil n ultimul timp datorit importanei deosebite
a determinrilor de toxicitate a substanelor din mediu asupra organismelor vii. Studiile de
ecotoxicologie completeaz determinrile chimice i ofer informaii specifice privind modul de
reacie al organismelor n condiii de stres ambiental.
Standardele internationale asigur sprijin pentru selecia metodelor experimentale care fac
posibil evaluarea potenialului ecotoxic al solurilor, levigatelor, apelor contaminate sau a
reziduurilor solide.
Domeniul de aplicare:
pentru evaluarea capacitii unui anumit tip de sol de a susine o biocenoz natural sau
activiti agricole
pentru evaluarea ecotoxicitii combinate a tuturor contaminanilor disponibili n sol sau n
materialele de sol
evaluarea ecotoxicitii substanelor potenial duntoare n cazul n care solul respectiv afecteaz
compoziia apei de suprafa sau a celei subterane

identificarea solurilor sau a reziduurilor solide cu un nivel de contaminare sczut pn la o

adncime de 1 metru i care poate rmne n natur fr s necesite tratamente speciale
determinarea potenialului ecotoxic care nu poate fi detectat pe cale chimic
monitorizarea i controlul tratamentelor aplicate solurilor contaminate i reziduurilor solide

monitorizarea i controlul solurilor i a materialelor de sol care au fost decontaminate i pot fi

reintegrate n circuitul biologic. (Raport RESOLMET, 32161/2008).

25

2.2 Bioremedierea solurilor contaminate cu metale grele

Estimarea gradului de poluare a solurilor i a eficienei tehnologiilor de remediere
Indicatori bacterieni i enzimatici de calitate.
Prima etap a oricrui proces de bioremediere a solurilor poluate este evaluarea ct mai corect a
nivelului de poluare: determinarea naturii poluanilor i a cantitii acestora, n vederea
elaborrii celor mai potrivite biotehnologii de remediere. Dac determinrile privind natura i
concentraiile poluanilor sunt n responsabilitatea laboratoarelor de profil, n cadrul
laboratorului de microbiologie se face o estimare a efectului pe care poluanii l au asupra
potenialului biologic general al solurilor afectate, a a cum este el definit de intensitatea
activitii microbiene i enzimatice. Acest potenial se apreciaz prin intermediul unor
indicatori bacterieni i enzimatici de calitate (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Cercetrile de microbiologie i enzimologie ambiental, se confrunt frecvent cu dificultatea
comparrii potenialului microbian i enzimatic al habitatelor, pornind doar de la parametri
individuali (un grup de bacterii, o activitate enzimatic). Pentru surmontarea acestor dificulti, sau elaborat dou formule originale pentru calcularea unor indicatori sintetici de calitate, care s-au
dovedit a avea o deosebit importan practic:
indicatorul bacterian al calitii solului i
indicatorul enzimatic al calitii solului.
Gsirea unor indicatori sintetici ai calitii biologice a unor habitate este o constant
permanent a preocuprilor cercettorilor din diverse domenii.
Cunoa terea potenialului microbian al habitatelor este de i mai mare interes, ntruct de
activitatea fiziologic i implicit enzimatic a microorganismelor depinde viteza cu care sunt
reintroduse n circuitul biogeochimic elementele majore care intr n compoziia substanelor
organice, ca i viteza ndeprtrii din sol a oricrui poluant. Relevana unor parametri individuali
(un grup de bacterii sau o enzim) este ns limitat, deoarece n acela i habitat coexist diverse
grupuri ecofiziologice: bacterii heterotrofe, chemotrofe nitrificatoare, denitrificatoare,
sulfoficatoare, desulfoficatoare, ferooxidante, fier-reductoare etc., al cror numr variaz cu
ordine de mrime. ntruct numrul bacteriilor care aparin diferitelor grupe fiziologice difer cu
cteva ordine de mrime de la o grup la alta, compararea rezultatelor pe baza unei singure valori
sintetice, sub forma unui indicator este foarte dificil. S-a pus la punct o formul, plecnd de la
premiza c funcia logaritmic ofer aceast posibilitate de a aduce la dimensiuni comparabile
valori foarte diferite ntre ele (Muntean, 1995, 1996).
De asemenea, activitatea enzimatic este divers ca i intensitatea fiecrei activiti n parte. Pentru
aprecierea potenialului enzimatic al solului, s-a perfectat o formul care ia n calcul valoarea real
individual a fiecrei activiti studiate, obinnd n final un singur numr, care poate lua valori cuprinse
ntre 0 (cnd nu este consemnat existena real a nici uneia dintre activitile studiate)

i 1 (cnd toate activitile au valorile reale individuale egale cu valorile teoretice maxime).
Formula asigur o pondere egal fiecrei activiti, prin aceasta realizndu-se un echilibru
dinamic ntre activitile luate n calcul. Unul dintre avantajele formulei este acela c face
posibil compararea potenialelor enzimatice ale diferitelor habitate stabilite de diferii
cercettori, n condiii de reacie identice (Muntean i colab., 1996).
Rezultatele obinute prin folosirea celor doi indicatori de calitate n cadrul diverselor cercetri

demonstreaz utilitatea indicatorilor, inclusiv pentru determinarea efectului diver ilor poluani
asupra habitatelor naturale.
De asemenea, indicatorii sintetici sunt utili pentru aprecierea eficienei unor biotehnologii de
remediere a habitatelor afectate de activitatea omului, ca i pentru estimarea potenialului
biologic general al altor habitate (Muntean i colab., 1996, 2007; Curticpean i Drgan-Bularda,
2007, citai n Raport RESOLMET, 32161/2008).

26

De altfel, potenialului biologic general al solurilor studiate va fi apreciat n fiecare etap pe baza
valorilor indicatorilor bacterieni i enzimatici de calitate. Aceasta deoarece cei doi indicatori
sintetici definesc potenialul general biologic al solului ntr-o form cuantificabil, numeric, cea
mai dezirabil pentru o estimare just, corect din punct de vedere tiinific a eficienei
msurilor ntreprinse pentru remedierea solurilor contaminate prin activitile specifice industriei
metalurgice.
Prezena n sol a unui poluant este imediat nregistrat de variaia numrului de bacterii
care aparin la diverse grupe ecofiziologice i de variaia intensitii activitii diferitelor
enzime. Datele din literatura de specialitate arat c, de regul, cre terea concentraiei unui
poluant este urmat de o scdere a potenialului microbian i enzimatic, la fel cum scderea
concentraiei poluantului este urmat de cre terea numrului de bacterii, respectiv de
intensificarea activitii enzimatice. Toate acestea sunt sintetizate n valorile calculate ale
indicatorilor enzimatici i microbieni ai calitii solului Muntean i colab., 2007)
Teste de ecotoxicitate.
Estimarea gradului de poluare a solului i a eficienei biotehnologiilor de remediere se poate face
i prin efectuarea unor teste de ecotoxicitate: - testul de inhibiie a cre terii Pseudomonas putida
(SR EN ISO: 2001) ; - i determinarea efectului inhibitor al apei asupra luminiscenei la Vibrio
fischeri (SR EN ISO 11348 (1-4): 2003). Se face astfel o raportare direct la standardele europene
care urmresc meninerea mediului ambiant la nivele controlabile (Raport RESOLMET,
32161/2008).
Izolarea microorganismelor cu potenial depoluant i de bioremediere ridicat
Bacteriile pot descompune, direct sau indirect (cometabolic) toate substanele organice
naturale, numero i produ i sintetici, printre care i substane toxice pentru ceilali componeni ai
ecosistemelor. Aceast capacitate degradativ a bacteriilor heterotrofe, numit infailibilitate
microbian, astzi este pus sub semnul ntrebrii de milioanele de substane chimice
xenobiotice, majoritatea recalcitrante, rezistente la degradarea microbian.
Degradarea substanelor organice se poate face direct, pe cale metabolic sau pe cale
cometabolic. n degradarea metabolic, substanele descompuse servesc drept surs de
nutrieni i donatori de electroni pentru chiar bacteria care o realizeaz. n degradarea
cometabolic, unele substane rezultate n urma aciunii degradante a unei anumite bacterii nu
sunt folosite pentru nutriie de ctre bacteria respectiv, ci pot fi degradate n continuare de ctre
alte bacterii sau sub influena unor produ i metabolici ai oricrei alte bacterii (acizi organici).
n contextul preocuprilor legate de remedierea solurilor afectate de contaminarea cu metale grele
este de mare interes gsirea, izolarea i selectarea de tulpini bacteriene din chiar habitatele poluate,
fiind crescut astfel ansa identificrii de tulpini deja adaptate condiiilor de poluare, deci de a
gsi microorganisme mai eficiente n aciunea de ndeprtare din sol a poluantului. Tulpinile
selectate vor fi supuse unor prelucrri n laborator, cu scopul de a le spori eficiena n procesul de
depoluare, urmnd ca ulterior s fie reintroduse n habitatele afectate, respectiv n modele
experimentale imaginate pentru remedierea solurilor contaminate (Raport RESOLMET,
32161/2008).
Bacteriile care aparin genului Pseudomonas (Gammaproteobacteria, ordinul IX
Pseudomonadales, familia I Pseudomonadaceae) au o nutriie chemoorhanoheterotrof, sunt
bacili flagelai polar, cu respiraie strict aerob, avnd oxigenul molecular drept acceptor final
de electroni n lanul respirator. Nu cresc la pH sub 4,5.

Produc siderofori compu i chelatori care leag i imobilizeaz fierul, dar i ali ioni metalici: Al,
Cr, Zn, Cu, Mn, Pb, Cd etc. Principalul siderofor produs de Ps. putida, ca i de alte specii ale aceluia
i gen (Ps. aeruginosa, P. fluorescens, P. chlororaphis), de asemenea foarte utile n procesele
decontaminrii solurilor poluate, este pyoverdina. Aciunea sideroforilor este de mare importan
3+
ecologic, dat fiind slaba accesibilitate a ionului Fe pentru organismele vii, datorit insolubilitii
compu ilor lui. Sideroforii leag compu ii Fe
27

3+

formnd complec i care sunt

transportai n interiorul celulelor unde pot fi folosii n respiraie de ctre

microorganismele anaerobe, cum sunt bacteriile fier-reductoare (Geobacter bremensis, G.
pelophilus, G. sulfurreducens).
Menionm c i unele poacee (gru, orz) produc o clas de compu i a a numiii
fitosiderofori, cu aciune similar sideroforilor produ i de bacterii.
O alt cale de mbogire a solubilitii compu ilor fierului trivalent din sol sau alte habitate este
acidifierea mediului, proces la care particip i microbiota habitatului, prin acizii organici
rezultai n urma autolizei, respectiv excreiile rdcinilor plantelor.
Membri genului Pseudomonas sunt unanim recunoscui ca avnd o rspndirea cvasiubicuitar i
cea mai mare capacitate de degradare aerob a unui numr mare de hidrocarburi, compu i
aromatici i derivai, dintre care numero i compu i naturali i produ i finali sau intermediari ai
activitii industriale. Din marea diversitate de compu i pe care diverse tulpini de Pseudomonas i
pot degrada metabolic amintim: benzoat, ftalat, salicilat, compu i policiclici, toluen, camfor,
xilen, p-crezol, fenilacetat, naftalin, 1,2,4-trimetil benzen, nicotin, 3-clorobenzoat. Genele
responsabile de sinteza enzimelor implicate n degradarea acestor compu i cu mare impact
detrimental asupra mediului ambiant sunt plasate pe plasmide, dintre care cel mai intens studiat
este plasmida TOL (numit i pWWO) i derivaii din ea, care i are originea ntr-o tulpin de
Ps. putida. Este o plasmid ce posed genele necesare pentru descompunerea toluenului, m- i pxilenului. Alte plasmide poart gene responsabile de degradarea altor compu i cu mare impact de
mediu: CAM (camfor), OCT (octan), NAH (naftalin) (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Trebuie menionate i alte proprieti ale speciilor de Pseudomonas, importante, determinate, de
asemenea, de gene plasmidiale: rezistena la antibiotice (cloramfenicol, tetraciclin,
streptomicin, tobramicin, gentamicin, carbenicilin etc.), la bacteriofagi, la bacteriocine i mai
ales rezistena la diferii ageni fizico-chimici, care n mod normal sunt foarte duntori
pentru alte microorganisme, printre care radiaia UV, borai i cromai, ca i muli ioni
metalici. Aceste proprieti sunt utile pentru cercettor n ncercarea de a izola tulpinile
respective din mediul lor natural: prezena n mediul de cultur a antibioticelor la care manifest
rezisten asigur eliminarea altor tulpini bacteriene sensibile la antibioticul respectiv.
Speciile genului Pseudomonas manifest i o anumit rezisten la aciunea metalelor, care pentru
alte specii bacteriene sunt toxice. La Ps. aeruginosa, specia tip a genului, ca i la Ps. fluorescens,
2+
rezistena la cupru este codificat de gene cromosomale. La o tulpin de Ps. putida ionul Cu se
poate acumula n concentraii de 6,5% din greutatea uscat a bacteriei. Capacitatea de acumulare a
2
fost mai mare n culturi precultivate n condiii n care ionul SO 4 a fost limitativ.
La Ps. stuzeri, rezistena la concentraii mari de argint se poate datora formrii de complexe de
sulfur de argint, deoarece nu s-a consemnat formarea niciunui complex cu polifosfai sau proteine
chelatoare. La o tulpin din aceast specie, izolat dintr-o min de argint, s-au gsit trei plasmide,
dintre care cea mai mare (~50 Md) posed genele responsabile de rezistena la metal.

Ps. fluorescens detoxific aluminiul prin producerea unui metabolit care complexeaz metalul.
Cnd n mediu este prezent i fier, cei doi ioni trivaleni sunt imobilizai ntr-un complex bogat
n lipide, care mai conine i P (fosfatidil-etanolamin).
Ca i n cazul Al i Fe, rezistena la Zn, Ca, Ga se datoreaz asocierii cu fosfatidil-etanolamina,
gsit n complexele bogate n lipide (Appana i colab., 1996).
Se consider c aproximativ jumtate dintre plasmidele cunoscute la Ps. aeruginosa confer
2+
rezisten la ionul Hg (Garrity i colab., 2005). O plasmid a speciei Ps. stutzeri (pPB)
confer rezisten la mercur i la compu ii organo-mercurici.

28

Rezistena la bor, crom i teluriu este determinat tot de gene plasmidiale. Dup cre terea n
prezena unor concentraii crescute de telurit, tulpini de Ps. aeruginosa i Ps. putida, purttoare
ale plasmidelor responsabile de rezistena la metal, acumuleaz structuri ce conin teluriu n
spaiul periplasmic.
Tot pe plasmide sunt situate n mod normal i genele care determin rezistena la arsen. Arsenaii
sunt redu i la arsenii, care sunt eliminai la exteriorul celulei printr-un sistem de export. A fost
identificat i un operon cromosomal implicat n reglarea acestei ci metabolice. Operonul a hibridizat
cu segmente cromosomale ale unor enterobacteriacee, respectiv cu cel de Ps. aeruginosa. Acest
operon pare a fi precursorul evolutiv al operonilor plasmidiali, care, n plus, au avantajul de a fi
prezeni n mai multe copii n aceea i celul, creia i confer, n consecin, o capacitate mai mare
de rezisten la metale (Diorio i colab., 1995, Raport RESOLMET, 32161/2008).

Plasarea genelor responsabile de degradarea unor compu i poluani cu impact att de mare, ca i a
unora care confer rezisten la aciunea toxic a metalelor grele, pe plasmide transferabile
chiar interspecific reprezint un mare avantaj.
Alte gene cu rol n degradarea hidrocarburilor sunt situate pe elemente transpozabile (Raport
RESOLMET, 32161/2008).
Date fiind progresele deosebite din domeniul geneticii moleculare, pot fi construite plasmide sau
ali vectori genetici deintori ai genelor de interes, care s aib o mare mobilitate interspecific
i, implicit, bacteriile posesoare s manifeste o mare eficien biotehnologic n demersuri de
mare actualitate, cum este i acela al prezentului proiect de cercetare.
De mare interes pentru biotehnologiile de remediere a mediului ambiant sunt i membri genului
Burkholderia (Beta-proteobacterie, ord. I Burkholderiales, fam. I Burkholderiaceae), (Raport
RESOLMET, 32161/2008). n ultimii ani acest interes a crescut progresiv, datorit legturii cu
poluarea chimic a mediului ambiental i preocuprilor de exploatare a capacitilor degradative ale
bacteriei n biotehnologiile de remediere. Atenia este reinut de dou specii ale genului:

Burkholderia cepacia (numit anterior Pseudomonas cepacia) i Burkholderia multivorans.

Sunt bacterii chemoorganoheterotrofe aerobe, dar pot folosi nitratul ca acceptor final de
electroni n respiraia anaerob.
Toate speciile genului au capacitatea de a acumula poli--hidroxibutirat (PHB) ca depozit de C,
care poate fi degradat i utilizat ca surs nutritiv atunci cnd condiiile de cre tere devin
improprii. Capacitatea de a produce i stoca PHB este un mare avantaj n competiia
interspecific n habitatele naturale ale bacteriilor, de regul srace n nutrieni.
Speciile genului produc nenumrai siderofori. Pe medii deficiente n fier sintetizeaz (ca i

Ps. aeruginosa i Ps. fluorescens) acid salicilic, compus cu mare capacitate siderofor, de
legare a fierului i a altor metale.
Ca i speciile de Pseudomonas, Burkholderia cepacia este foarte eficient n degradarea
toluenului.
B. cepacia cre te luxuriant pe medii ce conin ierbicide halogenate: acid 2,4,5triclorofenoxiacetic (2,4,5T) i acid 2,4-diclorofenoxiacetic (2,4D).
Tulpini naturale de B. cepacia sunt foarte active n degradarea bifenililor policlorinai.
Dehalogenarea apare frecvent dup clivarea inelului, ca i n cazul metabolismului altor compu i
haloaromatici. Au fost construii hibrizi in vitro, care pot realiza degradarea total a 2-Cl, 3-Cl,
2,4-dicloro- i 2,4,5-triclorobifenilului (Havel i Reineke, 1991).

De multe ori, degradarea compu ilor toxici poluani ai mediului nconjurtor este controlat de
gene situate pe plasmide. O plasmid de 50 kb poart genele rspunztoare de degradarea pnitrofenolului de ctre B. cepacia, urmnd o cale oxidativ cu formare de hidrochinon i nitrit
(Chauhan i colab., 2000). Plasmida este conjugativ i poate fi transferat la tulpini nepurttoare,
un avantaj n contextul demersului pentru gsirea celor mai potrivite tulpini pentru o
decontaminare ct mai eficient a mediului.

29

O cale nou de degradare a toluenului este asigurat de enzime a cror sintez este reglat de
gene situate pe plasmide: o cale de degradare inductibil, alta constitutiv, aceasta din urm fiind
reglat de gene situate pe plasmida TOM, de 108 kb.
Plasmida MOP poart gene implicate n catabolismul derivailor de ftalat, iar pe o plasmid de
numai 2 kb se gsesc genele responsabile de degradarea ierbicidelor care au n formul
fenilcarbamat (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Rolul microorganismelor n fixarea sau mobilizarea metalelor n sol
Mobilitatea diferiilor compu i organici sau anorganici ai metalelor n sol, ca i n alte habitate,
este strns legat de starea lor de oxidare. Energia folosit de sistemele vii pentru desf urarea
activitilor vitale este asigurat de reaciile de oxidoreducere, catalizate de enzimele primei
clase oxidoreductaze, n sistemele biologice numite generic i dehidrogenaze, datorit faptului
c, de obicei, n lanul transportor de electroni, transferul de electroni este nsoit de un
+
transfer de protoni (H ).
Totalitatea reaciilor de oxidoreducere efectuate la nivelul diverselor componente celulare,
n urma crora celula obine energia necesar desf urrii propriei activiti vitale
constituie respiraia.
Tendina unui compus chimic de a accepta sau de a ceda electroni n reaciile de oxidoreducere
biologic este exprimat cantitativ de potenialul de oxidoreducere (redox) = Eh.
+
Pentru a vizualiza sensul transferului de electroni (H ) n sistemele biologice a fost imaginat o
ax pe care diferitele cupluri redox sunt a ezate n ordinea cresctoare a potenialului lor redox.
Aceast ax mai poart numele turnul electronilor.
+

Forma redus a perechii redox din vrful turnului (valori negative; 2H /H2: Eh = 0,421 V) are
cea mai mare tendin de a ceda electroni, deci de a se oxida;
forma oxidat a cuplului de la baz are cea mai mare tendin de a accepta electroni,
deci de a se reduce (O2/H2O: Eh = +0,816 V).
Cuplurile redox situate la mijlocul turnului electronilor pot aciona n dou moduri:

ca acceptori de electroni, pe care i preiau de la cuplurile cu potenial redox mai negativ, situate
spre vrful turnului;
ca donori de electroni, pe care i cedeaz cuplurilor cu potenial redox mai pozitiv, situate spre
baza turnului.
n mediile lor de via, inclusiv n soluri, diferite grupe ecofiziologice de bacterii efectueaz
reaciile de oxidoreducere conform potenialelor redox prezentate n turnul de electroni (Raport
RESOLMET, 32161/2008).
Exemplu:
Desulfovibrio: oxideaz H2 cu ajutorul SO42; 2H+/H2 (Eh = 0,42 V);
2

SO4 /H2S (Eh = 0,22 V); Eh = 0,20 V;

4H2 + H2SO4

H2S + 4H2O + E (38 KJ/mol);

Beggiatoa:

oxideaz H2S cu ajutorul O2: SO4 /H2S (Eh = 0,22 V);

O2/H2O (Eh = +0,816); Eh = 1,04 V:

H2S + 2O2 H2SO4 + E (200 KJ/mol)
Genul Thiobacillus (Beta-proteobacterie, ord. II Hydrogenophilales, fam. I
Hydrogenophilaceae) cuprinde bacterii Gram negative de form bacilar, unele specii cu
mobilitate flagelar. Sunt bacterii chemolitoautotrofe, a a numitele bacterii sulfuroase
nepigmentate, care obin energia necesar fixrii CO2 din reaciile de oxidare a compu ilor
redu i ai sulfului, sau chiar a sulfului elementar. Capacitile lor nutritive i respiratorii sunt
complexe. Oxideaz de preferin S sau tiosulfat, mai degrab dect hidrogen sulfurat. Reacia
efectuat de Th. thiooxidans: S + 1O2 + H2O H2SO4 + E
30

Ca urmare a producerii acidului sulfuric, aciditatea n mediul lor natural poate s ajung la 1,5.
Sunt bacteriile cele mai tolerante la aciditate cunoscute. Se dezvolt optim la pH 2-4. Sunt
obligat aerobe. Ca i Beggiatoa, se pot hrni i heterotrof. Habitatele naturale comune ale
bacteriilor sulfuroase nepigmentate sunt apele i solurile bogate n compu i redu i ai sulfului,
apele din mine, izvoarele sulfuroase.
Tot obligat aerob este i Th. ferrooxidans, care, dup cum o arat numele, oxideaz compu ii
fierului n care acesta se gse te n stare bivalent, la compu i n care Fe este trivalent, la fel ca i
alte ferobacterii sau bacteriile feruginoase (Gallionella, Sphaerotilus):
2FeSO4 + H2SO4 + O2 Fe2(SO4)3 + H2O + E
2Fe(OH)2 + O2 + H2O 2Fe(OH)3 + E
Bacteriile feruginoase se ntlnesc mai frecvent n ape i mai rar n soluri. Prezint o importan
practic n special pentru sistemele de aprovizionare cu ap. Conductele metalice pot s fie corodate
sub aciunea bacteriilor feruginoase. De asemenea, formarea compu ilor oxidai, n special a
hidroxidului feric Fe(OH)3 compus insolubil, poate duce la colmatarea conductelor metalice,
prin depunere sub forma unor straturi de culoare ro ie-maronie, dup care se recunoa te prezena
ferobacteriilor n mediile lor naturale de via (Raport RESOLMET, 32161/2008).

Bacteriile denitrificatoare = nitrat reductoare au respiraie anaerob, folosind nitratul drept

acceptor final de electroni n sistemul transportor de electroni.
n prezena O2 fac respiraie aerob, chiar dac n mediu se gsesc i nitrai, datorit eficienei
energetice net superioare a respiraiei aerobe, precum i datorit represiei de ctre O 2 a sintezei
nitratreductazei. Exist specii care, prin reaciile produse se ncadreaz n acela i timp la dou
grupe bacteriene distincte din punct de vedere ecofiziologic.
De exemplu, Thiobacillus denitrificans, facultativ aerob, n prezena O 2 poate efectua reaciile
de oxidare a compu ilor redu i ai sulfului, dar n absena O 2, pentru oxidarea acestora folose te
oxigenul din nitraii prezeni n mediu:
S + 2HNO3 H2SO4 + N2 + O2 + E
Astfel, Th. denitrificans este o bacterie sulfoficatoare, deoarece oxideaz compu ii redu i ai
sulfului cu formare de sulfai, iar pe de alt parte este o bacterie denitrificatoare, ntruct, n
condiiile specificate, produce N2 din nitrai. Este un exemplu tipic de respiraie anaerob, n

care acceptorul final de electroni (H) nu este O 2 ci un compus anorganic oxidat (NO3 ). Unele
bacterii denitrificatoare pot oxida i compu i redu i ai fierului, altele pot face fermentaie, deci
bacteriile denitrificatoare au o gam foarte larg de opiuni n privina mecanismelor alternative
ale metabolismului energetic.
Bacteriile desulfoficatoare = sulfat-reductoare sunt tot bacterii anaerobe, la care acceptorul
2
final de electroni este sulfatul (SO 4 ). Produsul final al reducerii sulfailor este hidrogenul
sulfurat (H2S). n reducerea asimilatorie a sulfailor, H 2S este convertit n sulf organic, n
componena unor aminoacizi (eseniali: cisteina i metionina; neeseniali: glutation, taurin i
homocistein). n reducerea neasimilatorie este excretat n mediu. Specia desulfoficatoare tipic
este Desulfovibrio desulfuricans (Delta-proteobacterie). Reacia produs:
4H2 + H2SO4 H2S + 4H2O + E
Disproporionarea sulfului. Disproporionarea sau dismutaia este o reacie chimic n urma

creia un element este simultan redus i oxidat formnd doi produ i diferii. Unele bacterii sulfat
reductoare au capacitatea de a scinda un compus al sulfului aflat ntr-o stare intermediar de
oxidare, n doi compu i unul mai redus i cellalt mai oxidat dect substratul originar. De
exemplu, D. sulfodismutans poate descompune tiosulfatul (stare de oxidare intermediar) n
sulfat (mai oxidat) i hidrogen sulfurat (mai redus):
Na2S2O3 + H2O Na2SO4 + H2S + E

31

Procesul are semnificaie ecologic, deoarece asigur o cale prin care bacteriile desulfoficatoare
pot recupera energia unor compu i ai sulfului intermediari, rezultai ca urmare a oxidrii
incomplete a H2S de ctre bacteriile sulf-oxidante (Beggiatoa, Thiobacillus).
Transformrile metalelor efectuate sub aciunea microorganismelor constituie o verig
cheie a ciclurilor metalelor n biosfer. Transformrile metalelor sunt dominate de reaciile
de oxidoreducere, complexarea compu ilor organici i anorganici i schimbarea ntre formele
solubile i insolubile n ap.
Atunci cnd un microorganism oxideaz sau reduce un metal, acesta precipit sau devine
6+
3+
solubil. De exemplu: Cr este redus la Cr , care precipit sub form de oxizi, sulfuri sau
fosfai de crom (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Bacteriile care triesc n medii cu concentraii mari de metale dispun de mecanisme fiziologice
specifice, care le permit s supravieuiasc n aceste condiii improprii: precipitarea
extracelular, legarea ionilor metalici i eliminarea lor la suprafaa celulei, sechestrarea
intracelular, sub form de incluzii intracitoplasmatice.
Legarea cationilor la suprafaa celulei a devenit unul dintre cele mai atractive modele de
biotransformare. Acele metale care posed o configuraie a electronilor ce conine 10-12 straturi de

electroni sunt adesea toxice pentru organisme, la concentraii relativ sczute. n acest grup intr
2+
+
2+
2+
2+
Hg , Ag , Pb , Cd , Zn .
Interaciunile metal-microorganism joac un rol important n numeroase biotehnologii, ca
bioremedierea, biomineralizarea, biole ierea, coroziunea microbian i de aceea suscit un
interes mereu crescut n ultimii ani. Se urmre te folosirea tulpinilor bacteriene n culturi pure sau
n consorii capabile s mobilizeze/imobilizeze ionii metalici (Satchanska i colab., 2005, dup
Raport RESOLMET, 32161/2008).
n vederea bioremedierii habitatelor poluate, contaminarea simultan cu metale, pesticide sau
hidrocarburi ridic probleme i mai greu de rezolvat.
Problema polurii cu reziduuri mixte, n special cu metale i hidrocarburi solicit nainte de
toate izolarea de tulpini cu nalte capaciti de biotransformare a acestor poluani. n
consecin, un scop major al tuturor biotehnologiilor care vizeaz depoluarea, pstrarea i
conservare habitatelor naturale const n gsirea microorganismelor cu cele mai performante
capaciti de transformare n sensul dorit, n exploatarea cilor metabolice naturale, cre terea
eficienei acestora, pentru optimizarea procesului decontaminrii.
Remedierea metalelor implic adesea 5 abordri:
izolarea,
imobilizarea,
mobilizarea,
separarea fizic i
extracia.
Imobilizarea i mobilizarea implic procese de bioremediere efectuate de bacterii. Imobilizarea
este o tehnic de reducere a mobilitii contaminantului prin alterarea proprietilor lui fizicochimice. Se folosesc microorganisme, iar procesul se poate desf ura in situ sau ex situ (Raport
RESOLMET, 32161/2008).
Microorganismele pot mobiliza metalele prin le iere autotrof sau heterotrof, chelare de ctre
metabolii i siderofori, metilare i transformri redox. Le ierea heterotrof este atunci cnd
microorganismul acidific mediul prin eflux de protoni (for protonmotrice), avnd drept urmare

eliberarea cationilor metalici. Le ierea autotrof este atunci cnd bacteria acidofil obine energia
2+
necesar fixrii CO2 prin oxidarea compu ilor anorganici redu i ai fierului (Fe ) sau a compu ilor redu
3+

i ai sulfului. Sideroforii sunt liganzi specifici ai Fe , dar pot lega i alte metale, ca Mn, Mg, Cr etc.
Metilarea implic grupul metil care este transferat pe cale enzimatic pe un metal, formnd un numr
de diferii metaloizi. Transformrile redox permit microorganismelor s mobilizeze metalele,
metaloizi i compu ii organometalici. Exist numeroase

32

tehnici de mobilizare a metalelor, tehnologia fiind aleas i de n funcie de caracteristicile fizice

i chimice ale metalului.
Arsenul poate aprea n forme anorganice sau organice.
Trioxidul de arsen, arsenitul de sodiu i triclorura de arsen sunt compu ii anorganici cei mai
comuni. Neurotoxicitatea pentru sistemul nervos central sau periferic se poate datora compu ilor
anorganici i ncepe de obicei cu schimbri de sensibilitate urmat de slbire a activitii mu
chilor.
Compu ii organici ai arsenului se pot afla, de asemenea, n form trivalent sau pentavalent i pot
aprea n form metilat, ca rezultat al biometilrii n sol, ape, sedimente sau n organismele vii.
Formele pentavalente ale arsenului sunt pentoxidul, acidul arsenic, arsenaii de exemplu PbHAsO4,
folosit pe vremuri ca pesticid pentru combaterea gndacului de Colorado. Formele pentavalente ale
arsenului afecteaz activitatea enzimatic n organismele animale superioare i la om. Au fost
descoperite bacterii care pot folosi compu ii oxidai ai arsenului n respiraia anaerob, n timpul
5+
creia ace tia sunt redu i la compu i ai arsenului trivalent (As
3+

As ) (reducere neasimilatorie): Sulfurospirillum arsenophilum i Sulfurospirillum barnesii

(Zobrist, 2000). Acela i autor descrie bacteria Shewanella (Gammaproteobacteria, ord. X.
Alteromonadales, fam. I. Alteromonadaceae) chemoorganoheterotrof facultativ anaerob, care nu
5+
2+
reduce compu ii As , dar poate elibera ionul n mediu, ca i compu i redu i ai fierului (Fe ).
S-a descoperit c Pseudomonas arsenitoxidans cre te chemolitoautotrof, obinnd energia
necesar fixrii CO2 din reaciile de oxidare a compu ilor redu i ai arsenului (Santini i colab.,
2000). Bacteria este capabil s creasc i n prezen de substan organic, deci este doar
facultativ autotrof. Cre terea este mai intens n prezena arsenitului. Prin aceast capacitate de
a- i obine energia n urma reaciilor de oxidare a arsenitului, aceast tulpin de Ps.
arsenitoxidans este un organism unic n lumea procariotelor. Descoperirea are o importan
deosebit, deoarece alte bacterii care oxideaz compu ii redu i ai arsenului (Bacillus
arsenoxydans, Alcaligenes faecalis) nu pot cre te chemolitoautotrof. De aceea, descoperirea
acestei tulpini de Ps. arsenitoxidans reprezint un avans substanial n nelegerea
interaciunilor dintre microorganisme i compu ii arsenului, att de bine cunoscui pentru
aciunea lor puternic antibiotic (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Cromul este prezent att n organismele vii ct i n roci, ape i soluri. Exist n natur doar sub form
de compu i, nu i sub form elementar. Cele mai frecvent ntlnite forme n natur sunt compu ii
2+
3+
6+
cromului bivalent (Cr ), trivalent (Cr ) i hexavalent (Cr ). Pentru fabricarea oelului se folose te
0

2+

6+

2+

Cr . Din activitile industriei metalurgice rezult Cr i Cr , n timp ce Cr apare n mod

natural n mediul nconjurtor. Toxicitatea compu ilor cromului este dat de starea de valen a
metalului. Absorbia compu ilor cromului de ctre celule este mai intens n cazul compu ilor cu
6+
2
Cr , deoarece anionul cromat (CrO4 ) ptrunde n celule prin difuzie facilitat, n timp ce de
3+

ptrunderea compu ilor cu Cr sunt responsabile difuzia pasiv i fagocitoza, procese mai puin
eficiente. Din punctul de vedere al impactului negativ al compu ilor cromului asupra sntii
6+
mediului ambiant, cel mai mare interes l prezint compu ii cu Cr , cel mai frecvent ntlnii n
siturile contaminate. Cr

6+

3+

poate fi redus la Cr , de ctre materia organic i ioni S

2+

i Fe , n condiii anaerobe, frecvent ntlnite n apa freatic, respectiv n soluri inundate.

2

n prezena cromailor (CrO4 ) i a dicromailor (Cr2O7 ), cationii metalici precum cei

de plumb precipit. De asemenea, n prezena cromailor i dicromailor oxizii de fier i de
aluminiu sunt asorbii de particulele solului.
Toxicitatea i mobilitatea cromului depind de caracteristicile solului i de cantitatea de materie

organic ncorporat de acesta. Cromul hexavalent este mai toxic i mai mobil dect toate celelalte
forme. Cromul trivalent este de asemenea mobil, dar mobilitatea lui descre te cu adsorbia de ctre
mineralele argiloase i scderea pH-ului sub 5. Cre terea pH-ului stimuleaz le ierea, solubilizarea
compu ilor cromului hexavalent. n mod normal, cnd cromul este eliminat n apele naturale, el se
acumuleaz n sedimente, care pot fi supuse procedurilor de bioremediere
(Raport RESOLMET, 32161/2008).

33

Beyenal i Lewandowski, 2004 (Raport RESOLMET, 32161/2008), evalueaz efectele

mineralelor prezente n straturile situate sub sol asupra eficienei ndeprtrii plumbului din apa
freatic, folosind biofilme compuse din microorganisme sulfat-reductoare i examineaz
stabilitatea depozitelor de metal dup ce biofilmele au fost expuse temporar la aer. Pentru
cuantificarea efectelor, plumbul a fost imobilizat n biofilme cu Desulfovibrio desulfuricans,
crescut n condiii anaerobe n dou bioreactoare umplute unul hematit (redox-activ) i cellalt
cu cuar (redox-inert). Biofilmele crescute pe hematit a fost mai dense, mai groase i mai
poroase dect cele crescute pe cuar. Concentraiile medii de H 2S au fost mai mari n biofilmele
crescute pe cuar dect n cele crescute pe hematit. Plumbul a fost imobilizat mai eficient n
biofilmele crescute pe cuar dect n cele crescute pe hematit. n timpul desf urrii
experimentului, sub aciunea bacteriei desulfoficatoare s-a produs H 2S, care a reacionat cu Pb
prezent formndu-se PbS care precipit. S-a demonstrat c plumbul precipit mai mult n
prezena biofilmului situat lng compu i redox-ineri (cuar). Depozitele de plumb au fost
parial reoxidate, mai ales n biofilmele crescute pe hematit. n ambele bioreactoare, biofilmele
au rspuns la prezena O2 prin scderea densitii lor i prin cre terea ratei de producere a H 2S.
3+

2+

De i reducerea Fe la Fe nu a fost cuantificat, s-a constatat c fierul a fost eliberat continuu de

pe hematit tot timpul desf urrii experimentului.
Umrania (2006) (Raport RESOLMET, 32161/2008), izoleaz microorganisme acido-termofile
diferite din sol, nmol i ap din medii poluate n urma activitilor din industria metalurgic, n
vederea utilizrii lor pentru bioremedierea metalelor grele toxice.
A fost ameliorat tolerana acestor microorganisme la concentraii ridicate de Ag, As, Bi, Cd,
Cr, Co, Cu, Hg, Li, Mo, Pb, Sn i Zn.
Izolarea i adaptarea microorganismelor la concentraii mari de metale s-a fcut prin cultivarea
lor pe medii pentru bacterii autotrofe, n diferite condiii de incubare: pH: 2 4,5; temperatur:
3
7
40 65C; concentraii ale metalelor n mediile de cultur:10 10 M. Dac la concentraia
7

metalelor de 10 M a obinut 72 de izolate, la concentraia de 10 M a metalelor au rmas 16

izolate diferite. Izolatele au fost folosite pentru testarea capacitii lor de biosolubilizare a
minereurilor de sulfuri metalice.
n cazul calcopiritei (CuFeS2) au obinut un procent de solubilizare a cuprului de 85,82%, iar n
cazul covelitei (CuS) un procent de 97,5%, dup 5 zile de incubare, n prezena a unei concentraii a
3
metalelor de 10 M, pH 2,5, la 55C. Bioadsobia a fost mai bun n calcopirit: Ag 73%, Pb 35%,
Zn 34%, As 19%, Ni 15% and Cr 9% (Raport RESOLMET, 32161/2008).
Microorganisme care realizeaza indepartarea metalelor prin oxidari si utilizari biologice (dupa DSMZ-Deutsche
Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Braunschweig, Germany,

www.dsmz.de/strains/degradtn.htm)

Substanta
Denumirea

Arsenate AsO4

Chrysiogenes arsenatis

Sulfurospirillum arsenophilum

Sulfura de carbon CS2

Methanococcus maripaludis

Methanothermobacter marburgensis

Thiobacillus thioparus

Monoxidul de carbon
Acetitomaculum ruminis

Acetohalobium arabaticum

Bacillus schlegelii

Bacillus sp.

Carboxydothermus restrictus

Clostridium formicaceticum

Moorella thermoacetica

Mycobacterium sp.

Carbonat
Bryantella formatexigens

Cyanamide CN2H2

Myrothecium verrucaria

Fe(III)
Desulfuromonas palmitatis

Thermoterrabacterium ferrireducens

Fier feros Fe(II)

Acidithiobacillus ferrooxidans

Leptospirillum ferriphilum

FeSO4
Alicyclobacillus disulfidooxydans

Hydrogen sulfurat H2S

Blastochloris sulfoviridis

Rhodovulum euryhalinum

Rhodovulum sulfidophilum

34

Mn(IV)
Desulfuromonas palmitatis

Geobacter bremensis

Geobacter pelophilus
Nitrate
Paracoccus solventivorans
Oxid de azot NO
Pseudomonas aeruginosa
Pirita FeS2
Alicyclobacillus disulfidooxydans
Sulfat
Desulfomicrobium escambiense
Sulfide
2-

(S ) H2S,

Pandoraea norimbergensis
NaHS, Na2S, Ag2S, CdS etc.

Paracoccus pantotrophus

Rhodovulum euryhalinum

Rhodovulum sulfidophilum

Thermithiobacillus tepidarius

Xanthobacter tagetidis
Sulfonai
Clostridium pasteurianum
Sulf
Acidianus ambivalens

Acidianus brierleyi

Acidianus infernus

Acidithiobacillus thiooxidans

Desulfomicrobium baculatum

Desulfomicrobium norvegicum

Desulfurococcus amylolyticus

Desulfurococcus mobilis

Desulfurococcus mucosus

Desulfuromonas acetoxidans

Geobacter bremensis

Geobacter pelophilus

Pandoraea norimbergensis

Pyrococcus furiosus

Pyrococcus woesei

Staphylothermus marinus

Thermithiobacillus tepidarius

Thermococcus celer

Thermofilum pendens

Thermoplasma volcanium

Thermoproteus neutrophilus

Thermoproteus tenax

Thiobacillus sp.

Thiomicrospira thyasirae
2

Thiosulfate (S2O3 ),

Blastochloris sulfoviridis

Chlorobium limicola

Prosthecochloris vibrioformis

Hydrogenophaga palleronii

Hydrogenophaga pseudoflava

Marichromatium purpuratum

Pandoraea norimbergensis

Paracoccus pantotrophus

Rhodovulum sulfidophilum

Thermithiobacillus tepidarius

Xanthobacter tagetidis

Bioremedierea solurilor contaminate

Prin bioremediere nelegem folosirea microorganismelor pentru degradarea contaminanilor
care implic riscuri pentru mediul nconjurtor, deci i pentru sntatea omului. n mod normal, n
procesele de bioremediere sunt folosite diferite tipuri de microorganisme, care acioneaz n
paralel ori secvenial pentru a realiza depoluarea.
O abordare frecvent a bioremedierii este aceea a stimulrii unui grup de microorganisme n
scopul orientrii activitii ecologice n sol n direcia scopului propus. Pentru aceast abordare
se folose te termenul de biostimulare. Biostimularea poate fi realizat prin schimbarea unor
parametri ambientali: umiditate, pH, concentraie de O 2.
O alt abordare frecvent este a a-zisa bioaugmentare: microorganisme selectate pe baza
capacitii lor mari de degradare a poluailor sunt inoculate n siturile contaminate. Cele dou
abordri nu se exclud, ci pot fi folosite simultan.
Bioremedierea poate fi realizat in situ sau ex situ. Bioremedierea in situ nseamn tratarea la
faa locului a habitatelor afectate (n cazul de fa solurile). Bioremedierea ex situ nseamn
tratarea solurilor contaminate n afara sitului lor natural, n laborator, n modele experimentale,
bioreactoare, n care se pot crea condiii favorabile pentru cre terea randamentului degradrii
controlate a poluanilor (Raport RESOLMET, 32161/2008).
35

Modele de bioremediere a solurilor contaminate

Dup identificarea siturilor afectate i selecionarea din natur, eventual procurarea din
coleciile de culturi bacteriene recunoscute pe plan mondial (ATCC = American Type Culture
Collection; DSMZ = Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen) de tulpini
bacteriene adaptate condiiilor solurilor studiate, se concep n laborator modele
experimentale viznd crearea condiiilor optime de bioremediere a solurilor contaminate cu
metale grele, hidrocarburi, cu produ i rezultai n urma emisiilor de dioxid de sulf etc..
Date din literatura de specialitate (Raport RESOLMET, 32161/2008). Groudev i colab. (2001)
realizeaz un experiment constnd n splarea cu o soluie apoas acidificat a unei parcele
de sol contaminate cu concentraii mari de Cu, Zn, Cd, Pb i As. pH-ul iniial al solului a
fost de 5,4-6. Solul coninea o microbiot indigen bogat, care a avut aportul cel mai important
n solubilizarea contaminanilor. Activitatea microbian a fost mbuntit prin modificri
controlate ale debitului apei de splare, coninutul n oxigen i n nutrieni al solului. n mai
puin de 18 luni, concentraiile reziduale n sol ale metalelor (cu excepia plumbului) au sczut
sub nivelul permis pentru tipul de sol analizat.
Rezultate obinute n laboratoarele Universitii Babe -Bolyai (facultatea de Biologie i
Geologie) i Institutului de Cercetri Biologice Cluj-Napoca.
1. Cercetri asupra efectului diferitelor suprafee adsorbtive asupra potenialului microbian
i enzimatic al habitatelor. Cercetrile au fost efectuate n numeroase modele de laborator, viznd
obinerea de analogi ai nmolului terapeutic din lacurile saline (Kiss i colab., 1990; Bedelean i
colab., 1991; Pa ca i colab., 2003).
Drept suprafee adsorbante s-au folosit zeolii (tufuri vulcanice bogate n clinoptilolit),
minerale argiloase (caolin), crbune brun sub form de pulbere, turb. Avnd n vedere scopul
cercetrilor, acela de a obine analogi ai nmolurilor terapeutice, diferitele variante experimentale au
fost inoculate cu microorganisme halofile sub forma sedimentelor din diferite lacuri saline,
suspendate n apele din acelea i lacuri i incubate pentru diferite perioade (pn la 8 ani), n condiii
aerobe sau anaerobe, la lumin sau n ntuneric. Periodic s-a urmrit evoluia potenialului
microbian i enzimatic al analogilor nmolurilor terapeutice obinui astfel.

Fr excepie s-a constatat mbuntirea substanial a potenialului enzimatic i

microbian al sistemelor concepute, cu diferene ntre variantele experimentale, n funcie i de
adaosurile de nutrieni (uree, KH 2PO4).
Concluzia care se desprinde n urma tuturor acestor cercetri este c mineralele argiloase i
substanele humice exercit un efect de stabilizare i protecie asupra enzimelor din sedimente

i, prin extensie, se poate afirma fr rezerve i din soluri. Aceste substraturi contribuie la
supravieuirea enzimelor libere acumulate n microsituri formate de complexele
organominerale, unde sunt protejate de proteoliz i inactivare. n cazul experimentelor citate,
condiiile cele mai bune pentru mbogirea potenialului enzimatic au fost oferite de incubarea
n anaerobioz, indiferent dac suprafaa adsorbant a fost zeolitul sau caolinul. Potenialul
enzimatic s-a dezvoltat mai rapid dar a i sczut ulterior mai repede n variantele coninnd
crbune brun dect n cele care conineau turb.
2. n acelea i laboratoare s-a pus la punct o biotehnologie de mbuntire a calitii argilelor
refractare brute cu impuriti de fier (Pa ca i colab., 1992). Este tiut c argilele refractare din
ara noastr au o calitate inferioar datorit coninutului lor redus n Al 2O3 i coninutului
ridicat n Fe2O3. Biotehnologia pus la punct const n incubarea argilelor refractare brute

(provenite de la exploatarea din uncuiu ), n condiii de anaerobioz, favorizante ale

dezvoltrii bacteriilor fier-reductoare, n diferite variante experimentale. Bacteriile fier3+
2+
reductoare reduc pe cale biologic fierul trivalent (Fe ) la fier bivalent (Fe ), n respiraia
anaerob, iar compu ii fierului trivalent sunt insolubili, pe cnd cei ai fierului bivalent sunt
solubili n ap. Biotehnologia de deferizare microbian s-a dovedit foarte fezabil. Intensitatea
procesului de reducere a fierului trivalent a fost influenat de concentraia substanelor
nutritive, temperatur i durata incubrii (30-90 de zile). Din dou tipuri de argil tratate, ntr-un
caz deferizarea microbian a fost de 67%, iar n cellalt caz de 60%.
36

3. Eficacitatea zeoliilor n imobilizarea metalelor grele n sol este testat de Damian i

Damian (2007). Soluri examinate au fost contaminate cu mari cantiti de metale:
Pb (1054-40375 ppm) n asociaie cu Zn (490-1175 ppm), Cd (13,2-24,2 ppm) i Cu (37,6409,5 ppm) (n zona Baia Mare);
Cu (360-7000 ppm) n asociaie cu Zn (1900-3100 ppm), Cd (40-80 ppm) i Pb (50-2000
ppm) (n zona Zlatna).
Solurile poluate cu metale grele i amestecate cu zeolii, n primul rnd clinoptilolit (sol 83% zeolit 17%) i resturi organice au fost plantate cu Lolium perenne. Cre terea plantelor a
demonstrat efectul stimulativ al adaosului de zeolit. Cre terea mult mai bun a plantelor a fost
datorat faptului c amestecul de materie organic + zeolit + sol contaminat ofer plantelor
nutrieni eseniali (amoniu, humus, potasiu, calciu), pe de o parte, iar pe de alt parte, metalele
grele care n mod normal inhib cre terea plantelor sunt blocate prin schimb cationic, n urma
cruia metalele ptrund n structura zeolitului i nu mai au acces direct la rdcinile plantelor.
4. Bioremedierea in situ a solurilor contaminate cu metale grele. Laboratorul de Microbiologie
al UBB Biologie are o bogat experien n domeniul bioremedierii solurilor tehnogene,
concret al haldelor de steril rezultate de la exploatrile minire de Pb, Zn i Fe. Astfel, n perioada
1987-2006, s-a participat la activitatea de cercetare viznd bioremedierea haldelor de steril de la
Rodna, jud. Bistria (Pb i Zn), respectiv Iara, jud. Cluj (Fe).
Pe halda de steril de la Rodna au fost instalate 14 parcele experimentale n anul 1987, alte dou
n anul urmtor, supuse unui tratament diferit i nsmnate cu Lolium perene i Trifolium
pratense. Ulterior, pe taluzurile haldei au fost plantai puiei de ctin Hippopha rhamnoides.
Biotehnologiile aplicate au dus la formarea condiiilor favorabile pentru dezvoltarea
microorganismelor, cre terea plantelor i pentru o activitate enzimatic intens i durabil. Cea mai
bun tehnologie pentru bioremedierea sterilului coninnd impuriti de Pb i Zn a fost
copertarea cu un strat de 10 cm sol natural, din vecintatea haldei, fertilizarea mineral cu
NPK i nsmnarea cu un amestec de plante ierboase sau cu plante din flora spontan a regiunii.
Evoluia ascendent a potenialului microbian i enzimatic al solurilor parcelelor experimentale
a fost remarcabil, de la an la an. Culturile i plantaiile de puiet s-au extins, astfel c dup 20 de
ani, halda de steril, iniial cu un aspect selenar, fr nici o urm de vegetaie, mai ales pe
terasele superioare, s-a acoperit total de vegetaie. Solul tehnogen este n curs de transformare,
nregistreaz deja un potenial enzimatic i microbian comparabil cu al solurilor naturale
(Muntean i cola., 2001).
Pe terasele i taluzurile haldei de steril de la mina de fier din Iara au fost plantai peste 2000 de
puiei de arbori i arbu ti, majoritatea de ctin Hippopha rhamnoides. Au fost amplasate 26 de
parcele experimentale, cultivate cu urmtoarele specii ierboase: Festuca rubra, Festuca
arundinacea, Dactylis glomerata, Lolium perenne (familia Poaceae), Onobrychis viciifolia,
Trifolium repens, Trifolium pratense, Lotus corniculatus i Medicago sativa (familia Fabaceae).
Att parcelele, ct i puieii la plantare au fost supu i unor tratamente difereniate. S-a urmrit
evoluia vegetaiei i a potenialului microbian i enzimatic al solurilor parcelelor experimentale.

Aprecierea potenialului microbian s-a fcut pe baza valorilor indicatorilor bacterieni ai

calitii solului, calculai lund n considerare numrul de bacterii heterotrofe mezofile
aerobe, amonificatoare, denitrificatoare, fier-reductoare i desulfoficatoare.
Potenialul enzimatic a fost apreciat pe baza valorilor indicatorilor enzimatici ai calitii
solului, calculai pe baza valorilor urmtoarelor activiti enzimatice: catalazic, zaharazic,
fosfatazic, dehidrogenazic actual i potenial. Rezultatele obinute atest eficiena

tehnologiilor aplicate. Dup numai un an de vegetaie, n solurile parcelelor experimentale s-a

dezvoltat un potenial biologic remarcabil. Vegetaia a avut o evoluie bun, iar puieii de
Hippopha rhamnoides au drajonat masiv, asigurnd deja o bun acoperire a sterilului haldei
(Muntean i colab., 2005, 2006, 2007).

37

Tehnologia de bioabsorie a metalelor grele din soluii diluate

Referitor la poluarea cu metale grele, utilizarea biomasei microbiene a aprut ca o soluie
pentru dezvoltarea proceselor tehnologice economice i prietenoase cu mediul, utilizate n
tratarea siturilor contaminate. Biomasa de bacterii lipsite de via (moarte) ct i biomasa
microbiana vie pot capta metalele din soluii diluate prin procesul de bioabsorie n acest sens
solul contaminat fiind amestecat cu apa. Tehnologia de bioabsorie are avantajul de a avea
costuri sczute de operare, este eficienta pentru soluii diluate i genereaz minim de
efluent, n acest proces, biomasa microbian moart funcioneaz ca un schimbtor de ioni,
prin calitile diferitelor grupe reactive disponibile pe suprafaa celulelor, precum
carboxilul, aminele, fosfaii, sufaii i hidroxilii. Bioabsorbia este posibil pentru ambele
forme ale biomasei, ns bioacumularea este facilitata doar de biomasa vie.
Bioacumularea reprezint un proces de cre tere, i este astfel greu de definit varietatea de eflueni, n
opoziie cu bioabsorbia care este un proces independent de cre tere. Astfel, biomasa microbian
poate fi utilizat i exploatat mai eficient ca bioabsorbant dect ca bioacumulator.

Bioabsorbia metalelor. Cercetrile din acest domeniu au identificat o serie de microorganisme i

capacitile acestora de legare a metalelor. ntre acestea, biomasa de fungi ofer avantajul de a
deine un material al peretelui celular cu excelente proprieti de legare a metalelor. Muli fungi i
drojdii au demonstrat excelente poteniale de bioabsorbie a metalelor,
n special genul Rhizopus, Aspergillus, Streptoverticillum i Saccharomyces. ntre bacterii, specia

Bacillus a fost identificat a avea cel mai mare potenial de reinere a metalelor i a fost utilizat
n prepararea bioabsorbanilor comerciali. n afar de acestea, au existat rapoarte asupra
bioabsorbaniei metalelor prin utilizarea speciilor Pseudomonas, Zoogloea ramigera i
Streptomyces.
n procesul de bioabsorbie sunt implicate n special legrile pe pereii celulari, modificarea
acestora putnd afecta legarea ionilor metalici. Cu toate acestea ns, nu se pot face multe lucruri
pentru a compensa condiiile zonei care nu accepta procesul de bioremediere sau care nu ofer
condiii ideale pentru implementarea unui sistem de biorestaurare.
Exista multe proprieti ale solului care influeneaz procesul de bioremediere, cele mai
importante sunt urmtoarele: tipul si permeabilitatea solului; distribuia structurii
granulare;coninutul hidratat al solului, pH-ul, temperatura.
Tipul solului este o variabila importanta n proiectarea procesului de bioremediere. Astfel,
solurile noncoezive, precum pietri ul i nisipul, sunt mai bune pentru aplicarea bioremedierii
dect solurile compacte (dense).
Permeabilitatea solului este un factor cheie n succesul procesului de bioremediere, datorita facilitrii
transportului i distribuiei nutrienilor si acceptorilor. Cu ct solul este mai permeabil cu att sunt
mai bune condiiile pentru aplicarea cu succes a procesului de bioremediere, acest lucru fiind valabil
att pentru zona vadoasa ct si pentru cea saturata. La fel i circulaia aerului i apei n sol este
influenata de permeabilitatea acestuia. Astfel, n soluri cu permeabilitate mare este facilitat
introducerea i deplasarea aerului prin bioventilatie, acest lucru fiind posibil att pentru
bioremedierea n situ ct i pentru cea ex situ. Conform literaturii de specialitate, solul trebuie sa fie
suficient de permeabil, pentru a preveni ca masa microbian s determine colmatarea porilor. n acest
-4
sens, este necesar ca siturile sa aib o conductivitate hidraulica mai mare de 10 cm/s, aceasta
valoare permind desf urarea bioremedierii n situ cu rezultate bune. Un rol la fel de important ca i
permeabilitatea n prevenirea biopoluarii l joaca distribuia structurii granulare a solului.
Studiile n acest domeniu arata ca materialele foarte poroase, cu structuri granulare deprtate, sunt

mult mai sensibile la biopoluare dect materialele cu porozitate mrita, un sol fara drenaj este mult
mai predispus biopoluarii dect un material bine drenat.

Umezeala solului este o proprietate foarte importanta n sistemele de tratare a zonei nesaturate
(vadoase), deoarece microorganismele au nevoie de apa ca suport pentru procesul metabolic. n
procesul de bioremediere umiditatea ideala solului este de 50%.

38

2.3. Bioremedierea solurilor contaminate cu metale grele cu ajutorul plantelor

Metode de fitoremediere
Remedierea este considerat un sistem de management al locurilor contaminate pentru a preveni,
minimiza i diminua daunele pentru sntatea uman, proprietate ori mediul ambiant. Este un
termen mai larg dect curirea n care opiunile de remediere pot include aciuni fizice cum
sunt ndeprtarea, destrucia i ncapsularea.
Remedierea bazat pe risc este de mare importan fiind o opiune atractiv pentru remedierea
mediului ambiant contaminat (Magharaj i Naidu, 2006, dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
Pentru reabilitarea solurilor polute cu metale grele, dintre tratamentele biologice se poate
folosi numai fitoremedierea.
Avantajele majore raportate pentru fitoremediere comparativ cu tehnologiile de remediere
tradiionale includ:
posibilitatea de a genera mai puine reziduuri secundare;
degradarea minim a mediului ambiant;
posibilitatea de a lsa solul pe loc i n condiii de folosin dup tratament;
au costuri reduse de proiectare pentru terenurile candidate la remediere;
metoda cere foarte puin tehnic deoarece implementarea cere puin mai mult dect tehnicile
agricole de baz.
Dezavantajele includ:
timpul ndelungat cerut (de obicei cteva sezoane de cre tere);
adncimea limitat pe care se poate aplica (1,2 m pentru sol i 3 m pentru apa freatic) deoarece
rdcinile pot cura efectiv numai o adncime limitat;
posibilitatea ca poluanii s poat intra n lanul alimentar prin consumul animal al plantelor;
caracteristicile de operare i costurile pentru o scar larg de implementare nu au fost nc n
ntregime evaluate;
reziduurile plantelor pot necesita depunere ca reziduuri periculoase ori cere tratare suplimentar;
subprodusele de degradare pot fi mobilizate spre apa freatic ori
bioacumulate n animale;
dac concentraia contaminanilor este prea mare plantele pot muri;
cre terea plantelor poate fi sezonier n funcie de locaie;
condiiile climatice i hidrologice (ex. inundaii, secet) pot restriciona viteza de cre tere a
tipului de plant ce poate fi utilizat;
suprafaa terenului locului poate fi modificat pentru a preveni inundaiile sau eroziunea;
pot fi necesare amendamente pentru sol, inclusiv ageni de chelatare pentru a u ura preluarea
poluanilor de ctre plante prin ruperea legturilor dintre contaminani i particulele de sol.
Fitoremedierea folose te plantele pentru a extrage, sechestra i/ori detoxifia poluanii (HernandezAllica i colab., 2006, dup Raport RESOLMET, 32161/2008). Aceasta este o metod eficient,
non-invaziv, eficient economic, plcut estetic i social acceptat pentru remedierea zonelor

poluate.
Plantele sunt agenii ideali de remediere a solului i apei datorit geneticii lor, proprietilor
biochimice i fiziologice. Cei mai muli hiperacumulatori s-au gsit pentru nichel. Ace tia sunt
capabili s conin peste 1000 g Ni /g de esut uscat (Vernay i colab., 2006, dup Raport
RESOLMET, 32161/2008).
n acord cu mecanismele principale implicate n proces fitoremedierea poate fi clasificat astfel:
39

Rizofiltrarea absorbia, concentrarea i precipitarea metalelor grele de ctre rdcinile

plantelor;
Fitoextracia tehnic ce implic ntregul organism al plantei n procesul de preluare a
contaminanilor din sol;
Fitotransformarea degradarea moleculelor organice complexe n molecule simple i
ncorporarea acestor molecule n esuturile plantelor;
Fitostimularea - ori bioremedierea asistat de plante stimuleaz degradarea de ctre bacterii i
ciuperci prin cedarea de exudate/enzime n zona radicular (rizosfer).
Fitostabilizarea implic absorbia i precipitarea contaminanilor, n special a metalelor de
ctre plante, reducerea mobilitii lor i prevenirea splrii ctre apa
freatic, sau aer sau intrarea n lanul alimentar (Miller, 1996).
Dintre aceste metode pentru remedierea solurilor poluate cu metale grele se pot aplica numai
fitoextracia i fitostabilizarea.
Fitoextracia se refer la un numr de tehnologii pentru decontaminarea apei i soluluI, pe baza
utilizrii plantelor.
Diferite aplicaii ale fitoremedierii pot fi clasificate pe baza comportrii diferiilor tipuri de
poluani: extracie, degradare, depozitare ori o combinaie ntre toate trei.
Tehnicile de fitoremediere bazate pe extracia poluanilor sunt: fitoextracia pentru sol i
rizofiltrarea pentru ap (Magistrelli i colab., 2002, dup Raport RESOLMET, 32161/2008)..
n sol metalele sunt asociate cu diverse fraciuni: (1) n soluia solului, ca ion metalic liber i complex
metalic solubil, (2) adsorbit de constituienTii anorganici ai solului pe locurile de schimb ionic, (3) legat
de materia organic a solului, (4) precipitat sub form de oxizi, hidroxizi, carbonai i

(5) ptrun i n structura mineralelor silicatice. Extraciile secveniale sunt aplicate solului pentru
a izola i cuantifica metalele asociate cu diferite fraciuni ale solului. Pentru ca fitoextracia s
aibe loc, contaminanii trebuie s fie ntr-o form accesibil (gata de a fi absorbii de rdcini).
Bioaccesibilitatea depinde de solubilitatea metalului n soluia solului. Numai metalele asociate
cu fraciile 1 i 2 de mai sus sunt accesibile pentru a fi preluate de plante. Unele metale, cum sunt
Zn i Cd, trec nti n forme schimbabile, apoi n form bioaccesibil. Altele, precum Pb, apar ca
precipitat n sol, o form mult mai puin accesibil (Last, 2000, dup Raport RESOLMET,
32161/2008).
mprirea metalelor grele n soluri ca solubile, schimbabile, legate organic, precipitate cu
carbonaii, legate de oxizii de fier i mangan, precipitate cu sulfurile i fracia rezidual, variaz
semnificativ n funcie de extractantul folosit (Romaguera i colab., 2006 dup Raport
RESOLMET, 32161/2008).
Ar fi util s se elaboreze un sistem suport de decizie necesar pentru caracterizarea locurilor poluate
care s cuprind informaii cu privire la: existena vegetaiei (numrul taxonomic de specii i
distribuia acestora pe teren), caracteristicile solului (granulometria, nivelul trofic), umiditatea solului,
permeabilitatea solului, capacitatea de schimb cationic, pH-ul solului i capacitatea de tamponare,
salinitatea i coninutul de Na i Cl i coninutul total de carbon din solurile minerale.

Ordinul Ministrului Apelor, Pdurilor i Proteciei Mediului nr. 756/1997 aprob Reglementrile

privind poluarea mediului i arat n art.9 c atunci cnd concentraia unuia sau mai multor
poluani din soluri dep esc pragurile de intervenie pentru folosina existent a terenului, se
consider c exist impact asupra solului. n aceste situaii utilizarea zonei afectate pentru
folosine sensibile nu mai este permis i vor fi realizate prevederile art. 10, care arat c
pentru stabilirea obiectivelor de remediere pe baza interpretrii studiilor de evaluare a riscului,
autoritile competente trebuie s decid dac:
pot fi dezvoltate n viitor obiective care implic utilizarea terenurilor pentru folosina sensibil
sau mai puin sensibil;
terenul poate rmne n continuare n folosina curent, dar folosina nu mai poate fi extins;

trebuie luate msuri de remediere.

40

n zonele poluate, este absolut necesar s se instaureze un sistem de monitoring al calitii solului
(dup Raport RESOLMET, 32161/2008).

Fitoextracia
Fitoextracia, este o fitotehnologie dezvoltat pentru extracia metalelor grele din solurile poluate,
care a primit o atenie deosebit datorit caracteristicilor sale: costuri mai reduse, noninvaziv i
plcut la vedere. Tehnologia se bazeaz pe capacitatea unor plante de a extrage din sol cantiti mari
de metale. Hiperacumulatorii sunt plante care au capacitatea de a acumula, transloca i rezista la
concentraii mari de metale de-a lungul unui ciclu complet de cre tere. n special, Thlaspi
caerulescens a fost identificat ca fiind un hiperacumulator pentru Zn i Cu.
Bioaccesibilitatea se refer la abilitatea unui produs chimic din mediul ambiant de a interaciona cu
receptorii umani ori ecologici i receptorii acestora i punctul final care va influena metodele de
determinare a bioaccesibilitii (Juhasz, 2006, dup Raport RESOLMET, 32161/2008).

Materia organic a solului, pH-ul i coninutul de argil sunt proprietile chimice ale solului
care influeneaz bioaccesibilitatea i toxicitatea pentru receptorii ecologici (ex. rme, plante). Un
studiu comparativ cu 21 tipuri de soluri naturale, multiplu contaminate i cu un numr mare de
plante i rme ca punct final a fost realizat pentru a determina efectele simple i combinate ale
proprietilor chimice ale solului asupra bioaccesibilitii i toxicitii. Solurile au fost astfel
selectate nct s asigure un domeniu combinat de pH al solului, coninut de carbon organic,
capacitate de schimb cationic, oxizi de Al i Fe i coninut de argil. n acest nou tip de abordare,
tipul de sol i nu concentraia contaminanilor au fost folosite pentru a produce o varietate de
bioaccesibiliti a metalelor i dozele de expunere.
Fitoextracia implic cultivarea uneia sau mai multor specii de plante hiperacumulatoare, crora
s li se creeze cele mai bune condiii de dezvoltare pentru a asigura o mas vegetal ct mai mare,
pentru a putea extrage, acumula i ndeprta o cantitate ct mai mare de metale. Masa vegetal
recoltat va fi supus altor tratamente de extracie a metalelor sau va fi uscat i incinerat, iar
cenu a depus ntr-un depozit de gunoi controlat.
Aceste specii de plante remarcabile acumuleaz concentraii de 100 de ori mai mari de elemente
poluante dect plantele cultivate normal; unele plante cultivate sufer reduceri de producie datorit
fitotoxicitii metalelor. Tolerana la metale i hiperacumularea se desf oar pe solurile mineralizate
i sunt specifice metalelor prezente acolo unde plantele expuse prezint aceste trsturi. Unele elemente
sunt att de puternic legate de soluri, ori precipitate n rdcinile plantelor, c plantele nu pot acumula
niveluri suficient de ridicate pentru a asigura o fitoextracie folositoare. Nu au fost identificate plante
care s acumuleze 1 % Pb n biomasa suprateran fr ca s se aplice ageni de chelatare pe sol pentru
a dizolva Pb i preveni precipitarea lui n rdcinile plantelor. Adugarea agenilor de chelatare
produce o splare ctre apele freatice, lucru de care trebuie s se in cont n studiu (Chaney i colab.,
2006, citat de Raport RESOLMET, 32161/2008).

Tehnica fitoextraciei are un numr de avantaje care o poate face mult mai atractiv dect alte
tehnici de reabilitare:
reduce volumele ce trebuie depozitate n gropile de gunoi (la sfr itul procesului plantele sunt arse
i astfel volumul cenu ii este mult mai mic dect poate fi masa solului contaminat);
economise te energia (procesul de curire se bazeaz pe energia solar);
opereaz foarte simplu;
nu deranjeaz vizual i este acceptabil pentru opinia public;
este relativ u or de aplicat pe suprafee contaminate extinse;
este posibil reciclarea produselor din procesele de fitoextracie;

este posibil de utilizat pentru o mare varietate de poluani (metale,

radionuclizi, substane organice) (Magistrelli i colab. 2002, citat de Raport RESOLMET,
32161/2008).
Caracteristicile plantelor capabile s fie folosite n procesul de fitoextracie includ:
41

abilitatea de a acumula i tolera concentraii ridicate de metale grele n partea recoltabil a

plantei;
vitez de cre tere mare;
producie de biomas ridicat, pentru a putea ndeprta ct mai multe metale. Plantele sunt comparate
cu pompele de energie solar; poluanii absorbii de rdcini trec

prin fluxul xilemic i se acumuleaz n organele aeriene. Adncimea de aciune a acestei tehnici
depinde de adncimea de dezvoltare a sistemului radicular al plantelor utilizate pentru
fitoextracie. Poluantul este ndeprtat din sol la recoltarea plantelor, ceea ce face de dorit o
concentraie ct mai mare a poluantului n plant.
Contaminanii ce pot fi ndeprtai prin fitoextracie sunt:
metale: Ag, Cd, Co, Cr, Cu, Hg, Mn, Mo, Ni, Pb, Zn.
metaloizi: As, Se.
90
137
239
238
234
radionuclizi: Sr, Cs, Pu, U, U.
Estimarea transferului metalelor grele din sol n plant se realizeaz folosind factorul de transfer
(FT) numit i coeficient de fitoextracie,
FT = [ M ]p / [ M]t ,
unde
[ M ]p = coninutul de metal n plant (mg/kg); [ M ]t = coninutul de metal din sol (mg/kg).
Cantitatea de poluani ndeprtat pe an pe unitatea de suprafa = producia biomasei poluat

(kg s.u./ha) x concentraia poluantului (mg/kg s.u.) x numrul de recoltri pe an = Y . Cp . n

Fiecare element are propriul echilibru chimic n soluri n acord cu pH-ul solului, fazele sorbante
ale solului, materia organic a solului, potenialul redox al solului, etc,. Dac un element este
numai slab legat n sol, el poate fi splat prin sol i contamineaz apa freatic. Avnd n vedere pHul i chimismul elementelor, anionii i cationii monovaleni sunt de obicei splai (levigai).
Anionii divaleni cum sunt sulfaii sunt rapid levigai, n timp ce seleniaii, molibdaii,
tungstaii i alte cteva sunt splate numai la pH alcalin; la pH acid aceste elemente pot fi
adsorbite bine de oxizii de fier i alii. Arseniaii sunt adsorbii bine la pH acid i precipit ca
mineral de Ca la pH ridicat (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).

Fitostabilizarea
Aceast tehnic poate fi folosit pentru a restabili covorul vegetal n locurile unde vegetaia
natural lipse te datorit concentraiilor mari de metale grele n orizontul de suprafa ori
datorit degradrilor fizice a materialelor de suprafa. Speciile tolerante pot fi folosite pentru
restaurarea vegetaiei locului, scznd totodat potenialul de migrare a contaminanilor sub
influena eroziunii eoliene i hidrice i de levigare ctre apa freatic (eroziunea i levigarea sunt
frecvente pe terenurile fr vegetaie).
Plantele pretabile pentru fitostabilizare ntr-un anumit loc trebuie:
s aibe toleran ridicat pentru contaminantul avut n vedere;
s asigure o producie ridicat a biomasei radiculare capabil s imobilizeze ace ti contaminani
prin preluare, precipitare ori reducere;

s rein contaminanii aplicai n rdcin, mpiedicnd transferul n tulpini i frunze, pentru a

evita o depunere special.
Fitostabilizarea asigur reducerea riscului prin stabilizarea contaminanilor localizai n
apropierea suprafeei solului. Acest rezultat este asigurat de secreia de ctre plante a unor
compu i ce influenTeaz pH-ul solului i formeaz complexe metalice cu solubilitate redus. n
plus plantele ajut la reducerea eroziunii solului i la reducerea levigrii prin cre terea
evapotranspiraiei (Ma i Kingscott, 1997) (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
42

Bioremedierea solurilor contaminate cu dioxid de sulf

Emisiile de dioxid de sulf i depunerea pe sol i vegetaie
3.1.1. Surse de dioxid de sulf
Surse naturale:
erupiile vulcanice,
O

fitoplanctonul marin,
fermentaia bacterian n zonele ml tinoase,
oxidarea gazului cu coninut de sulf din descompunerea biomasei.
O Surse antropice: (datorate activitilor umane):
sistemele de nclzire a populaiei care nu utilizeaz gaz metan,
centralele termoelectrice,
procesele industriale (siderurgie, rafinarie, producerea acidului sulfuric),
industria celulozei i hrtiei i, n msur mai mic,
emisiile provenite de la motoarele diesel.
O

Principalele surse de poluare industrial sunt:

O Industria siderurgic i metalurgic. Industria de prelucrare a minereurilor n vederea extragerii

componenilor fero i sau nefero i se bazeaz n special pe procedee de topire i nnobilare la

temperaturi nalte n urma crora rezult cantiti extrem de mari de gaze nocive i pulberi.
O Industria petrochimic. n rafinriile din industria petrochimic apar emisii de hidrocarburi,

dioxid de sulf, hidrogen sulfurat, oxizi de carbon alturi de ali componeni nocivi mai puin
importani. Pe perioada depozitrii produselor, n special cele rafinate, datorit tensiunii de vapori
ridicate, sunt posibile emisii, cel mai frecvent de propan i butan.
O Industria materialelor de construcii elimin mari cantiti de praf i mai puin gaze

nocive.
O Industria chimic. Procedsele tehnologice ce se desf oar n industria chimic conduc la

poluarea atmosferei cu diverse substane: oxizi de sulf, hidrogen sulfurat, oxizi de azot, clor, etc.
O Industria minier. Ritmul ridicat de exploatare la minele deschise nseamn dislocarea unor

cantiti mari de pmnt i eliminarea de pulberi solide, concentrarea sterilului si poluarii in

iazuri de decantare, halde de steril.
O Industria energetic i transporturile. Sub aspect cantitativ se situeaz pe primul loc al surselor

de emisii de gaze nocive, datorit faptului c toate industriile necesit cantiti mari de energie, iar
obinerea ei prin combustie este legat de generarea unor cantiti imense de gaze reziduale (dioxid
de sulf, oxizi de azot, oxizi de carbon), praf i fum. (Raport RESOLMET, 32161/2008).

3.1.2 Poluarea cu dioxid de sulf n ara noastr

Aceasta se produce n jurul unor intreprinderi industriale, cum sunt unitile de metalurgie neferoase
(Romplumb Firiza S.A., Phoenix Baia Mare, Sometra Cop a Mic, Combinatele Siderurgice Galai,
Hunedoara etc.), efectele unora fiind resimite, chiar dup sistarea activitii (cazul Ampellum
Zlatna S.A.). De asemenea, suprafee importante sunt afectate de emisiile din zona combinatelor de

ngr minte, de pesticide, de rafinare a petrolului, cum este cazul n judetul Bacu, unde sunt
afectate slab-moderat 103538 ha de terenuri agricole, precum i al combinatelor de liani i
azbociment. n cazul metalurgiei neferoase (Baia Mare, Cop a Mic, Zlatna) au fost afectate n
diferite grade de coninutul de metale grele i de emi ia de dioxid de sulf, 198.624 ha, care produc
maladii ale oamenilor i animalelor din zonele nvecinate pe o raz de 2043

30 km. Solurile sufer de acidificare, care determin srcirea acestuia n elemente nutritive, se
destructureaz, se declan eaz procese de pant (eroziune i alunecri), uscarea vegetaiei etc.
(Raport RESOLMET, 32161/2008).
3.1.3. Efectele polurii cu dioxid de sulf
Sulful este un element esenial pentru sntatea plantelor i animalelor, el fiind benefic n
aproximativ acelea i cantiti ca i fosforul. Sulful joac un rol asemntor i la animale, avnd un
rol critic n formarea sntoas a pielii, prului i a esutului lnos.
Limitele coninutului n sulf pentru solurile cu folosin mai puin sensibil: Prag de alert: 5000 mg/kg substan uscat (S);
400 mg/kg substan uscat (sulfuri);
5000 mg/kg substan uscat (sulfai). Prag de intervenie: - 20.000 mg/kg substan uscat (S);

2000 mg/kg substan uscat (sulfuri);

50.000 mg/kg substan uscat (sulfai).
Oxizii de sulf au aciune duntoare att asupra organismului uman , regnului vegetal ct i
asupra construciilor din metal i piatr. Aciunea poluatoare a H2SO 4 se exercit sub forma
ploilor acide, principalul factor generator al morii padurilor n trile industrializate.
Efecte asupra sntii populaiei i animalelor
Concentraiile de dioxid de sulf care produc efecte detectabile n organismele animale i umane
snt mult mai nalte dect cele corespunztoare pentru vegetaie. Efectele dioxidului de sulf
asupra omului se manifest n primul rnd printr-o iritaie a sistemului respirator. Aceasta apare
la concentraii de 5 ppm. n unele cazuri iritaia apare chiar la concentraii de 12 ppm i
este nsoit de spasm bron ic la concentraii de 510 ppm. n ceea ce prive te aciunea toxic
acut a dioxidului de sulf prin expuneri intermitente la concentraii mai ridicate, prerile diver
ilor autori sunt ntru totul concordante. n privina aciunii cronice, prin expuneri continue la
concentraii relativ mici, prerile snt diferite i merg pn acolo nct neag o astfel de aciune.
Numeroase cercetri au dovedit ns efectele cronice ale expunerilor ndelungate la concentraii
mici. S-a dovedit c dioxidul de sulf odat intrat n organism prin cile respiratorii ajungee n
snge i produce tulburri n metabolismul glucidelor i n procesele enzimatice. n prezena
particulelor solide aciunea dioxidului de sulf determin efecte i mai grave.
3

La concentraii anuale de 100 fxg/m particule asociate cu concentraii de 30 ng/m dioxid de

sulf se constat o cre tere a sensibilitii la diferite boli a copiilor. Concentraii de particule
3
3
cuprinse ntre 100130 fxg/m asociate cu concentraii de 120 fxg/m dioxid de sulf determin
3
o cre tere a maladiilor respiratorii la copii. Dac la o concentraie de 300 p.g/m particule cu o
persisten n aer de cteva zile se asociaz o concentraie
Experienele fcute pe loturi de animale expuse la inhalaii de dioxid de sulf au scos n
eviden o mortalitate crescut. Ca i la om, dac dioxidul de sulf este absorbit pe particule solide
efectele snt i mai grave. Efectul aditiv determin o cre tere a numrului de mbolnviri i decese
n rndul animalelor expuse.
Efecte asupra plantelor
Prezena dioxidului de sulf n atmosfer constituie principala cauz a proceselor distructive asupra
plantelor. Multe plante prezint o sensibilitate accentuat n comparaie cu oamenii i animalele la

acest poluant. Sensibilitatea este funcie de concentraie i de timpul de expunere.

Leziunile provocate de dioxid de sulf i tulburrile produse n asimilaia clorofilial diminueaz

fotosinteza. Mecanismul aciunii toxice a dioxidului de sulf asupra plantelor este nc puin
cunoscut. Se tie ns c aciunea sa toxic este determinat de proprietile sale oxidoreductoare i de aciditatea sa. O serie de factori ca luminozitatea puternic, umiditatea i
temperatura favorizeaz apariia leziunilor chiar la concentraii mai mici de dioxid de sulf.
Comportamentul diferitelor specii de vegetale la aciunea dioxidului de sulf este foarte variat.
Plantele cu frunze suculente prezint cea mai mare sensibilitate, n timp ce plantele cu frunze
aciculare prezint cea mai mare rezisten.
44

Dioxidul de sulf ca poluant atmosferic exercit asupra lumii umane cu totul alte efecte dect
dioxidul de sulf singur, a a cum se ntlne te uneori n atmosfera industrial. Sinergismul cu ali
poluani atmosferici, n special cu particulele solide, accentueaz efectele toxice ale dioxidului
de sulf.
Pagubele cele mai importante provocate de SO 2 plantelor se petrec ziua, cnd activitatea
fotosintetic este maxim, aciunea fitotoxic a SO2 constnd n distrugerea clorofilei. Prin
expunerea unor plante la o atmosfer artificial de SO 2 acestea au eliminat H2S numai n
prezena luminii.
Efecte asupra mediului
Dioxidul de sulf n prezena particulelor are o capacitate de distrugere i mai mare. Astfel, oxizii de
sulf corodeaz suprafeele metalice din cauza formarii acizilor, deterioreaz i decoloreaz cldirile,
atac marmura i orice piatr de construcie, deteriornd astfel monumentele. Aciditatea aerului
poluat datorat oxizilor de sulf deterioreaz i decoloreaz esturile, obiectele de piele etc.

Oxizii de sulf impreuna cu acizii sulfuros si sulfuric, conduc la aparitia unor fenomene de
decolorare a materialelor colorate, de slabire a rezistentei si elasticitatii a materialelor

3.3. Bioremedierea solurilor contaminate cu dioxid de sulf

n majoritatea solurilor aerobe, microorganismele chemolitotrofe i fotoautotrofe sunt n cea
mai mare msur responsabile de oxidarea formelor de sulf n sol.
Bacteriile fototrofe sunt organismele predominante care contribuie la oxidarea sulfului la
interfaa sol-ap i la nivelul rizosferei.
Majoritatea microorganismelor din genul Thiobacillus sunt obligatoriu aerobe, de i unele, cum ar
fi T. denitrificans, se pot dezvolta n condiii anaerobe, prin utilizarea NO3 , ca un acceptor de
electroni terminal.
Alte specii de Thiobacilli utilizeaz electroni donori, cum ar fi oxidul feros (T. ferroxidans) i
tiocianatul (SCN ) (T.thioparus), mai degrab dect sulfurile. Microorganismele genului Thiobacillus
difer prin caracteristicile lor, i ca urmare, pot fi mprite n urmtoarele grupe:
-

2-

T. thioparus, care oxideaz n condiii aerobe S2 , S , S2O3 i (SCN ). Aceasta este o bacterie
strict autotrof i cre te la valorile pH-ului cuprinse ntre 4,5 7,8.
Thiobacillus thiooxidans n esen, se aseamn cu T. thioparus, dar acesta cre te n condiii
optime la un pH acid, chiar i la pH de 1. Aceast specie reprezint oxidanii clasici ai sulfului,
care a fost raportat pentru prima dat de ctre Waksman i Joffe. Biochimia acestei specii a fost
studiata timp ndelungat.
Thiobacillus denitrificans se caracterizeaz prin capacitatea sa de a oxida formele reduse ale
sulful, precum i reducerea NO3 la N2.
2+
3+
T.ferrooxidans poate utiliza Fe ca o surs de energie pentru oxidarea la Fe . Ca i caracteristici,
-

aceast bacterie este similar cu T. thiooxidans, de i se afl n imposibilitatea de a oxida S 2 .

Acest grup conine thiobacilli care sunt obilgatoriu chemolitotrofi, dar pot fi i heterotrofi (de
exemplu, T. neopolitanus).

Ultimul grup include thiobacilli care sunt accidental chemolitotrofi, dar obligatoriu heterotrofi (de
exemplu, T. perometabolis).
Biochimia oxidrii sulfului prin cre terea thiobacililor in vitro, a fost tratat n mai multe
studii.
Poli-tionaii nu au rolul central n oxidarea in vitro a sulfului anorganic, de ctre thiobacilli,
deoarece unele tulpini nu sunt n msur s fie metabolizate de ei. Pe de alt parte, o enzim
thiosulfat-oxidant a fost izolat de la diferii thiobacilli de ctre Trudinger. Electronii de la
oxidarea sulfului sunt transferai n lanurile de transport de electroni.
Alte bacterii sulfuroase cu rol oxidant: Cele mai importante microorganisme ale acestui grup, n
raport cu oxidarea sulfului n soluri sunt speciile Beggiatoa, bacterii, care particip la
45

oxidarea sulfiilor n zona de rdcin. Toate tulpinile Beggiatoa depoziteaz sulf, n prezena
H2S, de i aceste bacterii par a fi heterotrofe.
Bacteriile fototrofice, cum ar fi Chromatium i Chlorobium, au de asemenea, un rol important n
oxidarea sulfiilor.
Un numr de chemolitotrofe nefilamentoase care au capacitate oxidant a sulfului au fost izolate.
De exemplu, Sulfolobus se dezvolt n soluri acide fierbini.
Speciile Thiospira, Thiomicrospira i Macromonas au fost izolate din solurile de pdure saturate
cu ap. Importana acestor bacterii n oxidarea sulfului urmeaz a fi stabilit.
Schema din fig. 7 reprezint integrarea reaciilor biologice i chimice implicnd compu ii
anorganici ai sulfului din sol.
S-a constatat c adugarea de sulf stimuleaz o cre tere semnificativ a populaiei de
Thiobacillus. Oricum, se pare c nu exist nici o corelaie ntre procesele de oxidare a sulfului i
bacteriile Thiobacillus, cu excepia faptului c procesele de oxidare a sulfului sunt n general
reduse n soluri n lipsa acestor organisme. Astfel aceste procese de oxidare sunt accelerate n
sol prin inocularea cu populaia de Thiobacilli.
Implicarea organismelor heterotrofe n oxidarea sulfului din sol
Rolul dominant pe care l au thiobacili n oxidarea solului a fost menionat n cteva studii
privind rolul organismelor heterotrofe pe care l pot avea n proces. Faptul c majoritatea, dac nu
toate, microorganismelor heterotofe din sol, ntr-o anumit msur, sunt capabile de a oxida
sulful, sugereaz faptul c, probabil, ele pot participa la oxidarea elementar i la reducerea
formelor de sulf n sol. Oricum, rolul organismelelor heterotrofe n oxidarea sulfului din sol s-ar
prea s fie limitate de nivelurile sczute de carbon prezent pentru a sprijini organismele
heterotrofe i activitatea acestora.
Exist studii care arat c ciupercile pot folosi de eurile plantelor, cum ar fi paiele de cereale, ca
o surs de carbon n sprijinirea oxidrii sulfului. La polul opus, specii de fungi din descompunerea
lemnului au fost dovedite ca fiind incapabile s oxideze sulful cnd cresc din buci de lemn
introduse n sol. Cu toate acestea, anumite studii sugereaz c ciupercile Ectomycorrhizal sunt
capabile de a oxida sulful n cultur. Acestea susin faptul c microorganismele heterotrofe ar
putea avea un rol important n oxidarea sulfului, cel puin n anumite soluri, din punctul de
vedere al autorilor Lawrence i Germida.
Populaiile de heterotrofe capabile de a participa la aceast reacie au fost de zece mii de ori mai
0
2mari dect populaiile de heterotrofe care au oxidat S in SO4 .
0

2-

Bacteriile au tendina de a oxida sulful elementar S la S2O3 , iar fungii realizeaz

22oxidarea complet la SO4 . n general, se produce puin S4O6 n urma reaciilor de oxidare.
Oxidanii heterotrofici ai sulfului au fost gsii, de asemenea, predominani n dou soluri
(luvisoluri cenu ii) care confirm rapoartele anterioare cu privire la ambiguitatea oxidanilor de
sulf heterotrofi n marea varietate de soluri. Lawrence i Germida furnizez mai multe date pentru
a sublinia rolul heterotrofelor n oxidarea sulfului, artnd c rata de oxidare a sulfului cre te
liniar cu biomasa microbian a solului.
Cu toate acestea, rmne dificil de precizat cu exactitate ratele de oxidare a sulfului ntre oxidarea

heterotrofelor i chemolitotrofelor. Se pare c, probabil, totu i, acele populaii mixte de

microorganisme, inclusiv heterotrofele sunt responsabile de realizarea oxidrii sulfului n
0
2majoritatea solurilor. n acest fel, de exemplu, S poate fi oxidat la S2O3 de ctre un grup de
2microorganisme, i altele, pot oxida acest compus intermediar la produsul final, SO 4 . Astfel de
interaciuni sinergice ntre oxidarea sulfului prin microorganisme au fost demonstrate n vitro.

46

Depoluarea solurilor contaminate cu metale grele, dioxid de sulf, hidrocarburi

prin activiti specifice industriei metalurgice (dup : Raport RESOLMET, 32161/2008)
n prezent, i n Romnia, gospodrirea i asigurarea unor condiii de calitate bune a solurilor a
devenit o problem major n contextul alinierii trii noastre la standardele i cerinele impuse pe
plan mondial n ceea ce prive te protecia mediului i a resurselor naturale.
Asigurarea proteciei calitii solurilor, ca mijloc de cre tere a resurselor de sol, ct i pentru
protecia mediului nconjurtor, prevede printre altele utilizarea unor procedee i tehnologii de
depoluare menite s:
neutralizeze sau s blocheze fluxul de poluani;
s asigure eficiena dorit;
s asigure aplicarea legislaiei privind protecia calitii solului.
Metodele convenionale de depoluare a solurilor contaminate (cu hidrocarburi, metale grele,
dioxid de sulf) se aplic cu succes la scar internaional, ns majoritatea acestora prezint
urmtoarele inconveniente:
generarea unor eflueni lichizi sau gazo i ce necesit o tratare/depozitare suplimentar,
perioade mari de operare,
dificulti de monitorizare i control,
costuri ridicate de capital i operare.
Dezavantajele menionate, corespunztoare tehnologiilor respective, conduc la limitarea sau
chiar imposibilitatea aplicrii acestor tehnici de depoluare la nivel naional, n condiiile
economice actuale ale Romniei.
Pe plan mondial se observ tendina de dezvoltare a unor metode simple, rapide, ieftine i
eficiente, care s asigure prin aplicarea lor in-situ :
blocarea migrrii poluanilor din zona afectata n zonele nvecinate,
distrugerea poluanilor i
refacerea cadrului natural.
n cazul polurii cu hidrocarburi a solurilor contaminate prin activiti specifice industriei
metalurgice, cercetrile realizate de Choi i Cloud, 1992, Schatsberg, 1971 (dup Raport
RESOLMET, 32161/2008), subliniaz faptul c
metoda folosirii sorbenilor este foarte eficient i nu prezint riscuri pentru mediu. Materialele
sorbente fiind folosite ca materiale de prevenire a propagrii i dispersiei contaminanilor.
Conform organizaiei American Society for Testing and Materials (ASTM), materialele
sorbente existente pe pia se pot clasifica dup mai multe criterii:
natura lor (natural organice, natural anorganice, sintetice),
aspectul fizic:
tip I absorbani sub form de pernute, pturi;
tip II absorbanii neesui, particulai sau polidisper i;
tip III bariere din materiale sorbente nvelite n diferite texturi; tip IV: reele cu o impedan
sczut a migrrii fluidelor),

modul de aplicare
L-W: sorbeni recomandai pentru sorbia lichidelor de pe soluri i ap, L: sorbeni
recomandai pentru sorbia lichidelor de pe soluri,
W: sorbeni recomandai pentru sorbia poluanilor de pe ap,
I-S: sorbeni recomandai pentru sorbia lichidelor din zonele industriale substane chimice
agresive), etc. (dup : Raport RESOLMET, 32161/2008)

47

Studiile fcute de Johnson, 1973, Choi,1992 i alii (Raport RESOLMET, 32161/2008) arat
superioritatea sorbenilor naturali organici fa de cei sintetici n aplicarea lor pentru
depoluarea solurilor, avnd n vedere capacitatea lor de biodegradare.
Dr. Ali Ghalambor, 1995, University of Southwestern Louisiana, arat c dac sorbenii
naturali sunt folosii ntr-un mod corespunztor, pot fi mult mai eficieni dect sorbenii
sintetici i subliniaz numeroasele avantaje ale sorbenilor naturali organici: biodegradabili,
resurse regenerabile, cost sczut, impact sczut asupra mediului, u or de procurat i manipulat.
n urma testelor efectuate pe o serie de sorbeni naturali i sintetici, Ghalambor, 1998, ntre te
ideea folosirii sorbenilor naturali n cazul unor poluari (deversari accidentale de produse
petroliere), argumentnd aceasta prin faptul c sorbenii uzai pot fi tratai prin
biodegradare n vrac (compostare), n acest mod degradndu-se att sorbentul ct i produsul
petrolier (dup Raport RESOLMET, 32161/2008).
Sorbenii acioneaz att prin mecanismul de absorbie i adsorbie, sau prin amndou. Absorbenii
opereaz ca ni te burei i colecteaz produsul prin aciunea de capilaritate sau suciune. Ei permit
lichidului s ptrund n spaiul porilor materialului din care sunt confecionai, n timp ce adsorbenii
atrag lichidul pe suprafaa lor dar nu permit ptrunderea lor n material.

In anumite cazuri, materialele sorbente pot folosi ambele principii pentru recuperarea produsului
petrolier.
Absorbanii lucreaz cel mai bine cu produsele petroliere u oare, puin vscoase;
Adsorbanii au afiniti ctre produsele mai grele i mai vscoase.
Aplicarea la scar industrial a depolurii solurilor de contaminani de tip hidrocarburi
petroliere prin folosirea materialelor sorbente, nu este ntlnit n practica curent din Romnia,
att din lips de mijloace economice, ct i din lipsa unei baze tiinifice solide care s permit
abordarea cu succes, ntr-un timp real, a depolurilor discutate. n strintate exist o serie de
produse absorbante naturale pe baz de turb (PeatSorb, Spill Sorb, Oclansorb, etc) care
sunt folosite cu succes, att pentru depoluarea apelor ct i a solurilor (Raport RESOLMET,
32161/2008).
Metode de depoluare a solului
Clasificarea tehnologiilor de remediere a terenurilor poluate poate fi:
dup criteriul temporal, dup care tehnologiile se clasifica n :
aciuni iniiate - de izolare;
aciuni finale - de depoluare propriu - zisa
dup locul unde se realizeaz depoluarea ;
dup natura proceselor prin care se realizeaz depoluarea.
n funcie de locul n care se realizeaz remedierea se vorbe te despre :
tehnologii aplicabile "in situ" - adic pe amplasamentul poluat;
tehnologii aplicabile "ex situ" - adic n afara amplasamentului poluat; acestea implica extragerea
materialului poluat (sol, roca, apa subterana) si tratarea lui n instalaii sau pe suprafee special
amenajate n limita perimetrului poluat sau n afara lui.
Avantajele tehnologiilor aplicabile "in situ" rezulta din faptul ca amplasamentul
rmne relativ nederanjat, stratul poluat nefiind extras prin excavare. Solul tratat "in situ" i
pstreaz sau chiar i mbunte te structura fizica i fertilitatea; tratamentele "in situ" genereaz
cantiti mai mici de emisii (gazoase sau lichide) i de euri solide.

Avantajele tratamentele aplicabile "ex situ" au avantajul ca:

permit n mai mare masura supravegherea condiiilor n care se desf oar procesul;
fac poluanii mai u or accesibili pentru distrugere sau eliminare;
permit un control mai accesibil al emisiilor si de eurilor rezultate din remediere.

48

Dezavantajele principale ale tratamentelor "ex situ" sunt:

nevoia de excavare a terenului i eventual de transport i manipulare repetata a materialului
excavat;
unele tratamente pot modifica structura i compoziia stratului de sol sau a rocilor i limiteaz
astfel refolosirea lor. De exemplu. un tratament agresiv precum incinerarea modifica compoziia,
structura i fertilitatea solului i chiar proprietile geotehnice ale
rocilor.
Opiunea pentru o soluie de remediere "in situ" sau "ex situ" depinde de natura polurii i
condiiile fiecrui amplasament,
De exemplu. tratamentele "ex situ" sunt preferabile in cazul cnd este necesara o remediere rapida
i prevenirea procesului de migrare a poluanilor spre un receptor sensibil precum un acvifer
utilizat in scop potabil.
Exista tehnologii care se preteaz att la aplicarea "in situ", ct i "ex situ", opiunea depinznd
de condiiile amplasamentului, disponibilitatea materialelor necesare i costuri.
O alta clasificare a tehnologiilor de remediere se face n funcie de natura proceselor ce stau la
baza lor i anume n:
Metode fizice, bazate pe:
imobilizarea fizica a poluanilor n mediul contaminat, prin:
izolare (etan are, blocare hidraulica),
stabilizare;
extracia fizica a poluanilor din mediul contaminat, prin excavare,
pompare, splare, flotaie, injecie cu aer sub presiune, etc).;
Metode chimice:
se aplica pentru separarea, distrugerea sau transformarea poluanilor n forme mai puin nocive
(extracia chimica, oxidarea, reducerea, declorurarea i precipitarea);
Metode termice:
distrug, extrag sau imobilizeaz poluanii prin supunerea materialului contaminat la temperaturi
ridicate:
incinerare,
desorbie termica,
vitrificare;
Metode biologice:
biodegradarea poluanilor sub aciunea microorganismelor:
bioreactorul,
biodegradarea in vrac,
biodegradarea n situ,
bioventring-ul, biosparging-ul),
metode de biolixiviere i bioacumulare a poluanilor;
Procesul de bioremediere a solurilor contaminate cu hidrocarburi are

avantajul eliminrii transportului materialului contaminat,

implementarea are cost scazut,
se poate realiza cre terea vitezei de biodegradare prin adugarea de fertilizani sau
microorganisme (biostimularea, biosporirea),
are impact sczut asupra ecosistemelor,
are eficien ridicat.
Procesul de bioremediere are ns condiionri:
durata procesului este destul de mare, fiind aplicabil doar pentru poluanii biodegradabili i
impune o anumit permeabilitate a solului .
49

Biotehnologii de remediere a mediului poluat de activitatile metalurgice

Dupa studiul literaturii de specialitate pentru a implementa o tehnologie care s se preteze la
bioremedierea solului contaminat prin activiti specifice industriei metalurgice etapele
necesare a fi parcurse sunt urmtoarele:
descrierea sitului poluat;
caracterizarea mediului (fizica, chimica, geologica etc.);
evaluarea gradului de risc generat pentru mediu
identificare surse de poluare;
identificare cai de poluare i inte de poluare;
evaluarea probabilitilor consecinelor;
Pentru bioremedierea unei zone poluate, sunt necesare de parcurs i urmrit:
Msura de urgen: mi orarea pericolului imediat;
Diagnostic:
studiu geologic si hidrologic, istoricul activitilor;
istoricul ariei, cartare, i
analiz;
Evaluarea riscurilor;
Determinarea obiectivelor i mijloacelor depolurii;
Lucrri de depoluare n sine;
Monitorizare i restricii asupra folosirii terenului
Exista posibilitatea aplicarii a doua ci:

Bioremedierea intrisec (pasiv, de atenuare natural) care poate avea are loc prin urmtoarele
procese:
biodegradare; evaporare;
sorbie;

degradare chimic; dispersie;

dizolvare
Bioremedierea stimulat dup cum s-a mai arat poate avea loc n situl poluat sau n afara sitului
poluat.
Parametrii necesari a fi optimizai n carul bioremedierii stimulate sunt:
O aport de O2;
O nutrieni: macroelemente: N, P; microelemente: S, K, Mg, Ca, Mn, Fe; O raportul echilibru:
C:P:S i C:S;
O cometaboliii;
O microorganismele hidrocarbon-oxidate.
Pentru bioremediere se pot utiliza urmtoarele tipuri de microorganisme hidrocarbonoxidante:
bacterii:
Spirillum, Vibrio, Bacillus, Nocardia etc...;
Cianobacteriile: Anabaena, Nostoc, Oscillatoria;
levuri: Candida, Rhodotorula, Saccharomyces;
fungii filamento i: Fusarium, Penicillium, Graphium;
algele: Amphora, Chlorella, Dunaliella.

50

Caracteristicile fiziologice ale microorganismele hidrocarbon-oxidante sunt urmtoarele:

adeziunea celulelor microbiene la suprafee hidrofobe;
sinteza de compu i tensioactivi cu proprieti emulsionante;
sisteme de suport a hidrocarburilor prin membranele celulelor;
utilizarea hidrocarburilor ca unica surs de carbon i energie
Factorii care influeneaz bioremedierea solurilor poluate cu hidrocarburi sunt urmtorii:
factori fizici:
caracteristicile mediului poluat, prezena O2,
umiditate,
temperatura, pH,
aderena poluantului la particulele de sol sau sedimente;
factori chimici:

natura, concentraia i gradul de toxicitate a poluantului, concentraia compu ilor toxici,

solubilitatea poluantului, salinitatea mediului
prezena nutrienilor accesibili, biodegrabilitatea poluantului;

factori biologici:
densitatea microorganismelor indigene capabile sa degradeze poluantul.
Tehnologiile de bioremediere a solului care se pot aplica n situ sunt urmtoarele:
bioaugmentarea;
tratamentul terenului;
co-metabolism;
bioventilare;
biosparging;
biofiltrare;
stimulare cu ageni tensioactivi;
fitoremediere
Tehnologiile de bioremediere a solului care se pot aplica ex situ sunt urmtoarele:
bioreactoare;
land farming;
biosurry;
biopile;
compostare statica i agitare mecanica
Analiza comparativa - tehnologii n situ:
Sistemul bioventing se bazeaz pe stimularea procesul de degradare a contaminailor din sol
prin injectare de aer atmosferic i nutrieni (N, P) fiind indicat pentru eliminarea petrolului,
uleiului i lubrefianilor.
Sistemul de bioremediere a solurilor contaminate prin injecie de ap oxigenata se poate aplica
n situri cu poluare constant, fiind indicate pentru contaminani ca: hidrocarburi petroliere,
BTEX, ioni metalici.

Sistemul de bioremediere a solurilor contaminate (biostimulare, bioaugmentare) prin aport de

nutrieni i oxigen dizolvat n apa de injecie se poate aplica n situri cu poluare constanta fiind
indicate pentru urmatorii contaminani: hidrocarburi aromatice polinucleare, BTEX.
51

Analiza comparativa - tehnologii ex situ:

Sistemul land-farming se bazeaz pe excavarea solului pe o platforma ce permite colectarea
fluidelor drenate i n amestecarea solului, procesul consta n umezire, aerare, aport de nutrieni i
ageni de gonflare a hidrocarburilor din sol;
Sistemul biopile deriva de la procedeul land farming i se bazeaz pe ridicarea solului contaminat n
movile de civa metrii nalime, asigurnd umiditatea, aerarea i aportul de nutrieni,
contaminaii sunt redu i la CO2 i H2O n aprox. 36 luni;
0

Sistemul composting necesita o temperatura de 50-60 C ce favorizeaza activitaile biodegrative,

se adauga i ageni de gonflare;
Sistemul bioventing se bazeaz pe stimularea procesul de degradare a contaminailor din sol
prin injectare de aer atmosferic i nutrieni (N,P) fiind indicat pentru eliminarea petrolului,
uleiului i lubrefianilor.
Alta tehnologie de biodegradare ex-situ este procesul n care solul sau nmolul contaminat este
excavat i remediat, fiind un proces biologic, adugndu-se oxigen, nutrieni, ap sau
microorganisme care au ca efect cre terea biodegradabilitaii naturale a contaminanilor.
Tehnologia de bioremediere ex-situ implic bioremedierea n faz de nmol cnd se creeaz un
nmol apos prin combinarea solului sau a nmolului contaminat cu ap dup care, contaminanii
se biodegradeaz ntr-un reactor sau ntr-un iaz impermeabilizat.
Biodegradarea include i bioremedierea n faz solid, precum lucrarea pmntului, compostarea
i formarea de biogrmezi.
Bioremedierea n faz de nmol este utilizat pentru a distruge contaminanii organici din sol sau
nmol i pentru a reduce volumul de material contaminat. Biodegradarea nmolului s-a dovedit a
fi eficient n tratarea solurilor foarte contaminate care au concentraii de contaminani organici
sau de combustibili care variaz ntre 2.500 i 250.000 mg/kg. Procesul cu nmol a dovedit un
anumit potenial de tratare pentru o gam larg de contaminani, inclusiv pesticide, creozot,
pentaclorofenol, PCB-uri i alte substane organice halogenate. Dup realizarea biodegradrii
contaminanilor, nmolul tratat este trimis ctre sistemul de separare/deshidratare.
Bioremedierea n faz solid implic excavarea i pregtirea solului contaminat pentru a cre
te bioremedierea contaminanilor din sol. Tehnicile utilizate de obicei pentru pregtirea
solului de bioremediat sunt cernerea/sitarea, omogenizarea, adugarea nutrienilor i a
compostului. Bioremedierea se realizeaz n biogrmezi (cu ntoarcerea solului sau cu injecie
de aer).
Remedierea solurilor poluate cu metale grele se poate face prin procesul de biosorbie
precipitare i adugare de microorganisme(Raport RESOLMET, 32161/2008).
Concluzii.
Datele din ultimii ani fcute publice de ctre organele competente din domeniul proteciei
mediului relev c n siderurgie, metalurgie feroas i neferoas se afl opt situri contaminate cu o
suprafa total de 89.961,60 hectare.
La nivel naional mai sunt identificate urmtoarele situri contaminate: industria extractiv -170 de

situri contaminate cu o suprafa total de 2.725,46 hectare;

industria petrolier (incluznd zone de extracie, separatoare, conducte de transport, uniti
prelucrtoare, depozite, batale de de euri petroliere, staii PECO etc.) 232 de situri contaminate cu o
suprafa total de 2.664,78 hectare; sectorul energetic - 10 situri contaminate cu o suprafa
total de 1.700,28 hectare; depozitele de de euri industriale, respectiv industria chimic,
52

construcii de ma ini, material de construcie etc. - 110 situri cu o suprafa total de 954,92
hectare; depozitele de de eurile menajere - 475 de situri contaminate pe o suprafa total de
684,62 hectare; fermele agricole - 47 de situri contaminate cu o suprafa total de 30,90 hectare.

Bioremedierea poate fi o metod cu un cost efectiv pentru decontaminarea solurilor poluate.

Cercetrile asupra degradrii poluanilor de ctre microrganisme au fost focalizate primar asupra
bacteriilor, care cresc mai repede i sunt supuse manipulrilor genetice. Utilizarea
basidiomicetelor n cercetrile de fitoremediere ofer mari promisiuni pentru remedierea solurilor
contaminate cu poluani de tipul hidrocarburilor.
Dintre metodele bioremediere in-situ fac parte: bioventilarea (o tehnologie care stimuleaz
microorganismele existente natural n sol pentru a degrada unii poluani din sol prin asigurarea
oxigenului necesar), fitoremedierea (o tehnic ce folose te plantele pentru a ndeprta, transfera,
stabiliza sau distruge contaminanii n sol), utilizarea terenurilor agricole (solurile contaminate
sunt amestecate cu amendamente de sol cum sunt agenii de reducere a densitii aparente i
elemente nutritive, sunt aplicate pe terenuri agricole curate i ncorporate n sol; periodic se execut
lucrri ale solului pentru mbuntirea aerrii i omogenizare), atenuarea natural (un proces de
bioremediere pasiv) i bioremedierea mbuntit

(cunoscut i ca biostimulare, implic aplicarea de microorganisme selecionate, nutrieni,

donori de oxigen, etc. pentru a accelera procesele naturale de biodegradare).
Dintre metodele ex-situ fac parte: biogrmezi (sisteme inginere ti n care solul poluat excavat
este combinat cu amendamente, depus ntr-o grmad de compostare i nchis pentru tratament),
bioreactoare (sisteme inginere ti n care contaminanii sunt degradai, ntr-un mediu specific,
cu ajutorul microorganismelor), compostarea (proces biologic controlat prin care
contaminanii organici din sol sunt convertii de ctre microorganisme, n condiii aerobe i
anaerobe n subproduse nevtmtoare stabilizate) i utilizarea terenurilor agricole.
(http://www.resolmet.utcluj.ro )

Cap. 5. Evaluarea ecotoxicitatii solului

Un prim pas n evaluarea tehnologiei optime de remediere biologic a unui sol contaminat l
constituie evaluarea ct mai corect a ecotoxicitii acestuia.
Substanele toxice cu concentraii diferite pot afecta diferite specii prezente n ecosistem.
Abordarea ideal pentru o caracterizare precis a nivelului de toxicitate a unui mediu const n
utilizarea mai multor specii de organisme aparinnd unor grupri trofice i taxonomice diferite.
n acest contract de cercetare intenionm s aplicm metode folosind diferite specii de plante i
de microorganisme.
Criteriile pentru selectarea testelor de ecotoxicitate au fost stabilite n contextul evalurii riscului
i a clasificrii substanelor chimice. Aceste criterii se aplic i la caracterizarea mediilor
contaminate: validitatea stiintific, semnificaia ecologic, practicabilitatea i acceptabilitatea.
Antrenarea n soluiile apoase a fraciunilor solubile, coloidale sau a particulelor are un rol
important n evaluarea solurilor contaminate. Apa mobilizeaz cea mai mare parte a
contaminanilor afectnd n acest mod microorganismele i plantele. Eluatele apoase sunt folosite
pentru a testa efectul ecotoxic asupra organismelor expuse contactului cu apa contaminat.

Standardul ISO 15799:2003 (E) Guidance on the ecotoxicological characterization of soils and
soil material stabile te procedurile de lucru care trebuie aplicate pentru o testare ecotoxicologic
adecvat. Astfel, probele trebuie comparate cu probe martor, care pot fi repezentate de soluri
necontaminate cu proprieti pedologice stabilite, materiale inerte, (nisip de cuart), sol certificat
(sol standard), sau sol standardizat artificial ( ISO 11267, ISO 11268-1,2). Atunci cnd se
utilizeaz eluate trebuie fcute diluii succesive ale probei contaminate.
53

Solul ca substrat pentru microorganisme.

Flora microbian reprezint aproximativ 80% din totalul organismelor din sol. Alturi de
microfaun, rolul micrororganismelor este acela de a degrada i a descompune complexele
organice n substane simple, meninnd la valori normale ciclul carbonului, al azotului al
fosforului i al sulfului.
Respiraia indus la nivelul solului reprezint un indicator important al densitii populaiei
microbiene.
Bacteriile nitrificatoare care sunt rspunztoare de oxidarea amoniului la nitrit i de la nitrit la
nitrat, sunt un grup foarte sensibil de microorganisme. Nitrificarea redus este un indicator
sensibil a inhibiiei proceselor eseniale din sol. Scopul determinrii biomasei microbiene, sau a
altor procese microbiene din sol, sau din eluate (cre tere, fluorescen) permite evaluarea
continu a meninerii fertilitii solului, a potenialului de degradare a compu ilot organici i a
efectelor reziduurilor aplicate pe sol asupra comunitilor microbiene.
Solul ca substrat pentru cre terea plantelor.
Rdcinile plantelor reprezint urmtoarea ca mrime, dup microorganisme, suprafaa biologic
din sol. Contactul dintre rdcini i sol este mrit datorit perilor radiculari i a micorizelor. Testele
pe plante determin biodisponibilitatea i efectele poluanilor care nu pot fi detectai pe cale
chimic. Testele de ecotoxicitate vizeaz germinaia, cre terea sistemului radicular, a prilor
aeriene ale plantelor, coninutul n clorofil, viabilitatea i fotosinteza. Intentionm s aplicm
procedurile prezentate n urmtoarele standarde:
ISO 11269: 2003 (1) Soil quality- Determination of the effects of pollutants on soil flora- Method
for the measurement of inhibition of root growth; 11269 (2) Soil quality- Determination of the
effects of pollutants on soil flora- Effects of chemicals on the emergence and growth of higher
plants.
ISO 22030:2005 Soil quality -- Biological methods -- Chronic toxicity in higher plants,
ISO 8692: 2005 Water Quality, Freshwater algal growth inhibition test with
Scenedesmus subspicatus and Selenastrum capricornutum;
ISO 20079,:2005 Water quality- Determination of toxic effect of water constituents and waste
water to duckweed (Lemna minor)- Duckweed growth inhibition,
ISO 14442: 2006 Water quality - Guidelines for algal growth inhibition tests with poorly soluble
materials, volatile compounds, metals and waste water.
ISO 10519:1997 Rapeseed -- Determination of chlorophyll content -- Spectrometric method
Colectarea, transportul, depozitarea i prepararea probelor.
Colectarea, transportul, depozitarea i prepararea probelor se efectueaz de ctre personal calificat
care posed cuno tine suficiente pentru a manevra probele n condiii de securitate. Strategiea
de colectare trebuie fcut la faa locului n funcie de tipul de contaminare, i de scopul testrii
biologice (de ex. d.p.v. cantitativ probele variaz ntre 100g i 100 kg).
Procedurile sunt descrise detaliat n:
ISO 10381-6:1993, ISO/DIS 17616: 2006 Soil quality -- Guidance on the choice and evaluation of
bioassays for ecotoxicological characterization of soils and soil materials;

ISO/DIS 18772: 2006 Soil quality -- Guidance on leaching procedures for subsequent chemical
and ecotoxicological testing of soils and soil materials;
ISO/NP TS 21268: 2006 Soil quality -- Leaching procedures for subsequent chemical and
ecotoxicological testing of soil and soil materials -- Part 1: Batch test using a liquid to solid ratio
of 2 l/kg dry matter
Part 2: Batch test using a liquid to solid ratio of 10 l/kg dry matter

54

Part 3: Up-flow percolation test Soil quality -- Leaching procedures for subsequent chemical and
ecotoxicological testing of soil and soil materials
Part 4: Influence of pH on leaching with initial acid/base addition
Prelucrarea datelor i interpretarea statistic.
Se va efectua conform procedurilor descrise n standardul ISO / TS 20281:2006 Water quality
Guidance on statistical interpretation of ecotoxicity data.

Metode pentru determinarea ecotoxicitatii solului

Determinarea efectelor poluanilor asupra florei solului - Metod pentru msurarea cre
terii rdcinilor: IDT ISO 11269-1:1993
Standardul a fost elaborat pentru a pune la dispoziia utilizatorilor o metod rapid pentru
evaluarea calitii solurilor afectate de fenomene de poluare sau a celor recuperate pentru
agricultur de pe terenuri situate n zone industriale sau n areale de depozitare a sterilului de la
exploatri miniere. Metoda descris poate fi de asemenea folosit pentru a pune n eviden
efectul unor substane ncorporate n sol asupra calitii acestuia precum i la compararea unor
soluri de calitate necunoscut. Evaluarea se bazeaz pe compararea vitezei de cre tere a
rdcinilor unei anumite plante ntr-o situaie standard i pe un sol supus ncercrii.
Analiza chimic a probelor de sol sau a de eurilor aruncate n teren furnizeaz suficiente
informaii asupra pretabilitii sau nu a solului pentru producie agricol, sau asupra
eventualelor riscuri pentru mediul nconjurtor rezultate din aruncarea de eurilor, cum ar fi
nmoluri reziduale pe terenuri cultivate. Exist de asemenea necesitatea de a evalua calitatea
solurilor dup recuperarea terenurilor industriale i suprafeelor de depozitare a sterilului de la
exploatrile miniere sau cnd se decoperteaz un teren. Avnd n vedere faptul c principalul
criteriu este capacitatea solului de a furniza recolte, a fost elaborat un experiment rapid de cre tere
bazat pe dezvoltarea seminelor n condiii controlate de mediu.
Dou cerine eseniale prealabile ale experimentului de fitotoxicitate sunt ca acesta s furnizeze
rezultate de ncredere i s poat fi folosit n orice sezon al anului. De aceea este esenial ca
seminele s fie crescute ntr-un mediu controlat pentru a asigura condiii optime de cre tere,
care pot fi meninute pentru orice numr de experimente, producnd rezultate reproductibile de-a
lungul unei mari perioade de timp.
Determinarea efectului substanelor adugate: ISO 11269
Metoda de experimentare descris n aceast parte a ISO 11269 poate fi folosit pentru a compara
solurile, pentru a urmri schimbrile n activitatea lor sau pentru a determina efectul substanelor
adugate. ISO 11269 descrie un experiment preliminar pentru estimarea rapid a calitii solului
prin compararea vitezei de cre tere a rdcinilor unei anumite plante n condiii standardizate cu
cea ntr-un sol supus experimentrii.
Metoda se aplic tuturor solurilor, materialelor de sol, de eurilor sau substanelor chimice care
pot fi aplicate n sol exceptnd cazul n care contaminantul este foarte volatil sau afecteaz numai
fotosinteza.
Se aplic la msurarea efectelor substanelor adugate n sol n mod deliberat i la compararea
solurilor de calitate cunoscut i necunoscut.
Nu se intenioneaza folosirea metodei pentru a msura capacitatea solului de a asigura o cre tere

durabil a plantelor.
Principiu. Se determin cre terea unor semine pregerminate n condiii controlate, pe o anumit
perioad, stabilit n funcie de planta folosit n experiment. Cele dou medii martor sunt nisipul i
solul. La sfr itul perioadei de cre tere se msoar lungimea rdcinilor, att de la martori ct i de la
solul necunoscut sau la substana experimentat. O diferen semnificativ din punct de vedere
statistic n lungimile rdcinilor plntuelor
55

crescute n oricare din mediile experimentate comparativ cu martorii indic existena unui efect.
Plante i materiale pentru experimentare. Plantele pentru experimentare tebuie crescute din
semine nedecorticate. Orzul (Hordeum vulgare L.) din varietatea CV Triumph a fost folosit
timp de mai muli ani i se recomand n mod curent. De altfel, sunt corespunztoare i alte
varieti de orz (nedecorticat), cu condiia s aib acelea i caliti de germinaie i de alungire
a rdcinilor.
Raportul experimentului. Raportul experimentului include urmtoarele informaii: o referire la
aceast parte a ISO 11269;
o metod de a identifica cu precizie solul i proveniena sa;
varietatea de semine sau detalii despre alte specii de plante folosite; condiii de cre tere;
lungimea celei mai lungi rdcini a fiecrei plante din vasele care conin nisip,
sol,
proba experimentat;
o descriere a aspectului vizual al solului i terenului, dac aceasta este disponibil;
orice alte efecte observate;
rezultatele experimentului ( sub forma unui tabel), care s includ tratamentul, numrul de
repetiii i lungimea celei mai lungi rdcini a fiecrei plante, i dac inhibarea cre terii este
statistic semnificativ sau nu, sau nivelul de semnificaie pentru orice inhibare de cre tere
observat.
Prelucrarea statistic a rezultatelor. Pentru a stabili limitele de ncredere pentru medii
Limita superioar
= Media t
s

Limita inferioar
= Media t
s

n care:
s: abaterea standard n: numrul de msurri
Pentru a estima diferenele semnificative ntre vase, se folose te ecuaia:

x x
A

2
Bs A

sB

nA n B
Calitatea solului Determinarea efectelor poluanilor asupra florei
Se urmarese identificarea efectelor substanelor chimice asupra ncolirii i cre terii plantelor
superioare
Scopul. Aceast parte a ISO 11269 descrie o metod ce e aplicabil pentru determinarea unui efect
toxic posibil al substanelor chimice incorporate n sol asupra ncolirii i primelor
56

stadii de cre tere i dezvoltare ale unei varieti de plante terestre. Metoda este aplicabil i pentru
compararea unor soluri de calitate cunoscut i necunoscut.
O Definiii:
LOEC concentraia cea mai joas utilizat n test la care se observ c substana are un efect statistic
semnificativ
NOEC concentraie de testare imediat sub LOEC care cnd se compar cu martorul nu se obine o
diferen statistic semnificativ
ECx concentraia ce determin o modificare nedezirabil de x % in rezultatele testului

Principiul. Acest test de fitotoxicitate se bazeaz pe rspunsul din timpul ncolirii i primelor
stadii de cre tere al unei varieti de specii de plante terestre la concentraii diferite ale unei
substane chimice adugate solului de testare. Seminele sunt plantate n vase ce conin sol in
care a fost adugat substana chimic testat i n vase martor iar in final se compar plantele
din vasele martor cu celelalte.
Plantele de testare. Cel puin dou specii trebuie selectate pentru test, cuprinznd cel puin o
specie din fiecare categorie. Sunt dou categorii. Prima include monocotiledonate iar cealalt
dicotiledonate. Categoria 1 este format din speciile: Secale cereale, Lolium perenne, Oryza sativa,
Avena sativa, Triticum aestivum, Hordeum vulgare, Sorghum bicolor, Zea mays. n categoria 2 intr
speciile: Sinapis alba, Brassica napus ssp. napus, Raphanus sativus, Brassica rapa ssp. rapa,
Brassica campestris Var. Chinensis, Trifolium ornithopodioides, Lactuca sativa, Lepidium sativum,
Lzcopersicon esculentum Miller, Phaseolus aureus Roxb.
Exprimarea rezultatelor. Rezultatele vor fi exprimate n miligrame per kilogram de sol uscat. E
preferabil ca efectele s fie exprimate sub form de valori EC x dar pot fi date de asemenea sub
form de NOEC sau LOEC. Toate observaile trebuie luate n considerare la interpretarea datelor
obinute din test.

Testele cu alge
Deoarece formele de existen ale metalelor i implicit toxicitatea lor sunt afectate de mai muli
factori fizico-chimici ce se schimb o dat cu condiiile de testare. Pe lng formele de existen ale
+
metalelor toxicitatea este afectat de factori chimici sau fizico-chimici precum raportul dintre Ca i
+

Mg i mai ales pH, pentru c ionii de hidrogen concureaz cu metalele grele pe suprafaa algelor. O
problem particular n testele cu alge este c adiia de fier, microelemente i chelai la mediul de cre
tere reprezint o cerin nutriional. Ace ti constitueni ai mediului inevitabil schimb toxicitatea
metalelor grele. Cre terea algelor aduce noi modificri ale toxicitii metalelor grele. n cele din urm
metalele sunt absorbite n celulele algelor, cauznd o scdere a toxicitii la nivele ridicate de
toxicitate. n ciuda acestor dificulti, cu o optimizare adecvat, teste cu alge asupra metalelor grele
pot fi realizate n condiii n care influena sistemului de testare e minim. Factorii cheie sunt ca
biomasa de alge s fie meninut la un nivel redus, influena chelailor, afierului i a
microelementelor s fie minimizat i pH-ul s fie bine controlat.

Modificarea procedurilor testului de inhibiie a cre terii algelor pentru a testa materiale ce
conin metale grele
Mediul de cre tere trebuie modificat pentru a minimiza efectul chelailor n primul rnd prin
minimizarea concentraiei acestora i n al doilea rnd prin utilizarea unor cantiti echilibrate
stoichiometric de chelai i respectiv fier plus microelementele Zn, Co i Cu. Ca i chelat EDTA

nu este ideal pentru a fi utilizat n teste de toxicitate a metalelor pentru c FE(III)EDTA este un
complex ce se fotodescompune parial i pentru c EDTA formeaz complexe foarte puternice nu
doar cu fierul ci i cu alte metale i constantele de stabilitate exced cu mult pe cele ele complexelor
cu chelai naturali din ap. Acidul citric este un chelat alternativ.
Pentru a reduce densitatea de biomas algal final, perioada de testare a toxicitii metalelor
trebuie redus la dou zile.
57

Controlul strict al pH-ului este foarte important n testul cu metale deoarece pH-ul influeneaz
att forma de existen a metalului ct i toxicitatea acestuia.
Algele consum CO2, ceea ce ar duce la scderea pH-ului. Astfel controlul pH-ului n culturile de
alge este n primul rnd o problem de asigurare a unui transport faz gazoas/ap al CO 2 ce s
dep easc cererea de CO2. Avnd doar bicarbonatul i aerul ca i sisteme tampon pot fi obinute
valori ale pH-ului ntre 7 i 9. Uneori adiia de tampoane sintetice poate fi de ajutor n controlul
strict al pH-ului mai ales la valori neutre sau mai mici. A a numitul tampon biologic zwitterionic
conine grupri ionizabile att pozitive ct i negative i nu interfereaz cu procesele chimice i
biochimice implicate n cre terea algelor (Raport RESOLMET, 32161/2008).

Cap.6. Biomonitoringul poluarii solului cu metale grele

Metalele grele precum fierul, cuprul, plumbul, zincul, mercurul, cadmiul sau nichelul sunt
poluani importani provenii din industria extractiv (extracia minier, prepararea
minereurilor, metalurgia extractiv), dar ace ti paluani pot rezulta i din alte industrii precum
industria chimic, industria energetic etc. Ace tia sunt emi i de ctre agenii poluatori n aer, n
ap sau n sol sub diferite forme fizico-chimice.
Spre deosebire de marea majoritate a poluanilor din alte categorii, metalele grele emise n aer,
n ap i n sol nu sufer procese de biodegradare.
Metalele grele
pot fi transformate n compu i organometalici (mai puin toxici),
pot suferi o serie de reacii de oxidare sau de reducere ori
pot s fie fixai pe minerale argiloase prezente n soluri i n sedimente.
Aceste din urm procese sunt cele care contribuie la autopurificarea mediului n cazul
contaminrii cu metale grele. Practic fiecare metal are un comportament propriu n mediu i
realizeaz un circuit biogeochimic specific, influenat ns tot mai mult de factorul antropogen.
Exist specii capabile s acumuleze n organismul lor anumite substane n concentraii de zeci
de mii de ori mai mari dect concentraia lor n mediul nconjurtor. Studiul polurii a confirmat
existena acestui proces i n cazul unor poluani printre care i metalele grele. Astfel, pentru a
desemna acest proces se utilizeaz dou noiuni: bioconcentrarea i bioacumularea
(Oros, 2002).
Bioconcentrarea semnific cre terea direct a concentraiei unui poluant n timp ce el trece din
biotop ntr-un organism; la organismele terestre: trecerea din aer sau din sol n organismul
plantelor prin absorbie transfoliar sau transradicular, ori trecerea din aer n organismul
animal prin inhalare.
Bioacumularea este specific pentru organismele animale i include absorbia direct a
poluantului plus acumularea pe cale alimentar.
Ca msur a acestor procese se utilizeaz factorul de concentrare care este raportul dintre
concentraia poluantului ntr-un organism i concentraia sa n biotop:
Factorul de concentrare

Fc = [ Me ] organism
[ Me ] biotop

n cazul unei reele trofice n interiorul unei biocenoze, fenomenul de bioacumulare se poate
repeta de mai multe ori, la fiecare trecere de la un nivel trofic la altul, respectiv de la un organism
prad la un organism prdtor. n astfel de cazuri avem de-a face cu un proces de bioamplificare,
iar pentru caracterizarea lui se utilizeaz termenul de factor de transfer.
Dac presupunem c ntr-o piramid ecologic un organism prdtor situat pe nivelul trofic n+l
are concentraia (la echilibru) de poluant Xl, iar prada sa situat pe nivelul trofic n are
concentratia X0 atunci factorul de transfer (Ft) de la nivelul trofic n+1 este definit de raportul:
Factorul de transfer
Ft
=
[n+1]
=
X
1

[n]
X0

58

Bioindicatori pentru mediile terestre

Lichenii constituie bioacumulatori puternici datorit capacitii lor de a prelua poluanii
prezeni n aerul atmosferic.
Avnd o sensibilitate deosebit fa de poluani, lichenii sunt utilizai ca bioindicatori, pentru
diverse categorii de poluani: SO2, NOX, HF, Cl2, O3, peroxiacetat, metale grele, elemente
radioactive, fertilizatori, pesticide, erbicide.
Speciile de licheni corticali Parmelia physodes, Parmelia coperata i Evernia prunastri au servit ca
bioindicatori pentru a monitoriza poluarea cu plumb a aerului. Cladonia rangiferina i Cladonia
nitei pot fi utilizate ca bioindicatori acumulatori pentru U, Fe, Pb, Ti. Mercurul poate fi acumulat de
lichenii: Alectoria capillaris, Alectoria tremontii, Hypogymmia physodes, Cladonia sp., Collema sp.
(Oros, 2002). Cel mai larg utilizat bioindicator este lichenul Hypogymnia physodes. Pe lng sulf el
poate acumula foarte multe metale realiznd valori mari ale factorului de concentrare:

Cd
70 x
Fe
28 x
Pb
62 x
Mn
28 x
Cu
35x
Zn
26 x
Cr
34 x
Ni
9x
31X
Briofitele (mu chii) prezint o sensibilitate deosebit fa de poluarea aerului. Ca urmare,
numrul speciilor de briofite a fost mult diminuat n zonele urbane, n centrele industriale intens
poluate. Unele specii s-au stins iar altele s-au redus ca numr de indivizi ( i biomas) i ca arie de
rspndire. De exemplu, n Olanda au disprut n ultimii 100 de ani 15% din speciile de briofite
terestre i 13% din speciile de briofite epifite.
Pleurozium schreberi, Hyloconium splendens i Hypneum cupressiforme au fost utilizate ntr-un
proiect de biomonitorizare a polurii de fond cu 8 metale (As, Cd, Cr, Cu, Fe, Pb, Ni, V, Zn) a
Europei de Nord.
Elementele radioactive sunt i ele acumulate n mu chi mai intens dect n plantele superioare.
Astfel, Pleurozium schreberi a fost utilizat pentru monitorizarea cderilor de La, Zr i alte
elemente n urma testelor nucleare, iar speciile Ceratodon purpurens, Tortula ruralis i Bryum
137
argenteum, pentru biomonitorizarea cderilor de Cs dup accidentul de la Cernobl.
n cazul metalelor grele s-a stabilit urmtoarea secven a toxicitii acestora pentru briofite
(este asemntoare i la plantele cu flori): Hg > Pb > Cu > Cd >Cr > Ni > Zn
Unele specii au o capacitate deosebit de mare de acumulare a metalelor uneori pn la
concentraii extrem de mari. De exemplu, Hyloconium splendens originar dintr-o min de cupru
a acumulat Pb, Cd, Cu, Zn n concentraie de 17320 ppm (n comparaie cu plantele superioare

Picea 349,5 ppm, Clintonia 548,5 ppm n acela i mediu) (Blanc, 1974. citat de Oros, 2002).
Plante superioare, bioindicatori pentru metale grele
Plante cu flori - specii ierboase - acumulatori. de metale mai cunoscute sunt:
- Melandrium album (opaia)
4,286 fg/g
- Lolium perenne (raigras)

1,683 fg/g

- Plantago lanceolata (ptlgina) 1,547 fg/g

- Lepidium draba (urda vacii) 1,437 fg/g
- Polygonum aviculare (troscot)

1,190 fg/g

- Thlaspi (pungulia) 1000-3500 fg/g (pentru Ni i Zn).

Specii indicatoare: Lolium perenne i Lolium multiflora sunt foarte adecvate pentru a fi utilizate
ca indicatori de expunere. Aceste plante sunt frecvente n parcuri, pe marginea drumurilor, a
oselelor. Pe lng metale grele, ele sunt indicatori pentru S i F.
Alte specii ierboase utilizate ca bioindicatori pentru metale grele sunt:
Melandrium album (opai) - (Pb)
Thlaspi (punguli) - (Ni, Zn)
59

Solidago canadensis (splinu) (Pb)

Artemisia vulgaris (pelin), Calamagrostis epigeios (trestia), Chelidomium majus (rostopoasca),
Plantago major (ptlgina mare), Poa annua (firua) - utilizate ca bioindicatori pentru metale grele

ntr-un studiu n Berlin;

Equisetum arvense (coada calului) - ca bioindicatori de Hg n zona distrus de vulcanul Sf.Elena
din SUA;
Achilea milefolium (coada oricelului), Artemisia vulgaris (pelin), Plantago lanceolata
(ptlgina), Amaranthus retroflexus (moul curcanului) - bioindicatorii pentru V (Harhnan i
Reznicek, 1986 citati de Oros, 2002).
Hypericum perforatum (pojarnig), Hedera helix (iedera), Urtica dioica (urzica moart) - pentru
Pb, Cu, Zn, Cd, Hg (Holvarth i Rump, 1970, citati de Oros, 2002);
Vaccinium myrtilus (afinul), Vaccinium vitis ideea (meri or) - pentru Cd, Fe, Mn, Pb
(Czukojovska i colab., 1980, citati de Oros, 2002).
Arbori i arbu ti de foioase
Frunzele arborilor fixeaz metale grele din zonele poluate (de exemplu, pe marginea oselelor n
apropierea uzinelor) att din sol ct i direct din aer.
Specii sensibile: Betula pendula (mesteacn), Fraxinus excelsior (frasin), Sorbus aucuparia
(scoru de munte), Tilia cordata (tei), Malus domestica (mr).
Indicatori acumulatori - specii considerate rezistente: Eleagnus angustifolia (slcioara),
Populus canadensis (plop canadian), Salix alba (salcie), Sambucus nigra (soc negru).
- Specii relativ rezistente (acumulatori): Carpinus betulus (carpen), Quercus robur (stejar),
Fagus sylvatica (fag), Quercus palustris (stejar de balt), Acer saccharum (arar), Platanus
acerifolia (platan).
Coninuturi de diferite metale n frunzele unor arbori de foioase (indicatori-acumulatori)

Valori medii
Valori maxime
n zone rurale
(ppm)
(ppm)
(ppm)

Alianthus glandulosa (oetar)

1027
2112
190

Aesculus hippocastanus (castan slbatic)

874
1483
300

Tilia tomentosa (tei)

806
2458
240

Sophora japonica
754
2076
233

Celtis occidentalis
565
1239
214

Robinia pseudaccacia (salcm)

596
1194
262

Acer platanoides (paltin de cmp)

451
1101
289

Platanus acerifolia (platan)

399
660
193

- Indicatori pentru microelemente i ultramicroelemente:

Ag
Robinia pseudaccacia (salcm);
B Rosa rugosa (mce ), Acer campestre (artar de cmpie), Aesculus hippocastanus(castan
slbatic), Morus alba, Platanus hybrida (platan), Salix alba (salcie), Sambuccus nigra
(soc);
Bi
Robinia pseudaccacia (salcm);
Ce
Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus (castan slbatic);
Co
Sophora japonica;
Cr
Koelrenteria paniculata;
Cs
Eu

Rosa rugosa;
Rosa rugosa, Thuja occidentalis;

Sophora japonica;
Ga
Rosa rugosa, Thuja occidentalis;
La
Rosa rugosa;
Mo
60

Robinia pseudaccacia;

Ni
Rosa rugoza, Sophora japonica, Thuja orientalis, Aesculus
hyppocastanus;
Sb
Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus;
Sn
Thuja occidentalis;
Th
Rosa rugosa, Thuja occidentalis;
Rosa rugosa, Thuja occidentalis;
V
Rosa rugosa, Thuja occidentalis, Robinia pseudaccacia, Aesculus hyppocastanus;
Robinia pseudaccacia;
Zn
Robinia pseudaccacia.
Coniferele sunt indicatori mai sensibili dect copacii cu frunze cztoare datorit faptului c
durata de via a acelor (frunzelor) este de 3-4 ani i sunt expuse polurii i pe perioadele de iarn.
Poluarea cu SO2 i HF poate fi indicat de conifere i prin determinarea coninutului din frunze
(coniferele sunt i acumulatori). Specii de conifere sensibile la poluarea cu SO2 sunt: Abies alba,

Picea abies, Pinus banksiana, Pinus nigra, Pinus silvestris, Pinus strobus, Larix decidua, iar
fa de poluarea cu HF sunt sensibile: Abies alba, Picea abies, Pinus ponderosa, Pinus
silvestris, Pinus strobus. Unele specii pot fi utilizate i pentru indicarea polurii cu oxidani
fotochomici: Picea abies, Pinus banksiana, Pinus strobus.
Indicarea polurii cu metale grele se face prin acumularea acestora, mai ales n acele coniferelor
(coniferele sunt acumulatori de metale grele). Astfel, Picea abies, Pinus silvestris, Pinus nrigra,
Taxus baccata, Thuja occidentalis sunt specii adecvate pentru indicarea polurii cu Fe,
Mn,Cu, Pb. Zn,Cd,Ag, Hg.
Plante de tis (Taxus baccata) au fost utilizate ntr-un proiect de evaluare a polurii cu metale
grele n ora ul Darmstadt din Germania n perioada 1978-1984, coninutul de metale (Pb, Cu,
Cd, Ni, Cr, Hg) indicnd o scdere a polurii n perioada menionat (Kovacs, 1992, citat de
Oros, 2002).

Bioindicatori in apele dulci.

Avand in vedere ca depoluarea biologica este deosebit de activa in medii acvatice, in iazuri de
depoluare, precizam o serie de bioindicatori i bioacumulatorii, care permit evaluarea unor
poluani cum sunt metale grele etc.
Macrofite acvatice. O serie de alge, briofite, fanerogane amfibii sau hidrofite prezint aptitudini
accentuate de concentrare n esuturi att a unor elemente minerale (metale grele) ct i a unor
compu i organici xenobiotici din ape (dupa Oros, 2002).
Mu chii acvatici cu potenial de bioacumulare sunt printre alii: Fontinalis, Amblystegium,
Rhychostegium, Plathyhypnidium, Cindidotus .
O serie de cercetri au stabilit c Fontinalis squamosa i Fontinalis antipyretica au o capacitate
mare de bioacumulare a Zn i altor metale toxice. Ultima specie acumuleaz i PCB sau ali
compu i organici xenobiotici, sau metale mai rare ca Ag, Bi, Sn.
Alge. Alga ro ie Lemanea sp. este una dintre puinele macrofite care poate tri n imediata
apropiere a apei dintr-un iaz de steril de la o exploatare de Pb, se poate dezvolta n ape cu
concentraii mari de metale toxice-Zn.
Fanerogame. Typha latifolia (papura) s-a dovedit un bioacumulator eficace al Zn, acumulnd n
rdcini pn la 1400 mg Zn / kg atunci cnd plantele au crescut pe sedimente cu coninut de 10

mgZn/kg de sediment (Oros, 2002).

61

Cap 7. Tehnologii de reconstructie ecologica a siturilor

degradate sau poluate industrial
Tratamentul unui sit presupune doua componente:
Un tratament imediat, pentru mbuntirea nsu irilor fizice, chimice, topografice, de toxicitate,
de stabilitate ale sitului n scopul asigurrii condiiilor pentru tratamentul pe termen lung.
Tratamentul pe termen lung const n instalarea i intreinerea vegetaiei pe sit etc.
(dup Oros, 2002).

Pentru ameliorarea structurii fizice a terenului se face tratament imediat: lucrri de scarificare sau
de discuire - dac structura este prea compact; de compactare i acoperire cu materiale fine-dac
structura este afnat; lucrri de stabilizare prin tratamente cu diverse materiale stabilizatoare;
lucrri de drenare; de umezire pentru imbuntirea stabilitii i a umiditii.
Alte lucrri de tratare pot fi realizate in vederea asigurrii condiiilor cerute de instalarea
eficient a vegetaei, se pot realiza lucrri de: fertilizare (adaosuri de ingr minte si de
amendamente), corectare a pH-ului cu var; lucrri de neutratizare i fixare a unor substane
toxice (metalele grele).
Scopul reabilitrii este realizarea unui ecosistem cu o robust autointreinere. Instalarea
vegetaiei i intreinerea acesteia este o etapa decisiv n aceast aciune i de ea depinde reu ita
intregii aciuni de reabilitare. Recultivarea biologic este deosebit de important i de mare
responsabilitate (dup Oros, 2002).
Realizarea cu succes a ecosistemului autosustenabil necesita in mod obligatoriu ca toate
problemele subliniate la analiza sitului original s fie rezolvate, fie ele fizice, nutriionale, ori
legate de toxicitate. De exemplu dezvoltarea de aciditate din pirita coninut n materialul haldat
poate face ca noul ecosistem proaspt instalat s intre rapid in degenerare. Singura soluie este s
se adauge cantiti suficiente de carbonat de calciu (calcar, creta) i s se urmareasc orice nou
generare de aciditate(dup Oros, 2002).
Durata lucrarilor. Nu se va putea realiza un ecosistem complet ntr-o perioad de un an, chiar
dac acesta ar fi un ecosistem simplu precum o paji te de iarb verde. Este foarte dificil de creat
un sol totalmente fertil, complet biologic, intr-un singur an pornind de la de euri, cu exceptia
cazurilor cnd exist un strat substanial de sol vegetal adugat peste de eurile preexistente, ori
de material organic adus din alt parte (nmol de canalizare, compost). Asemenea adaosuri se pot
realiza nsa numai la scar mic.
Solul trebuie s se construiasc pe o perioad de caiva ani, acordndu-se o atenie deosebit
proceselor formatoare de sol. Cerina nu este formarea unui sol care s fie complet dezvoltat in sensul
pedologic (ceea ce poate lua mii de ani) ci un sol complet dezvoltat in sensul biologic. Aceasta
nseamn ca solul format s posede coninuturi adecvate de materie organic i n special de azot,
asociate cu procese active de mineralizare (dup Oros, 2002). Ecosistemele normale n regiunea
temperat necesit circa 150 kg azot/ha anual. De obicei acesta poate fi produs numai dac n sol
capitalul de azot este de 10 ori mai mare, rezultnd un capital minimal de azot necesar n sol de 1000
kg/ha, legat de o mare cantitate de materie organic. Un astfel de sol se poate constitui numai dac n
ecosistemul n dezvoltare printre speciile de plante exista leguminoase ori alte plante fixatoare de azot.
Acestea pot s nu mai fie necesare n partea final a dezvoltrii ecosistemului, dar n partea iniial,

speciile fixatoare de azot trebuie s fie nu numai prezente printre cele semanate sau plantate, s fie
adecvate condiiilor concrete, astfel nct ele s se menin, iar contribuia lor la fixarea azotului s
fie durabil. Trebuie acordat atenie tratamentelor cu fertilizatori i, de asemenea, aciunilor de
cosire, sau p unat a ierbii. n cazul ecosistemelor de pdure, acelea i lucruri trebuie avute n vedere i
aciunile de proptire i de rrire a puieilor (Oros, 2002).

62

Toate acestea vor asigura rata satisfctoare a cre terii n ecosistemul n dezvoltare; o producie
satisfctoare de materie organic atat la suprafa ct i n interiorul solului n formare (circa 10
000 kg/ha/an). Aceast materie organic, mpreun cu penetrarea actual a rdcinilor n sol i cu
activitatea animalelor din sol ce se hrnesc cu materie organic, vor fi deosebit de importante n
dezvoltarea unei structuri adecvate a solului care reprezint cel mai adesea o problem n
terenurile degradate. Ameliorarea structurii, mpreuna cu covorul de plante de la suprafa vor
diminua eroziunea terenului.
La terenurile proaspat nierbate se constat adesea c dup un start foarte bun, rata de cre tere
scade n perioada urmtoare la nivele deosebit de mici datorit unei inadecvate ngrijiri ulterioare.
Unele specii sunt mai tolerante dect altele la lipsa de ntreinere: n zona temperat sunt
leguminoasele Sarothamnus scoparius i Ulex europeus (tolerante la aciditate i lips de fosfor).
Necesitile de ntretinere ulterioar a vegetaiei fac parte integrant din aciunea de reabilitare
i chiar din luarea deciziei privind felul reabilitrii (dup Oros, 2002).

Plante utilizate n recultivarea terenurilor degradate

Plante ierboase. n mai toate cazurile de reabilitare a unor terenuri degradate formarea
unui covor vegetal ierbos este o int final sau o etap intermediar pentru atingerea elului
final care poate fi o pdure, un teren arabil sau un parc.
O

De regul printre ierburile care triesc pe o paji te exist i leguminoase care au o mare capacitate
de a fixa azotul atmosferic iar printre acestea, trifoiul este cel mai rspndit.
In fiecare zona climatic exist un numar mai mare sau mai mic de plante ierboase care pot fi
utilizate n lucrrile de recultivare a zonelor n curs de reabilitare. In Marea Britanie, Bradshaw i
Chadwick, 1980, citeaz 140 de specii de ierburi si 70 specii de leguminoase dintre care se pot
alege speciile adecvate pentru recultivare.
Problema ce se ridic este care specii sunt adecvate pentru reabilitarea terenurilor, cum se face
alegerea i care sunt metodele cele mai bune de nsmnare? Din punctul de vedere al
recultivrii unei zone degradate, cea mai important nsu ire de luat n considerare trebuie s fie
adaptarea plantelor la condiiile terenului (solului). Pe de alt parte, unele dintre aceste plante
sunt u or de obinut prin seminele produse de productori specializai; altele ins se gsesc
numai sub form de plante slbatice.
Plantele slbatice nu trebuie ignorate ntruct pot avea o serie de insu iri extrem de favorabile i pot
aduce servicii foarte utile in activitatea de instalare i de permanentizare a covorului vegetal. In tabelul
alaturat sunt prezentate o serie de specii de graminee inand
cont de criteriile amintite nainte.
n cadrul fiecrei specii exist de obicei foarte multe soiuri i varieti cu nsu iri diferite privind
rezistena, modul de iernare, cerinele fat de condiiile solului i climatului etc. Cutarea soiurilor celor
mai adecvate constituie o cheltuial de timp util pentru c o alegere corect trebuie s ia n considerare
toate diferenele cu privire la persistenta si la intretinerea u oara a covorului vegetal final.

Graminee posibil de utilizat n recultivare (Oros, 2002)

Specii
Cerine de
Tolerana
Tolerana
Tolerana fa
Cultivatori

fertilitate
la pH
la secet
de

temperatur
Agrostis gigantea (iarba
medii
neutru,
medie
rece, cald
putini
cmpului)
calcaros

Agrostis stolonifera (iarba

medii
neutru,
mica
rece, cald
putini
cmpului)
calcaros

Agrostis tenuis (iarba

mici
acid, neutru
medie
rece, cald
multi
cmpului)

Alopecurus pratensis (coada

medii
neutru,
medie
rece, cald
putini

vulpii)
calcaros

Dactylis glomerata
mari
neutru,
medie,
rece, cald
multi
(golom)
calcaros

Deschampsia caespitosa
medii
neutru,
medie
rece, cald
Specie

63

(trs)
calcaros

salbatica
Deschampsia flexuosa (trs
mici
acid
mare
rece, cald
Specie
mica)

salbatica
Festuca arundinacea (piu
mari
neutru, acid
mica
rece, cald
multi
de livezi)

Festuca ovina (piu ul oii)

mici
acid, neutru
mare
frig, rece,
putini

cald
Festuca rubra (piu ro u)
mici
neutru,
mare
frig, rece,
multi

calcaros
cald
Festuca pratensis (piu de
medii
neutru,
medie
rece, cald
putini
livezi)
calcaros

Lolium perenne (zzanie)

medii
neutru,
medie
rece, cald
multi

(raigras)
calcaros

Phleum pratense(timoftic)
medii
neutru,
medie
rece, cald
multi

calcaros

Poa pratensis (firu de li vezi )

mici
acid, neutru,
mare
frig,rece,
multi

calcaros

cald

Leguminoasele reprezint o component de importan crucial n aproape toate mixturile de

ierburi deoarece ele contribuie la meninerea unui influx adecvat de azot i asigur furnizarea unui
capital adecvat de azot organic n interiorul solului nou, n formare. Ele nltur necesitatea
tratamentelor cu azot pentru intreinere prin marirea cantitii de azot mineralizabil. Astfel,
trifoiul este un fertilizator mai bun dect tratamentele cu fertilizatori chimici, intruct furnizeaz
azotul n mod gradual i continuu.

Leguminoase perene cu utilitate deosebit in reabilitarea terenurilor

(A= acid; N = neutru; C = calcaros), dupa Oros, 2002
Specii de leguminoase
Preferine
Preferine pentru
Existena n flora
pentru sol
climat
Romaniei
Amorpha fruticosa (tufa de
N,C
cald
indigo)

Centrosema pubescens
A,N
cald
Coronilla varia(coroni te)
AN
rece, cald
++
Desmodium uncinatum
A,N
cald
Lathyrus sylvestris (lintea
N,C
cald
+
pratului)

Lespedeza bicolor
A,N
cald
ornamental
Lespedeza cuneata
A,N
cald
-

Lespedeza japonica
A,N
cald
Lotus corniculatus
N,C
rece, cald
++
(ghizdei)

Lupinus perrenis (lupin)

A,N,C
rece, cald
cultivat
Medicago sativa (lucern)
N,C
rece, cald
++
Melilotus alba (sulfin
A,N,C
rece, cald
++

alb)

Melilotus officinalis
A,N,C
cald
++
(sulfin)

Phaseolus vulgaris (fasole)

A,N,C
cald
cultivat
Stylosanthes humilis
A,N
cald
Trifolium pretense (trifoi
N,C
rece
++

ro u)

Trifolium hybridum (trifoi)

A,N,C
rece
++
Trifolium repens (trifoi
N,C
rece, cald
++
alb)

Ulex europeus
A,N,C
rece
-

64

i in cazul leguminoaselor, alegerea spec iilor depinde de condiiile de sol i de climat. De obicei
leguminoasele cele mai adecvate sunt cele utilizate n agricultur ntruct acestea au o rat mare
de fixare a azotului [Oros, 2002].
Leguminoasele sunt adecvate datorit simbiozei cu bacteria Rhizobium ce se fixeaz in radcini i
formeaz nodozitile fixatoare de azot. Se practic utilizarea de semine deja infectate cu
Rhizobium. De asemenea, se poate utiliza sol in care au fost deja cultivate leguminoasele respective,
pentru a aduce un aport de bacterii Rhizobium adecvate. Uneori se realizeaza a a numite culturi - doic.
Speciile utilizate n acest scop trebuie alese n funcie de elul urmrit.
Pregtirea terenului i nsmn area se fac de regul prin acelea i metode care sunt utilizate n
mod obi nuit n agricultur i cu acelea i utilaje.
Rata de nsmnare (cantitatea de semine la hectar) poate varia n funcie de teren i de sit, dar i
aici este bine s se urmeaze practica din lucrrile agricole. Nu se justific ratele de nsmnare, cu
valori ridicate din horticultur (500 kg/ha) n timp ce n agricultur se aplic 40 kg/ha, n ideea c
smna mult asigur succesul. Aceasta nu este adevrat, succesul este asigurat numai prin
asigurarea condiiilor corecte de cre tere. Bradshaw i Chadwick (1980) consider ca normal pentru
zona temperat o rat de nsmnare de 50 - 100 kg/ha i ceva mai puin pentru
climatul tropical [Oros, 2002].

Daca s-a putut identifica material vegetativ special adaptat la condiii particulare, precum cele
din haldele metalifere, de exemplu, atunci clonarea i propagarea vegetativ reprezint o metod
eficient de stabilizare, aceasta asigurnd prezervarea caracteristicilor genetice nemodificate ale
materialului adaptat.
Materialul vegetativ plantat n teren va necesita aceea i atenie n privina lucrrilor de
ameliorare i ntreinere ca i materialul semnat. Chiar dac materialul de start este mai mare
(plantule) i are o mai mare rezerv de nutrieni pe termen scurt, pe termen lung el va necesita
acelea i adaosuri de azot i ali nutrieni ca i terenul nsmnat [Oros, 2002].

Arbori i arbu ti utilizati in recultivarea terenurilor degradate.

Ca i n cazul plantelor ierboase, posibilitatea de alegere a speciilor este imens. Pentru plantarea
pe terenurile degradate, este necesar s se aleag specii cunoscute a fi bine adaptate la mediul
local, cu acordul inspectoratului silvic. In general, speciile cele mai valoroase sunt cele care
reprezint pionierii naturali. Este posibil identificarea de specii care sunt adaptate in mod
particular la condiiile dificile de deficien de nutrieni, carena care este prezent n
succesiunea natural timpurie a vegetaiei pe terenurile degradate, dupa Oros, 2002.
5.3.1 Arbori.
Ca i n cazul ierburilor, speciile trebuie alese i n funcie de nsu irile particulare ale sitului
precum pH-ul i climatul. Exist un numr de arbori din familia Leguminoase n zona temperat
precum Robinia pseudacacia (salcmul), Cercis siliquastrum, Gleditschia triacanthos (pltic),
Gymnocladus dioica, Sophora japonica , iar n climatul cald speciile genului Acacia, precum si
alte specii de arbori, care nu sunt leguminoase, i care au capacitate de a fixa azotul ex. specific
de Alnus (anin), Hippopha rhamnoides (ctina alb). Aceste specii cresc relativ repede far
adaos de fertilizatori (azot) i reprezint instrumente valoroase in reabilitarea terenurilor degradate
sau a celor tehnogene, de i uneori necesit adaos de ali nutrieni.
Arborii cei mai utilizai in recultivarea terenurilor degradate in zona temperat
((N)=fixatoare de azot, N = neutru, A= acid, C = calcaros), dupa Oros, 2002.

Specii de arbori
Cerine
Toleran
Cerine de
Toleran
Rspndire
de
la pH
umiditate
la climat
in Romnia
fertilitate

Acer pseudoplatanus (paltin de

medic
NC
uscat
rece, cald
++
munte)

65

Specii de arbori
Cerine
Toleran
Cerine de
Toleran
Rspndire
de
la pH
umiditate
la climat
in Romnia
fertilitate

Acer negundo (arar american)

medie
NC
uscat
cald
Alnus glutinosa (anin negru)
slab (N)
ANC
umed
rece
++
Alnus incana (anin alb)
Slab
NC
umed
rece
++
(N)

Betula papyrifera (mesteacn)

slab
ANC
umed,
cald
-

uscat

Betula pendula (mesteacan)

slab
NC

umed,
rece
-

uscat

Betula pubescens (mesteacan

slaba
ANC
umed,
rece
+
pufos)

uscat

Coriaria arborea
slaba (N)
AN
uscat
rece, cald
Eleagnus sylvatica
slaba (N)
NC
uscat
rece, cald
Eleagnus umbellulata
slab (N)
NC
uscat
rece, clad
Eleagnus angustifolia (slcioar)
slaba (N)
NC
uscat
cald
+
Fagus sylvatica (fag)
medie
ANC
uscat
rece
++
Fraxinus americana (frasin
medie
NC
umed,
cald
american)

uscat

Fraxinus excelsior (frasin)

medie
NC
uscat
rece
++
Juniperus virginiana (ienupar de
slaba
ANC
uscat
rece,cald
cultivat
Virginia)

Larix leptolepis (zad, larice)

slaba
ANC
uscat
rece
Pinus banksiana (pinul bancsian)
slaba
AN
uscat
rece
cultivat
Pinus echinata
slaba
AN
uscat
cald
Pinus nigra (pin negru)
slaba
ANC
uscat
rece, cald
++
Pinus rigida (pinul rigid)
slaba
AN
uscat
rece, cald
Pinus strobus (pinul strob)
medie
ANC
uscat
rece, cald

cultivat
Pinus sylvestris (pinul silvestru)
slaba
ANC
uscat
rece, cald
++
Pinus tolda
medie
AN
uscat
cald
Pinus virginiana
slaba
AN
uscat
cald
Platanus occidentalis (platan)
medie
NC
umed
rece, cald
cultivat
Populus nigra (plop negru)
medie
N
umed
cald, rece
++
Populus tremula (plop
medie
ANC
umed
rece
++
tremurator)

Robinia fertilis
slaba
ANC
uscat
rece, cald
Robinia pseudacacia (salcam)
slaba
ANC
uscat
rece, cald
++
Salix caprea (salcie capreasca)
slaba
ANC

umed,
rece
++

uscat

Salix cinerea (zlog )

slaba
ANC
umed,
rece
++

uscat

Salix daphnoides (salcie

slaba
NC
umed
rece
++
brumarie)

5alix purpurea (rachita rosie)

slaba
ANC
umed
rece
++
Salix viminialis (rulaje)
medie
NC
umed
rece
++
Sorbus aucuparia (scoru )
slabd
ANC
uscat
rece
+
Thuja occidentalis
medie
NC
umed,
rece
cultivat

uscat

Arbu ti.
Posibilitatea de alegere pentru arbu ti este de asemenea imens. Aici nu se pune problema unei
utilizri comerciale, specific alese vor fi cele care au nsu irile cele mai adecvate fa de
condiiile terenului i care ndeplinesc bine rolul de fixare.
Dintre arbu tii foarte valoro i, cu capacitatea de a fixa azotul sunt leguminoasele Ulex,
Sarothamnus i eleagnaceele Eleagnus (slcioara) i Hippofa rhamnoides (ctina alb). Ali
66

arbu ti utilizai adesea pentru fixarea terenurilor degradate i pentru halde sunt sngerul (Cornus
sanguinea), cornul (Cornus mas), lemnul cinesc (Lygustrum vulgare), drobul (Cytisus
nigricans), drmozul i clinul (Viburnum lantana, Viburnum opulus), etc.
Sortimentul de specii forestiere care asigur rezultate bune pe halde este bogat, speciile utilizate
depinznd de condiiile staionale existente sau create prin lucrrile de ameliorare.
Speciile amelioratoare de sol (fixatoare de azot)
Speciile amelioratoare de sol (fixatoare de azot) precum salcmul (Robinia pseudacacia), aninul
(Alnus), slcioara (Eleagnus) i ctina alb (Hippofa rhamnoides) au dat rezultate bune n
toate cazurile. Ele au contribuit i la ameliorarea materialului de sol din halde n timp relativ scurt
i au stimulat cre terea altor specii lemnoase cnd au fost cultivate n amestec cu acestea.
Dintre celelalte specii forestiere folosite pe halde au dat rezultate bune sau satisfcatoare (Traci,
1985, Oros, 2002):
pinii, in special pinul silvestru (Pinus sylvestris), pe haldele miniere i industriale cu depozite
grosiere i nisipoase, cu pH sub 7, i
pinul negru (Pinus nigra) pe haldele calcaroase sau argiloase cu pH peste 7;
plopii, mai ales plopul alb (Populus alba) i plopul tremurtor (Populus tremula), i

slciile (Salix alba, Salix caprea, Salix incana, etc.) pe haldele formate din depozite nisipoase, din
regiuni mai umede sau cu posibiliti de irigare;
frasinul (Fraxinus excelsior), paltinul (Acer), cire ul pdure (Cerasus avium),
ulmul (Ulmus) i frasinul de Pensylvania (Fraxinus pensylvanica), ararul ttresc (Acer tataricum)
i altele, pe haldele cu condiii staionale ceva mai favorabile sau pe care s-a a ternut un strat de
pmnt fertil;
stejarul i stejarul ro u (Quercus robur i Quercus borealis) pe haldele cu cele mai bune condiii de
sol;
mesteacanul (Betula verrucosa), oetarul fals (cenu erul) (Ailanthus altissima),
ararul american (Acer negundo), mojdreanul (Fraxinus ornus),etc. pe haldele cu condiii
staionale mai dificile (mesteacanul in zone mai umede pe haldele acide, iar celelalte specii pe
haldele din zone mai calde i secetoase - mai ales mojdreanul);
lemnul cinesc (Ligustrum vulgare), sngerul (Cornus sanguinea) i a1i arbu ti, pe diferite tipuri
de halde, in amestec cu speciile menionate mai inainte.

Impdurirea haldelor
Analiza situaiei unor halde din Romnia i a datelor din literatura de specialitate l-au condus pe
Traci,1985 la concluzia c pentru caracterizarea codiiilor staionale ale haldelor i pentru
clasificarea staiunilor de halde, trebuie s se ia n considerare urmtorii factori principali:
condiiile generale fitoclimatice, cu distingerea urmtoarei serii de tipuri de halde:
halde din regiuni de cmpie i coline, din step i silvostep;
halde din regiunile de dealuri din subzonele stejarului i gorunului; halde din regiuni montane din
subzonele fagului i molidului;

proveniena materialului component, distingndu-se:

halde miniere,
halde industriale,
halde menajere, etc.;
caracteristicile depozitelor din halde, distingndu-se:
halde din fragmente de roc grosiere (pietri , pietre, bolovani cu sau fr material fin),
halde din materiale fine de roc (nisip, pulberi), halde din materiale foarte fine (argil),

halde din cenu , halde din zgur,.

67

halde din de euri menajere.

La acestia se mai adauga o serie de ali factori ce trebuie luai n considerare precum: petrografia
rocilor i compozitia mineralogiec, pH-ul, prezena unor sruri solubile sau / i compu i toxici,
configuraia microreliefului hlzilor (valuri sau movile, platforme, blti). Toate acestea vor sta la baza
proiectrii i aplicrii soluiilor tehnice difereniate pentru stabilizarea i mpdurirea haldelor.

Utiliznd parial aceste caracteristici, Traci, 1985, a facut i o clasificare staionala a haldelor din
care extragem cateva tipuri de staiuni.
Staiunea Hmc1 = halde miniere (Hm) formate din materiale grosiere de roci acide (bolovani,
pietre, pietri i puine materiale fine de riolit, din galeriile de exploatare a aurului), sub form
de movile i valuri, inalte de 20-30 m, cu pante de 20-30, stabile, situate in subzona de vegetaie a
fagului i molidului (c).
Staiunea Hmb3 = halde miniere (Hm) carbonifere formate din fragmente de roc i lignit, sub
forma de valuri i movile, nalte de 10-30 m, cu pante de 20-30, semistabile, nenelenite, din
subzona de vegetaie a gorunului (b).
Staiunea Hmb4 = halde miniere (Hm) formate din materiale fine de roc (nisip de la flotaia
minereurilor de plumb-zinc), cu pH 7-8, sub form de platforme
inalte de 7-15 m, cu panta versanilor de 20-25, semistabile , din subzona de vegetaie a
gorunului (b).
Staiunea Hib2 = halde industriale (Hi) formate din cenu a de la centrale electrice de
termoficare, cu pH= 9,7 , cu coninut ridicat de Fe, Mg, Pb, Ca i coninut redus de nitrai, sub
forma de dune inalte de 40-50 m, cu pante de 25-30, nestabile, situate in subzona de vegetatie a
stejarului (b).
Statiunea Hda1 = halde de de euri menajere (Hd) alcatuite predominant din materiale organice
(hrtie, materiale plastice, resturi alimentare) i puine fragmente de sticl, ceramic, obiecte
metalice, etc., sub forma de platforme inalte de 5-10 m, situate n zone de cmpie i coline din step
si silvostep (a).
Lucrri de ameliorare a condiiilor pentru instalarea i dezvoltarea vegetaiei forestiere
In general, haldele ofera condiii staionale dificile, de aceea, n majoritatea cazurilor sunt
necesare lucrri de ameliorare a acestor condiii pentru a permite instalarea vegetaiei forestiere
i dezvoltarea ei corespunztoare.
Printre cele mai general aplicate categorii de lucrri se pot mentiona:
Lucrri de consolidare a haldelor contra alunecrilor prin mic orarea pantei i reamenajarea
taluzurilor, ziduri de sprijin, drenaje i lucrri de combatere a eroziunii prin gardulee liniare sau
rombice, banchete de zidrie uscat, etc.;
Lucrri de pregtire a terenului.
In cazul haldelor cu suprafaa foarte tasat (foarte adesea este cazul halzilor miniere i
industriale) afnarea terenului este indispensabil pentru instalarea vegetaiei forestiere.
Pe suprafaa terasei la haldele de steril de flotaie, afnarea se realizeaz prin artur la 30-40
cm adncime i/sau discuire, iar
n cazul haldelor din materiale grosiere (halde de min) prin scarificare cu scarificatoare cu dini
pn la 30-40 cm.

Pentru instalarea vegetaiei forestiere, aceast pregtire se poate executa i n f ii de 1,0-1,5 m

lime alternnd cu f ii nelucrate de 0,75-1,0 m laime, sau chiar pe tablii cu dimensiunile
stabilite de la caz la caz.
Pe versanii haldelor, pregtirea terenului se va face n terase late de 26 m amplasate la
distane de 3-6 m. Terasele pot fi sprijinite cu gardulee (la materialele nestabile) sau nesprijinite
in cazul materialelor stabile;
Lucrari de ameliorare a condiiilor de sol. Aproape n toate cazurile, haldele de de euri industriale
prezint carene n substanele nutritive i n special pentru azot. Prin urmare, sunt necesare lucrri
de fertilizare i alte lucrri de mbuntire a nsu irilor fizico-chimice ale materialelor de solificare, n
special n privina capacitii de reinere a apei i a nutrienilor.
68

Acoperirea cu un strat de sol fertil de 20-25 cm grosime este o metoda general valabil, util i
n cazul mpduririlor, ns foarte rar este utilizabil din considerente de costuri i posibiliti
de procurare a cantitailor de sol necesare.
Acoperirea cu alte materiale, nlocuitori de sol, precum nmoluri dragate din canale de irigaie
sau de desecare ori din canalele portuare, etc., nmoluri de la staiile de epurare municipale a
apelor menajere, este o alternativ adesea fezabil. Fiind bogate n materie organic, acestea
amelioreaz nsu irile materialului superficial din hald i aduce un aport de elemente nutritive.
Mulcirea cu paie, ramuri, scoare, frunze, rumegu sau turb este o alt posibilitate de
ameliorare a materialelor, avnd efect pozitiv i in prevenirea eroziunii.
Alte lucrari de ameliorare a condiiilor de sol sunt cele de combatere a aciditii prin tratare
cu var sau calcar i de fixare sau neutralizare a substanelor nocive, fie prin spalarea srurilor
solubile, fie prin fixare cu gips, fosfogips sau alte tratamente.
La organizarea activitii de instalare a vegetaiei forestiere se recomand ca din speciile tipice
pentru fiecare staiune de halde s se aleaga 2 - 3 specii ntre care s fie cel puin una dintre cele
amelioratoare de sol (fixatoare de azot), respectiv salcm, anin sau catina alb. Amestecul de plante
2
indicat este cel in buchete de 50 - 100 m sau in benzi pure alterne, late de 5-10 m.

Ctina alb i ali arbu ti pot fi folosii i n culturi n amestec intim cu speciile de talie mare sau
in rnduri pure alterne cu acestea.
Se va evita amestecul intim, n rnduri alterne sau n buchete mici de pin cu salcm, anin sau
salcioar, deoarece foioasele menionate, avnd cre teri mai mari in primii ani, cople esc i
elimind pinul din cultur. Unele specii ca salcmul i aninul pot fi folosite i n culturi pure.
Pentru taluzuri, dup realizarea lucrrilor de consolidare specifice, se va realiza plantarea
puieilor. Din sortimentul de specii recomandat se va alege o singur specie, evident, cea mai
potrivit condiiilor staionale. Cu deosebire, se utilizeaz n aceste cazuri specii fixatoare de
azot precum ctina alb, salcmul i aninii. Foarte rar, pentru a realiza efecte peisajistice, se
utilizeaza combinaii de dou specii. Desimea culturilor va fi 0,3-1m x 2-3m, cea mai mica
desime va fi n cazul plantaiilor de salcm (0,8-1m x 2-2,5 m) iar cea mai mare n cazul
plantaiilor n cordon de ctin alb (0,3-0,5m x 2-2,5m ).
Gazonarea prealabil sau concomitent cu plantarea este foarte recomandat pentru prevenirea
eroziunii, utilizndu-se n special lupinul peren pentru nverzirea taluzurilor.
Intreinerea. Fertilizare i amendare. Acestea sunt la fel de importante pentru arbori ca i pentru
ierburi i leguminoase. Dac deficienele i pH-ul nu sunt corectate la inceput i meninute la
valori normale in continuare, cre terea arborilor va fi slab. Dup mai muli ani, copacii vor
nrdcina suficient de adnc pentru a ajunge s furnizeze nutrieni in cantitile necesare, dar
cre terea iniial slab poate conduce la moartea copacilor prin vandalism, datorit animalelor
ori prin competiia cu vegetaia inconjurtoare. Dac stocul de sol fertil de la plantare este
bine fertilizat i aduce un aport de nutrieni pentru primul an, principala grij va fi acordat
pentru anii al doilea i al treilea. Nutrienii limitativi vor fi, ca i in cazul ierburilor, azotul i
fosforul.
Vegetaia nsoitoare. Intruct copacii sunt plantai la densitate mic, o mare parte din teren
ramne neprotejat i atunci un covor vegetal poate fi important. Acesta nu este necesar dac
terenul este plat, dar in pantele expuse la eroziune, covorul vegetal devine esenial. Acesta
poate fi realizat dintr-un amestec de graminee cu leguminoase sau numai leguminoase, acestea

din urm sunt valoroase i prin fixarea azotului. Dar covorul vegetal va intra in competiie
pentru nutrieni i apa cu tinerii arbori i chiar pentru lumin dac arborii sunt foarte mici.
Astfel, speciile ierboase trebuie alese cu grij, iar rata de nsmnare trebuie s fie foarte mic,
mult mai mic dect in cazul paji tilor. Chiar i a a, poate deveni necesar ca vegetaia s fie
combtut in jurul arborilor, prin tiere sau erbicidare in anul al doilea i al treilea. Astfel de lucrri
sunt obi nuite pentru plantaiile forestiere pe terenurile erodate, la acestea se vor aduga i alte
lucrri de intreinere specifice in funcie de insu irile staiunii de hald, dupa Oros, 2002.
(http://www.resolmet.utcluj.ro )
69

Cap. 8. Biotehnologii de remediere a apelor poluate

Indepartarea metalelor grele din ape poluate i levigate ale solurilor contaminate
cu ajutorul cianobacteriilor
Din cele 35 de metale considerate periculoase pentru sanatatea umana, 23 au fost catalogate drept
metale grele: stibiu, arsen, bismut, cadmiu, ceriu, crom, cobalt, cupru, galiu, fier, aur, plumb,
mangan, mercur, nichel, platina, argint, telur, taliu, staniu, uraniu, vanadiu si zinc.

Cele mai periculoase substante pentru sanatate sunt considerate plumbul, cadmiul, mercurul si
arsenul. Expunerea la concentratii mari din aceste metale poate duce la otraviri, cu grave efecte
asupra sistemului nervos sau asupra organelor interne precum plamani, ficat, rinichi si altele.
In ultimii ani s-au dezvoltat numeroase tehnici de indepartare a metalelor grele din apele uzate, cu
scopul de a scadea cantitatea de ape uzate cu continut de metal rezultat din activitatile industriale
precum si pentru a imbunatati calitatea efluentilor. Numeroase tratamente precum precipitarea
chimica, coagularea-flocularea, flotarea, schimbul ionic sau filtrarea prin membrane pot fi folosite
pentru a indeparta metalele grele din ape uzate contaminate, fiecare metoda avand anumite
avantaje si limitari. O modalitate de ndeprtare a metalelor grele prin utilizarea
microorganismelor - cyanobacteriilor este deosebit de intens cercetat (Roberto De Philippis i
Ernesto Micheletti, 2009).
Folosirea microorganismelor pentru indepartarea metalelor grele
Biosorbtia reprezinta proprietatea biomasei microbiene nevii de a acumula ioni ai metalelor grele,
proces nesustinut metabolic. In contrast, termenul bioacumulare descrie un proces activ in care
metalele grele sunt indepartate in urma unei activitati metabolice a unor organisme vii. In ultimii
ani, cercetarea s-a bazat pe mecanisme de biosorbtie deoarece biomasa poate fi utilizata cu succes
pentru a indeparta metalele grele din efluentii industriali precum si pentru a recupera metale
pretioase din solutii de procesare.
Celulele microbiene reprezinta biosorbenti excelenti datorita raportului mare suprafata/ volum pe
care-l au si datorita unui numar mare de situsuri de chemo-sorbtie potential active. Cercetarile in
domeniul biosorbtiei metalelor grele au condus la identificarea mai multor tipuri de biomase
microbiene eficiente in concentrarea acestor metale. Unele tipuri de biomasa sunt deseuri rezultate
la fermentari industriale (de ex. bacteria Bacillus subtilis). Alte tipuri de microbi care pot lega
metale pot fi recoltate din medii specifice precum lacuri sau mari (anumite tipuri de cianobacterii).
Acestea pot acumula cantitati considerabile de metale grele, precum Pb, Cd, U, Cu, Zn, Cr sau
altele.
Caracteristici generale ale cianobacteriilor. Cianobacteriile reprezinta un grup larg de bacterii
Gram-negative, procariote fototrofice caracterizate prin capacitatea de a realiza fotosinteza in
prezenta oxigenului dar si autotrofe, ca principala sursa de nutritie. S-a observat ca anumite
cianobacterii pot creste pe intuneric pe anumite substraturi organice sau in conditii anaerobe,
realizand fotosinteza in lipsa oxigenului, folosind sulfuri ca si donori de electroni. Aceasta
independenta trofica, alaturi de usurinta cultivarii lor, recomanda cianobacteriile in procesele de
decontaminare.
Utilizarea cianobacteriilor in indepartarea metalelor grele. In ultimii ani s-au publicat multe
articole referitoare la capacitatea microorganismelor de a acumula si indeparta metalele grele din
ape. Aceste procese pot fi clasificate ca: procese active, metabolice sau procese pasive,
nemetabolice. In procesele active, adsorbtia, numita bioacumulare, se datoreaza transportului
metalului prin membrana celulara, urmata de acumularea intracelulara in functie de metabolismul

celular. In cazul interactiilor fizico-chimice intre metal si gruparile functionale prezente pe

suprafata celulei (bazate pe adsorbtia fizica, schimb ionic si complexare), procesul de sorbtie nu
depinde de metabolism. Peretele celular, compus din polizaharide, proteine, lipide poate oferi
situsuri pentru legarea metalelor (Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009).
Cianobacteriile au un perete celular care permite adsorbtia pasiva a unor mari cantitati de metale
dizolvate. Pe suprafata peretelui celular exista de fapt grupari functionale precum grupari
carboxilat, hidroxil, sulfat, fosfat sau amino. Cationii metalici pot fi luati din mediu de catre
70

gruparile incarcate negativ de pe peretele celular (Fig. 1), cu sarcina negativa prezenta pe
straturile polizaharidice care inconjoara peretele celular (Fig. 2) sau cu sarcinile negative ale
polizaharidelor eliberate in mediul inconjurator (apa) (Fig. 3), (dupa Roberto De Philippis i
Ernesto Micheletti, 2009).

Fig. 1. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative de pe suprafata celulara

Fig. 2. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative de pe straturile polizaharidice exocelulare

Fig. 3. Interactia cationilor metalici cu sarcinile negative ale polizaharidelor eliberate in mediu (apa) (dupa
Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009).

Un numar mare de tipuri de cianobacterii au fost testate in legatura cu capacitatea lor de a

indeparta metalele grele (in special Cd, Hg, Ni, Zn sau Pb) din solutii metalice. De exemplu,
Tolypothrix tenuis si Calothrix parietina au indepartat cu succes cantitati ridicate de Hg,
Scytonema schmidlei, Anabaena cylindrica si A. torulosa au indepartat 96-98% din Cd aflat intr71

o solutie de Cd de concentratie 1mg/ l., Gloeocapsa sp., Nostoc paludosum, N. piscinale, N.

punctiforme, N. commune, Oscillatoria agardhii, Phormidium molle si Tolypothrix au indepartat
90-96% Pb dintr-o solutie de Pb de concentratie 1mg/ l. Procesul de legare al metalului are loc prin
complexarea ionilor metalici cu materialul polizaharidic, mucilaginos care acopera ceretele celular
sau este eliberat de suprafata celulara.
Indeprtarea metalelor grele de ctre Cyanobacterii: Resultate obinute cu Cyanobacterii i metale ( Dupa : Roberto De
Philippis i Ernesto Micheletti, 2009.)
Metal
Cyanobacterii
Cyanobacterii

/ Sorbia (mmol g-1)a sau

/ Sorption (mmol g-1)a sau

Eficiena ndeprtrii metalului(%)b

Eficiena ndeprtrii metalului(%)b
Al
Spirulina platensis
/ 0.0045a,c
Co
Oscillatoria angustissima
/
0.26a

Spirulina maxima
/ 0.0145a,c
Spirulina sp.
/
0.0002a

Mastigocladus laminosus / #113 0.0284a,c

Phormidium valderianum BDU / 30501 n.r.
Cd
Anabaena nodosum
/ 0.087a
Cr
Aphanocapsa halophytia 0.29a

Anaabena nodosum
/ 0.81a
Cyanospyra capsulata 0.36a

Anabaena sp. BCC

/ 2 85b
Cyanothece CE 4 1.83a

Anabaena variabilis NIES / 23 57b

Cyanothece ET 5 0.59a

Anacystis nidulans n.r.

Cyanothece PE 14 0.26a

Aphanocapsa halophytia n.r.

Cyanothece TI 4 1.29a

Calothrix marchica BCC / 4 57b

Cyanothece VI 13 0.93a

Calothrix marchica BCC / 6 87b

Cyanothece VI 22 1.08a

Calothrix parietina TISTR 8093 / 0.70a

Cyanothece 16Som 2 3.77a

Calothrix sp. BCC10 / 89b

Nostoc PCC 7936 0.07a

Calothrix sp. TISTR 8130 82b

Spirulina sp. 0.19a

Chlorococcus paris n.r.

Synechococcus sp. PCC 7942 0.10a

Cylindrospermum sp. BCC / 20 65b

Fe
Phormidium laminosum 94.8b

Gloeocapsa sp. BCC

/ 25 96b

Gloeothece magna 3.78a,c

Mn
Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 2.84a,c

Hapalosiphon hibernicus BCC 27 90b

Ni
Aphanocapsa halophytia n.r.

Hapalosiphon sp. BCC 30 62b

Cyanospyra capsulata 1.41a

Hapalosiphon welwitschii BCC 34 75b

Cyanothece CE 4 1.24a

Lyngbya hieronymusii BCC 41 97b

Cyanothece ET 5 0.24a

Lyngbya spiralis BCC 42 80b

Cyanothece PE 14 0.19a

Lyngbya taylorii 0.37a

Cyanothece TI 4 0.62a

Mastigocladus laminosus #113 0.0048a,c

Cyanothece VI 13 0.39a

Mastigocladus sp. BCC 36 78b

Cyanothece VI 22 0.59a

Nostoc rivularis n.r.

Cyanothece 16Som 2 0.96a

Microcystis aeruginosa f. aeruginosa NIES 44 95.3b

Lyngbya taylorii 0.65a

Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 1.23a,c

Microcystis aeruginosa 4.26a

Nostoc linckia n.r.

Nostoc PCC 7936 0.032a

Nostoc sp. BCC 50 94b

Phormidium laminosum 85b

Nostoc commune. BCC 76 69b

Spirulina sp. 0.003a

Nostoc micropicum BCC 77 72b

Synechococcus sp. PCC 7942 0.05a

Nostoc piscinale. BCC 47 82b

Synechocystis sp. 3.23a

Nostoc punctiforme BCC 48 73b

Nostoc punctiforme BCC 49 84b

Oscillatoria amoena BCC 53 83b

Oscillatoria jasorvensis BCC 56 94b

Oscillatoria agardhii BCC 52 90b

Phormidium angustissimus BCC 68 87b

Phormidium molle BCC 7193 95b

Phormidium valderianum BDU 30501 83b

Rivularia sp. BCC 80 88b

Spirulina platensis 0.0035a,c

Spirulina maxima 0.0017a,c

Spirulina platensis 0.33a

Spirulina platensis 1.07a

Spirulina vulgaris 1.00a

Stigonema sp. BCC 90 89b

Synechococcus sp. PCC 7942 0.06a

Tolypotrix tenuis TISRT 8063 0.80a

Tolypotrix tenuis 0.18a

Tolypotrix tenuis BCC 100 53b

72
Pb

Anabaena sp. BCC 2 29b

Anabaena variabilis NIES 23 48.92b Aphanothece halophytica 22b

Calothrix sp. BCC 8 59b Calothrix sp. BCC 10 13b Calothrix sp.

TISTR 8130 86b

Calothrix sp. n.r. Cylindrospermum sp. BCC 20 52b

Gloeocapsa sp. BCC 25 96b

Hapalosiphon hibernicus BCC 27 13b Hapalosiphon

welwitschii BCC 34 47b Lyngbya heironymusii BCC 41 80b

Lyngbya spiralis BCC 42 73b Lyngbya taylorii 1.47a
Mastogocladus sp. BCC 36 29b
Microcystis aeruginosa f. fl os-aquae C3-40 1.50a,c Nostoc
commune BCC 76 94b
Nostoc piscinale BCC 47 94b Nostoc punctiforme BCC 48 98b Nostoc
punctiforme BCC49 51b Oscillatoria agardhii BCC 52 73 96b
Oscillatoria amoena BCC 53 89b

Oscillatoria jasorvensis BCC 56 89 85b Phormidium

angustissimum BC 68 77b Phormidium molle BCC 71 90b
Rivularia sp. BCC 80 76b
Spirulina maxima 84b Spirulina platensis 35b Spirulina platensis 0.08a

Hapalosiphon hibernicus BCC 27 84b Hapalosiphon

welwitschii BCC 34 85b Lyngbya hieronymusii BCC 41 92b
Lyngbya spiralis BCC 42 96b Mastigocladus laminosus #113
0.005a,c Mastigocladus sp. BCC 36 89b

Nostoc sp. BCC 50 86b

Nostoc commune sp. BCC 76 43b Nostoc micropicum BCC
77 26b Nostoc piscinale sp. BCC 47 22b Nostoc
punctiforme sp. BCC 48 66b Nostoc punctiforme sp. BCC
49 49b Oscillatoria amoena BCC 53 12b Oscillatoria
jasorvensis BCC 5689 89b Oscillatoria agardhii BCC 52
73b Phormidium angustissimus BCC 68 74b Phormidium
molle BCC 71 93b
Rivularia sp. BCC 80 86b
Spirulina maxima 0.00125a,c Spirulina platensis 0.00055a,c
Stigonema sp. BCC 90 92b Stigonema sp. BCC 92 94b

Tolypotrix tenuis BCC 100 94b

Spirulina, sp. 0.00005a Stigonema sp. BCC 90 52b Stigonema sp. BCC
92 59b

Synechococcus sp. PCC 7942 0.15a

Tolypothrix tenuis TISTR 8063 88b Tolypothrix tenuis BCC 100 90b
Tolypothrix tenuis TISTR 8063 0.15a

Zn
Anabaena variabilis NIES 23 67.7b Anacystis nidulans
n.r. Aphanocapsa halophytia n.r. Aphanothece halophytia 2.03a
Chroococcus paris n.r.
Lyngbya taylorii 0.49a
Mastigocladus laminosus #113 0.00856a, Microcystis aeruginosa f.
fl os-aquaeC3-40 1.23a,c Nostoc linckia n.r.
Nostoc rivularis n.r Oscillatoria angustissima 0.33a Oscillatoria
angustissima 9.81a Phormidium laminosum 78.2b Spirulina maxima
0.0023a,c Spirulina platensis 0.0046a,c Spirulina platensis 0.11a

Tolypotrix tenuis TISTR 8063 0.14a

Sn

Aphanocapsa halophytia 82b

Cu
Anabaena variabilis NIES 23 35.4b Anacystis
nidulans n.r. Aphanocapsa halophytia n.r. Calothrix sp. n.r.
Chroococcus paris n.r.
Cyanospyra capsulata PCC 9502 3.65a Cyanospyra
capsulata 1.97a Cyanospyra capsulata 2.25a Cyanothece
CE 4 0.52a
Cyanothece ET 5 1.78a
Cyanothece PE 14 0.16a
Cyanothece TI 4 050a
Cyanothece VI 13 0.95a
Cyanothece VI 22 0.98a
Cyanothece 16Som 2 3.17a Gloeothece sp. PCC 6909 0.41a

Microcystis aeruginosa f.flos-aquae C3-40 4.1a

Nostoc PCC 7936 1.465a

Hg
Anabaena sp. BCC 2 68b Calothrix marchica BCC 4 84b
Calothrix sp. BCC 8 86b Calothrix sp. BCC 10 92b

Calothrix parietina TISTR 8093 50b

Calothrix sp. TISTR 8130 40b
Cylindrospermum sp. BCC 20 83b
Gloeocapsa sp.BCC 25 50b

Oscillatoria angustissima 4.22a Phormidium laminosum

97.5c Spirulina, sp. 0.19a
Synechococcus sp. PCC 7942 0.18a
Tolypotrix tenuis TISTR 8063 0.18a

Eficiena ecologic i economic a metodei.

Ca urmare a numeroase studii facute pe diverse cianobacterii folosite pentru indepartarea metalelor
grele din solutii apoase, s-au obtinut rezultate foarte promitatoare in ceea ce priveste utilizarea
speciilor testate. Insa acest tip de biomasa este departe de a fi folosita pe scara industriala in tratarea
apelor uzate contaminate cu metale grele din doua motive: (1) costurile de productie ale biomasei,
care sunt inca prea ridicate pentru aplicatii industriale si (2) lipsa cercetarii suficiente in folosirea
cianobacteriilor pentru realizarea unor linii industriale care sa duca la la indepartarea metalelor cu
ajutorul acestora.

73

Interactiiunile dintre cianobacterii si metale sunt foarte complexe, depinzand de un numar mare de
factori legati de caracteristicile chimice si morfologice ale celulelor microbiene, pana la
proprietatile fizice si chimice ale metalelor care urmeaza a fi indepartate.
Rezultatele promitatoare obtinute pana acum, cresterea pretului chimicalelor, posibilitatea de a
utiliza cianobacterii care se dezvolta in mod natural (fara costuri de productie) si cresterea
interesului public pentru folosirea unor biotehnologii verzi pentru rezolvarea problemei poluarii
apelor deschid noi perspective in folosirea cianobacteriilor pentru indepartarea metalelor grele din
ape uzate.

Bioremedierea prin zone de inundare artificiale sau zone umede construite

pentru tratarea apelor uzate sau a eluatelor din soluri contaminate cu metale
grele.
Apele poluate cu metale grele pot fi eficient tratate utiliznd iazuri de decantare artificiale sau
sisteme de zone umede. ndeprtarea metalelor n aceste sisteme includ urmtoarele mecanisme:
filtrarea i sedimentarea particulelor n suspensie, adsorbia, ncorporarea n materialul vegetal,
precipitarea prin procese biogeochimice mediate de microorganisme.
S-au investigat beneficiile proceselor anaerobe de reducere a sulfailor, reducere a cromului
etc.), pentru fixarea i precipitarea metalelor grele i a unor metaloizi (As).

S-a demonstrat importana biotehnologiile wetland folosite pentru fixarea/recuperarea metalelor

grele din apele de min, din soluiile rezultate din depozitele de de euri, i din efluenii
industriali. Cercetrile noi duc la dep irea greutilor anterioare ntmpinate la aplicarea pe
scar larg a sistemelor wetland care limitau activitatea bacteriilor sulfat reducatoare si a altor
bacterii prin: - concentraia ridicat a oxigenului si prin potenialul redox ridicat, - prin
aciditatea efluenilor, pH sczut, - prin limitarea substratelor organice (Kuschk i colab., 2005).
Utiliznd un habitat ingineresc i o biocenoz construit ca instalaii sau zone de inundare artificiale
(zone umede construite - constructed wetlands) se poate realiza decontaminarea prin bioremediere a
apelor subterane poluate, a apelor uzate i a eluatelor din soluri contaminate. Metoda poate fi o
alternativ promitoare i economic fat de tehnologiile de pompare i tratare sau fa de
barierele reactive. Astfel implementarea unui habitat ingineresc de zone umede constriuite exploatnd
principiile degradrii biologice sunt aplicabile i in situ, la scar larg sau medie (n instalaii
wetlands mobile) sau n scopul reducerii nivelului de poluare ) (Kuschk i colab., 2005).

Indeprtarea metalelor grele prin bioreactoare i zone umede construite a constituit

obiectivul cercetrilor finanate de NATO Collaborative Linkage Grant No. EST.CLG.978918
(2003-2004), cu partneri: - UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle (Leipzig,
Germany), Department of Bioremediation and Centre for Environmental Biotechnology (UBZ) at
the UFZ; - Wageningen University (Wageningen, The Netherlands); - Institute of Biochemistry
and Physiology of Microorganisms of RAS (Pushchino, Russia), - Institute for Biology of Inland
Waters of RAS (Borok, Russia), (dupa Kuschk i colab., 2005).

Uniti de plante i ape uzate, contaminate cu crom.

74

Uniti mobile de inundare cu filtru orizontal Uniti cu filtru orizontal n meso-scale experiment wetland pentru
bioremediere (dupa Kuschk i colab., 2005).

Cercetrile proiectului au fost concentrate asupra proceselor biologice capabile de ndeprtarea

metalelor, n special a cromului, din apele uzate. Principalele rezultate obinute (dupa Kuschk i
colab., 2005), au cuprins:
Cercetri asupra gamei largi de procese fizice, chimice i biologice care contribuie la detoxificarea
de metale n zone umede construite i n filtre de sol plantate care asigur un sistem heterogen de
gradieni coninui n ambele zone, aerobe sau anaerobe.
n laborator, la scri diferite, s-au cercetat sisteme de zone umede (pe suprafee orizontale i n
sisteme cu fluxuri subterane, sau n iaz cu covor de plante plutitoare; toate sistemele, plantate cu
Juncus effusus- rogoz, pipirig), au fost testate pentru rata lor de ndeprtare a cromului. Cele mai
bune rezultate s-au obinut n sisteme cu fluxuri subterane. Se consider c acest rezultat poate fi
atribuit numai bacteriilor anaerobe stabilite n sistem, Juncus effusus avnd o capacitate sczut de
adsorbie pe pietri i o rata sczut de ndeprtare pentru crom, n sistem hidroponic.
Au fost mbogite culturile mixte de bacterii reductoare pentru crom, constnd din diferite specii de
bacterii anaerobe i facultativ anaerobe. n consoriu au avut loc o succesiune de procese reducere
bacterian i, dup ce cromul a fost precipitat, n sistem s-a acumulat numai sulfura.

O bacterie reductoare pentru crom a fost izolat i caracterizat. Prezena nitratului a ridicat
specific rata de reducere a Cr(VI) i numrul de celule.
Furnizarea de substrate organice promoveaz dezvoltarea condiiilor anoxice i activitatea
bacteriilor metal reductoare i sultat reductoare n consoriul de bacterii i n zonele umede
construite.
Experienele au testat efectul diferiilor contaminani (compu i organici i metale grele) asupra
plantelor in condiii de ser. S-au cultivat diferite specii de plante de ap emergente (helofite),
pstrate n ser pe timpul iernii. Principalele specii cultivate : Acorus calamus (obligean),
Glyceria maxima (mana de ap), Iris pseudacorus (stnjenelul galben), Juncus effusus

(rogoz,pipirig), Phragmites australis (stuf, trestie), Typha latifolia (papura cu frunza lat), Typha
angustifolia (papura cu frunza ngust)

Acorus calamus (obligean) Glyceria maxima (mana de ap)

75

Iris pseudacorus (stnjenelul galben)

Juncus effusus (rogoz, pipirig)

Phragmites australis (stuf) Typha latifolia (papura) Typha angustifolia (papura)

Instalaia experienelor cu plante emergente de ap Sera i containerele de cultivare a Helophytelor (dupa Kuschk i
colab., 2005).

Bibliografie :
Doris Bohme, Susanne Hufe, 2003. Research for the Environment. 4th Edition (ISSN 0948-6925), 134 pages. EDS.:
Doris Bohme, Susanne Hufe, iunie 2003. Published by UFZ Centre for Environmental Research Leipzig-Halle,
http://www.ufz.de/index.php?en=2293
CRISTEA V., HODISAN I., POP I., EMILIA BECHIS, GROZA G., GALAN P., 1990. Reconstrucia ecologic a
haldelor de steril minier. I. Dezvoltarea vegetaiei spontane. n Contribuii botanice, Univ. din Cluj-Napoca,
Grdina botanic: 33-38.
Cunningham, S.D. and Berti, W.R., 1993. Remediation of contaminated soils with green plants: An overview. In
Vitro Cell. Dev. Biol. (Tissue Culture Association), 29, 207212.
Ensley, B.D., 1995. Will plants have a role in bioremediation? In: Fourteenth Annual Symposium 1995 in Current
Topics in Plant Biochemistry, Physiology and Molecular Biology, 1995.
Roberto De Philippis i Ernesto Micheletti, 2009. Heavy Metal Removal with Exopolysaccharide-Producing
Cyanobacteria. In Heavy Metals in the Environment (2009), eds.: Lawrence K. Wang, J. Paul Chen, Nazih K.
Shammas, Yung-Tse Hung. CRC Press. Taylor & Francis Group. pp 89-123.
Peter Kuschk, Arndt Wiener, Roland Mller, Matthias Kstner, 2005. Constructed Wetlands Treating Wastewater
with Cenoses of Plants and Microorganisms. Web page: www.phyto.ufz.de A Research Association at UFZ Centre
for Environmental Research Leipzig-Halle. In the Helmholtz Association. Published by UFZ Centre for
Environmental Research Leipzig-Halle. Printed by System Print Medien GmbH Dezember 2005

KISS T., DRAGAN-BULARDA M., DANIELA PACA, 1993. Enzimologia mediului nconjurtor. Enzimologia
solurilor tehnogene.Vol. II. Ed. CERES, Bucure ti.
Kumar, P.B.A.,1995. Phytoextraction: The use of plants to remove metals from soils. Environmen. Sci. Technol., 29,
12321238.
MALSCHI Dana, 2009. Biotehnologii si depoluarea sistemelor ecologice. (Tehnologii de depoluare biologica,
Tehnologii de bioremediere. Reconstructia ecologica). Note de curs si aplicatii practice. Manual in format
electronic Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai Cluj-Napoca. Editura Bioflux, Cluj-Napoca.
2009, P. 200. 978-606-92028-5-2. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Note de curs si aplicatii practice.
Manual in format electronic. Facultatea de Stiinta Mediului, Universitatea Babes-Bolyai. Editura Bioflux, ClujNapoca, 2009, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ 634 pg., plan e color, ISBN 978-606-92028-4-5.
http://www.editura.bioflux.com.ro/docs/malschi2.pdf/
Muntean, V., 1995-1996, Bacterial indicator of mud quality, Contrib. Bot., 73-76.
Muntean, V., Cri an, R., Pa ca, D., Kiss, S., Drgan-Bularda, M., 1996, Enzymological classification of salt lakes in
Romania, Int. J. Salt Lake Res., 5 (1), 35-44.

76

Muntean, V., Pa ca, D., Cri an, R., Kiss, S., 2001, Potenialul enzimatic n sterilul de la o min de zinc i plumb supus
recultivrii biologice, Lucrrile celei de a XVI-a Conferine Naionale pentru tiina Solului, Publicaiile
Societii Naionale Romne pentru tiina Solului, 30B, 65-73.
Muntean, V., Nicoar, A., Groza, G., 2005, Microbiological research on iron mine spoils submitted to bioremediation,
Contrib. Bot., 40, 259-266.
Muntean, V., Groza, G., 2006, Bacterial potential of the experimental plots installed on the iron mine spoils in Iara,
Contrib. Bot., 41 (2), 101-107.
Muntean, V., 2007, Bacterial and enzymatic indicators of water and sediment pollution in the Arie river, Stud. Univ.
Babe -Bolyai, Biol., 52 (1), 87-92.
Muntean, V., Groza, G., 2007, Bacterial and enzymatic potential of the experimental plots installed on the iron mine
spoils in Iara, Stud. Univ. Babe -Bolyai, Biol., 52 (2), 101-108.
OROS, V., 1996, Aspecte ecotoxicologice ale polurii apelor cu metale grele. n vol.: Cercetri noi in mineritul i
metalurgia neferoas". Lucrrile sesiunii tiintifice 35 ani de nvmnt Superior in Baia Mare 17-19 oct. Vol. III,
"Ingineria Mediului", 133 - 139.
OROS V., 2000. Recultivarea biologic a terenurilor degradate datoril activitii miniere de suprafa i
depozitrii de eurilor. n DENU I. (eds.), Reabilitarea ecologic i managementul siturilor degradate de industria
minier. Ed. Univ.de Nord, Baia-Mare, 2000.
OROS V., 2002. Biomonitoring. In Poluarea si monitorizarea mediului, Ed..Univ.Transilvania, Brasov. p.60-73. OROS
VASILE, 2002. Reabilitare ecologic a siturilor degradate industrial. Ed. Univ. Transilvania Bra ov. Cap.IV.
Recultivarea biologica a terenurilor degradate p.134-153
RAMADE, F., 1987, Precis d'Ecotoxicologie. Ecologie Fondamentale. Mc Grow Hill. Ramade, F., 1992,Precis
d'Ecotoxicologie. Maisson, Paris.__
Raskin, I., 1994. Bioconcentration of metals by plants. Environ. Biotechnol., 5, 285290.
Salt, D.E.1995. Phytoremediation A novel strategy for the removal of toxic metals from the environment using plants.

Biotechnology, 13, 468474.

Nazih K. Shammas, 2009. Management and Removal of Heavy Metals from Contaminated Soil. In Heavy Metals in
the Environment (2009), eds.: Lawrence K. Wang, J. Paul Chen, Nazih K. Shammas, Yung-Tse Hung. CRC Press.
Taylor & Francis Group. Boca Raton London New York. Pp.381-430
http://www.resolmet.utcluj.ro. Raport RESOLMET, contract 32161 / 2008)
http://www.dsmz.de/strains/degradtn.htm. DSMZ - Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,
Braunschweig, Germany. DSMZ - Degradation (including Fermentation, Oxidation, Utilization)

77