Coloraia Gram este o coloraie compus folosit n microbiologie pentru

examenul microscopic al bacteriilor, care a permis clasificarea acestora n funcie de afinitatea

tinctorial a peretelui bacterian. Metoda a fost inventat de bacteriologul danez Hans Christian
Gram, n anul 1884.
Pricipiu: Colorantul bazic (violet de genian ) patrunde in celula bacterian fixat in prealabil i
reacioneaza cu componenii acizi din citoplasm care, dupa tratarea cu soluia Lugol (iodur de
potasiu), formeaz un complex stabil intracelular. Acest complex insolubil este specific bacteriilor
Gram pozitive ce nu se decoloreaz cu alcool aceton. Bacteriile Gram negative n care nu se
formeaza acest complex stabil se decoloreaza i trebuie recolorate cu alt colorant de contrast
(fuxina). Solutii necesare: Violet de gentiana, Soluie Lugol (rol de mordansant) , Alcool-aceton,
Fuxin diluat 1/10.
Tehnica: Se acopera frotiul cu soluie violet de genian i se ine 1 minut. Se indeparteaza
colorantul, se spal cu ap si se adaug soluia Lugol 1 minut. Se indeparteaza solu ia Lugol fr a
spla si se decoloreaza cu alcool aceton prin miscari ale lamei pana cand solu ia devine incolora
(depinde de grosimea preparatului dar in general 20 secunde). Se spal cu apa i se adaug fuxina
1 minut Spalare si uscare pe hartie filtru. Rezultat: bacteriile Gram pozitive apar colorate in albastruviolet iar cele Gram negative se coloreaz in roz pana la rosu. Cu termenul "Gram variabile" sunt
desemnate bacteriile cu perete de tip Gram pozitiv care n anumite condiii se coloreaz precum cele
Gram negative, cauzele acestui comportament nefiind inca bine cunoscute.