Thèse Ioanovici

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit
dopat cu magneziu i cercetri asupra

proprietilor mecanice n vederea
utilizrii ei n implanturi osoase
Tez destinat obinerii
titlului tiinific de doctor inginer
la
Universitatea Politehnica din Timioara
i
Universitatea Artois din Bethune, Frana
n domeniul Inginerie Mecanic
de ctre
Ing. Teodora Georgiana IOANOVICI
Conductori tiinifici:
Prof.univ.dr.ing. Liviu BERETEU
Prof.univ.dr.ing. Philippe HIVART
Conf.univ.dr. Francine MONCHAU
Refereni tiinifici:
Prof.univ.dr.ing. Ioan VIDA-SIMITI
Prof.univ.dr.ing. Ileana Constana ROCA
Prof.univ.dr.ing. Pascal VANTOMME
Conf.univ.dr.ing. Aurel RDU
Ziua susinerii tezei: 23.03.2012
Cuvnt nainte
Teza de doctorat intitulat Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i

cercetri asupra proprietilor mecanice n vederea utilizrii ei n implanturi osoase a fost realizat n
cadrul Universitii Politehnica din Timioara i al Universitii Artois din Bethune, Frana ntr-un
program de cotutel sub coordonarea Prof. Dr. Ing. Liviu BERETEU, Prof. Dr. Ing. Philippe HIVART i a
Conf. Dr. Francine MONCHAU.
Datorit caracterului interdisciplinar al specializrii terminate de doctorand n cadrul Facultii
de Mecanic, Universitatea Politehnica din Timioara tiine aplicate: Inginerie medical i n
cadrul doctoratului acest aspect a continuat fcnd necesar colaborarea cu Laboratorul de
Biomateriale de la Universitatea Artois n vederea sprijinirii tematicii abordate care include att
aspecte de inginerie mecanic ct i aspecte de tiina materialelor, biologie i chimie.
Datorit celor menionate anterior aceast tez de doctorat este una cu un caracter
interdisciplinar care abordeaz domenii de actualitate i de mare interes n ultimii ani ca i substituia
osoas i proprietile mecanice i biologice ale materialelor utilizate pentru aceasta. Rezultatele
acestei cercetri pot fi folosite n viitor att n domeniul ingineriei mecanice ct i n alte domenii cum
ar fi tiina materialelor, medicina, chimie i biologie.
Acest program de doctorat a fost finanat prin proiectul strategic ID 6998, Contract POSDRU
6/1.5/S/13, proiect cofinanat din fondul social european prin programul operaional sectorial de
dezvoltare a resurselor umane 2007-2013 Investing in People.
Abstract
Necesitatea de a nlocui o pierdere de esut este un fenomen frecvent ntlnit n chirurgia osoas.
Autogrefa se folosete ca metod de referin dei are numeroase dezavantaje (alt operaie
chirurgical necesar, rata de morbiditate, cantitate disponibil redus), dar repararea unui defect mai
mare conduce adesea la utilizarea materialelor artificiale.
Substituii osoi bioceramici sunt o alternativ des utilizat dar din pcate cei existeni pe pia la ora
actual au nc o eficacitate insuficient n numeroasele aplicaii din cauza dificultilor la integrarea
unui volum mare sau din cauza rezistenei mecanice inadecvate pe termen lung.
Datorit acestui dezavantaj din urm a devenit interesant procedeul de dopaj al bioceramicelor
fosfocalcice care au compoziia similar cu faza minerala a osului. Multe substane utilizate ca i
dopani (F, CO3, Mn, Zn, Bi, Na...) au fost studiate n ultimul deceniu, dar de multe ori s-au evideniat
efecte citotoxice sau nrutirea proprietilor mecanice.
Contrar dezavantajelor identificate n cazul majoritii aditivilor, influena doprii cu magneziu a
hidroxiapatitei reprezint o important tem de cercetare. n realitate acest element este prezent n
mod natural n corpul uman i a fost studiat ca i dopant care n cantiti mici (0.5-1%) poate
mbuntii proprietile mecanice fr s afecteze negativ biocompatibilitatea ceramicii. Un aspect
care nu a fost abordat este creterea cantitii de dopant peste 1-2% n vederea mbuntirii
proprietilor mecanice.
A fost studiat i optimizat aadar sinteza hidroxiapatitei cu substituie de magneziu prin metoda
precipitrii apoase pentru un coninut de 1%, 2%, 5% si 10% de magneziu n mas. Influena
cantitii de magneziu asupra stoechiometriei pudrei de ceramic finale comparat cu hidroxiapatita
pur a fost evideniat. Au fost realizate caracterizri fizico-chimice (DRX, MEB), biologice
(citotoxicitate, test n fluid biologic simulat SBF) i mecanice (microduritate, modul de elasticitate)
asupra bioceramicilor dopate i acestea au fost comparate.
Cuvinte cheie:
Substitut osos implant- bioceramic - dopant - magneziu - sintez prin precipitare apoas hidroxiapatit nanocristalin
Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

vederea utilizrii ei n implanturi osoase
Cuprins
1. Introducere ............................................................................................................... 3
1.1. Introducere general .................................................................................................. 4
1.2. Prezentarea capitolelor tezei ....................................................................................... 5
2. Stadiul actual al cunoaterii ...................................................................................... 9
2.1. Biomateriale si aplicaiile acestora ............................................................................. 10
2.1.1. Clasificarea biomaterialelor .................................................................................... 11
2.1.1.1. Biomateriale metalice ......................................................................................... 12
2.1.1.2. Biomateriale polimerice ....................................................................................... 17
2.1.1.3. Biomateriale ceramice ........................................................................................ 20
2.1.1.4. Biomateriale compozite ....................................................................................... 23
2.1.1.5. Biomateriale naturale. iesutul osos ...................................................................... 25
2.1.2. Biocompatibilitatea................................................................................................ 29
2.2. Bioceramica ............................................................................................................ 32

2.3. Hidroxiapatita ......................................................................................................... 36
2.3.1. Proprietile hidroxiapatitei .................................................................................... 36
2.3.2. Modalitai de sintez a hidroxiapatitei ...................................................................... 40
2.3.3. mbuntirea hidroxiapatitei ................................................................................. 42
2.3.3.1. Hidroxiapatita bifazic ........................................................................................ 42
2.3.3.2. HA/Al2O3 ........................................................................................................... 45
2.3.3.3. Hidroxiapatita dopat ......................................................................................... 46
2.3.3.4. Magneziul ca i dopant ........................................................................................ 50
3. Materiale i metode ................................................................................................. 53
3.1. Sinteza bioceramicii ................................................................................................. 54
3.1.1. Bioreactorul ......................................................................................................... 54
3.1.2. Filtrarea ............................................................................................................... 57
3.1.3. Calcinarea ............................................................................................................ 58
3.1.4. Realizarea eantioanelor ........................................................................................ 58
3.1.4.1. Mcinarea pudrei ............................................................................................... 58

3.1.4.2. Realizarea barbotinei .......................................................................................... 60

3.1.4.3. Sinterizarea ....................................................................................................... 62
3.2. Caracterizarea materialului ....................................................................................... 65
3.2.1. Caracterizarea fizic .............................................................................................. 65
3.2.1.1. Difractometria cu raze X ..................................................................................... 65
3.2.1.2. Microscopia electronic ....................................................................................... 66
3.2.2. Examinare biologica .............................................................................................. 68
3.2.2.1. Test de citotoxicitate .......................................................................................... 69
3.2.2.2. Test cu fluid biologic simulat SBF ......................................................................... 73
3.3. Testarea mecanic a eantioanelor solidificate ............................................................. 75
3.3.1. Densitatea eantioanelor realizate ........................................................................... 75
3.3.2. Microduritatea Vickers ........................................................................................... 75
3.3.3. Modulul de elasticitate ........................................................................................... 78
3.3.3.1. Testarea prin compresiune a eantioanelor realizate ............................................... 79
3.3.3.2. Testarea prin vibraii a eantioanelor realizate ....................................................... 80
3.4. Testarea termografic .............................................................................................. 86
4.Rezultate i discuii .................................................................................................. 88
4.1. Materiale obtinute .................................................................................................... 89
4.2. Validarea materialelor obtinute .................................................................................. 93
4.2.1. Validarea fizica ..................................................................................................... 93
4.2.2. Validarea biologica .............................................................................................. 97
4.3. Proprietati mecanice ...............................................................................................100
4.4. Testarea termografic .............................................................................................111
4.5. Formarea unei aplicatii de implant osos .....................................................................115
5. Concluzii i contribuii personale ............................................................................117
5.1. Concluzii ................................................................................................................118
5.2. Contribuii personale ...............................................................................................121
6. Bibliografie .............................................................................................................123
7. Anexe ......................................................................................................................136

1. Introducere

1.1 Introducere general

Din cele mai vechi timpuri a existat un interes pentru repararea i nlocuirea prilor din
organismul uman care prezentau probleme i acest lucru a fost realizat folosind diverse materiale
mai mult sau mai puin potrivite n funcie de informaiile existente la perioada respectiv.
Datorit evoluiei tiinei i aparaturii din zilele noastre lumea medical se afl ntr-o perioad de
tranziie de la vindecarea organelor existente la nlocuirea acestora cu materiale sintetice obinute
n laboratoare performante.
Substituia osoas este pe locul 2 ca i procedur de nlocuire a esutului, pe locul nti
fiind transfuzia de snge. Mai mult de 2.2 milioane de reconstrucii osoase sunt realizate n fiecare
an la scar mondial pentru a repara defecte osoase n ortopedie, neurochirurgie i n medicina
dentar.
Dei exist mai multe posibiliti pentru repararea defectelor osoase cum ar fi autograftul
(esut osos obinut din centura iliaca a pacientului), alograftul (esut osos uman de la alt individ),
xenograftul (esut osos provenit de la animale) i substituii sintetici, fiecare prezint i anumite
dezavantaje ca i riscurile de contaminare sau cantitatea limitat existent. Aceste incoveniente se
pot nltura utiliznd compui obinui n condiii reproductibile ntr-un laborator eliminnd astfel
riscul de contaminare i limitarea cantitativ.
esutul osos este sintetizat n principal din materiale bioactive i rezistente cu structur
similar cu osul natural care este un material compozit natural cu proprieti de autoreparare.
Bioceramicele sunt o clas de materiale care ndeplinesc condiiile necesare substituiei osoase,
acestea fiind i biocompatibile i cu o rezisten mecanic similar cu a osului. Materialele
bioceramice pot fi mprtie n dou mari categorii n funcie de reactivitatea acestora n mediul
fiziologic i biologic.
O prim categorie este format din bioceramicile inerte ca i alumina (Al 2O3) i oxidul de
zirconiu (ZrO2) care dein proprieti mecanice bune i sunt utilizate n principal pentru realizarea
capurilor protezelor de articulaii.
A doua categorie conine bioceramicele care au abilitatea de a interaciona cu mediul
intern (bioactive) pentru a crea legturi i pentru a stimula reconstrucia osoas, biosticla i fosfaii
de calciu. Hidroxiapatita (HA) Ca10(PO4)6(OH)2 i fosfatul tricalcic (TCP) Ca3(PO4)2 sunt recunoscute
n mod special pentru abilitatea de a crea o interfa perfect cu esutul osos natural.
Hidroxiapatita difer foarte puin de esutul osos, formnd partea minerala a acestuia.
Abilitatea acestor materiale bioactive de a se integra n mediul intern justific aplicaia lor
pentru acoperirea implanturilor metalice utilizate n protezare (old, genunchi), pentru repararea
defectelor osoase i pentru multe alte aplicaii.
Ceramicele fosfocalcice comerciale exist sub numeroase forme i dein diferite proprieti
n funcie de productor dar adesea acestea au o suprafa specific sczut ceea ce le face puin
reactive n mediul intern. De asemenea puritatea hidroxiapatitei comerciale poate avea de suferit
deoarece sunt acceptate pn la 5% alte faze, ceea ce nseamn c dac se dorete un material cu
puritate ridicat acesta trebuie sintetizat n cadrul propriului laborator.

Dopajul hidroxiapatitei a fost de asemenea studiat n ultimele decenii n vederea

mbuntirii proprietilor dar o mare parte din materialele utilizare au cauzat alte dezavantaje ca
i proprieti mecanice mai proaste sau efecte citotoxice.
Spre deosebire de celelalte elemente de dopaj studiate magneziul a atras interesul
comunitii de cercetare n ultimele dou decenii din cauza mbuntirii proprietilor mecanice
fr a afecta negativ biocompatibilitatea. Dei acest material de dopaj a fost studiat n lucrri
tiinifice nu multe dintre acestea folosesc o cantitate mai mare de 1wt% de Mg 2+ i scopul acestei
teze este tocmai de a studia efectul diferitelor concentraii de dopant (1wt% - 10wt%) asupra
proprietilor materialului final.
1.2 Prezentarea capitolelor tezei

Aceast tez este mprit pe cinci capitole dup cum urmeaz:
1. Introducere
2. Stadiul actual
3. Materiale i metode
4. Rezultate i discuii
5. Concluzii i perspective
n partea de introducere s-a fcut o scurt trecere n revist a problematicii abordate n

aceast teza de doctorat evideniind necesitatea realizrii unui asemenea studiu: lipsa materialelor
sintetice utilizate n substituia osoas care dispun de proprieti mecanice necesare n aplicaii
unde apar solicitri mecanice.
Se prezint esutul osos ca i un material compozit i principalele biomateriale utilizate
pentru a l nlocui. Se vorbete despre cele dou categorii predominante de bioceramici utilizare n
acest domeniu, cele inerte (alumina i oxidul de zirconiu) precum i cele bioactive (biosticla,
fosfaii de calciu). Dintre fosfaii de calciu cel care prezint cel mai mare interes n domeniul
implantologiei osoase este hidroxiapatita datorit biocompatibilitii sale excelente i similitudinii
cu faza minerala a osului. Aceasta stimuleaz regenerarea osoas dar are dezavantajul rezistenei
mecanice scazute, acesta fiind principalul aspect care se dorete a fi ameliorat.
n capitolul de stadiu actual s-a facut un studiu extins asupra problematicii abordate, i
acesta este mprit la rndul lui n: biomateriale, bioceramic i hidroxiapatit. Din cauz c este
foarte extins a fost divizat n trei mari subcapitole tocmai pentru a evidenia aspectele cele mai
importante din fiecare.
n prima parte despre biomateriale se realizeaz un studiu asupra principalelor categorii
de materiale utilizate n acest domeniu, s-a realizat o clasificare dupa cum urmeaz: metale,
polimeri, materiale ceramice, materiale compozite i materiale naturale. De asemenea se trec n
revist i principalele proprieti n cazul fiecrei categorii, civa reprezentani importani i de
asemenea exemple de implanturi comerciale realizate din aceste materiale. n partea de materiale
naturale este prezentat i esutul osos mai pe larg i se incheie acest subcapitol cu o prezentare a

biocompatibilitii
care
este
esenial
cazul
oricriu
material
existent
pe
pia
care
interacioneaz cu mediul intern al organismului uman.

Al doilea subcapitol din stadiul actual abordeaz bioceramica, material care nu a fost
prezentat pe larg n subcapitolul anterior. Se prezint n mod special familia ceramicilor
fosfocalcice din care face parte i hidroxiapatita i se trec n revist principalele aspecte care
trebuie avute n vedere n cazul acestor materiale care trebuie s reziste n corpul omenesc o
perioad lung de timp.
n cel de-al treilea subcapitol se prezint mai pe larg hidroxiapatita i principalele
caracteristici ale acesteia. i acest subcapitol este mprit la rndul lui n mai multe pari n funcie
de subiectul abordat: proprietile hidroxiapatitei, modalitile de sintez precum i posibilitile de
mbuntire studiate. Pe lng prezentarea acestui material n acest subcapitol s-a dorit i
prezentarea ideii de dopare a acestuia n vederea mbuntirii proprietilor mecanice, pstrnd
intact proprietatea de biocompatibilitate. Un alt procedeu de mbuntire studiat a fost realizarea
de materiale compozite pe baz de alumin sau oxid de zirconiu, care ar putea crete proprietile
mecanice datorit ranforsrii hidroxiapatitei.
Capitolul de materiale i metode prezint procedeele utilizate pentru a obine acest
material i modalitile de testare ntrebuinate. De asemenea se prezint i echipamentele
utilizate i parametrii din cadrul experimentelor. Subcapitolele prezint urmtoarele aspecte:
sinteza materialului, caracterizarea materialului i testarea mecanic.
La partea de sintez a materialului este prezentat motivaia alegerii acestei metode
(asigur posibilitatea varierii parametrilor de reacie independent unul fa de cellalt i permite
sintetizarea la temperaturi sczute pentru o mai mare siguran) i etapele necesare pn la
obinerea produsului final (maturarea n bioreactor, filtrarea, uscarea, calcinarea, mcinarea,
formarea i sinterizarea). A fost de asemenea sintetizat i un material compozit pe baz de
hidroxiapatit i alumin n vederea mbuntirii proprietilor mecanice.
Caracterizarea materialului s-a realizat din punct de vedere biologic i fizico-chimic. S-a
efectuat un test de citotoxicitate asupra eantioanelor de pudr sintetizate i calcinate timp de o
or la 900C i de asemenea eantioanele formate i tratate termic au fost imersate n fluid
biologic simulat timp de 30 de zile pentru a vedea efectul acestuia asupra suprafeei i
proprietilor. Caracterizarea fizico-chimic s-a realizat prin intermediul difractometriei cu raze x
pentru a studia i valida compoziia obinut, i de asemenea prin analiza microstructurilor
obinute cu microscopul electronic cu baleaj.
Testarea mecanic s-a realizat pe eantioane sub form de disc ( ~13mm/h ~2 mm)
care au fost n prealabil tratate termic n funcie de compoziia fiecruia (1150C hidroxiapatita i
1250/1350C hidroxiapatita dopat cu magneziu). n primul rnd s-a calculat densitatea
eantioanelor nainte i dup tratamentul termic dup metoda msurrii masei i volumului,
aceasta fiind necesar n evaluarea rezultatelor testelor mecanice realizate. Al doilea test efectuat
a fost cel de microduritate Vickers pentru a studia evoluia acesteia cu procentajul de magneziu i
temperatura de sinterizare, i de asemenea dup imersarea n fluid biologic simulat timp de 30 de
zile. Pentru a calcula modului de elasticitate care este o caracteristic foarte important de
material s-au realizat ncercri de compresiune i ncercri cu vibraii libere . Din ncercrile de
compresiune
au rezultat grafice
for-deformaie
din care
s-a putut determina evoluia

proprietilor si din cele cu vibraii libere s-a putut de asemenea determina modulul de elasticitate
dup un algoritm de calcul realizat.
n capitolul de rezultate sunt prezentate comparaiile ntre materialele sintetizate i sunt
discutate diferenele dintre proprietile acestora.
n prima parte sunt prezentate rezultatele sintezelor realizate i validarea compoziiilor
prin difractogramele aferente. Din aceast analiz rezult c materialele sintetizate sunt
hidroxiapatit i hidroxiapatit dopat cu magneziu. Dup confirmarea c s-a obinut materialul
dorit acesta a fost testat biologic pentru a verifica biocompatibilitatea pudrei rezultate n contact
direct cu celule osteoblaste MC3T3-E1. n urma acestui test a rezultat c hidroxiapatita dopat cu
1% Mg prezint o biocompatibilitate mai bun dect hidroxiapatita nedopat, dar dup creterea
procentajului de magneziu peste 2% apar descreteri, acestea fiind foarte evidente n cazul
materialului cu 10% Mg.
Proprietile mecanice au fost analizate prima dat prin msurarea microduritii Vickers
care s-a evideniat iar n cazul probelor dopate cu 1% i 2% Mg i sinterizate la 1350C. Pentru
probele cu 5% Mg aceast valoare a microduritii a fost foarte sczut i datorit problemelor
aprute la punerea n form i densitii inferioare fa de celelalte compoziii.
S-a dorit de asemenea determinarea modulului de elasticitate, acesta fiind o important
caracteristic de material, i acest lucru a fost realizat printr-un test de compresiune realizat la
60N (o fora inferioar forei de rupere 130N- pentru a nu distruge proba care urma s mai fie
analizat) si printr-un test cu vibraii libere. Din curbele tensiune-deformaie rezultate au fost
extrase rezultatele necesare pentru a calcula aceast caracteristic. Rezultatele au artat c proba
dopat cu 2% Mg i sinterizat la 1350C prezint cea mai mare valoare, dar i cea dopat cu 1%
Mg are proprieti superioare hidroxiapatitei nedopate. Din determinarea modului de elasticitate
prin vibraii s-a confirmat c eantionul cu 2% Mg prezint cea mai mare valoare i cel cu 1% Mg
prezint o valoare superioar HA nedopate.
Ca urmare a acestor descoperiri s-a stabilit c hidroxiapatita dopat cu 1% magneziu
prezint cele mai bune proprieti combinate, pe parte biologic i mecanic i s-a realizat o
aplicaie de implant pentru coloana vertebral din aceasta. Aceast aplicaie s-a realizat att ca i
implant dens ct i cu un schelet de polimetilmetacrilat pentru a porozitate controlat care ajut la
osteointegrare.
Concluzii si perspective
S-a reuit obinerea de hidroxiapatit pur i dopat cu 1%, 2%, 5% i 10% Mg, precum
i realizarea unui material compozit cu adiie de alumin.
Materialele sintetizate sunt biocompatibile dei hidroxiapatita dopat cu 10%
magneziu
prezint proprieti mult sczute i cea dopat cu 1% magneziu are o biocompatibilitate mai bun
dect cea nedopat.
Densitatea eantioanelor este invers proporional cu procentajul de magneziu adugat
acest lucru crend probleme i la punerea n form care a fost dificil n cazul 5% Mg i imposibil
pentru 10% Mg.
Microduritatea Vickers este cea mai bun n cazul eantioanelor cu 1% Mg i 2% Mg
sinterizate la 1350C.

Modulul de elasticitate cel mai mare l are MgHA 2% sinterizat la 1350C, cel al MgHA 1%
fiind i el superior hidroxiapatitei.
Deoarece combinaia dintre proprietile biologice i cele mecanice este cea mai bun n
cazul MgHA 1% aceasta a fost utilizat pentru realizarea implantului osos dens si macroporos.
n viitor se dorete o analiz mai amnunit a influenei temperaturilor asupra
proprietilor mecanice i de asemenea realizarea de teste de proliferare celular pentru a valida i
eantioanele solide realizate.

2. Stadiul actual al cunoaterii

2.1. Biomateriale si aplicaiile acestora

Biomaterialele sunt materiale folosite la realizarea dispozitivelor medicale care asist,
repar, nlocuiesc esutul viu sau organele care funcioneaz sub un nivel acceptabil, ntr-o
manier sigur, fundamentat i acceptat din punct de vedere fiziologic i economic.
nc din secole anterioare s-au utilizat diferite materiale sintetice sau naturale pentru
nlocuirea diferitelor pri ale corpului uman. n poporul etrusc, spre exemplu, se obinuia
nlocuirea dinilor abseni cu puni artificiale sculptate din os de taur. De asemenea, n secolul al
17-lea s-a implantat cu succes o bucat de os canin n craniul unui duce olandez.
n practica medical, utilizarea sigur a materialelor pentru nlocuirea unei pri a corpului
nu s-a realizat pn la dezvoltarea procedeelor aseptice chirurgicale, la finele secolului XIX. S-a
ncercat, decenii ntregi, nlocuirea esuturilor dure prin diferite metode: folosirea materialelor
autogene, pentru inceput, dar pentru folosirea grefelor este necesar o procedura chirurgical
adiional. Pentru a rezolva acest impediment s-au folosit mai trziu materiale alogene. Dar nici
acestea nu sunt potrivite pentru aplicaii cu ncrcri de fore. Astfel s-a apelat la utilizarea
materialelor sintetice precum metale i materiale ceramice. Pn n anul 1960 materialele folosite
aveau o origine industrial. Dup acest an s-a nceput realizarea materialelor cu scop specific,
pentru utilizarea n domeniul medical.
n ultimele decenii a existat un interes major pentru acest domeniu al biomaterialelor care
se manifest i n diversitatea definiiilor care se gsesc n funcie de aplicaie i de autor. Mai jos
avem cteva dintre definiiile cele mai des ntlnite.
Conform definiiei, un biomaterial este orice substan (n afara medicamentelor) sau
combinaie de substane, de origine sintetic sau natural, care poate fi folosit pentru o perioad
oarecare, n cadrul unui sistem care trateaz, mbuntete sau nlocuiete un esut, un organ sau
o funcie a corpului [1].
O alt definiie care descrie succint conceptul de biomaterial este urmtoarea: un
biomaterial este un material nonviabil folosit ntr-un dispozitiv medical relizat pentru interaciunea
cu sistemele biologice [2].
Dei scopul principal al biomaterialelor este de a fi folosite pentru aplicaii medicale,
acestea sunt utilizate i pentru a crete culturi de celule, n laboratoare clinice pentru testarea
proteinelor
din
snge,
pentru
echipamente
de
procesare
biomoleculelor
aplicaii
biotehnologice, pentru vectori de diagnostic genetic, n acvacultura scoicilor sau pentru

biochipuri, celul-silicon de investigaie. n aplicaii medicale, biomaterialele sunt rareori izolate,
ele fiind de cele mai multe ori integrate n dispozitive sau implanturi.
Indiferent de scopul aplicaiei, biomaterialele trebuie s ndeplineasc dou condiii
fundamentale: biofuncionalitate i biocompatibilitate ridicate. Biofuncionalitatea se refer la
abilitatea implantelor de a funciona optim n aplicaia pentru care au fost realizate. Pentru o bun
funcionalitate trebuie luate n considerare proprieti mecanice precum: rezistena la rupere,
tenacitatea la rupere, alungirea la rupere, limita de oboseal, modulul lui Young; proprieti fizice
precum densitatea n cazul implanturilor ortopedice sau expansiunea termic pentru cimenturi
10

osoase i proprieti de chimie a suprafeelor precum rezistena la degradare, oxidarea, coroziunea

sau abilitatea de sudare cu esutul osos [3].
Biocompatibilitatea este definit ca fiind abilitatea unui material de a interaciona cu
organismul gazd ntr-un mod corespunztor aplicaiei pentru care este utilizat [2].
2.1.1 Clasificarea biomaterialelor

Avnd n vedere proprietile menionate anterior s-au identificat diferite materiale
sintetice obinndu-se astfel urmtoarele clase principale de biomateriale:
I.
II.
Metale: oeluri inoxidabile, titan, aliaje de titan, aliaje cobalt-crom, etc.;

Ceramice: oxid de aluminiu (alumin), dioxid de siliciu, fosfai de calciu, vitroceramice
(Bioglass), etc.;
III.
Polimeri: polietilen, silicon, unele materiale naturale, etc.;
IV.
Materiale compozite: polimeri consolidai cu ceramice, ceramice consolidate cu

metale, diferite ceramice combinate, etc.
Fiecare grup de biomateriale poate fi clasificat n funcie de aceste patru categorii.

Materialele naturale, precum valve de inim de la animale, sunt formate din proteine i au o
structur repetitiv asemntoare polimerilor. Astfel, ele se consider din categoria polimerilor.
Clasificarea biomaterialelor poate fi fcut i innd cont de interaciunea cu organismul
gazd:
a.
Materiale bioinerte: nu provoac nici o reacie din partea organismului (ex. oel
inoxidabil);
b.
Materiale bioactive: interacioneaz cu esuturile nconjurtoare i formeaz legturi

(ex. hidroxiapatita);
c.
Materiale biodegradabile: se degradeaz sub aciunea unui agent biologic cum ar fi

enzimele (ex. acid polilactic);
d.
Materiale bioresorbabile/bioabsobabile: resturile de material sunt ndeprtate de

activitatea celular, prin fagocitoz (ex. acid poliglicolic);
e.
Materiale bioerodabile: se erodeaz prin procese fizice i chimice (ex. poliortoester).
Alegerea materialului potrivit se face n concordan cu funciunea care se dorete s fie

nlocuit. Din pcate, nu exist un biomaterial care s ndeplineasc toate cerinele care se impun.
De exemplu, n cazul aplicaiilor supuse ncrcrilor de fore (implanturi dentare sau de old),
cerinele mecanice pot fi satisfcute doar de metale. n acest caz, aliajele de titan sunt cele mai
promitoare datorit rezistenei specifice ridicate i a modulului elastic sczut [4]. Titanul are o
tendin puternic de pasivare i formeaz rapid un strat subire de oxid de titan n prezena
oxigenului. Acest strat de oxid este puternic aderent i stabil i nu se distruge n condiii fiziologice
normale. De asemenea, datorit acestui strat, nu exist un contact direct ntre titan i esuturile
11

nconjurtoare i se mpiedic astfel fenomenul de coroziune a titanului [5]. Totui, n pofida

acestor proprieti pozitive, titanul are o aderen sczut la oase n comparaie cu alte materiale
precum fosfaii de calciu a cror proprieti mecanice sunt, din pcate, nesatisfctoare pentru
aplicaii de acest tip.
Cercetrile
recente,
din
domeniul
biomaterialelor,
se
concentreaz
pe
realizarea
materialelor biomimetice/bionice (materiale cu proprieti similare celor existente n organismele

vii) i a materialelor biofuncionale (materiale complexe care emuleaz structuri funcionale ale
organismului, cum ar fi fibra muscular).
2.1.1.1. Biomateriale metalice

Mulumit excelentelor proprieti mecanice i rezistenei la coroziune, unele metale sunt
folosite drept substitueni pasivi pentru nlocuirea esuturilor tari (implanturile totale de old i
genunchi), ca i implanturi la fracturi (plci i tije), la dispozitive pentru fixarea coloanei, respectiv
n implantologia dentar. Alte aliaje metalice au roluri mai active n implantologie, cum ar fi
stenturile vasculare, fire de ghidaj pentru cateter, fire ortodontice i implanturi cohleare.
Biocompatibilitatea implanturilor metalice creeaz ns griji considerabile datorit faptului
c acestea se pot coroda ntr-un mediu in vivo [6]. Slbirea implantului prin dezintegrarea
materialului propriu-zis al acestuia, respectiv efectele nocive ale compuilor chimici rezultani
asupra esuturilor i organelor nvecinate se numr printre consecinele coroziunii.
Metalele n stare pur sunt mai rar utilizate, aliajele acestora fiind mai des folosite datorit
faptului c mbuntesc unele dintre proprieti, cum ar fi rezistena la coroziune i duritatea.
Trei grupe de materiale domin grupa biomaterialelor metalice: oelurile inoxidabile 316 L,
aliajele de cobalt i titanul pur sau aliajele de titan.
a) Oeluri inoxidabile
Primul tip de oel inoxidabil folosit n implanturi a fost oelul de vanadiu (18-8Va), dar
rezistena la coroziune a acestuia nu a fost corespunztoare. Pentru a-i mri rezistena la
coroziune, n compoziia acestuia s-a adugat molibden (18-8Mo), care mai trziu a devenit oelul
inoxidabil 316. n anii 1950, componena de carbon a oelului inoxidabil 316 a fost redus de la
0,08% la 0,03% din greutatea total, cu scopul de cretere a rezistenei la coroziune. Astzi, acest
oel poart numele de oel inoxidabil 316L i conine o cantitate de 0,03% carbon, 2%
magneziu, 17-20% crom, 12-14% nichel, 2-4% molibden i alte elemente n cantiti mai mici
cum ar fi fosforul, sulful i siliciul.
12

Fig. 1.1 - urub implantabil din oel inoxidabil productor

Horst Engineering
Stratul pasiv (rezistent la coroziune) al acestor oeluri nu este la fel de robust ca n cazul
aliajelor de titan. Din aceast cauz, oelurile inoxidabile sunt folosite doar la realizarea
implanturilor medicale temporare cum ar fi uruburile de fixare i tijele ortopedice pentru fixarea
fracturilor. Aceste oeluri pot fi ecruisate prin prelucrare la rece. Procesul de ecruisare este bazat
pe efectul inducerii unor tensiuni de compresiune n suprafaa piesei metalice printr-o sablare
controlat. Prin acest tratament se mrete rezistena la oboseal i, de asemenea, durata de
via a piesei. n cadrul procesului de fabricaie al oelurilor inoxidabile, tratamentele la cald sunt
necesare naintea celor la rece.
Tabel 1.1 Proprietile mecanice ale oelului inoxidabil 316L [8]
Stare
material
Tratat
termic
Deformat
la rece
Rezistena de
Rezistena minim la
Alungirea minim
Duritate
rupere la
rupere (0,2%Rp0,2),
la rupere
Rockwell
traciune, [MPa]
[MPa]
[%]
[HRB]
485
172
40
95
860
690
12
Structura cristalin poate fi de asemenea o caracteristic important n cazul dispozitivelor

ortopedice specifice, cum ar fi uruburile pentru fixarea oaselor fabricate din oelul 316L. n acest
context structura cristalin se refer la o anumit orientare preferat a grunilor deformai. n
seciuni metalografice longitudinale ale uruburilor din oel inoxidabil se pot observa gruni
alungii. Orientarea grunilor rezult n urma proceselor de prelucrare la rece la care sunt supuse
semifabricatele (bare trase) din care de regul sunt farbricate uruburile.
b) Aliaje pe baz de Co-Cr
Exist 2 tipuri de aliaje Co-Cr: (1) aliajul CoCrMo obinut prin turnare i (2) aliajul
CoNiCrMo care este obinut n mod normal prin prelucrare la cald. Aliajul turnat CoCrMo a fost
13

folosit de-a lungul multor decenii n stomatologie i n executarea articulaiilor artificiale. Aliajul
CoNiCrMo prelucrat la cald este utilizat pentru realizarea stlpului de susinere a protezelor supuse
la solicitri mecanice mari ca i cele de genunchi i old.
Cele dou elemente de baz ale acestor aliaje formeaz o soluie solid de pn la 65%
Co. Molibdenul este adugat micorarea granulaiei care mrete rezistena mecanic dup turnare
i prelucrare. Cromul mrete rezistena la coroziune i rezistena final a soluiei solide.
Figur 1.2 Implant plac tibial din CoCr- Natural Knee, productor Zimmer
Aliajul CoNiCrMo conine aproximativ 35% Co i 35% Ni. Aliajul este extrem de rezistent la
coroziune n contact cu apa marin (care conine ioni de clor) cnd este supus la solicitri.
Prelucrarea la rece poate mri rezistena mecanic considerabil. Totui exist dificulti n
prelucrarea la rece a acestui aliaj, n special cnd se realizeaz dispozitive de dimensiuni mari ca i
tija implantului de old. Doar prelucrarea la cald se poate utiliza pentru fabricarea pieselor de
dimensiuni mari din acest aliaj.
Rezistena ridicat la rupere i la oboseal a aliajului CoNiCrMo l fac potrivit pentru
aplicaii care necesit o perioad lung de via fr a se fractura sau a se degrada la oboseal,
precum este nevoie n cazul implanturilor de old. Acest avantaj este important atunci cnd lum
n considerare ct este de dificil nlocuirea implantului de old deoarece acesta este nglobat n
canalul medular. Astfel se explic de ce dup revizie implantarea oldului nu ofer aceleai
satisfacii ca la intervenia iniial, n special datorit unei fixri mai slabe.
n tabelul de mai jos sunt prezentate proprietile mecanice ale aliajelor CoCr. Pe lng
aceste proprieti aliajele CoCr prezint o foarte bun rezisten la coroziune. Dac se impune o
cretere a rezistenei la ntindere va rezulta o scdere a ductilitii aliajului.
14

Tabel 1.2 Proprietile mecanice necesare pentru aliajele de CoCr [9]

Proprieti
Rezistena la
rupere [MPa]
Limita de curgere
[MPa]
Elongaie [%]
Reducerea ariei
seciunii [%]
Rezistena la
oboseal [MPa]
Resturile
CoCrMo
CoCrWNi
655
CoNiCrMo
Clit
Lucrat la rece
860
763-1000
1793 min.
450
310
240-655
1585
10
50
65
35
310
metalice eliberate din proteze datorit uzurii, coroziunii pot afecta organe i
esuturi locale. Studiile au artat c n special cobaltul este toxic pentru celulele osteoblaste i
inhib sinteza de colagen tip I, osteocalcin i fosfataza alcalin. Cromul si aliajele de crom s-au
dovedit a fi mai bine tolerate de organism dect nichelul si cobaltul [10].
Modulul de elasticitate a aliajelor CoCr prezint valori ntre 220 i 234 GPa, valori mai mari
dect a altor biomateriale precum oelul inoxidabil. Acest fapt poate avea influen asupra
modurilor diferite de transfer a ncrcrii ctre os n articulaiile artificiale, dei studiile nu au
clarificat legtura ntre un modul crescut i longevitatea fixrii implanturilor. S-a observat o uzur
sczut a articulaiilor artificiale metal-metal n cazul acestor aliaje datorit proprietilor de
duritate i rezilien ridicate [11].
c)
Aliaje pe baz de Titan
Rezistena ridicat, greutatea sczut i rezistena deosebit la coroziune determin

utilizarea cu succes a titanului i aliajelor sale ntr-o diversitate de aplicaii de o fiabilitate ridicat
att n mediul medical ct i n alte ramuri industriale precum automotive, industria chimic,
extracii petroliere, sport. Astfel, n prezent titanul pur i aliajele sale sunt cele mai des utilizate
biomateriale n fabricarea implanturilor.
Figura 1.3 uruburi dentare din titan productor Dentatus
15

Suprafaa
implanturilor
de
titan
const
dintr-un
strat
subire
de
oxid
crui
microarhitectur i compoziie chimic este de o importan ridicat din mai multe motive. Natura
fizic a suprafeei determin aderena implantului la esutul nconjurtor, iar compoziia chimic a
acestui strat permite diferite tipuri de ataament a biomoleculelor prin reacii chimice. Datorit
acestei proprieti de pasivare a titanului, implanturile din acest metal sunt foarte bine tolerate de
organism deoarece stratul de oxid are rol de barier ntre esut i particulele de titan de sub strat.
Interaciunea ntre esut i suprafa este dinamic, n special imediat dup implantare pn
atinge un cvasiechilibru [12], [13], [186].
Tabel 1.3 Proprietile mecanice ale titanului i ale aliajelor sale [14]
Ti pur
Ti pur
Ti pur
Ti pur
Gradul1
Gradul2
Gradul3
Gradul4
240
345
450
170
275
Elongaia [%]
24
Gtuirea [%]
30
Proprietate
Rezistena la
rupere [MPa]
Limita de
curgere [MPa]
Ti6Al4V
Ti13Nb13Zr
550
860
1030
380
485
795
900
20
18
15
10
15
30
30
25
25
45
Proprietiile mecanice ale titanului sunt puternic influenate de coninutul de oxigen din
material. Spre exemplu un coninut de 0,27% oxigen determin o rezisten de rupere la oboseal
de 216 MPa, pe cnd pentru acelai numr de cicluri la un procentaj de oxigen de 0,40%
rezistena de rupere la oboseal devine aproximativ 88 MPa [15]. Totui, prezena oxigenului n
compoziia titanului are dezavantajul c scade prelucrabilitatea titanului.
Prezena altor elemente precum oxigenul, carbonul, azotul poate mbuntii proprietiile
mecanice ale titanului. Azotul are efect de durificare a titanului asemenea oxigenului cu rezultate
aproape duble.
Ti-6A1-4V este un aliaj al titanului ale crui proprieti depind de proporiile fazelor alfa i
beta, rezultate n urma tratamentelor la care a fost supus materialul. Pentru a stabiliza faza alfa se
folosete aluminiul, iar pentru a stabiliza faza beta se introduce vanadiul.
Atunci cnd aliajul este nclzit pn n domeniul fazei beta (peste 1000C), iar apoi este
rcit lent la temperatura ambiant faza alfa precipit n graunii de faz beta. Dac rcirea se face
rapid se obine o mpletire a celor dou faze. Uzual aliajul se nclzete i se prelucreaz la
temperaturi apropiate de temperatura de formare a fazei beta, iar apoi se recoace pentru a obine
o structur fin a grunilor. Folosind acest procedeu, materialul rezultat, are o rezisten de
rupere la oboseal ridicat.
TiNi, un aliaj cu memoria formei, este unul din cele mai speciale aliaje adoptate n
industria implanturilor. n ciuda reticenelor cauzate de procentul ridicat de nichel, aliajul se
comport din punct de vedere al biocompatibilitii similar cu titanul pur.
16

d) Alte metale
n anumite aplicaii se folosesc i alte metale, precum tantalul a crui structur este foarte
asemntoare cu cea a osului. Aplicaiile tantalulului sunt totui limitate datorit proprietilor
mecanice sczute i a densitii ridicate.
Metalele din grupul platinei precum Pt, Pd, Rh, Ir, Ru i Os sunt extrem de rezistente la
coroziune dar au proprieti mecanice sczute [16]. Sunt n principal folosite pentru electrozi
datorit conductivitii electrice bune.
De asemenea, diferite metale se folosesc pentru acoperirea implanturilor prin procedee
precum pulverizarea cu jet de plasm, implantarea de ioni, depunere chimic i fizic i depunere
n pat fluidizat [17].
2.1.1.2. Biomateriale polimerice

Polimerii sunt potrivii pentru aplicaii biomedicale datorit proprietilor lor diverse,
respectiv pentru c sunt similari materialelor naturale, cum ar fi matricele extracelulare bazate pe
proteine. De exemplu, doar printr-o mic variaie la legturile chimice sau la structur, polimerii
pot fi flexibili sau rigizi, respectiv pot avea rezisten mare sau mic. n funcie de modificrile
suprafeei, resping legturile cu proteine sau, din contr, sunt predispuse la acestea. Polimerii pot
fi biodegradabili sau permaneni, putndu-se forma n structuri complexe folosind numeroase
tehnologii de fabricaie.
Figura 1.4 - Cup acetabular din UHMDPE productor Ortho Development
Printre dezavantajele polimerilor se numr rezistena lor inferioar metalelor sau

ceramicelor, respectiv tind s se deformeze n timp. Anumite tipuri de polimeri se pot deteriora n
cursul procesului de sterilizare i se pot descompune n corp n mod catastrofal, sau prin eliberarea
unor compui toxici [18]. Prin urmare, examinarea nainte i dup implantare a devenit procedura
standard n cazul dezvoltrii oricrui nou dispozitiv medical fabricat din polimeri.
17

Tabel 1.4 Aplicaii ale polimerilor [19], [20]

Polimeri
Aplicaii
Implanturi cardiovasculare
Polietilena, polivinil, policlorhidr, poliester, cauciuc siliconal,

politetrafluoritilen
Implanturi ortopedice
Polietilen, polimetil, polimetacrilat,
Farmaceutic (ambalaje
Polilactite, policoglicoide
medicamente)
esuturi artificiale
Acid polilactic, acid poliglicoloc, polilactid, policoglicoide
Marile macromolecule din compoziia polimerilor disponibili n comer sunt sintetizate prin
combinarea mai multor (poli) molecule (meri) mai mici printr-un proces denumit polimerizare.
Polimerizarea poate fi de dou feluri: polimerizare prin adiie (sau reacie n lan), atunci cnd
monomerii sunt ataai unul cte unul, respectiv polimerizare prin condensare (reacie n trepte),
atunci cnd mai multe lanuri de monomeri sunt combinate i se genereaz un produs secundar,
cum ar fi apa. n scopul mbuntirii proprietilor mecanice, chimice i fizice, n sintetizarea
polimerilor se folosesc aditivi cum ar fi ageni de umplere, plastifiani, stablilizatori i colorani
[21]. n momentul de fa este cunoscut faptul c unii aditivi folosii n fabricarea recipienilor din
plastic pentru ap provoac dereglri hormonale sau sunt cancerigeni, acesta fiind un exemplu clar
pentru care aditivii polimerilor folosii n aplicaii biomedicale trebuie s fie atent verificai nainte
de implantarea ntr-un pacient.
Proprietile mecanice ale materialelor polimerice depind de mai muli factori, i anume
compoziia i structura lanurilor macromoleculare precum i masa atomic a acestora. Tabelul de
mai jos red cteva din cele mai importante proprieti mecanice ale unor biomateriale polimerice.
Tabel 1.5 Proprietile mecanice ale polimerilor biomedicali [20]
Absorbia de
Modulul de
Rezistena la
Elongaia la
ap
elasticitate
rupere
rupere
[%]
[GPa]
[MPa]
[%]
Polietilen
0.0010.02
0.82.2
3040
Polipropilen
0.010.035
1.62.5
0.080.1
Tg
Tm
[K]
[K]
130500
160170
398408
2140
100300
243270
433453
310
50800
148
233
0.10.9
1.52
2840
600720
200250
453523
0.010.05
12
1540
250550
293295
595600
Polivinil-clorur
0.040.75
34
1075
10400
250363
423
Poliamid
0.253.5
2.43.3
4490
40250
293365
493540
0.10.4
34.8
3880
2.56
379388
443
0.150.7
2.84.6
5675
8130
418
498523
0.060.3
34.9
4280
50500
340400
518528
Polimer
Polidimetilsiloxan
Poliuretan
Politetrafluoroetilen
Polimetilmetacrilat
Policarbonat
Polietilentereftalat
18

Proprietile de traciune ale polimerilor pot fi caracterizate de comportamentul lor la

deformare. Polimerii amorfi, cu structur de cauciuc sunt moi i extinderea lor este reversibil.
Libertatea de micare a lanului polimeric este limitat local, pe cnd structura reelei rezultate din
mpletirea lanurilor previne micarea sau curgerea la scar macro. Astfel, polimerii cu structur de
cauciuc au de obicei ridigitate sczut i o extensibilitate de cteva sute de procente. Materialele
de cauciuc prezint o cretere a tensiunii nainte de rupere datorit cristalizrii i a reorientrii
moleculare n direcia tensiunii. Polimerii sticloi i semicristalini au rigiditate mai mare i o
extensibilitate mai sczut.
Proprietile mecanice maxime la deformaie ale polimerilor sunt importante n selecia
unui material specific pentru aplicaii biomedicale. Comportarea la oboseal este de asemenea
important pentru evaluarea aplicaiilor. De exemplu, polimerii folosii n inima artificial trebuie s
reziste la multe cicluri de micri pulsatile.
Materialele polimerice pot fi clasificate drept termoplastice respectiv termorigide. Un
polimer termoplastic are structur liniar sau ramificat. n stare solid se aseamn unei farfurii
cu spaghetti, lanurile putnd aluneca unele peste altele. Odat nclzite, lanurile alunec mai
uor, polimerul curgnd sau topindu-se. Prin urmare, polimerii termoplastici pot fi nclzii, topii,
turnai i reciclai. Proprieti diferite pot fi obinute prin adugarea anumitor liganzi. PVC este mai
rigid dect PE datorit faptului c atomii de clor sunt mai mari i mpiedic alunecarea moleculelor
peste celelalte. Polimetilmetacrilat (PMMA) este mult mai rigid i casant dect UHMWPE, din cauza
faptului c doi dintre atomii de hidrogen sunt nlocuii, unul cu un grup metilic (CH 3), iar cellalt cu
un grup acrilic (COOCH3). Creterea rezistenei i a modulului de elasticitate se poate explica prin
faptul c aceste grupuri de dimensiuni mari fac alunecarea mult mai anevoioas. De asemenea,
orientarea tipic cristalin a moleculelor este i ea mpliedicat, astfel PMMA (plexiglas-ul) are
structur amorf, prin urmare este transparent.
Polimerii termoplastici se pot degrada n corpul uman printr-o reacie de hidroliz, n cursul
creia apa provoac descompunerea lanului de polimer. Poly (D,L-lactide-coglicolide) sau PLGA
este un poliester termoplastic care se regsete n majoritatea instrumentelor biomedicale, cum ar
fi suturile chirurgicale respectiv uruburile i plcile ortopedice de fixare. Suturile din vicril sunt
realizate dintr-un copolimer al PLGA, acesta fiind compus n proporie de 90:10 din acid glicolic
respectiv lactic. Acidul poliglicolic se absoarbe mai repede dect acidul polilactic, iar prin variaia
raportului acizilor amintii n copolimer, expertul n biomateriale poate ajusta compoziia astfel
nct s se ajung la rata dorit de descompunere. n timpul descompunerii PLGA se elibereaz
compui prezeni n mod normal n corpul uman, dar care provoac o scdere local a pH-ului,
ceea ce poate mpiedica formarea de esuturi noi.
Spre deosebire de cele prezentate anterior, un polimer termorigid este compus din lanuri
reticulate. Acetia se descompun mai degrab dect s se topeasc cu creterea temperaturii.
Termenul rigid presupune existena unei reacii chimice, de multe ori implicnd schimb de cldur,
care duce la rigidizarea materialului ntr-o structur reticulat tridimensional. Un exemplu uzual
pentru asemenea materiale este rina epoxy 5-minute. Cnd dou pri sunt amestecate,
catalizatorul provoac rigidizarea rinii ntr-o structur reticulat. Odat rigidizat, nu mai poate fi
nclzit pentru reutilizare [22]. Gradul de reticulare influeneaz direct proprietile mecanice.
Folosind rini cu grad sczut de reticulare se fabric mnuile de cauciuc, respectiv cu un grad i
19

mai ridicat i adugnd mai mult sulf se obin anvelope pentru autovehicule. Cu un grad i mai
mare de reticulare se pot obine structuri rigide de exemplu pentru fabricarea carcaselor bateriilor
auto.
Datorit multitudinii aplicaiilor n domeniul biomedical, hidrogelii, structuri polimerice
reticulate destinse pe baz de ap, au fost studiai extensiv n ultima perioad. Hidrogelii sunt
obinui prin reticularizarea lanurilor polimerice aflate ntr-o soluie apoas, cu ajutorul radiaiilor
sau prin metode chimice, n scopul realizrii unei reele polimerice completate cu molecule de ap.
Cel mai des utilizat hidrogel este polihidroxietilmetacrilat (PHEMA) reticulat. PHEMA are coninut
de ap similar cu cel al esuturilor vii, rezist la degradare, nu se absoarbe n corp, rezist la
sterilizarea termic fr degradri i se poate realiza ntr-o varietate larg de forme i dimensiuni.
Aplicaii ale hidrogelilor sunt lentilele de contact, capsule pentru transportul medicamentelor,
materiale adezive pentru vindecarea rnilor, materiale pentru reconstrucia organelor genitale,
membrane de rinichi artificial i materiale pentru nlocuirea corzilor vocale. Gradul de reticulare
este un parametru critic n cazul hidrogelilor, determinnd raportul de destindere i rezistena
mecanic [23].
O multitudine de tehnologii sunt aplicate pentru obinerea instrumentelor biomedicale
bazate pe polimeri. Tehnologia folosit depinde de o serie de factori, cum ar fi caracterul
termoplastic sau termorigid al materialului, iar n cazul termoplastic, de temperatura de curgere.
Polimerii termorigizi trebuie pregtii n form lichid liniar i turnai ntr-o matri. Dup acest
pas nu mai pot fi supuse la niciun procedeu de formare. n schimb, polimerii termoplastici pot fi
prelucrai repetat (prin comprimare, injectare, extrudare, etc), turnai i formai n fibre sau
pelicule prin extrudare urmat de ambutisare sau laminare cu scopul mbuntirii proprietilor
mecanice, cum ar fi rezistena la rupere [21].
Abilitatea de a forma structuri complexe i posibilitatea de a controla proprietile
materialului la diferite scri, respectiv faptul ca sunt degradabili, fac din polimeri alegerea numrul
unu n ceea ce privete materialele pentru ingineria esuturilor.
Proprietile mecanice, chimice i fizice ale materialelor polimerice sunt de o relevan
ridicat pentru performana diferitelor aparate utilizate n clinicile medicale. Polimerii reprezint o
familie divers i mare de materiale care prezint caracteristici ce le permit utilizarea n aplicaii
att pentru esuturi moi ct i esuturi tari. Muli cercettori au modificat cu succes proprietile
chimice i biologice ale polimerilor, prin imobilizarea anticoagulanilor precum heparina sau
proteinelor precum albumina, pentru a lrgi spectrul lor de aplicaii [23], [24].
2.1.1.3. Biomateriale ceramice

Bioceramicele i biosticla sunt materiale ceramice biocompatibile [25]. Bioceramicele sunt
folosite pentru o varietate mare de aplicaii, de la oxizi ceramici ineri implantai n organism, pn
la materiale resorbabile. Totui aplicaia lor principal este pentru implanturi dentare i ortopedice
[26].
20

Figura 1.5 - Implant de old ceramicceramic - productor Finsbury Orthopaedics

Spre deosebire de metale i polimeri, ceramicele sunt greu de forfecat plastic datorit
naturii ionice i covalente a legturilor i a numrului mic de sisteme de alunecare. Aceste
caracteristici fac ca ceramicele sa fie nonductile i sunt responsabile pentru deformarea prin
alunecare aproape inexistent la temperatura ambiant [27].
Conductivitatea electric i termic a acestor materiale se explic prin legturile
interatomice de tip ionic. De asemenea slaba mobilitate a dislocaiilor explic proprietatea de
plasticitate redus. Aceast lips a plasticitii confer ceramicelor proprietatea de fragilitate care
determin materialele ceramice s i pstreze forma i dimensiunile pn la rupere.
Ceramicele sunt foarte sensibile n privina microfisurilor deoarece n loc s se deformeze
plastic fisurile se propag formnd fracturi. Astfel, la punctul de iniiere a crpturii se formeaz
un concentrator de tensiune care slbete materialul considerabil. De aceea este greu s se
estimeze rezistena la rupere a materialului ceramic. Tot din acest considerent bioceramicele au
rezisten de rupere la traciune sczut comparativ cu rezistena de rupere la compresiune. Dac
totui, o ceramic este fr defecte este un material foarte puternic chiar i supus unor ncrcri
mari. Fibrele de sticl fr defecte au rezistena la rupere mai mare dect oelul de rezisten
ridicat [27].
Ceramicele sunt de obicei dure. Msurarea duritii acestora se face tot prin calibrare cu
materiale ceramice. Diamantul este cel mai dur material ceramic, iar talcul este cel mai puin dur.
Materialele ca alumina i cuarul au valori ale duriti n acest interval.
Alte caracteristici ale materialelor ceramice sunt temperatura ridicat de topire i
conductivitate sczut la temperatur i electricitate. Aceste caracteristici se datoreaz legturilor
chimice din ceramice.
Tabel 1.6 Proprietile mecanice ale unor bioceramice de referin [19]
Fosfat de
Carbon
calciu
pirolitic
22
40-117
18-28
4500
500
510-896
517
350
56-83
69-193
280-560
Materiale
Alumina
Biosticla
Modulul Young[GPa]
380
Rezistena la compresiune [MPa]

Rezistena de rupere la traciune [MPa]
21

Pentru a fi considerate bioceramice, materialele ceramice trebuie s fie nontoxice,

noncarcinogenice,
nonalergenice,
noninflamatoare,
biocompatibile,
biofuncionale
pe
toat
perioada de via a dispozitivului pentru care au fost utilizate.

Categoriile
de
bioceramice
sunt:
ceramice
bioinerte
sau
neabsorbabile,
ceramice
absorbabile, ceramice bioactive.

Bioceramicele bioinerte prezint o bun comportare la coroziune, valori ridicate ale
densitii, modulului lui Young, a duritii. Din cadrul acestor ceramice fac parte alumina (Al2O3) i
oxidul de zirconiu (ZrO2). Ele sunt de obicei folosite n cazul implanturilor ortopedice, implanturilor
dentare i n chirurgia maxilo-facial.
Bioceramicele absorbabile au ca principal component fosfaii de calciu sub diferite
modificri structurale. Datorit solubilitii acestora, care asigur degradarea ionic, ele sunt
utilizate n aplicaii care stimuleaz creterea oaselor pe material. Problema cea mai frecvent n
privina acestor ceramice este corelarea ratei de dizolvare a materialului cu viteza de cretere a
esutului osos din jurul implantului.
Bioceramicele bioactive sunt formate din fosfai i sticle ceramice. Se folosesc de obicei
pentru acoperirea implanturilor, tijelor i uruburilor de fixare, pentru a permite esutului uman s
adere la suprafaa implantului. Din aceast categorie fac parte hidroxiapatita i bioglass-ul. Ele
formeaz legturi care permit transferul solicitrilor de ntindere i forfecare de-a lungul interfeei
esut-implant, proprietate ce vine n avantajul ancorrii implantului la esutul nconjurtor.
A patra grup este reprezentat de ceramice pe baz de carbon cu diferite structuri, n
funcie de tehnologia de procesare. Principalul avantaj al acestei grupe de materiale este c sunt
total inerte fa de esutul viu. Din aceast grup fac parte carbonul, carburile i nitrurile de
carbon.
Figura 1.6 Bioglass- structur scaffold [187]

Bioceramicele nu sunt supuse coroziunii dar se pot degrada n mediul fiziologic n funcie
de tipul materialului, dup cum se arat n clasificarea de mai sus. Chiar i alumina, care este
considerat n general un material bioinert, i schimb proprietatea de rezisten mecanic cnd
este inserat ntr-un mediu salin. Ceramicele bioactive ct i materialele sticloase sunt degradabile
n organismul uman ele fiind absorbite datorit activitii osteoblastelor (celule rspunztoare cu
modelarea esutului osos). Acest fenomen are loc deoarece particulele de fosfat de calciu se
aseamn cu particulele minerale ale esutului osos [22].
22

Alumina, cel mai utilizat material al categoriei de ceramice bioinerte are proprietile
mecanice cele mai bune, dar asemenea tuturor ceramicelor are o rezisten la rupere sczut n
comparaie cu metalele. Totui avantajul principal al aluminei este faptul c are un coeficient de
frecare sczut i o rezisten mare la uzare.
Hidroxiapatita i sticla bioactiv sunt la polul opus privind proprietile mecanice, fa de
alumin. De aceea, acestea sunt utilizate n aplicaii care necesit un proces de osteointegrare.
Exist metode speciale care simuleaz condiii simultane de tensiune, uzare i mediu
coroziv, pentru a determina comportarea bioceramicelor pe termen lung, ntr-un mediu biologic.
Astfel se pot determina aplicaiile cele mai potrivite pentru fiecare categorie. Totui, n ultima
perioad, acolo unde bioceramicele nu reuesc s ndeplineasc toate cerinele, se folosesc
compozite ceramice care aduc cu sine avantajele ceramicelor mbinate cu anumite proprieti de la
celelalte faze din compozit.
2.1.1.4. Biomateriale compozite

Materialele compozite sunt compuse din dou sau mai multe pri distincte. Cu toate c i
materialele pure pot avea subuniti structurale distincte, cum ar fi grunii sau moleculele,
termenul compozit se folosete exclusiv n cazul unor materiale compuse din doi sau mai muli
constitueni distinci din punct de vedere chimic, separai de o interfa clar identificabil. Exemple
de materiale compozite folosite n aplicaii biomedicale sunt: polietilen ranforsat cu fibre de
carbon i polimeri pe baz de acid polilactic ranforsai cu particule de hidroxiapatit, pentru
aplicaii de vindecare osoas. Faza discontinu se numete material de ranforsare deoarece este
de regul mai rezistent dect faza continu.
Pentru situaii n care se dorete absorbia unuia dintre componenii din compozit, se
realizeaz compozite cu matrice absorbabile. Se utilizeaz pentru aplicaii cnd este necesar
administrarea de medicamente pentru a expune suprafee unor esuturi [28]. Motivele principale
pentru utilizarea acestor compozite sunt de a obine proprieti mecanice care variaz n timp i de
a asigura dizolvarea complet a unor piese pentru a elimina preocuprile cu biocompatibilitatea.
Un exemplu tipic este folosirea compozitelor absorbabile pentru fixarea fracturilor [29].
Compozitele cu matrice neabsorbabil sunt de obicei folosite n implanturi care trebuie s
ofere proprieti mecanice specifice care nu pot fi obinute cu materiale omogene. Spre exemplu,
n cimenturi s-au utilizat particule i buci de fibre pentru a ntri i durifica structuri care sunt
supuse unor solicitri mari.
23

Figura 1.7 - Component a protezei de sold cu fibre de

metal Reed Sprunger
Materialele compozite se pot folosi cu succes la fabricarea unor instrumente la care este
necesar o combinaie de proprieti mecanice imposibil de obinut n cazul unor materiale pure,
cum ar fi protezele totale de old, plombele dentare i plcile pentru oase. Marele avantaj al
compozitelor const n posibilitatea proiectrii proprietilor astfel nct s corespund exact
aplicaiei dorite; cu toate acestea, este practic imposibil crearea unui compozit cu o structur
perfect. De regul apar probleme legate de dispersia celei de-a doua faze sau prezena unor
legturi slabe dintre cele dou faze, ceea ce conduce la scderea proprietilor mecanice i implicit
la eficien redus a produsului finit. n ciuda acestor probleme, n cele mai multe cazuri
proprietile compozitelor sunt totui net superioare biomaterialelor pure, prin urmare devin tot
mai des utilizate n aplicaii biomedicale.
Proprietile unui compozit depind de forma neomogenitilor, de volumul ocupat de ele i
de interfaa dintre constitueni. Geometria materialului de ranforsare se clasific n: particule, fr
dimensiuni lungi, fibre, cu o dimensiune lung, i plcue cu dou dimensiuni lungi. Incluziunile pot
varia n mrime i form n cadrul categoriei. De exemplu, incluziunile de particule pot fi sferice,
elipsoide, poliedrice sau neregulate. Particulele au o natur nefibroas i sunt aproximativ
echiaxiale.
Fibrele sunt materiale de ranforsare a cror lungime este mult mai mare dect seciunea.
Laminatele sunt structuri compozite care se formeaz prin suprapunerea fibrelor sau a plcilor
dup o orientare care s produc un element structural. Caracteristicile i numrul plcilor sunt
astfel alese nct s corespund cerinelor de proiectare. Din punct de vedere mecanic, fibrele sunt
mult mai efective fa de particule. Compozitele cu fibre de polimer pot avea o rezilien sau o
rezisten comparabil cu cea a metalelor sau chiar mai mare. De asemenea, ce trebuie remarcat
este c materialele compozite ranforsate cu particule sunt izotropice pe cnd cele ranforsate cu
fibre sunt anizotrope.
Pentru a ndeplini anumite cerine se caut relizarea compozitelor cu proprieti diferite pe
direcii diferite. La nivel molecular, esuturile din oase, tendoane, vase de snge sunt compozite cu
proprieti anizotropice, iar singura metod de a le substitui este prin materiale compozite.
24

Figura 1.8 Ranforsri folosite n materiale compozite: (a) particule, (b) fibre, (c) plcue (platelet) [22]
Dei fiabilitatea i biocompatibilitatea compozitelor sunt problematice, ele ofer avantaje

unice privind proiectarea i fabricarea lor. Aceste avantaje pot fi utilizate pentru construirea de
proteze isocompliant pentru artere [30] sau plcue de fixare i uruburi cu o rigiditate controlat
[31]. i proprietatea lor de radioluminiscen se dovedete a fi de mare importan pentru
anumite aplicaii precum fixarea fracturilor, deoarece astfel se poate urmrii fractura prin
imagistica cu raze X.
Compozitele polimerice sunt materialele ideale pentru orteze i proteze ortopedice datorit
acestor proprieti de flexibilitate a proiectrii i rezistenei, ntr-att nct se pot realiza astzi
proteze pentru persoane cu performane atletice [32].
Materialele compozite se realizeaz prin amestecarea a doi constitueni, urmat de
turnarea, compactarea sau supunerea lor la o reacie chimic. Dac faza primar de ranforsare
este alctuit din fibre, de regul se acoper sau se impregneaz cu cealalt faz, astfel nct
compozitul s poat fi nclzit i presat pentru a se ajunge la densitatea dorit. O alt modalitate
de a obine compozite este printr-o reacie chimic, atunci cnd a doua faz se creaz chiar n
timpul reaciei. n cazul formrii unor tuburi de nalt rezisten, se utilizeaz procedeul nfurrii
unui filament n jurul unui miez, urmat de densificarea structurii.
Biocompozitele au proprieti speciale care nu permit folosirea direct a materialelor
existente n industrie. De cele mai multe ori compozitele se proiecteaz particular pentru fiecare
aplicaie n parte. Acest fapt duce la costuri suplimentare, un dezavantaj ce se adaug la
problemele de biocompatibilitate a biocompozitelor.
Datorit costului ridicat, biocompozitele sunt probabil singurele biomateriale care se
proiecteaz i fabric exclusiv pentru dispozitive medicale.
2.1.1.5. Biomateriale naturale. iesutul osos

Materialele naturale sunt sintetizate de un organism sau plant i sunt de regul mai
complicate din punct de vedere chimic i structural dect materialele sintetice.
Proteinele i polizaharidele reprezint de fapt polimerii produi de natur, putnd fi astfel
clasificate n categoria polimerilor. Proteinele, grupul principal de molecule care fac viaa posibil,
sunt construite din lanuri lungi formate din doar 20 de aminoacizi legai ntre ei de peptide.
Proteinele au nenumrate funcii n corpul uman. Pot avea rolul de enzime care catalizeaz mii de
reacii chimice importante eseniale pentru via. Moleculele de semnalizare ale celulelor (cell
signaling molecules), responsabile pentru migrarea celulelor sunt formate din proteine. Proteinele
25

sunt elementele de construcie ale matricii extracelulare de suport a mai multor esuturi.
Schimbri ale nivelului de proteine sau n structura lor conduc la funcionare defectuas, cauznd
prin urmare multe boli. Implantarea unui produs natural confecionat din proteine este de dorit n
detrimentul polimerilor sintetici, tocmai datorit capacitii proteinelor de a comunica cu celulele
vii.
Legturile direcionale din proteine dau natere unor proprieti mecanice ridicate ale
polimerilor naturali. De exemplu, rezistena la rupere a mtsii este mai mare dect a nylon-ului
tras, unul dintre cei mai rezisteni polimeri sintetici. Mai mult dect att, modulul de elasticitate al
mtsii este de 13 ori mai mare dect valoarea corespunztoare nylon-ului. La fel ca n cazul
polimerilor sintetici, gradul de reticulare afecteaz semnificativ proprietile mecanice. De
exemplu, elastina, care se gsete n pielea uman, este compus din proteine nfurate cu
puine legturi reticulare. Aceast caracteristic structural confer elastinei flexibilitate mult mai
mare dect a colagenului de tip I, care se gsete n oasele umane i care este format din
molecule tip bar asamblate ntr-o structur cristalin repetitiv cu grad ridicat de reticulare.
n aplicaiile biomedicale se mai folosesc i materiale ceramice naturale. Ceramicele
naturale sunt de regul pe baz de calciu, cum ar fi cristalele osoase din fosfat de calciu purificat
sau coralii din carbonat de calciu, ambele materiale fiind utilizate n aplicaii ortopedice pe post de
nlocuitor de material osos. Osul intact este de fapt un compozit compus din material ceramic
natural i polimeri naturali, ceea ce face ca osul s fie mult mai rezistent la fisurare dect
ceramicele sintetice, datorit structurii sale multistrat, care mpiedic propagarea fisurilor.
Cristalele ceramice mici sunt aliniate cu precizie i sunt separate de straturi subiri de material de
baz organic, care formeaz astfel interfaa dintre cristale. Propagarea unei fisuri n acest material
este foarte anevoioas tocmai datorit faptului c trebuie s urmreasc conturul neregulat al
interfeei dintre cristale.
esutul osos compozit natural

Compoziia esutului osos este aproximativ 60% materie anorganic, 30% organic i 10%
ap, cu uoare variaii, n funcie de vrst, sex, tipul de os i starea fiziologic a organismului.
Celulele osoase sunt intergate ntr-o matrice fibroas de proteine ntrit prin mineralizare. Acest
fapt i confer osului caracter de compozit. El poate fi considerat ca fiind format din materie
celular (15%) i o matrice extracelular (85%).
Celulele osoase, osteoblastele i osteocitele, sunt responsabile de procesele de sintez,
modelare, ntreinere i remodelare. Pentru a obine proprietile mecanice caracteristice osului,
precum duritate i rezisten se dezvolt matricea extracelular [33].
Osteoblastele sunt celule mononucleate de form cubic sau cilindric ce comunic ntre
ele i se formeaz n mduv. Ele au rolul de a controla mineralizarea i de a sintetiza proteinele
necesare bunei dezvoltri a esutului osos. Poziia lor este n exteriorul osului. Dup realizarea
funciei specifice, fie rmn ncastrate n matricea creat, transformndu-se n osteocite, fie se
opresc din funionare prin fenomenul de moarte programat, fie migreaz la suprafaa osteonului
pentru a forma stratul ce mpiedic solubilizarea cristalelor minerale din os.
26

Figura 1.9 - Compoziia osoas: osteoblaste, osteocite, matricea calcificat
Rolul osteocitelor este de ntreinere a osului. Ele sunt interconectate asemenea

osteoblastelor comunicnd i cu acestea. Din aceste celule se formeaz osteoclastele mature cu rol
n demineralizarea i prin urmare reconstrucia i remodelarea osoas.
Osul este una dintre cele mai dure structuri din organismul animal. Culoarea lui, n stare
vie, este roz albicios n exterior i rou puternic n interior. La examinarea unei seciuni n os se
observ c este compus din dou feluri de esuturi, unul de natur dens, osul compact, iar
celalalt const din fibre i lamele, ce se unesc ntr-o structur reticular, osul trabecular.
esutul compact este mereu pe partea exterioar a osului, iar esutul trabecular pe
interior. Cantitatea relativ a acestor dou feluri de esuturi variaz n funcie de os, sau partea din
acelai os dupa cerinele necesare. Examinarea atent a esutului compact arat c este extrem de
poros, astfel c diferena fa de osul trabecular este cantitatea de materie solid i numrul de
spaii din fiecare. Spaiile sunt mici i materia solid consistent n osul compact, iar n osul
trabecular spaiile sunt mari iar materia solid este ntr-o cantitate mai mic.
n timpul vieii, osul este permeat de vase sanguine i este nglobat ntr-o membran
fibroas denumit periost. Excepie fac prile acoperite cu cartilaj articular. Dac se d jos
periostul de pe os se observ mici puncte roii, unde vasele de snge intr n os. Dac osul viu ar
fi secionat, se poate observa sngele ieind din vasele ramificate n os. nteriorul oaselor lungi ale
membrelor este o cavitate cilindric umplut cu mduv, nconjurat de o structur aleolar
puternic vascularizat denumit membrana medular.
Proprietile mecanice ale osului mpac (mbin) rigiditatea i elasticitatea ridicat ntr-o
form care nc nu a putut fi reprodus cu un material sintetic. S-au gsit specimene de os cortical
cu o rezisten la traciune de 78.8-151 MPa n direcie longitudinal i 51-56 MPa n direcie
transversal. Elasticitatea osului este de asemenea important pentru funcionarea osului,
deoarece i confer abilitatea de a rezista la impact. Estimri ale modulului de elasticitate a
specimenelor de os arat o elasticitate ntre 17-20 GPa n direcie transversal i 6-13 GPa n
direcie transversal [34]. Aceste proprieti remarcabile ale osului se datoreaz naturii compozite
n care cristalele minerale sunt orientate n direcie longitudinal oferind osului o rezisten i
rigiditate mai mare n direcia longtudinal dect n direcia transversal.
27

Lund n considerare raporturile care exist ntre cele

trei dimensiuni ale oaselor, ele pot fi mprite n: oase lungi,
oase late, oase scurte i oase mixte.
Oasele lungi au lungimea mult mai mare fa de
grosime i lime. Dintre acestea fac parte femurul, tibia,
peroneul, humerusul, etc. Ele sunt alctuite dintr-un corp sau
diafiz i din dou extremiti numite epifize. Majoritatea
oaselor din organismul uman intr n aceast categorie.
Oasele late au limea i lungimea mai predominant
fa de grosime. Dintre acestea fac parte oasele craniului,
omoplatul, sternul i coxalul.
Oasele scurte se caracterizeaz prin faptul c lungimea,
grosimea i limea sunt aproape egale. n aceast categorie
intr oasele tarsiene, carpiene i vertebrele.
Oasele mixte au o form neregulat, care nu se
ncadreaz n niciuna din celelalte categorii. Printre oasele
mixte se enumer osul maxilar, osul zigomatic, mandibula, etc.
Pentru a-i ndeplinii rolul, oasele prezint numeroase
elemente precum proeminene, suprafee articulare i scobituri.
Oricare ar fi forma oaselor, ele prezint numeroase
elemente ce contribuie la ndeplinirea rolului lor. Dintre
acestea,
cele
mai
comune
sunt:
suprafeele
articuare,
proeminenele i scobiturile.
Modelarea i reconstrucia osoas

Figura 1.10 -Structura oaselor
lungi: esut compact i spongios
[35]
esutul
osos
este
treptat
nlocuit
cu
unul
nou,
microfisurile i fracturile sunt reparate la o vitez care scade cu

vrsta. Pn la finalul adolescenei, aceste procese de formare de esut nou i resorbie se
concentreaz pe creterea i modelarea oaselor, la maturitate aceste procese sunt respunztoare
pentru remodelarea oaselor. nlocuirea esutului are loc fr a fi afectat forma osului. Acest
fenomen poart denumirea de legea lui Wolff de remodelare a osului [36].
Remodelarea are loc la nivelul suprafeelor spongioase i ale osteonilor prin aciunea
concentrat a osteoblastelor i osteoclastelor i sub controlul factorilor reglatori locali i sistemici.
Secvena de remodelare decurge ntotdeauna dup acelai tipar. ntr-o prim etap sunt activate
osteoclastele care iniiaz resorbia unei anumite poriuni osoase. Dup o anumit perioad de
timp (de regul 2-3 sptmni) osteoclastele i reduc activitatea i mor prin apoptoz, iar
suprafaa afectat este pregtit pentru etapa formatoare, de exemplu prin producerea de linii de
cimentare. Remodelarea se ncheie prin refacerea esutului osos sub aciunea osteoblastelor, care
este un proces mult mai lent (3-4 luni). Sptmnal se recicleaz astfel ntre 5 i 7% din masa
osoas, cu nlocuirean complet a coninutului unui os spongios la fiecare 3-4 ani i a unui os
compact la fiecare 10 ani [37].
28

Figura 1.11 -Modelarea i remodelarea osoas
La suprafaa osteoblastelor se gsete o enzim, fosfataza alcalin, care intervine n

calcificarea matricei osoase prin clivarea pirofosfatului un inhibitor al mineralizrii osoase [38].
Fosfataza alcalin osoas este un indicator sensibil i fidel al metabolismului osos. Un nivel ridicat
este ntlnit n perioada de cretere osoas, n cursul procesului de vindecare a fracturilor, ct i n
afeciuni ale sistemului osos caracterizate prin hiperactivitate osteoblastic i remodelare osoas,
cum ar fi boala Paget, rahitism, osteomalacie, acromegalie, osteosarcom, sarcom Ewing,
metastaze osoase [39].
2.1.2. Biocompatibilitatea
Biocompatibilitatea este o proprietate unic a biomaterialelor. Din pcate nu putem defini
i msura precis biocompatibilitatea. De cele mai multe ori biocompatibilitatea este definit n
funcie de peformana sau succesul unei aplicaii specifice. Astfel, un pacient care nu se adapteaz
la implantul lui poate susine c respectiva protez nu este biocompatibil.
O astfel de evaluare operaional ne ofer puine informaii pentru a proiecta noi
implanturi
cu biocompatibilitate
ridicat. Tragem concluzia c o definire
mai precis a
biocompatibilitii implic un proces de definire lund fiecare aplicaie n parte.

Prin urmare, biocompatibilitatea s-a definit general ca fiind proprietatea biomaterialelor de
a nu produce reacii adverse cu esuturile nconjurtoare din organismul n care au fost implantate
[2].
Conform cercettorilor Wintermantel i Mayer (1999), biocompatibilitatea poate fi mprit
n dou categorii: biocompatibilitate intrinsec i biocompatibilitate extrinsec [40].
Biocompatibilitatea intrinsec implic o coresponden ntre proprietile chimice, fizice i
biologice ale implantului cu esutul nconjurtor sau organul care l nlocuiete. Biocompatibilitatea
extrinsec implic o coresponden ntre proprietile mecanice ale materialului i mediul n care
este implantat. O biocompatibilitatea optim se obine atunci cnd compatibilitatea structural i a
suprafeei este ndeplinit.
29

Tabel 1.7 -Caracteristici ale biocompatibilitii

Biocompatibilitate
Factori determinani
Insolubilitate
Intrinsec
Rezistena la coroziune la un pH de 6,6-7,5

Neutralitate electric
Rezisten mecanic
Biostabilitate
Extrinsec
Form macroscopic
Structur micromorfologic de suprafa
Printre factorii care influeneaz biocompatibilitatea sunt sntatea i vrsta pacientului,

proprietile esutului nconjurtor, factorii imunologici, caracteristicile implantului (rugozitatea i
porozitatea materialului, reaciile chimice, proprietile de coroziune, toxicitatea acestuia).
Materialele biocompatibile trebuie s fie stabile din punct de vedere chimic, trebuie s aib
o bun rezisten la coroziune. n organismul uman, compoziia mediului variaz fiind imposibil de
estimat precis n condiii de laborator. Poate avea caracter acid sau bazic iar coroziunea
microbiologic trebuie de asemenea luat n calcul.
Coroziunea poate aprea i la oboseal atunci cnd materialele sunt supuse la solicitri
mecanice constante i ciclice sau putem vorbi de coroziune electrochimic atunci cnd proprietile
electrochimice ale esuturilor afecteaz materialul impantului (apare frecvent la aliajele dentare).
Din punct de vedere al proprietilor fizice, materialele biocompatibile trebuie s prezinte o
conductivitate termic sczut pentru a reduce ocurile termice. Acest deziderat se realizeaz
folosind un izolator termic ntre esut i implant.
Potenialul ABE (Anodic Back Elecromotive Force for electromotoare anodic de reacie)
este un bun indicator al biocompatibilitii caracteriznd procesele de coroziune electrochimic. n
tabelul de mai jos sunt prezentate potenialele ABE pentru diferite metale. Limita de
biocompatibilitate se situeaz n jurul unui potenial ABE de 3000 mV. Astfel se poate uor observa
c cel mai biocompatibil metal din tabel este titanul.
Tabel 1.8 -Poteniale ABE ale unor metale i aliaje metalice
Materialul
Potenial ABE
Materialul
[mV]
Potenial ABE
[mV]
Titan
+ 3500
Zirconiu
+ 320
Niobiu
+ 1850
V2A
+ 300
Tantal
+ 1650
Nichel
+ 200
Platin
+ 1450
Inox (17%Cr)
+ 75
Paladiu
+ 1350
Cupru
- 30
Radiu
+ 1150
Staniu
- 200
Iridiu
+ 1150
Cobalt
- 350
Aur
+ 1000
Oel carbon
- 480
Crom
+ 750
Fier
- 500
+ 650
Zinc
- 1150
Vitaliu
(Cr-Co-Mo)
30

Pe lng potenialul ABE, un material biocompatibil trebuie s ndeplineasc un anumit

grad de toxicitate. S-a artat, n cerctri asupra celulelor vii, c foarte puine metale sunt
netoxice pentru organism. Printre aceste metale netoxice se enumer titanul, zirconiul i tantalul.
Cele mai toxice metale sunt cobaltul vanadiul i nichelul [41].
Lund toate acestea n considerare trebuie avut o grij suplimentar la declararea unui
material ca fiind biocompatibil deoarece aceasta este specific funciilor i mediului unde se
implanteaz materialul. Astfel, un biomaterial compatibil pentru o aplicaie poate fi duntor
pentru o alta.
31

2.2. Bioceramica
Bioceramica poate fi definit ca i un material de origine ceramic biocompatibil i
osteoconductor iar cele mai uzuale ntrebuinri sunt n nlocuirea articulaiilor sau esutului osos.
De asemenea pot fi folosite ca i strat de acoperire pentru alte materiale pentru a mbuntii
biocompatibilitatea materialelor metalice [44], [45]. Pot fi utilizate i ca implanturi care se resorb
i ofer un suport temporar pentru refacerea esutului propriu [46-49]. Unele bioceramici se pot
utiliza chiar i ca modalitate de livrare a unor substane medicamentoase n organism [50], [51].
Prima bioceramic testat la scar mai larg a fost ghipsul, dei multe din implanturi au
euat datorit infeciilor care au fost favorizate de aceste materiale, deoarece sistemul de aprare
al corpului nu putea aciona n acele regiuni inaccesibile. Prin urmare, utilizarea biomaterialelor nu
a devenit o practic obinuit pn la introducerea tehnicilor chirurgicale aseptice de ctre J.
Lister, n anul 1860. n plus exist i o lips de informaii referitoare la toxicitatea acestor
materiale.
n acest context aplicaiile ortofosfailor calcici devin logice datorit similitudinii cu faza
mineral a osului i dinilor [55-59]. Acetia nu sunt toxici i nu cauzeaz moarte celular n
esutul nconjurtor. Prima ncercare de utilizare a acestor materiale a fost realizat n anul 1920
cu fosfat tricalcic (TCP), iar aplicaia era repararea defectelor cauzate chirurgical la iepuri [60].
Dei studiul anterior a fost primul realizat nu exist detalii n privina acestuia i nu se tie dac
materialul a fost un precipitat sau o ceramic i dac a fost sub form granular sau de pudr. Al
doilea raport clinic a fost publicat 30 de ani mai trziu [61], iar peste 20 de ani a fost raportat
prima aplicaie n chirurgia dentar a ortofosfatului de calciu (descris greit ca i TCP) n cazul
defectelor periodontale cauzate chirurgical [62] i utilizarea cilindrilor de HA dens pentru
substituia rdcinii dentare [63].
Conform bazelor de date tiinifice, prima lucrare care coninea termenul de bioceramic n
abstract a fost publicat n anul 1971 [64], iar prima care coninea acest termen n titlu n anul
1972 [65], [66] dei aplicaiile ceramicilor ca i proteze erau cunoscute anterior [67], [68].
n data de 26 aprilie 1988 a avut loc primul simpozion internaional de bioceramic n
Kyoto, Japonia.
Comercializarea bioceramicilor fosfocalcice (n principal HA), cu aplicaii dentare i
chirurgicale, a nceput n anii 80 datorit eforturilor lui Jarcho [69], [70] n SUA, De Groot [71],
[72], [73] n Europa i Aoki [74], [75] n Japonia. Imediat dup aceea, HA a devenit o bioceramic
de referin n grupul ortofosfailor de calciu pentru aplicaii medicale. Prepararea i aplicaiile
biomedicale ale apatitelor ce provin din coral [76], [77] i os bovin [78], au fost raportate n
acelai timp [79].
Deoarece odat cu vrsta apare o deteriorare a esuturilor, exist o nevoie cresctoare de
materiale nlocuitoare pentru corpul uman. Osul este unul din principalele esuturi care se
nlocuiesc deoarece este vulnerabil la fracturi la persoanele n vrst, datorit pierderii densitii i
rezistenei mecanice. Acest fenomen se ntmpl mai ales n cazul femeilor, datorit schimbrilor
hormonale ce apar datorit menopauzei. Densitatea osoas scade deoarce celulele productoare
de esut (osteoblastele) devin progresiv tot mai neproductive n fabricarea de esut nou i
vindecarea microfisurilor existente. Aceast problem de densitate cauzeaz implicit alte probleme
32

de natur mecanic i consecinele sunt numeroasele fracturi de old sau vertebre tasate i
probleme ale coloanei vertebrale [44].
Reactivitatea suprafeei este una din cele mai cunoscute caracteristici ale bioceramicilor i
contribuie la abilitatea acestora de a crea legturi cu osul nconjurator i de a stimula creterea
esutului. n timpul implantrii au loc diferite reacii la interfaa implant-esut care duc la schimbri
n timp a caracteristicilor de suprafa ale implanturilor i a esutului inconjurator (nvecinat)[80],
[188].
Biomaterialele ceramice fosfocalcice sunt necesare pentru a nltura durerea din esuturile
calcificate bolnave (oase i esut dentar) i pentru a restaura funciile normale n organism. Cea
mai mare provocare din acest domeniu este nlocuirea esutului mbtrnit i defectuos cu un
material care poate funciona pe toat durata vieii pacientului, i n mod ideal care poate fi
nlocuit de os matur fr a periclita suportul mecanic [81].
Deoarece durata medie de via este de peste 80 de ani, n prezent i nevoie pentru
nlocuirea unor pri ale organismului ncepe la vrsta de aproximativ 60 de ani, implantul ceramic
neresorbabil trebuie s reziste cel puin 20 de ani. Aceast cerin de durabilitate este greu de
realizat lund n considerare condiiile dure ale mediului n care este implantat materialul: soluii
saline corozive la 37C, ncrcri mecanice multiaxiale i ciclice. Performanele bioceramicilor
realizate special pentru asemenea condiii clinice, reprezint una dintre cele mai importante
realizri n cercetare din ultimul secol [44].
Deoarece bioceramica fosfocalcic face parte din grupa ceramicilor bioactive care sunt
folosite pentru oseointegrare, n mod special este cea mai potrivit pentru orice tip de substituie
osoas pentru c promoveaz formarea de esut nou i creeaz legturi puternice cu esutul
nconjurtor.
Acestea sunt produse din materiale sintetice prin diferite metode de procesare, iar
ceramica final va avea proprieti foarte similare cu osul, precum porozitatea i structura.
Prezint de asemenea o excelent biocompatibilitate i osteoconductivitate.
n procesul de fabricaie al bioceramicelor fosfocalcice se pot varia diferii parametrii
pentru a obine goluri sau poroziti n interiorul materialului, n vederea optimizrii proprietilor
mecanice i de dezvoltare a osului [82], [83]. Este posibil obinerea unui material cu aceleai
proprieti mecanice ca i osul dei acestea au dezavantajul c sunt casante i mai puin capabile
de a absorbi energia naintea ruperii [83].
Cea mai important proprietate a fosfailor de calciu este solubilitatea acestora n ap.
Dac aceasta este inferioar celei a prii minerale a osului, se va degrada extrem de lent, poate
chiar deloc [84].
Exist multe tipuri de bioceramici n aceast grup utilizate n regenerarea esutului osos,
dar cea mai rspndit este hidroxiapatita (HA) datorit compoziiei sale cu stoechiometrie
identic cu cea a osului i smalului dentar. Aceasta are formula Ca10(PO4)6OH2 i face parte din
grupa numit apatite [85].
Diferite forme de fosfai de calciu au fost testate pentru uz clinic, ncepnd cu mono-, di-,
tri, tetra-, octo- etc. i formele anhidre i hidrate ale acestora. Formele care se utilizeaz n
prezent sunt cele cu raportul Ca/P ntre 1.50 i 1.67 din cauza similitudinii cu osul.
33

n tabelul urmtor avem o exemplificare a principalelor ceramici din grupa fosfailor de

calciu.
Tabel 1.9 Ortofosfai de calciu existeni i principalele lor proprieti [49], [86]
Solubilitatea
Ca/P
Compusul
mol %
Formula chimic
la 25oC, log(Ks)
Monocalciu fosfat
0,5
monohidrat (MCPM)
Solubilitatea
pH-ului n
la 25oC, g/L
soluii apoase
la 25oC
Ca(H2PO4)2.H2O
1,14
~18
0,0-2,0
Ca(H2PO4)2
6,59
~0,088
2,0-6,0
CaHPO4.2H2O
6,59
~0,088
2,0-6,0
CaHPO4
6,90
~0,048
[c]
96,6
~0,0081
5,5-7,0
-Ca3(PO4)2
25,5
~0,0025
[a]
-Ca3(PO4)2
28,9
~0,0005
[a]
[b]
[b]
~5-12[d]
~85,1
~0,0094
6,5/9,5
Ca10(PO4)6(OH)2
116,8
~0,0003
9,5-12
Ca10(PO4)6F2
120,0
~0,0002
7-12
Ca10(PO4)6O
~69
~0,087
[a]
Ca4(PO4)2O
38-44
~0,0007
[a]
Monocalciu fosfat
0,5
Stabilitatea
anhidru (MCPA)
Dicalciu fosfat dihidru
1,0
(DCPD), mineral
brusit
Dicalciu fosfat anhidru
1,0
(DCPA), mineral
monetit
1.33
Octocalciu fosfat
Ca8(HPO4)2(PO4)4.5
(OCP)
H2O
-Tricalciu fosfat ( -
1,5
TCP)
1,5
-Tricalciu fosfat (TCP)
1,0-2,2
Fosfat de calciu amorf

(ACP)
Hidroxiapatit
1,5-1,67
1,67
1,67
n=3-4,5; 15-20%
H2O
Ca10-x(HPO4)x(PO4)6-
deficient n calciu
(CDHA)
1,67
CaxHy(PO4)z.nH2O.
x(OH)2-x
[e]
Hidroxiapatit (HA,
Hap sau OHAp)
[f]
(0<x<1)
Fluorapatit (FA sau

FAp)
Oxiapatit (OA sau
OAp)
Tetracalciu fosfat
2,0
(TTCP sau TetCP.

Mineral hilgenstockit
[a] Aceti compui nu pot fi precipitai din soluii apoase;

[b] Nu se poate realiza o msurtoare exact. Totui, urmtoarele valori au fost gsite:
25,70,1 (pH=7,40), 29,90,1 (pH=6,00), 32,70,1 (pH=5,28)> Comparaia disoluiei n
buffer acid este: ACP>>-TCP>>-TCP>CDHA>>HA>FA;
[c] Stabil la temperaturi de peste 100;
[d] ntotdeauna metastabil;
34

[e] Ocazional CDHA este denumit HA precipitat;

[f] n cazul n care x=1 (condiia ca Ca/P=1,5), formula chimic a CDHA arat n modul
urmtor: Ca9(HPO4) (PO4)5(OH).
Familia fosfailor de calciu se poate mprii n 4 subcategorii [87]:
(A) hidroxiapatite;
(B) fosfai tricalcici;
(C) fosfai calcici bifazici;
(D) cimenturi de fosfai calcici.
Datorit proprietilor deosebite pe care le are hidroxiapatita n reconstrucia osoas,
aceasta este materialul cel mai des utilizat i obiectul prezentului studiu.
35

2.3. Hidroxiapatita
Apatita este un nume general pentru a defini un grup mai mare de materiale ceramice cu
proprieti chimice diferite, dar structur cristalin asemntoare; hidroxiapatita fiind parte din
acest grup.
Aceasta este o ceramic bioactiv care se utilizeaz la acoperirile pe implanturi sau ca i
substitut osos datorit capacitii excelente de a stimula regenerarea osoas i proliferarea
celulelor.
Un material bioactiv este capabil de a stimula regenerarea osoas la contactul dintre
acesta i mediul biologic, i poate fi utilizat n diferite aplicaii ortopedice sau n medicina dentar.
Hidroxiapatita Ca10(PO4)6(OH)2 este unul din materialele cele mai utilizate n ultimele
decenii pentru regenerarea i nlocuirea de esuturi osoase, datorit asemnrii cu structura
anorganic a osului uman [45], [88].
10Ca(NO3)24H2O + 6(NH4)2HPO4+ 8NH4OH
Ca10(PO4)6(OH)2 + 20NH4NO3 + 6H2O
[89]
Aceast bioceramic are proprieti excelente de biocompatibilitate n organismul uman i

se utilizeaz mai ales pentru implanturile de oase i dini [90], [91].
Dei hidroxiapatita se utilizeaz n mod normal n reconstrucia osoas, aceasta nu este
singura sa aplicaie, fiind rspndit n mai multe ramuri ale domeniului medical i n afara lui. O
alt aplicaie important pentru hidroxiapatit este sistemul drug-delivery pentru antibiotice [92]
i factori de cretere [93]. Aceasta se utilizeaz i n alte domenii, precum n electronic, ca i
catalizator, cromatografie etc.
Dei se poate utiliza os natural de la acelai pacient (autogref) sau de la un pacient diferit
(alogref), acestea sunt n cantiti limitate i implic o procedur chirurgical n plus. O alt
posibilitate este s se foloseasc os de provenien animal (xenogref), dar i acesta are
dezavantaje cum ar fi contaminrile pe care le poate produce. Toate produsele obinute sintetic au
numeroase avantaje ca i cantitatea disponibil nelimitat, sterilizare i depozitare facil [94]. Ca
i toate materialele utilizate n implantologie, i hidroxiapatita sintetic produce un rspuns
inflamator care depinde de compoziie, dimensiune i proprietile de suprafa ale materialului,
dei n mod normal acesta este nesemnificativ din punct de vedere clinic. Problemele ntmpinate
sunt datorit resturilor de material osteoconductiv produse n urma uzrii care pot conduce la
resorbie osoas similar cu cea ntlnit n cazul protezelor totale de articulaii [87].
2.3.1 Proprietile hidroxiapatitei

Cel
mai
mare
dezavantaj
al
hidroxiapatitei
este
dat
de
proprietile
mecanice
nesatisfctoare care limiteaz aplicaiile, n mod special rezistena mecanic i tenacitatea [95].
Pentru a nltura aceast limitare, hidroxiapatita se utilizeaz n combinaie cu oxizi ceramici sau
metale n dispersie care au rolul de a crete proprietile mecanice [96], [97], [98].
Mediul n care sunt implantate aceste materiale este foarte important deoarece este
necesar o fixare rigid foarte apropiat de osul pacientului pentru o ncorporare adecvat a
36

implatului. Orice micromicare impiedic ntreptrunderea dintre materialul implantat i os astfel

afectnd negativ proprietile mecanice ale ansamblului i favorizeaz esut granular i fibroza la
interfaa dintre cele dou [87], [99], [100].
n mod ideal un substitut osos ar trebui s aib urmtoarele proprieti [85], [101].
1) Biocompatibilitate
2) Osteoconductivitate
3) Osteogenicitate
4) Bioabsorbabilitate
5) Capabil de a asigura suport mecanic
6) Uor de utilizat clinic
7) Cost acceptabil
Hidroxiapatita are o structur cristalin cu simetrie hexagonal cu grupul spaial P63/m i
parametrii celulei a = 9.418 , c = 6.881 , b = 120 i densitate d=3.156 g/cm3,
unitatea
celular fiind orientat de-a lungul axei c justificnd orientarea preferenial care creeaz un
aspect acicular [102]. Structura apatitica este contruit dintr-un schelet hexagonal de ioni
ortofosfai PO43- care creeaz dou tunele libere pentru aezarea ionilor de calciu. Cei 6 cationi Ca
2+ vor forma un tunel principal n care sunt prezente gruprile hidroxil. Aceste tunele confer
hidroxiaptitei proprietatea de a accepta schimburi ionice [103], [104].
Existena tunelelor n care se afl ionii de OH dau apatitei anumite proprieti apropiate de
ale zeolitului. Din acest motiv apatitele prezint proprieti de schimbri ionice (OH fluor clor
etc.). Aceste tunele pot acomoda i molecule mici ca i H2O sau glicina [105].
Aceast
abilitate
de
substituie,
prin
nlocuirea
golurilor
din
structur,
permite
hidroxiapatitei nestoechiometrice s existe n domediul dintre fosfatul apatitic octocalcic i

hidroxiapatita stoechiometric.
Nestoechiometria are urmtoarele consecine:
-
Prezena golurilor n locaiile cationice i OH;
Un coninut de OH mai sczut dect dou grupri pe circuit;
Cu ct se ndeparteaz mai tare de hidroxiapatita stoichiometric
starea de
cristalinitate scade;
-
Cu ct se ndeprteaz mai tare de hidroxiapatita stechiometrica crete solubilitatea.
Hidroxiapatita care este produs prin precipitaie rapid nu va fi stoechiometrica deoarece

are nevoie de o perioad de maturare n mediul apos unde are loc un fenomen de suprafa care
crete stoechiometria i descrete solubilitatea.
37

Fig.1.12 Structura cristalografic a HA
Hidroxiapatita conine 39.84 % calciu n mas i 18.52 % fosfor. Raportul atomic Ca/P a
hidroxiapatitei stoechiometrice este de 1.67 [79]. Stoechiometria hidroxiapatitei este extrem de
important deoarece i cea mai mic abatere de la aceast proporie poate favoriza apariia de
TCP dup tratamentul termic.
Spre deosebire de celelalte materiale din familia fosfailor de calciu, hidroxiapatita este
stabil n condiiile fiziologice i este termodinamic stabil la pH-ul fiziologic avnd un rol activ n
remodelarea osoas prin formarea de legturi chimice puternice cu osul nconjurator [106]. Dei
iniial acest material implantat are proprieti mecanice mai sczute ca osul, s-a demonstrat dup
un experiment in vivo timp de 6 luni, c dup aceast perioad, datorit legturilor produse,
rezistena mecanic poate fi superioar celei a osului pacientului [100].
Hidroxiapatita de origine natural

Aceasta poate provenii din corali sau os bovin i are structura similar cu osul cortical i
spongios.
Hidroxiapatita care provine din coral este un material bioinert n ciuda originii biologice i
stimuleaz creterea osului n contact direct cu suprafaa. Dimensiunea i configurarea porilor
creeaz un mediu ideal pentru ntreptrunderea dintre material i esutul osos nconjurtor.
Osteoblastele sunt identificate iniial direct pe suprafaa implantului n timpul osteoconduciei
[101].
Proprietile mecanice ale hidroxiapatitei din coral sunt sczute, ceea ce face ca materialul
s fie casant i este necesar fixarea cu plcue sau uruburi pentru a evita ncrcarea ciclic.
Acestea au fost utilizate cu succes la reconstrucia unor defecte de metafiz i n artroplastii de
revizie sau ca material de umplere pentru donatorii de os din centura iliaca.
38

Rata de probleme de infecie, probleme de interaciune cu esutul moale, nesudare sau

sudare ntrziat, sudare greit sau de probleme mecanice este similar cu cea a autograftului. n
plus, acest material de coral are o rat de refracturare mai mare dect osul provenit de la acelai
pacient. Acest material este utilizat n general ca i implant osteoconductiv [107].
Hidroxiapatita de origine sintetic
Este de obicei preparat ntr-un laborator, cel mai des prin metoda de precipitare apoas i
este dup aceea sinterizat la temperaturi mai mari de 1000C. Aceasta poate fi fabricat sub
form dens sau macroporoas n funcie de aplicaie. Tensile stength a hidroxiapatitei dense
variaz ntre 79 i 106 MPa i pentru cea poroas este 42 MPa, cea a osului cortical fiind ntre 69 i
110 Mpa [87]. Hidroxiapatita sintetic se poate utiliza sub form de blocuri sau granule i utiliznd
tehnica plasma spray (pulverizare prin plasm) poate fi folosit pentru acoperirea diferitelor
implanturi dentare sau ortopedice.
Fig. 1.13 Hidroxiapatita: SEM x200 i SEM x350 (Firma Teknimed)
Avantajele hidroxiapatitei sintetice constau n faptul c se elimin riscurile de contaminare

care existau la materialele preluate din corpul uman sau animal i se poate produce n cantitate
nelimitat.
De
asemenea,
datorit
faptului
c este
produs
ntr-un
laborator,
condiiile
experimentale pot fi controlate astfel nct s se obin forma i proprietile dorite.

Hidroxiapatita a fost studiat clinic i experimental sub form dens, poroas i granular,
rezultatele indicnd c structura formei poroase permite creterea esutului fibrovascular n
interiorul structurii, ceea ce produce o stabilitate i rezisten la micromicare in vivo [93], [108].
Comparativ, structura dens este mai puin stabil i nu exist cretere de esut n interiorul
materialului pentru a ancora implantul (Holmes et al, 1987). n plus, forma implanturilor din
material poros sau dens este mai dificil de realizat cu mare precizie i este nevoie de graft osos n
jurul piesei pentru a promova vindecarea i stabilitatea, cnd nu exist interfa osoas [109].
Hidroxiapatita granular este utilizat pentru spinal fusion , tratamentul chisturilor
osoase i n chirurgia maxilofacial pentru refacerea esutului osos. Avantajul utilizrii acestui
material este dat de faptul c paote fi fabricat n diferite dimensiuni i forme i poate fi ntrebuinat
i n cazul cavitilor de form neregulat. Amestecarea granulelor de hidroxiapatit cu snge
permite obinerea unei paste care se poate modela uor n forma dorit. De asemenea, granulele
de 1-2 mm permit o ntreptrundere osoas mai bun n comparaie cu cele de dimensiuni mai
39

mici. Acest aspect se poate datora volumului liber ntre granulele adiacente care este mai mare i
permite transportul nutrienilor ctre esutul care se dezvolt [110], [111].
Hidroxiapatita i osul
Dei partea mineral a osului este aproape identic cu hidroxiapatita sintetic, exist unele
diferene care se manifest att la nivel biologic ct i la nivel mecanic.
n tabelul urmtor avem o comparaie a proprietilor mecanice pentru osul natiral,
hidroxiaptita sintetic, bioglas i alumina policristal.
Tabel 1.10 Proprieti mecanice ale unor implanturi ceramice [87]

Rezistena la
Rezistena la
Modul de elasticitate
ncovoiere (MPa)
compresiune (MPa)
(GPa)
Os natural
30-90
90-230
3.8-17
HA sintetic
110-170
500-900
35-120
A-W GC
200-220
1000
120
Alumina policristal
300-400
2500-3000
350-380
Alumina are cele mai ridicate proprieti mecanice i o biocompatibilitate excelent, dar
utilizarea sa se limiteaz la capul femural al protezei de old i la cteva alte aplicaii ale
protezelor. Hidroxiapatita sub form de granule nu are proprietai mecanice foarte bune i ca
urmare se utilizeaz pentru umplerea defectelor osoase. Dei unele tipuri de hidroxiapatit au
proprieti mecanice mai sczute dect osul, altele se apropie, i chiar depesc unele proprieti
mecanice ale osului. Hidroxiapatita dens poate fi fabricat astfel nct s aib proprieti
mecanice similare cu osul i prin modificri n structura acesteia poate aduce multiple mbuntiri.
2.3.2 Modalitai de sintez a hidroxiapatitei

Exist cteva metode diferite de a sintetiza hidroxiapatita i fiecare are avantajele i
dezavantajele ei, prin urmare i biomaterialele obinute vor avea proprieti diferite.
Principalele ci de sintez sunt:
Reacia solid-solid (metoda uscat);
Reactive n sruri coalescente;
Metoda sol-gel;
Precipitarea pe cale apoas;
Metoda cimenturilor.
40

Pentru reacia solid-solid materialele utilizate pentru sintez sunt urmtoarele: Ca2P2O7
sau CaHPO42H2O i CaCO3 sau Ca(OH)2. Sinteza se realizeaz la temperaturi nalte (12001300C) timp de 2-3 ore sub presiune parial de ap (3 KPa) conform reaciei:
3Ca2P2O7 + 4CaCO3 + H2O
Ca10(PO4)6(OH)2 +4CO2
Sinteza prin reacie solid-solid const n nclzirea unui amestec reactiv format din diferite
sruri de cationi i anioni ntr-un raport Me/XO4 de 1.67. Amestecul trebuie s fie perfect omogen
pentru a favoriza o reacie total.
Conform Wallaeys o fluoroapatit fosfocalcic a fost sintetizat din fosfat tricalcic i
fluorur de calciu prin urmtoarea reacie [112]:
3 Ca3(PO4)2 + CaF2
Ca10(PO4)6F2
Aceast reacie are loc la 900C timp de cteva ore.

n cazul reacilor solid-gaz, cel din urm provine ori din sublimarea unei sruri solide
coninute n amestecul reactiv sinteza poate avea loc ntr-o incint nchis - sau poate proveni
din exterior prin introducerea unui gaz de reacie.
Reacia n sruri coalescente este apropiat de condiiile naturale n care se formeaz
hidroxiapatita. Fosfaii metalici cu structur apatitic se pot fabrica n acest mod. Se pot obine
cristale amestecate cu reactivii iniiali.
Metoda sol-gel se bazeaz pe polimerizarea precursorilor organo-metalici de tipul
M(OR)n alcoxid. Dup hidroliza controlat a acestei soluii de alcoxid, condensarea monomerilor
produce legturi oxo i ulterior un oxid organic. Polimerizarea progresiv a precursorilor formeaz
oligomeri, apoi polimeri, crescnd astfel vscozitatea.
Aceste soluii polimerice au ca rezultat un gel care uureaz formarea materialelor (dense,
filme transparente, pudr ultra fin, ceramic etc.) i are numeroase aplicaii tehnologice [118].
Pe cale lichid se folosete n mod normal precipitarea apoas, datorit faptului c toi
parametrii pot fi controlai independent [113].
Pentru sinteza prin precipitare apoas, materialele de la care se pornete sunt:
soluie de nitrat de calciu tetrahidrat [Ca(NO3)2 4H2O];
soluie amoniacal de hidrogenfosfat de amoniu [(NH4)2HPO4] este adugat pictur
cu pictur, sub mixare uoar.

10Ca(NO3)24H2O + 6(NH4)2HPO4 + 8NH4 OH
Ca10 (PO4)6 (OH)2 +20NH4 NO3+ 10H2O
Sinteza din faze apoase se produce prin dou procese diferite: prin dubl decompoziie sau
prin neutralizare. Aceste dou procese se utilizeaz n mod curent pentru producia hidroxiapatitei
la nivel industrial.
Metoda dublei decompoziii [114], [115], [116] const n adugarea unui soluii saline de
cationi Me ntr-un mod controlat ntr-o soluie salin de anioni XO4. Precipitatul este splat dup
41

aceea i uscat. Aceast tehnic permite i obinerea apatitelor mixte (care conin dou tipuri
diferite de cationi) prin controlul raportului Me1/Me2.
Cationii sunt introdui simultan n bioreactor n raportul dorit, permind evitarea
segregrii
din
timpul
precipitaiei.
Principalul
dezavantaj
al
acestei
metode
const
implementarea acesteia, care necesit o cantitate mare de echipamente i n vitez sczut de

sintez.
Metoda neutralizrii const n neutralizarea suspensiei de hidroxid de calciu prin adugarea
soluiei de acid fosforic. Aceast reacie permite obinerea rapid a unor cantiti mari de
hidroxiapatit fosfocalcic utiliznd un echipament restrns [117].
Metoda cimenturilor: cimenturile fosfocalcice sunt cimenturi minerale hidraulice care se
ntresc prin reaciile acid-baz dintre fosfatul de calciu de natur acid i fosfatul de calciu de
natur bazic, pentru obinerea unei hidroxiapatite fosfocalcice single phase.
2.3.3 mbuntirea hidroxiapatitei

Dei acest material are proprieti excelente n ce privete biocompatibilitatea i legturile
ce le creeaz cu osul nconjurtor, favorizeaz integrarea acesteia n esut. ntr-un timp scurt apar
i unele dezavantaje ale acestui material. Hidroxiapatita nu are rezistena mecanic necesar
pentru a putea fi utilizat n aplicaii care sunt supuse solicitrilor ciclice i intense. Pentru a
nltura acest dezavantaj, cercettorii au elaborat tot felul de tehnici n ultimele 2 decenii, pentru a
spori proprietile mecanice fr a afecta biocompatibilitatea i bioactivitatea acestei ceramici.
Acetia au ncercat s mbunteasc proprietile acestui material n mai multe feluri,
printre care amintim:
Metoda de sintez;
Metoda de sinterizare;
Hidroxiapatita bifazic;
Dopani n structura cristalin.
2.3.3.1 Hidroxiapatita bifazic

Dou dintre cele mai populare materiale utilizate pentru a realiza HA bifazic sunt ZrO2 i
Al2O3.
Prepararea unui material compozit de scar micrometric este o idee atrgtoare pentru
mbuntirea proprietilor mecanice ale hidroxiapatitei.
Pentru sintetizarea unei matrici ceramice funcionale, trebuie ndeplinite 3 condiii:
Rezistena mecanic i tenacitatea materialului de ranforsare trebuie s fie mai mare
dect cele ale matricii;
Stratul interfacial dintre matrice i ranfort trebuie s fie n concordan i cu reacie
limitat, producnd o legtur nici prea puternic, nici prea slab;
42

Coeficienii de expansiune termic trebuie s fie n concordan cu fazele componente
pentru a nu produce microfisuri la rcire.

n cazul n care aceste condiii nu sunt ndeplinite, apar defecte microstructurale ducnd la
deteriorarea proprietilor mecanice ale compozitului [145].
ZrO2
ZrO2 este o ceramic inert n stare pur, care dobndete nite proprieti extraordinare
dac este dopat cu oxizi stabilizatori precum ytriu, magneziu i calciu. Acesta este un polimer
care se poate ntalni n 3 forme:
Monoclinic;
Teragonal;
Cubic.
n mod normal la temperatura ambiant, ZrO2 este monoclinic, aceast faz fiind stabil
pn la 1170C. Peste aceast temperatur, se transform n tetragonal, iar peste 2370C n
cubic. Cnd are loc rcirea, transformarea tetragonal-monoclinic se produce n intervalul de
100C - 1070C. Proprietile mecanice mbuntite n urma acestei transformri, se utilizeaz n
realizarea de biocompozite i n aplicaii convenionale de ceramic datorit biocompatibilitii
bune.
Proprietile de interes n utilizarea acestor ceramice sunt:
Rezistena mecanic;
Duritatea;
Tenacitatea;
Rezistena la uzare;
Proprietile termice.
Tipul i cantitatea de aditivi pentru a stabiliza ZrO2 n starea tetragonal este o variabil
important n compoziie care afecteaz toate proprietile mecanice. Coninutul de ytriu este cea
mai important variabil n ZrO2 stabilizat cu Y. Pentru a avea proprieti mecanice bune este
important ca microstructura s nu conin faze monoclinice care ar avea un comportament similar
cu defectele, aceasta dictnd nivelul minim de stabilizator care se poate aduga (aprox 1,8 mol%
Y n soluie solid pentru a stabiliza starea tetragonal i a mbuntii proprietile mecanice).
ZrO2 tetragonal se degradeaz cnd este n contact cu apa la temperaturi de 200-300C,
datorit mturrii fazei metastabile care restricioneaz utilizarea sa n aplicaii pe termen lung
[146].
Dintre toi oxizii ceramici, ZrO2 biomedical are cele mai bune proprieti mecanice,
existnd peste 600000 de capuri femurale implantate, realizate din acest material la nivel mondial.
Deoarece ZrO2 este bioinert, acesta nu creez legturi cu osul natural.
ZrO2 parial stabilizat este un material utilizat ca ranforsare pentru numeroase ceramici,
datorit rezistenei mecanice ridicate i tenacitii, de asemenea datorit bioineriei. Totui,
aplicaia acestui material este limitat deoarece acesta reacioneaz cu hidroxiapatita, formnd
TCP i ZrO2 stabilizat complet, acesta fiind un mare dezavantaj.
43

Materialele ranforsate cu ZrO2 se pot fabrica prin mai multe metode: mixare mecanic,
metode sol-gel, mixare solid-lichid i metode de precipitare urmate de uscare, calcinare, formare i
sinterizare.
Adugarea de ZrO2, scade temperatura de descompunere a HA [147].
Al2O3
Aceasta este o ceramic biocompatibil, cu proprieti mecanice similare cu ale metalelor
i care se utilizeaz mai ales n pri ale corpului unde exist un risc mare de uzur.
Aceasta este o ceramic inert care se utilizeaz pentru aplicaii unde apar solicitri
mecanice ca i protezele de old sau implanturile dentare.
Alumina se poate utiliza pentru aplicaii de termen lung datorit biocompatibilitii
excelente de care dispune i datorit capsulei fine care se formeaz care permite fixarea
necimentat a protezelor. De asemenea, aceasta are un coeficient de frecare extrem de sczut i
de uzur la fel.
Proprietile excelente ale aluminei se datoreaz dimensiunii grunilor foarte redus de
aproximativ 4 microni i datorit distribuiei nguste a mrimii grunilor care duc la o rugozitate
foarte sczut.
Rezistena mecanic, rezistena la oboseal i tenacitatea alfa-aluminei policristaline,
depinde de mrimea i puritatea grunilor. Cu o dimensiune de 4 microni i puritate de 99,7% se
obine o bun rezisten flexural, excelent rezistena la oboseal dinamic i de impact,
rezisten la propagarea fisurilor subcritice i o excelent rezisten la compresiune [148].
Aplicaiile clinice ale aluminei includ proteze de genunchi, os i uruburi dentare,
reconstrucie maxilofacial i alveol dentar, substitut de oase osiculare, nlocuiri de segmente
osoase.
Modulul elastic ridicat al aluminei creaz tensiuni (stress shielding) care duc la
destabilizarea implantului la pacienii cu osteoporoz.
n cazul adugrii de alumin sub form de platelets mari, tenacitatea HA a crescut fr
s existe reacii semnificative ntre faze, dei mbuntirea rezistenei mecanice a fost minim
datorit formrii microfisurilor n jurul platelets din cauza coeficientului de expansiune termic
diferit.
n cazul utilizrii pudrei fine de Al2O3 nu au aprut microfisuri, dar proprietile mecanice
nu au fost mbuntite semnificativ datorit limitrii proprietilor aluminei.
Conform Ji et al., 1992, cnd pudre de alumin i HA sunt amestecate i sinterizate n aer
la 1100-1400C, HA se descompune i reacioneaz cu alumina, crend faze secundare nedorite
[149]. Din acest motiv, pentru a crea aceste materiale bifazice, se utilizeaz un dopant n HA care
stabilizeaz termic produsul pn la temperaturi mai ridicate. Un exemplu de asemenea dopant
este dat de Mg2+.
La temperaturi peste 1300C Al2O3 reacioneaz complet cu HA crend aluminai. Aceast
reacie poate fi evitat prin adiia de CaF2 n amestecul de pudre [150].
44

2.3.3.2 HA/Al2O3
Datorit
proprietilor
mecanice
ale
acestei
ceramici
bioinerte
excelentei
biocompatibiliti, este una dintre cele mai utilizate pentru a crea materiale bifazice pentru
substituia osoas. Dei exist i studii care utilizeaz alte ceramici pentru asemenea aplicaii cum
ar fi ZrO2, alumina este mai bine tolerat n organism pe termen lung.
Materialele bifazice HA-Al2O3 au artat rezisten la ncovoiere mbuntit raportat la
HA [151].
Kim et al. [152] au obinut o rezisten la ncoviere de 255 MPa n cazul HA coninnd 40
vol% de Al2O3 dup presare la cald timp de 2 ore la 30 MPa i 1200C.
Li et al. [151] au obinut o rezisten la ncovoiere de 250 MPa n cazul HA coninnd 30
vol% de Al2O3 dup presare izostatic la cald cu 200 MPa la 1275C, dei n mod normal presarea
HA sinterizate se face la 100 MPa [153].
Conform Evis et al., densificarea materialelor bifazice HA-Al2O3 cnd temperatura de
sinterizare a crescut de la 1100 la 1200C. Porozitatea a crescut de asemenea odat cu creterea
cantitii de alumin, pentru a reduce acest aspect probele au fost presate la cald la 60 MPa n vid,
densificarea a fost superioar fa de sinterizarea n aer. ntre 1100-1200C stabilitatea fazei HA a
descrescut dramatic i n toate materialele realizate (10 wt%, 25 wt%, 40wt%) Ha s-a transformat
aproape n totalitate n TCP, aprnd aluminai de calciu (CaAl2O4, Ca2Al2O5). Se crede c s-a
format iniial CaO n tranziia HA-TCP care dup aceea a reacionat cu -n-Al2O3 formnd aceti
aluminai. n cazul materialelor cu 10 i 25% -n-Al2O3, HA a fost stabil dup presarea la cald la
1100C, descompunndu-se abia ntre 1100 i 1200C. Dup sinterizarea n aer la 1100C volumul
unitaii de celule hexagonale s-a schimbat, ceea ce a sugerat c HA netransformat era defiecient
n Ca2+ si OH-. La 1200C sinterizare n aer, nu mai exist HA n structur. Microduritatea a crescut
pentru materialele coninnd 10 i 25 % Al2O3 dup creterea temperaturii de sinterizare de la
1100C la 1200C. Proba de 40 wt% afieaz o sinterabilitate i duritate sczut comparat cu
celelalte compoziii din cauza porozitaii mai ridicate, ceea ce necesit o temperatur mai ridicat
pentru a se densifica. O tenacitate maxim Kic de 2 MPa/m a fost observat n materialul coninnd
40 wt% Al2O3. Acetia au rezumat prin faptul c presarea la cald n vid mbuntaete densificarea
i nltur riscurile descompunerii HA n faze secundare. Pe msur ce cantitatea de alumin a
crescut, sinterabilitatea a sczut. Presarea la cald la 1200C a dat cele mai bune proprieti
mecanice (microduritate i tenacitate) raportat la presarea la 1100C [154].
Conform Kim et al., adiia de 5 vol% de MgF2 n materialele bifazice, mpiedic complet
tranziia de faz, observndu-se formarea de MgAl2O4. n cazul probelor cu coninut de 20 vol%
alumin, disocierea HA a fost inhibat complet pn la temperaturi de 1400C. Densificarea
materialului a fost crescut, ceea ce a influenat pozitiv i proprietile mecanice (rezistena la
ncovoiere 170 MPa, duritatea Vickers 7 GPa) [155].
Kim et al., raporteaz faptul c fabricarea materialelor bifazice HA-Al2O3 cu adiie de CaF2
mbuntete proprietile mecanice (duritate, modul de elasticitate, rezisten mecanic i
tenacitate) fa de cele fr aditivi. De asemenea, celulele osteoblast-like au avut o activitate
favorabil de proliferare i difereniere pe probele coninnd 20 vol% Al2O3, indicnd o viabilitate i
activitate celular comparabil cu HA [150].
45

2.3.3.3 Hidroxiapatita dopat

Una dintre tehnicile de mbuntire a proprietilor HA este doparea acesteia cu cantiti
mici de ioni care afecteaz enorm proprietile produsului final, chiar dac sunt n concentraii mici
(1-5%).
n tabelul urmtor avem cteva exemple de substane care pot crea substituii n reeaua
cristalin a hidroxiapatitei.
Tabel 1.11 Pricipalele substituii ionice care se pot realiza n structura hidroxiapatitei
Me
XO4
Ca2+
REE3+
Na+
SiO44-
CO3F3-
SO42-
CO32-
OH-
O2-
Sr2+
...
...
AsO43-
HPO42-
S22-
F-
H2O
Pb
2+
...
PO4
3-
2+
VO4
Ba2+
...
Mg
CO3
3-
2-
...
2-
...
Cl
N2
Br-
...
n plus, dopajul cu ioni influeneaz i celelalte proprieti ale hidroxiapatitei, nu doar pe

cele mecanice, cum ar fi solubilitatea, biocompatibilitatea, stabilitatea termic i bioactivitatea.
Faza apatitic care constituie componenta inorganic a esutului osos, poate fi descris ca
i o apatit fosfo-calcic multisubstituional n care substanele ionice ca i carbonatul, fluorul,
magneziul, sodiul, etc. au un rol important n mineralizarea osoas i acestea reflect istoria
regimului alimentar, sau expunerea la materiale periculoase ca i n cazul plumbului i stroniului
[119]. Tipul i cantitatea de substituii ionice din osul natural variaz de la persoan la persoan n
funcie de sursa de ap, regimul alimentar i posibilele afeciuni medicale.
Tabel 1.12 Proprieti mecanice ale unor implanturi ceramice [87]

Compoziie
Smal
Dentin
Os
Calciu, Ca2+
36,5
35,1
34,8
Fosfor, P
17,7
16,9
15,2
Sodiu, Na
0,5
0,6
0,9
Magneziu, Mg2+
0,44
1,23
0,72
0,08
0,05
0,03
3,5
5,6
7,4
0,01
0,06
0,03
0,30
0,01
0,13
0,022
0,10
0,07
<0,01
<0,01
<0,01
Total anorganic
97
70
65
Total organic
1,5
20
25
Ap adsorbit
1,5
10
10
Potasiu, K+
Ion carbonat, CO3
Fluoruri, F
Cloruri, Cl
2-
Pirofosfat, P3O7
4-
Alte elemente: Sr2+, Pb2+,

Zn2+, Cu2+, Fe3+, Al3+
46

ncorporarea unor ioni poate crete (ex. CO32, Mg2+ or Sr2+)
sau descrete (ex. F)
solubilitatea hidroxiapatitei i prin aceasta biodegradabilitatea [122].

Studii au artat c rspunsul biologic i activitatea hidroxiapatitei pot fi stimulate prin
substituia n cantiti mici cu ioni ca i silicon, carbonat sau magneziu [123], [124].
n cele mai multe cazuri, doparea HA cu diferii ioni cauzeaz apariia fazelor secundare de
TCP i TCP, i n unele cazuri mai grave (doparea cu Li i Si), apar i faze ca i CaO, care sunt
de nedorit n ceramicile fosfocalcice.
Hidroxiapatita dopat cu 2 tipuri de ioni n acelai timp a nregistrat o rat de disoluie mai
sczut dect HA nedopat sau dopat cu un singur tip de ioni, cnd a fost expus la condiii
fiziologice simulate timp de 21 de zile [125].
Conform Webster et al, schimbrile ce intervin n volumul hidroxiapatitei dopate, implic
faptul c fiecare dopant (Mg2+, Zn2+, La3+, Y3+, In3+ si Bi3+), nlocuiete calciul n structura HA,
avnd n vedere c ionii mai mici dect cei ai calciului (Mg2+, Zn2+, In3+, Y3+) corespund cu o
micorare a volumului cristalin, iar ionii mai mari (Bi3+, La3+) corespund unei creteri a volumului
cristalin. Aceast observaie este n conformitate i cu studiul realizat de Ergun et al, din care
rezult c Mg2+, Zn2+ i Y3+ vor substitui calciul n structura HA. De asemenea, conform Webster et
al, mrimea grunilor hidroxiapatitei dopate, difer n diametru, Mg-HA i Zn-HA avnd grunii
mai mari dect HA i celelate eantioane dopate cu La3+, Y3+, In3+ i Bi3+, avnd grunii mai mici
[125], [126].
CO32Ionii de carbonat se gsesc din abunden n interiorul i n jurul esutului mineral al osului
(8 wt%) i sunt fie adsorbii la suprafaa cristalelor minerale, fie sunt prezeni ca i o faz
amestecat de CaCo3 sau MgCO3 [110].
Ionii de carbonat constituie parte integral din structura mineralului osos i au posibilitatea
de a crea mai multe tipuri de substituii (hidroxil sau fosfat) n condiii fiziologice [127]. De
asemenea, creterea concentraiei locale de ioni de calciu i fosfor poate duce la o precipitare
spontan de apatit, prin urmare substituia cu ioni de carbonat a ionilor de fosfat sau hidroxil va
crete concentraia local de ioni de fosfat n teorie, ducnd la mineralizare osoas. Alte studii au
artat c hidroxiapatita dopat cu carbonat se resoarbe n condiii fiziologice, permind
precipitarea de mineral osos n aceste zone de resorbie, devenind astfel mai bioactiv dect
hidroxiapatita dens care are o resorbabilitate minim dup sinterizare [109].
Conform Kanaan et al, ncorporarea de carbonai n HA alturi de ali ioni eseniali
+
(Na ,Mg2+, K+, F-, Cl-), scade att proprietile mecanice ct i ntrzie proliferarea osteoblastelor
MC3T3 raportat la HA nedopat, dei aceast HA dopat cu carbonai este biocompatibil [128].
Si
Studii in vivo i in vitro au artat ct de important este acest element pentru formarea de
esut osos nou i calcificarea acestuia. Studii realizate cu microscopul electronic cu baleiaj au
demonstrat c n osul care se afl n cretere activ se gsete silicon n concentraie de pn la
47

0,5 wt%. Ca urmare a acestor rezultate, putem trage concluzia c ncorporarea de silicon sau a
unor grupuri de silicai n structura hidroxiapatitei are potenialul de a mbuntii bioactivitatea.
Un aspect important n realizarea acestor subtituii este riscul de a crea instabilitatea termic a
produsului dopat i descompunerea Si-HA dup sinterizare n faze secundare nedorite, ca i CaO
sau TCP [129].
O hidroxiapatit dopat cu silicon a fost dezvoltat de Gibson et al. (1999) prin
ncorporarea unei cantiti mici de silicon (0,4 wt%) n structura HA printr-o metod de precipitare
apoas. Raportul Ca/(P+Si) de 1,67 fiind echivalent cu cel al hidroxiapatitei pure i nu au fost
observate faze secundare la sinterizarea Si-HA la 1200C timp de 2 ore. Studiile iniiale in vitro au
indicat c Si-HA a stimulat formarea unui strat superficial apatitic ntr-o soluie fiziologic artificial
i c aceasta a stimulat rspunsul celular comparativ cu HA stoechiometric [123].
Bioactivitatea in vivo a granulelor de hidroxiapatit a fost stimulat de substituia
grupurilor de silicati n structura HA, ducnd la creterea semnificativ a ntreptrunderii osoase i
la acoperirea granulelor Si-HA, comparativ cu granulele de HA [111].
Zn2+
A fost raportat de Webster et al. c doparea HA cu 2 mol% de Zn poate crete semnificativ
adeziunea osteoblastelor comparativ cu HA nedopat [130].
Ito et al. au determinat c doparea cu Zn n cantiti de 0,6-1,2 wt% a intensificat
proliferarea celulelor osteoblast-like n cazul materialului bifazic TCP/HA [131].
Un alt studiu similar a descoperit c Zn este un inhibitor in vitro a resorbiei osoase
osteoclastice [132].
Conform Webster et al., doparea cu Zn a creat n HA o rat foarte mare de disoluie,
pierznd 13% din mas n 21 de zile n condiii biologice simulate, contrar cercetrilor lui Ito et al.,
care raportau o disoluie mai sczut, dei sunt diferene ntre cele dou experimente i nu poate
exista o comparaie direct [125], [131], [132].
Y3+
Webster et al. au raportat c n cazul hidroxiapatitei dopate cu 2 mol% de ytriu, adeziunea
osteoblastelor a fost cu 28% mai mare dect pentru hidroxiapatita nedopat. Cantiti mai
semnificative de Y dau rezulate mai bune de adeziune celular, dar efectul nu arat creteri
semnificative peste 5-7 mol% [130].
De asemenea, conform Webster at al., doparea cu ytriu crete adeziunea osteoblastelor
[125].
In3+
Conform Hidaka et al. i Webster et al., In3+ scade cristalinitatea HA i prin urmare crete
rata de disoluie. De asemenea, conform Webster at al. doparea cu indiu crete adeziunea
48

osteoblastelor. Conform Webster et al. Zn-HA a sczut cu 8% n mas dup 21 de zile n condiii
biologice simulate [125], [133].
Mn
Gradul de descompunere a Mn-HA depinde de cantitatea de Mn introdus n pudra iniial
i de temperatura de calcinare. HA coninnd 0,1-1 wt% Mn nu s-a descompus pn la 800C. Au
fost identificate insule izolate de Mn n faza cristalin n structura hidroxiapatitei dopate.
Proliferarea celular este mai sczut dect n cazul HA, dar celulele au morfologia corect
determinat de aderen i rspndire [134].
Influena Mn depinde de asemenea de compoziia chimic a constituentului de baz care
este introdus n structura HA.
Influena Mn asupra proprietilor mecanice este controversat i depinde de compusul
chimic din care provine Mn.
FIonii de F nlocuiesc gruparea OH n structura HA, sczndu-i solubilitatea, ceea ce este de
dorit n aplicaiile dentare de prevenire a deteriorrii danturii [128]. Acetia stimuleaz proliferarea
i diferenierea celulelor osoase, dei n concentraii mari pot inhiba proliferarea celular prin
eliberarea de ioni de Ca2+ n HA datorit solubilitii sczute. De asemenea, concentraiile mari pot
provoca creteri anormale de esut i proprieti mecanice sczute. Concentraia optim de F n HA
pentru aplicaii biomateriale fiind raportat ca 0,033-0,4 mol F-/mol apatit. F mbuntete
stabilitatea termic i crete modulul de elasticitate, ceea ce nu este de dorit n aplicaiile cu
ncrcri mecanice utilizate n cazul dinilor i oaselor din cauza concentrrii de tensiune.
Acest material se folosete i ca dopant n cazul compozitului HA-ZrO2 deoarece
stabilizeaz termic HA mpiedicnd descompunerea acesteia la temperaturi mai ridicate, astfel se
pot obine proprieti mecanice mai bune datorit densificrii la temperaturi mai mari.
Bi3+
Conform Webster et al. acest dopant are cele mai bune proprieti de compatibilitate
biologic, dar deoarece nu este un element ntlnit n mod normal n corpul omenesc este nevoie
de studii pentru determinarea utilitii sale n domeniul materialelor utilizate n ortopedie i
medicin dentar [125].
Mg2+
Doparea hidroxiapatitei cu magneziu prin metoda implantrii cu flux de ioni, mrete rata
de cretere osoas [135] i abilitatea de a crea legturi cu osul [124]. Mecanismul exact nu este
cunoscut dar exist studii care arat c aportul de magneziul intrete oasele la oameni i animale
[136] i c deficiena n acest element poate cauza osteoporoz la om i obolani. Acesta este un
49

element ntlnit n mod normal n structura osului i procentul este de 0,44-1,23 % n funcie de
tipul de esut osos, smalul dentar conine 0,44 %, dentin 1,23 % i osul 0,72 % magneziu [57].
Adiia de magneziu n straturile de acoperire cu HA utilizate n cazul implanturilor din aliaje
de titan crete n mod simitor legturile osoase la ase sptmni dup implantare n femurul de
iepure. Rezistena la alunecare a interfeei n cazul implanturilor acoperite cu Mg-HA a fost de 3,54
1,41 MPa, comparativ cu 1,97 1,17 MPa n cazul acoperirilor cu HA [124].
ncorporarea de magneziu poate afecta de asemenea cristalinitatea acoperirilor cu HA i
poate avea un rol important n adeziunea celular. Molecule ca i intregrina i fibronectina
interacioneaz cu acesta favoriznd ataamentul celular i proliferarea celular crescnd
bioactivitatea implanturilor de titan acoperite cu Mg-HA [124].
Conform Webster et al., doparea cu 2 mol% de Mg crete semnificativ adeziunea
osteoblastelor comparat cu HA nedopat [130].
Serre et al. a descoperit c adaosul de 20 wt% de Mg reduce osteoconductivitatea
ceramicii apatitice fa de celulele osteoblast-like, indicnd c o cantitate prea mare de dopant
poate fi defavorabil materialului final, dei n cantiti mici are efecte dorite [137].
De
asemenea,
conform
Webster
at
al.
doparea
cu
magneziu
crete
adeziunea
osteoblastelor. Mg-HA are fosfataza alcalin aproape identic cu cea a HA dup 7 zile, dar dup 21
este aproape dubl, dar mai sczut dect HA dopat cu ioni trivaleni, acesta fiind un semn al
adeziunii celulare mai crescute [125].
Ionii de Mg2+ stabilizeaz faza -TCP n timpul tratamentului termic i tind s stabilizeze
HA cu o singur faz n prezena ionilor de CO3 chiar i la 1300C [138].
2.3.3.4 Magneziul ca i dopant

Magneziul este unul dintre cei mai importani ioni bivaleni care ajut la meninerea
sntii dinilor i stimuleaz transformarea osului imatur (amorf) ntr-un os matur i cristalin
[128]. Acesta este de asemenea cunoscut pentru prevenirea fracturilor osoase datorit creterii
elasticitii oaselor.
Ca
rezultat
al
studiului
realizat
asupra
principalilor
dopani
utilizai
cazul
hidroxiapatitei, acest element a reieit c aduce cele mai multe avantaje. n primul rnd acesta
stabilizeaz descompunerea HA la temperaturi de sinterizare mai ridicate, ceea ce va permite
densificarea ceramicii la temperaturi superioare i implicit proprieti mecanice mai bune [139].
De asemenea, s-a observat c proprietile biologice sunt similare cu cele ale hidroxiaptitei
i chiar superioare n unele studii, cu condiia s nu se utilizeze o cantitate prea mare de dopant.
n cazul bioceramicilor bifazice HA/TCP, acesta previne tranziia TCP-TCP pn la
temperaturi mai ridicate.
Un aspect importart de menionat este faptul c o cantitate prea mare de Mg va reduce
osteoconductivitatea i solubilitatea va crete, rezultnd c este important de determinat
cantitatea de Mg optim pentru fiecare aplicaie [137].
n majoritatea studiilor realizate pentru Mg-HA, apare TCP ca i faz secundar, deoarece
temperatura de tranziie a HA n TCP scade cu creterea coninutului de Mg, astfel 0,25Mg-HA este
50

stabil pn la 840C, 0,5 Mg-HA pn la 760C i 1,0 Mg-HA pn la 660C comparat cu HA care
este stabil pn la 960C [138], [140].
Doparea cu 2,5-7,5 vol% prezint densiti de osteoblaste ridicate.
Conform Tan et al. Mg-HA care conine 1 % Mg prezint cele mai bune proprieti
mecanice (modulul de elasticitate de 136,3 GPa, duritate Vickers de 7,66 GPa, tenacitatea 1,48
MPam1/2 comparat cu HA 113,57/7,10/1,08), dei acesta a studiat doar compoziii de Mg-HA
coninnd ntre 0,05-1 wt% Mg. De asemenea nu este raportat descompunerea HA chiar i dup
sinterizare la temperaturi de 1400C. Toate compoziiile au o densitate teoretic de 98% cnd sunt
sinterizate la temperaturi peste 1050C [141].
Caccioti et al. a studiat Mg-HA coninnd ntre 0,6-2,4 wt% Mg i a demonstrat c gradul
de cristalinitate scade progresiv cu creterea coninutului de Mg. Aceast lucrare arat apariia
fazei TCP la concentraii mai mari de 0,5 wt% Mg i densitile finale ale Mg-HA sunt mai sczute
dect ale HA din cauza porozitii reziduale [140].
n cantitate redus magneziul mbuntete bioactivitatea [142].
Kalita et al. indic c procentajul de Mg optim pentru a obine proprieti mecanice
mbuntite este de 1 wt%, dei experimenteaz cu un coninut de Mg de pn la 4 %.
Densitatea maxim obinut este de 3,29 g/cm3 n cazul probei de 1 wt% Mg-HA, i duritatea
crete cu 20% fa de HA i rezistena la compresiune crete cu 34% fa de HA. De asemenea, n
acest experiment se demonstreaz c n jurul temperaturii de 500C are loc cristalizarea complet
a hidroxiapatitelor obinute. De asemenea, lucrarea relev faptul c datorit adiiei de Mg a crescut
gradul de cristalinitate i nu au aprut faze secundare n HA dopat cu 1 wt% Mg [143].
Tabel 1.13 Proprieti comparate ale HA, osului i MgHA 1%

Os
Proprieti
MgHA 1%
HA dens
Paralel
Normal
Densitatea teoretic [g/cm3]
3,156
Duritate [GPa]
7,10
7,66
Rezistena la traciune [MPa]
40-100
124-174
49
Rezistena la incovoiere [MPa]
20-80
160
Rezistena la compresiune [MPa]
100-900
170-193
133
1200
Tenacitatea [MPa/m1/2]
~1
2-12
1,48
Modulul lui Young [GPa]
70/120
17-18,9
11,5
136,3
Conform Ryu et al., coninutul mai ridicat de MgO mpiedic creterea grunilor de
HA/TCP i scade sinterabilitatea, rezultnd c optim ar fi o cantitate de 1 wt% Mg. De asemenea,
Mg-HA are o bun biocompatibilitate fr citotoxicitate [144].
Ca i concluzie a literaturii studiate putem spune c magneziul este recomandat ca i
dopant pentru hidroxiapatit din urmtoarele motive:
mbuntete proprietile mecanice ale HA;
51

Mg2+ stabilizeaz faza -TCP crescnd temperatura de tranziie a -TCP pn la
1600C;
Biocompatibilitate fr citotoxicitate i bune proprieti de biodegradare;
Magneziul este n strns legtur cu mineralizarea esuturilor calcificate stimulnd
direct proliferarea osteoblastelor.

Riscurile care pot aprea la utilizarea Mg pentru doparea HA sunt urmtoarele:
O cantitate prea mare de Mg poate scdea gradul de cristalinitate, cristalitele
devenind mai mici i neregulate, formnd aglomerate datorit dimensiunii;
Creterea cantitii de Mg poate induce apariia TCP la temperaturi mai sczute;
Un coninut crescut de MgO inhib creterea grunilor de HA/TCP i scade
sinterabilitatea.
52

3. Materiale i metode
53

3.1. Sinteza bioceramicii

n urma studierii literaturi i a metodelor existente de sintetizare a hidroxiapatitei s-a ales
metoda de sintetizare prin precipitarea apoas. Aceast metod de sintetizare ofer posibilitatea
de a varia parametrii reaciei independent unul de cellalt i asigur o bun reproductibilitate a

procesului [125].
Astfel, se pot modifica urmtorii parametri:

-
Cantitatea de reactivi i implicit stoechiometria;
pH-ul;
Temperatura la care se realizeaz reacia;
Viteza de rotaie;
Durata de maturare a soluiei.
Un alt avantaj al acestei metode const n faptul c ofer o siguran mai mare n
desfurarea experimentului deoarece se poate alege o temperatur de reacie mai scazut. Acest
parametru mai sczut poate creea condiii mai sigure, att pentru persoana care realizeaz
experimentul, ct i pentru instalaia utilizat care se poate uza mai repede la temperaturi mai
ridicate.
Sinteza este relizat pornind de la urmtorii reactivi:
Calciu nitrat tetrahidrat Ca(NO3)24H2O (Carlo Erba Reagenti SpA, Italia);
di-Amoniu hidrogen fosfat soluie (NH4)2HPO4 (Carlo Erba Reagenti SpA, Italia);
Magneziu nitrat hexahidrat Mg(NO3)26H2O (AppliChem G.m.b.H., Germania).
Etapele n care se amestec diferiii compui chimici sunt foarte importante i acestea ne
dau rezultatul dorit i stoechiometria corespunztoare (raportul dintre Ca i P) n substana final,
raportul Ca/P al hidroxiapatitei pure fiind de 1,667 [157], [158].
3.1.1. Bioreactorul
Procesul de sintez a hidroxiapatitei este realizat utiliznd un bioreactor cu perei dublii
prin care circul un fluid termoconductiv cu ajutorul unui termostat (Unistat Tango, Huber
G.m.b.H., Germany). Acest termostat este un circulator etan pentru fluidul care va nclzi uniform
pereii bioreactorului n timpul experimentului. Acelai termostat se poate utiliza i pentru
experimente care utilizeaz o cuv neizolat de exterior [156].
Capacitatea bioreactorului utilizat este de 4,5 litri i temperatura la care s-a realizat
experimentul este de 50C. Aceast temperatur a fost aleas n urma unor experimente la diferite
temperaturi care au demonstrat c rezultatele sunt asemntoare i aceast temperatur ofer o
siguran mai mare a aparaturii i a utilizatorului. Fiecare experiment realizat la aceast
temperatur are o durat de 20 de ore (timp de maturare) i viteza de rotaie este de 220
rotaii/minut.
Procesul este nceput cu ap deionizat care este turnat n bioreactor i adus la
temperatura dorit de 50C n cazul nostru. A doua etap const n adugarea Ca(NO3)24H2O i
pornirea paletei de rotaie pentru a dizolva cristalele de nitrat de calciu. n acest punct ncep s
54

apar diferene n funcie de produsul pe care dorim s l obinem, n cazul n care dorim
hidroxiapatit pur sau hidroxiapatit dopat cu magneziu.
Mg(NO3)26H2O
Ca(NO3)24H2O
H2O deionizat
NH4OH 30 %, pH 11
(NH4)2HPO4
Pomp peristaltic
pH 11, T 50C, viteza de rotaie

220 tr/min, durata 20 h
Filtrare, uscare (40C),
calcinare (1 h la 900C)
Citotoxicitate
Mcinare, barbotin,
DRX, MEB
turnare
Sinterizare
Figura 2. 1 Schema obinerii produsului final din hidroxiapatit
a)
Pentru a obine hidroxiapatit pur se adaug soluie de hidroxid de amoniu NH 4OH
(Carlo Erba Reagenti SpA, Italia) cu concentraia de 30 % pentru a aduce pH-ul la 11, dup care
se va aduga soluia de (NH4)2HPO4 cu ajutorul pompei peristaltice (Masterflex easy-load L/S,
USA) pentru a fi asimilat treptat cu viteza de aproximativ 25 ml/minut.
b)
Pentru a obine hidroxiapatit dopat, n primul rnd trebuie realizat calculul de
nlocuire a calciului din nitratul de calciu cu magneziu din nitratul de magneziu. Aadar n
conformitate cu procentajul de magneziu pe care l dorim vom aduga Mg(NO 3)26H2O imediat
dup ce nitratul de calciu s-a dizolvat i dup vom echilibra din nou pH-ul ca mai sus i se va
aduga soluia de fosfat n acelai mod.
55

Figura 2. 2 Bioreactorul i termostatul la care este conectat
Avnd n vedere volumul bioreactorului pentru sinteza de hidroxiapatit pur s-au utilizat
aproximativ 3,5 moli de nitrat de calciu. Pentru sinteza de hidroxiapatit dopat s-a nlocuit 1wt%,
2 wt%, 5 wt% i respectiv 10 wt% din cantitatea de calciu cu magneziul din nitratul de magneziu,
astfel pentru fiecare procent de calciu nlocuit s-a adugat aproximativ 15 grame de nitrat de
magneziu.
Figura 2. 3 Motorul agitatorului

utilizat, IKA RW20, Germania
56

3.1.2. Filtrarea
Dup ce trec cele 20 de ore de maturare se filtreaz soluia obinut cu o pomp de
vacuum (VWR vacuum gas pump, USA) i se las la uscat n incubator (Heraeus incubator,
Germania) la 40C timp de 24-48 de ore.
Instalaia de filtrare este format dintr-un suport ceramic care are perforaii, pentru
scurgerea prii lichide din soluie, i din filtre de hrtie foarte fine care sunt dimensionate
conform diametrului necesar. Suportul ceramic este plasat peste un vas de scurgere realizat
cu dou orificii, unul pentru aezarea dispozitivului cu substana de filtrat i cellalt pentru
plasarea tubului pompei de vacuum care va realiza filtrarea. Dup ce soluia obinut n
bioreactor este maturat se scoate prin partea inferioar a aparatului unde are un urub de
eliminare a coninutului. Deoarece soluia realizat are un volum mai mare dect suportul
utilizat pentru filtrare, aceast etap se realizeaz de 3-4 ori pentru fiecare sintez.
i acest proces are dou etape:
Prima const n filtrarea prii lichide din soluie;
A doua const n splarea prii solide rmase i filtrarea pentru eliminarea lichidelor
din nou.
n final vom obine o turt de substan solid, care n literatura tiinific se mai
numete i cake, care se poate vedea n figura de mai jos. Aceasta conine nc umiditate i de
aceea e nevoie de uscare i calcinare pentru a purifica ceramica obinut.
Figura 2. 5 Pudra de hidroxiapatita dup filtrare

Figura 2. 4 Instalaia de filtrare
alctuit din pompa de vacuum i
suportul ceramic de filtrare
57

3.1.3. Calcinarea
Dup
ce
pudra
obinut
este
uscat,
se
mrunete i se calcineaz n cuptor (Nabertherm,

Germania) cu mediu atmosferic la 900C timp de 1 or
i cu o rat de cretere a temperaturii de 5C pe minut.
Deci procesul dureaz n total mai mult de 7 ore cu tot
cu perioada de nclzire treptat i rcire treptat.
Aceast etap este necesar deoarece dup
sintez nu obinem hidroxiapatit cu proprietile dorite
deoarece nc exist impuriti din soluie care vor
Figura 2. 6 Vase realizate din alumina pentru
calcinarea pudrelor de hidroxiapatit n ele
disprea doar dup creterea temperaturii peste 450C

i prin aceast calcinare se obine i cristalizarea
pudrei. Deci apa rezidual i nitratul de amoniu sunt eliminate n jur de 450C i la 900C se
obine o cristalizare care ne permite analiza ulterioar prin difractometrie.
Urmtorul pas este testarea pudrelor cu difractometrul cu raze X pentru a verifica puritatea
hidroxiapatitei i analiza cu microscopul elctronic cu baleiaj va evidenia mrimea grunilor i
structura produsului obinut.
Pentru verificarea produsului obinut din punct de vedere biologic se va realiza un test de
citotoxicitate pe diferitele compoziii obinute.
3.1.4. Realizarea eantioanelor

Dup ce pudrele obinute sunt validate, acestea se pot turna n mulaje pentru a fi testate
ca i eantioane de hidroxiapatit dens dup etapa de sinterizare. Deoarece pudra conine
particule aglomerate n urma tratamentului de calcinare, aceasta trebuie n prealabil mcinat
pentru a putea fi realizat o barbotin i turnat.
Dup aceast etap se poate realiza amestecul necesar cu ap deionizat i agent
dispersant n vederea turnrii amestecului obinut n mulajele confecionate din ghips.
n etapa de realizare i turnare a barbotinei trebuie ateptat pentru a se usca eantioanele

n mulaj, dup care poate fi nlturat cofragul i lefuite probele de eventualele neregulariti.
Ultimul pas n obinerea eantioanelor este sinterizarea acestora cu ajutorul unui cuptor
care poate urca pn la temperaturi de 1400C.
3.1.4.1. Mcinarea pudrei

Dup etapa de calcinare pentru a putea realiza forma eantioanelor, avem nevoie de un
amestec de substan uscat cu ap distilat numit barbotin, dar acesta nu poate fi realizat fr
ca pudra rezultat s fie mcinat pentru a desprinde particulele care au fuzionat n urma
tratamentelor prin care au trecut. Pentru a mrunii pudra vom utiliza o instalaie format dintr-un
58

suport cu 2 bare care se rotesc cu ajutorul unui motor, i deasupra va fi plasat containerul cilindric
cu amestecul de mcinat. Datorit rotirii barelor i containerul se va roti timp de 3 ore pn ce
pudra va avea granulaia potrivit pentru eantioane. n interiorul cilindrului din polipropilen de
densitate mare se introduc bile de alumin care au rolul de a mrunii, se introduc 500 ml de ap
distilat i 100 de grame de pudr calcinat.
Dup perioada de 3 ore, amestecul se filtrez din nou i se aeaz n incubator pentru
uscare timp de 24 ore.
Figura 2. 7 Instalaia utilizat pentru mrunirea pudrei obinute

dup calcinare, i pentru realizarea amestecului de barbotin
Figura 2. 8 Pudra de hidroxiapatita dup macinare
59

3.1.4.2. Realizarea barbotinei

Dup ce pudra obinut este uscat, are granulaia necesar pentru a realiza barbotina n
modul urmtor:
n interiorului cilindrului se introduc bilele necesare mcinrii, iar pentru un amestec de
100 de grame se vor introduce 29 ml de ap distilat;
Deoarece dorim ca amestecul s conin 70% mas uscat
se va utiliza un agent dispersant (Darvan 7-N, R.T. Vandelbilt

company, USA) n proporie de 1%, deci 1 ml n cazul de fa;
Se adaug treptat pudra obinut pn la ncorporarea
complet, dup care cilindrul se nchide etan cu ajutorul capacului i

se pornete instalaia.
Dup ce am obinut barbotina format din 70% mas solid,
aceasta va fi turnat n formele pregtite pentru realizarea de
eantioane. Acestea au fost realizate din gips, locaurile pentru
turnarea discurilor de hidroxiapatit au fost realizate cu un burghiu cu
diametrul de 16 milimetri. A fost aleas aceast dimensiune deoarece
cutiile de cultur celular au diametrul de 15 mm i dup tratamentul
Figura 2. 9 Agent dispersant,

Darvan 7-N, R.T. Vandelbilt
company, USA
termic final probele realizate se vor retracta puin. Fiecare set de

mulaj cuprinde o plac de baz i 2 plcue perforate fiecare cu cte 2 coloane de 6 locauri, n
total obinnd un numr maxim de 24 de probe pe set.
Figura 2. 10 Motorul instalaiei de marunire

Figura 2. 11 Bile de alumina
Dup recuperarea amestecului, acesta se extrage cu ajutorul unei pipete i se plaseaz n

fiecare loca cteva picturi pn nu se mai vede fundul, se las s se usuce puin dup care se
mai adaug puin pentru a nu se forma un gol n mijlocul discului. Dup ce tot amestecul a fost
repartizat n mulaje se ateapt aproximativ o or pn ce probele se usuc puin, astfel nct s
nu fie deteriorate la demulare.
60

Figura 2.12 Plac de ghips
Figura 2.13 Mulaje de ghip
Figura 2.15 Eantioane demulate
Figura 2.14 Modul de umplere a mulajelor
Figura 2. 16 Hrtia abraziv utilizat la lefuire, Struers, Germania
Discurile obinute dup demulare au grosimi uor diferite n funcie de cantitatea de

substan adugat n loca i pentru a rectifica aceasta se lefuiesc cu ajutorul hrtiei abrazive de
diferite granulaii. Prima dat se ncepe cu hrtia cu granulaia cea mai mare pentru a lua
marginile grosiere de pe discuri i pentru a scdea rapid grosimea. Dup ce s-a ajuns aproape de o
grosime dorit se trece la o nou hrtie cu granulaie mai mic i tot aa pn la hrtia cu
granulaia cea mai fin care doar va lustrui suprafaa probei. n mod normal grosimea discurilor nu
trebuie s fie mai mare de 3 mm deoarece dup lefuire aceasta trebuie s fie aproximativ 2 mm
pentru testele biologice. n cazul n care discurile sunt mai groase au nevoie de mai mult timp de
61

uscare n mulaj, sunt mai dificil de scos i e nevoie de mai mult lefuire. Deoarece tot procesul de
realizare a probelor se face manual i dureaz foarte mult, nu este recomandabil s se produc
dicuri foarte groase care ar ngreuna i mai mult procesul.
Dup ce toate discurile au fost lustruite se aseaz cu grij pe o hrtie curat i se noteaz
numrul de probe din fiecare compoziie. Dei dup demulare obinem un anumit numr de probe,
acesta nu va fi cel final deoarece adesea n procesul de lefuire unele discuri se rup din cauza
fisurilor ce pot aprea la demulare sau manipulare.
3.1.4.3. Sinterizarea
n momentul n care avem toate probele pregatite i lefuite, acestea vor fi tratate termic
ntr-un cuptor la temperaturi ridicare n scopul obinerii proprietilor mecanice necesare.
Tratamentul de sinterizare are ca i rezultate o tenacitate crescut [159], densificarea
materialului [160] i creterea rezistenei mecanice [161], [162].
Aceste fenomene au loc din
cauz c produsele nesinterizate conin aer i alte gaze blocate n spaiile intergranulare, dup
tratamentul termic aceste gaze sunt eliminate, produsele crude scad n volum.
n marea majoritate a cazurilor, ortofosfaii cu raportul Ca/P < 1,5 nu sunt sinterizai
deoarece nu sunt stabili din punct de vedere termic, pe cnd sinterizarea HA deficiente n Ca sau a
ACP duce la formarea de compui bifazici (HA+ -TCP [163] sau HA + -TCP [164]).
Au fost realizate studii amanunite ale efectelor temperaturilor i duratei de sinterizare
asupra proprietilor hidroxiapatitei i a corelaiei dintre acestea i densitate, porozitate, mrimea
grunilor, compoziia chimic i rezistena mecanic a implanturilor. Sinterizarea sub ~1000 C
are ca rezultat coalescena particulelor iniiale cu densificare puin sau deloc i o pierdere
semnificativ a suprafeei de contact i a porozitii. Gradul de densificare depinde de temperatura
de sinterizare, iar gradul de difuzie ionic depinde de durata de sinterizare [165]. De asemenea
exist aditivi de sintez care pot crete temperatura de sinterizare a fosfailor de calciu [166],
[167]. n mod neateptat, un cmp magnetic n timpul sinterizrii, s-a dovedit c influeneaz
creterea grunilor de HA [168].
Pudra de hidroxiapatit poate fi de asemenea sinterizat sub presiune la 10001200 C
pn la atingerea densitii teoretice. Procesarea la temperaturi mai crescute poate duce la
creterea excesiv a grunilor i la descompunerea HA deoarece aceasta devine instabil la
temperaturi peste ~1300 C [71], [169], [170].
Temperatura de descompunere a bioceramicilor HA depinde de presiunea parial a
vaporilor de ap. Procesarea pudrelor n vid duce la descompunerea mai rapid a acesteia, pe cnd
procesarea sub presiune parial de ap ridicat previne descompunerea. Pe de alt parte,
prezena apei n atmosfer mpiedic densificarea HA i accelereaz creterea grunilor [171],
[172].
O corelaie sigur a fost identificat ntre duritate, densitate i mrimea grunilor n HA
sinterizat: n ciuda densitii crescute, duritatea ncepe s scad la o anumit limit critic a
mrimii grunilor [173], [174].
62

Acest proces se realizeaz ntr-un cuptor care poate atinge temperaturi mai ridicate
necesare pentru densificarea discurilor ceramice. Acest cuptor n form de tub este produs de
firma Carbolite i poate realiza tratamente termice de pn la 1600C. Acesta are ca elemente de
nclzire carbur de siliciu, care sunt aranjate uniform n jurul tubului de lucru pentru a asigura o
nclzire uniform. Este utilizat mai ales n cercetarea materialelor noi care necesit temperaturi
exacte de tratament i diferite opiuni de atmosfer.
Figura 2. 17 Cuptorul de sinterizare pentru probele ceramice,

Carbolite, UK
Figura 2. 18 Tratamentul de sinterizare cu diferitele etape
Fiecare prob este plasat cu grij n interiorul cuptorului i notat astfel nct s poat fi
identificate la final. n funcie de coninutul ceramicii, temperatura de sinterizare va fi diferit i de
asemenea rampele de cretere ale temperaturii sunt adaptate pentru fiecare material n parte.
n cadrul acestui proces de sinterizare au fost alese mai multe trepte de temperatur
fiecare cu un anumit scop. Astfel, avem prima treapt la 150C timp de 30 de minute n cadrul
creia se va elimina apa rmas n eantioane, a doua treapt de 550C timp de o or ajut la
eliminarea tensiunilor interne i ultima i cea mai important etap este temperatura de sinterizare
care difer n funcie de compoziia probelor.
63

Pentru eantioanele realizate din hidroxiapatit pur, temperatura aleas este de 1150C,
pe cnd pentru cea dopat cu diferite procente de magneziu (MgHA 1%, MgHA 2%, MgHA 5%)
temperatura de sinterizare a fost crescut la 1250C deoarece acest element este cunoscut pentru
abilitatea sa de a stabiliza termic hidroxiapatita. n acelai timp alt set de probe de hidroxiapatit
dopat au fost sinterizate i la 1350C pentru a obine o densificare mai bun i pentru a studia
dac se poate urca pn la aceast temperatur.
Pentru comparaie au fost tratate termic i eantioane realizate din alumin comercial la
1400C.
Toate tratamentele de sinterizare au durata de tratament la temperatura maxim de 3 ore,
pasul de cretere a temperaturii fiind de 5C/minut.
n urma acestor etape se dorete obinerea unui produs densificat, fr coninut de alte
substane utilizate n procesul de realizare a barbotinei (ap deionizat, dispersant, resturi de
polipropilen de la containerul folosit) i cu proprieti mecanice i biologice corespunztoare.
64

3.2. Caracterizarea materialului

n vederea validrii materialelor obinute, acestea trebuie testate pentru a verifica
compoziia rezultat i puritatea acesteia, precum i a caracteristicilor de suprafa, a mrimii
grunilor i a orientrii acestora.
Dup ce am validat materialul obinut din punct de vedere al coninutului, mai trebuie
testat i biologic pentru a verifica biocompatibilitatea i a elimina riscul de contaminare n timpul
procesului de fabricaie.
3.2.1. Caracterizarea fizic

Caracterizarea fizic a materialului se face n primul rnd cu ajutorul difractometriei care
ne d informaii valoroase referitoare la compoziia rezultat i existena unor faze secundare
dorite sau nedorite. Dup ce tim ce material am obinut se face i o analiz a suprafeei cu
ajutorul microscopului electronic cu baleiaj pentru a vedea forma i dimensiunea grunilor,
precum i legturile formate ntre acetia.
3.2.1.1. Difractometria cu raze X

Tehnica difraciei cu raze X este cel mai des aplicat pentru analiza materialelor cristaline,
dar poate duce la obinerea unor date relevante i cnd sunt analizate materiale lichide sau solide
amorfe.
Tubul n care sunt generate razele X conine un catod (filament de Wolfram) care este
nclzit prin aplicarea unui voltaj (curent alternativ) n domeniul 5 15 V. Ca i anod este folosit
un obiectiv rcit cu ap, confecionat din diverse elemente pure (de ex. Mo, Cu). Electronii sunt
accelerai n vacuum la poteniale de 5.000 pn la 80.000 V producnd un spectru de tipul celui
prezentat n figura 2. n momentul cnd electronii accelerai ating obiectivul (inta), ei vor fi
respini de ctre electronii atomilor anodului producndu-se astfel o scdere a vitezei sau chiar
nfrnarea electronilor primari. Pentru a nfrna un electron cu conservare de energie, acesta
trebuie s fie capabil de a pierde energia ntr-o manier proprie, i anume sub form de radiaie.
Scopul principal al msurtorilor cu raze X este obinerea unor informaii suplimentare
despre structura fin a unui material.
Pentru investigarea unei probe necunoscute se aplic n prima etap o msurtoare de
ansamblu, de tip Bragg-Brentano (sau ceva similar), ntr-un domeniu larg al unghiului incident.
Apariia unor semnale (peakuri) evideniaz existena unei probe cristaline, ceea ce nseamn c
se pot efectua att determinri ale sistemului cristalin ct i ale structurii cristaline. Diagrama de
difracie se va analiza n funcie de numrul, poziia, intensitatea respectiv forma peakului de
difracie.
65

Evidenierea unor semnale foarte ascuite indic existena unui material monocristalin.
Apariia mai multor peakuri de difracie indic fie
existena
unui
material
cu
structur
cristalin
asimetric fie a unui material policristalin. Absena

peakurilor de difracie apare n cazul materialelor
amorfe, atunci cnd n microvolumul analizat nu
exist planuri cristalografice de difracie. Cazul clasic
pentru definirea materialelor amorfe se raporteaz la
mrimea
cristalitelor
orientate
perpendicular
pe
suprafa (< 20nm pentru elementele grele i < 50

nm pentru elementele uoare).
Determinarea fazelor cristaline prezente ntrun material poart denumirea de analiz calitativ.
Aceasta
se
bazeaz
pe
diferenele
structurilor
cristaline ale elementelor din compoziia chimic

respectiv ale legturilor chimice formate. Aceste
valori se compar cu diagramele standard de difracie
folosind
metoda
amprentei
(fingerprint).
Fiecrui
peak de difracie i corespunde mai mult sau mai

puin o band de difracie (hkl) n scopul indexrii
spectrului de difracie. Determinarea parametrilor de
Figura 2. 19 Difractometrul cu raze X Bruker

D8 Advance, SUA
reea, a distribuiei atomilor respectiv a gradului de simetrie n aranjarea atomilor n reea, poart
denumirea de analiza structurii cristaline.
n cazul materialelor policristaline (polifazice) se pot efectua i determinri cantitative ale
fiecrei faze n parte. Analiza cantitativ mai cuprinde i determinarea mrimii particulelor [175],
[176].
n cazul de fa s-a utilizat dispozitivul Bruker D8 Advance (USA) cu un tub de Cu i un
detector cu scintilaie.
3.2.1.2 Microscopia electronic

Microscoapele electronice sunt instrumente performante care realizeaz imagini virtuale
mrite ale obiectelor examinate, utiliznd fluxuri de electroni accelerai. Cu ajutorul acestuia se
poate efectua examinarea i caracterizarea att a materialelor eterogene organice ct i a celor
anorganice la scar nanometric (nm) sau micrometric (m), n condiiile unor rezoluii foarte
bune.
n cazul microscopului electronic cu baleiaj, pe suprafaa supus examinrii este baleiat un
fascicul fin focalizat de electroni accelerai, pentru generarea imaginilor. Atunci cnd se dorete
efectuarea analizei chimice a unei anumite zone de pe prob, acest fascicul este static.
Radiaia X caracteristic, emis de suprafaa probei n urma bombardamentului cu
electroni, este utilizat n vederea efecturii analizei elementare calitative i cantitative a
materialului aflat ntr-un volum cu diametrul i adncimea egale cu aproximativ 1m.
66

Electronii incideni ptrund cu mare energie n suprafaa probei supuse examinrii. n urma
impactului acestor electroni primari cu suprafaa probei, volumul de material n care se produce
interaciunea, emite mai multe tipuri de radiaii:
electroni secundari;
electronii retrodifuzai;
radiaia X caracteristic a materialului;
ali fotoni de energii diferite.
Toate aceste semnale sunt utilizate pentru a obine diferite caracteristici ale probei
examinate precum: compoziie, topografia suprafeei, orientarea cristalelor [177].
Cele mai importante semnale de imagine sunt cele date de electronii secundari i de ctre
cei retrodifuzai, deoarece ei sunt primii detectai n urma diferenelor topografiei suprafeelor.
Efectul tridimensional reprodus de ctre electronii secundari este datorat adncimii mari a
cmpului microscopului electronic cu baleiaj i totodat efectului de umbr, permind obinerea
unor imagini cu rezoluie mare. Electronii retrodifuzai contribuie la formarea imaginilor
bidimensionale bazndu-se pe energia electronilor provenii de la prob, respectiv a numrului
atomic al elementelor detectate. Elementele cu numr atomic mic (energie sczut) apar
ntunecate pe imagine (gri nchis pn la negru), iar odat cu creterea numrului atomic
(respectiv a energiei) nuana de gri se deschide.
Microscopul electronic cu baleiaj permite, n egal msur, examinarea suprafeelor
lucioase, cu un nalt grad de prelucrare, ct i a celor neprelucrate, cu denivelri. El poate vizualiza
elemente structurale aflate n plane diferite, pstrnd n acelai timp perspectiva de ansamblu, i
realizeaz astfel imagini tridimensionale ale suprafeelor examinate. De aici i popularitatea acestui
aparat, indispensabil, la ora actual, n microfractografie (analiza suprafeelor de rupere cu
ajutorul microscopului).
Dei aceast metod de analiz a materialelor este deseori folosit pentru analiza
suprafeelor la mriri de 10 10.000x, ea este mult mai complex dect ne putem imagina [177].
Rezoluia instrumental de ordinul 1 5 nm (10 50 ) este considerat deja o rutin pentru
instrumentele comerciale. n situaii n care se studiaz materiale minerale sau sintetice, se
ntmpl s se ating limitele rezoluiei, ceea ce nseamn un prag de mrire de 150.000200.000x.
La ptrunderea fasciculul de electroni n prob, se produce interaciunea acestuia cu
cmpurile electrice ale atomilor materialului, ca specii ncrcate negativ. Sarcina pozitiv a
protonilor este concentrat n nucleu, n timp ce sarcina negativ a electronilor este distribuit n
nveliul electronic.
Electronii de impact, care prsesc ulterior proba, se numesc electroni secundari. De
regul, ei posed o energie mai mic de 50 eV. Dac locul de generare al acestor electroni se afl
la o adncime mai mare de 10 nm n prob, scade probabilitatea de emitere a acestora i se
produce o absorbie de energie a electronilor primari difuzai neelastic (electroni absorbii). n
cazul anumitor materiale este posibil recombinarea electronilor secundari, obinui n urma
difuziei neelastice, cu golurile de sarcin (vacanele) rezultate n acelai timp, conducnd la
generare de fotoni n domeniul vizibil sau infrarou apropiat. Aceste apariii luminiscente sunt
67

rezultatul unui proces de difuzie neelastic cunoscut sub denumirea de catodoluminiscen (CL)
[178].
Calitatea micrografiilor MEB depinde, n principal, de patru factori:
diametrul spotului de electroni (dS);
intensitatea curentul fasciculului de electroni (iF);
unghiul de convergen al electronilor (aC);
tensiunea de accelerare a fasciculului de electroni (V0 [kV]).
Majoritatea probelor necesit o preparare special n vederea analizei cu ajutorul
microscopului electronic cu baleiaj. Probele trebuie s fie perfect uscate, lipsite de eventuale soluii
sau substane ce gazific n prezena vidului, producnd contaminarea coloanei microscopului sau
deteriorri ale sistemului de vidare. Foarte important pentru o bun analiz a probelor este pe de o
parte modul de fixare a acestora n microscop iar pe de alt parte, conductibilitatea electric a
acestora.
Orice prob inert n vid naintat, ce nu se modific n timpul bombardrii cu electroni, iar
pe suprafa nu apare efectul de ncrcare, poate fi analizat n MEB. Pregtirea probelor pentru
analiz MEB ncepe cu etapa de curire a suprafeei, fiind urmat de fixarea preparatului care
depinde de natura materialului i forma probei. Cea mai efectiv metod de splare a probelor
este cea n baia ultrasonic, ajutnd la ndeprtarea eventualelor particule de pe suprafaa probei,
cu dimensiuni sub 1 m.
Fixarea probelor se face pe diferite suporturi speciale (de regul din aluminiu), care
asigur o bun conductibilitate electric.
Figura 2. 20 Microscop cu baleiaj de electroni, MEB FEG Hitachi

S4700
n cadrul examinrilor realizate s-a utilizat microscopul MEB FEG, Hitachi S4700, iar
imaginea fiind realizat la 6 KV i 10 mA prin metalizare cu depunere de carbon.
3.2.2 Examinare biologic

Dup caracterizarea cu raze X a probelor obinute i validarea compoziiei pentru a vedea
cum reacioneaz acestea cu mediul biologic este nevoie de realizarea unor teste in vitro care ne
ofer mai multe informaii despre comportamentul acestor substane n contact cu celule vii.
68

3.2.2.1 Test de citotoxicitate

Meninerea cantitii de esut osos este asigurat de dou tipuri de celule, osteoblastele
care formeaz matricea osoasa, i osteoclastele care o degradeaz pentru reconstrucie.
Testul de citotoxicitate const n determinarea influenei unui material asupra viabilitii
celulare i au fost utilizate celule osoase osteoblaste MC3T3-E1.
Linia celular MC3T3-E1
Celulele utilizate n experimente sunt osteoblaste MC3T3-E1 (Riken Gene Bank, Japonia),
izolate de Kodama i Sudo n 1981 [180].
Aceast linie celular netumorigen provine din calota cranian a oarecilor nou-nscui.
Este recunoscut mai ales pentru caracteristicile osteoblast-like, adic sunt capabile s
sintetizeze proteine ca i fofataza alcalin, osteocalcin sau colagenul de tipul I, care sunt specifice
fenotipului osteoblastic. Celulele sunt cultivate n mediu prezentat mai jos (proporiile sunt date n
volum) [181], [182].
-
45% MEM (Minimum Essential Media, Gibco, SUA) alpha cu Glutamax, cu coninut de
45% mediu DULBECCO (Gibco, SUA) cu coninut de fenol;
5% ser fetal bovin (Eurobio), decomplementat la 56C timp de 30 de minute;
5% ser bovin nou-nscut (Eurobio), decomplementat la 56C timp de 30 de minute;
Antibiotic: 50 g/ml gentamicin (Panpharma);
Antifungic: 250 g/ml de mycostatine (Gibco).
fenol;
Celulele se pun n cultur la o concentraie de 2000 de celule/cm 2, ceea ce nseamn

150000 de celule ntr-un flacon de 75 cm2 (Nunc) cultivate la 37C n atmosfer umed i
coninnd 5% CO2 n incubator (Sanyo, SUA).
Figura 2. 21 Incubatorul pentru pstrarea

culturilor celulare, Sanyo
69

Culturile celulare sunt verificate n mod regulat i transplantate nainte de confluen

pentru a evita orice risc de alterare a fenotipului. Morfologia osteoblastelor este prezentat n
figura urmtoare dup colorare cu cristal violet.
Figura 2. 22 Morfologia osteoblastelor MC3T3-E1
ntreinerea liniei celulare
Cnd celulele nu sunt folosite, acestea sunt crio-conservate la -180C n azot lichid n
concentraia de 1,5-3106 ntr-un mediu de congelare specific. Decongelarea trebuie realizat rapid
la 37C i dup aceea suspensia se amestec cu 10 ml de mediu de cultur. Celulele sunt
centrifugate la 600 rotaii/minut timp de 7 minute i repuse n suspensie n 15 ml de mediu de
cultur ntr-un flacon de 75 cm2 (Nunc).
Pentru a putea detaa celulele de pe flacon se folosete un amestec: tripsina (0,025% vol)
- EDTA (0,01% vol, Gibco) timp de 7 minute, iar dup se repun n cultur la concentraia de
150000 celule/15 ml. Fiecare proces de tripsinare i transplantare se calculeaz ca un ciclu de
trecere i dup fiecare decongelare este nevoie de 2 cicluri pentru ca celulele s revin la
activitatea normal.
Supravegherea culturii celulare este realizat cu ajutorul microscopului optic (Nikon TMS),
iar linia celular se utilizeaz aproximativ 20 de cicluri, deoarece dup asta poate aprea
mbtrnirea celular.
nainte de fiecare experiment celulele sunt nsmnate 48 de ore nainte pentru a lucra cu
celule de acelai potenial i a obine o bun reproductibilitate a rezultatelor. Numrarea celulelor
se realizeaz cu ajutorul unul aparat automat de numrare, Beckman Coulter Z2.
70

Dispozitivul de numrat (Beckman Coulter Z2) particule este utilizat pentru identificarea
numrului de celule aflate n contact cu eantioanele studiate. Acesta poate numra toate
particulele de un diametru superior sau egal cu o valoare aleas. Acesta este echipat cu o sond
de aspirat cu deschiderea de 100 m i analizeaz un volum de 500 l i diametre ntre 0,5 i 50
m. n funcie de tipul celulelor utilizate se face o recalibrare a contorului de particule care este
indispensabil pentru a determina diametrul specific al fiecarei linii celulare. Pentru aceast
calibrare este preparat o suspensie celular coninnd 3x106 celule/80 ml i se realizeaz
numrtoarea variind diametrul de detecie a particulelor ntre 2 i 30 m cu pasul de 0,25m i
cu ceilali parametrii neschimbai. Curba de calibrare exprim numrul de celule n funcie de
diametrul particulelor, dimensiunea medie a osteoblastelor n suspensie este 17 m. Pragul inferior
al diametrului pentru numrarea osteoblastelor MC3T3-E1 este de 9 m deoarece o dimensiune
mai mic risc s interfereze cu zgomotul de fond.
Figura 2. 23 Dispozitiv de numrat particule Beckman Coulter Z2
Realizarea testului
nainte de nceperea testului celulele sunt meninute n mediul de cultur n incubator la 37
C n atmosfer de 5% CO2. Mediul de cultur este schimbat tot la dou zile i celulele sunt
transplantate cnd ating o confluen de 80 % pentru a limita diferenierea lor spontan.
Toi reactivii utilizai n cultura celular (mediul de cultur, Trypsina EDTA, penicilina i
streptomicina, acizi amine neeseniali i ser bovin fetal) au fost furnizai de firma Gibco Invitrogen.
71

Figura 2. 24 Pudr de hidroxiapatit i hidroxiapatit dopat pentru testul de citotoxicitate
Figura 2. 25 Plac de cultur celular de la firma CytoOne
Toate experimentele se realizeaz n plci de cultur din polistiren steril non-toxic cu orificii
numite godeuri n care se introduc mostrele noastre i substanele de reacie sau de hrnire a
celulelor depuse. Aceste plci sunt fabricate n conformitate cu standardele europene i
internaionale pentru a asigura calitate optic optim i o dezvoltare uniform i durabil a
celulelor [179].
Mod de lucru
Se ncepe prin a pune 5000 de celule n fiecare godeu din placa de cultur;
Mediul de cultur (fr coninut de ser bovin fetal) este plasat n contact direct cu
diferitele compoziii de pudr de hidroxiapatit sintetizat;
Cutia de cultur este plasat timp de 24 de ore n incubator n atmosfer cu 5% CO 2
pentru a permite mediului de cultur s interacioneze cu pudra;
Dup perioada de 24 de ore mediul de cultur este filtrat la 80 de rotaii pe minut i se
adaug 10% ser bovin fetal;
Din mediul complet (care conine i ser bovin fetal) sunt plasai 200 l n fiecare godeu
cu strat de celule dezvoltat i se las 24 de ore n incubator;
Se adaug 200 l de soluie Blue Alamar i se pune din nou 3 ore n incubator;
72

Dup ce placa de cultur este nchis cu capacul se nfoar n folie de aluminiu
pentru a fi protejat de lumin i se aeaz n incubator timp de 3 ore, timp n care substana
reacioneaz cu celulele i ii va schimba proprietile;
Dup ce au trecut cele 3 ore de reacie se face verificarea cu fluorometrul (Berthold,
Germania) pentru a vedea cte celule n stare bun de sntate vor fi detectate pentru fiecare
compoziie diferit. Pentru acest test se utilizeaz soluia de Blue Alamar de pe eantioane, care se
transfer cu ajutorul unei pipete ntr-o cutie multiwell cu 96 de micro-godeuri (wells). Acest
suport este plasat n aparatul de msur care este conectat la un computer i pe monitor apar
colorate godeurile n funcie de vitalitatea celular a fiecarei probe.
Reactivul Blue Alamar (Interchim) conine un indicator de cretere calorimetric i a
fluorescenei care se bazeaz pe detecia activitii metabolice celulare. Soluia ptrunde prin
pereii celulari pn la mitocondrii unde ntlnete enzime care vor reduce substana i aceasta i
va schimba culoarea devenind roiatic i cu proprieti de fluorescen. Sistemul conine un
indicator al reaciei de oxidare/reducere care devine fluorescent i i schimb culoarea ca rspuns
al reacilor chimice din mediul de cultur. Aceast transformare nu poate fi realizat dect n
prezena celulelor vii i intensitatea culorii este proporional cu activitatea celular. Indicatorul
ratei de oxidare/reducere raportat la metabolismul celular indic schimbri clare i stabile. Un
mare atu al acestui test este i faptul c nu este destructiv dei o mic toxicitate asupra celulelor a
fost identificat, ceea ce permite continuarea culturii celulare dup acest test.
3.2.2.2 Test cu fluid biologic simulat SBF

Acest test se folosete pentru a vedea comportamentul pe termen lung al discurilor
realizate prin turnare n fluid biologic simulat.
Fluidul biologic simulat a fost preparat n laborator
dup reeta revizuit a lui Kokubo din 2003 [183].
Pastilele din diferite compoziii densificate n urma
procesului de sinterizare au fost plasate n containere sterile
cu cte 7 ml de fluid biologic simulat.
Scopul acestui experiment este de a compara
caracteristicile mecanice ale materialelor nainte i dup 30
de zile de la imersarea n fluid, i de asemenea de a studia
suprafaa eantioanelor cu microscopul electronic pentru
determinarea precipitaiilor de suprafa.
Toate probele sunt pstrate n incubator la 37C n timpul
Figura 2. 26 Eantioane utilizate pentru

testul SBF
experimentului.
Dup aceast perioad de 30 de zile probele sunt scoase din fluid i examinate pentru a
vedea modificrile ce intervin pe o perioad mai lung ntr-un mediu similar cu cel intern.
73

Figura 2. 27 Containerele cu fluidul biologic simulat i

eantioanele studiate
74

3.3 Testarea mecanic a eantioanelor solidificate

Dup ce s-a validat compoziia obinut de hidroxiapatit i hidroxiapatit dopat cu
magneziu i s-a verficat biocompatibilitatea, urmeaz etapa cea mai important de testare, i
anume, testele proprietilor mecanice. Acestea reprezint un aspect foarte important de material
fiind eseniale n aplicaiile de implantologie.
Proprietile care s-au verficat n aceast lucrare sunt: microduritatea Vickers i modulul
de elasticitate.
nainte de verificarea caracteristicilor mecanice s-a calculat densitatea pentru a putea face
i o corelaie ntre diferitele proprieti, temperatura de sinterizare i compoziie.
n cazul modulului de elasticitate s-au utilizat dou metode diferite de determinare, i
anume: testarea la compresiune i testarea prin vibraii.
3.3.1. Densitatea eantioanelor realizate

Pentru a calcula densitatea pastilelor realizate s-a utilizat metoda msurarii volumului i a
masei.
Probele pentru care s-a fcut acest calcul au fost cele crude i cele sinterizate la diferite
temperaturi.
Pentru a msura masa eantioanelor s-a folosit o balan foarte precis i pentru calculul
volumului s-a msurat diamentrul mediu i nlimea medie a eantioanelor.
Dup calcularea densitii s-a studiat i densitatea relativ la densitatea teoretic a
hidroxiapatitei dense.
3.3.2. Microduritatea Vickers

Duritatea se definete n tehnic drept rezistena opus de material unei aciuni de
ptrundere mecanic exercitat din exterior prin intermediul unui alt corp.
n practic, se constat c materialele cu duritate mai mare pot achia (zgria) materialele
cu duritate mai mic, de asemenea rezistena la uzare este strns legat de duritate.
Pentru determinarea duritii se utilizeaz o serie de metode care pot fi clasificate dup
modul n care se desfoar aciunea de deformare a suprafeei.
Astfel, exist ncercri statice i ncercri dinamice de determinare a duritii; metodele
statice sunt n general mai precise dect cele dinamice dar sunt mai laborioase i mai lente. Exist
i metode combinate de determinare a duritii, spre exemplu prin rulare sau prin pendulare.
Metodele statice pentru determinarea duritii sunt: metode prin zgriere cu un corp mai
dur i metode prin apsare.
75

Metode de determinare a duritii prin apsare

Metodele de determinare a duritii prin apsare se deosebesc ntre ele, n principal prin
forma penetratorului, condiii de lucru, dimensiuni caracteristice ale urmelor obinute.
Cele mai cunoscute i mai utilizate metode de determinare a duritii prin apsare sunt:
Brinell, Vickers i Rockwell.
Metoda Vickers
Duritatea Vickers reprezint rezistena pe care o opun metalele la ptrunderea unui
penetrator piramidal de diamant, cu baza ptrat, cu unghiul la vrf prescris, sub aciunea unei
sarcini constante.
Duritatea Vickers se noteaz n mod obinuit cu HV i exprim raportul dintre fora F
aplicat i aria suprafeei urmei remanente produse de penetrator. Unghiul feelor opuse ale
penetratorului, specific acestei metode este de 1360 i a fost ales pentru a putea stabili o legtur
cu duritatea Brinell.
Dac exprimm S n funcie de diagonala bazei piramidei i inem cont de unghiul la vrf al
piramidei obinem relaia de calcul a duritii Vickers:

[1]
Aprecierea duritii const n msurarea diagonalei urmei. n acest scop se poate utiliza un
microscop sau un proiector, iar pentru operativitate au fost realizate tabele n care se citete
duritatea corespunztoare.
n domeniul sarcinilor obinuite, ntre 4,9 daN i 98 daN urmele obinute cu penetratoare
cu unghiuri la vrf identice sunt asemenea, duritatea fiind deci independent de sarcina aplicat n
timpul ncercrii.
Figura 2. 28 Urma lasat de penetratorul Vickers

Pot fi msurate duriti pornind de la 10 HV i mergnd pn la 1900 HV.
76

n ceea ce privete adncimea de penetrare a piramidei Vickers, aceasta este de 1/7 d i

ca urmare metoda se preteaz i pentru efectuarea msurtorilor de duritate a pieselor subiri, a
straturilor subiri obinute prin diferite procedee de depunere sau prin tratament termic.
Dei duritatea nu variaz cu fora de apsare, din motive practice au fost prescrise
anumite valori discrete pentru sarcinile aplicate n timpul ncercrii. Acest lucru a condus la
clasificarea ncercrilor Vickers n trei categorii i anume: ncercri de duritate Vickers; ncercri de
duritate Vickers cu sarcini mici i ncercri de microduritate Vickers (cu microsarcini).
Aceast clasificare i valorile sarcinilor utilizate sunt prezentate n tabelul 2.1.
Tabel 2.1 Sarcini utilizate la ncercarea Vickers [184]

ncercarea
Sarcina de ncercare daN (kgf)

4,903
9,806
19,61
29,42
49,30
98,07
10
20
30
50
100
Vickers cu
0,49
0,89
1,96
2,94
3,92
sarcini mici
0,50
1,00
2,00
3,00
4,00
Vickers cu
0,0049
0,0098
0,0196
0,049
0,098
0,196
microsarcini
0,005
0,010
0,020
0,050
0,100
0,200
Vickers
Pentru evitarea vicierii interpretrii duriti datorit influenrii reciproce a urmelor prin
existena zonelor durificate din jurul acestora, se recomand pstrarea distanelor b ntre centrele
urmelor nvecinate i distanelor c ntre centrul urmelor i marginea piesei conform tabelului 2.2.
Tabel 2.2 Timpul de meninere a sarcinii i distana admis dintre urme, la

determinarea duritaii Vickers [184]
Duritatea Vickers,
Timpul de meninere a
HV
sarcinii [s]
Peste 100
10-15
2,5 d
2,5 d
36-100
27-33
3,5 d
2,5 d
10-35
115-125
4,5 d
3,5 d
Sub 10
170-190
5,5 d
4,5 d
Pentru realizarea determinrii se execut minim trei ncercri pentru a obine trei urme, iar
suprafaa trebuie pregtit la o rugozitate care s asigure o msurare n condiii bune a urmelor.
Urmele trebuie s aib conturul clar i nederanjat de urmele prelucrrii.
Fiecare urm se msoar separat prin evaluarea celor dou diagonale i prin calcul se
obine diagonala medie.
Pentru valori ale duritii sub 100 HV precizia cerut pentru exprimarea rezultatelor este
0,1 HV iar pentru duriti mai mari zecimalele se neglijeaz. Valoarea duritii este urmat de
simbolul HV i de doi indici. Primul indice reprezint sarcina de ncrcare exprimat n daN iar al
doilea timpul de meninere a sarcinii n secunde.
77

Datorit naturii probelor examinate trebuie utilizat un dispozitiv de msur microduritatea

Vickers folosind o sarcin de 200 de grame timp de 15 secunde. Dispozitivul utilizat pentru
realizarea acestor este este microdurimetrul Wolpert 402MVD i microscopul electronic cu baleaj
pentru a msura diagonalele.
Figura 2. 29 Microdurimetrul Vickers Wolpert 402MVD
3.3.3 Modulul de elasticitate

Modulul de elasticitate a fost msurat datorit importanei sale majore n comportamentul
oricrui material, acesta putnd fi un indicator pentru mai multe aspecte mecanice care se pot
determina cu ajutorul lui.
Un corp solid supus unei solicitri la ntindere se deformeaz. Deformarea este elastic
dac n urma ncetrii aciunii forei exterioare corpul revine la starea iniial. n caz contrar
deformarea este inelastic. n cazul unei deformri elastice, n interiorul corpului deformat ia
natere o for elastic F, care se opune solicitrii exterioare reprezentate de fora Fe. Deformarea
avnd valoarea l, fora elastic are expresia:

(1)
n care k este coeficient de proporionalitate, ce exprim constanta elastic a materialului

supus ntinderii.
Cnd se realizeaz echilibrul mecanic fora elastic este egal i de semn contrar cu fora
de solicitare exterioar. n cazul particular al unei bare ce are seciunea normal S i lungimea
iniial lo exist relaia:
78
(2)

unde E reprezint modulul longitudinal de elasticitate sau modulul lui Young. Raportul =
l/lo se numete alungire relativ, iar raportul = Fe/S este cunoscut sub numele de rezisten
normal la ntindere sau efort unitar. Utiliznd aceste mrimi condiia de echilibru (1) ia forma:
(3)
unde mrimea = 1/E mai este cunoscut i sub numele de coeficientul de alungire.
Conform relaiei (2) putem constata c dimensiunea modulului de elasticitate este L -1M T-2 unitatea
sa de msur fiind N/m2.
Pentru determinarea acestuia am utilizat dou metode diferite pentru a vedea diferenele
care apar n funcie de modalitatea de testare. Astfel, proba a fost testat prin compresiunea
eantioanelor i prin metoda vibraiilor.
3.3.3.1 Testarea prin compresiune a eantioanelor realizate

Acest test s-a realizat cu ajutorul echipamentului Test Xpert II Zwick Roell Z005 la o vitez
de 1mm/min i for maxim de 60N.
Figura 2. 30 Echipament de ncercri Zwick Roell Z005
Pentru a realiza aceast ncercare s-a nceput prin a testa un eantion pentru a vedea care
este fora de rupere. Aadar o prob de MgHA 2% 1250C a fost testat i aceasta s-a rupt la fora
de 132,46N. Dup acest rezultat s-a hotrt pstrarea forei maxime de compresiune la 60N
pentru a nu distruge probele care urmau s fie testate i prin alt metod ulterior.
Pentru a calcula modulul de elasticitate, care este panta la linia din graficul fordeformaie, se utilizeaz valorile din zona liniat i se folosesc urmtoarele formule:
[MPa]
79
(4)

Unde
= tensiunea aplicat [MPa]
= deformaia [mm]
[N]
(5)
Unde
F= este fora rezultat de pe graficul tensiune-deformaie [N]
S= aria suprafeei testate [mm]
[mm]
(6)
Unde
l= deformaia msurat pentru fora pe grafic [mm]
h= nlimea eantionului testat [mm]
[MPa]
2
1
[%]
Figura 2.31 Exemplu de msurare a modulului de elasticitate cu ajutorul graficului tensiune-deformaie
Dup trasarea curbelor tensiune-deformaie pentru diferitele compoziii s-au realizat

calcule pentru modulul de elasticitate utiliznd domeniul liniar al curbelor i s-a relizat comparaia
ntre valorile obinute pentru eantioanele tratate termic i pentru cele care au fost imersate n
fluid biologic simulat timp de 30 de zile.
3.3.3.2 Testarea prin vibraii a eantioanelor realizate

Pentru a realiza aceast msuratoare se utilizeaz metoda determinrii experimentale a
modulului Young din rspunsul la vibraii libere.
n cele ce urmeaz, probele de hidroxiapatit, se vor considera plci cilindrice, avnd
seciunea circular de raz constant, i nesupuse unor solicitri exterioare. Pentru studiul
vibraiilor libere ale acestor plci se iau n considerare diferite condiii de frontier (de sprijin). Cele
mai cunoscute cazuri n literatur sunt: placa ncastrat pe contur, plac rezemat pe contur, plac
rezemat n centrul su i plac liber. Din punct de vedere experimental ultimele dou cazuri sunt
80

cele mai uor de realizat, aa cum sunt prezentate modelele fizice ale acestora, n figurile de mai
jos.
Figura 2.32 Modelul fizic plac - rezemat n centru
Figura 2.33 Modelul fizic - plac liber
Considernd proba de HA, numrul 3 n figur, avnd conturul perfect liber i sprijinit n
centrul su, pe suportul 3, aceasta poate fi adus n starea de vibraie printr-un impuls aplicat prin
intermediul unei bile 2, de dimensiuni i mas mici. Modul fundamental va avea frecvena [184]:
(7)
unde d este grosimea plcii, R este raza acesteia, E este modulul de elasticitate, este densitatea,
iar este coeficientul lui Poisson.
Se constat c pe baza acestei formule, avnd determinat frecvena modului fundamental
(cea mai joas frecven dintre frecvenele proprii, deci cea mai uor de excitat), prin msurtori
experimentale, se poate determina modulul de elasticitate longitudinal (Young).
n mod asemntor dac se consider proba legat printr-un fir (de a), fr proprieti
elastice, n centrul su se poate considera c aceasta se va comporta ca o plac liber. Pentru
aceast situaie modul fundamental va avea frecvena [184]:
(8)
Instrumentaia de msur utilizat

Pentru efectuarea msurtorilor de vibraii s-au realizat dou standuri experimentale dup
cum se poate vedea n figurile urmtoare.
81

Figura 2.34 Standul experimental pentru nregistrarea rspunsului sonor: a. plac liber; b. plac rezemat n
centru
Figura 2.35 Standul experimental pentru nregistrarea semnalului prin fascicul laser: a. plac liber; b. plac
rezemat n centru
Cele dou standuri experimentale s-au creat pentru msurtorile de vibraii pe sistemele
mecanice reale corespunztoare celor dou modele fizice prezentate n figurile 8 i 9. Pentru
amndou situaii s-au fcut msurtori de vibraii att prin nregistrarea sonor a semnalului, ct
i prin convertirea frecvenei acestuia, prin intermediul unui laser, ntr-un fascicul laser modulat n
frecven proporional cu viteza instantanee a probei.
Pentru prima situaie s-a folosit un microfon condensator, datorit sensibilitii i fidelitii
sale de msur n domeniul frecveelor nalte.
Rspunsul sonor captat a fost introdus n calculator cu ajutorul unei plci de sunet de bun
calitate. Pentru a obine informaii ct mai precise, placa de sunet a fost setat pe o frecven de
eantionare e = 44100 Hz la o precizie de 16 bii. Setarea s-a fcut prin programul de achiziie
CoolEdit.
Pentru a elimina frecvenele joase din semnalele nregistrate am aplicat semnalelor
achiziionate un filtraj de tip FFT cu caracteristic de trecere plat cuprins n banda de frecvene
(400,20000) Hz.
Semnalale au fost stocate n fiiere cu format wav i txt n perechi avnd inclus att
momentul de timp, ct i valoarea msurat.
Au fost de asemenea msurate vibraiile libere ale probelor cu ajutorul unui vibrometru
laser OMETRON de tip Industrial Vibrometer VQ-400-A. Acesta este echipat cu un laser de 1 mW,
82

cu lungimea de und =633 nm (rou). Acest dispozitiv msoar viteza instantanee ntr-un punct
pe baza efectului Doppler pe direcia fascicolului laser.
Ca principiu de funcionare la vibrometru apare ntre fascicolul laser incident i cel reflectat
de obiectul n micare o diferen de frecven proporional cu viteza obiectului: =k v(t)/. Prin
compunerea cele dou fascicule apare fenomenul de btaie, rezultnd o modulare a intensitii
faciculelor de lumin amestecate, cu o frecven proporional cu viteza instantanee. Cu un
convertor frecventensiune rezult o tensiune proporional cu:
U(t) =
k v(t)
. (9)
Dispozitivul msoar n banda de frecvene (2-20000) Hz msurnd viteza n domeniul 0100 mm/s, fr posibilitatea de a modifica scala de msur. Dispozitivul scoate la ieire semnal
analogic, n domeniul 0-5 V. Semnalul de la ieire a fost introdus de asemenea n calculator prin
placa de sunet.
Msurtorile efectuate cu VQ-400-A au o calitate mai proast datorit schimbrii
necontrolate a fascicolului laser reflectat generat de micrile lente ale discului dup impact i
datorit imposibilitii de a regla scara de msur a vitezei.
Determinarea pulsaiilor proprii din rspunsul liber

Se va considera un sistem vibrant cu un grad de libertate cruia i se aplic un impuls
scurt, i se nregistreaz rspunsul acestuia, x(t) sub forma discret
discrete de timp
xk = x(tk ) ,
la momente
tk = kDt , unde k = 0,1,2,3,... .
n cazul vibraiilor probei, x(t) reprezint presiunea sonor nregistrat cu microfonul sau
viteza instantanee msurat cu vibrometrul laser ntr-un punct de pe discul studiat.
nregistrarea se poate face cu un accelerometru, semnalul fiind amplificat, integrat de
dou ori i introdus n calculator. n acest caz
n e = 1/Dt
reprezint frecvena de eantionare.
Valorile experimentale ale rspunsului msurat se noteaz cu

momentelor de timp
xk ,
corespunztoare
t k , unde k = 0,1,2,3,... .
Deoarece sistemul investigat reprezint un sistem vibrant cu amortizare vscoas, avnd
grade de libertate, rspunsul liber se poate scrie n funcie de parametrii sistemului, sub forma:
xk = A0 e - rtk cos( pt k + j ), (10)

unde r este factorul de amortizare, iar p este pseudopulsaia vibraiilor libere ale sistemului.
Acest rspuns se poate pune i sub form complex:
x = Ae
( - r ip ) kDt
unde
l1, 2 = -r ip
= Ael
kDt
(11)
sunt cantiti complex conjugate, care apar n perechi, partea real
reprezentnd coeficientul de amortizare, iar partea imaginar reprezentnd pseudopulsaia.
83

Se introduc notaiile:
S1=-(1+2)= 2r(12)
S2=12=r2+p2 (13)
Se demonstrez uor c parametrii
s1, 2
se obin rezolvnd nti sistemul liniar de ecuaii:
x1 s1 - x2
, (14)
=
x2 s2 - x3
x0
x
1
care, pentru mrirea preciziei poate fi generalizat la sistemul supradeterminat:
x0
x
1
...
x2 n -1
x1
x2 n
x2 s2 x2 n +1
,
=
... s1 ...
x4 n
x2 n
(15)
Rezolvnd sistemul supradeterminat

[A]{s}={b} (16)
obinem
{s1 , s2 }
{s}=([A]t[A])[A]{b}(17)
ale cror soluii sunt:
r=
s1
,
2
(18)
s
p = s2 - ( 1 ) 2
2
. (19)
Trebuie s se observe c pseudopulsaiile vor aprea n perechi de semn contrar.

Metoda poate fi generalizat pentru sisteme cu mai multe grade de libertate.
Experimental se dorete s se stabileasc pulsaia fundamental a unui disc corespundtor
cazului n care discul este liber.
Aceast frecven este legat de modulul lui Young, E, i de densitate aa cum s-a vzut n
seciunea precedent, printr-o relaie care ne va permite s determinm E. Similar se poate face i
pentru alte frecvene proprii.
Pentru obinerea unei micri vibratorii s-a aplicat cu o bil mic rigid un impact discului.
Rspunsul la vibraii poate conine mai multe moduri, motiv pentru care se poate extrage
componenta fundamental a rspunsului (fmin), prin filtraj, sau s se aplice metoda (16) pentru
cazul cu mai multe grade de libertate.
84

Figura 2.37 Eantion din semnalul inregistrat
Figura 2.36 Captur semnal nregistrat de pe monitor
85

3.4 Testarea termografic
Intruct eantioanele realizate prezint diferite proprieti n funcie de compoziie a fost

realizat i un test cu ajutorul camerei de termografie pentru a studia evoluia temperaturii n
funcie de cantitatea de dopant adugat i de asemenea omogenitatea structurii.
Termografia presupune preluarea imaginii termice a obiectului i convertirea imaginii
obinute n frecvene din domeniul vizibil, pentru care ochiul prezint sensibilitate spectral.
Din punct de vedere tehnic, termograful este un aparat optoelectronic, care conine
urmtoarele subansambluri principale:
-
obiectiv de preluare a imaginii;
matrice de elemente fotosensibile IR (traductor termic, care transmite un semnal
electric proporional cu temperatura);

-
modul de palete de culoare (care transform semnalul transmis de traductorul termic
n semnal optic n domeniul vizibil).

Termograful FLIR A40M este echipamentul cu ajutorul cruia se realizeaz aceste
msurtori. FLIR A40M este o camer n infrarou, accesibil, cu precizie, care produce imagini
mai clare dect camerele precedente i are posibilitatea de msurare a temperaturii n domeniul
industrial i n procesele de monitorizare n verificarea produselor i n aplicaii de securitate.
Figura 2.38 Camer termografic FLIR THERMOVISION A40M
Camera a fost creat astfel nct s poat fi montat n orice loc i n orice poziie s
depind doar de factorii din ncpere, cum ar fi temperatura i umiditatea. Adaptabil la orice tip
de msurtori, are rezoluia de 320x240 pixeli, interfa IEEE-1394 ce capteaz pe PC o imagine
monocrom de 8/16 bit cu o vitez de 60Hz.
Echipamentul folosete o tehnic de detecie avansat prin microbolometrul FPA produce
imagini intense pe o und lung ntr-o palet de culori multiple care i permit s observi variaiile
mici de temperatur, cum ar fi 0,080C. Captarea imaginii n timp real la camerele standard (60Hz)
pot identifica rapid evenimente tranzitorii termice i pot genera imagini clare al obiectelor aflate n
micare [185].
86

Figura 2.39 Imaginea n infrarou a eantionului
Figura 2.40 Imaginea n infrarou a eantionului i graficul temperatur-timp
Pentru testul eantioanelor de hidroxiapatit i hidroxiapatit dopat, acestea se rcesc n

realabil cu ajutorul unui frigider i dup se vizualizeaz cu termograful i se nregistreaz fluctuaia
temperaturii timp de aproximativ 7 minute. n timpul nregistrrii camera preia informaii care
ulterior pot fi analizate pentru a trasa graficul evoluiei temperaturii n timp i de asemenea se
poate observa cum fluctueaz temperatura n funcie de suprafaa probei. Dac nczirea este
uniform atunci vom avea de-a face cu o structur omogen i dac acest lucru nu se ntmpl
atunci putem determina care compoziii prezint neomogeniti.
Aceste aspecte de conductivitate termic i stabilitate termic pot fi de interes n cazul
implanturilor realizate din aceste compoziii, deoarece acestea vor fi n contact cu esutul i o
diferen de mai mult de cteva grade celsius ntre implant i esut poate provoca reacii
inflamatorii i implicit un rspuns de respingere a corpului strin.
87

4. Rezultate i discuii
88

4.1. Materialele obinute
A. Metoda de sintez aleas De ce s-a ales?

n urma studierii literaturii i a metodelor existente de sintetizare de hidroxiapatit s-a ales
metoda de sintetizare prin precipitare apoas. Aceast metod de sintetizare ofer posibilitatea de
a varia parametrii reaciei independent unul de cellalt.
Astfel se pot modifica urmtorii parametri:
-
Cantitatea de reactivi i implicit stoechiometria;
pH-ul;
Temperatura la care se realizeaz reacia;
Viteza de rotaie;
Durata de maturare a soluiei.
Un alt avantaj al acestei metode const n faptul c ofer o siguran mai mare n
desfurarea experimentului deoarece se poate alege o temperatur de reacie mai sczut. Acest
parametru mai sczut poate crea condiii mai sigure att pentru persoana care realizeaz
experimentul ct i pentru instalaia utilizat care se poate uza mai repede la temperaturi mai
ridicate.
Deoarece interesul acestei lucrri este de a aduga dopani n structura hidroxiapatitei
pure aceast metod are din nou un avantaj permindu-ne ncorporarea unei cantiti
semnificative de dopani i integrarea acestora la nivelul structurii cristaline a hidroxiapatitei, nu
doar o amestecare mecanic.
Rezultatul acestui tip de sintez este o pudr nanometric care nc nu este cristalizat din
cauza resturilor de nitrat de amoniu rezultat n urma reaciei. Deci produsul final va fi sub form
amorf i va trebui trecut printr-un tratament termic pentru eliminarea acestor compui nedorii i
pentru cristalizare.
Un alt atuu oferit de metoda prin precipitare n soluie apoas este dat de cantitatea de
produs final obinut, aceasta fiind n jur de 400-500 grame de produs uscat dup filtrare. Alte
metode permit obinerea unor cantiti mult mai mici de produs final.
n experimentul de fa am ales s pstrm constani unii parametrii (pH, viteza de
rotaie) i s variem unul sau mai muli din ceilali (stoechiometrie, temperatur, durat de
maturare).
Temperatura i durata de sintez
Prin varierea temperaturii i duratei de sintez am dorit s vedem ce efect va avea aceasta
asupra produsului final i care temperatur este recomandabil.
Experimentele au fost realizate la dou temperaturi diferite (50C i 88C) i dou durate
diferite de maturare ( 20 h i 1 h) fiind studiate produsele rezultate pentru a vedea dac exist
diferene. Rezultatul difractometriei cu raze X a artat c ambele pudre sunt hidroxiapatita i c
fazele nu sunt modificate din cauza temperaturilor diferite. Singura diferen observat a fost n
89

cristalinitatea pudrei obinute imediat dup filtrare, cea sintetizat la 88C fiind mai cristalin
dect cea la 50C, lucru care va fi oricum uniformizat dup tratamentul termic.
Astfel am ales metoda cu temperatura mai sczut din cauza condiiilor de securitate
sporite ale metodei i a materialului.
Varierea stoechiometriei
Pentru a obine un material bifazic am ales s modificm cantitile iniiale de reactivi i

astfel am obinut ceramic bifazic hidroxiapatit-tricalciufosfat (HA-TCP). Aceast material este
apreciat pentru mbuntirea osteoinduciei deoarece combinaia dintre hidroxiapatita foarte puin
resorbabil i TCP-ul resorbabil creeaz combinaia perfect pentru dezvoltarea treptat a esutului
osos n locul TCP-ului care se va resoarbe, fr s piard complet suportul mecanic care este
asigurat de hidroxiapatit.
Prin urmare metoda de sintetizare este adaptat att pentru obinerea hidroxiapatitei pure
ct i pentru obinerea materialelor bifazice sau dopate, reaciile avnd loc la nivelul structurii
cristalografice i nu doar prin mixare mecanic.
Prin orice deficit de calciu n reacia inial produsul final va conine mai mult sau mai puin
TCP, n funcie de rezultatul dorit i de aplicaia medical.
B. Doparea cu magneziu De ce s-a ales acesta?

Pentru a mbuntii proprietile mecanice ale hidroxiapatitei am ales dopajul cu
magneziu din mai multe motive:
-
Acesta este un element care exist deja n esutul osos natural n proporie de 0,44-
1,22 % n funcie de tipul osului;

-
Conform
literaturii
tiinifice,
acesta
mbuntete
proprietile
mecanice
ale
hidroxiapatitei;
-
Are rol de stabilizator n cadrul tratamentelor termice stopnd transformrile nedorite
de faz;
-
Nu creeaz probleme de biocompatibilitate;
Este folositor i n cazul materialelor bifazice HA-Al2O3 deoarece oprete apariia
aluminailor n urma tratamentelor de sinterizare pn la temperaturi de 1400C;

-
Dei comportamentul hidroxiapatitei a fost studiat n mii de articole n ultimele decenii,
cel al hidroxiapatitei doate cu magneziu este nc relativ necunoscut i aceasta nu se gsete nc

la scar larg n comer.
Dei doparea cu magneziu poate mbuntii proprietile hidroxiapatitei trebuie avut n
vedere i cantitatea de dopant utilizat, deoarece peste 2 % poate cauza probleme din cauza
densificrii insuficiente.
90

C. Realizarea barbotinei De ce s-a ales aceast metod

A fost aleas aceast form de prelucrare a pudrei obinute deoarece ne permite o mare
flexibilitate n realizarea de forme complexe. Pentru a putea realiza barbotina, pudra a fost n
prealabil calcinat i mcinat cu ajutorul instalaiei formate din containerul de polipropilen cu
bile de alumin.
Figura 3. 1 a. Instalaia de mcinare a pudrei obinute i de realizare a barbotinei; b. Containerul din polipropilen
n care este introdus pudra i bilele de alumin.
Barbotina a fost realizat ntr-o instalaie de mixare ntr-un suport de polipropilen i cu

ajutorul unor bile de alumin pentru omogenizare. Cantitatea de materie uscat utilizat n
realizarea barbotinei variaz n funcie de compoziie, s-a dorit ncorporarea a 70 % de materie
uscat, dar hidroxiapatita dopat nu a putut fi ncorporat dect n cantiti de 65 % pentru MgHA
2 %, respectiv 56 % pentru MgHA 5 %. Hidroxiapatita MgHA 1 % a putut fi ncorporat n
proporie de 70 % i MgHA 10 % nu a putut fi pus sub form de barbotin.
Deoarece dorim obinerea unei densiti finale ct mai ridicate i materia crud trebuie s
aibe o anumit densitate de plecare, barbotinele care au o densitate inferioar vor da i produse
finale de densitate inferioar. Din acest considerent densitatea crud trebuie s se ncadreze n
intervalul 35-45 % din densitatea teoretic a hidroxiapatitei (3,15 g/cm3).
Prin acest proces de realizare a formelor implanturilor se pot realiza forme pentru diferite
regiuni ale corpului cum ar fi vertebrele, oasele craniului, regiunea maxilo-facial etc. Pe lng
formele complexe care se pot realiza, putem de asemenea obine structuri macroporoase care
favorizeaz cretearea esutului osos (osteointegrarea) i fuzionarea cu materialul implantat.
Aceste implanturi macroporoase se pot realiza cu ajutorul materialelor polimerice care se introduc
n barbotin i se elimin dup tratamentul termic rmnnd golurile ocupate de volumul acestora.
i din aceast etap putem observa c doparea cu magneziu n cantiti prea mari nu este
benefic pentru material, deoarece nu poate fi ncorporat toat cantitatea n structura
cristalografic.
91

D. Realizarea de materiale bifazice cu Al2O3

Din dorina de a mbuntii proprietile mecanice am realizat i materiale bifazice
hidroxiapatit alumin (HA-Al2O3) prin ncorporarea de diferite procentaje de alumin n timpul
realizri barbotinei.
Deoarece acest material bifazic devine instabil la temperaturi ridicate, datorit apariiei
aluminailor, peste 1200C se adaug alumin la hidroxiapatita dopat, magneziul fiind un bun
stabilizator termic i n acest caz, permind densificarea pn la 1400C, fr apariia
aluminailor.
E. Eantioanele realizate
Deoarece n cadrul acestui experiment s-au modificat diferii parametrii avem i diferite
produse obinute, astfel am obinut hidroxiapatita pur la 50C i 88C, hidroxiapatita bifazic cu
TCP i hidroxiapatita dopat cu magneziu.
Tabel 3.1. Sinteze realizate
Nr
Denumire
Temp [C]
Timp [h]
Compoziie
DRX
MEB
Biologie
FHA1T
50
20
HA
FHA2T
50
20
HA
FHA3T
50
20
HA
FHA4T
50
20
HA
FHA5T
50
20
HA
FHA6T
50
20
HA
FHA7T
50
20
HA
FHA8T
50
20
HA
FHA9T
50
20
HA
10
FHA10T
50
20
HA
11
FHA11T
88
HA
12
FHA12T
88
HA
13
FHA13T
50
20
HA
14
FHA14T
50
20
HA-TCP
15
FHA15T
50
20
HA-TCP
16
FHA16T
50
20
HA-TCP
17
FHA17T
50
20
HA-TCP
18
FMgHA1T
88
MgHA 1%
19
FMgHA2T
50
20
MgHA 5%
20
FMgHA3T
50
20
MgHA 1%
21
FMgHA4T
50
20
MgHA 1%
22
FMgHA5T
50
20
MgHA 1%
23
FMgHA6T
50
20
MgHA 5%
24
FMgHA7T
50
20
MgHA 2%
25
FMgHA8T
50
20
MgHA 1%
26
FMgHA9T
50
20
MgHA 1%
27
FMgHA10T
88
MgHA 10%
92

4.2. Validarea materialelor obinute

4.2.1. Validarea fizic
Caracterizarea cu raze X a pudrelor
Difractometria cu raze X a fost realizat cu dispozitivul Bruker D8 Advance cu un tub de Cu

i un detector cu scintilaie.
n urmtoarele imagini avem difractogramele pentru pudre de hidroxiapatit pur ct i
hidroxiapatita dopat cu magneziu n diferite concentraii.
Hidroxiapatita pur
Difractograma urmtoare este obinut de la o pudr de hidroxiapatit nedopat i
calcinat la 900C pentru a obine o cristalizare complet. Din imagine putem observa mai multe
peak-uri de nalt intensitate corespunztoare planelor hidroxiapatitei (002), (211), (112), (300) i
(213) corespunztoare cu fia standard PDF # 9-432 a hidroxiapatitei. Nu este detectat faza TCP
sau CaO.
Hidroxiapatit dopat cu 1% i 5% Magneziu

HA
HA
HA
Figura 3. 2 Difractograma pudrei de hidroxiapatit pur calcinat la 900 C
Pentru aceste dou compoziii, peak-urile de intensitate puternic se afl n regiunea 31,
certificnd faptul c am obinut o pudr cu grad ridicat de cristalinitate. Prezena MgO este
93

identificat n dreptul 43 punnd n eviden prezena dopantului n cele 2 compoziii studiate

[189].
Pentru compoziia MgHA 1% nu a fost identificat nicio alt faz secundar.
Dimpotriv, pentru compoziia MgHA 5% apar trei peak-uri de -TCP corespunztoare
planurilor (210), (220) n conformitate cu fia standard PDF # 9-169 a -TCP.
Figura 3. 3 Difractograma pudrei de MgHA 1% calcinata la 900 C
Prezena acestei faze, care este perfect biocompatibil, nu mpiedic folosirea acestei
compoziii ca biomaterial. Apariia acestor faze de -TCP sau CaO induse de adugarea dopanilor
este cunoscut din literatur.
94

Figura 3. 4 Difractograma pudrei de MgHA 5% calcinat la 900 C
Figura 3. 5 Analiza EDS a elementelor chimice prezente n pudra de MgHA 5% calcinat la 900 C
95

Caracterizarea prin microscopie electronic cu baleiaj
Pentru a vedea structura pudrelor sintetizate i mrimea grunilor acestea au fost

analizate cu microscopul electronic cu baleiaj, MEB FEG, Hitachi S4700, la 6 KV i 10 mA prin
metalizare cu carbon.
Figura 3. 6 Imaginile pudrelor realizate cu microscopul electronic cu baleiaj: a. HA; b. MgHA

1%; c. HA; d. MgHA 1%; e. MgHA 5%; f. MgHA 5%;
96

Din imaginile de mai sus putem vedea c am obinut o pudr cu granulaie fin i care n
urma procesului de calcinare formeaz conglomerate, deci trebuie mcinat nainte de folosire n
cadrul barbotinei. Din figurile 3.8 a, b i f putem vedea c mrimea gruilor este mai mic de 1
m i c acestea s-au cristalizat bine n urma tratamentului termic la 900 timp de o or.
4.2.2. Validarea biologic

Pentru certificarea biocompatibilitii produselor de diferite concentraii, s-a recurs la
testarea acestora n cadrul unui test de citotoxicitate i imersate n fluid biologic simulat.
Test de citotoxicitate
Evaluarea rspunsului celular este realizat printr-un test indirect asupra pudrelor de
hidroxiapatit realizate i calcinate o or la 900C i sterilizate timp de 45 de minute.
Pudrele sunt amestecate cu un mediu de cultur celular (care nu conine ser bovin fetal)
timp de 20 de ore la 37C sub agitaie (80 rot/min). Lichidul este extras i filtrat, se adaug 10%
ser bovin fetal i se aeaz peste celule (osteoblaste MC3T3-E1) aflate n cultur cu 24 de ore
nainte. Cte 200 l de mediu este pus n fiecare godeu i totul este lsat la incubat timp de 24 de
ore.
Este relizat un test calorimetric cu Blue Alamar prin spectrometrie (dup incubarea
reactivului timp de 3 ore) pentru msurarea i cuantificarea activitii celulare a osteoblastelor cu
scopul de a identifica eventualele efecte citotoxice.
100%
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
control
medium
HA powder
HA -TCP
powder
HA 1%Mg
powder
HA 2%Mg
powder
HA 5%Mg
powder
Figura 3. 7 Graficul testului de citotoxicitate realizat asupra pudrelor de diferite compoziii
Dup cum putem vedea i n graficul de mai sus toate pudrele sunt biocompatibile avnd
procentajul de activitate celular ntre 90-100% fa de mediul de control. Desigur se pot observa
unele diferene mici ntre diferitele compoziii, hidroxiapatita pur are o activitate celular de
100% pe cnd materialul bifazic HA-TCP este la doar 90 % i MgHA 5% doar 89%. Dintre celelalte
eantioane putem identifica cel mai bun rspuns n afar de hidroxiapatit n cazul MgHA 1%.
97

Pastile realizate
Din pudra sintetizat au fost realizate probe pentru a efectua teste asupra lor. Acestea au
fost turnate n mulaje realizate din ghips i au diamentrul de 16 mm i nlimea de aproximativ 23 mm.
Figura 3. 1 Pastile demulate; a. nelefuite; b. uscate i lefuite
Aceste pastile au fost uscate n incubator dup demulare i sinterizate la temperaturi nalte
pentru a le densifica. Fiecare compoziie are o temperatur diferit de sinterizare n funcie de
compoziia chimic.
Tabel 3.2 Compoziiile pastilelor realizate pentru testele biologice i mecanice
Numr
Numr eantioane
eantioane
sinterizate
HA
35
30
1250
FMgHA5T
MgHA 1% Mg
43
35
1250/1350
S3
FMgHA2T
MgHA 5% Mg
26
25
1250/1350
S4
FMgHA7T
MgHA 2% Mg
63
50
1250/1350
S5
FHA14T
HA-TCP
67
35
1120
29
25
1150
29
25
1150
23
20
1150
29
25
1150
37
30
1400
Nr
Nume
Compoziie
S1
FHA5T
S2
S6
S7
S8
S9
S10
HA-
98% HA+2%
Alumina1
Alumin
HA-
70% HA+30%
Alumin2
Alumin
HA-
50% HA+50%
Alumin3
Alumin
HA-
30% HA+70%
Alumin4
Alumin
Alumina1
Al2O3
98
Temperatura [C]

Figura 3. 9 Eantioane de MgHA nainte i dup sinterizare
Testarea n fluid biologic simulat SBF
Pentru a studia comportamentul eantioanelor densificate n fluid biologic simulat am creat

o soluie de SBF n care am imersat probele pentru o perioad de 30 de zile. Dup intervalul de 30
de zile se examineaz probele pentru a vedea dac au aprut precipitai pe suprafaa acestora i
dac s-a modificat microduritatea.
Figura 3. 10 Probele imersate n fluid biologic

simulat
Figura 3. 11 Container cu
soluie SBF pentru referin
Dup 30 de zile n acest incubator probele sunt scoase din fluidul biologic simulat i
examinate din nou fizic i mecanic pentru a vedea influena acestuia pe termen mediu.
99

4.3 Proprieti mecanice

Pentru evaluarea efectului parametrilor de sintez i a cantitii de dopant asupra
produselor finale obinute s-au efectuat prima dat teste de caracterizare fizic pentru a certifica
compoziia obinut, i dup aceea teste de verificare a cititoxicitii.
Dup obinerea pudrelor, acestea au fost validate ca fiind hidroxiapatit, respectiv
hidroxiapatit dopat cu magneziu, i biocompatibile. Dat fiind faptul c tim proprietile fizice i
biologice ale materialului, se pot efectua teste mecanice pentru a vedea influena tuturor
parametrilor asupra compoziiilor obinute. Atfel s-au realizat teste pentru determinarea densitii
prima dat pentru a vedea i corelarea dintre aceasta i proprietile mecanice msurate. Au fost
testate eantioanele pentru determinarea microduritii Vickers si a modulului de elasticitate prin
dou metode diferite.
A. Densitatea
Pentru a calcula densitatea am folosit metoda de msurare a masei i a volumului probelor
realizate.
Tabel 3.3 Densitatea eantioanelor raportat la densitatea teoretic a hidroxiapatitei
Nr.
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
MgHA
1%
2%
5%
1%
2%
5%
1%
2%
5%
Crude
Sinterizate la 1250C
Sinterizate la 1350C
1,23
1,18
1,03
2,32
2,12
1,72
2,35
2,28
1,79
1,19
1,22
1,05
2,21
2,11
1,63
2,49
2,33
1,81
1,18
1,16
1,02
2,2
2,07
1,65
2,38
2,28
1,83
1,19
1,21
1,03
2,15
2,08
1,69
2,36
2,31
1,78
1,23
1,19
1,07
2,23
2,12
1,71
2,41
2,31
1,84
Media
1,204
1,192
1,04
2,222
2,1
1,68
2,398
2,302
1,81
38.22
37.84
33.01
70.53
66.66
53.33
76.12
73.07
57.46
% HA
Teoretic
Putem observa c adaosul de magneziu n cantiti prea mari afecteaz negativ densitatea
inial i final a eantioanelor. Acest lucru ne poate indica de asemenea c hidroxiapatita dopat
cu magneziu are nevoie de temperaturi mai nalte de sinterizare pentru o densificare
corespunztoare.
100

Figura 3. 22 Graficul densitilor probelor realizate i tratate termic la diferite temperaturi
Din figura 3.16 putem vedea cum densitatea este mbuntit la creterea temperaturii de
sinterizare i aceasta este afectat negativ de cantitatea de dopant adugat. Este posibil ca din
cauza diferenelor de dimensiuni ale ionilor de magneziu n structura cristalografic s creeze
modificri structurale care se manifest ntr-o pudr cu densitate mai mic i deci i produsul final
va avea asemenea probleme.
B. Microduritatea Vickers
Pentru a vedea evoluia duritii materialului n funcie de temperatura de sinterizare i de

compoziie se utilizeaz un microdurimetru de tip Wolpert 402MVD, cu ajutorul cruia putem
msura diagonalele lsate de vrful de identare i astfel calcularea duritii. Pentru vizualizarea
acestor diagonale s-a utilizat microscopul electronic cu baleiaj din cauza limitrilor microscopului
optic.
101

Tabel 3.4 Valorile microduritii pentru eantioanele de MgHA sinterizate nainte i

dup SBF
Compoziie
HV nainte de SBF
HV dup SBF
MgHA 1% 1250C
108,04
200,14
MgHA 1% 1350C
263,79
237,77
MgHA 2% 1250C
180,53
195,99
MgHA 2% 1350C
260,19
212,14
MgHA 5% 1250C
44,98
40,11
MgHA 5% 1350C
60,28
63,82
A fost realizat o comparaie a eantioanelor n funcie de valorile obinute pentru a

identifica mai uor diferenele, astfel din figura urmtoare putem observa cum microduritatea
prezint valorile cele mai crescute n cazul MgHA 1% sinterizat la 1350C, valoare cu aproximativ
20% superioar celei a HA nedopate. De asemenea, o valoare superioar a HA nedopate se
identific i n cazul MgHA 2% sinterizat la 1350C. Valorile pentru eantioanele MgHA 5% sunt
extrem de sczute i n raport cu hidroxiapatita pur.
HV
263.79
260.19
226.75
180.53
108.04
44.98
HA
60.28
MgHA 1% MgHA 1% MgHA 2% MgHA 2% MgHA 5% MgHA 5%

1250
1350
1250
1350
1250
1350
Figura 3.13 Graficul valorilor microduritii Vickers pentru eantioanele sinterizate
Deoarece am imersat probele n fluid biologic simulat am dorit i determinarea

proprietilor mecanice ale acestora dup un interval de 30 de zile i compararea acestora cu
valorile iniiale. Astfel, n figura 3.14 i 3.15 putem vedea graficele de comparaie ntre ale
eantioanelor tratate termic nainte de a fi imersate n fluid biologic simular i dup 30 de zile.
102

HV la 30 de zile dupa SBF

237.77
200.14
212.14
195.99
63.82
40.11
MgHA 1%
1250 SBF
MgHA 1%
1350 SBF
MgHA 2%
1250 SBF
MgHA 2%
1350 SBF
MgHA 5%
1250 SBF
MgHA 5%
1350 SBF
Figura 3.14 Graficul valorilor microduritii Vickers pentru eantioanele sinterizate i imersate n SBF timp de
30 de zile
HV inainte de SBF
HV la 30 zile dupa SBF
263.79
237.77
200.14
260.19
212.14
195.99
180.53
108.04
60.28 63.82
44.98 40.11
MgHA 1%
1250
MgHA 1%
1350
MgHA 2%
1250
MgHA 2%
1350
MgHA 5%
1250
MgHA 5%
1350
Figura 3.15 Graficul valorilor microduritii Vickers pentru eantioanele sinterizate nainte i dup imersarse n
SBF timp de 30 de zile
C. Modulul de elasticitate
Determinarea prin compresiune

Acest test s-a realizat cu ajutorul echipamentului Test Xpert II Zwick Roell Z005 la o vitez
de 1mm/min i for maxim de 60N.
103

Diagrama tensiune - deformatie

HA 1250C
MgHA 1% 1250
MgHA 1% 1350
MgHA 2% 1250
MgHA 2% 1350
MgHA 5% 1250
MgHA 5% 1350
HA-Al2O3
70
60
Tensiune [MPa]
50
40
30
20
10
0
0.000
0.005
0.010
0.015
0.020
0.025
0.030
0.035
0.040
deformatie [mm]
Fig. 3.16 Graficul tensiune deformaie pentru eantioanele sinterizate la diferite temperaturi
Diagrama tensiune-deformatie: probe SBF

MgHA 1% 1250 SBF
MgHA 1% 1350 SBF
MgHA 2% 1250 SBF
MgHA 2% 1350 SBF
MgHA 5% 1250 SBF
MgHA 5% 1350 SBF
70
Tensiune [MPa]
60
50
40
30
20
10
0
0.000
0.010
0.020
0.030
0.040
0.050
Deformatie [mm]
Figura 3.17 Graficul tensiune deformaie pentru eantioanele sinterizate la diferite temperaturi i imersate n
fluid biologic simulat timp de 30 de zile
104

Dup trasarea curbelor tensiune-deformaie pentru diferitele compoziii s-au realizat

calculele pentru modulul de elasticitate utiliznd domeniul liniar al curbelor i s-a relizat
comparaia ntre valorile obinute pentru eantioanele tratate termic i pentru cele care au fost
imersate n fluid biologic simulat timp de 30 de zile.
Din figura 3.18 putem observa c MgHA 2% 1350C prezint cea mai ridicat valoare de
92, pe cnd HA pur prezint o valoare de mai puin de jumtate, cu 42. Nici compoziia de MgHA
1% 1250C nu prezint proprieti sczute fa de HA, dimpotriv are o valoare cu 75% mai
ridicat.
Din figura 3.19 putem observa cum valorile modulului de elasticitate scad pentru toate
eantioanele dup expunerea la mediul biologic simulat dar totui acestea rmn superioare
compozitie fa de HA pur.
n figura 3.20 avem alturate toate valorile nainte i dup 30 de zile n fluid biologic
simulat pentru a putea vedea cum proprietile variaz la expunere, acestea scznd cu aproape
30% n unele cazuri.
Modul Young E [MPa]

92.340
73.634
52.184
44.256
42.960
HA 1250C
MgHa 1%
1250C
MgHa 1%
1350C
38.276
MgHA 2%
1250C
34.805
MgHA 2%
1350C
MgHA 5%
1250C
MgHA 5%
1350C
Figura 3.18 Comparaie ntre valorile modulului de elasticitate pentru diferitele compoziii de materiale
105

Modul Young E [MPa] - probe SBF 30 zile

56.873
44.965
38.749
31.967
31.926
24.239
MgHa 1%
1250C SBF
MgHa 2%
1250C SBF
MgHa 5%
1250C SBF
MgHa 1%
1350C SBF
MgHa 2%
1350C SBF
MgHa 5%
1350C SBF
Figura 3.19 Comparaie ntre valorile modulului de elasticitate pentru diferitele compoziii de material dup
imersare n fluid biologic simulat timp de 30 de zile
Modul Young [MPa]

92.340
73.634
56.873
52.184
44.965
44.256
38.276
34.805
38.749
31.967
31.926
24.239
MgHa MgHa MgHA MgHA MgHA MgHA MgHa MgHa MgHa MgHa MgHa MgHa
1%
1%
2%
2%
5%
5%
1%
2%
5%
1%
2%
5%
1250C 1350C 1250C 1350C 1250C 1350C 1250C 1250C 1250C 1350C 1350C 1350C
SBF
SBF
SBF
SBF
SBF
SBF
Figura 3.20 Comparaie ntre valorile modulului de elasticitate pentru diferitele compoziii de material nainte i
dup imersare n fluid biologic simulat timp de 30 de zile
106

Determinarea modulului de elasticitate prin rspunsul la vibraii libere
Experimental se dorete s se stabileasc pulsaia fundamental a unui disc corespundtor

cazului n care discul este liber.
Aceast frecven este lagat de modulul lui Young, E, i de densitate aa cum s-a vzut n
seciunea precedent, printr-o relaie care ne va permite s determinm E. Similar se poate face i
pentru alte frecvene proprii.
Pentru obinerea unei micri vibratorii s-a aplicat cu o bil mic rigid un impact discului.
Rspunsul la vibraii poate conine mai multe moduri, motiv pentru care se poate extrage
componenta fundamental a rspunsului (fmin), prin filtraj sau s se aplice metoda (16) pentru
cazul cu mai multe grade de libertate.
Figura 3.21 Captur semnal nregistrat de pe monitor
Figura 3.22 Eantion din semnalul nregistrat
Figura 3.23 Semnalul de vibraii pentru HA-1250 0C
107

Figura 3.24 Semnalul de vibraii pentru HA 5%Mg -1250 0C
Figura 3.25 Semnalul de vibraii pentru HA5%Mg-12500C -SBF Suport
108

Figura 3.26 Semnalul de vibraii pentru HA5%Mg-12500C -SBF Liber
Tabel 3.5 Valorile modulului de elasticitate (Young) determinate pe baza msurtorilor de vibraii
Nr.
Nume fiier
r [s-1]
f1 [s-1]
Rx10-3[m]
dx10-3[m]
E [MPa]
HA-1250 Liber
866.977
4183.580
6.0
2.2
52.81
HA-1250 Suport
1524.215
3954.325
6.0
2.2
57.14
MgHA01-1350 Liber
1073.67
3983.579
6.0
2.1
57.99
MgHA02-1250 Liber
1159.270
3297.693
6.0
2.0
39.77
MgHA02-1350 Liber
1152.7543
6135.010
6.0
2.1
96.30
MgHA05-1250 Liber
1086.452
4235.29
6.0`
2.0
65.53
MgHA05-1350 Liber
1044.341
3218.404
6.0
2.0
39.31
HA-Al2O3-1150 Liber
2368.284
6015.566
6.5
2.8
93.12
1371.039
4015.386
6.0
2.0
58.99
1292.309
3407.538
6.0
2.0
42.46
1726.6037
3985.922
6.0
2.0
58.21
1063.605
1785.641
6.0
2.0
67.32
1288.1465
4463.032
6.0
2.0
34.89
1152.369
1528.214
6.0
2.0
45.36
1453.289
2985.589
6.0
2.0
32.71
1115.855
4271.095
6.0
2.0
55.55
crt.
1
10
11
12
13
14
15
16
MgHA01-1250SBF
Liber
MgHA02-1250SBF
Liber
MgHA02-1350SBF
Liber
MgHA02-1350SBF
Suport
MgHA05-1250SBF
Suport
MgHA01 1350SBF
Liber
MgHA051250SBFLiber
MgHA01-1250 Suport
109

Modul de elasticitate - vibratii [MPa]
96.3
65.53
52.81
58.99
55.55 57.99
58.21
45.36
39.77
39.31
42.46
32.71
Figura 3.27 Modulul de elasticitate determinat prin metoda vibraiilor [MPa]
110

4.4 Testarea termografic

Aceast msurtoare s-a fcut cu ajutorul echipamentului FLIR Thermovision A40M.
Din urmtoarele imagini putem observa cum crete temperature n eantioanele rcite care
se adapteaz la temperature mediului ambient dupa un anumit interval de timp.
Hidroxiapatita pur pornete de la o temperature de 22C dupa 10 minute n frigider i
atinge un prag de temperatur de aproximativ 25C dup 5 minute de cretere liniar.
Figura 3.28 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru HA pur
Eantionul de hidroxiapatit dopat cu 1% magneziu atinge un prag de temperatur mult

mai repede dect n cazul anterior, ceea ce arat ca realizeaz un schimb de cldura mai bun. Din
imaginea preluat de camer putem observa c structura este omogen deoarece nclzirea se
face uniform pe toat suprafaa. Astfel proba dopat cu 1% magneziu se adapteaza mai bine
temperaturii mediului ambiant i realiznd schmbul de caldur mai repede scade i riscul de a
cauza probleme de respingere din cauza diferenelor de temperatur.
111

Figura 3.29 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru MgHA 1% sinterizat la 1250C
i n cazul eantionului MgHA 2% schimbul de cldur se realizeaz foarte rapid,

temperatura crescnd cu 5C n aproximativ 6 minute, pe cnd la HA pur este de 3C n 6
minute.
Fig. 3.30 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru MgHA 2% sinterizat la 1250C
112

Fig. 3.31 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru MgHA 5% sinterizat la 1250C
Pentru MgHA 5% temperatura variaza similar ca i n cazul celorlalte compoziii de HA

dopat, cu aproximativ 5C n 6 minute.
La eantionul de MgHA 5% crud studiat evoluia temperaturii n timp este asemntoare cu
cea a probelor sinterizate, aceasta variind cu 5C n 6 minute.
Fig. 3.32 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru MgHA 5% crud
113

Fig. 3.33 Evoluia temperaturii pe aria examinat pentru toate eantioanele comparate
Studiind graficele comparate ale diferitelor compoziii putem vedea cum fiecare pornete
de la o temperatur diferit n funcie de rcirea realizat in frigider, i de asemenea putem
observa c n cazul HA i MgHA 5% crud apar mai multe fluctuaii de temperatur i se distinge
clar domeniul de palier. Eantioanele MgHA sinterizare realizeaza un schimb constant de
temperatura si acestea se i adapteaza temperaturii mediului nconjurator mai repede.
114

4.5 Formarea unei aplicaii de implant osos

Pentru a exemplifica una din aplicaiile acestor produse a fost realizat un implant vertebral
din hidroxiapatit dopat cu 1% magneziu cu ajutorul unui mulaj de ghips. Acest tip de implant
osos se utilizeaz n cazul cage-urilor de fuziune spinal cu miez de substitut osos pentru a
favoriza procesul de vindecare i pentru a elimina neplcerile cauzate de autogrefe [190].
Aceste tipuri de implanturi se pot realiza att dense ct i cu structura macroporoas cu
ajutorul bilelor de PMMA (polimetimetacrilat). Acest material se amestec cu produsul sintetizat i
se toarn n mulaje care se ncalzesc n cuptor pentru a elimina scheletul format din bile,
rmnnd doar golurile controlate care stimuleaza osteointegrarea.
Pentru formarea implantului
se ncepe de la un mulaj metalic realizat pe o main cu
comand numeric i n funcie de ce tip de implant se dorete, avem dou posibiliti:

a.
Dac se dorete obinerea unui implant dens se realizeaz un mulaj de ghips pornind
de la mulajul metalic i se creeaz o barbotin de MgHA 1% care se toarn n acesta;

b.
Pentru obinerea unui implant macroporos mai inti trebuie obinut stuctura organic
i de abia ulterior se adaug barbotina de MgHA i se trateaz termic pentru eliminarea bilelor de
PMMA care las goluri sub form sferic cu diametrul de 500-600 m.
Figura 3. 3 Mulaj de ghips pentru

turnarea implanturilor osoase
Figura 3. 34 Mulaj metalic pentru

implant osos
Figura 3. 36 Implant dens realizat din

MgHA 1%
115
Figura 3. 37 Suportul organic din bile de

PMMA pentru implanturile macroporoase

Figura 3. 38 Structur macroporoas obinut cu

ajutorul bilelor de PMMA
116

5. Concluzii i contribuii personale
117

5.1 Concluzii
A. Sinteza prin precipitare
Avantajele cele mai importante ale acestei metode sunt urmtoarele:
Parametrii pot fi modificai independent unul de cellalt;
Asigur o siguran mai mare a sintezei;
Pudra obinut este nanometric;
Se pot ncorpora cantiti semnificative de dopani la nivelul matricii cristaline;
Se pot obine cantiti importante de produs n funcie de dimensiunea bioreactorului
utilizat.
Temperatura de sintez a fost variat pentru a vedea efectul acesteia asupra pudrelor,
rezultnd c aceasta nu schimb compoziia produsului final.
Varierea stoechiometriei pentru HA a fost realizat printr-un deficit de Ca care a rezultat n
apariia unei HA-TCP bifazice care poate avea proprieti de osteointegrare mai bune datorit
resorbiei treptate a TCP-ului care permite osului s creasc n locul acestuia.
B. Posibilitile de dopaj
Motivaia pentru alegearea magneziului are legtur i cu faptul c acesta este un element
chimic care se regsete i la nivelul osului natural i stabilizeaz termic beta TCP-ul evitnd
formarea alfa TCP-ului i apariia aluminailor n compozitele HA-Al2O3.
n acelai timp exist numeroase studii care indic mbuntire proprietilor mecanice
prin acest dopaj [124, 141, 143].
Prin metoda de sintez aleas, magneziul poate fi ncorporat n structura cristalin a
hidroxiapatitei.
C. De ce am lucrat cu barbotine
Putem obine o densitate crud mai bun raportat la probele obinute prin presare
uniaxial s-au realizat barbotine cu pn la 70% coninut de materie uscat. Se pot obine bune
densiti crude de aproximativ 35-45%.
Se pot fabrica forme complexe: discul intervertebral, oasele craniuliu etc. Cantitatea
de
materie uscat foarte ridicat de 70% s-a obinut prin mcinarea pudrei n avans n dispozitivul de
polipropilen cu bilele de alumin n interior, deoarece n urma calcinrii grunii sunt aglomerai i
nu se pot utiliza n barbotin nc.
Au aprut modificri n cazul HA dopate n realizarea barbotinei deoarece cantitatea de
materie uscat total ncorporat a fost mai sczut i cu materialul de MgHA 10 % nu s-a putut
realiza barbotina din cauza densitii sczute a acestuia, fapt ce nu permite ncorporarea de
cantiti semnificative n barbotin.
118

D. Materiale bifazice cu alumin
Pentru a mbuntii proprietile mecanice ale hidroxiapatitei pentru aplicaii n care apar
eforturi ciclice este nevoie de un material de dopaj sau de un material bifazic pe baz de HA.
Deoarece alumina este un biomaterial inert care este utilizat deja n implantologie.
E. Realizarea unei aplicaii de implant
Pentru a exemplifica una din aplicaiile acestor produse a fost realizat un implant vertebral
din hidroxiapatit dopat cu 1% magneziu cu ajutorul unui mulaj de ghips.
Aceste tipuri de implanturi se pot realiza att dense ct i cu structur macroporoas, cu
ajutorul bilelor de PMMA.
Concluzie general
Ca i concluzie general putem spune c pudra de hidroxiapatit i hidroxiapatit dopat,
au fost sintetizate prin metoda precipitaiei apoase i c hidroxiapatita a fost dopat cu diferite
cantiti de magneziu (1%, 2%, 5% i 10%). Aceast metod de sintez a hidroxiapatitei permite
un control al parametrilor (stoechiometria reactivilor, temperatura, viteza de rotaie, i pH) mai
bun i o bun reproductibilitate.
Efectul doprii cu magneziu a fost studiat prin:
-
Difracie cu raze X pentru pudrele calcinate la 900C;
Morfologia a fost observat cu ajutorul microscopului electronic cu baleiaj;
Densitile au fost msurate i comparate prin metoda calculului volumului i masei;
Au fost realizate teste de citotoxicitate pe liniile osteoblastice;
S-au msurat caracteristicile mecanice ale eantioanelor turnate i densificate prin
sinterizare la temperaturi nalte.

Pentru pudrele cu magneziu n cantiti mai mari a fost evideniat prin difractometrie cu
raze X prezena TCP-ului care nu afecteaz negativ biocompatibilitatea, dimpotriv poate permite
o mai bun osteointegrare, deoarece acesta este resorbabil i permite osului natural creterea n
legatur strns cu implantul, fr s dispar prea repede, deoarece suportul de hidroxiapatit
rmne pentru a asigura stabilitate.
Pentru concentraia de 1 wt% magneziu nu a fost identificat nicio faz secundar.
Un alt aspect al creterii cantitii de dopant se observ i n densitatea eantioanelor
realizate i sinterizate sau crude, aceasta scade direct proporional cu cretearea cantitii de
magneziu, astfel pentru MgHA 10% nu au putut fi realizate eantioane, deoarece pudra nu a putut
fi pus sub form de barbotin.
Etapa urmtoare a constat n studiul pudrelor de hidroxiapatit dopate pentru evaluarea
proprietilor mecanice i biologice. Pentru a putea realiza aceste teste, hidroxiapatita a fost pus
n form pe cale lichid cu ajutorul unei barbotine. Aceast metod de formare a eantioanelor
solide de hidroxiapatit este adesea utilizat pentru concepia implanturilor osoase macroporoase
utilizate pentru osteointegrare. n prealabil, pudrele obinute, au fost calcinate la 900C timp de o
119

or i mcinate timp de 3 ore pentru spargerea aglomerailor formai n urma tratamentului

termic.
nainte de formarea eantioanelor de hidroxiapatit solide, pudra a fost testat la
citotoxicitate cu linia celular de osteoblaste MC3T3-E1. n urma acestei examinri a fost
evideniat biocompatibilitatea produselor sintetizate, dar exist o diminuare a proliferrii celulare
n cazul eantioanelor care conin cantiti mari de magneziu (10%). Dimpotriv, n cazul
hidroxiapatitei dopate cu 1% magneziu, se observ o cretere a numrului de celule proliferate
fa de hidroxiapatita pur, acest lucru indicnd o mbuntire a biocompatibilitii la doparea cu
cantiti mici de magneziu.
Pudrele sunt puse n suspensie apoas, barbotina astfel preparat prezint un coninut de
materie uscat de 60-70%. Dup turnarea amestecului n mulaje, acestea se las la uscat o or i
se demuleaz, ulterior fiind tratate termic prin sinterizare la 1250C i 1350C.
Finalitatea acestui studiu este de a studia proprietile mecanice ale diferitelor compoziii
pentru a determina combinaia ideal care nu afecteaz negativ proprietile biologice.
Eantioanele solide realizate din MgHA 5% au creat dificulti la punerea n form i
acestea se manifest i n proprietile mecanice sczute.
Densitatea eantioanelor realizate este invers proporional cu procentajul de Mg2+
ncorporat.
Microduritatea Vickers este cea mai bun n cazul eantioanelor cu 1% Mg i 2% Mg
sinterizate la 1350C.
Modulul de elasticitate cel mai mare l are MgHA 2% sinterizat la 1350C, cel al MgHA 1%
fiind i el superior HA.
Din analiza termografic putem observa un anumit grad de neomogenitate n structura
MgHA 5% care se poate datora i barbotinei cu coninut insuficient de materie uscat. De
asemenea, eantioanele de MgHA sinterizate ating mai repede un nivel de prag al temperaturii
dect celelalte compoziii, datorit schimbului mai rapid de temperatur cu mediul ambiant.
Deoarece combinaia dintre proprietile biologice i cele mecanice este cea mai bun n
cazul MgHA 1% aceasta a fost utilizat pentru realizarea implantului osos
n ultima etap a fost creat o aplicaie din pudr MgHA 1% sub forma unui implant
vertebral cu ajutorul unor mulaje metalice i din ghips.
120

5.2 Contribuii personale

Principalele contribuii personale obinute n cadrul tezei de doctorat sunt:
1. Realizarea unei analize bibliografice extinse asupra biomaterialelor, hidroxiapatitei i a

magneziului ca i dopant. Clasificarea principalelor tipuri de biomateriale i prezentarea mai
amnunit a bioceramicelor i hidroxiapatitei.
2. Adaptarea echipamentului de sintez a hidroxiapatitei pentru integrarea rotorului paletei de
mixare n bioreactor cu ajutorul unui suport realizat cu echipamente CNC. Adugarea unei
pompe peristaltice instalaiei de sintez pentru incorporarea lent a amestecului de fosfat.
3. Realizarea sintezei de hidroxiapatit prin precipitare apoas la temperatur sczut pentru o
mai mare siguran n desfurarea experimentelor.
4. ncorporarea de magneziu ca i dopant n timpul sintezei i n cantiti de la 1% pn la 10%,
dei studiile anterioare au utilizat doar cantiti de pn la 2%.
5. Realizarea unui sistem de filtrare a precipitatului obinut n urma maturrii n bioreactor.
6. Conceperea unui sistem de formare al eantioanelor solide pe baza unor mulaje din ghips.
Acestea sunt turnate n laborator i sunt realizate locauri pentru eantioane cu ajutorul unei
maini de gurit.
7. Realizarea unui ciclu n trepte de sinterizare a probelor pentru eliminarea tensiunilor reziduale
i stabilizarea cuptorului.
8. Combinarea pudrei de hidroxiapatit sintetizat cu alumin comercial n vederea realizrii
unui material compozit.
9. Simularea condiiilor fiziologice prin imersarea eantioanelor n fluid biologic simulat n
vederea studierii evoluiei proprietilor mecanice.
10. Determinarea microduritii Vickers pentru eantioane sinterizate i pentru eantioane
imersate n fluid biologic simulat timp de 30 de zile.
11. Determinarea modulului de elasticitate pentru eantioane sinterizate i pentru eantioane
imersate n fluid biologic simulat timp de 30 de zile, prin metoda testrii la compresiune.
12. Determinarea modulului de elasticitate pentru eantioane sinterizate i pentru eantioane
imersate n fluid biologic simulat timp de 30 de zile, prin metoda vibraiilor libere.
13. Analiza eantioanelor cu ajutorul unui echipament termografic n vederea studierii variaiei de
temperatur n funcie de compoziie.
14. Realizarea unui implant osos de fuziune vertebral din MgHA 1%, care a fost considerat optim
deoarece combin proprieti biologice foarte bune cu proprieti mecanice mai crescute
dect ale HA pure.
121

Perspective de viitor
Aceste teste asupra materialelor sintetizate se pot continua utiliznd o mai mare varietate
de parametrii de tratament termic i de realizare a eantioanelor solide, precum i prin realizarea
unor forme mai complexe.
Testele mecanice pot fi realizate n condiii diverse i de asemenea se pot realiza teste de
oboseal pentru studiul influenei eforturilor ciclice asupra structurii.
Avnd n vedere c exist posibilitatea de a obine implanturi macroporoase, acestea se
pot testa mecanic pentru studiul influenei gradului de porozitate asupra modulului de elasticitate
i a celorlalte proprieti.
Aceste materiale se pot combina cu alte ceramici, metale sau polimeri n vederea obinerii
unui material compozit cu proprieti mecanice sau bilogice superioare.
122
Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n vederea
6. Bibliografie
123
1.
2nd Consensus Conference on Biomaterials, Chester (UK), 7-8 September 1991
2.
D.F. Williams, The Williams Dictionnary of Biomaterials, Liverpool University Press, Liverpool,
1999
3.
H.J. Breme, V. Biehl, J.A. Helsen, Metals and implants, in: J.A. Helsen,H.J. Breme (Eds.),
Metals as Biomaterials, John Wiley & Sons Ltd,Chichester, 1998, pp. 3771
4.
X.Y. Liu, P.K. Chu, C.X. Ding, Mater. Sci. Eng. R 47 (2004) 49121
5.
P. Tengvall, I. Lundstrom, Clin. Mater. 9 (1992) 115134
6.
Williams, D. F. (1982). Biocompatibliity in Clinical Practice (Boca Raton, FL: CRC Press)
7.
Francine Monchau, Elaboration et caractrisations physico-chimiques et biologiques de

biocramiques utilises comme substituts osseux, thse de doctorat d'universit, Universit de
Lille 2, oct. 2001
8.
American society for Testing and Materials, F139-86, p.61, 1992
9.
American Society for Testing and Materials, F75-87, F90-87, F562-84, 1992
10. Granchi,
D., Ciapetti, G., Savarino, L., Cavedagna, D., Donati, M. E., and Pizzoferrato, A.
(1996). Assessment of metal extract toxicity on human lymphocytes cultured in vitro. J.

Biomed. Mater. Res. 31, 183191
11. Schmalzried,
T. P., Peters, P. C., Maurer, B. T., Bragdon, C. R., and Harris, W. H. (1996).
Long-duration metal-on-metal total hip arthroplasties with low wear of the articulating
surfaces. J. Arthroplasty 11, 322331
12. Hazan,
R., Brener, R., and Oron, U. (1993). Bone growth to metal implants is regulated by
their surface chemical properties. Biomaterials 14, 570574;
13. Kasemo,
B. and Lausma, J. (1988). Biomaterial and implant surface: a surface science
approach. Int. J. Oral Maxillofac Impl. 3, 247259
14. American Scociety for Testing and Materials, F67-89, F136-84, 1992
15. Comte,
T. W. 1984. Metallurgical observations of biomaterials, in Contemporary Biomaterials,
Boretos, J. W. and Eden, M., Eds, Noyes, Park Ridge, NJ
16. Wynblatt,
P. (1986). Platinum Group Metals and Alloys. In: Encyclopedia of Materials Science
and Engineering, M. B. Bever, Ed. (Oxford, Cambridge: Pergamon Press), pp. 35763579
17. Smith,
W. F. (1993). Structure and Properties of Engineering Alloys, 2nd ed. (New York:
McGraw-Hill)
18. B.
Basu, D.S. Katti, A. Kumar, Advanced Biomaterials, American Ceramic Society, Wiley and
Sons, Hoboken, New Jersey, 2009
19. Biomateriale
si
biocompatibilitatea
acestora
cu
organismul
uman,
http://www.scribd.com/doc/41463101/Biomateriale-Si-tea-Acestora-Cu-Organismul-Uman
20. Buddy D. Ratner et al, Biomedical Engineering desk reference, Elsevier Academic Press, 2009
124
21. M.A.
Meyers, P.Y. Chen, A.Y.M. Lin, Y. Seki, Biological Materials: Structure and Mechanical
Properties, Prog. Mater. Sci. 53 (2008) 1206
22. J.B.
Park, J.D. Bronzino, Biomaterials Principles and Applications, CRC Press, Taylor & Francis
Group, Boca Raton, Florida, 2003
23. Sperling,
L.H. (1992). Introduction to Physical Polymer Science, 2nd ed. Wiley-Interscience,
New York
24. Black,
J., and Hastings, G. (1998). Handbook of Biomaterial Properties. Chapman and Hall,
London
25. P.
Ducheyne, G.W. Hastings (editors) (1984) CRC metal and ceramic biomaterials vol 1 ISBN
0-8493-6261-x
26. J.F. Shackelford (editor)(1999) MSF bioceramics applications of ceramic and glass materials in
medicine ISBN 0-87849-822-2
27. Park JB and Lakes RS. 1992. BiomaterialsAn Introduction, 2nd ed., Plenum Press, New York
28. Yasko,
A., Fellinger, E., Waller, S., Tomin, A., Peterson, M., Wang, E., and Lane, J. (1992),
Comparison of biological and synthetic carriers for recombinant human BMP induced bone
formation. Trans. Orth. Res. Soc. 17: 71
29. Daniels,
A. U., Melissa, K. O., and Andriano, K. P. (1990). Mechanical properties of
biodegradable polymers and composites proposed for internal fixation of bone. J. Appl.
Biomater. 1(1): 5778
30. Gershon, B., Cohn, D., and Marom, G. (1992). Compliance and ultimate strength of composite
arterial prostheses. Biomaterials 13: 3843
31. Veerabagu,
S., Fujihara, K., Dasari, G. R., and Ramakrishna, S. (2003). Strain distribution
analysis of braided composite bone plates. Composites Sci. Technol. 61: 427435
32. Dawson,
D. K. (2000). Medical devices. in Comprehensive Composite Materials, Vol. 6, A.
Kelly, ed. Elsevier, pp. 132
33. Advanced
biomaterials for skeletal tissue regeneration: Instructive and smart functions F.
Barre`re, T.A. Mahmood, K. de Groot, C.A. van Blitterswijk, Materials Science and Engineering
R 59 (2008) 3871
34. K.A. Athanasiou, C. Zhu, D.R. Lanctot, C.M. Agrawal, X.Wang, Tissue Eng. 6 (2000) 361381
35. Grays Anatomy
36. Wolff,
J. 1986. The Law of Bone Remodeling, R. Maquet and R. Furlong (trans.), Springer-
Verlag, Berlin
37. Brighton,
C.T. 1984. Principle of fracture healing, In Instructional Course Lectures, J. Murray
(Ed.), pp. 60106, The American Academy of Orthopaedic Surgeons
125
38. Lothar
Thomas. Enzymes. In Clinical Laboratory Diagnostics-Use and Assessment of Clinical
Laboratory Results. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt /Main, Germany, 1 Ed.,

1998, 36-45
39. Richard
A. McPetersen, Matthew R. Pincus. Biochemical Markers of Bone Metabolism. Clinical
Enzymology. In Henrys Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods Sauders

Elsevier 21-Ed 2007, 181, 255-257
40. Wintermantel
E, Mayer J, Ruffieux K, et al. Biomaterials, human tolerance and integration.
Chirurgie. 1999;70:847-857
41. Williams,
D. F. (1998). General concepts of biocompatibility, Handbook of Biomaterial
Properties, J. Black, and G. Hastings, eds. Chapman and Hall, London, pp. 481489
42. Hummel, R.E. (1997). Understanding Materials Science. Springer-Verlag, New York
43. Newey,
C., and Weaver, G. (1990). Materials Principals and Practice. Butterworth-Heinemann
Ltd., Oxford, UK
44. Hench, L.L. Bioceramics. J. Am. Ceram. Soc. 1998, 81, 1705-1728.
45. Hench, L.L. Bioceramics: From concept to clinic. J. Am. Ceram. Soc. 1991, 74, 1487-1510.
46. Cao, W.; Hench, L.L. Bioactive materials. Ceram. Int. 1996, 22, 493-507.
47. Pinchuk, N.D.;
Ivanchenko, L.A. Making calcium phosphate biomaterials. Powder Metall. Metal
Ceram. 2003, 42, 357-371.
48. Heimann,
R.B. Materials science of crystalline bioceramics: A review of basic properties and
applications. CMU J. 2002, 1, 23-46.
49. Dorozhkin, S.V. Bioceramics based
on calcium orthophosphates. Glass Ceram. 2007, 64, 442-
447.
50. Salinas,
A.J.; Vallet-Reg, M. Evolution of ceramics with medical applications. Z. Anorg. Allg.
Chem. 2007, 633, 1762-1773.
51. Tomoda,
K.; Ariizumi, H.; Nakaji, T.; Makino, K. Hydroxyapatite particles as drug carriers for
proteins. Colloids Surf. B Biointerfaces 2010, 76, 226-235.
52. Huebsch
N.; Mooney, D.J. Inspiration and application in the evolution of biomaterials. Nature
2009, 462, 426-432.
53. Ring,
M.E. Dentistry: An Illustrated History; Harry, N., Ed.; Abrams: New York, NY, USA,
1992; p. 320.
54. Bobbio,
A. The first endosseous alloplastic implant in the history of man. Bull. Hist. Dent.
1970, 20, 1-6.
55. Lowenstam,
H.A.; Weiner, S. On Biomineralization; Oxford University Press: Oxford, UK,
1989; p. 324.
56. Weiner,
S.; Wagner, H.D. Material bone: Structure-mechanical function relations. Ann. Rev.
Mater. Sci. 1998, 28, 271-298.
126
57. LeGeros,
R.Z. Calcium Phosphates in Oral Biology and Medicine; Karger: Basel, Switzerland,
1991; p. 108, 201.
58. Weiner,
S.; Dove, P.M. An overview of biomineralization processes and the problem of the
vital effect. In Biomineralization, Series: Reviews in Mineralogy and Geochemistry; Dove, P.M.,
De Yoreo, J.J., Weiner, S., Eds.; Mineralogical Society of America: Washington, DC, USA,
2003; Volume 54, pp. 1-29.
59. Weiner,
S.; Traub, W.; Wagner, H.D. Lamellar bone: Structure-function relations. J. Struct.
Biol. 1999, 126, 241-255.
60. Albee,
F.H. Studies in bone growth: Triple calcium phosphate as a stimulus to osteogenesis.
Ann. Surg. 1920, 71, 32-39.
61. Ray,
R.D.; Ward, A.A., Jr. A preliminary report on studies of basic calcium phosphate in bone
replacement. Surg. Form. 1951, 3, 429-434.
62. Nery, E.B.; Lynch, K.L.; Hirthe W.M.; Mueller; K.H. Bioceramic implants in surgically
produced
infrabony defects. J. Periodontol. 1975, 46, 328-347.
63. Denissen,
H.W.; De Groot, K. Immediate dental root implants from synthetic dense calcium
hydroxylapatite. J. Prosthet. Dent. 1979, 42, 551-556.
64. Blakeslee,
K.C.;
Condrate,
R.A.,
Sr.
Vibrational
spectra
of
hydrothermally
prepared
hydroxyapatites. J. Am. Ceram. Soc. 1971, 54, 559-563.
65. Garrington,
G.E.; Lightbody, P.M. Bioceramics and dentistry. J. Biomed. Mater. Res. 1972, 6,
333-343.
66. Cini,
L.; Sandrolini, S.; Paltrinieri, M.; Pizzoferrato, A.; Trentani, C. Materiali bioceramici in
funzione sostitutiva. Nota preventiva. (Bioceramic materials for replacement purposes.

Preliminary note). Chir. Organi Mov. 1972, 60, 423-430.
67. Rivault,
M.A. Evolution, conception et technologie des travaux de prothse fixe, raliss en
cramo-mtallique. (Evolution, conception and technology of fixed prosthesis made of ceramic

and metal). Rev. Fr. Odontostomatol. 1966, 13, 1367-1402.
68. Hench, L.L.; Splinter, R.J.; Allen, W.C.; Greenlee, T.K. Bonding mechanisms at the interface of
ceramic prosthetic materials. J. Biomed. Mater. Res. 1971, 2, 117-141.
69. Jarcho,
M.; Bolen, C.H.; Thomas, M.B.; Bobick, J.; Kay, J.F. Doremus, R.H. Hydroxylapatite
synthesis and characterization in dense polycrystalline form. J. Mater. Sci. 1976, 11, 20272035
70. Jarcho,
M. Calcium phosphate ceramics as hard tissue prosthetics. Clin. Orthop. Rel. Res.
1981, 157, 259-278
71. De
Groot, K, Bioceramics of Calcium Phosphate; Ed.; CRC Press: Boca Raton, FL, USA, 1983;
p. 146.
72. De Groot, K. Bioceramics consisting of calcium phosphate salts. Biomaterials 1980, 1, 47-50.
127
73. Rejda, B.V.; Peelen, J.G.J.; De Groot, K. Tricalcium phosphate as a bone substitute.
J. Bioeng.
1977, 1, 93-97.
74. Aoki,
H.; Kato, K.M.; Ogiso, M.; Tabata, T. Studies on the application of apatite to dental
materials. J. Dent. Eng. 1977, 18, 86-89.
75. Akao,
M.; Aoki, H.; Kato, K.; Sato, A. Dense polycrystalline -tricalcium phosphate for
prosthetic applications. J. Mater. Sci. 1982, 17, 343-346.
76. Roy,
D.M.; Linnehan, S.K. Hydroxyapatite formed from coral skeletal carbonate by
hydrothermal exchange. Nature 1974, 247, 220-222.
77. Elsinger,
E.C.; Leal, L. Coralline hydroxyapatite bone graft substitutes. J. Foot Ankle Surg.
1996, 35, 396-399.
78. Shipman,
P.; Foster, G.; Schoeninger, M. Burnt bones and teeth: An experimental study of
color, morphology, crystal structure and shrinkage. J. Archaeol. Sci. 1984, 11, 307-325.
79. LeGeros,
R.Z. LeGeros, J.P. Calcium phosphate bioceramics: Past, present, future. Key Eng.
Mater. 2003, 240-242, 3-10.
80. Ducheyne,
P.; Qiu, Q. Bioactive ceramics: The effect of surface reactivity on bone formation
and bone cell function. Biomaterials 1999, 20, 2287-2303.
81. Bohner, M. Resorbable biomaterials as bone graft substitutes. Mater. Today 2010, 13, 24-30.
82.
LeGeros RZ (2002) Properties of osteoconductive biomaterials: calcium phosphates, Clin.

Ortho. 395:81-98.
83. Davy DT (1999) Biomechanical issues in bone transplantation,
Ortho. Clin. North Am. 30:553-
563
84. BohnerM
(2000) Calcium orthophosphates in medicine: from ceramics to calcium phosphate
cements, Injury 31:37^17.
85. Cornell CN (1999) Osteoconductive materials and their role as substitutes for autogenous bone
grafts, Ortho. Clin. North Am. 30:591-598.
86. Dorozhkin,
S.V. Calcium orthophosphates in nature, biology and medicine. Materials 2009, 2,
399-498.
87. Aziz
Nather, BONE GRAFTS AND BONE SUBSTITUTES, Basic Science and Clinical Applications,
World Scientific Publishing Co. Pte. Ltd., Singapore, 2005, 450
88. POSNER A.S. The mineral of bone. Clin. Orthop Relat Res, 1985, 200:87-89
89. Paul W. Brown, Brent Constantz - Hydroxyapatite and related materials, 1994, CRC Press
90. L.L.
Hench, EC Ethridge, Biomaterials: An interfacial Approach, Academic press, New York,
1982
91. R.Z. Legeros, Apatites in biological systems, Prog. Cryst. Growth Charact. 4, 1981, 1-45
128
92. Queiroz AC, Santos JD, Monteiro
FJ, Gibson IR and Knowles JC (2001) Adsorption and release
studies of sodium ampicillin from hydroxyapatite and glass-reinforced hydroxyapatite

composites, Biomaterials 22:1393-1400.
93. Damien
E, Hing K, Saeed S and Revell PA (2003) A preliminary study on the enhancement of
the osteointegration of a novel synthetic hydroxyapatite scaffold in vivo, J. Biomed. Mater.

Res. 66A:241-24
94. Block
JE and Thorn MR (2000) Clinical indications of calcium-phosphate biomaterials and
related composites for orthopedic procedures, Calcif. Tissue Int. 66: 234-238
95. K.
De Groot, C. De Putter, P. Smith, A. Driessen, Mechanical failure of artificial teeth made of
dense calcium phosphate, Sci. Ceram. &&, 1981, 433-437
96. J.
Huaxia, P.M. Marquis, Sintering behaviour of Hydroxyapatite reinforced with 20% Al2O3, J.
Mater. Sci. 28, 1993, 1941-1945
97. Y.M.Kong, S. Kim, H.E. Kim, Reinforcement of hydroxyapatite bioceramics by addition of ZrO2
coated with Al2O3, J. Am. Ceram. Soc. 82, 1999, 2963-2968
98. R.
Ramachandra Rao, T.S. Kanaan, Synthesis and sintering of hydroxyapatite zirconia
composites, Mater. Sci. Eng., C 20, 2002, 187-193
99. Bauer
TW and Muschler GF (2000) Bone graft materials. An overview of the basic science,
Clin. Ortho. 371:10-27
100.
Fleming JE Jr., Cornell CN and Muschler GF (2000) Bone cells and matrices in
orthopedic tissue engineering, Ortho. Clin. North Am. 31:357-374.
101.
OShors EC (1999) Coralline bone graft substitutes, Ortho. Clin. North Am. 30: 599-
613.
102.
Kay M.I, Young R.A, Posner A.S, Crystal structure of hydroxyapatite, Nature, 204,
1050-1052, (1964)
103.
Young
R.A,
Some
aspects
of
crystal
structural
modeling
of
biological
apatites, Coll. Intern. CNRS, Paris, 230, 21-39, (1975)
104.
Legeros R.Z, Taheri M.H, Quirolgico G.B, Legeros J.P, Formation and stability of
apatites : effects of some cationic substituants, Intern. Cong. Phosphorus Compounds, Boston,
89-103, (1980)
105.
Rey C, Etude des relations entre apatites et composs molculaires, Thse dtat,
INPT, (1984)
106.
Holmes RE, Bucholz RW and Mooney V (1987) Porous hydroxyapatite as a bone graft
substitute in diaphyseal defects: A histometric study, J. Orthop. Res. 5:114-121
107.
Bucholz RW (2002) Nonallograft osteoconductive bone graft substitutes Clin. Ortho.
395:44-52.
129
108.
Hing KA, Damien E, Mclnnes T and Revell PA (2002) Biological evaluation of a
morphologically distinct porous hydroxyapatite bone graft substitute, in: Proc. of the European
Society for Biomaterials Confi, p. 150.
109.
Hasegawa M, Ohashi T, Tani T and Doi Y (2000) Proc. of the 13th Int. Symp. On
Ceramics in Medicine 13:453-457
110.
Patel N, Gibson IR, Hing KA, Best SM, Damien E, Revell PA and Bonfield W (2001b)
The in vivo response of phase pure hydroxyapatite and carbonate substituted hydroxyapatite
granules of varying size ranges, Bioceramics 14:383-386.
111.
Patel N, Gibson IR, Hing KA, Best SM, Damien E, Revell PA and Bonfield W (2002) A
comparative study on the in vivo behaviour of hydroxyapatite and silicon substituted

hydroxyapatite granules, /. Mater. Set Mater. Med. 13:1199-1206.
112.
Wallaeys R, Contribution ltude des apatites phosphocalciques , Ann. Chim. 7,
pp. 808-848, (1952)
113.
RABU B. Contribution ltude de lhydroxyapatite fritte, prparation et proprits du
composite particulaire Ca(PO4)3 OH-Ca2SiO4, Cration de micropores par frittage sous

pression. Thse, Universit de Mulhouse, 1986
114.
Hayek E., Newesely H., Pentacalcium monohydroxyorthophosphate-hydroxyapatite.
Inorg. Syntheses, vol.7, pp :63-65 (1963)
115.
Trombe J.C, Contribution ltude de la dcomposition et de la ractivit de certaines
apatites, Thse, Universit Paul-Sabatier Toulouse, (1972)
116.
Arends J., Christoffersen J., Christoffersen M.R., Eckert H., Fowler O., Heughebaert
J.C., Nancollas G.H., Yesinowski J.P., Zawacki S.J., a calcium hydroxyapatite precipitated from
aqueous solution-an international multimethod analysis. J.Crystal Growth, vol 84, pp. 515532, (1987)
117.
Osaka A., Miura Y., Takeuchi K., Asada M. et Takahashi K., Calcium apatite prepared
from calcium hydroxyde and orthophosphoric acid , J.Mater. Sci.Mat.Med., 2, pp.51-55,

(1991)
118.
Livage, Sanchez, journal of non-crystalline solides, 145(1992), 11-19, (1992)
119.
Guyton AC.Textbook of medical physiology, 8th ed. Philadelphia: W.B. Saunders
Company; 1991
120.
E. D. Beltran-Aguilar, L. K. Barker, M. T. Canto, B. A. Dye, B. F. Gooch, S. O. Griffin, J.
Hyman, F. Jaramillo, A. Kingman, R. Nowjack-Raymer, R. H. Selwitz, T. Wu, MMWR Surveill

Summ 54 (2005)
121.
C. Cooper, Osteoporos Int 9 Suppl 2 (1999) S2
122.
LeGeros, R.Z. Calcium phosphate-based osteoinductive materials. Chem. Rev. 2008,
108, 4742-4753
130
123.
Gibson
IR,
Best
SM
and
Bonfield
(1999a)
Chemical
characterization
of
siliconsubstituted hydroxyapatite, 7. Biomed. Mater. Res. 15:422-428
124.
Revell PA, Damien E, Zhang XS, Evans P and Howlett CR (2003) The effect of
magnesium ions on bone bonding to the hydroxyapatite coating on titanium alloy implants,
Bioceramics 16:447-450
125.
Thomas J.Webster, Elizabeth A.Massa-Schlueter, Jennifer L.Smith, Elliot B.Slamovich,
Osteoblast response to hydroxyapatite doped with divalent and trivalent cations, Biomaterials
25 (2004) 21112121
126.
Ergun C, Webster TJ, Bizios R, Doremus RH.Hydroxyl apatite with substituted
magnesium, zinc, cadmium, and yttrium I: structure and microstructure.J Biomed Mater Res
2002;59 30511.
127.
Gibson IR and Bonfield W (2002) Novel synthesis and characterisation of an ABtype
carbonate-substituted hydroxyapatite, J. Biomed. Mater. Res. 15:697-708
128.
S. Kannan, S.I. Vieira, S.M. Olhero, P.M.C. Torres, S. Pina, O.A.B. da Cruz e Silva,
J.M.F. Ferreira, Synthesis, mechanical
and
biological
characterization of ionic doped
carbonated hydroxyapatite/-tricalcium phosphate mixtures, Acta Biomaterialia 7 (2011)

18351843
129.
Elsie Damien and Peter A Revell, Enhancement of the Bioactivityof Orthopaedic
Biomaterials:Role of Growth Factors, IonSubstitution and Implant, BONE GRAFTS AND BONE
SUBSTITUTES, World Scientific Publishing Co. Pte. Ltd., Singapore, 2005, 481
130.
Webster TJ, Ergun C, Doremus RH, Bizios R.Hydroxyl apatite with substituted
magnesium, zinc, cadmium, and yttrium II: mechanisms of osteoblast adhesion.J Biomed
Mater Res 2002; 59:3127
131.
Ito A, Ojima K, Naito H, Ichinose N, Tateishi T.Preparation, solubility, and
cytocompatibility
of
zinc-releasing
calcium
phosphate
ceramics.J
Biomed
Mater
Res
2000;50:17883.
132.
Ito A, Kawamura H, Miyakawa S, Layrolle P, Aomori R, Tsutsumi S.Resorbab ility
reduction by the incorporation of zinc into tricalcium phosphate.Key Eng Mater 2001;192195:
199202.
133.
Hidaka S, Okamoto Y, Abe K, Miyazaki K.Effects of indium and iron ions on in vitro
calcium phosphate and crystallinity. J Biomed Mater Res 1996;31:118.
134.
Czesawa Paluszkiewicz, Anna Slsarczyk, Dawid Pijocha, Maciej Sitarz, Mirosaw
Bucko,Aneta Zima, Anna Chrscicka, Magorzata Lewandowska-Szumie, Synthesis, structural

properties and thermal stability of Mn-doped hydroxyapatite, Journal of Molecular Structure
976 (2010) 301309
131
135.
Zhang XS, Revell PA, Evans P, Tanner KE and Howlett CR (1998) Magnesium-ion
implantation of HA-coated implants enhances bone ingrowth in rabbits, Transac. Soc.

Biomaterials 21: p. 187
136.
Toba Y, Kajita Y, Masuyam R, Takada Y, Suzuki K and Aoe S (2000) Dietary
magnesium supplementation affects bone metabolism and dynamic strength of bone in

ovariectomised rats, /. Nutr. 130:216-220
137.
Serre CM, Papillard M, Chavassieux P, Voegel JC, Boivin G. Influence of magnesium
substitution on a collagen-apatite biomaterial on the production of a calcifying matrix by

human osteoblasts.J Biomed Mater Res 1998;42:62633.
138.
Gibson IR, Bonfield W. Preparation and characterization of magnesium/carbonate co-
substituted hydroxyapatites. J Mater Sci Mater Med 2002;13:68593.
139.
Fadeev, I. V., Shvorneva, L. I., Barinov, S. M. and Orlovskii, V. P., Synthesis and
structure of magnesium-substituted hydroxyapatite. Inorg. Mater., 2003, 39(9), 947950.
140.
Ilaria Cacciotti, Alessandra Bianco, Mariangela Lombardi, Laura Montanaro, Mg
substituted hydroxyapatite nanopowders: Synthesis, Thermal stability and sintering behaviour

, Journal of the European Ceramic Society 29 (2009)
141.
C.Y. Tan, K.L. Aw, W.H. Yeo, S. Ramesh, M. Hamdi and I. Sopyan, Influence of
Magnesium Doping in Hydroxyapatite ceramics in Biomed, 2008, pp.326-329
142.
Landi E, Tampieri A, Mattioli-Belmonte M, Celotti G, Sandri M, Gigante A, et al.
Biomimetic Mg- and MgCO3-substituted hydroxyapatites: synthesis, characterization and in

vitro behaviour. J Eur Ceram Soc 2006;26:2593e601
143.
Samar J. Kalita , Himesh A. Bhatt, Nanocrystalline hydroxyapatite doped with
magnesium and zinc: Synthesis and characterization, Materials Science and Engineering C 27
(2007) 837848
144.
Hyun-Seung Ryu, Kun Sun Hong, Deug Joong Kim et all, Magnesia-doped HA/-TCP
ceramics and evaluation of their biocompatibility, Biomaterials 25 (2004)
145.
Kim CH (1999) Experimental study of PDGF's effect on healing of the commercial
xenogeneic bone powders transplanted in the calvarial defect of the rat, Thesis, Dankook
University
146.
A.W. Paterson, R. Stevens, Preferred orientation of the transformed monoclinic phase
in fracture surfaces of Y-TZP ceramics, International Journal of High Technology Ceramics,

Volume 2, Issue 2, 1986, Pages 135142
147.
A. Rapacz-Kmita, A. Slosarczyk, Z. Paszkiewicz, Mechanical properties of HApZrO2
composites, Journal of the European Ceramic Society 26 (2006) 14811488
148.
2
149.
Buddy D. Ratner et al, Biomaterials science : an introduction to materials in medicine

nd
edition, Elsevier Academic Press, 2004

H.Ji, P.M. Marquis, Biomaterials 13-11, 1992, 744
132
150.
Hae-Won Kim, Young-Hag Koh, Seung-Beom Seo, Hyoun-Ee Kim, Properties of
fluoridated hydroxyapatitealumina biological composites densified with addition of CaF2,

Materials Science and Engineering C 23 (2003) 515521
151.
J. Li, B. Fartash, L. Herrnansson, Hydroxyapatite-alumina composites and bone-
bonding, Biomoterials 16 (1995) 417-422
152.
S. Kim; Y. Kong, I. Lee, H. Kim, J mater Sci, Mater Med, 13, 2002, 307
153.
M.B. Thomas, R.H. Doremus, 1981, 258
154.
Z. Evis, R.H. Doremus, A study od phase stability and mechanical properties of
hydroxylapatite-nanosize -alumina composites, Materials science and Engineering C27, 2007,

421-425
155.
Sung-Jin Kim,Hee-Gon Bang, Jun-Ho Song, Sang-Yeup Park, Effect of fluoride additive
on the mechanical properties of hydroxyapatite/alumina composites, Volume 35, Issue 4, May

2009, Pages 16471650
156.
Cryothermostat Unistat Tango Nuevo instructions manual, Huber G.m.b.H., Germany,
2007
157.
AFNOR, Designation NF S94-066, Determination quantitative du rapport Ca/P de
phosphate de calcium, AFNOR, Paris, 1998
158.
S. Raynaud, E. Champion, D. Bernache-Assolant and J. Laval, Determination of
calcium/phosphorus atomic ratio of calcium phosphate apatites using X-ray diffractometry in

J. Am. Ceram. Soc. 84, 2001, pp. 355-366.
159.
Khalil, K.A.; Kim, S.W.; Dharmaraj, N.; Kim, K.W.; Kim, H.Y. Novel mechanism to
improve toughness of the hydroxyapatite bioceramics using high-frequency induction heat

sintering. J. Mater. Proc. Technol. 2007, 187-188, 417-420.
160.
Landi, E.; Tampieri, A.; Celotti, G.; Sprio, S. Densification behaviour and mechanisms
of synthetic hydroxyapatites. J. Eur. Ceram. Soc. 2000, 20, 2377-2387
161.
Ruys, A.J.; Wei, M.; Sorrell, C.C.; Dickson, M.R.; Brandwood, A.; Milthorpe, B.K.
Sintering effect on the strength of hydroxyapatite. Biomaterials 1995, 16, 409-415
162.
Van Landuyt, P.; Li, F.; Keustermans, J.P.; Streydio, J.M.; Delannay, F.; Munting, E.
The influence of high sintering temperatures on the mechanical properties of hydroxylapatite.

J. Mater. Sci. Mater. Med. 1995, 6, 8-13
163.
Dorozhkina, E.I.; Dorozhkin, S.V. Mechanism of the solid-state transformation of a
calcium-deficient hydroxyapatite (CDHA) into biphasic calcium phosphate (BCP) at elevated

temperatures. Chem. Mater. 2002, 14, 4267-4272
164.
Li, Y.; Kong, F.; Weng, W. Preparation and characterization of novel biphasic calcium
phosphate powders (-TCP/HA) derived from carbonated amorphous calcium phosphates. J.

Biomed. Mater. Res. B Appl. Biomater. 2009, 89B, 508-517
133
165.
Mostafa, N.Y. Characterization, thermal stability and sintering of hydroxyapatite
powders prepared by different routes. Mater. Chem. Phys. 2005, 94, 333-341
166.
Suchanek, W.; Yashima, M.; Kakihana, M.; Yoshimura, M. Hydroxyapatite ceramics
with selected sintering additives. Biomaterials 1997, 18, 923-933
167.
Safronova, T.V.; Putlyaev, V.I.; Shekhirev, M.A.; Tretyakov, Y.D.; Kuznetsov, A.V.;
Belyakov, A.V. Densification additives for hydroxyapatite ceramics. J. Eur. Ceram. Soc. 2009,
29, 1925-1932
168.
Chen, S.; Wang, W.; Kono, H.; Sassa, K.; Asai, S. Abnormal grain growth of
hydroxyapatite ceramic sintered in a high magnetic field. J. Cryst. Growth 2010, 312, 323-326
169.
Brs,
E.,
Hardouin,
fondamentaux/Calcium
P.
Phosphate
Les
Matriaux
Materials.
en
Phosphate
Fundamentals;
de
Eds.;
Calcium.
Aspects
Sauramps
Medical:
Montpellier, France, 1998; p. 176
170.
Muralithran, G.; Ramesh, S. Effects of sintering temperature on the properties of
hydroxyapatite. Ceram. Int. 2000, 26, 221-230
171.
Suchanek, W.L.; Yoshimura, M. Processing and properties of hydroxyapatite-based
biomaterials for use as hard tissue replacement implants. J. Mater. Res. 1998, 13, 94-117
172.
Bernache-Assollant, D.; Ababou, A.; Champion, E.; Heughebaert, M. Sintering of
calcium phosphate hydroxyapatite Ca10(PO4)6(OH)2 I. Calcination and particle growth. J. Eur.

Ceram. Soc. 2003, 23, 229-241
173.
Ramesh, S.; Tan, C.Y.; Bhaduri, S.B.; Teng, W.D.; Sopyan I. Densification behaviour
of nanocrystalline hydroxyapatite bioceramics. J. Mater. Proc. Technol. 2008, 206, 221-230
174.
Kobayashi, S.; Kawai, W.; Wakayama, S. The effect of pressure during sintering on
the strength and the fracture toughness of hydroxyapatite ceramics. J. Mater. Sci. Mater. Med.
2006, 17, 1089-1093
175.
E. Lifshin, X-ray Characterization of Materials, Wiley VCH, NY, 1999
176.
H.P. Klug, L.E. Alexander, X-ray Diffraction Procedures for Polycrystalline and
Amorphous Materials, J. Wiley & Sons, USA, 1954
177.
J. Goldstein et al., Scanning Electron Microscopy and X-Ray Microanalysis, Kluwer
Academic/Plenum Publishers, New York 2003;
178.
S.L.
Flegler,
J.W.
Heckman,
Jr.,
K.L.
Klomparens,
Elektronenmikroskopie/
Grundlagen, Methoden, Anwendungen, Spektrum Akademischer Verlag Heidelberg; Berlin;

Oxford, 1995
179.
NORME ISO 10993-5/EN 30993-5, NF S 99-505 Evaluation biologique des dispositifs
mdicaux. Partie 5 : Essais concernant la cytotoxicit : Mthodes in vitro. AFNOR, 1994, 7 p.
180.
KODAMA H., AMAGAI Y., SUDO H., KASAI S.& YAMAMOTO S., Establishment of a
clonal osteogenic cell line from newborn mouse calvaria. J. Oral Biol., 23, 1981, 899-901
134
181.
DERUYTER L. Caractrisations physico-chimiques de surface de membranes utilises
pour la reconstruction osseuse guide. Diplme Ingnieur CNAM, Lille, 1999
182.
LINEZ-BATAILLON P., MONCHAU F., ANSELME K., BIGERELLE M., BEAUVILLAIN J-C.,
HILDEBRAND H.F. Adhsion de cellules osseuses et tats de surface des implants. Etude in
vitro de ladhsion dune ligne de cellules osseuses de souris (MC3T3-E1) sur des chantillons
de titane (TiAl6V4) de cinq rugosits diffrentes. Alpha Omga News, 41, 1998, 11-13
183.
Oyane A, Kim HM, Furuya T, Kokubo T, Miyazaki T, Nakamura T. Preparation and
assessment of revised simulated body fluids. J Biomed Mater Res A 2003;65:18895
184.
Gheorghe Bdru Proprietile materialelor metalice, 2007-2008
185.
ThermoVisionTM A40M Operators manual, 2004
186.
T. Ioanovici, G. Marginean, L.Bereteu, M.Toth-Tacu, Influence of TiO2 scaling on
corrosion resistance of titanium implants, Annals of the University of Oradea vol. VIII, pp.
1167-1172 (199), May 2010
187.
M.O. Ghiba, C. Sftescu-Jescu, D. Bugariu, T. Ioanovici, Design of a hip stem with
mesh structures, Proceedings of 5th International Conference on Applied Computational

Intelligence and Informatics SACI 2009, Timisoara, Romania, vol. 1, pp. 129-132, 28 29
May 2009
188.
T. Ioanovici, F. Monchau, Ph. Hivart, B. Genestie, L.Bereteu, H.F. Hildebrand,
Evaluation of a dense calcite ceramic as bone substitute, 24th European Conference

Biomaterials ESB2011, Dublin, Ireland, 4-8 September 2011
189.
T. Ioanovici, F. Monchau, K. Berdich, Ph. Hivart, M. Traisnel, L. Bereteu, Influence of
magnesium doping on synthesized hidroxyapatite using the wet precipitation method, 3 rd

International Conference on e-Health and Bioengineering EHB2011, Iasi, Romania, 24-26
November 2011
190.
Der-Yang Cho, Wuen-Yen Lee, Pon-Chun Sheu, Chun-Chung Chen, Cage containing a
biphasic calcium phosphate ceramic (Triosite) for the treatment of cervical spondylosis,
Surgical Neurology 63 (2005) 497 504
135

7. Anexe
136
ANEXA: Calculul modulului Young in Mathcad pentru

probele suspendate-liber
-1
-1
r := 1159 s
f 1 := 3297 s
f1 reprezinta pseudofrecventa
f frecventa naturala
r factorul de amortizare
este decrementul logaritmic
este rapotul de amortizare
E modulul lui Young
d grosimea probei
R raza discului
densitatea HA
coeficientul lui Poisson
N := 20000
Dt :=
4 p
2 p f1 N
i := 0 ..
j :=
N
2
+ 1 .. N
ti := i Dt
tj := j Dt
yj := exp(-r tj ) sin(2 p f1 tj )
xi := exp(-r ti ) sin(2 p f1 ti )
max( x) = 0.352
max(y)
d := ln
1
xi
z :=
yj
= 0.056
d + 4 p
0.5
0
- 0.5
-1
1 10
2 10
i ,j
-3
R := 6 10
d := 2. 10
s := 0.3
-3
f :=
1-z
3 kg
r := 2.1 10
3
Pentru proba MgHA 2% 1250 0C se obtine :
E :=
f1
f R r 1 - s
( .412 d)
= 3.977 10 Pa
ANEXA: Calculul modulului Young in Mathcad pentru probele

rezemate in centru
-1
-1
r := 1063 s
f 1 := 1785.4235s
f1 reprezinta pseudofrecventa
f frecventa naturala
r factorul de amortizare
este decrementul logaritmic
este rapotul de amortizare
E modulul lui Young
d grosimea probei
R raza discului
densitatea HA
coeficientul lui Poisson
N := 20000
Dt :=
4 p
2 p f1 N
i := 0 ..
j :=
N
2
+ 1 .. N
ti := i Dt
tj := j Dt
yj := exp(-r tj ) sin(2 p f1 tj )
xi := exp(-r ti ) sin(2 p f1 ti )
max( x) = 0.595
max(y)
d := ln
1
xi
z :=
yj
= 0.094
d + 4 p
0.5
0
- 0.5
-1
0
1 10
2 10
i ,j
-3
R := 6. 10
d := 2. 10
s := 0.3
-3
f :=
f1
1-z
3 kg
r := 2.1 10
3
Pentru proba MgHA 2% 1350 0C SBF sprijinita in central sau pe un

reazem se obtine pentru modulul lui Young urmatoarea valoare
f 2 R4 r (1 - s 2)
7
E1 :=
= 6.732 10 Pa
( .172 d)

Thèse Ioanovici

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Thèse Ioanovici

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit

dopat cu magneziu i cercetri asupra

Ing. Teodora Georgiana IOANOVICI

Ziua susinerii tezei: 23.03.2012

Teza de doctorat intitulat Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

2.2. Bioceramica ............................................................................................................ 32

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

3.1.4.2. Realizarea barbotinei .......................................................................................... 60

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

1.1 Introducere general

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Dopajul hidroxiapatitei a fost de asemenea studiat n ultimele decenii n vederea

1.2 Prezentarea capitolelor tezei

n partea de introducere s-a fcut o scurt trecere n revist a problematicii abordate n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

interacioneaz cu mediul intern al organismului uman.

s-a putut determina evoluia

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

2. Stadiul actual al cunoaterii

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

2.1. Biomateriale si aplicaiile acestora

o funcie a corpului [1].

O alt definiie care descrie succint conceptul de biomaterial este urmtoarea: un

biotehnologice, pentru vectori de diagnostic genetic, n acvacultura scoicilor sau pentru

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

osoase i proprieti de chimie a suprafeelor precum rezistena la degradare, oxidarea, coroziunea

2.1.1 Clasificarea biomaterialelor

Metale: oeluri inoxidabile, titan, aliaje de titan, aliaje cobalt-crom, etc.;

Polimeri: polietilen, silicon, unele materiale naturale, etc.;

Materiale compozite: polimeri consolidai cu ceramice, ceramice consolidate cu

Fiecare grup de biomateriale poate fi clasificat n funcie de aceste patru categorii.

Materiale bioactive: interacioneaz cu esuturile nconjurtoare i formeaz legturi

Materiale biodegradabile: se degradeaz sub aciunea unui agent biologic cum ar fi

Materiale bioresorbabile/bioabsobabile: resturile de material sunt ndeprtate de

Materiale bioerodabile: se erodeaz prin procese fizice i chimice (ex. poliortoester).

Alegerea materialului potrivit se face n concordan cu funciunea care se dorete s fie

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

nconjurtoare i se mpiedic astfel fenomenul de coroziune a titanului [5]. Totui, n pofida

materialelor biomimetice/bionice (materiale cu proprieti similare celor existente n organismele

2.1.1.1. Biomateriale metalice

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Fig. 1.1 - urub implantabil din oel inoxidabil productor

Structura cristalin poate fi de asemenea o caracteristic important n cazul dispozitivelor

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Tabel 1.2 Proprietile mecanice necesare pentru aliajele de CoCr [9]

Aliaje pe baz de Titan

Rezistena ridicat, greutatea sczut i rezistena deosebit la coroziune determin

Figura 1.3 uruburi dentare din titan productor Dentatus

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

2.1.1.2. Biomateriale polimerice

Figura 1.4 - Cup acetabular din UHMDPE productor Ortho Development

Printre dezavantajele polimerilor se numr rezistena lor inferioar metalelor sau

Contribuii la sinteza de hidroxiapatit dopat cu magneziu i cercetri asupra proprietilor mecanice n

Tabel 1.4 Aplicaii ale polimerilor [19], [20]

Polietilena, polivinil, policlorhidr, poliester, cauciuc siliconal,

Polietilen, polimetil, polimetacrilat,

Acid polilactic, acid poliglicoloc, polilactid, policoglicoide