Sunteți pe pagina 1din 16

Capitolul 13

13
CICLUL CELULAR
Organismele vii sunt compuse din celule, a cror cretere
i diviziune necesit succesiunea programat a unor evenimente
i procese care formeaz ciclul celular. Unele din aceste procese
sunt continue, ca de exemplu sinteza proteinelor sau a lipidelor.
Altele, de exemplu sinteza ADN, din contra, sunt procese
discontinui i depind de procesul de diviziune celular. Fiecare
ciclu celular cuprinde dou perioade dinamic i calitativ
distincte: interfaza i mitoza (fig.13.1). Se accentueaz c
procesul multiplicrii celulare are la origine replicarea ADNului cromozomial, replicare care are loc n perioada interfazic
S.

Fig. 13.1. Etapele ciclului celular

203

Capitolul 13

Interfaza
Interfaza ocup cea mai mare parte din durata ciclului
celular (90%), constituie perioada n care celula desfoar o
susinut activitate biosintetic (sinteza de ADN, ARN,
proteine), asigurnd condiiile necesare realizrii diviziunii
celulare. In cadrul acestei etape au fost descrise trei perioade
distincte:
Perioada G1 perioada presintetic sau postmitotic, se
caracterizeaz prin:
- intensificarea transcripiei i a proteosintezei, procese
aproape blocate n perioada mitotic;
- decondensarea cromatinei proces important pentru
activarea transcripiei genelor;
- reorganizarea nucleolilor;
- cromozomii
sunt
monocromatidieni
i
se
caracterizeaz prin set diploid (2n = 2c).
Perioada S perioada sintetic, se caracterizeaz prin:
- replicarea semiconservativ asincron a moleculelor
de ADN;
- dublarea cantitatii de ADN ;
- cromozomi bicromatidieni (2n = 4c);
- sinteza simultan de proteine histone i nehistone
implicate n sinteza i compactizarea ADN;
- dublarea centriolilor (fig. 13.2).
Perioada G2 perioada postsintetic sau premitotic care
se caracterizeaz prin:
- transcripia i sinteza proteinelor cu aceeai
intensitate ca i n G1, asigurndu-se condiiile
necesare intrrii celulei n mitoz.

204

Capitolul 13

Mitoza i citochineza
Diviziunea celular debuteaz prin diviziunea nuclear
sau mitoza, se ncheie cu diviziunea citoplasmei sau
citochineza.
Mitoza i citochineza ocup o scurt perioad de timp
(10%) din durata desfurrii ciclului celular, numit perioada
mitotic (M). Mitoza, odat declanat, este un proces continuu.
Dar pentru studiu i descriere, a fost mprit n patru etape:
profaza, metafaza, anafaza i telofaza.
Profaza. Se caracterizeaz prin prezena n nucleu a
cromozomilor bicromatidieni (2n=4c). Aceste cromatide, unite
la nivelul centromerului, reprezint imaginea citologic a
procesului chimic de replicare a ADN-ului. Cromozomii se
condenseaz puternic, se ngroa i devin vizibili. Pe ambele
pri ale centromerilor se maturizeaz cte un kinetocor. La
sfritul profazei nucleolul dispare iar membrana nuclear
disociaz. Concomitent se organizeaz aparatul de diviziune:
centriolii se deplaseaz spre polii opui ai celulei, se formeaz
fusul de diviziune prin asamblarea microtubulilor.

Fig. 13.2. Ciclul centriolilor

205

Capitolul 13

Metafaza. Firele fusului de diviziune unesc centriolii i


cromozomii prin intermediul kinetocorilor. Cromozomii sunt
dispui n plan ecuatorial, formnd placa ecuatorial. La aceast
faz cromozomii sunt maximal condensai i prezint forma
optim pentru studiul citologic.
Anafaza. ncepe prin clivarea longitudinal a
centromerului fiecrui cromozom, separarea celor dou
cromatide surori i migrarea lor simultan spre polii opui ai
celulei (fig. 13.3). La aceast faz cromozomii devin
monocromatidieni, iar celula are un set tetraploid de cromozomi
(4n = 4c).

Fig. 13.3. Mecanismul micrii filamentelor fusului de diviziune

Telofaza. n telofaz se ncheie migrarea cromozomilor


fii ctre polii celulei, fiecare pol coninnd 2n cromozomi
monocromatidieni (set diploid). ncepe decondensarea
progresiv a cromozomilor i revenirea la starea cromatinei
206

Capitolul 13

interfazice a materialului ereditar. Fibrele fusului acromatic


disociaz. Se reasambleaz membrana nuclear n jurul fiecrui
grup de cromozomi. Reapar nucleolii.
Citochineza definete fenomenul de diviziune, n care
are loc separarea masei citoplasmatice n dou jumti i a
organitelor citoplasmatice n cele dou celule. La celulele
animale diviziunea citoplasmatic se realizeaz prin clivare.
Fiecare celul fiic motenete n urma citochinezei un
set de componente celulare. Deoarece, cu excepia nucleului,
organitele celulare nu se pot duplica n absena unei copii
preexistente, n celula parental are loc dublarea constituenilor
celulari naintea declanrii citochinezei. Duplicarea organitelor
celulare se realizeaz prin mecanisme diferite. Mitocondriile
cresc i se divid prin fisiune semiautonom. Aparatul Golgi i RE
se fragmenteaz n vezicule din care vor fi constituite noile
organite celulare, n timp ce ribozomii se multiplic prin
asamblarea elementelor constituente (ARNr i proteine
ribozomale). Se apreciaz c celula nu dispune de un mecanism
specializat de distribuire a organitelor celulare, astfel nct
celulele fiice nu sunt identice dup coninutul citoplasmatic.
Totodat replicarea ADN n interfaz i mitoza asigur formarea
celulelor identice genetic att ntre ele ct i cu celula mam.
Diviziunea mitotic st la baza nmulirii celulelor
somatice, asigur creterea organismului pluricelular, determin
biomasa organismului i regenerarea esuturilor.
Reglarea ciclului celular
Durata ciclului celular este variabil n funcie de
specie i tip celular, ba chiar i pentru celulelr aceluiai esut.
Exist celule n organism care se divid foarte rapid, parcurgnd
ntregul ciclu celular n 8 ore, pe cnd altele se divid rar, cu
ciclul celular de 100 zile sau chiar mai mult. La eucariotele
207

Capitolul 13

superioare ciclul celular dureaz 10-25 ore, din care diviziunea


celular dureaz o or. Perioada G1 are durata cea mai variabil,
n timp ce perioada S este cea mai constant pentru un anumit
tip celular.
Dup ce au depit perioada G1, timpul necesar pentru
perioada S i G2, deci pn la nceputul diviziunii este foarte
constant pentru diferite celule. De acea s-a introdus noiunea de
punct de restricie (punct R) pentru momentul imediat, urmat
de sfritul perioadei G1, care trebuie depit pentru ca celula s
poat parcurge etapele urmtoare ale ciclului celular (fig. 13.4).
Un alt punct de restricie se afl spre sfritul perioadei
G2. Inhibarea sintezei proteinelor n aceast faz mpiedic
intrarea celulei n mitoz. Se consider c o proteinkinaz
solubil (o enzim ce catalizeaz fosforilarea proteinelor) este
activat spre sfritul perioadei G2 i acioneaz asupra
proteinelor din lamina nuclear i asupra histonelor H1.
Fosforilarea proteinelor din lamina nuclear induce
dezasamblarea nveliului nuclear, pe cnd fosforilarea
histonelor H1 produce condensarea cromozomilor, fenomen
caracteristic mitozei.
Reglarea succesiunii evenimentelor ciclului celular
Acurateea proceselor de replicare i segregare a ADN
depinde de succesiunea evenimentelor ciclului celular ntr-o
ordine strict, astfel nct, declanarea unui nou eveniment s
survin doar n urma ncheierii complete a evenimentului
precedent.
Exist mecanisme i factori reglatori, ce controleaz trei
evenimente cheie ale ciclului celular:
- iniierea sintezei ADN
este controlat de complexul
activator al perioadei S;

208

Capitolul 13

derularea replicrii materialului genetic nuclear este


controlat de alt factor semnal de ntrziere a perioadei
mitotice;
declanarea procesului mitotic, n care are loc segregarea
materialului genetic, este dirijat de factorul de activare a
mitozei (M-phase promoting factor: MPF).

Factorii de cretere
S-au descris mitogene specifice ca: eritropoietina,
factorii de cretere ai unor celule (nervilor, fibroblastelor),
poliamine (putrescina), hormoni (n special estrogenii). Exist i
factori tisulari, care inhib diviziunile celulare cum sunt
chalonele (peptide sau glicoproteine) (tab. 13.1).
Tabelul 13.1. Factorii de cretere i aciunea lor asupra
celulelor int

FACTORII DE CRETERE

ACIUNEA ASUPRA CELULELOR INT

Factorul de cretere
epidermal EGF
Factori de cretere de tip
insulinic IGF1, IGF2
Factorul de cretere a
fibroblatilor FGF
Factorul de cretere neuronal
NGF
INTERLEUKINA 2 IL2

Stimuleaz proliferarea mai multor tipuri


celulare
Stimuleaz proliferarea adipocitelor i a
celulelor din esutul conjunctiv
Stimuleaz proliferarea: fibroblatilor,
celulelor endoteliale i mioblatilor
Induce cretere axonal i viabilitatea
neuronilor simpatici i senzori
Stimuleaz proliferarea limfocitelor T
Stimuleaz proliferarea celulelor Stem i a
majoritii celulelor precursoare ale multor
celule difereniate
Stimuleaz proliferarea celulelor precursoare
ale eritrocitelor
Stimuleaz proliferarea: celulelor
precursoare ale macrofagelor i
granulocitelor, neutrofilelor

INTERLEUKINA 3 IL3
ERITROPOIETINA
Factori de stimulare a
coloniilor granulocitare GCSF
Factori de stimulare a
coloniilor de macrofage
M-CSF

Stimuleaz proliferarea celulelor precursoare


ale macrofagelor i granulocitelor
209

Capitolul 13

Competiia celulelor pentru factorii de cretere menine


constant densitatea populaiei celulare. n momentul n care
densitatea populaiei celulare depete o valoare prag,
concentraia factorilor de cretere scade i n consecin
diviziunea celular este oprit.
Ciclinele
Descoperirea ciclinelor i a protein-kinazelor
dependente de cicline (cdk) a permis interpretarea corect a
mecanismelor ce regleaz ciclul celular.
Ciclinele reprezint un grup restrns de proteine a cror
sintez se realizeaz ntr-un mod dependent de perioadele
ciclului celular. Ele activeaz cdk, formnd cu acestea complexe
ce prezint activitate kinazic. Pe parcursul formrii
complexelor, ciclinele induc modificri conformaionale i de
locaie a cdk ceea ce confer acestora specificitate n folosirea
diferitelor substraturi. Specificitatea activitii catalitice a
complexelor ciclina /cdk st la baza parcurgerii de ctre celul a
ciclului celular.
Evenimentele ce marcheaz intrarea celulei n perioada
mitotic sunt rezultatul fosforilrii directe sau indirecte a unor
proteine de ctre MPF. Prin fosforilarea laminelor nucleare,
MPF declaneaz dezorganizarea membranei nucleare.
Fosforilarea histonei H1, proces ce iniiaz condensarea
cromatinei, este catalizat de proteinkinaz, enzim activat prin
fosforilare de ctre MPF. Se consider c un mecanism indirect
similar de fosforilare st la baza asamblrii fusului de diviziune.
Ciclinele i protein-kinazele dependente de cicline constituie
componentele motorului ciclului celular (fig. 13.4).
Ciclinele se clasific n trei grupe (fig. 13.5):
1. ciclinele perioadei G1 ciclinele D i E;
2. ciclinele perioadei S ciclina A;
3. ciclinele perioadei G2 ciclina B.
210

Capitolul 13

Fig. 13.4. Reglarea ciclului celular

Fig. 13.5. Activitatea

ciclinelor n ciclul celular

211

Capitolul 13

Gene implicate n controlul ciclului celular


Organismele multicelulare i-au dezvoltat sisteme
complexe de comunicare ntre celulele care le alctuiesc. Prin
intermediul acestor sisteme se asigur reglarea dezvoltrii i
organizrii esuturilor, controlul creterii i proliferrii,
coordonarea activitii celulelor, esuturilor i organelor. Sunt
descrise dou clase principale de gene care codific proteine
implicate n reglarea ciclului celular: protoncogenele i genele
supresoare de tumori (antioncogene).
Protooncogenele reprezint o clas eterogen de secvene de
ADN, aflate n celulele normale, ale cror funcii se exercit n
cadrul proceselor de cretere, proliferare i difereniere celular.
Acestea codific factori de cretere, receptori ai factorilor de
cretere, cicline i ali mitogeni. Protooncogenele sunt active n
celulele embrionare, iar la adult doar n celulele esuturilor
proliferative (celulele epiteliale, celulele hematopoezei). Prin
mutaii, eveniment accidental, protooncogenele se pot
transforma n oncogene (de ex., c-bcl, c-myc, c-ras, c-jun etc.).
Oncogena este, deci, forma anormal, activat, a unei
protooncogene, care se caracterizeaz prin capacitatea de a
induce i/sau promova proliferarea anormal (n exces)
caracter specific celulelor canceroase.
Genele supresoare de tumori (GST) au roluri cruciale n
fiziologia celulelor. Produii lor proteici alctuiesc reele de
semnalizare intracelulare cu funcii diametral opuse celor pe
care le ndeplinesc reelele formate din proteinele codificate de
protooncogene. GST funcioneaz inhibnd proliferarea i
diferenierea celular. Unele GST codific factori proteici ce
controleaz replicarea i reparaia ADN i stopeaz intrarea
celulei n mitoz att timp ct aceste procese nu iau sfrit.
Pierderea sau inactivarea GST (de ex., prin hipermetilarea unor
secvene ADN reglatoare ale unor uniti transcripionale)
212

Capitolul 13

confer celulelor capacitatea proliferrii autonome (de ex., p53,


Rb).
Adeziunea celular
La majoritatea celulelor organismelor vertebrate,
formarea adeziunilor intercelulare i celula-matrice este o
condiie important n depirea punctului de restricie. Dup
intrarea n perioada sintetic, pn la ncheierea mitozei, celulele
pierd parial legturile ce le stabilizeaz n esut i se rotunjesc
(fig.13.6).

Fig. 13.6. Configuraia celulelor n diferite etape


ale ciclului celular

S-a constatat c celulele cultivate n suspensie, supuse


unei agitri permanente, devin sferice i i pierd capacitatea
proliferativ, fenomen numit dependen de ancorare a
diviziunii celulare.
Evoluia celulelor
dup diviziune
n dependen de perioada ontogenetic i tipul esutului
dup diviziune celulele pot avea o evoluie diferit, controlat
genetic. Celulele esuturilor proliferative se divid intens,
producnd populaii noi de celule. Alte celule prsesc ciclul
celular pentru o difereniere (specializare) terminal i rmn
ntr-o perioad de activitate metabolic de susinere G0. Celulele
213

Capitolul 13

care i-au epuizat programul de supravieuire sunt eliminate din


esut prin apoptoz. Pe lng proliferare i difereniere, n
organism, celulele a cror funcie este epuizat, sunt nlturate i
nlocuite de celule tinere. Procesul de nlturare este un proces
fiziologic i a fost denumit apoptoz sau moarte celular
programat.
Diferenierea celular
Toate celulele unui organism pluricelular pornesc de la o
celul zigot cu setul de gene capabil s asigure creterea i
dezvoltarea unui organism complex format din diferite esuturi.
Replicarea ADN i mitoza asigur transmiterea aceleai
informaii genetice tuturor celulelor care vor rezulta din
diviziunea zigotului. n diferite perioade ontogenetice celulele
i modific aspectul, compoziia i ca rezultat funciile.
Diferite celule se deosebesc ntre ele prin setul de proteine
necesare pentru activitatea celulei i setul specializat de proteine
necesare pentru ndeplinirea unor funcii specifice esutului dat.
De exemplu, n celulele dermului se sintetizeaz keratin, n
eritrocite hemoglobina, n celulele intestinului fermeni
digestivi, n celulele retinei opsine etc. Coninutul difereniat
de proteine n diferite celule este determinat de expresia
difereniat a genelor n timp i spaiu. Astfel, diferenierea
celular este determinat de conectarea sau deconectarea
unor gene cu expresie difereniat n timp i spaiu.
Apoptoza
Homeostazia tisular necesit un echilibru ntre moartea
i proliferarea celular. n general, sinuciderea celular este
activat pentru a elimina selectiv celulele devenite indezirabile
(nedorite). Acestea pot fi: celule lezate sau senescente
(polinucleare acumulate la nivelul situsului inflamator), celule
214

Capitolul 13

recunoscute ca strine sau preneoplazice (a cror apoptoz este


indus de celule citotoxice) sau celule care au pierdut contactul
cu mediul lor nconjurtor (de exemplu, celulele epidermice,
care au migrat, n urma unui traumatism n esutul subcutanat),
sau celule n exces care intr n competiie cu alte celule pentru
un semnal inhibitor.
S-a demonstrat c apoptoza are loc n:
- cursul dezvoltrii normale a embrionului;
- regresia organelor la larve n timpul metamorfozei;
- pierderea celulelor din spaiul interdigital al mnii la
embrionul uman;
- eliminarea celulelor senescente sau lezate din esuturi;
- eliminarea celulelor transformate (canceroase);
- n sistemul imun - prin apoptoz se realizeaz ndeprtarea
unor clone limfocitare i selecia altora.
Fiecare celul primete multiple semnale (hormoni,
citokine) prin intermediul receptorilor specifici. Aceste semnale
pot induce intrarea celulei n ciclul celular sau n apoptoz. De
exemplu, glucocorticoizii sau ionoforul de Ca2+ induc apoptoza
n timocite. Acest proces este inhibat prin activarea proteinkinazei C de ctre un ester forbol sau de ctre IL1. Alterarea
unui receptor specific ar putea determina apariia unei clone
maligne, dezechilibrnd aceast relaie ntre semnalele
inductoare i represoare ale apoptozei i ale proliferrii.
Caracteristica esenial a apoptozei este reprezentat de
clivajul
ADN
dublucatenar
la
nivelul
linker-ilor
intranucleozomici (fig.13.7).
Modificrile din nucleu ce afecteaz n principal
moleculele de ADN, sunt produse n urma activrii sau induciei
unei endonucleaze care este dependent de ionii de Ca2+ i
Mg2+. Aceast enzim este prezent n mod constitutiv, n unele
tipuri de celule (timocitele din cortex), ns ea apare indus n
alte tipuri de celule. Aceast endonucleaz cliveaz ADN
215

Capitolul 13

Fig. 13. 7. Schema evenimentelor din apoptoz

internucleozomal, dnd natere la o serie de fragmente formate


din 180-200 perechi de baze.
Dup clivarea ADN urmeaz fragmentarea nucleului
urmat de fragmentarea celulei i formarea corpilor apoptotici.
Acetia sunt fagocitai de celulele vecine sau de limfocte.
Fagocitarea corpilor apoptotici se realizeaz n urma
recunoaterii de ctre celulele fagocitare a noilor molecule, care
sunt expuse pe suprafaa membranei corpilor apoptotici (de ex.,
glicani bogai n reziduuri de N-acetil- glucozamin). n
mecanismul declanrii acestui proces au fost identificate o serie
de gene. Din categoria acestor gene s-a demonstratrolul a dou
grupuri principale: oncogenele (myc, ras, bcl-2) i unele gene
216

Capitolul 13

supresoare ale creterii tumorale (p53) care pot fi implicate n


iniierea sau blocarea apoptozei.
Unele proto-oncogene (c-bcl-2) blocheaz specific
moartea fiziologic a celulei (apoptoza). Supraexpresia
oncogenelor mutante c-ras poate produce acelai efect blocant,
chiar dac celulele au fost expuse la diferii factori de cretere, la
care ele sunt sensibile i care n condiii normale ar fi condus la
moartea lor prin apoptoz. n schimb, gena supresoare a creterii
tumorale, p53, are un efect opus, ea induce apoptoza n celulele
susceptibile.

Fig. 13.7. Reglarea apoptozei

Apoptoza i senescena
n timpul mbtrnirii (senescenei), s-a observat n
majoritatea organelor o scdere a numrului de celule, ca
rezultat al ncetinirii ritmului de cretere a celulelor i al
eliminrii lor prin apoptoz. Acestea ar putea fi consecine ale
unei deficiene de factori de cretere, a unor anomalii de
217

Capitolul 13

transmitere a semnalelor inter- i intracelulare i a modificrii


ciclului celular. Apoptoza intervine n eliminarea celulelor
senescente alterate. Dac apoptoza este perturbat, poate fi
antrenat eliminarea celulelor sntoase i pstrarea celulelor
anormale.
Deci, n cursul mbtrnirii apoptoza ar permite
eliminarea celulelor cu funcionare deficitar apoptoza
normal. Mecanismele reglatoare ale apoptozei ar fi activate de
ctre o leziune celular incompatibil cu supravieuirea celulei.
n alt caz, activarea acelorai mecanisme va avea drept
consecin dispariia celulelor normale apoptoza abuziv. De
exemplu, diminuarea progresiv a sintezei anumitor factori de
cretere i/sau de supravieuire o dat cu vrsta nu ar permite
meninerea dect a unei populaii celulare din ce n ce mai
redus numeric.
n alte cazuri, mecanismele de control ale apoptozei ar fi
ele nsei afectate de mbtrnire i activarea lor ar putea
determina deleia neadecvat a celulelor normale apoptoz
aberant. Activarea inoportun i/sau disfuncia mecanismului
apoptotic ar contribui la moartea celular n exces, fenomen
caracteristic senescenei.
Verificarea cunotinelor:
1. Definii noiunile: ciclu celular, mitoz, interfaz, kinetocor,
punct de restricie, cicline, factor de cretere, apoptoz.
2. Care sunt perioadele ciclului celular?
3. Ce procese au loc n interfaz?
4. Care este durata ciclului celular?
5. Ce factori controleaz evenimentele din interfaz?
6. Ce factori induc mitoza?
7. Care este rolul biologic al mitozei?
8. Care este soarta celulelor dup diviziune?
9. n ce const rolul biologic al apoptozei?
218