IMP SPITALUL REPUBLICAN ACSR

REFERAT

Tema: LICHIDUL CEFALORAHIDIAN

Efectuat: Cebotari Cristina, felcer laborant

Coordonat: Badan Olesea, medic laborant

CHIINU 2014

I. EXAMENUL DE LABORATOR AL LICHIDULUI CEFALORAHIDIAN

1.1. Generaliti
Lichidul cefalorahidian se afl n permanent circulaie n ventriculii cerebrali i tunicile
meningiale. Condiionat spaiul lichidian este divizat n intern i extern. Spaiul lichidian intern
este compus din ventriculii creerului: dou ventricule cerebrale laterale, ventricolul al III-lea i
ventricolul al IV-lea al creerului. Toi ventricolii creierului snt unii prin guri interventriculare.
Encefalul i mduva spinrii snt acoperii de 3 membrane: dura mater, arahnoida i pia mater.
Spaiul extern prin care are loc circulaia lichidului cefalorahidian este situat ntre tunica
arahnoidea i pia mater i poart numirea de spaiul subarahnoidian. ntre spaiul lichidian extern
i intern exist o comunicare permanent.
Lichidul cefalorahidian se formeaz din plasma sangvin prin procesele de ultrafiltraie i
secreie n plexul vascular al ventriculilor i se reabsoarbe napoi n patul vascular prin
vilozitile arahnoidiene. n principiu L.C.R. prezint un ultrafiltrat din plasm, care conine o
cantitate foarte mic de proteine. La fel are loc secreia activ din snge n lichid a unor
substane, n special cloridele.
Lichidul cefalorahidian circul foarte ncet, din ce cauz contacteaz un timp ndelungat
cu celulele creierului. Celulele creierului permanent asimil glucoza din LCR din ce cauz
concentraia glucozei este mult mai mic comparativ cu sngele. L.C.R. se formeaz permanent
n cantitate de 0,2-0,8 ml/min.La maturi n spaiul subarahnoidean se conine 100- 150ml lichid,
la copii 80-90 ml. Toat cantitatea de lichid se schimb din nou aproximativ de 1-6 ori n 24 ore.
Examenul de laborator al lichidului cefalorahidian reprezint o metod ce furnizeaz date
eseniale n diagnosticul meningitelor bacteriene, virale, encefalite, hemoragii intracraniene,
subarahnoidale, unor patologii ale creierului ca scleroza multipl, boli generative, afeciuni

autoimune, neurosifilis. Acest examen se efectueaz ntotdeauna cnd este prezent un sindrom
meningian.
Extragerea lichidului cefalorahidian pentru examenul de laborator se efectueaz prin
puncie lombar, pe nemncate. Tehnica punciei va fi efectuat numai de medici cu experien
n domeniul respectiv. Tehnica de punctare i recoltare trebuie s fie strict aseptic. Puncia
poate fi efectuat n poziia culcat" sau aezat" ntre vertebrele L 3 - L4 sau L4 - L5. Locul de
punctare i poziiile pentru puncia lombar le apreciaz medicul clinician. ntruct examenul
L.C.R. necesit un complex de analize, recoltarea eantioanelor pentru diferite examinri
(citologice, bacteriologice, biochimice .a.) se efectueaz n mai multe eprubete sterile, fiecare
eprubet trebuie s conin aproximativ cte 4-5 ml LCR, mai frecvent 3 eprubete, una pentru
examinri clinice i citoz, una pentru examenul bacteriologic i una pentru examenul
biochimic.
n momentul punciei acul poate strpunge un vas sangvin i lichidul poate fi sangvin. Se
recomand recoltarea separat a lichidului colorat cu adaos de snge i necolorat.
De menionat c la examenul LCR mult mai informative snt datele aprecierii vizuale
(presiunea, aspectul, transparena, culoarea), apoi examenului citologic i bacteriologic i n cele
din urm - biochimic.
Fr a provoca unele consecine neplcute pentru pacient se poate extrage 10-20 ml
lichid cefalorahidian. Dac imediat dup ntrarea acului n spaiul subarahnoidian, LCR este uor
sanghinolent, primele picturi vor fi nlturate dup care lichidul se clarific.
n cazurile cnd este suspiciune de o meningit tuberculoas se recolteaz o prob separat
ntr-o eprubet steril pentru vlul, proba nu trebuie agitat, se pstreaz n poziia vertical, se
introduce n termostat la 37C pentru 24 ore
pentru formarea la suprafaa lichidului a unei pelicule (un fel de pung) din fibrin
(caracteristic pentru meningita tuberculoas), n care, uneori, pot fi depistate BK, i alte
bacterii.
Deoarece LCR posed o activitate citolitic, pentru examenul morfologic ea trebuie
expediat n laborator imediat dup extragere.
Examenul de laborator al LCR include un complex de probe i anume: presiune;
examenul macroscopic (aspect, transparen, culoare); examenul microscopic: numrtoarea
elementelor celulare/mm3; examenul sedimentului celulare (formula leucocitar, celulele
tumorale); examenul bacteriologic (BK, coci, virusuri); examenul biochimic (proteine,
electroforeza proteinelor, glucoza, cloruri, enzime, hormoni); examenul serologic pentru sifilis.
De menionat c nu toate testele enumerate se efectueaz la fiecare pacient. Setul
testelor este indicat de mediul specialist.

1.2.Examenul fizic
Presiune (tensiune) - presiunea LCR este mult mai mic comparativ cu presiunea
arterial i se msoar n mm.^ ap (H20). Pentru msurarea tensiunii exist manometru
special (Claude), care se cupleaz la acul de puncie. Recoltarea probelor se efectueaz dup
aprecierea presiunii de scurgere. Tensiunea normal este de 12-15mm.ap.
La o presiune normal LCR se elimin prin acul de puncie cu o vitez de 60 picturi
pe minut, la mrirea presiunii lichidul se elimin ca o uvi. De rutin tensiunea este
determinat la nceputul i la sfritul punciei. Valori crescute se determin la hipertensiune
intracranian (obstrucie de mduv spinal, tumori, abcese, meningite, hidrocefalie).
Densitate - se determin cu picnometrul. Valori normale - 1002 - 1008. Valori crescute se
observ n meningite i encefalite, valori sczute se observ n hidroce falie.
Transparena n mod normal LCR este transparent, clar ca apa de stnc". Clar poate
fi n meningitele seroase, virale; opalescent n meningitele virale i tulbure purulent n
meningitele bacteriene purulente. In meningita tuberculoas este mai frecvent clar, la fel i la
nceputul celor bacteriene.
Culoare - n condiii fiziologice LCR este incolor. Culoarea poate fi apreciat la
comparaia cu ap distilat n eprubete incolore de diametru egal.
Culoare roie (lichid hemoragie, eritrocromie), aspect roietic sugereaz prezena
sngelui. Amestecul de snge poate fi cauzat sau de o hemoragie subarahnoidean, sau de
penetrarea unui vas sangvin n momentul punciei. In aceste cazuri trebuie eliminat posibilitatea
unui incident de puncie. n cadrul unui incident de puncie intensitatea culorii treptat se va
micora de la prima pn la a treiea eprubet, i invers, n hemoragii subarahnoidiene lichidul va
fi de culoare roie uniform n toate eprubetele.
Prezena eritrocitelor n lichid poate fi apreciat macroscopic (vizual) prin aspectul
roietic, n acele cazuri cnd numrul lor depete 500 ntr-un mkl. O cantitate mai mic de
eritrocite poate fi determinat doar la examenul microscopic.
n unele cazuri pentru diferenierea sngelui proaspt din LCR de cel mai vechi se
recurge la centrifugale. Dac sngele din lichid este proaspt (un incident de puncie, cu
penetrarea unui vas sangvin, hemoragii meningiene recente) centrifugatul este incolor, iar dac
sngele exist n lichid de mai mult vreme (cteva ore) centrifugatul este de culoare roz, uor
glbuie sau chiar xantocromic (colorat n galben pn la maro). Lichidul cu un coninut
considerabil de snge poart numirea de lichid hemoragie, iar cu o cantitate redus sangvinolent.

n toate cazurile cnd n LCR se stabilete prezena sngelui (lichid hemoragie) apare
problema necesitii examenului de laborator al acestui lichid. De notat, c rezultatele
examenului de laborator al lichidului hemoragie nu reflect corect valorile indicilor studiai i
trebuie interpretate atent.
"t)e obicei lichidul hemoragie poate fi ntlnit n: hemoragie cerebral, hemoragie
meningian (subarahnoidean), traumatismelor SNS .a.
n dinamic (independent de etiologic i gradul hemoragiei) eritrocitele treptat sunt
scoase din lichid: peste dou zile 25-50%, peste 3-4 zile 52-97% din cantitatea eritrocitelor
stabilit n prima zi. La pacienii cu traumatism cranio-cerebral eritrocitele dispar din LCR la 510-a zi.
Exist dou mecanisme de ndeprtare a eritrocitelor din LCR:
I

- eritrocitele nemodificate morfologic din spaiul subarahnoidean trec n spaiul subdural i apoi
n vasele sanguine;

II - fagocitarea eritrocitelor de ctre celulele arahnoendoteliului tunicilor meningiale. n rezultatul

hemolizei eritrocitelor hemoglobina sub influena enzimelor se transform n bilirubin.
Bilirubina ptrunde n spaiul subarahnoidian oferind lichidului culoarea galben. n aa mod
apare xantocromia LCR.
'Xantocromia - prezint un sindrom lichidian care se caracterizeaz prin colorarea LCR
n galben sau galben-maro, i este cauzat de apariia produselor degradrii hemoglobinei bilirubinei. Xantocromia poate fi de natur hemoragic sau de staz. Xantocromia hemoragic
poate aprea n primele cteva ore dup hemoragie, uneori peste 1,2,3 zile i nu prezint un
semn de hemoragie veche (nvechit). Nivelul xantocromiei crete treptat i dispare peste 10-14
zile i nu este asociat de majorarea pronunat a valorilor proteinelor.
Xantocromia de staz - apare ca rezultat al reducerii vitezei torentului sangvin n vasele
creierului, ce cauzeaz ptrunderea plasmei colorate n galben prin pereii vasculari cu
permeabilitatea crescut n lichid. Xantocromia de staz este mai stabil i asociat de majorarea
pronunat a valorii proteinelor din LCR.
Culoarea verde a LCR apare n rezultatul oxidrii bilirubinei n biliverdin sub influena
enzimelor din leucocite (puroi). De obicei hohidul verde i tulbure-purulent se ntlnete n
meningitele purulente.
1.3. Examenul microscopic
(elementele celulare)
^Examenul citologic are scopul de a determina citoza - evaluarea cantitativ a numrului
de elemente n lichidul necentrifugat (la mm3) dup numrtoarea fcut n camera Fuchs-

Rozenthal sau Goreaev. Importana clinic are n primul rnd evaluarea numrului de leucocite i
diferenierea lor n preparate colorate.
1.3.1. Numrtoarea leucocitelor
Principiu se determin cu ajutorul microscopului i a camerei de numrat a numrului
de leucocite n LCR necentrifugat dup distrugerea eritrocitelor.

Reactivi: Sol.acid acetic 10%, colorat cu albastru de metilen (reactivul Samson): acid
acetic glacial 5 ml, ap pn la 50 ml, albastru de metilen 0,1 ml.
Utilaj".
1. Microscop
2. Camera Fuchs-Rozenthal
3. Agitator pentru numrtoarea leucocitelor.
Not:
1. Deoarece LCR posed mari capaciti citolitice numrtoarea leucocitelor cere o execuie
rapid, n primele 30 min. dup puncie.
2. Celulele din LCR foarte repede se lipesc de pereii eprubetei, din aceste considerente lichidul
nainte de examinare trebuie agitat bine.
Tehnica de lucru
1. ntr-un agitator pentru numrtoarea leucocitelor se ea pn la diviziunea 11" LCR.
2. Se poate introduce ntr-o eprubet cu o pipet o pictur de reactiv Samson i 10 picturi
lichid. Reactivul Samson hemolizeaz eritrocitele i coloreaz n albastru leucocitele. Pentru
colorarea mai pronunat a celulelor soluia se agit i se las pe timp de 10-15 min. Dup
agitare se umple camera Fuchs-Rozenthal, ns n prealabil se d drumul la prima pictur
(nainte de a umple camera ea trebuie pregtit pentru a obine volumul i nlimea ei).
Camera este compus din 16 ptrate mari, fiecare din ele coninnd cte 16 ptrele mici - n
total 16x16 = 256 ptrele mici. Adncimea camerei este de 0,2 mm, volumul total - 3,2 mkl
(mm3). Se numr leucocitele n toate cele 256 ptrele i suma leucocitelor numrate se
mparte la 3,2 (volumul camerei). Astfel aflm/ numrul de leucocite ntr-un mkl (mm 3) de
lichid, deoarece' lichidul nu a fost dizolvat. Practic cifra de leucocite gsite n 256 ptrele
mici se mparte la 3. n cazurile cnd LCR nainte de umplerea camerei se dizolv cifra primit
se ntlnete cu gradul diluiei.

De notat c celulele LCR pot fi numrate n orice camer de numrare a elementelor

sangvine. Pentru a transforma rezultatele n uniti SI (numrul de celule ntr-un volum LCR
cifra gsit pentru 1 mm3 se nmulete cu 106.
Posibile erori pot aprea la pstrarea ndelungat a LCR.
Valori normale pentru lichidul recoltat prin puncia lombar.
nou-nscui - 0 - 30 celule/mkl;
1-5 ani - 0-20 celule/mkl;
6-18 ani - 0-10 celule/mkl;
aduli - 0-5 celule/mkl.
Interpretarea rezultatelor. Majorarea numrului de leucocite n lichid poart numirea de
pleocitoz. Pleocitoza prezint un simptom important al proceselor inflamatorii al tunicilor
meningiale, n special al meningitelor bacteriane sau a afeciunilor organice ale sistemului
nervos central (encefalite, abscese cerebrale .a.).
Pot fi separate cteva grade de pleocitoz:
5 - 50 x 106/1

1. Uoar

2. Moderata 51 -200xl06/l
200 - 700 x 106/l

3. Major

4. Extrem de major - mai mult de 1000 x 106/1.

Pleocitoza pronunat este caracteristic pentru meningitele purulente, pleocitoza uoar
i moderat pentru meningitele virale, tuberculoase. n cantiti mici leucocitele pot fi depistate
n meningitele seroase, neurosifilis, tumori, encefalite.
1.3.2. Numrtoarea eritrocitelor n camera de numrat
Principiu se bazeaz pe numrtoarea direct, la microscop, n camera de numrtoare
pentru eritrocite. Numrtoarea se efectueaz n orice camer (Burker, Goreaev, FuchsRozenthal, Toma, Neibauer .a.) care au diverse volume i ptrate de numrat. n Republica
Moldova este preferat camera Goreaev, i se procedeaz la fel ca i numrtoarea elementelor
sngelui.
Valori normale eritrocite absente. Prezena eritrocitelor sugereaz hemoragia
subarahnoidian sau penetrarea unui vas sanguin. Pentru diagnosticarea hemoragiilor
intracraniene are importana nu numai prezena eritrocitelor n LCR ci i creterea numrului lor
n punciile repetate.

1.3.3. Diferenierea elementelor celulare n camera de numrat

Aceast metod este preferat mai frecvent n activitatea cotidian. n camera de numrat
(ocular x 10 sau x 15, obiectivul x 40) pot fi difereniate aproape toate elementele celulare.
Reactivul Samson coloreaz nucleele ntr-o nuan roz-fiolet, citoplasma rmnnd incolor.
Se examineaz talia celulelor, forma i poziia nucleelor, corelaia nucleo- citoplasmatic,
inglobri n citoplasm .a.
1.3.4. Diferenierea n preparatele colorate
Deoarece n LCR coninutul n celule este foarte mic, n prealabil este necesar de a
mbogi lichidul prin centrifugare. Sunt utilizate cteva metode de colorare a frotiilor pentru
diferenierea celulelor.
Coloraia Rozina. Lichidul se centrifugheaz 7-10 minute. Supernatantul se nltur,
sedimentul se aplic pe o lam degrasat, apoi cltinnd uor se distribuie uniform pe suprafaa
lamei i peste 1-2 min partea lichid se vars. Tehnica preparrii frotiului din sedimentul rmas
pe lam depinde de gradul pleocitozei (numrul de leucocite ntr-un mkl). n cazul unui
pleocitoz nepronunat (10-15 leucocite (mkl)), sedimentul se repartizeaz pe o poriune de 1
cm2; la o pleocitoz mai mare de 30 leucocite/mkl - pe o poriune 1,5 - 2,0 cm 3; la o pleocitoz
de 150 leucocite/mkl - pe o poriune de 2-3 cm 2. Cnd numrul de leucocite este foarte mare i
n sediment are loc prezena eritrocitelor, sedimentul se repartizeaz pe toat suprafaa lamei i
imediat se vars. Lama se aeaz n poziia vertical. In aa mod se obine grosimea minimal a
fro iului. Frotiurile se usuc ntr-un dulap de uscat la 40 - 50C. Frotiurile uscate se fixeaz cu
alcool metilic 1-2 min i se coloreaz dup metoda Romanovschii: preparatele mai subiri cu
citoz mic - 6-7 min., cele cu citoz mare i prezena sngelui - 10-12 min. Apoi colorantul se
vars, frotiul se spal cu ap distilat i se usuc. Dac nucleele celulelor au o culoare albastrdeschis frotiile se recoloreaz nc 2-3 min.
Coloraia Voznaia. Sedimentul se aplic pe lam, se clatin uor astfel ca lichidul s fie
repartizat uniform pe suprafa. Frotiul se usuc la temperatura camerei timp de 24 ore, se
fixeaz cu alcool metilic 5 min., se acoper cu colorantul ce conine azur-eozin (la fel ca i
pentru vopsirea frotiurilor sangvine, ins diluat de 5 ori). Se las pentru colorare timp de 1 or.
Dac celulele sunt palide frotiul se recoloreaz cu vopsea nediluat sub controlul microscopului
2- 10 min. Timpul coloraiei adugtoare este direct proporional numrului de celule din lichid.
Coloraia Alexeev. Pe frotiul uscat, ns nefixat se aplic 6-10 picturi colorant
Romanovschii. Cu aceiai pipet foarte atent colorantul se repartizeaz pe toat suprafaa
preparatului i se las timp de 30 sec., dup ce se mai adaug (far a vrsa colorantul) nc 12-20

picturi de ap, preventiv nclzit pn la 50-60C. Raportul dintre picturile de colorant i cele
de ap trebuie s fie 1:2. Preparatul se clatin uor astfel ca vopseaua s se amestece cu apa i se
las pentru 3 min. Apoi colorantul se spal cu ap distilat, se usuc cu hrtie de filtru i se
examineaz la microscop. Aceast metod poate fi utilizat pentru examenul citologic de
urgen.
1.3.5. Morfologia elementelor celulare
Limfocitele - diametrul 5-8 mkm, nucleul rotund, compact, citoplasma bazofil (slab),
subire, uneori se observ numai ntr-o singur parte a celulei. Valori normale 1-2 limfocite la
1 mkl. Pleocitoza limfoid (majorarea pronunat a numrului de limfocite) poate avea loc n
inflamaiile cronice ale tunicilor meningiale (meningite tuberculoase, virale) nepronunat - n
tumorile S.N.S., primele zile dup operaii pe creier.
Neutrofilele - morfologic celulele sunt asemntoare cu neutrofilele sngelui circulant.
Prezena neutrofdelor (n diverse cantiti) indic meningita bacterian sau abcesele cerebrale.
Prezena neutrofdelor morfologic nemodificate este caracteristic pentru inflamaiile acute,
prezena celulelor morfologic modificate indic micorarea intensitii procesului inflamator.
Eozinofilele - pot fi difereniate conform granulaiilor citoplasmatice granule mari
de culoare roie-crmizie, uniforme, strlucite. Por aprea n LCR n procese patologice de
natur parazitar, meningite toxice, reactive, tuberculoase, sifilitice.
Monocite tisulare - celule cu diametrul 7-10 mkm. Pot fi ntlnite n lichidul normal sub
form de exemplare unice. Prezena n cantiti mari este caracteristic pentru procese/
inflamatoare cronice, dup operaie pe suturile SNC.
Macrofagi - diametrul 7-17 mkm, uneori 20-30 mkm, nucleul de diferite forme, situat
la periferia celulei, citoplasma conine nglobri i vacuole. Pot fi prezente n procese
inflamatorii, n perioada postoperatorie pe esuturile SNS, n aceste cazuri avnd un semn
prognostic pozitiv.
Celulele plasmatice. Celule mai mari dect limfocitele, nucleul voluminos, situat
excentric, citoplasma abundent.
Sunt prezente n LCR n cadrul proceselor inflamatoare cronice a creierului i meningelor, .a.
Celulele tumorale i complexele lor pot fi depistate n preparatele colorate i camera de
numrat. Morfologic pot fi identificate de ctre citologii cu experien n domeniu, indic
neoplasme cerebrale.
1.4. Examenul chimic

Deosebirea esenial a particularitilor chimice dintre LCR i plasma sangvia const n

concentraia foarte mic a proteinelor n lichid (aproximativ de 200 ori), considerabil mai mic a
colesterolului, glucozei i mai mare a clorului.
Din aceste considerente determinarea concentraiei diferitor substane n LCR trebuie
asociat i comparat cu concentraia acelorai substane n plasm. Uneori modificrile unor
substane din lichid nu reflect modificrile ce au loc n SNC ci a compoziiei sngelui circulant.
Metodele de determinare a proteinelor pot fi subdivizate n cantitative i calitative.
Probele calitative aii un caracter de orientare i au la baza lor principiul de sedimentare a
globulinelor: reacia Pandy; reacia Honne Apelt; reacia Lange; reacia Fridman.
In principiu rezultatele dozrii proteinelor totale n LCR prezint un test puin informativ
pentru diagnosticarea bolilor sistemului nervos central. O informaie mai ampl poate fi obinut
prin electroforeza proteinelor. n cadrul proceselor inflamatorii ale SNC n LCR crete coninutul
fraciilor globulinice gama, alfa-1, alfa-2 i scade coninutul albuminelor.
De notat c o concentraie n limitele normale a proteinelor n LCR nc nu mrturisete
lipsa afeciunilor organice a SNC.
1.4.1. Determinarea proteinelor prin metoda cu acid sulfosalicilic i sulfat de sodiu
Principiu. Intensitatea tulburrii soluiei provocat de coagularea proteinelor cu acid
sulfosalicilic este direct proporional cu concentraia lor.
Reactivi:
1. Soluie de acid sulfosalicilic 6%;
2. Soluie de sulfat de sodiu 14%;
3. Soluie de lucru - pentru analize poate fi utilizat soluia proaspt din amestecul n volume
egale a soluiilor enumerate;
4. Soluie standard de albumin (din ser uman sau de bovine) 1% : lg albumin liofdizat se dizolv
ntr-o mic cantitate de soluie 0,9% clorur de sodiu ntr-un balon cotat cu capacitatea 100 ml,
apoi se adaug soluie de clorur de sodiu pn la nivelul 100. Reactivul este nestabil. Pentru
stabilizare se adaug l ml soluie de azid de sodiu (NaN 3). Dup aceast soluie poate fi utilizat
(fiind pstrat n frigider) timp de 2 luni. 1 ml de soluie conine 10 mg albumin.
Utilai: Fotocolorimetru
Tehnica de lucru. Intr-o eprubet se toarn 5 ml soluie de lucru proaspt pregtit i 0,5
ml LCR, se amestec. Peste 10 min se citete absorbia probei fa de martor la 410-480 nm n
cuv de 1 cm (filtru albastru-violet). Proba martor conine doar soluie de clorur de sodiu 0,9%
- 5,0 ml.

Calcularea rezultatelor se efectueaz dup curba etalon.

Construirea curbei etalon: din soluia standard de albumin (la 1 ml sol.0,9% NaCl - 10
mg albumin) se prepar o serie de soluii standard de lucru cu diferit grad de diluie, care se
prelucreaz la fel ca i proba de analizat. n 5 eprubete n fiecare din ele consecutiv se toarn
0,05;0,1; 0,2; 0,5 i 1,0 ml soluie de albumin i se adaug pn la 10 ml soluie de clorur de
sodiu de 0,9%. Concentraia proteinei n aceste soluii va fi corespunztor 0,05; 0,1; 0,2; 0,5; 1,0
g/l.
Not: 1. Dac nainte de fotocolorimetrie compuii ncep s se sedimenteze proba trebuie
bine agitat;
2. Dependena liniar a rezultatelor se pstreaz pn la concentraia de albumin
1 g4, n cazul concentraiilor mai ridicate LCR trebuie diluat.
Valori normale: la puncia lombar 0,1-0,22 g4.
importana clinic. Concentraia proteinelor n LCR obinut prin puncia lombar crete n
procesele inflamatorii (meningite, encefalite, mielite), afeciuni organice ale SNC, tumori.
Majorarea coninutului proteinelor lichidului cefalorahidian n afeciunile sistemului
nervos se poate realiza pe dou ci:
1. Creterea

permeabilitii vaselor sangvine i a membranelor (tunicilor) meningelale,

care conduce la ptrunderea n lichid a proteinelor cu masa molecular mare;

2. Prezena n LCR a diferitor celule de natur inflamatorie (P-limfocitele) care sintetizeaz
proteine (imunoglobuline).
La fel majorarea proteinelor totale poate fi cauzat de prezena sngelui n lichid (Hb i
proteinele plasmatice), prezena puroiului (proteinele exudatului).
n ambele cazuri (prezena sngelui sau a puroiului) poate fi determinat vizual i
determinarea proteinelor este iraional, i nu ofer informaie diagnostic adugtoare.
O informaie diagnostic mai util poate fi obinut prin dozarea proteinelor totale n
LCR n cadrul inflamaiilor nepurulente ale esuturilor SNC sau n obstrucia canalului mduvei
spinrii de ctre o tumoare i staza lichidian.
O informaie mai ampl i util pentru diagnosticarea bolilor cerebrale poate oferi
electroforeza proteinelor.
Majorarea imunoglobulinelor, izolate prin electroforeza proteinelor permite diagnosticarea
sclerozei multiple, neurosifUisului sau alte boli neurologice degenerative imunogene. Blimfocitele prezente n canalul spinal central n unele afeciuni de natur inflamatore pot
sintetiza imunoglobuline, care la electroforeza proteinelor apar n zona y-globulinelor sub form
de benzi multiple, alctuite din cteva tipuri de inumoglobuline, numite benzi de gamaglobuline

oligoclonale. Snt ntlnite i n unele inflamaii sau boli autoimune ale SNC: scleroza multipl,
neurosifilis, encefalite, lupus eritematos sistemic, sindromul Guillam-Barre.

Proteina reactiv este pozitiv n caz de infecii bacteriene.

Proteinele LCR conin dou fraciuni: albumine i globuline, valorile raportului dintre
globuline i albumine fiind n norm de aproximativ 0,2 - 0,3. Determinarea acestui raport d
unele indicaii utile n diagnosticul neuroinfeciilor.
1.4.2. Metoda unificat de determinare a globulinelor prin precipitare cu
acid carbolic. ReaciaPandy
^Principiu: reacia const n precipitarea globulinelor cu o soluie saturat de acid
carbolic.
Reactivi. Soluie saturat de acid carbolic: 100 g acid carbolic se dizolv n 1 1 ap, se
agit i se pune n termostat la t 37C pentru 6-8 ore, apoi se las la temperatura camerei 7 zile,
dup ce supernatantul se separ i se utilizeaz n calitate de reactiv.
Utilai. Nu este necesar.
Tehnica de lucru. Pe o sticl de ceas, situat pe hrtie neagr se introduce 1 ml reactiv, la
marginea picturii se adaug 1 -2 picturi de lichid cefalorahidian.
-Interpretarea rezultatelor. Dac reacia este pozitiv n locul de contact al reactivului cu
LCR apare o opalescen care apoi se transform n tulburare. Pentru notarea rezultatelor se
folosete sistema cu 4 plusuri: 1. reacia sab. Slab pozitiv +; 2. opalescen + +; 3. tulburare
intensiv + + +; 4. tulburare lptoas, intens pozitiv + + + +.
Not - pentru acurateea rezultatelor LCR nu trebuie sa conin snge.
Interpretarea rezultatelor. Reacia este pozitiv n: meningite, boli infeoioase (tifos,
pneumonie), paraliza progresiv, tumori ale mduvei spinrii.
1.4.3.Determinarea fraciei globulinice (reacia Nonne Appelt)
Principiu: esena reaciei const n sedimentarea globulinelor cu o soluie saturat de
amoniu sulfuric [(NH4)2S04].
Reactivi. Pentru pregtirea reactivului 85 g sulfat de amoniu c.c. se dizolv n 100 ml ap
distilat prin fierbere. Soluia se las la temperatura camerei pentru cteva zile apoi se filtreaz.
Reacia soluiei trebuie s fie neutr (pH 7,0-7,1).
Utilai: nu este necesar.

Tehnica de lucru. Intr-o eprubet se introduce 0,5 ml lichid cefalorahidian se adaug 0,5
ml reactiv i se agit. In alt eprubet se introduce 1 ml ap (proba de control).
Aprecierea rezultatelor. Rezultatele se citesc n decurs de 3 minute dup amestecarea
componenelor, deoarece mai trziu proba se poate opacifia i cu un LCR normal. Comparaia cu
proba de control se va face pe un fon ntunecat. Pentru notarea rezultatelor se utilizeaz sistema
cu 4 plusuri. Reacia prezint diferite grade de intensitate a opacifierii: 1 + slab opalescen; 2 +
soluie net opalescen; 3 + moderat opalescent; 4 + opalescent cu precipitaii (reacia intens
pozitiv).
Interpretarea rezultatelor. Reacia prezint o informaie relativ referitor la coninutul
globulinelor n LCR. Un rezultat slab pozitiv (soluie uor opalescent) poate avea loc i cu
lichidul normal (coninutul de proteine supra 0,2 g4). Reacia este pozitiv n unele meningite,
unde valoarea globulinelor este crescut. n aceste cazuri (reacia pozitiv) se recomand
examenul electroforetic al proteinelor LCR.
1.4.4. Reacia coloidal cu clorur de aur (proba Lang)
Principiu. Esena reaciei const n modificarea dispersiei particulelor coloidale, care
provoac o tulburare intensiv, modificarea culorii cu precipitat.
Reactivi: 1. Clorur de sodiu 4,5 g pe 1 1 ap;
2. Clorur de aur soluie 1% pe ap;
3. Citrat de sodiu (C6H5Na3 . 5H20) soluie 1% pe ap.
Soluie de lucru: ntr-un balon cotat se introduce 95 ml ap bidistilat, se adaug 1 ml.
Soluie de 1% clorur de aur, se nclzete pn la 90-95C dup ce se adaug 5 ml soluie 1%
citrat de sodiu i se fierbe 1 -3 min pn cnd soluia capt o culoare purpurie-roie. Soluia de
lucru poate fi pstrat la ntuneric 2 luni. Pentru diluie se utilizeaz sol.NaCl 0,45%.
Utilaj special - nu este necesar.
Tehnica de lucru. Se prepar diferite grade de diluie a lichidului cefalorahidian n 11
eprubete n modul urmtor: n prima eprubet se introduce 0,9 ml, n celelalte cte 0,5 ml.
Soluie de clorur de sodiu 0,45%. Apoi n prima eprubet se adaug 0,1 ml lichid
cefalorahidian, se amestec bine dup ce 0,5 ml soluie se transfer n eprubet a doua. Aceast
procedur se repet pn la eprubet a unsprezecea. Din eprubeta a unsprezecea 0,5 ml coninut
se ndeprteaz. n aa mod se obine o serie de diluii a LCR. n eprubeta 12 lichid
cefalorahidian nu se adaug (proba de control). n toate eprubetele se adaug cte 2,5 ml soluie
clorur de aur. Eprubetele energic se agit i se las pentru 16-18 ore la temperatura camerei.
Interpretarea rezultatelor. Practic rezultatele se nregistreaz n ziua urmtoare dup
efectuarea probei. Dac lichidul cefalorahidian este normal, soluia din toate 11 eprubete este de

culoare rou-purpurie. n cazuri de patologie culoarea coninutului eprubetelor se schimb i

apare precipitat. Modificrile culorii se noteaz cu cifre: 0 - culoare nemodificat; 1 - culoare
roie-violet; 2 - violet; 3 - rou- albastriu; 4 - albastru; 5 - albastru deschis; 6 - incolor.
Sunt separate trei tipuri variante de modificri ale reaciei coloidale:
I

maximal - cele mai pronunate modificri se observ n eprubetele 1,2 i 3.

II moderat - cele mai pronunate modificri se observ n eprubetele 4,5 i 6

III modificri pronunate se nregistreaz modificrile culorii n diluiile mici ale lichidului (dup
eprubeta 6).
Interpretarea rezultatelor. Tipul I este caracteristic pentru: paralizie progresiv; scleroza
multipl, encefalomielite postinfecioase, tumori.
Tipul II este caracteristic pentru tabes dorsalis, unele meningoencefalite.
Tipul III se nregistreaz la pacienii cu valori pronunat crescute a proteinelor n LCR.
1.4.5. Reacia Fridman
Principiu. Este bazat pe reacia de oxido-reducere a soluiei de permanganat de potasiu
i sedimentarea proteinelor cu acid tricloracetic.
Reactivi: 1. Soluie de permanganat de potasiu de 1%, pregtit pe ap bidistilat i
pstrat nu mai puin de 2-3 sptmni.
2. Soluie de acid tricloracetic 20%.
Tehnica de lucru: ntr-o eprubet se introduce 1 ml lichid cefalorahidian i 0,05 ml ( o
pictur) de reactiv N1 i se agit energic. Lichidul normal se coloreaz n violet-aprins care se
menine un timp ndelungat. Culoarea nu se schimb nici dup adaosul a 2-3 picturi de
reactivul 2.
Interpretarea clinic. Proba este util pentru diagnosticarea precoce a meningitelor. n
stadiile timpurii ale meningitelor dup amestecarea lichidului cu permanganatul de potasiu
culoare violet foarte rapid (1-2 min) se modific n rou-glbiu i apoi galben-cafeniu. La
adaosul a 2-3 picturi de reactiv 2 lichidele din meningitele purulente devine galben- deschise
sau se decoloreaz deplin, devine tulbure i precipit.
"Determinarea glucozei. Determinarea glucozei n LCR se face dup metode similare
pentru glucoza n snge. Deoarece modificarea concentraiei glucozei n snge se reflect asupra
concentraiei din lichid este necesar ca dozarea s fie efectuat simultan.
De obicei glucoza din LCR este utilizat pentru asigurarea metabolismului celulelor
creierului. n acele cazuri cnd n LCR sunt prezente leucocite i bacterii, pentrp activitatea lor
ele la fel utilizeaz glucoza din lichid i concentraia ei scade.

Prin urmare determinarea glucozei n lichidele purulente nu are importan diagnostic.

Un interes practic mai amplu pentru diagnosticul pozitiv i diferenial prezint dozare glucozei
n LCR n meningitele seroase (virotice i tuberculoas).
Valori normale. n norm valoarea glucozei n lichid constituie 60-70% din valoarea ei
sangvin i constituie 2,8 - 3 ,9 mmol/1.
.Importana clinic. n patologie n fond se constat diminuarea nivelului glucozei n
LCR - glicorahia; n primul rnd din cauza intensificrii utilizrii glucozei n metabolismul
celulelor patologice din lichid-leucocitele, celule tumorale. Uneori glicorahia este cauzat de
afeciunile barierei hematoencefalice i dereglarea transportului glucozei din snge n LCR.
Valorile sczute se observ n: toate meningitele i tumori ale SNC. Modificarea glucozei
prezint un indiciu important n aprecierea evoluiei spre vindecare a meningitelor seroase, n
special a celor virotice i tuberculoase.
-Determinarea clorului. Dozarea clorului poate fi realizat prin metoda de titrare sau la
analizator pentru electrolii.
-/Valori normale - 115-125 mmol/1.
Concentraia clorului este sczut n meningite, n special n cea tuberculoas. n
principiu micorarea nivelului clorului n LCR asociaz strile de scdere a concentraiei
glucozei (Glicorahia i clorurorahia).
Creterea nivelului clorului n LCR nu are semnificaie patologic.
De marcat, c cauzele i mecanismul modificrii concentraie clorului n LCR pn n
prezent nu sunt clarificate pe deplin.
n laboratoarele specializate n domeniul examinrii LCR pot II dozai i ali componeni
chimici: colesterolul, ureea, acidul uric, acidul lactic, electroliii, unele enzime, prin metodele
testate pentru examenul sangvin.
n laboratoarele bacteriologice se determin microorganismele pentru aprecierea
etiologiei afeciunilor i cu scop terapeutic.