Sunteți pe pagina 1din 57

Universitatea de Stat de Medicin i Farmacie Nicolae Testemianu

Catedra Biologie molecular i Genetic uman

Curs

Genetica uman
II

Chiinu, 2012

Cuprinsul
CURS 7 ...................................................................................................................................................................... 3
GENELE UMANE .............................................................................................................................................. 3
CURS 8 .................................................................................................................................................................... 16
TEHNICI DE ANALIZ A GENELOR ......................................................................................................... 16
CURS 9 .................................................................................................................................................................... 22
CARACTERE EREDITARE ............................................................................................................................ 22
CARACTERISTICA GENELOR ALELE I NEALELE ................................................................................ 22
CARACTERE MONOGENICE MENDELIENE ............................................................................................ 23
DETERMINISMUL UNOR CARACTERE EREDITARE NORMALE ......................................................... 24
CARACTERE MONOGENICE NON-MENDELIENE ................................................................................... 25
CARACTERE EREDITARE NORMALE POLIGENICE ............................................................................ 27
CURS 10 .................................................................................................................................................................. 29
STUDIUL CARACTERELOR EREDITARE ................................................................................................. 29
PARTICULARITILE CARACTERELOR EREDITARE .......................................................................... 29
METODE DE STUDIU UTILIZATE N GENETICA UMAN ..................................................................... 31
CURS 11 .................................................................................................................................................................. 35
INTRODUCERE N PATOLOGIA GENETIC UMAN ............................................................................. 35
ASPECTE COMUNE N PATOGENEZA BOLILOR GENETICE ................................................................ 37
BOLI CROMOZOMIALE ................................................................................................................................ 39
BOLI MONOGENICE ...................................................................................................................................... 42
TESTAREA GENETIC .................................................................................................................................. 53

CURS 7
GENELE UMANE
n conceptul clasic gena este un segment cromozomial ce controleaz expresia fenotipic a
unui caracter, iar n conceptul contemporan gena reprezint un segment polinucleotidic al moleculei
de ADN ce codific sinteza unei molecule specifice polipeptid sau ARN.
Astfel substratul molecular al informaiei genetice este molecula de ADN, iar substratul
molecular al caracterului morfologic, biochimic sau fiziologic este proteina.
Genele umane se clasific n dou categorii majore: gene structurale care codific
polipeptide i gene codificatoare de molecule de ARNr i ARNt.

ORGANIZAREA GENERAL A GENELOR STRUCTURALE


Gena structural reprezint o combinaie de secvene nucleotidice reglatoare i
codificatoare:
secvene reglatoare proximale promotorul, enhanceri i silenseri, care sunt responsabili de
controlul iniierii transcripiei, ratei i vitezei transcripiei;
secvene reglatoare distale terminatorul i situsul de poliadenilare, care intervin n
controlul terminrii procesului de transcripie i maturizrii ARN-transcriptului primar;
secvena codificatoare ce este format din exoni separai de introni.
Genele sunt localizate n lungul moleculei de ADN cu o poziie fix (locus) i sunt separate
una de alta prin secvene necodificatoare spaceri. Ele nu au granie morfologice, au numai granie
funcionale, ce se stabilesc n procesul transcripiei.
n genomul uman se descriu circa 30000 perechi gene structurale ce constituie circa 25% din
genom (la 50% din ele funcia este cunoscut).
Dimensiunile genelor umane sunt diferite i au o lungime medie de 3000p.n., de ex:
- gena globinei 1, 5 kb;
- gena insulinei - 1, 7 kb;
- gena catalazei - 34 kb;
- gena distrofinei - 2,5 mb;

Categoria
Gene mici
Gene medii
Gene mari
Gene gigante
Gene
supergigante

Clasificarea genelor umane dup dimensiuni


Dimensiunile
Exemple
genei, kb
-globina
0,8
-globina
1,5
Insulina
1,7
Factorul IX de coagulare
34,0
Catalaza
34,0
Fenilalaninhidrixilaza
90
Factorul VIII de coagulare
186,0
Tireoglobulina
~300,0
Distrofina

Lungimea, kb
pn la 10
10-25
25-50
51-100
101-500
peste 500

~2000,0

Dimensiunile
ARNm, kb
0,5
0,6
0,4
2,8
1,6
2,4
9
8,7

Numrul
intronilor
2
2
2
7
12
12
26
36

16,0

60

Repartizarea genelor umane dup lungime


% de la numrul total
23,3
35,6
20,2
13,0
6,7
1,2

PARTICULARITILE GENELOR STRUCTURALE UMANE:


A. au o organizare complex:
pot prezenta mai mult de un promotor sau situsuri de iniiere al transcripiei;
pot prezenta mai muli codoni de iniiere i codoni STOP;
prezint secvene complexe de reglare a transcripiei;
asigur diferite variante de splicing alternativ;
B. se caracterizeaz prin prezena unor mecanisme de reglare combinat a activitii genelor
(complex i precis n spaiu i n timp):
n dependen de tipul celulei;
n dependen de perioada ontogenetic a celulei i a organismului;
4

n dependen de factorii de mediu interni sau externi.

Tipuri
Dimensiuni
complete

Forme
scurte

Muscular
Cerebral
Cerebral

Gena distrofinei i izoformele distrofinei


Lungimea
Localizarea
ARNm, kb
promotorului
Captul 5'
14
netranscris
14
Intronul 1
14
Intronul 1

1-Dp71

4,5-4,8

Intronul 63

2-Dp116

5,5

Intronul 56

3-Dp40

2,2

Dp140
Dp260

7,5

Intronul 44

Expresie
Inim, muchi scheletici
Scoara Hipocamp
Celulele Purkinje
Oriunde, n afar de
muchi
Nervii periferici
Oriunde, n afar de
muchi
Neuroni embrionali
Retin

PROPRIETILE GENELOR UMANE


1. Genele, fiind reprezentate de secvene de ADN, se replic, autoreproducndu-se i prin mitoze

repetate sau prin meioz se transmit la alte generaii de celule sau de organisme, asigurnd
continuitatea materialului genetic n irul generaiilor i transmitea genealogic a caracterelor ereditatea;
2. Gena este specific - codific o molecul polipeptidic, determin expresia unui caracter;
3. Gena are o aciune dozat asupra fenotipului prin posibilitatea sintezei unei anumite cantiti de

produs genic (ARNm i molecule polipeptidice);


4. Gena este stabil datorit particularitilor de organizare a moleculei de ADN i transmiterii din

generaie n generaie a informaiei genetice neschimbate, determinnd formarea caracterelor


asemntoare la prini i copii; dar exist n genomul uman gene nestabile, programate genetic,
ce se reorganizeaz de novo n timpul diferenierii celulare (de ex.: genele pentru lanurile grele
i uoare ale Ig, genele ce codific pentru receptorii olfactivi, pentru enzimele aparatului de
detoxifiere a xenobioticilor);
5. Unele gene sunt dependente de factorii de mediu (interni genetici i negenetici, externi) i

determin expresivitatea variabil a unui caracter la diferite persoane n diverse condiii de


mediu:
factorii de mediu pot modula (mri, micora sau bloca) expresia genei;
factorii de mediu pot modifica expresia genei (expresie patologic, non-expresie);
6. Genele pot avea aciune pleiotrop; pleiotropia sau aciunea multipl a genei este proprietatea

genei de a contribui la formarea mai multor caractere; poate fi primar - determinat de aciunea
multipl a produsului genei sau poate fi secundar determinat de consecinele secundare ale
aciunii proteinei la nivelul diferitor celule, esuturi i organe;
7. Genele pot exista n mai multe forme moleculare (diferite secvene nucleotidice), determinnd o

surs de variabilitate genetic. Prin modificarea secvenei nucleotidice ale unei gene (mutaii)
apar variante noi ale genei alele; alelele multiple controleaz diferite stri sau forme
alternative ale unui caracter; caracterul controlat de o serie de alele multiple se numete caracter
polimorf (25% din genele umane au variante alelice multiple).

FUNCIILE GENELOR UMANE


Genele dein i pstreaz informaia genetic codificat despre sinteza anumitor proteine
specifice i formarea anumitor caractere fenotipice (biochimice, morfologice, fiziologice, psihice i
comportamentale).
Genele transmit informaia genetic datorit replicrii ADN-ului i reprezint legtura
material dintre generaii, asigurnd transmiterea genealogic a caracterelor de specie i de familie.
Genele realizeaz
informaia genetic prin transcrierea ADN-ului pe molecule
informaionale de ARN i translaia codului genetic n timpul sintezei proteinelor substratul
material al diferitor caractere la nivel de celul, esut i organism.
Expresia genelor reprezint realizarea informaiei codificate de gene prin formarea
caracterelor - fenotipului.
(I) La nivel molecular, aceasta constituie procesul prin care informaia din ADN este
transformat n molecule polipeptidice, ARNt, ARNr. Expresia genelor ce codific polipeptide
reprezint un proces complicat, ce decurge n cteva etape:

transcripia copierea informaiei genetice din ADN i sinteza moleculelor precursoare ale
ARNm;

processingul maturizarea moleculelor ARNm: CAParea, poliadenilarea, splicingul;

transferul ARNm n citoplasm;

translaia procesul prin care secvena nucleotidelor din ARN este tradus ntr-o secven
de aminoacizi ai lanului polipeptidic.

maturizarea moleculei proteice prin conformaie +/- modificri structurale.

(II) La nivel celular expresia genei reprezint rezultatul integrrii proteinei sintetizate ntr-o
structur celular, ntr-un lan metabolic sau ntr-o reea de semnalizare celular. Fenotipul celular
morfologia i funcia este controlat de genomul celulei, dar realizat de setul specific de
proteine sintetizate proteinomul.
(III) La nivel organismic expresia genelor se manifest prin caractere morfologice i nsuiri
complexe, datorit cooperrii tuturor componentelor moleculare i supramoleculare n morfogeneza
i fiziogeneza organismului uman.
Astfel, n concept actual, expresia genic este studiat la diferite nivele:
i. molecular polipeptidul sintetizat, care constituie efectul primar al expresiei genice;
ii. celular molecula proteic i funcia ei n celul efectul secundar;
iii. organismic manifestarea fenotipic a genei efectul teriar.

CLASIFICAREA GENELOR UMANE


Exist diferite criterii de clasificare a genelor, care includ diferite puncte de vedere asupra
legturii dintre structur, localizare i funciea genelor:
6

1. dup tipul produsului genic:


- gene codificatoare de proteine gene structurale;
- gene codificatore de ARNr i ARNt.
2. dup numrul de copii n genom:
- unice - cu o singur copie;
- cu mai multe copii (repetate n tandem sau dispersate).
3. n dependen de numrul de celule n care se expresea genele:
- genele house keeping active n toate celulele;
- gene specifice de esut.
4. n dependen de perioada de expresie fenotipic:
- gene active n toate perioadele vieii;
- gene active numai n perioada embrionar;
- gene active n perioada pubertii;
- gene active la adult.
5. dup gradul de activitate:
- gene normomorfe - cu activitat normal;
- gene hipomorfe - cu activitat redus:
- gene hipermorfe - cu activitat n exces;
- gene amorfe - cu activitate blocat.
Activitatea genic se stabilete dup cantitatea de molecule de ARN transcris, cantitatea de
protein sintetizat, activitatea produsului genic proteinei.
6.
-

dup funcia produilor genici sintetizai sunt gene ce codific:


gene codificatoare de enzime - 31,2%;
gene codificatoare de modulatori ai proteinelor sintetizate - 13, 6 %
gene codificatoare de receptori;
gene codificatoare de factori de transcripie;
gene codificatoare de proteine ale matricei intracelulare i matricei extracelulare;
gene codificatoare de transportori membranari i proteine canal;
gene codificatoare de molecule de semnalizare celular;
gene codificatoare de hormoni;
gene codificatoare de imunoglobuline, etc.

50%

7. n dependen de aciunea modulatoare a factorilor de mediu asupra expresiei genei:


- gene stabile;
- gene plastice.

LOCALIZAREA GENELOR
Conform teoriei cromozomiale ale ereditii propus de Th. H. Morgan (1911):
genele sunt localizate pe cromozom, fiecare gen ocup un anumit locus;
genele unui cromozom sunt dispuse liniar i formeaz grupuri de nlnuire;
numrul grupurilor de nlnuire este egal cu numrul haploid de cromozomi;
ntre cromozomii omologi poate avea loc schimb de gene alele (crossing-overul);
frecvena crossing-overului este direct proporional cu distana dintre gene i este invers
proporional puterii de nlnuire;
7

distana dintre gene se msoar n % de recombinare i 1% de crossing-over =1cM


(centiMorganid).
n loci identici ai cromozomilor omologi sunt dispuse
gene cu aceiai funcie - gene alele, iar genele cu loci diferii n
acelai cromozom sau cromozomi diferii se numesc gene
nealele.
Dac individul este purttor de alele identice este numit
homozigot, dar dac genele alele sunt diferite heterozigot.
Fiecare persoan poart circa 30 000 perechi de gene,
dup unele perechi este homozigot, iar dup altele heterozigot,

Repartizarea genelor pe cromozomi este neomogen:


sunt cromozomi bogai n gene i cromozomi sraci n gene;
sunt fragmente de cromozomi cu o densitate mare de gene i cu densitate redus.

Unele gene au o singur copie, altele gene au mai multe copii i formeaz familii repetitive (n
tandem sau pe diveri cromozomi) sau nerepetitive de gene.
Genele de pe un cromozom, ce sunt localizate foarte aproape una de alta formeaz haplotipuri,
care deseori au elemente reglatoare comune.
Genele localizate pe autosomi determin caractere autozomale ce se transmit de la prini
indiferent de sex, iar genele localizate pe gonosomi determin caractere sex-lincate ce se transmit
dependent de sex:
- genele i caracterele X-lincate se transmit de la mam i fiicelor i fiilor, iar de la tat numai
fiicelor;
- genele i caracterele Y-lincate (holandrice) se transmit exclusiv din tat n fiu.
HRILE GENETICE
Genomul celulei include dou sisteme de gene cu mod de organizare i motenire diferite:
genomul nuclear i genomul mitocondrial.
n nucleul celulelor umane se conin circa 30000 perechi de gene, care sunt repartizate de-a
lungul a 46 molecule de ADN, care corespund celor 46 cromozomi din setul diploid.
Fiecare cromozom conine n medie 1-2000 de gene. Genele sunt dispuse liniar n cromozom,
una dup alta, fiind separate prin secvene necodificatoare (ADN-satelit, spaceri). Genele unui
cromozom se transmit de la o generaie la alta, n bloc, fenomen numit nlnuire genic sau linkage.
Fiecare cromozom reprezint un grup de nlnuire.
Genomul mitocondrial este organizat sub form ADN inelar, conine 37 gene aranjate compact i se
transmite pe linie matern.
Astfel, la om sunt 25 de grupuri de nlnuire:
22 grupuri ale autosomilor;
un grup al cromozomului X;
un grup al cromozomului Y;
un grup genele ADN-ului mitocondrial.

Cromozom
Nr. gene
Lungimea, Mb

1
3511
250

2
2368
243

3
1926
198

4
1444
191

5
1633
181

6
2057
171

7
1882
159

8
1315
146

Cromozom
Nr. gene
Lungimea, Mb

9
1534
141

10
1391
136

11
2168
135

12
1714
134

13
720
115

14
1532
107

15
1249
103

16
1326
90

Cromozom
Nr. gene
Lungimea, Mb

17
1773
81

18
557
78

19
2066
59

20
857
63

21
450
48

22
855
51

X
1672
155

Y
429
59

Fenomenul de linkage se manifest numai n cazul genelor plasate pe acelai cromozom, n timp ce
pentru genele plasate pe cromozomi diferii transmiterea ereditar a genelor se face independent,
mendelian.
Studiul mecanismului de transmitere ereditar a artat c nu ntotdeauna genele ce fac parte din
acelai grup linkage se transmit nlnuit. Excepiile sunt explicate prin posibilitatea recombinrii ntre
cromozomii omologi crossing-over, care are loc n meioz. n timpul crossing-overului are loc
schimbul reciproc de gene alele ntre cromozomii pereche - cromozomii omologi.
Frecvena crossing-overului este diferit pentru diveri loci, variaz de la 0% la 50% i este

Mecanismul recombinrii ntre cromozomii omologi crossing-overul

corelat cu distana dintre gene. La valori de peste 50% nu se mai consider o recombinare, ci o
segregare independent.
Pe baza observaiei c ntre genele foarte apropiate probabilitatea apariiei chiasmelor i
respectiv a fenomenului de crossing-over este mic, iar ntre genele mai ndeprtate crete spre limita
superioar de 50%, determinarea frecvenei recombinrilor genice n procente constituie modalitatea de
stabilire a localizrii genelor pe cromozom i, respectiv, a alctuirii hrilor genetice.
9

Hrile genetice se alctuiesc innd cont de fenomenul de linkage, crossing-over, plasarea


liniar a genelor pe cromozomi, etc. Aceste hri constituie o reprezentare grafic a cromozomilor i a
genelor care alctuiesc diferite grupe de linkage, gene situate pe cromozomi la distane relative,
exprimate n procente de recombinare (1% de crossing-over = 1 cMorganid (1cM)).

Motenirea nlnuit complet i incomplet.


Formarea zigoilor nerecombinai (NR) i a celor recombinai (R) produi ai crossing-overului

n prezent, datorit tehnicilor de genetic molecular, s-au elaborat hrile fizice ale
cromozomilor cu distribuia exact a genelor pe cromozom, iar mrimea genelor i distana dintre ele se
prezint n perechi de nucleotide (pn).
Stabilirea unor relaii (grupe) de nlnuire ntre
gene i, deci, caractere este foarte important n
genetica medical. Se urmrete transmiterea
unor caractere patologice n comun cu un
caracter normal.
Caracterul normal servete ca marcher
(indicator) a unei patologii i este important n
special pentru bolile ce apar pe parcursul vieii.
Exemple de grupe de nlnuire:
- Rh i eliptocitoz (eritrocite cu form oval);
-

AB0 i xeroderma pigmentosum (XP);


grupa sanguin Duffy i cataracta congenital;
grupa sanguin Lutheran, statusul secretor i miopatia;
grupele MNSs i dentinogenesis imperfecta-1 (DI-1);
grupa sangvin Xg i hemofilia A (HEMA), hemofilia B (HEMB), daltonismul (Dalt); etc.

10

MUTAIILE GENICE
Mutaiile genice pot interesa genele de structur sau secvenele implicate n reglare: n primul
caz se modific structura (calitatea polipeptidului sintetizat dup informaia genei), n al doilea caz se
schimb ritmul (cantitatea) sau tipul de protein sintetizat. Ca rezultat al mutaiilor genice, se produc
forme alternative ale genei, numite alele.

Clasificarea mutaiilor genice

Mutaiile genice se pot produce prin:


- alterri ale secvenei nucleotidice - prin substituie, inversie, deleie, inserie de nucleotide;
- recombinri intragenice i crossing-over inegal;
- reversie;
- duplicaii i hiperduplicaii.
Substituia unui singur nucleotid prin alt nucleotid este cea mai frecvent posibilitate de
modificare genic. Substituiile sunt definite mutaii punctiforme i se clasific n:
transversii - tip de nlocuire (substituie) a bazelor azotate n care o baz azotat purinic este
nlocuit de o baz pirimidinic sau invers.
tranziii - tip de nlocuire (substituie) a bazelor azotate din ADN, n care o baz purinic este
nlocuit de o alt baz purinic sau o baz pirimidinic este nlocuit de alt baz pirimidinic.

11

Substituia duce la modificarea unui singur codon (sens sau nonsens). Schimbarea unui codon sens
va determina unul din urmtoarele efecte:
- schimbarea aminoacidului ca rezultat al modificrii codonului mutaii misens;
- oprirea sintezei proteinei, n cazul n care codonul format prin substituie este un codon STOP
(UAA, UAG i UGA) mutaii nonsens;
- pstrarea structurii iniiale (normale) a proteinei deoarece codonul rezultat prin substituie este
sinonim cu cel modificat samesens mutaii.

.
Substituia poate implica uneori i un codon non-sens sau stop: UAA sau UAG pot deveni CAA sau
CAG, codoni care semnific glutamina. n acest caz sinteza polipeptidului continu pn la un nou
codon stop. Un exemplu de elongaie a catenei l constituie o alt Hb anormal Hb CS (Hb Constant
Spring) a crei caten alfa are 172 aminoacizi n loc de 141; secvena adiional de 31 aminoacizi
ncepe ntr-adevr cu Glutamina.
Substituia poate interesa doi sau chiar mai muli aminoacizi distinci, separai, din catena unui
lan polipeptidic . De ex: Hb C-Harlem = 2 alfa 2 beta 6 GluVal; 73 AspAsn.
Inversia va duce la modificarea unui codon i lectura sa n sens invers. Consecinele inversiei
sunt aceleai ca i ale substituiei.
Prin deleie se nelege lipsa a una sau a mai multe perechi de nucleotide din molecula de ADN.
Natura anomaliei produse va depinde de numrul de perechi de nucleotide implicat n deleie. Dac
lipsete o singur pereche de nucleotide se produce o decalare a fazei (cadrului) de lectur a codului
genetic (mutaii frame shift); lectura este incorect i se sintetizeaz o protein n care toi
aminoacizii, situai dincolo de locul deleiei, vor fi modificai (ex: Hb Wayne).
Dac numrul de nucleotide deletate este multiplu de trei, atunci n catena polipeptidic
determinat de gena mutant vor lipsi unul sau mai muli aminoacizi (n Hb Gun-Hill sunt abseni cinci
aminoacizi din catena beta: 91-95) Uneori se poate realiza deleia complet a unei gene. n alfatalasemii nu se produc catenele alfa ale hemoglobinei pentru c gena corespunztoare lipsete din
genom, n locul lor se sintetizeaz alte tipuri de lanuri: de ex: Hb H=4 beta sau Hb Bart=4 gama.
Inseria sau adiia nseamn introducerea unui nucleotid n secvena unei gene; din punctul de
inserie lectura codonilor se va face decalat, realizndu-se o protein cu secven anormal.

12

Crossing-overul inegal se poate produce dac nu are loc o mperechere perfect a omologilor. n
rezultatul CO inegal se produce o rearanjare a secvenelor ADN i deci o modificate a structurii
polipeptidelor codificate de aceste secvene (ex. Hb Lepore).

Reversia (mutaia supresiv) este o mutaie care intereseaz o alt mutant, determinnd
revenirea la fenotipul normal (slbatic). Reversia adevrat transform codonul mutant n normal, iar
reversia numit supresiv produce o a doua mutaie, diferit ca poziie ca prima dar care corijeaz
efectul ei.
Ex. Hb. Harlem prezint prima mutaie n catena beta 6 Glu-Val ca i Hb S dar efectul ei de
transformare a hematiilor n secer este anulat de o a doua mutaie: beta 73 AspAsn. Situaia se repet i
n cazul Hb Memphis/S: alfa 23 GluGln; beta 6 GluVal.
Consecinele mutaiilor genice. Efectul primar al mutaiilor genice l reprezint modificarea
secvenei aminoacizilor n moleculele polipeptidice, sintetizate pe baza informaiei acestor gene (ele
sunt produsul primar al genei respective). Efectul biologic al acestei modificri depinde de tipul
aminoacidului substituit i de locul su particular n molecula polipeptidic. Dac mutaiile vor
modifica structura sau ritmul de sintez a unei enzime, atunci se produce o alterare (bloc complet sau
parial) a unei ci metabolice. Efectul primar este urmat de o mulime de efecte secundare care vor
determina un fenotip modificat.

13

Mutaiile pot afecta partea reglatoare sau partea codificatoare a genei. Modificarea secvenei
nucleotidice a promotorului poate duce la schimbri cantitative n sinteza ARN i proteinei:
- blocarea transcripiei lipsa produsului proteic modificri fenotipice prin deficien (de ex.,
fenilcetonuria, intolerana la zaharoz);
- activarea continu a transcripiei sinteza unei cantiti mari de produs proteic modificri
fenotipice prin exces (de ex., sinteza n cantiti mari a HbF i HbA2 duce la hemoliz i
anemie).
Modificarea secvenei nucleotidice a regiunii codificatoare, n special a exonilor, poate duce la
schimbarea mesajului genetic i secvena de aminoacizi din protein, producnd schimbri calitative n
sinteza produsului final:
- sinteza unei proteine cu o activitate sczut (mutaie hipomorf);
- sinteza unei proteine cu o activitate exagerat (mutaie hipermorf);
- sinteza unei proteine inactive (mutaie amorf).
Dup valoarea adaptiv i consecinele mutaiilor genice asupra structurii i funciei
organismelor ele se pot mpri n mai multe grupe:
- mutaii neutre care produc polimorfismul biologic intraspecific, variantele normale (de ex.,
grupele sanguine, serice sau tisulare);
- mutaii deviante (defavorabile) care antreneaz un handicap mai mult sau mai puin sever i
creeaz fie o stare de boal, fie o predispoziie la boal; unele dintre ele sunt mutaii letale sau
subletale, afectnd decisiv viabilitatea i reproducerea individului;
- mutaii evoluante cu valoare adaptiv mai mare ca normalul; ele produc indivizi mai bine
adaptai, mai rezisteni la mediu.
MUTAII DINAMICE
n 1991 s-a descoperit o nou clas de alterri ale ADN, diferite de mutaiile clasice, mutaiile
dinamice. Ele sunt reprezentate de creteri ale numrului unor repetri trinucleotidice situate n
proximitatea sau chiar n interiorul genelor structurale. Mutaiile dinamice sunt caracterizate de
instabilitate, exprimat prin creterea numrului de copii ale unitilor trinucleotidice, cu ocazia
diviziunilor pe care le realizeaz celula purttoare.

Mutai
e
comple
t
Exist variaii ale numrului de repetri trinucleotidice:
- polimorfisme ADN benigne;
- premutaia secvena de ADN devine instabil, dar nu determin un fenotip patologic;
- mutaia complet - prin expansiunea repetrilor trinucleotidice determinnd fenotip
patologic.
14

Purttorii premutaiilor sunt fenotipic normali. Expansiunea repetrilor are loc n gametogenez.
Astfel unii din gameii purttorilor sntoi vor conine mutaia complet, care la descendeni va
produce un fenotip patologic. n gametogeneza ultimilor, din cauza instabilitii acestor repetri, vor
aprea expansiuni adiionale, care la urmtoarea generaie va produce un fenotip patologic mai grav
(=fenomenul de anticipaie).

1-2% din persoane au un efect determinat de mutaia


unei gene;
fiecare individ este heterozigot (purttor) de circa 610 gene recesive;
fiecare individ este heterozigot (purttor) de circa 3-5
gene letale tot recesive (care dac vor fi n stare
homozigot la descendeni vor produce moartea lor)

15

povar
genetic

Frecvena (rata) mutaiilor


Frecvena medie cu care se produce un eveniment mutaional particular, per celul (sau individ)
i per generaie se numete rat de mutaie. Rata mutaiilor spontane variaz pentru diferii loci, ntre
anumite limite: 1:25000 (sau 4x10-5) 1:1000000 (sau 1x10-6) per gamet i generaie. Exist variaii
regionale.

CURS 8
TEHNICI DE ANALIZ A GENELOR
Tehnologia ADN recombinant a creat premisele dezvoltrii unor metode de diagnostic
molecular dotate cu capacitate de rezoluie, grad de precizie i nivel informativ net mai superioare celor
ale metodelor convenionale. Superioritatea absolut a abordrii moleculare rezult ns din faptul c
spre deosebire de toate celelalte metode de diagnostic, limitate la determinarea exclusiv a trsturilor
fenotipice, - analiza ADN, destinat nemijlocit studiului genotipului este singura n msur s
obiectiveze alterrile primare (mutaiile) care se fac direct responsabile pentru starea de boal.
Tehnicile ADN recombinant permit identificarea genelor normale i/sau a variantelor lor
mutante, stabilirea purttorilor de gene mutante, diagnosticul prenatal sau presimptomatic al
patologiilor genetice, iar n viitorul apropiat apare posibilitatea dezvoltrii terapiei genice.
Studiul molecular al genelor poate fi realizat pe mai multe ci n dependen de scopul propus:
- secvenierea ADN pentru determinarea structurii primare a genei;
- tehnica Southern-blot pentru identificarea RFLPs;
- tehnica Northen-blot pentru determinarea expresiei genelor (analiza ARNm);
- tehnica Western-blot pentru determinarea produsului proteic al genei;
- tehnica PCR pentru identificarea genei normale sau mutante, prin amplificarea specific a
secvenelor de ADN, etc.
n laboratoarele de biologie molecular se utilizeaz diverse variante ale metodelor menionate. Toate
aceste metode se bazeaz pe diferite principii de manipulare a acizilor nucleici:
- clivarea specific a ADN-ului genomic pentru obinerea fragmentelor de cercetat;
- identificarea fragmentelor de ADN sau ARN de cercetat prin hibridare cu sonde specifice
complementare secvenei int;
- identificarea genelor normale sau mutante prin procesul de amplificare specific a ADN (PCR)
reacie specificat de alegerea primerilor complementari genei / secvenei de interes;
- vizualizarea fragmentelor de interes dup rezultatele electroforezei i marcarea specific al ADN
sau ARN de cercetat, sau utilizndu-se programe computerizate de citire i interpretare a
rezultatelor;
- interpretarea rezultatelor este un proces complex, legat de fiecare tehnic i procedur n parte n
concordan cu particularitile metodei utilizate.

Pentru separarea fragmentelor de acizi nucleici se utilizeaz electroforeza n gel de agaroz sau de poliacrilamid.
Purtnd sarcin negativ, moleculele acizilor nucleici migreaz n cmpul electric, iar viteza de migrare depinde
de greutatea molecular a fragmentelor cercetate - fragmentele mai scurte migreaz mai rapid, n timp ce
fragmentele lungi migreaz mai lent. Pentru determinarea dimensiunilor fragmentelor de acizi nucleici,
concomitent cu fragmentele de interes sunt supuse electroforezei n trecuri vecine i fragmente-marker ai
lungimii. Moleculele acizilor nucleici pot fi vizualizate n gel prin colorare cu ageni chimici, marcare radioactiv
sau fluorescent. n cazul marcrii radioactive fragmentele se identific cu ajutorul autoradiografiei care const
n suprapunerea gelului cu un film fotosensibil.

16

SECVENIEREA ADN
Secvenierea const n determinarea succesiunii nucleotidelor (bazelor azotate) dintr-un anumit
segment al moleculei de ADN. Analiza secvenei bazelor azotate din structura ADN poate fi realizat
prin dou ci: 1) calea chimic (Maxam-Gilbert), n care se folosesc reaciile chimice de clivare a
ADN-ului n baze individuale, dar fiind o metod complicat i laborioas, n ultimii ani nu se mai
utilizeaz; 2) calea enzimatic (Sanger) n care ADN-ul este sintetizat in vitro pe baza matriei ADN
studiat, n aa fel nct reacia se termin specific n poziia care corespunde unei baze anumite. Pentru a
determina o secven de nucleotide pe una din cile menionate, ADN-ul este supus seriei de patru
reacii separate, fiecare reacie fiind specific pentru una din baze. Prin electroforez produii de reacie
vor migra n patru curse paralele, pe acelai gel. Urmrind band cu band, poate fi identificat ordinea
nucleotidelor n ADN.

Tehnica Sanger (dideoxi) utilizeaz sinteza enzimatic a unei catene, complementar cu o


matri clonat. n cadrul acestei proceduri sinteza este stopat prin ncorporarea unui dideoxinucleozid trifosfat - un analog al dezoxiribonucleotidelor. Dideoxinucleozidtrifosfaii conin n
poziia 3' grupa H, dar nu grupa OH care mpiedic polimerizarea nucleotidelor. Folosind patru
analogi dedeoxi diferii n timpul sintezei catenei noi de ADN, se poate de identificat fiecare nucleotid
normal din catena matri. Electroforeza fragmentelor obinute permite stabilirea ordinii nucleotidelor
n molecula de ADN. n ultimii ani se utilizeaz o metod automat de secveniere, bazat pe metoda
dideoxi.
n scopuri de diagnostic a purttorilor de gene normale sau mutante se compar rezultatele
secvenierii cu datele structurii primare normale a genei din bibliotecile de ADN. Spre regret, nu se
cunoate nc secvena tuturor genelor umane, de aceea n diagnostic se utilizeaz metode indirecte:
nlnuirea cu marcheri genetici apropiai (repetiii hipervariabile de ADN mini- i microsatelitic),
determinarea situsurilor de restricie caracteristice genei date, hibridarea cu sonde alel-specifice etc.
TEHNICA SOUTHERN-BLOT
Tehnica Southern-blot se bazeaz pe analiza specific a unor fragmente de ADN genic/genomic
obinute prin secionarea ADN-ului genomic cu una sau mai multe enzime de restricie. innd cont c
enzimele de restricie nu acioneaz la ntmplare asupra ADN-ului, dar cliveaz ADN-ul bicatenar
numai n anumite situsuri de restricie, la utilizarea unei enzime de restricie se obin fragmente de ADN
bicatenar cu o lungime diferit (numrul i lungimea fragmentelor de restricie depind de harta de
restricie pentru enzima utilizat).
17

Lund n calcul polimorfismil ADN / polimorfismul genic determinat de mutaii punctiforme, ne


putem da seama c hrile de restricie la diferite persoane se pot deosebi. Diferenele dintre hrile de
restricie obinute de la doi indivizi este numit Polimorfismul Lungimii Fragmentelor de Restricie
(RFLP Restriction Fragment Lenght Polimorphism). Acest polimorfism poate fi folosit ca marcher
genetic n evaluarea genotipului.
Pentru analiza RFPLs a unor gene e
necesar s se cunoasc localizarea specific a
situsurilor de restricie. Aceast informaie e
utila
pentru compararea genelor normale cu genele
mutante, pentru identificarea precoce a
purttorilor de gene mutante patologice.
Tehnica Southern-blot se bazeaz pe
principiul RFLPs i vine cu o soluie destul
de
important pentru identificarea fragmentului
de
interes din amestecul de mii de fragmente
diferite obinute prin digestia specific a
ADN-ului genomic. Identificarea secvenei
int
se face pe baza hibridrii ADN-int cu o
sond complimentar, radioactiv dup
transferul fragmentelor de ADN de cercetat
pe un
suport solid - tehnica Southern-blot (de la
numele inventatorului Edward Southern).

(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
(7)

Tehnica Southern-blot const din urmtoarele etape:


extragerea din celule a ADN-ului genomic cu greutate molecular mare;
digestia enzimatic a ADN-ului cu diferite ER, fiecare producnd fragmente de lungime diferit;
separarea fragmentelor de restricie prin electroforez n gel de agaroz;
denaturarea fragmentelor bicatenare cu o soluie alcalin;
transferul capilar al fragmentelor de ADN pe membrane filtre de nailon sau nitroceluloz;
hibridarea cu sondele monocatenare radioactive;
autoradiografia pentru vizualizarea hibrizilor ADN int - ADN sond i interpretarea rezultatelor.

18

Extragerea ADN
din celule nucleate

Denaturarea ADN i
transferul FR
pe membrane

Restricia ADN genomic


cu ER

Electroforeza FR

Hibridare cu sonda

Autoradiografia

Vizualizarea i interpretarea
rezultatelor

Etapele tehnicii Southern-blot

Datorit tehnicii Southern-blot se poate determina prezena sau lipsa unor situsuri de restricie
caracteristice genei analizate care se asociaz cu anumite mutaii:
- detectarea mutaiilor punctiforme ce implic situsurile de restricie (dispar sau apar noi situsuri de
restricie), care se evideniaz prin modificarea numrului i lungimii fragmentelor de restricie;
- detectarea mutaiilor prin deleii, duplicaii sau inserii ale unor fragmente polinucleotidice mai mari de
50-100p.b., care se evideniaz prin modificarea lungimii fragmentelor de restricie;
- acestea permit diagnosticul prenatal sau presimptomatic al mutaiilor patologice i depistarea
purttorilor heterozigoi de gene mutante.
Metoda Southern blot are i limite: (1) nu permite detectarea mutaiilor punctiforme sau
microdeleiilor la nivelul secvenelor de ADN dintre situsurile de restricie; (2) este laborioas,
complex i scump.
TEHNICA NORTHERN-BLOT
Metoda Northern-blot const n transferul moleculelor denaturate de ARN pe filtre de nailon sau
nitroceluloz, urmat de hibridarea cu sonde marcate. Aceast metod este similar tehnicii Southernblot cu deosebirea c ARNm extras i purificat nu este supus scindrii cu enzime, iar electroforeza
decurge n condiii de denaturare. Tehnica Northern-blot permite identificarea transcripilor genelor
analizate, cantitii de ARNm, stabilirea lungimii lor.

TEHNICA WESTERN-BLOT
Aceast metod const n identificarea unei proteine specifice din amestecul de proteine celulare.
Pentru aceasta, proteinele sunt separate prin electroforez n condiii de denaturare. Proteinele separate dup
greutatea molecular sunt transferate pe filtre de nailon sau nitroceluloz i supuse tratrii cu anticorpi specifici
marcai radioactiv sau fluorescent. Prin aceast metod se poate identifica prezena/lipsa proteinei,
dimensiunile ei, rata de expresie a genei.
19

TEHNICA PCR N ANALIZA GENELOR


Tehnica PCR poate fi utilizat pentru multiplicarea selectiv a unei secvene de ADN genic. Ca
rezultat, se obin populaii omogene de fragmente care pot fi utilizate n studiile de genetic molecular
sau n diagnostic.

Extragerea ADN

Electroforeza
produilor PCR

Pregtirea componentelor
pentru PCR

Vizualizarea
produilor PCR

Amplificarea ADN-int

Autoradiografia i interpretarea
rezultatelor

Etapele analizei PCR

Pentru a realiza amplificarea unei secvene este necesar cunoaterea structurii genei normale
sau mutante i sinteza primerilor specifici complementari capetelor fragmentului de interes. Primerii
reprezint secvene oligonucleotidice monocatenare de 20-30 baze care sunt obinute prin sintez
artificial. PCR se bazeaz pe hibridarea ADN int - primer i replicarea semiconservativ a ADN.
Avantajele tehnicii PCR sunt urmtoarele: necesitatea cantitilor mici de ADN, rapiditatea ei
(n cteva ore se obin milioane copii de ADN), iar specificitatea primerilor permite amplificarea
selectiv a ADN i, de menionat c, produsele de amplificare pot fi utilizate n calitate de sonde pentru
hibridri n alte tehnici.
Aplicaiile practice ale tehnicii PCR:
- detectarea mutaiilor cunoscute la bolnavi i purttori, n diagnosticul prenatal i presimptomatic al
bolilor ereditare;
- determinarea genelor de predispoziie la bolile comune (coronaropatii, boala hipertonic, tulburri
psihice etc.);
- diagnosticul precoce i evaluarea pronosticului bolilor canceroase;
- determinarea prenatal a sexului;
- identificarea agenilor patogeni (virui, bacterii);
- dactiloscopia genomic n identificarea persoanelor, analiza filiaiei (paternitate, maternitate);
- tipizarea HLA.

20

Utilizarea tehnicii PCR pentru identificarea mutaiilor


punctiforme cu primeri specifici pentru gena normal

Utilizarea tehnicii PCR pentru identificarea deleiilor

Hibridarea in situ
Hibridarea in situ reprezint o tehnic molecular, n care o sond specific marcat poate
identifica direct pe preparatele celulare:
(1) o gen pe un anumit cromozom sau fragment de cromozom;
(2) un ARNm ntr-o celul particular sau esut;
(3) numrul moleculelor de ARNm n dependen de perioada ontogenetic sau tip tisular;
(4) ADN viral;
(5) deleiile cromozomiale submicroscopice;
(6) genele responsabile de producerea cancerului, localizarea i nivelul lor de expresie.
n ultimii ani se utilizeaz metoda FISH (Fluorescence In Situ Hibridization) care utilizeaz
sonde fluorescent marcate. Metoda FISH este simpl, poate fi aplicat pe preparate celulare arhivate,
este rapid, nu modific morfologia celulelor.

Tehnica FISH

21

CURS 9
CARACTERE EREDITARE
RELAIA GENOTIP - FENOTIP
Definirea biologic a unui individ este determinat de ansamblul unor caractere morfologice,
fiziologice, biochimice, psihice i comportamentale fenotipul, controlate de aciunea, n diferite proporii,
a factorilor ereditari i a celor de mediu. Sistemul de gene din setul diploid de cromozomi al unui individ,
care determin formarea unui anumit fenotip se numete genotip. Caracterele, la formarea crora genotipul
particip ntr-o proporie mai mare de 50% poart denumirea de caractere ereditare. Caracterele ereditare
pot avea determinism monogenic sau poligenic (multifactorial).
CARACTERISTICA GENELOR ALELE I NEALELE
Genele alele sunt localizare n loci identici pe cromozomi omologi i controleaz acelai
caracter sau forme alternative ale aceluiai caracter. Genele alele se pot prezenta n mai multe forme
moleculare diferite polialelism, dar n genotip, la o persoan, sunt prezente numai dou alele o
pereche (excepie - pe cromozomii X i Y la brbai este prezent doar o alel pentru fiecare gen).
Fiecare individ poart circa 30 mii perechi de
gene alele, dup unele este homozigot - purttor de
gene alele identice, dup altele este heterozigot purttor de gene alele diferite i hemizigot dup
genele nlnuite cu cromozomul X la brbai. n cazul
heterozigoiei se manifest alela cu o activitate mai
mare (gena dominant) fa de a doua (gena
recesiv). Astfel sunt alele:
- cu activitate moderat normomorfe;
- cu activitate mrit hipermorfe;
- cu activitate mic hipomorfe;
- neactive amorfe;
- cu funcie nou neomorfe.
Manifestarea fenotipic a unei alele depinde i
de alte gene nealele i de factorii de mediu.
n timpul transmiterii: n meioz, genele alele
se separ n gamei diferii segreg, iar la fecundare se combin ntmpltor formnd diferite
genotipuri, determinnd segregarea caracterelor ce reprezint baza legilor ereditii mendeliene. Alelele
unui individ una este de origine matern i alta de origine patern. Individul homozigot produce
gamei identici dup alela dat, iar individul heterozigot produce gamei diferii 50% vor conine o
alel i 50% vor conine cealalt alel.
Gene nealele sunt localizate n loci diferii ai cromozomilor i, de regul, controleaz caractere
diferite sau coopereaz pentru formarea unui caracter complex. Se manifest fenotipic independent una
fa de alta sau interacioneaz determinate de:
o efectul poziiei genelor dintr-un haplotip;
o epistazie;
o aciunea complimentar;
o poligenia aditiv.
Genele nealele se transmit:
- n bloc nlnuit, dac se afl pe acelai cromozom i formeaz grup de nlnuire, haplotipuri;
- independent, dac se afl pe cromozomi diferii.
22

Transmiterea nlnuit a genelor


localizate ntr-un cromozom

Combinarea independent a genelor nealele


din cromozomi neomologi

CARACTERE MONOGENICE MENDELIENE


Caracterele monogenice sunt caracterele controlate de o singur pereche de gene alele (conform
dogmei genetice: o pereche de gene un caracter). Exemple de caractere monogeneice normale pot fi:
- grupele de antigene eritrocitare (AB0, Rh, MN, Xg, etc.);
- grupele serice (haptoglobine, transferine, etc.);
- grupele enzimatice;
- antigenii tisulari (HLA).
Caracterele monogenice reprezint produsul interaciunii a dou alele, ntre care pot exista relaii de
dominan / recesivitate sau codominan; se transmit mendelian i respect legile monohibridrii.

Exprimarea fenotipic n populaie a caracterelor monogenice este de regul bimodal (de ex., 75%
din populaie are Rh+, iar 25% - Rh-). Unele caractere monogenice prezint mai multe forme alternative
polimorfisme determinate de existena alelelor multiple i/sau interaciunea cu ali factori ereditari sau
neereditari (de ex., mai multe variante de grupe sangvine dup sistemul AB0 I [0], II [A1 sau A2], III [B],
IV [A1B sau A2B]).
Caracterele monogenice pot fi att normale (de ex., grupele sangune, grupele serice, antigenii
tisulari, etc.), ct i patologice (de ex., polidactilia, albinismul, fenilcetonuria, hemofilia, daltonismul, unele
forme ale displaziei smalului dentar, etc.).

23

DETERMINISMUL UNOR CARACTERE EREDITARE NORMALE

Caracterul

Alele

Localizare pe
cromozom

Factorul Rhesus

D, d

Gusttor

G, g

Secretor

Se, se

19

Grupe sangvine
AB0

0, A1, A2, B

Relaiile dintre
alele
Dominan /
recesivitate
Dominan /
recesivitate
Dominan /
recesivitate

Genotipuri

Fenotipuri

DD, Dd
dd
GG, Gg
gg
SeSe, Sese
sese

Rh+
RhGusttor
Negusttor
Secretor
Nesecretor

Dominan /
recesivitate

00
A1A1, A1A2, A10
A2A2, A20
BB, B0

0 (I)
A1 (II)
A2 (II)
B (III)

Codominan

A1B
A2B
MM
MN
NN
Hp1Hp1
Hp1Hp2
Hp2Hp2
Xg(a+)Xg(a+),
Xg(a+)Xg(a-), Xg(a+)Y
Xg(a-)Xg(a-), Xg(a-)Y

A1B (IV)
A2B (IV)
M
MN
N
Hp1-1
Hp1-2
Hp2-2

Grupe sangvine
MN

M, N

Codominan

Haptoglobine

Hp1, Hp2

16

Codominan

Grupe sangvine
Xg

Xg(a+),
Xg(a-)

Dominan /
recesivitate

Xg+
Xg-

Unele gene au aciune unic (o gen un caracter), altele au aciune multipl, pleiotrop (o

gen controleaz formarea mai multor caractere).


n dependen de capacitatea de manifestare fenotipic caracterele pot fi: dominante,
intermediare i recesive. Gena ce se manifest att la homozigoi ct i la heterozigoi se numete alel
dominant (A), iar cea care se manifest doar n stare homozigot alel recesiv (a). Fiecare individ
este heterozigot pentru unii loci i este homozigot pentru alii. ntre genele alele pot exista mai multe
tipuri de relaii interaciuni alelice:
- dominare complet la heterozigoi se manifest alela dominant (de ex., indivizii DD sau Dd
prezint Rh+, iar dd prezint Rh-);
- dominare incomplet la heterozigoi se formeaz un caracter intermediar (de ex., HbAHbA
hemoglobin normal 100% eritrocite normale; HbAHbS anemie form uoar, 50% eritrocite
normale i 50% eritrocite n form de secer; HbSHbS anemie form letal, 100% eritrocite n
form de secer);
- codominare la heterozigoi se manifest ambele alele (de ex., grupa sangvin IV A1B sau A2B).
Manifestarea fenotipic a caracterelor monogenice poate fi influenat i de gene nealele din
acelai grup de nlnuire sau din grupuri diferite interaciuni nealelice:

24

epistazia fenomenul cnd o gen (epistatic) influeneaz activitatea unei alte gene nealele
(hipostatic). De ex., gena h n stare homozigot blocheaz expresia genelor sistemului AB0
fenotipul Bombay:
o persoanele cu genotip HHBO sau HhBO prezint antigeni B pe eritrocite, iar
o persoanele cu genotip hhBO nu prezint antigeni B pe eritrocite.
- aciunea complementar a genelor pentru formarea unui caracter coopereaz diferite gene prin
aciunea concomitent a produilor lor (de ex., hemoglobina A este rezultatul expresiei genelor globinei de pe cromozomul 16 i -globinei de pe cromozomul 11);
- efectul poziiei - activitatea unei gene este influenat de alte gene sau secvene nvecinate;
modificarea secvenelor nvecinate pot duce la inhibarea sau activarea defectiv a genei.
Genotipul se afl sub influena diferitor factori genetici sau negenetici, interni sau externi ce pot
influena capacitatea de manifestare fenotipic a genei:
- penetrana reprezint frecvena cu care o gen se manifest fenotipic la indivizii heterozigoi;
penetrana poate fi complet (toi heterozigoii prezint caracterul dominant) sau incomplet (doar o
parte dintre heterozigoi prezint caracterul dominant);
- expresivitatea reprezint gradul sau severitatea de manifestare fenotipic a unei gene (de ex.,
forme complete sau incomplete ale unui sindrom, forme uoare sau forme grave ale unei patologii).
-

CARACTERE MONOGENICE NON-MENDELIENE


Majoritatea caracterelor monogenice normale sau anormale se transmit dup regulile lui Mendel
avnd o manifestare distinct n dependen de genotipul persoanei, prezentnd i unele excepii
determinate de interaciuni cu alte gene sau cu factorii de mediu penetrana incomplet sau
expresivitatea variabil. Dar exist caractere ce prezint abateri de la regulile mendeliene care sunt
determinate de fenomene genetice neobinuite:
- instsbilitatea genelor;
- amrentarea genomic;
- disomia uniparental;
- mozaicizmul,
- ereditatea mitocondrial.
Penetrana reprezint frecvena cu care o gen se manifest fenotipic la indivizii heterozigoi.
Penetrana poate fi complet (toi heterozigoii prezint caracterul dominant) sau incomplet (doar o
parte dintre heterozigoi prezint caracterul dominant). Cauzele non-penetranei unei gene pot fi
interaciunile genelor nealele de tipul epistaziei, efectului poziiei sau pot fi factorii de mediu.

Un exemplu de non-penetran a genei B, fenotip Bombay, n


cazul epistaziei recesive ntre genele H i ABO.

Expresivitatea reprezint gradul sau severitatea de manifestare fenotipic a unei gene la diferii
indivizi cu acelai genotip. Cauzele expresivitii variabile pot fi interaciunile genice sau factorii de
mediu i se manifest prin forme complete sau incomplete ale unei patologii, forme uoare sau forme
grave ale unei patologii, etc..

25

Expresivitatea variabil a genei polidactiliei la indivizii


heterozigoi: I-1 are ase degete la piciorul drept, II-4 are cte
ase degete i la mni i la picioare, II-5 numai la picioare, III-4
la piciorul stng, III-5 la mna i piciorul stng, III-6 la
ambele mni i III-8 are ase degete numai la mna dreapt.

Instabilitatea genelor n irul generaiilor este determinat de mutaii dinamice. Ele sunt
reprezentate de creterea numrului de copii ale unor repetri trinucleotidice situate n proximitatea sau
chiar n interiorul genelor structurale, cu ocazia diviziunilor pe care le realizeaz celula purttoare.
Exist variaii ale numrului de repetri trinucleotidice:
- polimorfisme ADN benigne;
- premutaia secvena de ADN devine instabil, dar nu determin un fenotip patologic;
- mutaia complet - prin expansiunea repetrilor determinnd fenotip patologic.
Purttorii premutaiilor sunt fenotipic normali. Expansiunea repetrilor are loc n gametogenez.
Astfel unii din gameii purttorilor sntoi vor conine mutaia complet, care la descendeni va
produce un fenotip patologic.
n gametogeneza ultimilor, din cauza instabilitii acestor repetri, vor aprea expansiuni adiionale,
care la urmtoarea generaie va produce un fenotip patologic mai grav (=fenomenul de anticipaie).

Mutaie
complet

Amprentarea genomic este un proces genetic implicat n reglarea activitii genelor, n special
prenatal, controlnd dozajul genetic prin inactivarea selectiv a genelor de origine matern sau patern.
26

Mecanismele amprentrii gnelor nu sunt pe deplin elucidate. Unul din acestea ar putea fi determinat de
metilarea ADN proces asociat cu inactivarea genei.
De exemplu, gena Igf-2 ce controleaz sinteza
unuia dintre factorii de cretere poate fi implicat n
procesul de cretere (talia). Mutaia acestei gene este
implicat n apariia nanismului, n cazul dac este
motenit pe linie patern. Astfel indivizii heterozigoi
(Na) pot avea fenotip normal dac gena mutant (a)
este de origine matern sau sunt cu hipostatur (pitici)
dac gena (a) are origine patern. Duplicaia genei
normale (N NNa) poate cauza supracreterea dac
este motenit pe linie patern sau prezint fenotip
normal dac motenete pe linie matern.
Disomia uniparental este fenomenul, cnd
zigotul conine doi cromozomi omologi motenii de la
acelai printe. Ea apare ca rezultat al nedisjunciilor cromozomilor n meioza matern sau patern,
urmat de eliminarea postzigotic a cromozomului supranumerar de cealalt origine. O alt cauz a
apariiei disomiei uniparenatale ar putea fi translocaia robertsonian. Astfel, persoanele cu disomie
uniparental motenesc de la un singur printe alelele pentru anumite caractere, nlnuite cu
cromozomul disomic. Dar, n dezvoltare exist o contribuie difereniat a informaiei din cromozomii
materni i paterni (dozaj genetic). Totodat prezena ambelor genomuri parentale este esenial pentru
dezvoltarea feilor viabili. Necesitatea existenei materialului genetic a ambilor prini a fost
demonstrat prin consecinele disomiei uniparentale. Sindromul Prader Willi i sindromul Angelman
sunt determinate de amprenarea genei Snrpn cu localizare n cromozomul 15q11-13. n cazul
sindromului Prader Willi s-a identificat disomia uniparental matern a cromozomului 15, care se
manifest fenotipic prin retard mintal moderat, obezitate i hipostatur. Sindromul Angelman rezult
prin disomie uniparental patern, manifestndu-se fenotipic prin retard mintal sever i ataxie. n
disomia uniparental matern a cromozomului 7 au fost depistat retard de cretere.

CARACTERE EREDITARE NORMALE POLIGENICE


Caracterele poligenice sunt controlate de mai multe gene nealele, care acioneaz independent unele
de altele (nu exist relaii de dominan / recesivitate sau epistazie), care, de regul, au efecte cantitative
mici aditive. Caracterul poligenic prezint o
distribuie continu n populaie (distribuie
normal gaussian) i nu exist clase
fenotipice distincte, specifice transmiterii
monogenice. Fiecare individ din populaie
difer, uneori aproape imperceptibil, de toi
ceilali. Expresia caracterelor poligenice
este influenat de mediu, de aceea pot fi
numite caractere multifactoriale. Exemple
de caractere poligenice normale pot fi
menionate: distribuia pigmentaiei pielii,
talia,
masa
corpului,
inteligena,
Modelul de motenire a pigmentaiei tegumentelor la om
dermatoglifele, etc.
pe exemplul a trei perechi de gene

27

Culoarea pielii depinde de mai muli factori: grosimea i


transparena epidermei; starea circulaiei la nivelul vaselor
subepidermice; cantitatea de pigment melanic i distribuia acestuia
(cel mai important). Cantitatea de melanin din piele este
determinat de 2-6 perechi de gene. Modelul de motenire a
pigmentaiei tegumentelor este reprezentat n figurile alturate.
Fiecare alel dominant (A, B, C) determin sinteza unei anumite
cantiti de melanin, iar alele recesive (a, b, c) sunt inactive.
Cantitatea de melanin, i ca rezultat intensitatea pigmentaiei,
depinde de sumarea dozelor genelor dominante, fenomen numit
poligenie aditiv (cumulativ).
Distribuia normal (Gaussian) n populaie
pigmentaia pilelii

VALOAREA CUNOATERII CARACTERELOR EREDITARE NORMALE


Din punct de vedere teoretic, cunoaterea ereditii caracterelor normale la om permite:
demonstrarea valabilitii legilor lui Mendel;
studiul funciei genice;
evidenierea unor fenomene genetice cunoscute la alte specii (himerele, dubla fecundare, recombinarea
genetic, nedisjuncia meiotic);
investigarea localizrii genelor pe cromozomi i stabilirea "hrilor genetice" (utilizarea caracterelor
normale ca marcheri i analiza fenomenelor de nlnuire genic ntre genele normale care le determin
i alte gene, normale sau anormale);
elucidarea unor aspecte de genetic a populaiilor.
Din punct de vedere practic, cunoaterea ereditii caracterelor normale la om permite:
elaborarea testelor de identificare a persoanei (fiecare individ are o combinaie specific, unic, de
caractere ereditare normale - ex. dermatoglife unice, combinaie HLA specific, etc.);
stabilirea compatibilitatii ntre donator i recipient (grupe sanguine - pentru transfuzii; grupe tisulare,
sanguine - pentru transplanturi);
expertiza filiaiei i paternitii, diagnosticul gemenilor monozigoi (concordan 100% pentru
caracterele monogenice, 95% pentru dermatoglife) i dizigoi;
elaborarea testelor de diagnostic n diferite boli:
diagnosticul unor afeciuni prin studiul nlnuirii genelor anormale cu anumite gene normale
(ex. elipsocitoza - locus nlnuit cu locusul Rh);
relaii ntre sistemul HLA i predispoziia sau rezistena fa de anumite boli;
prezena unor modificri ale dermatoglifelor n unele anomalii cromozomice (de ex. sindromul
Down - pliu palmar transvers unic, triradius axial t' sau t", exces de bucle cubitale).

28

CURS 10
STUDIUL CARACTERELOR EREDITARE
Caracterele ereditare normale sau anormale (bolile genetice) se caracterizeaz prin determinism
monogenic, poligenic sau multifactorial. De regul, determinismul genetic al caracterelor se stabilete
odat cu formarea genotipului individului la fecundare. Astfel, caracterele ereditare au un ir de
particulariti prin care se deosebesc de cele neereditare:
- sunt produse prenatal;
- au manifestare congenital;
- se transmit genealogic;
- sunt familiale;
- sunt concordante la gemenii monozigoi;
- se asociaz cu marcheri genetici;
- au o distribuie populaional specific.
De fapt aceste particulariti luate fiecare n parte, nu au o valoare absolut deoarece unele dintre ele se pot
ntlni i la caracterele i bolile neereditare dar, atunci cnd ele se asociaz mai multe deodat la un
caracter, semnific, de obicei, natura ereditar.
PARTICULARITILE CARACTERELOR EREDITARE
1. Determinismul genetic
Fiecare caracter ereditar este determinat de interaciunea genotip factorii de mediu. Gena sau
genele motenite determin un caracter fenotipic prin:
- sinteza unor proteine specifice (caracter elementar);
- realizarea funciei specifice a proteinei la nivel de celul i/sau esut;
- manifestarea unui anumit caracter (normal sau patologic) la nivel de organism caracter
fenotipic.
2. Determinismul prenatal
Constituia genetic a fiecrui individ se stabilete n momentul formrii zigotului, iar fenotipul se
formeaz prin expresia difereniat a genelor motenite (caractere de specie, caractere normale individuale,
anomalii). Caracterele ereditare sunt determinate pn la natere, dei se pot manifesta la diferite etape ale
ontogenezei. Dar, n perioada prenatal, organogeneza poate fi influenat i de factorii mediului,
producnd anomalii de dezvoltare neereditare (de ex., fenocopiile).
3. Manifestarea congenital
Manifestarea congenital reprezint prezena caracterului sau a bolii nc de la natere. Majoritatea
caracterelor i bolilor ereditare sunt prezente la natere, dar exist i excepii, cnd ele se manifest mai
trziu la o anumit vrst, mai precoce sau mai tardiv (de ex., hipodonia, miopatia, coreea Huntington
etc.). Dar, exist i afeciuni neereditare cu manifestare congenital (de ex., fetopatia rubeolic, fetopatia
alcoolic, boala constriciilor amniotice).
4. Transmiterea genealogic
Transmiterea genealogic reprezint motenirea unui caracter de la prini i transmiterea lui la
descendeni. Este cunoscut c caracterele i bolile ereditare se transmit din generaie n generaie. Dar
exist i unele care nu se transmit:
- datorit decesului precoce a persoanelor afectate (bolnavii cu hemoglobinopatii severe);
- datorit sterilitii persoanelor afectate (de ex., sindromul Morris - testicul feminizant);
- apariia unor mutaii noi care ar putea s se transmit generaiilor urmtoare;
- boli recesive rare.
Exist i boli neereditare care se pot transmite de la o generaie la alta (de ex., transmiterea mam - ft a
sifilisului, SIDA etc.).
Analiza transmiterii genealogice este un lucru esenial n stabilirea naturii ereditare a unui caracter
sau a unei boli deoarece transmiterea ereditar se face dup nite reguli stricte, matematice (ex: legile lui
29

Mendel), n timp ce transmiterea neereditar are un caracter aleator, n funcie de condiiile momentane de
mediu.
5. Distribuia familial
Distribuia familial reprezint frecvena crescut a anomaliei / caracterului la membrii nrudii ai
aceleiai familii, comparativ cu frecvena din populaia general (concentrare familial a caracterului).
Majoritatea bolilor ereditare prezint o net distribuie familial, dei exist i boli ereditare cu apariie
sporadic (de ex., anomaliile cromozomice care apar sporadic deoarece de obicei determin anomalii de
reproducere). Exist i boli neereditare care pot prezenta distribuie familial atunci cnd membrii familiei
sufer influena unor condiii similare de mediu (de ex., gua endemic, tuberculoza, intoxicaiile, unele
infecii etc.).
6. Concordana caracterului la gemenii monozigoi
Caracterele monogenice, pur ereditare sunt totdeauna identice la gemenii monozigoi (100 %
concordan), iar cele neereditare sau multifactoriale pot fi discordante. Cnd concordana unui caracter
este regula, iar discordana excepie, se vorbete despre caractere determinate parial ereditar (caractere
multifactoriale). In cazul caracterelor ecologice, concordana este egal cu discordana la gemenii
monozigoi.
7. Frecvena diferit n populaii diferite
Anumite caractere ereditare prezint frecvene diferite n populaii genetic diferite. Aceasta se
explic prin concentrarea anumitor gene ntr-o anumit regiune. De exemplu:
- deficiena n G6PD (glucozo-6-fosfat-dehidrogenaza) sau unele hemoglobinopatii (de ex.,
sicklemia) sunt mai frecvente n zonele cu malarie, deoarece heterozigoii pentru aceste afeciuni
sunt rezisteni la plasmodiul malariei;
- n izolatele umane (geografice, etnice sau religioase), prin cstorii consangvine se creeaz un
fond crescut de alele comune (de ex., n majoritatea populaiilor din Europa frecvena albinismului
este 1:20000, iar ntr-un izolat din regiunea Bihorului, Romnia este de 1:100).
8. Prezena anomaliilor cromozomice
Toate afeciunile care se nsoesc de anomalii cromozomice de numr sau de structur (vizibile la
analiza cariotipului) sunt anomalii genetice (ereditare). Dar nu toate bolile ereditare se nsoesc de anomalii
cromozomice (de ex., bolile ereditare produse prin mutaii genice sau poligenice se nsoesc de un cariotip
normal). Cariotipul normal nu exclude deci existena unui caracter ereditar anormal la subiectul cercetat.
9. Asocierea cu marcheri genetici
Unele caractere fenotipice anormale se pot asocia cu marcheri genetici specifici uor detectabili, de
obicei caracteristici pentru o familie, la care se refer:
- o anumit secven ADN, reprezentnd o gen normal, localizat n vecintatea genei patologice;
- un microsatelit aflat n vecintatea sau interiorul unei gene patologice;
- un situs de restricie.
Asocierea se poate explica prin urmtoarele fenomene:
- transmiterea nlnuit a genelor ce formeaz haplotip (de ex., asocierea Rh - eliptocitoz);
- o gen favorizeaz apariia unei anumite tulburri (ex. asocierea HLA-B27 - spondilit
anchilozant).
Numai asocierea criteriilor prezentate permite stabilirea naturii ereditare a unui caracter. Criteriile
luate separat, nu au valoare practic.

30

METODE DE STUDIU UTILIZATE N GENETICA UMAN


n genetica uman, pentru a stabili natura ereditar a unui caracter se utilizeaz mai multe metode
ce au ca int urmtoarele:
- analiza materialului genetic cu depistarea direct sau indirect a mutaiilor, analiza marcherilor
genetici (metode molecular-genetice, metode citogenetice);
- analiza produsului genic primar (proteina), depistarea defectelor de metabolism (metode
biochimice);
- studiul transmiterii ereditare a caracterelor normale i patologice n familie (metoda
genealogic);
- stabilirea ponderii factorilor genetici i factorilor de mediu n geneza unui caracter normal sau
patologic (metoda gemenilor);
- stabilirea structurii genetice a populaiei (metoda populaional-statistic).
METODE MOLECULAR GENETICE
Metodele molecular-genetice sunt bazate pe tehnologia ADN recombinant i include mai
multe tehnici de studiu a secvenei nucleotidelor n ADN i expresiei genice la nivel de ARN. Acestea
au ca scop depistarea genelor normale sau mutante responsabile de un anumit caracter, modificrile
genice asociate cu un anumit fenotip, unele particulariti de organizare a ADN-ului asociate cu anumite
anomalii marcheri genetici (minisatelii, situsuri de restricie, metilarea ADN-lui etc.), analiza
expresiei genelor (expresia specific de esut, ntr-o anumit perioad a ontogenezei, rata expresiei). n
dependen de scopul studiului se pot folosi mai multe metode bazate pe:
- secvenierea ADN;
- tehnica PCR;
- tehnica Southern-blot;
- tehnica Northern-blot, etc.
Analiza acizilor nucleici este util n:
- depistarea purttorilor de mutaii genice;
- diagnosticul prenatal sau postnatal a unor boli genice;
- depistarea genelor de predispoziie la boal;
- analiza filiaiei (maternitate / paternitate);
- stabilirea identitii biologice (criminologie);
- depistarea ADN-ului (ARN-ului) strin n diagnosticul infeciilor.
n figura din stnga se prezint:
A. o familie cu dou generaii, unde ambii prini sunt sntoi
i au 5 copii dintre care doi prezint semnele clinice ale
fenilcetonuriei (afeciune autozomal rcesiv);
B. rezultatele electroforezei produilor PCR a tuturor
membrilor familiei respective; I-1, I-2, II-3, II-5 sunt
heterozigoi (Na), II-2 i II-4 sunt homozigoi dup alela
recesiv patologic (aa), iar II-1 este homozigot dominant dup
alela normal (NN).

31

METODE CITOGENETICE
Metodele citogenetice includ diverse tehnici de analiz microscopic a materialului geneic la
nivel de celul:
- analiza cromozomilor metafazici i prometafazici (cariotiparea);
- teste de citogenetic molecular pe cromozomi interfazci (FISH, mFISH, SKY);
- testul Barr pentru analiza cromatinei sexuale X;
- testul F pentru analiza cromatinei sexuale Y.
Cariotiparea reprezint analiza setului de cromozomi din celulele somatice n diviziune pentru
aprecierea numrului, formei i mrimii cromozomilor, utiliznd diferite tehnici de colorare /
vizualizare. Astfel, analiza plcilor metafazice sau prometafazice permite depistarea diferitor anomalii
cromozomice de numr sau de structur implicate n sindroame plurimalformative, neoplazii, stri
intersexuale.
Analiza cromozomilor interfazici, bazat pe hibridizarea in situ permite stabilirea unor
anomalii cromozomice submicroscopice (microdeleii sau microduplicaii) sau stabilirea poziiei unor
gene n cromozomi.
Testul cromatinei sexuale permite diagnosticul sindroamelor cromozomiale cu implicarea
heterozomilor X sau Y i stabilirea sexului genetic. Cromatina sexual X (corpusculul Barr) poate fi
uor vizualizat pe preparate citologice n interfaz (numrul corpusculilor Barr + un cromozom X =
numrul cromozomilor X n celula analizat).
METODE BIOCHIMICE
Spectrul de metode biochimice presupune analiza produsului primar al expresiei genice
proteina, precum i a metaboliilor controlai de aceast protein. Sunt utilizate metode calitative i
cantitative specifice unui anumit tip de metabolii. Aceste tehnici sunt indicate n:
- diagnosticul unor boli monogenice enzimopatii;
- diagnosticul unor boli multifactoriale;
- stabilirea unei predispoziii la boal.
De exemplu, prin analiza electroforetic a proteinelor serice se poate stabili polimorfismul individual i,
indirect, constituia genetic a individului (genotip homozigot sau heterozigot).
METODA GENEALOGIC
Una dintre particularitile caracterelor ereditare este concentrarea lor familial i transmiterea
de la o generaie la alta. Metoda genealogic presupune analiza familial, identificarea persoanelor cu
un anumit caracter i urmrirea acestuia pe parcursul mai multor generaii. Aceasta este important
pentru stabilirea tipului de transmitere a caracterului i calcularea probabilitii de reapariie a
caracterului ereditar la descendenii unui cuplu.
Studiul genealogic se realizeaz n mai multe etape:
- anamneza familial;
- analiza clinic i paraclinic a membrilor familiei;
- ntocmirea arborelui genealogic;
- analiza tipului de transmitere a caracterului;
- stabilirea genotipurilor persoanelor din familia studiat i calcularea probabilitii de
manifestare a unui fenotip normal sau patologic;
- sfat genetic.
Anamneza familial este primul pas n obinerea informaiilor despre prezena unui anumit
caracter ntr-o familie. De regul, informaia este obinut de la proband (cazul princeps persoana ce
se adreseaz dup sfat genetic). Datele despre structura familiei sunt nregistrate n fie speciale de
consult genetic i sunt completate pe baza informaiilor obinute din analiza familial.
32

Analiza familial include chestionarea rudelor probandului (cel puin 2-3 generaii), analiza
clinic i paraclinic a probandului i a rudelor afectate i sntoase, analiza fielor medicale personale,
efectuarea testelor genetice (n dependen de caz cariotip, cromatin sexual, analiza ADN, studiul
nlnuirii cu marcheri genetici). Toate aceste informaii pe de o parte completeaz istoricul familiei, pe
de alt parte concretizeaz tipul anomaliei sau afeciunii (diagnostic clinic precis). Fiele de consult
genetic includ urmtoarele date:
(a) dac probandul este copil evoluia sarcinii, boli acute sau cronice ale mamei i medicamente
administrate n timpul sarcinii, expunerea la ageni teratogeni sau mutageni; vrsta prinilor; prezena
consangvinitii; naterea la termen sau prematur, durata travaliului, natere natural sau prin manevre
obstetricale; date despre nou-nscut greutatea i talia la natere, scor Apgar; evoluia postnatal.
(b) dac probandul este adult evoluia pubertii, funcia reproductiv (normal sau perturbat:
sterilitate, avorturi spontane, nou-nscui mori sau nou-nscui vii malformai); locul de munc,
expunere la noxe.
Analiza familial este util pentru diferenierea unei anomalii congenitale neereditare de o boal
ereditar propriu-zis.
ntocmirea arborelui genealogic. Arborele genealogic este reprezentarea grafic, cu ajutorul
unor semne convenionale, a rezultatelor anchetei familiale i servete la stabilirea tipului de
transmitere n cazul n care acesta este ereditar.
Stabilirea tipului de transmitere a caracterului n cazul cnd acesta este ereditar, se
efectueaz n conformitate cu criteriile de recunoatere (prezena caracterului n fiecare generaie sau
discontinuitate n transmitere; raportul prezenei caracterului la cele dou sexe). Transmiterea poate fi
monogenic sau poligenic, autozomal, sau lincat cu cromozomii sexuali, determinat de alele
dominante sau recesive. n dependen de tipul de transmitere, se stabilete genotipul persoanelor
sntoase i afectate, se calculeaz riscul de recuren (probabilitatea apariiei anomaliei analizate la
descendeni).
Rezultatele analizei genealogice a familiei stau la baza unui consult genetic adecvat pentru:
- informarea obiectiv a familiei;
- planificarea familiei;
- opiuni pentru diagnosticul prenatal n scop de prevenire a naterii copiilor cu anomalii;
- prevenirea manifestrii unor complicaii n cazul bolilor genetice cu manifestare la adult.
METODA GEMENILOR
Prin analiza comparativ a unui caracter la gemenii monozigoi i gemenii dizigoi se poate
urmri o concordan sau discordan care poate fi asociat cu ponderea factorilor genetici i de mediu
n manifestarea unui fenotip.
Gemenii monozigoi (GMZ) provin din acelai zigot i ca urmare sunt genetic identici. De
regul GMZ, avnd genotip identic, au caractere ereditare asemntoare (concordan) i difer doar
dup caracterele influenate de mediu (discordan).
Gemenii dizigoi (GDZ) sunt gemeni provenii din fecundarea a dou ovule diferite de ctre doi
spermatozoizi, ei difer genetic ca oricare membru al unei fratrii fa de ceilali.
Pentru stabilirea cotei factorilor genetici i celor de mediu n formarea unui caracter, se
calculeaz coeficientul de ereditate (H):
Concordan aGMZ Concordan aGDZ
H
x100%
100% Concordan aGDZ
Concordana GMZ sau GDZ reprezint procentul de asemnare dup un anumit caracter la mai
multe perechi de gemeni (valori statistice veridice). Cu ct raportul este mai apropiat valoric de 100%,
participarea factorilor genetici n determinismul caracterului este mai mare. Coeficientul are valoarea 100%
pentru caracterele pur ereditare (concordana la gemenii monozigoi este de 100%).
La valorile H cuprinse ntre 100-70% factorul ereditar are rol major, preponderent; ntre 70-40%
caracterul este format sub influena mediului dar cu predispoziie genetic; mai puin de 40% - caracterul este
ecologic.
33

n prezent metoda gemenilor se utilizeaz pentru stabilirea rolului factorilor genetici i de mediu n
longevitate, manifestarea talentului, sensibilitatea la medicamente, etc.
Caracterul
analizat
Sexul
ABO
Dermatoglife

Concordana la
GMZ (%)
100
100
95

Concordana la
GDZ (%)
58
65
60

Reumatism

60

34

40

Diabet zaharat

30

16

17

H (%)
100
100
88

Tipul
caracterului
Genetic
Genetic
Genetic
Cu predispoziie
genetic
Ecologic

METODA POPULAIONAL-STATISTIC
Populaia uman reprezint totalitatea indivizilor ce locuiesc pe un anumit teritoriu, ntre care are
loc schimb permanent de informaie ereditar. Structura genetic a unei populaii se poate deosebi de alta
datorit existenei unui genofond particular determinat de suma genotipurilor indivizilor din aceast
populaie. S-a stabilit c genofondul unei populaii este relativ constant de-a lungul mai multor generaii.
Stabilitatea genetic este valabil pentru populaia ideal care se caracterizeaz prin urmtoarele
particulariti:
- este numeroas (peste 1,5 mii indivizi);
- este panmictic (cstorii la ntmplare);
- lipsa fluxului interpopulaional de gene (lipsa migraiilor);
- rata mutaiilor rmne constant;
- lipsa seleciei n favoarea sau defavoarea unui genotip;
- lipsa undelor populaionale.
Echilibrul genetic al unei populaii ideale este caracterizat de legea Hardy-Weinberg, valabil
pentru caracterele monogenice:
1. ntr-o populaie ideal frecvena alelelor rmne constant de-a lungul generaiilor:
p+q=1, unde
p frecvena alelei dominante (A)
q frecvena alelei recesive (a)
2. ntr-o populaie ideal frecvena genotipurilor rmne constant de-a lungul generaiilor:
p2+2pq+q2=1, unde
2
p frecvena homozigoilor dominani (AA)
2pq frecvena heterozigoilor (Aa)
q2 frecvena homozigoilor recesivi (aa).
Factorii care ar putea modifica genofondul populaiei sunt: izolatele, cstoriile consanguine sau
asortative, migraiile, mutageneza, selecia, deriva genic etc.
Valoarea practic a metodei populaional statistice const n cunoaterea genofondului
populaiei, estimarea frecvenei unor alelele mutante, calcularea numrului aproximativ al persoanelor
afectate i purttoare de mutaii patologice etc. Datele statistice pot fi utile n planificarea activitii
instituiilor medicale, iniierea unor programe de profilaxie a patologiilor genetice.

34

CURS 11
INTRODUCERE N PATOLOGIA GENETIC UMAN
Bolile genetice reprezint stri patologice determinate sau condiionate de modificri specifice
ale materialului genetic (mutaii). Bolile genetice sunt numeroase i variate att dup cauza apariiei,
momentul manifestrii, ct i tabloul clinic.
ETIOLOGIA BOLILOR GENETICE

Cauzele producerii bolilor genetice pot fi clasificate n trei grupe:


anomalii cromozomice de numr sau de structur, ce determin un deficit sau surplus al
materialului genetic i ca consecin, n dependen de dezechilibrul genic sindroame
plurimalformative viabile sau letale;
mutaii genice cu efect patologic major, ce determin anomalii calitative sau cantitative n sinteza
unei proteine (enzim, receptor, canal, etc.) i producerea unei boli monogenice sau unui sindrom
monogenic;
mutaii poligenice cu efect patologic minor, dar aditiv, ce reprezint predispoziia la boal, iar
aciunea unor factori de mediu determin apariia unor boli multifactoriale.
Mutaiile reprezint modificri anormale ale materialului genetic la diverese nivele:
- substituii nucleotidice n secvenele codificatoare sau necodificatoare ale moleculei de
ADN;
- deleii sau adiii nucleotidice;
- deleii sau duplicaii a unor fragmente cromozomiale;
- monosomii sau trisomii cromozomiale.

Mutaiile pot afecta att materialul genetic nuclear, ct i ADN-ul mitocondrial; pot afecta
materialul genetic al celulelor generative i se pot transmite genealogic, sau pot afecta materialul
genetic al celulelor somatice realizndu-se o clon celular mutant cu consecine patologice doar
asupra fenotipului purttorului, fr transmitere genealogic.
Mutaiile pot fi ereditare (motenite), manifeste sau nu la alte generaii, sau pot fi de novo spontane sau produse sub aciunea unor factori de mediu mutageni (radiaii, virusuri, noxe profesionale,
diverse substane chimice toxice).
CLASIFICAREA BOLILOR GENETICE
Bolile genetice sunt determinate sau condiionate de mutaii la nivelul moleculelor de ADN
(modificri calitative sau cantitative ale materialului genetic). n dependen de cota de participare a
factorilor genetici bolile genetice se clasific n:
- boli cromozomiale determinate de anomalii de numr sau structur a cromozomilor;
- boli monogenice sau monofactoriale, determinate de mutaii dominante sau recesive, manifestarea
crora nu depinde de anumite condiii de mediu;
- boli poligenice sau multifactoriale care sunt condiionate de mutaii mai multe gene cu efect minor
sau aditiv i determinate de aciunea patologic a factorilor de mediu.

n dependen de perioada ontogenetic de manifestare, bolile genetice pot fi clasificate n:


anomalii sau malformaii congenitale;
boli i sindroame congenitale;
boli i sindroame ale adultului.
Bolile genetice sunt rezultatul modificrii materialului ereditar, dar pot fi:
35

ereditare, cu transmitere genealogic mendelian sau nonmendelian;


neereditare, produse prin mutaii spontane, dar care se pot transmite la generaiile urmtoare;
anomalii de reproducere, ca rezultat al mutaiilor letale sau mutaiilor sterile;
boli genetice ale celulelor somatice, ca rezultat a apariiei postnatale a unei clone celulare mutante.

Specialitii din domeniul geneticii medicale insist asupra clasificrii etio-patogenetice a bolilor
genetice:
boli cromozomiale sau sindroame cromozomiale plurimalformative;
boli monogenice sau moleculare;
boli poligenice sau multifactoriale, boli cu predispoziie genetic;
boli mitocondriale;
boli genetice ale celulelor somatice (boala canceroas);
boli de incompatibilitate materno-fetal.
n prezent sunt cunoscute peste 1000 sindroame cromozomiale. Dup datele Dr. Mc.Kusick au
fost descrise i nregistrate peste 9000 de boli i sindroame monogenice. Luate fiecare n parte, au o
frecven populaional mic, dar n ansamblu reprezint o categorie de patologie uman important, n
special lund n consideraie impactul lor medico-social:
- 50% din toate avorturile spontane cunoscute n primul trimestru de sarcin prezint o anomalie
cromozomial;
-

2-3% dintre nou-nscui au o anomalie congenital major;

0,6% din toi nou-nscuii au o anomalie cromozomial;

50% din toi copii cu retard mintal sever, cecitate sau surditate prezint o cauz genetic;

30% din toi copii spitalizai prezint o maladie genetic;

40-50% din mortalitatea infantil au cauz genetic;

1% din toate cazurile de malignitate sunt direct determinate de factorii genetici;

10% din cazurile comune de cancer (CR de sn, CR de colon sau CR ovarian) au o component
important genetic;

5% din populaia cu vrste < 25 ani va manifesta o maladie genetic;

10% din aduli prezint fie o maladie pur genetic, fie o maladie cu predispoziie genetic.

36

ASPECTE COMUNE N PATOGENEZA BOLILOR GENETICE


Specificitatea mecanismului patogenic al bolii este determinat de caracterul lezrii materialului
genetic, dar se formeaz la nivelul ntregului organism determinnd particularitile individuale de
desfurare a procesului patologic.
n bolile cromozomiale dereglrile fenotipice coreleaz cu gradul de dezechilibru cromozomic,
cu ct mai mult material genetic este implicat n mutaie, cu att mai precoce apar defectele de
dezvoltare n ontogenez i mai grave sunt consecinele. Bolile cromozomiale se caracterizeaz prin
anomalii multiple de dezvoltare (dismorfii cranio-faciale, anomalii scheletice, anomalii cardiovasculare, anomalii ale sistemului nervos, anomalii ale aparatului urinar etc.).
Mecanismele patogenetice n bolile monogenice sunt diverse i depind de caracterul
modificrilor biochimice determinate de mutaie:
Gen mutant (ADN)
ARNm mutant
Protein anormal
Funcie celular dereglat
Simptoame
Patogeneza multor boli ereditare i neereditare poate fi influenat de ali factori interni: starea
sistemului imun i endocrin, vrsta i sexul pacientului, particularitile metabolismului.
Tabloul clinic al bolilor genetice este foarte polimorf. Polimorfismul clinic este definit prin
varietatea manifestrilor clinice i de laborator a unei boli, determinat de:
- heterogenitatea genetic;
- penetrana incomplet a unor gene dominante;
- expresivitatea variabil a genelor patologice, pleiotropie, interaciunea factorilor genetici cu
factorii de mediu.
Cauzele genetice ale polimorfismului clinic sunt determinate de unicitatea biologic a fiecrui
individ. Un rol important n expresivitatea bolii genetice l au factorii de mediu ce pot interaciona cu
cei ereditari la orice etap de dezvoltare prenatal i postnatal.
Bolile cu predispoziie genetic se caracterizeaz printr-un polimorfism mai accentuat, manifestndu-se
prin continuitatea distribuirii de la formele uoare, pn la formele grave.
EREDITATEA I CONSECINELE BOLII
1. Unele mutaii (genice sau cromozomiale) sunt letale, fiind responsabile de moartea prenatal,
perinatal i infantil. Se cunosc peste 150 gene ce provoac moartea prenatal, printre nounscuii mori 1:5 are un defect genetic. Factorii externi cu aciune distructiv (hipoxia, trauma
la natere, intoxicarea, hipotrofia, infeciile) produc mai frecvent moartea copiilor cu genotip
anormal, dect la cei cu genotip normal. Cele mai frecvente cauze ale mortalitii infantile sunt
bolile cromozomice, fibroza chistic, fenilcetonuria, sindromul adreno-genital, hipotireoza.

37

2. Mutaiile patologice, ca factori etiologici, pot fi cauza bolilor cronice. Evoluia cronic i
progresiv n bolile genetice este o caracteristic, cu excepia celor letale.
3. Mutaiile genice se manifest nu numai cu semne specifice, dar i cu diminuarea rezistenei
nespecifice a organismului la bolile asociate, determinnd cronizarea ultimelor.
4. Constituia genetic a pacientului:
- poate modifica eficacitatea msurilor terapeutice,
- poate determina reacie patologic a unor indivizi la anumite medicamente,
- determin un polimorfism n viteza de eliminare sau oxidare a unor preparate
medicamentoase, sau a metaboliilor care pot modifica farmacocinetica unor
medicamente.
5. Unele mutaii sau asocierea lor duc la scderea capacitii organismului de a rezista la
aciunea distrugtoare a factorilor de mediu, astfel i nsntoirea bolnavului va fi
problematic. Aciunea genelor asupra cronizrii proceselor patologie poate fi explicat prin
modificarea direcionrii unor procese biochimice, modificarea statusului hormonal, deficiene
ale rspunsului imun.
PARTICULARITILE BOLILOR GENETICE
Fiecare caracter ereditar este determinat de interaciunea genotip factorii de mediu. Gena sau
genele mutante determin un fenotip patologic prin:
- sinteza anormal a unor proteine specifice (efectul patologic primar al mutaiei);
- dereglarea structurii sau funciei specifice la nivel de celul i/sau esut (efectul patologic
secundar al mutaiei);
- manifestarea unui anumit caracter patologic sau sindrom la nivel de organism simptoamele bolii
(efectul patologic teriar al mutaiei).
Bolile i sindroamele genetice se caracterizeaz prin determinism monogenic, poligenic, multifactorial
sau apar n rezultatul anomaliilor cromozomiale. De regul, determinismul genetic al bolii se stabilete
odat cu formarea genotipului individului la fecundare. Astfel, afeciunile ereditare au un ir de
particulariti prin care se deosebesc de cele neereditare:
- sunt produse prenatal i se pot manifesta congenital sau n orice perioad de via;
- se transmit genealogic i au o agregare familial; dar pot aprea spontan prin mutaii de novo;
- se asociaz cu marcheri genetici (anomalii cromozomice sau secvene nucleotidice specifice);
- sunt concordante la gemenii monozigoi i au o distribuie populaional specific;
- au evoluie cronic, progresiv i recidivant determinate de aciunea permanent a genei
mutante, cu manifestare variabil de la pacient la pacient, chiar i n cadrul aceleai familii;
- se manifest cu modificri patologice a mai multor organe i sisteme, datorit efectului
pleiotrop al genei mutante;
- sunt rezistente la metodele de tratament tradiionale.
METODELE STABILIRII NATURII GENETICE A UNEI BOLI
Pentru a stabili implicarea factorilor genetici n bolile umane i ponderea lor n producerea unei
patologii se urmrete:
- studiul transmiterii genealogice a bolii sau anomaliei i determinarea tipului de motenire,
calcularea riscului de manifestare sau de recuren;
-

evidenierea unor anomalii cromozomice sau mutaii genice ce ar putea fi responsabile de


fenotipul patologic;
38

determinarea defectului biochimic primar la nivel de sintez proteic sau efectele acestuia asupra
unui proces biochimic controlat de gena/proteina modificat.

identificarea unor marcheri genetici specifici asociate cu fenotipul patologic;

calcularea indicelui de ereditate n cadrul patologiei multifactoriale;

studiul distribuiei populaionale a bolilor genetice i calcularea frecvenei genelor patologice,


purttorilor heterozigoi de gene mutante.
BOLI CROMOZOMIALE

Bolile cromozomiale sunt rezultatul unor modificri specifice ale numrului cromozomilor
caracteristic speciei (46 n celulele somatice umane) sau modificri structurale ale acestora. Efectele i
gravitatea anomaliilor cromozomice depind de tipul de anomalie i mrimea dezechilibrului genetic - cu
ct defectul cantitativ este mai mare, cu att consecinele sunt mai grave.
Sindroamele cromozomice prezint modificri fenotipice comune (tulburri de cretere pre- i
postnatal; ntrziere n dezvoltarea psiho-motorie i debilitate mintal; multiple anomalii viscerale,
disgenezii gonadice) i modificri specifice ale cromozomului sau cromozomilor implicai.
SINDROMUL DOWN (TRISOMIA 21)
Sindromul Down este un sindrom plurimalformativ congenital cu incidena medie de 1:700
nou-nscui, dar dependent de vrsta matern:
- la 20 ani 1:1500;
- la 30 ani 1: 900;
- la 35 ani 1: 400;
- la 40 ani 1:100;
- la 45 ani 1:30.
Cauza sindromului Down este trisomia 21:
95% - trisomia 21 omogen liber, avnd ca origine nondisjuncia meiotic;
5% - trisomia 21 mozaic sau translocaional.
Cariotipuri asociate n sindromul Down:
47, XX (XY), +21;
47, XX(XY), +21/ 46,XX(XY);
46, XX(XY), rob (21;13);
46, XX(XY), rob (21;14);
46, XX(XY), rob (21;15);
46, XX(XY), rob (21;21);
46 ,XX(XY), rob (21;22);
46, XX(XY), i(21q).
Manifestrile clinice majore sunt determinate de anomalii multiple de dezvoltare:
- hipotonie generalizat;
- dismorfism cranio-facial;
- malformaii cardiace;
- retard mintal i fizic;
- imunitate sczut;
- risc crescut pentru leucemii.
Evoluie:
- n cazul de malformaii severe decesul n perioada de sugar;
39

n celelalte cazuri evoluia i gradul de retardare mental i somatic depinde de menegementul


medical i social, dar longevitatea este redus.

Riscul de recuren depinde de forma trisomiei i variaz ntre 1 i 100%;


Diagnosticul este bazat pe studiul cromozomilor (cariotip, FISH).
SINDROMUL PATAU (TRISOMIA 13)
Sindromul Patau este un sindrom plurimalformativ congenital cu incidena medie de 1:5000 7000 nou-nscui i dependent de vrsta matern. Cauza: 75% - trisomia 13 omogen liber,
avnd ca origine nondisjuncia meiotic; 20% - trisomia 13 prin translocaii reobertsoniene; 5%
- trisomia 13 forma mozaic. Cariotipuri asociate n sindromul Patau:
47, XX (XY), +13;
47, XX(XY), +13/ 46,XX(XY);
46, XX(XY), rob (13;13);
46, XX(XY), rob (13;14);
46, XX(XY), rob (13;15);
46, XX(XY), rob (13;21);
46 ,XX(XY), rob (13;22);
46, XX(XY), i(13)q.
Manifestrile clinice majore sunt determinate de anomalii multiple de dezvoltare:
- dismorfism cranio-facial: microcefalie, holoprosencefalie, microftalmie, despictur labiopalatin, defecte ale scalpului;
- polidactilie;
- criptorhidie;
- malformaii cardiace;
- retard mintal i fizic;
- imunitate sczut.
Evoluia sdr Patau este determinat de prezena malformaiilor viscerale: 50% din cazuri se
termin cu deces n prima lun de via; 70% - deces naintea vrstei de 6 luni de via, 70% - deces
nainte de 6 luni; 10% - supravieuiesc vrstei de 1 an.
Riscul de recuren depinde de forma trisomiei i variaz ntre 1 i 100%.
Diagnosticul este bazat pe studiul cromozomilor (cariotip, FISH).
SINDROMUL EDWARDS (TRISOMIA 18)
Sindromul Edwards este un sindrom plurimalformativ congenital cu incidena medie de 1:3000
nou-nscui i dependent de vrsta matern. Cauza sdr Edwards este: n 89% din cazuri - trisomia 18
omogen liber, avnd ca origine nondisjuncia meiotic; 1% - duplicaii ale cromozomului 18; 10% trisomia 8 forma mozaic. Cariotipuri asociate n sindromul Edwards:
47, XX (XY), +18;
47, XX(XY), +13/ 46,XX(XY);
46,XX(XY), 18p+;
46,XX(XY), 18q+.
Manifestrile clinice majore sunt deteminate de asocierea anomaliilor multiple de dezvoltare:
- dismorfism cranio-facial;
- stern scurtat,
- criptorhidie;
- malformaii cardiace i renale;
- retard mintal i fizic;
- imunitate sczut.

40

Evoluie: 30% din cazuri deces n prima lun de via; 10% - supravieuiesc vrstei de 1 an cu
retard sever mental i somatic. Riscul de recuren 1%. Diagnosticul este bazat pe studiul cromozomilor
(cariotip, FISH).

SINDROMUL TRISOMIEI 8
Sindromul trisomiei 8 este un sindrom plurimalformativ congenital cu incidena medie de
1:5000 nou-nscui i dependent de vrsta matern, mai frecvent sun afectai indivizii de sex masculin.
Cauza trisomia 8: 90% din cazuri sunt rezultatul unei nedisjuncii postzigotice, determinnd forme
mozaice ale trisomiei 8; 10% - sunt trisomii pariale determinate de rearanjamente strucrurale ale
cromozomului 8 (duplicaii). Cariotipuri asociate n sindromul Patau:
47, XX (XY), +8;
47, XX(XY), +8/ 46,XX;
46, XX(XY), 8p+;
46, XX(XY), 8q+.
Manifestrile clinice majore sunt deteminate de asocierea anomaliilor multiple de dezvoltare:
- dismorfism cranio-facial: frunte proieminent, strabism, epicant, hipertelorism, palatin arcuit,
despictur palatin, buze ngroate, urechi mari malformate;
- contracturi articulare, camptodactilia, aplazia rotulei, pliu palmar transvers unic;
- anomalii ale anusului;
- malformaii cardiace i renale;
- retard mintal i fizic;
- imunitate sczut.
Evoluie: Trisomia 8 total este letal, iar n formele pariale sau mozaice pacienii au
longevitate sczut. Riscul de recuren 1 %. Diagnosticul este bazat pe studiul cromozomilor
(cariotip, FISH).
SINDROMUL TURNER
Sindromul Turner este un sindrom plurimalformativ congenital cu incidena medie de 1:2000
1 : 5000 nou-nscuii de sex feminin. Cauza : 50% - 69% - monosomia X total i omogen, 30-40% forme mozaice i restul cazurilor, mult mai rare, sunt rezultatul unor monosomii X pariale (deleii,
izocromozomi, cromozom X inelar). Cariotipuri asociate n sindromul Turner:
45,X;
45,X / 46,XX;
46, X, Xq-;
46, X, i(X q);
46, X, del(Xp);
46, X, r(X);
Manifestrile clinice majore sunt determinate de anomalii multiple de dezvoltare:
o la nou-nscut piele abundent n exces la nivelul gtului, pterigium coli, limfedem
periferic localizat mai ales pe faa dorsal a piciorului;
o malformaii cardiace (DSA);
o hipostatur disproporionat;
o impubertizm, amenoree primar.
Evoluie: statura final a adultelor este ntre 125-145 cm; intelegena i sperana de via
sunt, n general, normale; tratamentul de substituie cu hormaoni estrogeni de la adolescen induce
dezvoltarea caracterelor sexuale secundare i previne osteoporoza, dar nu influieneaz statura i
infertilitatea. Riscul de recuren 1 %. Diagnosticul este bazat pe studiul cromozomilor (cariotip,
FISH); testul Barr, de regul, este negativ.

41

SINDROMUL KLINEFELTER
Sindromul Klinefelter este un sindrom cu infertilitate masculin, cu incidena medie de
1:1000 nou-nscuii de sex masculin; 1 : 10 din brbaii infertili; 1 : 100 din bieii din instituiile
pentru retard mintal. Cauza: 85% - disomie X total i omogene (47,XXY), 15% - forme mozaice sau
polisomii X totale sau pariale. Cariotipuri asociate n sindromul Klinefelter:
47, XXY
47, XXY / 46,XY
48, XXXY
48, XXYY
49,XXXXY
etc.
Manifestri clinice majore:
o Talie nalt;
o Constituie de tip feminin;
o Ginecomastie;
o Pilozitate sczut de tip feminin;
o Testicule mici (sub 2 cm la adult), incapabile de a secreta testosteron;
o Oligo- sau azoospermie;
o Sterilitate primar;
o Retard mintal moderat.
Evoluie: Tratamentul de substituie cu testosteron induce dezvoltarea caracterelor sexuale
secundare i previne osteoporoza. De regul, indivizii cu sindrom Klinefelter sunt infertili, dar n
cazurile cu mozaicizm ar putea fi fertili. Riscul de recuren 1 %. Diagnosticul este bazat pe studiul
cromozomilor (cariotip, FISH); testul Barr este pozitiv.

Sindromul
Cri-du-chat

Wolf-Hirschhorn

Prader - Willi

Angelman
Williams

Velo-cardio-facial
DiGeorge

Alte sindroame cromozomice


Manifestri clinice majore
5pSindrom plurimalformativ congenital: microcefalie,
deficien mintal, hipertelorizm, epicant, fante
palpebtale de tip antimongolian, ipt specific datorat
malformaiilor laringelui, malformaii viscerale i
scheletice.
4pSindrom plurimalformativ congenital: microcefalie,
hipotrofie staturo-ponderal, dismorfie facial
caracteristic, malformaii cardiace grave, retard
mintal sever.
del (15)(q11-q13), Hipotonie
neonatal,
dismorfie
craniofacial
crs patern
caracteristic, obezitate, hipogonadism, retard mintal
moderat, tulburri de comportament.
del (15)(q11-q13), Microcefalie, retard mintal sever, tulburri de mers i
crs matern
echilibru, absena vorbirii, tulburri de comportament
Del (7) (q11.23)
Dismorfie facial caracteristic, stenoz aortic,
laxitate articular, hipostatur, retard mintal, dereglri
psihice
Del 22(q11.2) sau
Despictur palatin, malformaii cardiace, dismorfie
Del 10(p13)
facial caracteristic, hipoplazia paratiroidei i
timusului.
Cauza

BOLI MONOGENICE
Bolile i sindroamele monogenice sunt strile patologice determinate de mutaii dominante sau
recesive ntr-o singur gen cu efect major, ce determin o sintez anormal a lanului polipeptidic
codificat i, prin efect pleiotrop, anomalii de structur sau funcie celular. Acestea la rndul lor vor
42

determina manifestarea fenotipic cu o simptomatologie specific genei date i diverse simptome


secundare. Patologia monogenic mai este numit monofactorial datorit independenei manifestrii
genelor mutante de factorii de mediu. Dar, factorii de mediu pot modula expresia genic i determina o
expresivitate variabil a bolii la diferii pacieni. O caracteristic a bolilor monogenice este transmiterea
lor genealogic mendelian cu posibilitatea calculrii riscului de recuren. Dup tipul transmiterii
bolile monogenice se clasific n 5 categorii:
- dominante-autozomale
- dominante X-lincate;
- recesive-autozomale;
- recesive X-lincate;
- mitocondriale.
n general bolile monogenice sunt rare i pot aprea att prin mutaii motenite ct i mutaii de
novo. n ansamblu bolile monogenice sunt numeroase (peste 9000 entiti nozologice) i au implicaii
deosebite pe plan medical i social. Majoritatea din ele nu sunt posibil de tratat iar prevenirea lor
necesit teste genetice specifice pentru diagnosticul prenatal.

Boli
Autozomal
dominante
Autozomal
recesive
X-lincate
Y-lincate
Mitocondriale
Total

Distribuia bolilor monogenice n dependen de tipul de transmitere


conform catalogului lui Mc. Kusick
a. 1966
a. 1975
a. 1986
a. 1994
a. 1998
837

1218

2201

4458

531

947

1420

1730

119
1487

171
2336

286
3907

412
19
59
6678

Afeciuni cu transmitere autozomal dominant


Principalele afeciuni cu transmitere autozomal dominant sunt:
hipercolesterolemia familial;
sindromul Marfan;
coreea Huntington;
boala polichistic renal;
neoplazia multipl endocrin;
miotonia congenital Thomsen;
neurofibromatoza Recklinghausen;
retinoblastomul;
sindroamele Wiliams, Noonaan i velocardiofacial;
afeciunile de colagen (osteogeneza imperfecta i sindromul Ehlers-Danlos).
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAL
-

Este cea mai frecvent afeciune cu transmitere autozomal-dominant;


are o inciden de 1 : 500;
etiologia: apare ca urmare a unui defect al
receptorului lipoproteinelor cu densitate
joas (LDL), determinat de mutaia genei
situate n locusul 19p13;
vrsta de debut dup 30-40 ani;
43

a. 2012

8005

19769

495
27
60
8587

1172
59
64
21064

se caracterizeaz prin urmtoarele particulariti clinice:


- xantelasme la nivelul feei, palpebral, xantoame pe tendoanele extensorilor) tendonul lui Achile);
- cardiopatie ischemic precoce (crize anginoase, infarct de miocard);
- deces prematur prin cardiopatie ischemic (50% din brbai decedeaz fr tratament pn la
vrsta de 60 ani);
- valori mari ale colesterolemiei 300-600mg/dl; LDL peste 200mg/dl;
- anamnez familial pozitiv (ali cardiaci n familie);
- diagnostic prenatal prin analiza ADN.
-

SINDROMUL MARFAN
Sindrom autozomal-dominant ce afecteaz esutul conjunctiv cu expresivitate variabil, dependent
de factorii de mediu;
are o inciden de 1 : 10000 1 : 15000;
etiologia: apare ca urmare a unei mutaii n gena fibrilinei care este situat n locusul 15q21;
debuteaz n primii ani de via prin:
- creterea rapid a membrelor cu aspect de arahnodactilie;
- subluxaia de cristalin, cataract, strabism,
- articulaii laxe cu scolioz i cifoz;
- pectus excavatum sau carinatum;
- afeciuni cardiace (anevrism de aort);
sperana medie de via 40-50 ani;
diagnosticul presiptomatic se bazeaz pe analiza ADN.

COREEA HUNTINGTON
Afeciune neurovegetativ cu transmitere atozomal-dominant ce se manifest la indivizii de peste
30-40 ani;
are o inciden de 1 : 18000;
etiologia: apare ca urmare a unei mutaii dinamice n gena ce codific proteina huntingtina, situat
n locusul 4p16.3;
mutaia produce atrofia de nucleu caudat, putamen i globus palidus;
manifestri clinice majore:
- tulburri neurologice motorii progresive (coree, distonie);
- n timp apar tulburri de personalitate i demen;
decesul se produce la 15-20 ani de la debutul clinic;
agregare familial, afecteaz mai frecvent brbaii;
diagnosticul presiptomatic se bazeaz pe analiza ADN.
ADPKD
Boala Polichistic Renal de tip Autozomal Dominant este o afeciune multisistemic, caracterizat
prin scderea rezistenei esutului conjunctiv i astfel apar modificri structurale ale organelor
supuse stres-ului presional: tubii nefronali, conducte biliare, perete vascular, ducte pancreatice,
aparat valvular cardiac;
are o inciden de 1 : 1000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena PKD1 situat n locusul 16p13.3 (85%) sau PKD2
din locusul 4q21-22 (15%);
manifestri clinice majore:
- dezvoltarea progresiv i difuz de chiti renali multipli, bilaterali, n toate segmentele tubilor
uriniferi;
- asocierea variabil cu alte anomalii extrarenale (cardiovasculare, digestive) - n special chiti
hepatici;
- manifestat de obicei la adult i evolund frecvent spre IRC;
44

6-10% din pacienii cu IRCT, admii n dializ, au ADPKD;


vrsta medie la care se atinge IRCT este 55 ani, dar exist variaii individuale;
diagnosticul presimptomatic se bazeaz pe analiza ADN.
MIOTONIA CONGENITAL THOMSEN
Afeciune muscular nondistrofic cu transmitere autozomal-dominat i manifestare congenital;
frecvena 1:20000-50000 nou-nscui;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena ce codific canalul de clor tip 1 din muchii
scheletici (localizare 7q35);
manifestri clinice majore:
- afectarea muscular n special la nivelul centurilor scapular i pelvian;
- slbiciune muscular, astenie fizic marcat;
diagnosticul este susinut prin electromiogram;
diagnosticul prenatal bazat pe teste ADN.
NEUROFIBROMATOZA RECKLINGHAUSEN
Este o afeciune cu transmitere autozomal-dominant cu expresivitate variabil;
are o inciden de 1 : 3000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n proteina neurofibromina o GTP-az ce regleaz
expresia proteinelor RAS, acionnd ca o protein supresoare de tumori; gena NF1 este situat n
locusul 17q11.2;
debutul clinic n copilrie i pubertate, boala evolueaz n timp;
manifestrile clinice majore:
- prezena de pete cafe au lait cutanate ce apar nc din copilrie;
- neurofibromatoz cutanat i subcutanat;
- modificri ale irisului noduli Lisch;
- tumori benigne pe traiectul unor nervi;
- anomalii de cretere i dezvoltare, retard mental, HTA secundar (frecvent de natur renal
displazie de arter renal);
copii cu neurofibromatoz au un risc crescut pentru leucemia mielomonoclonal tipul juvenil i
pentru mielodisplazie;
testul prenatal sau presimptomatic este bazat pe analiza ADN.
RETINOBLASTOMUL
Este cea mai frecvent tumor intraocular cu transmitere autozomal-dominant, exprimat n
copilrie;
are o inciden de 1 : 18000 1 : 30000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena RB1, localizat n 13q14.3, produsul creia
intervine n reglarea ciclului celular i a transcripiei;
manifestri clinice majore:
- tumoare embrionar cu origine n celulele retinei;
- la aduli se asociaz cu alte neoplazii sarcomul osteogenic, sarcoamele de pri moi sau
melanoamele;
- diagnostic prenatal se bazeaz pe testele ADN.
OSTEOGENEZA IMPERFECT (TIP I IV)
Este o afeciune cu transmitere autozomal-dominant cu expresivitate variabil ce determin o
predispoziie la deformaii scheletice i fracturi osoase n urma unor traumatisme minime;
are o inciden de 1 : 10000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena ce codific pentru sinteza colagenului tip I (locus:
17q21.31-q22) sau n alte gene ce codific lanurile procolagenului;
manifestri clinice majore:
45

Tip I (Boala Lobstein) forma uoar;


- fragilitate osoas;
- sclere albastre;
- surditate presenil;
Tip II (Boala Vrolik) forma sever, letal n perioada neonatal;
- fracturi osoase;
- deformaii scheletice;
- sclere de culoare nchis;
Tip III fracturi prezente la natere;
- deformaii osoase progresive;
- hipostatur;
- sclere albastre;
- tulburri ale dentiiei;
- surditate;
Tip IV deformaii osoase uoare sau moderate;
- susceptibilitate la fracturi;
- surditate;
- sclere de culoare normal;
- anomalii ale dentiiei;
diagnosticul prenatal prin teste ADN.

SINDROMUL EHLERS-DANLOS
Reprezint un grup de boli genetice ale esutului conjunctiv cu transmitere autozomal-dominant;
are o inciden de 1 : 5000 1 : 50000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena ce codific colagenul tip V (2q31);
manifestri clinice majore:
- manifestri cutanate aspectul hiperextensibil (cutix laxa); textur moale, catifelat; apariia
unor escare atrofice i a echimozelor;
- manifestri articulare hipermobilitate articular;
- cifoscolioz;
- anomalii oculare keratoconus; sclere albastre; subluxaie de cristalin; dezlipirea retinei;
- complicaii ruptura prematur a membranelor i hemoragiile pre- sau postpartum;
- ruperea vaselor ce reprezint o cauz frecvent de deces;
diagnostic prenatal pe baza testelor ADN.

AFECIUNI CU TRANSMITERE AUTOZOMAL-RECESIV


Principalele afeciuni genetice cu transmitere autozomal-recesiv sunt:
fenilcatonuria;
fibroza chistic;
boala Wilson;
surditatea nonsindromic recesiv;
hemoglobinopatiile;
atrofia muscular spinal acut infantil;
atrofia muscular progresiv a copilului;
trombastenia Glanzmann.

FENILCETONURIA
Reprezint o hiperfenilalaninemie sever cu transmitere autozomal-recesiv;
are o inciden de 1 : 10000 nou-nscui;

46

etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena pentru fenilalaninhidroxilaz (PAH), cu localizare
12q24.1;
manifestri clinice majore:
- tulburri neorologice;
- retard somatic i mintal;
- demen n formele netratate;
- miros particular al urinei;
- dermatit cronic descuamativ;
boala se manifest n copilrie i depinde de dietoterapie (excluderea fenilalaninei din produsele
alimentare);
diagnosticul prenatal sau neonatal prin dozarea fenilalaninei plasmatice sau analiza ADN.

FIBROZA CHISTIC (MUCOVISCIDOZA)


- Reprezint o alterare a funciei exocrine cu producerea de secreii glandulare vscoase ce conduc la
afectare pulmonar cronic i insuficien pancreatic; patologia are o transmitere autozomalrecisiv;
- are o inciden de 1 : 2500;
- etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena CF (locus 7q31.2) ce codific pentru un canal de
clor la nivelul polului apical al celulelor apicale;
- manifestri clinice majore:
- la nivel-pulmonar infecii recurente cu evoluie spre insuficien pulmonar;
- la nivelul pancreasului obstrucia canalelor pancreatice, deficiena enzimelor pancreatice i ca
rezultat afectarea digestiei;
- creterea concentraiei de sodiu i clor n secreiile sudorale;
- tulburri gastrointestinale ileus meconeal (la 10-25% dintre nounscuii cu FC);
- absena congenital bilateral a vaselor deferente la biei (95% de cazuri);
- supravieuirea medie este de 25 30 de ani;
- diagnosticul prenatal prin teste de ADN.

BOALA WILSON
reprezint o degenerescen hepato-lenticular cu tansmitere autozomal recesiv.
Are o inciden 1 : 100000;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena localizat pe crs. 13q14.3, ce determin tulburri n
transportul cuprului cu scdere a capacitii de ncorporare a cuprului n ceruloplasmin i scderea
secreiei biliare; cuprul se acumuleaz n ficat producnd leziuni la acest nivel; se depune n creer,
rinichi.;
manifestri clinice majore:
- debuteaz la persoanele tinere cu afectare hepatic i tulburi neurologice;
- afeciunea hepatic are o evoluie ciclic cu caracterul unei hepatopatii cronice (icter, astenie,
inapeten) cu citoliz;
- poate asocia anemie hemolitic;
- manifestrile neurologice tremor fin al extremitilor, coree, dizartrie, imposibilitate de a
coordona micrile;
- manifestri psihice cu alterarea personalitii (schizofrenie), scderea performanelor colare la
copii;
- semn specific prezena inelului Kayser-Fleischer.
supravieuirea depinde d gradul de afectare a ficatului; ciroza hepatic cauz frecvent de deces;
diagnosticul prenatal prin teste de ADN.
HEMOGLOBINOPATIILE
Reprezint un grup heterogen de patologii, cu transmitere autozomal - recesiv, determinate de
diverse variante ale Hb, care induc tulburri prin afectarea structurii i funciei hematiilor;
47

etiologia: apar ca urmare a unor mutaii n dou familii de gene:


- familia alfa-globinelor localizat pe crs. 16p, format din 4 gene funcionale ( 2, 2, 1, 1);
- familia beta globinelor pe crs. 11p, cuprinde 5 gene funcionale
- se disting diferite forme de hemoglobinopatii - hemoglobinoza S, hemoglobina C, talasemiile.
Hemoglobinoza S apare ca urmare a nlocuirii acidului glutamic din poziia 6 a lanului cu
valina. Boala se poate manifesta la homozigoi i heterozigoi prin anemie drepanocitar. Clinic
copiii aa sunt icterici, cu ntrziere de cretere, dureri osoase, peste 50% au splenomegalie. Pacienii
prezint eritrocitele n form de secer, viscozitate sanguin, staz i risc de tromboze vasculare.
Diagnosticul pe baza datelor clinice, hematologice, electroforezei Hb, diagnosticul prenatal analiza
ADN.
Hemoglobina C apare prin nlocuirea acidului glutamic (6, lan ) cu lizina, se caracterizeaz
printr-o solubilitate sczut, clinic anemie hemolitic grav, splenomegalie i icter cutaneo-mucos,
hematologic-eritrocite n int.
Talasemiile detrminate de afectarea sintezei lanului sau a Hb, ce reprezint modificri
cantitative. n dependen de defectul molecular se manifest de la forme uoare pn la forme grave,
letale de anemie. Beta talasemia major Cooley - se manifest precoce, n primul an de via cu retard
de cretere, paloare a tegumentelor, hepatosplenomegalie compensatorie, hiperplazia medular, n
special la nivelul oaselor feei i craniului - aspect caracteristic de craniu n perie, la nivelul oaselor
lungi - subiere a corticalei cu risc crescut de fractur, pacienii fac uor infecii intercurente.
Diagnosticul clinic, hematologic, anamneza familial (prini heterozigoi cu semne uoare de anemie),
diagnostic prenatal teste ADN.
-

ATROFIA MUSCULAR SPINAL ACUT INFANTIL


Afeciune grav, ce se manifest precoce prin hipotonie muscular, retracia spaiului intercostal n
timpul inspiraiei, tuse ineficiente, areflectivitate, cu transmitere autozomal-recesiv;
etiologia: apare ca urmare a unui defect n gena localizat pe crs. 5q13.2;
moartea survine n primii doi ani de via;
diagnosticul pe baza biopsiei musculare i electromiogramei;
diagnosticul prenatal pe baza testelor ADN.
AFECIUNI CU TRANSMITERE RECESIV X LINCAT

DISTROFIA MUSCULAR DUCHENNE (DMD) afeciune cu debut n prima copilrie, de obicei


sub vrsta de 5 ani, cu afectarea muchilor centurilor, se asociaz cu retard mental. Criteriile de
diagnostic sunt dozarea creatinkinazei (crescut), electrocardiograma i biopsia muscular.
DISTROFIA MUSCULAR BECKER (DMB) afeciune cu debut n a doua copilrie, fiind
asemntoare simptomatic cu DMD, dar cu o supravieuire mai mare i fr retard mental.
DMD i DMB se transmit XR, gena afectat fiind localizat pe braul p (Xp21). Proteina codificat de
aceast gen se numete distrofina: face parte din clasa spectrinei (din citoscheletul celular).
Studiile electroforetice in vitro pe biopsiile musculare de la pacienii cu DMB au artat o
diminuare a conductanei clorului sarcolemal. Repausul n conductana clorului pentru fibra muscular
sintetic contribuie la repolarizarea potenialelor de aciune n esutul dat, iar reproducerea lor conduce
la instabilitate electric.
Astfel, genele canalelor de clor din fibra muscular par a fi cele mai indicate n explicarea
acestor modificri.
Fiind o maladie XR, se manifest n special la biei, mama fiind purttoare de gen patogen. n
astfel de cazuri diagnosticul prenatal se poate face prin detectarea genei mutante n vilozitile coriale,
folosind RFLP intra- i extragenic.

48

HEMOFILIILE A I B
Hemofiliile A i B sunt afeciuni XR; genele
mutante responsabile sunt localizate pe braul lung
(Xq28), avnd ca urmare deficitul factorilor VIII i
respectiv IX, componente ale cii intrinseci a
coagulrii.
Boala afecteaz 1 din 5000 de biei.
Hemofilia A este de 10 ori mai frecvent ca
hemofilia B.
Aspectul clinic al hemofiliei A depinde de gradul de activitate a factorului VIII i se exprim n
4 forme:
Forma
Concentraia
Manifestri clinice
factorului VIII
Sever
Sngerare spontan i dup circumcizie. Hemartroze
1%
repetate. Deformri articulare.
Moderat
1-5%
Hemartroze ocazionale. Deformri articulare rare.
Uoar
5-20%
Sngerare rar: dup intervenii chirurgicale,
stomatologice, dup traumatisme.
Ascuns
Se includ i purttoarele genei patologice.
25%
Diagnosticul prenatal al hemofiliilor se bazeaz pe stabilirea sexului, analiza ADN n vilozitile
coriale i dozarea factorului VIII sau IX n sngele fetal.
PROFILAXIA BOLILOR EREDITARE
Profilaxia primar const n evitarea concepiei sau naterii copilului cu anomalie grav,
incurabil prin diverse msuri ce intesc:
micorarea procesului mutaional;
limitarea concepiei n cazurile cu risc 100% sau ntreruperea sarcinii dup diagnosticul
prenatal;
diagnosticul preimplantiv cu selecia produilor de concepie mutani n cazurile de
fertilizare in vitro;
terapie genic germinal sau somatic cu revenirea la genotip normal.
Profilaxia secundar cuprinde o serie de inrervenii pentru prevenirea / atenuarea maniferstrii
complicaiilor la indivizii cu mutaii patologice:
msuri terapeutice perinatale i n timpul sarcinii;
diagnosticul preclinic cu aplicarea terapiei de prevenire a complicaiilor;
excluderea factorilor ce pot provoca apariia bolilor cu predispoziie genetic;
terapie de substituie / dietoterapie / transplant de esut .... pentru fiecare caz n
particular.
Profilaxia eficient poate fi relizat n cadrul unui centru specializat de consult genetic.
Diagnosticul prenatal cu scop de prevenire a bolilor genetice sau AC grave are ca scop
depistarea anomaliilor congenitale sau a bolilor genetice la embrion sau ft. Se realizeaz n cazurile de
sarcini cu risc teratogen sau genetic (anamnez familial sugestiv) i poate fi ca metod de screening
populaional.
Diagnosticul prenatal necesit respectarea principiului de siguran i precizie i se poate
realiza numai n cadrul unui centru specializat de consult genetic.

Strategii de terapie a bolilor genetice


Pentru atenuarea consecinelor patologice a unor mutaii se aplic diverse strateii de tratament
simptomatic, corecie a tulburrilor metabolice, ce acioneaz asupra proteinei deficitare, transplante
49

de organe, terapii celulare. Terapia genic are ca scop corecia cauzei bolii mutaiei genice.
Terapia genic reprezint modificarea genetic a celulelor afectate prin substituia genei mutante
amorfe cu o gen normal sau inhibarea unei gene patologice sau ARNm mutant. Terapia genic
poate fi realizat la nivelul celulelor somatice sau celulelor germinale (interzis). Boli candidate
pentru terapia genic sunt:
- Deficiena ADA SIDC (deficiena de adenozindezaminaz implicat n
sindromul imunodificienei combinate);
- Hemofilia B;
- Fibroza chistic;
- FH (hipercolesterolemia familial);
- Cancerul.

SFATUL GENETIC
Sfatul genetic este actul medical specializat i complex prin care se determin probabilitatea
(riscul) ca o boal ereditar sau parial ereditar s se manifeste sau s reapar ntr-o familie. Sfatul genetic
este atribuia medicului genetician i se acord la solicitarea persoanelor interesate, deoarece prin
calcularea riscului i stabilirea conduitei ulterioare, sfatul genetic are rol important n profilaxia bolilor
genetice. Dup calcularea riscului de recuren i comunicarea acestuia, trebuie avut n vedere
posibilitatea efecturii diagnosticului prenatal, precum i ntreruperea sarcinii cnd se consider c riscul
este prea mare.
Necesitatea actual a sfatului genetic este determinat de 2 condiii:
1. Diferitele substane poluante din mediul urban, precum i iradierea accidental, profesional sau
diagnostic n timpul sarcinii pot duce la apariia de mutaii i deci a bolilor genetice. Datorit creterii
frecvenei bolilor genetice, cresc i morbiditatea, mortinatalitatea i mortalitatea infantil prin boli
genetice.
2. Datorit interveniei medicinii moderne persoanele cu boli genetice pot supravieui pn la vrsta de
adult i deci pot transmite boala genetic la descendeni.
Ideal, sfatul genetic ar trebui solicitat n urmtoarele situaii:
* Premarital:
1. Unul sau ambii parteneri au anomalii congenitale sau boli genetice;
2. Parteneri sntoi, dar unul sau ambii au rude apropiate cu boli genetice (frai, prini, bunici,
unchi-mtu, verior);
3. Parteneri sntoi, dar doresc o cstorie consangvin;
4. Persoane expuse accidental, profesional sau terapeutic la ageni teratogeni sau mutageni;
5. Cupluri care se cstoresc trziu sau planific s aib copii la mai mult de 35 ani;
* Postmarital (cele mai frecvente solicitri):
1. Naterea unui copil malformat sau cu o boal genetic;
2. Cupluri cu copii nscui mori sau avorturi spontane repetate;
3. Femei care necesit:
a. doze mari de medicamente care pot afecta dezvoltarea ftului;
b. femei care au avut boli infecioase virale (rubeol);
c. radiografii pe micul bazin, vaccinri.
Sfatul genetic se acord n centre specializate de genetic medical, de ctre o echip complex de
specialiti (genetician, obstetrician, pediatru, chirurg pediatru, endocrinolog etc). Centrul trebuie s fie
dotat cu un laborator bine utilat pentru a efectua investigaiile necesare unui diagnostic corect i complet.
Metodologia sfatului genetic
Stabilirea diagnosticului precis clinic i paraclinic (date biochimice, radiografii, echografie, ECG,
EEG etc) ;
Stabilirea autenticitii filiaiei i a caracterului genetic al bolii prin:
50

Ancheta familial, care va ncerca att depistarea bolnavilor, ct i a purttorilor de gen


anormal pe baza analizei arborelui genealogic;
Explorri genetice (msurtori antropometrice, cromatin sexual, cariotip, Southern blot, PCR
etc).
Cunoaterea datelor din literatura de specialitate, mai ales frecvena de apariie a bolii n populaia
respectiv.
Calcularea riscului de recuren presupune folosirea unor noiuni de calcul al probabilitilor.
Tipuri de risc:
a. Total 100% n:
Boli monogenice:
Boli cromozomice:

- bolnav + bolnav n anomalii recesive;


- translocatii reciproce echilibrate ntre cromozomi omologi

b. Foarte mare 50-75% n:


Boli monogenice:
- bolnav + sntos heterozigot n anomalii recesive (50%);;
- bolnav + bolnav n boli dominante autozomale cu penetran
complet (75%);
- bolnav + sntos n boli dominante autozomale cu penetran
complet (50%);
c. Mare - 25% - n boli monogenice: - heterozigot + heterozigot n anomalii recesive;
d. Moderat 10 - 25% n:
Boli monogenice:
Boli poligenice:
Boli cromozomice:

- boli dominante cu penetran redus;


- n situaia cnd exist mai multe persoane afectate n familie;
- translocaii ntre cromozomi diferii;

e. Mic, mai puin de 5% n:


Boli poligenice:
- n situaia cnd exist o singur persoan afectat n familie;
- malformaii;
Risc 0% nu exist. Riscul minim este de 3,2% .
Acordarea sfatului genetic
Sfatul genetic trebuie s precizeze:
a. Natura i consecinele bolii;
b. Riscul de recuren;
c. Mijloacele de modificare a consecinelor;
d. Mijloacele de prevenire a recurenei (diagnostic prenatal, sfat).
Rspunsul celui care d sfat genetic trebuie s fie explicit, obiectiv, personalizat n funcie de
pacient, modulat dup contextul psihologic creat de gravitatea handicapului, vrsta de procreere, vrsta
sarcinii, prezena altor copii normali sau anormali, echilibrul psihologic al cuplului.
Medicul trebuie s informeze, nu s decid.
Latura psihologic a sfatului genetic este deosebit de important.
Dup acordarea sfatului genetic pot fi stabilite msuri de ngrijire ulterioar:
a. Trimitere la specialiti corespunztori, agenii de sntate, grupuri de susinere;
b. Continuarea evalurii clinice dac este indicat;
c. Continuarea susinerii prin sfat genetic dac este indicat.
In boli monogenice calcularea riscului de recuren se face pe baza legilor ereditii (gene mutante
cu efecte majore ce se transmit dominant sau recesiv, autozomal sau gonosomal).
In boli poligenice se calculeaz "riscul empiric", stabilit pe baza studiilor populaionale.
51

In boli cromozomice n aprecierea riscului de recuren trebuie inut cont de mecanismul de


producere (nedisjuncie, translocaie ntre cromozomi omologi sau neomologi etc). (Vezi Cap.Anomalii
cromozomice).
APARITIA UNOR COPII BOLNAVI DIN PARINTI SNTOI
Apariia unor copii bolnavi din prini sntoi determin adesea o adevrat dram familial fiind
o situaie frecvent ce implic sfat genetic n practica obinuit a geneticii medicale. Cauzele acestui
eveniment nedorit pot fi foarte diverse i explic riscul diferit de recuren n diferite familii.
1. Boli recesive autozomale sau gonosomale cu prini sntoi, dar purttori (risc 25 % sau 50 %).
Se ntlnete ntmpltor, dar mai frecvent n legturile consanguine.
2. Boli dominante cu penetran incomplet (dominan neregulat) n care unul din prini este
heterozigot nemanifest (risc variabil 20 - 30 %).
3. Boli recesive cu heterogenitate genetic (gene diferite determin acelai aspect fenotipic). Ex:
surditatea congenital (surdomutitatea), retinit pigmentar etc. Riscul este de 50 % iar transmiterea
mimeaz o transmitere dominant neregulat.
4. Anomalii poligenice n care prinii sunt sntoi, dar copilul motenete un numr de gene de
risc ce depete pragul. Riscul variabil este de 4 - 10 % .
5. Mutaie nou. Riscul este variabil de la neglijabil pn la foarte mare n funcie de existena
aciunii factorului mutagen.
6. Factorii de mediu teratogeni (medicamente, substane chimice, infecii) pot determina anomalii
(malformaii) neereditare dar cu manifestare congenital. Riscul poate fi neglijabil n cazul n care
se elimin agenii teratogeni.
ROLUL CONSANGVINITII N TRANSMITEREA RECESIVA
Consangvinitatea (cstorie ntre rude de snge) crete riscul ntlnirii a doi prini sntoi dar
purttori ai unei gene recesive anormale i duce la apariia unor copii bolnavi de boli recesive. Acest lucru
se explic deoarece ntr-o familie n care exist o persoan cu o anomalie recesiv, frecvena heterozigoilor
pentru aceast gen anormal este mult mai mare dect n populaia general datorit fondului genetic
comun al persoanelor nrudite.
In bolile recesive este important a se calcula:
COEFICIENTUL DE NRUDIRE:
reprezint probabilitatea a doi indivizi de a prezenta o anumita gena motenita de la un strmo
comun:
coeficientul de nrudire se noteaz cu r;
el se calculeaz folosind urmtoarea formul:

r = coeficient de nrudire;
n1 = numrul de generaii situate ntre unul dintre cei doi indivizi i strmoul comun;
n2 = numrul de generaii situate ntre al doilea individ i strmoul comun.
exemple de coeficieni de nrudire:
- rude de gr. I - prini/copii; frate (sor)/frate (sor) - au r = 1/2
- rude de gr. II - bunici, mtui, unchi - au r = 1/4
- rude de gr. III - veri primari - au r = 1/8.
COEFICIENTUL DE CONSANGVINITATE:
Coeficientul de consangvinitate se calculeaz pentru indivizii rezultai n urma cstoriei a
dou persoane nrudite.
52

Coeficientul de consangvinitate al unui individ este probabilitatea acestuia de a prezenta


pentru un locus dat din genomul su dou gene alele identice motenite de la un strmo
comun.
Coeficientul de consangvinitate se noteaz cu F
Coeficientul de consangvinitate se poate calcula prin dou formule:
n cazul n care membrii cuplului consanguin prezint un singur cuplu de strmoi
comuni:
,
F = coeficient de consangvinitate;
r = coeficient de nrudire.
n cazul n care membrii cuplului consanguin prezint mai multe cupluri de strmoi
comuni:

,
F = coeficient de consangvinitate;
n = numrul de indivizi prezeni ntr-o bucl care ncepe la nivelul unui
strmo comun, merge pe linie descendent pn la copilul rezultat n urma
unei cstorii consanguine, trecnd pe la unul dintre membrii acestui cuplu
consanguin i se ntoarce pe linie ascendent pn la acelai strmo comun,
trecnd pe la al doilea membru al cuplului consanguin.
NOT:
n se calculeaz pentru toi strmoii comuni
De obicei cu ct o boal recesiv este mai rar cu att consangvinitatea la prini este mai
frecvent.

TESTAREA GENETIC
Testarea genetic este o metod de studiu ce identific genotipurile asociate cu o anumit
afeciune sau predispoziie la boal sau care pot duce la apariia unor boli la descendeni. Scopul testrii
genetice const n identificarea urmtoarelor categorii:
- Persoane afectate (ct mai precoce pentru o ct mai prompt intervenie terapeutic);
- Purttori sntoi heterozigoi (pentru afeciuni recesive);
- Purttori sntoi de gen mutant dominant (pentru afeciuni dominante cu debut tardiv);
- Persoane cu predispoziie genetic pentru boli cu determinism multifactotial.
n dependen de caz, scopul final al acestei identificri este alegerea unei opiuni reproductive
optime sau acolo unde este posibil un tratament precoce. Testarea genetic este parte component a
screeningului neonatal, populaional sau familial.
Screening-ul neonatal
Reprezint programul de depistare presimptomatic i de prevenire a unor boli genetice. Are
drept scop depistarea nou-nscuilor cu anumite boli genetice nemanifestate la natere, boli a cror
evoluie poate fi controlat i eventual oprit prin terapie adecvat i iniiat precoce. Constituie o
strategie eficient de sntate public, aplicabil pentru unele afeciuni tratabile precum fenilcetonuria,
hipotiroidismul congenital i galactozemia.
53

Pentru alte tipuri de afeciuni, programele de screening variaz de la o ar la alta, n funcie de


prevalena afeciunilor ce pot beneficia de ameliorri terapeutice prin depistare precoce: mucoviscidoza
(frecvent n Europa), anemia falciform (frecvent la afro - americani), maladia Ta Sacks (frecvent
la evreii ashkenazi); thalasemia (frecvent la populaia circum - mediteranian); depistate neonatal,
acestor afeciuni li se poate influiena evoluia, depistarea lor putnd constitui factor de decizie pentru
sarcinile ulterioare.
Exist deja protocoale specifice pentru o serie de afeciuni:
Screening-ul pentru fenilcetonurie, aplicabil nou-nscuilor, se realizeaz prin testarea nivelului
fenilalaninei n ser n primele 4-5 zile dup natere, sensibilitatea testului fiind de 98%, iar specificitatea
practic de 100%.
Screening-ul neonatal n hipotiroidia congenital se bazeaz pe: detectarea imunologic a
hormonilor tiroideni sanguini care prezint valori sczute; testele moleculare de screening neonatal i de
depistare a heterozigoilor sunt cel mai frecvent aplicate.
Efectuarea screening-ului neonatal la anemia falciform n zonele afectate cu predilecie se
realizaeaz pe baza tabloului hematologic i prin diagnostic ADN.

DIAGNOSTICUL PRENATAL
Este necesar n cazul sarcinilor cu risc crescut, identificate prin screening sau n urma consilierii
genetice a cuplurilor parentale cu risc. Un diagnostic prenatal complet va impune consultri
interdisciplinare (obstetrician, pediatru, genetician, neonatolog etc.).

Dei diagnosticul prenatal constituie o surs de disconfort pentru mam i chiar o surs de risc
vital pentru ft, acesta rmne un instrument predictiv extrem de eficient n epidemiologia bolilor
genetice, permind n unele situaii evitarea naterii unui copil malformat.
Existnd riscurile citate mai sus, efectuarea diagnosticului prenatal impune ndeplinirea unor
criterii clar definite:
- severitatea malformaiei: nendoielnic n cazul prezumpiei de sindromDown (sau alte anomalii
trisomice), defecte de tub neural deschis sau boli metabolice neurodegenerative, decizia rmne
discutabil n alte situaii (defecte ale membrelor, despictur labio- maxilo palatin), n care
intelectul i durata de via pot rmne neafectate; zona geografic poate fi decisiv pentru unele
afeciuni, impactul malformaiei fiind diferit receptat n funcie de particularitile socio-culturale
zonale;
54

existena unui tratament satisfctor: astfel, fenilcetonuria poate rmne fr consecine


neuropsihice n rile n care exist posibilitatea deteciei prenatale prin analiza molecular i a unei
diete specifice corespunztoare, n timp ce galactozemia afecteaz sever ficatul n majoritatea
cazurilor;
- acceptarea prealabil de principiu a ntreruperii sarcinii de ctre cuplu i comunitate ca sanciune
terapeutic n cazul confirmrii unei malformaii grave;
- existena unui test diagnostic prenatal cu dezabilitate satisfctoare; stabilirea existenei unui risc
genetic semnificativ la consilierea genetic prealabil sarcinii.
Metoda utilizat poate varia n funcie de vrsta sarcinii i tipul afeciunii implicate (boala
cromozomic, monogenic sau alt tip de anomalie congenital). Pot fi necesare att metode invazive
care comport risc abortiv (caz n care acordul ambilor prini este obligatoriu).
Indicaiile pentru diagnostic prenatal:
- vrsta matern gestaional peste 35 de ani (risc de nondisjuncie cromozomic meiotic-gamei
anormali);
- istoric familial pozitiv (defecte de tub neural, boli cromozomice, boli monogenice depistabile prin
diagnostic enzimatic/ ADN, anomalii morfologice congenitale);
- sarcini anterioare cu anomalii cromozomice;
- teste screening pozitive sugestive;
- un printe cu anomalie cromozomic echilibrat cunoscut;
- expunere la ageni teratogeni cunoscui n cursul sarcinii (n special n trimestrul I);
- boli cronice materne cu posibil impact asupra ftului (prin deficienele funcionale organice sau
prin medicaia folosit).
-

Diagnosticul prenatal cuprinde att metode noninvazive, ct i metode invazive, acestea din urm
avnd ns risc abortiv.
METODE NONINVAZIVE
Echografia are ca scop identificarea unor anomalii fetale structurale: defecte de tub neural,
malformaii congenital de cord, anomalii scheletice, renale etc.
Detecia celulelor fetale n circulaia matern, metod la limita dintre cercetare i practica
medical, se bazeaz pe apariia n sngele matern a anticorpilor fa de celulele trofoblastice sau
sanguine (trombocite, leucocite) nc din primul trimestru de sarcin. Metologia poate fi util att n
determinarea sexului produsului de concepie (important n transmiterea bolilor legate de cromozomul
X), dar i n boli monogenice cu transmitere autozomal precum i n anomalii cromozomice de tip
aneuploidie. Poate fi utilizat ca test screening n grupuri int speciale cu risc crescut .
Detecia ADN-ului fetal n plasma matern acest ADN, provenind din apoptoza celulelor
fetale, ar fi n cantitate mai mare dect cel izolat din celulele fetale i n consecin, mai uor de detectat.

METODE INVAZIVE SUB CONTROL IMAGISTIC


Fetoscopia - efectuat n sptmnile 17-20 de sarcin permite vizualizarea endoscopic a ftului,
recoltarea de snge ombilical din cordon, biopsia tegumentar (n suspiciunea de epidermoliz buloas,
ichtioza, hiperketatoz, n afara acestor faciliti diagnostice, metoda permite i proceduri terapeutice
precum transfuzia sanguin n vena ombilical n caz de necesitate. Prezint ns risc semnificativ (510%) de avort spontan, natere prematur, pierdere de lichid amniotic, infectare de lichid amniotic.
Cordonocenteza prin PUBS (percutaneous umbilical blood sampling) const n puncionarea
transabdominal echoghidat a cordonului ombilical nc din sptmna 17 de gestaie. Se practic n
urmtoarele situaii:
- boli cromozomice ce necesit o analiz cromozomic rapid (prin amniocinteza sunt necesare
culturi celulare, ceea ce ntrzie diagnosticul);
55

boli monogenice caracterizate prin sinteza de proteine anormale specifice: hemoglobinopatii (tip
thalasemie), hemofilie;
- suspiciune de infecie fetal (n caz de infecie matern viral rubeol, virus citomegalic sau
bacterian);
- incompatibilitate de grup sanguin (n cazul confirmrii fiind posibil transfuzia sau
exsanguinotransfuzia n utero);
- deficite imunologice.
Riscul de avort spontan i natere prematur este mai redus n cazulfetoscopiei, dei rmne
semnificativ (aproximativ 2% deoarece se practic cu ac subire, motiv pentru care aceast metod tinde
s nlocuiasc fetoscopia.
Amniocenteza - const n aspirarea transabdominal de lichid amniotic sub ghidaj echografic.
Permite efectuarea de cariotip (rezultat tardiv ns, deoarece implic culturi celulare), analiza ADN,
determinri biochimice. Celulele amniotice prelevate permit
studierea cromozomilor (cariotipului) pentru identificarea
rearanjamentelor structurale, a mozaicurilor i a aneuploidiilor,
cu interpretare viciabil ns prin contaminarea cu celule
materne sau, n cazul sarcinilor gemelare, prin confuzie cu
celulele celuilalt ft, datorit puncionrii din greeal a sacului
amniotic al acestuia. Alte surse de eroare in de tehnic sau de
prezena mozaicurilor cromozomice, linia anormal innd, n
acest din urm caz, nu de celulele fetale ci de cele
extraembrionare. n plus, prelevarea de celule amniotice face
posibil studiul ADN, necesar n unele boli genice, cum ar fi: fibroza chistic de pancreas, hemofilia,
distrofia muscular Duchenne, sindromul X fragil, rinichiul polichistic etc. Din lichidul amniotic se pot
face analize biochimice n vederea identificrii de proteine anormale caracteristice unor enzimopatii
(fenilcetonuria, tirozinemia galactozemia, polizaharidozele etc.).
Riscurile fetale ale amniocentezei sunt reprezentate de:
- avort 1% (n caz de manevre repetate poate atinge 10%);
- chorioamniotit;
- pierderi de lichid amniotic.
Riscurile materne nu sunt neglijabile:
- hemoragii vaginale;
- izoimunizare Rh.

Puncia vilozitilor choriale (CVS) placenta primitiv (corionul) derivnd din


blastocist ca i embrionul, puncia vilozitilor
choriale efectuat n sptmnile 9-11 de
sarcin, (niciodat mai devreme) sub control
ecografic, transabdominal sau transcervical,
permite, prin studierea biopunctatului obinut,
diagnosticul n caz de:

boli cromozomice prin metoda FISH (pe


celule interfazice, identificndu-se eventuale mozaicuri cromozomice, precum i aneuploidii ce
intereseaz cromozomii 13, 18, 21, X, Y) sau prin PCR pentru identificarea unor marcheri specifici
cromozomici.
boli moleculare prin analiza ADN-ului ce permite fie detecia direct a mutaiei (distrofia
amiotrofic, mucoviscidoza, sindromul X fragil, sicklemia), fie detecia indirect (prin analiza de
nlnuire n hemofilie), fie combinarea ambelor metode (neurofibromatoza, coreea Huntingron,
distrofia muscular Duchenne, cancerul mamar familial, hemocromatoza).
Avantajele metodei:
- diagnostic precoce (trimestrul I de sarcin);
56

decelarea (n 1-3% din cazuri) de mozaicuri cromozomice adevrate (dar celulele fetale pot fi
contaminate cu celulele materne ceea ce preteaz la confuzii; n plus, pot exista alte facte derutante);
se impune monitorizarea sarcinii i efectuarea cariotipului din celulele fetale obinute prin
amniocentez i cordono-centez.
Riscurile constau n:
- avort (risc superior amniocentezei);
- anomalii ale membrelor (de aceea metoda este interzis nainte de sptmna a 9-a de gestaie);
- pierderi de lichid amniotic,
- sngerri vaginale.
-

Placentocenteza transabdominal - este un echivalent al punciei vilozitilor coriale, util n


trimestrele II i III de sarcin n caz de oligohidraminos, cnd celelalte metode (amniocenteza,
cordiocenteza, PUBS) sunt practic contraindicate. Puncia vilozitilor choriale avnd indicaii
asemntoare amniocentezei (dar un termen diferit), s-ar impune o contrapunere amniocentez versus
CVS.
PROBLEME ETICE N TESTAREA GENETIC
Testarea genetic este una din cele mai importante aplicaii ale cunotinelor obinute din
Proiectul Genomului Uman i reprezint analiza ADN-ului, cromozomilor, proteinelor i a unor
metabolii umani pentru detectarea bolilor transmise ereditar, mutaiilor, identificarea purttorilor,
stabilirea diagnosticului sau prognosticului prenatal i clinic, monitorizarea i screeningul prenatal i al
nou-nscuilor.
Principiile eticii identificate de Comitetul de Apreciere a Riscului Genetic din USA. (CommiTTee
on Assessing Genetic Risks) se refer la dreptul la autonomie, intimitate, confidenialitate i echitate.
Pe baza acestor principii, Comitetul a emis urmtoarele recomandri:
- Screeningul nou-nscuilor nu poate fi avizat fr dovada necesitii lui pentru detecia i
tratamentul efectiv al bolilor specifice.
- Testarea copiilor se face numai n cazul bolilor pentru care exist i este necesar tratament curativ
sau preventiv.
- Confidenialitatea poate fi elucidat, prin dezvluirea diagnosticului la rude, numai cnd ne
ateptm la lipsa unei dezvluiri voluntare i numai n situaiile cnd exist o nalt probabilitate de
afectare ireversibil sau/i fatal a rudelor n lipsa acestei dezvluiri
- Falsa paternitate poate fi relevat exclusiv mamei (nu i partenerului acesteia).
- Informaia genetic, privitoare la statusul de purttor al solicitantului / consultantului nu poate fi
dezvluit partenerului fr consimmntul consultantului.
- Legislaia ar trebui astfel adoptat nct riscurile genetice s nu fie luate n considerare la luarea
deciziei de asigurare medical sau privind costul acesteia.
- Legislaia ar trebui astfel adoptat nct informaia genetic s nu poat fi accesat de ctre
angajatorul prospectiv sau existent, dect n cazul n care poate influena exercitarea atribuiilor
profesionale.

57