Sunteți pe pagina 1din 52

CAPITOLUL 1

Generalit
i privind
nchimia
chimia
analitic
Generaliti
privindsepararea
separarea n
analitic
1.1. Rolul
separ analitic
rii n procesul
analitic de m sur
Rolul separrii
n procesul
de msur
Probele
investigate
n diversele
suntmai
demulte
celeorimai
multe
ori foarte
Probele
investigate
n diversele
domeniidomenii
sunt de cele
foarte
complexe,
astfel
complexe, astfel nct determinarea unor anumite specii (anali i) din probe nu este
nct determinarea unor anumite specii (analii) din probe nu este posibil din cauza interferenelor
posibil din cauza interferen elor restului componentelor din prob n procesul de analiz .
restului componentelor din prob n procesul de analiz. Metodele de separare au tocmai rolul de a
Metodele de separare au tocmai rolul de a transfera anali ii de interes ntr-un nou mediu,
transfera
de interes
ntr-un
nou mediu,
mult iei
maichimice
simplificat
de vedere
mult mai analiii
simplificat
din punct
de vedere
a compozi
dectdin
cel punct
al probei
ini iale.a
compoziiei
chimice
dect
cel altransfer
probei iniiale.
De asemenea,
prinuna
acest
transfer
poateetape,
realiza, on
De asemenea,
prin
acest
se poate
realiza, n
sau
mai se
multe
una
multe etape,ieio cretere
analiilor
dinvaloarea
probe, astfel
nct valoarea
acesteia
cre sau
teremai
a concentra
anali ilora concentraiei
din probe, astfel
nct
acesteia
s se situeze
s
se situeze
limitaiede
detecie afizice
metodei
final. rezultat
Proba rezultat
peste
limita peste
de detec
a metodei
de fizice
analizde, analiz,
utilizat utilizat
n final.nProba
prin
opera
ii maimai
mult
sausaumai
in complexe,
de separare
separare
i concentrare,
numit
prin
operaii
mult
maipupuin
complexe, de
i concentrare,
numit
probprob
final,
final , s
trebuie
s fie compatibil
cu metoda
fizici s
depermit
analiz obinerea
i s permit
ob inerea
de
trebuie
fie compatibil
cu metoda fizic
de analiz
de informaie
analitic
informa
ie
analitic
(calitativ
sau
cantitativ
)
din
procesul
de
m
surare
a
unei
propriet
i
(calitativ sau cantitativ) din procesul de msurare a unei proprieti fizice. Aadar, separarea i/
fizice.
A adar, separarea
i/sau
sunt modalit
i de prelucrare
a probelor
i
sau
concentrarea
sunt modaliti
deconcentrarea
prelucrare a probelor
i se includ
n schema general
a unui
se
includ
n
schema
general
a
unui
proces
analitic
de
m
sur
.
proces analitic de msur.
Prelucrarea probelor prin proceduri de separare este precedat i influen at de
Prelucrarea probelor prin proceduri de separare este precedat i influenat de prelevarea
prelevarea acestora i urmat de analiza propriu-zis , a a dup cum se poate observa i
acestora i urmat de analiza propriu-zis, aa dup cum se poate observa i din reprezentarea
din reprezentarea general dat unui proces analitic n Fig. 1.1. Un rol important, n
general
dat unui
proces analitic
n Fig.
1. Unl rol
dezvoltarea
i optimizarea
acestui
dezvoltarea
i optimizarea
acestui
proces
au important,
dependennele
dintre parametrii
unei etape
proces
l
au
dependenele
dintre
parametrii
unei
etape
i
informaia
obinut
din
proces
(liniile
i informa ia ob inut din proces (liniile punctate).
punctate).
SISTEM
INVESTIGAT

PRELEVARE
PROBE

DECIZII

PREPARARE
PROBE

INFORMATII
ANALITICE

PROBA
FINALA

ANALIZA:
MASURARE
PROPRIETATI FIZICE

Fig. 1. Reprezentarea etapelor unui proces analitic de msur.

Fig. 1.1. Reprezentarea etapelor unui proces analitic de m sur .

InIngeneral,
separarea
i concentrarea
ca etape importante
prelucrarea probelor,
constau
general,
separarea
i concentrarea
ca etape nimportante
n prelucrarea
dintr-o
serieconstau
de operaii
analitice,
sauii mai
puin complexe,
unul pu
sauinmai
multe din
probelor,
dintr-o
seriemai
de mult
opera
analitice,
mai mult avnd
sau mai
complexe,
scopurile
urmtoare:
avnd unul
sau mai multe din scopurile urm toare:
-- izolarea
izolarea unuia
unuia sau
sau mai multor
multor anali
analiii de
deinteres
interes dintr-un
dintr-unmediu
mediu(prob
(prob)
avndooanumit
anumit
) avnd
compoziie
n vederea
eliminrii
compozi ie(numit
(numit matrice),
matrice),
n vederea
elimininterferenelor
rii interferen acesteia;
elor acesteia;
-- concentrarea
concentrarea
anali
ilor
de
interes,
astfel
nct
n
proba
final concentraia
ob inut , concentra
analiilor de interes, astfel nct n proba final obinut,
acestora s ia
fie
acestora
s
fie
peste
limita
de
detec
ie
a
procesului
de
determinare
(preferabil
n
peste limita de detecie a procesului de determinare (preferabil n intervalul de linearitate al
msurtorilor);
- eliminarea unei pri grosiere a matricei complexe
interferente (etap cunoscut i sub
7
numele de clean-up);
- modificarea structurii analiilor de interes n vederea mbuntirii unor parametrii analitici
importani (detectabilitate UV-VIZ prin introducerea unor cromofori, inducerea unei proprieti
fluorescente, mbuntirea selectivitii unui proces cromatografic, etc); - schimbarea strii de
agregare a analitului sau a matricei n care se gsesc analiii;

- schimbarea solventului probei, proces care are loc de obicei concomitent cu izolarea i
concentrarea analiilor din prob.
De menionat c, de regul, o prob de analizat cu ct este mai complex, cu att i
procedura de prelucrare este mai complex, cu o durat de timp mai mare, iar influena erorilor
(sistematice i/sau ntmpltoare) este mai mare. Astfel, probele biologice, probele legate de
controlul poluanilor din mediul ambiant (aer, ap, sol), probele alimentare, matricile organice
complexe, etc., necesit de cele mai multe ori proceduri de prelucrare, extrem de laborioase i cu o
durat mare de timp. In cadrul procedurilor de prelucrare a acestor probe, concentrarea i/sau
izolarea anumitor specii de interes reprezint principalul scop, iar aceasta se poate realiza
convenabil prin una sau mai multe operaii de extracie.
Prelevare i implicaii asupra procesului de msur
Recoltarea sau prelevarea probelor dintr-un sistem investigat este esenial pentru calitatea
informaiilor obinute din procesul analitic i, implicit, pentru calitatea deciziilor referitoare la
sistemul din care acestea provin. Aceast etap a procesului analitic de msur poate fi discutat din
mai multe puncte de vedere:
a) dup numrul probelor prelevate astfel nct acestea s fie reprezentative pentru sistemul
investigat;
b) dup cantitatea de prob prelevat care depinde de capacitatea de procesare n etapa urmtoare de
preparare a probelor;
c) funcie de natura fizic a sistemului investigat (care poate fi gazos, lichid sau solid);
d) funcie de natura sistemului investigat din punct de vedere al omogenitii sau heterogenitii
sale;
e) funcie de modalitatea de prelevare (n timp i/sau spaiu).
Prelevarea poate fi sistematic sau ntmpltoare, dup cum pot fi luate probele dintr-un
sistem investigat. Prelevarea sistematic presupune respectarea unor reguli de prelevare (n spaiu i
timp), astfel nct informaia analitic s reflecte concentraia (coninutul) de analii n coordonatele
menionate. Prelevarea stratificat este efectuat atunci cnd materialul sau sistemul investigat este
distribuit n zone (straturi) aproximativ omogene. Prelevarea ntmpltoare (aleatoare) se aplic
atunci cnd compoziia sistemului investigat este constant n timp i spaiu, pe o perioad i pe o
ntindere determinate. De asemenea, probele pot fi recoltate ntmpltor, atunci cnd scopul analizei
nu este determinarea exact a coninutului, ci identificarea unor specii chimice.
Prelevarea probelor poate fi uneori nsoit de operaii de modificare a compoziiei acestora.
De exemplu, prelevarea probelor de aer bazat pe reinerea ntr-un mediu lichid reprezint i
nceputul operaiilor de preparare a probelor; adugarea unui reactiv specific n mediul de reinere
nltur aceast etap n procesul de preparare a probelor. De aceea, unele tehnici de prelevare sunt
n acelai timp i tehnici de preparare a probelor. Este cazul, n special, la domeniul prelevrii
probelor gazoase, unde se pun i cele mai dificile probleme legate de reinerea analiilor de interes
i msurarea volumului probelor gazoase.
Prelevarea probelor atmosferice se poate face n dou modaliti: 1) static, atunci cnd
volumul de aer prelevat se aduce ntr-un vas calibrat, n care apoi se introduc reactani dizolvai n
soluie sau adsorbani pentru reinerea fizic a analiilor de interes; 2) dinamic, prin aspirarea cu
ajutorul unei pompe de aspirare avnd debitul controlat i trecerea fluxului gazos printr-un mediu
lichid de reinere, sau printr-o trap rcit ori printr-un adsorbant fa de care analiii de interes au o
mare afinitate.
Numrul de probe prelevate dintr-un material (sistem), presupus omogen, depinde de
eroarea introdus n etapa de prelevare (notat cu eprelevare i egal cu diferena Yreal Y ).

n prele var e
[9]
e 2prele
printr-un adsorbant fa de care anali
ii de
var einteres au o mare afinitate.
Num rul de probe prelevate dintr-un material (sistem), pre
depinde
n ceva
etapamai
de complicat
prelevare ,(notat
cu ela
Soludeia eroarea
acestei introdus
ecua ii este
deoarece,
prel
depinde
de
n.
De
aceea,
se
folose
te
o
metod
iterativ
,
consider
Y ). Conform
relapentru
iei 1.20,
rimea
diferen
a Yrealintervalului
Conform relaiei de mai
jos mrimea
de ncredere
Yreal,m
dac
erorileintervalului
ar interveni de ncre
pentru
care
se
calculeaz
o
valoare
pentru
t,
reintrodu
doar n aceast etap,dac
este dat
de expresia:
erorile
ar interveni doar n aceast etap , este datcare
de se
expresia:
calculeaz un nou nprelevare, s.a.m.d.
t (n 1, P) s prele var e
Yreal Y
n prele varmetodelor
e
1.9. Clasificarea
de separare
Clasificarea metodelor de separare In primul rnd, metodele de separare pot fi mecanice,

centrifugarea, n care for a motrice de separare este fizic (p


20aplicabil
centrifug
). Aceast
posibilitate
sistemelor
heter
In primul rnd, metodele
de separare
pot fi mecanice,
cum ar fieste
filtrarea
i centrifugarea,
n
selectivitatea
lor inesau
mai
degrab
deAceast
separarea
de faze,
care fora motrice de separare
este fizic (presiunea,
fora
centrifug).
posibilitate
este dect d
anumite
aplicabil sistemelor heterogene.
Prin probe
urmare,dispersate.
selectivitatea lor ine mai degrab de separarea de
Filtrarea
este definit ca o opera ie analitic prin care se
faze, dect de specii analitice din anumite
probe dispersate.
dispersat
ntr-un
lichid,
utiliznd
acest
scop un
Filtrarea este definit ca o operaie analiticmediu
prin care
se separ
o faz n
solid
dispersat
ntr-material p
model
teoretic
curgerii
unui lichid
un mediu lichid, utiliznd nbazeaz
acest scoppe
unun
material
poros.
Teoriaalfiltrrii
se bazeaz
pe unprintr-o
model capilar ,
teoretic al curgerii unui lichid
printr-o capilar,
acorddescrie
cu legeafluxul
lui Poiseuville.
Relaia(reprezentat
care
Poiseuville.
Rela iancare
( ) de filtrant
d
descrie fluxul () de filtrant
(reprezentat
de
mediul
lichid
avnd
viscozitatea
)
ce
trece
printr-o
viscozitatea ) ce trece printr-o capilar cu raza r i lungimea L este
capilar cu raza r i lungimea L este urmtoarea:
l

dV
dt

r4 P
8
L ,

n care: V este volumul de lichid, t este timpul, iar P este presiunea aplicat, care reprezint fora
n care:
este volumul
de lichid,
t este
timpul,
iar P
motrice a acestei separri. ,Aceasta
este Vnecesar
avnd n vedere
rezistena
filtrului,
precum
i este pre
for apemotrice
a acestei
separ
ri. Aceasta
este necesa
posibilitatea de acumularereprezint
a precipitatului
filtru, blocnd
curgerea
lichidului
prin porii
a filtrului,
precum
i posibilitatea
de acumulare
a precipitat
materialului filtrant. In plus,rezisten
pot avea loc
anumite efecte
de hidratare
n porii filtrului,
sau fenomene
curgerea
lichidului
prin porii
materialului
filtrant.
In plus,
de adsorbie i electrocinetice,
ceea ce nseamn
c aceast
simpl
operaie analitic
nu este
una purpot avea l
mecanic n multe situaii. hidratare n porii filtrului, sau fenomene de adsorb ie i electrocinetic
c aceast
simpl
opera
nu este
una pur
mecanic n mu
Cele mai simple materiale
de filtrare
sunt pe
baz ie
de analitic
hrtie de filtru,
cu diferite
poroziti,
mai
simpledemateriale
de de
filtrare
sunt
baz de hrt
care influeneaz curgerea lichidului, Cele
n acord
cu relaia
mai sus. Filtre
sticl sau
de pe
porelan
porozit
i, care
influen
eaz curgerea
acorddecu rela ia
sunt de asemenea foarte utilizate
n aceste
operaii.
De regul,
dup filtrarelichidului,
se aplic o n
operaie
splare, n vederea ndeprtrii
complete
prii
matrice
lichid
proba filtrat.
sticl
sau ade
pordeelan
sunt
de din
asemenea
foarte utilizate n aceste
In funcie de dimensiunea particulelor
solidese
n suspensie,
poate
clasificat
trei grupe: ndep rt ri
dup filtrare
aplic o filtrarea
opera ie
de fisp
lare, nn vederea
- filtrarea simpl are loc atunci
cnd
particulele
n
suspensie
au
dimensiunea
mai
mare
dect
10 m;
matrice lichid din proba filtrat .
- se consider microfiltrare atunci cndInparticulele
au dimensiunileparticulelor
ntre 0,02 i 10solide
m; n suspens
func ie reinute
de dimensiunea
printr-o
frit
(cu
- prin ultrafiltrare se separ
particule
cu diametrul
subavnd
0,02 m.diametrul de pn la 0,2 m), care ar
clasificat
n
treipori
grupe:
In cromatografia de
probele
care are
sunt loc
chiar
dacparticulele
au fost filtrate
eventualele
particule
rinjectate,
mase
ncnd
suspensie
n prob
. Odat auajun
-lichide
filtrarea
simpl
atunci
n anterior,
suspensie
di
nainte de a intra efectiv acumula,
n coloana
cromatografic,
trec
n
captul
coloanei
printr-o
frit
(cu
pori
blocnd
m; spa iul dintre particulele ce constituie faza sta i
dect 10
avnd diametrul de pn la
0,2
m),
care
are
rolul
de a, bloca
(filtra)
rmase
n
curgerea
prin coloan
precum
ieventualele
interac
iaparticule
anali ilor
faza
io
- se consider
microfiltrare
atunci
cnd particulele
recu
inute
austa
dime
suspensie n prob. Odat ajunse n coloan ele s-ar acumula, blocnd spaiul dintre particulele ce
10 m;
constituie faza staionar, modificnd
astfel curgerea prin
coloan,
precum
interacia utilizat
analiilor cu
Centrifugarea
este
o opera
ie ianalitic
la separar
- prin ultrafiltrare se separ particule cu diametrul sub 0,02 m.
faza staionar.
In timpul centrifug rii dou for e ac ioneaz asupra particulel
In cromatografia
de lichide
probele care sunt
injectate, chia
Centrifugarea esteheterogen:
o operaie analitic
la ional
separarea
probelor
for autilizat
gravita
i for a heterogene.
centrifugIn, timpul
datorit rota
anterior, asupra
nainteparticulelor
de a intra
efectiv
nmediul
coloana
cromatografic
, trec
centrifugrii dou fore neglijabil
acioneaz
disperse
heterogen:
fora se aplic
n raport cu cea
de adin
doua,
mai
ales cnd
gravitaional i fora centrifug,
datorit
rotaiei aplicate.
raport cu cea de
esteeste
datneglijabil
de relania:
accelera
ia centrifug
(ac)Prima
a doua, mai ales cnd se aplic viteze mari de rotaie; acceleraia centrifug (ac) este dat de relaia:
2
21
a
r (2
n) 2 r
c

. n care este viteza angular (n radiani per sec); n viteza de


rpm), iar r este raza n mm. For a centrifug relativ (RCF) este
accelera ia centrifug i cea gravita ional :

ac

(2

n) 2 r

. n care este viteza angular (n radiani per sec); n viteza de tura


. n care este rpm),
viteza angular
(n radiani
pern
sec);
n viteza
(rotaii / relativ
min, sau rpm),
iar r este da
iar r este
raza
mm.
For de
a turaie
centrifug
(RCF)
este raza n mm. Fora centrifug relativ (RCF) este dat de raportul dintre acceleraia centrifug i
accelera ia centrifug i cea gravita ional :
cea gravitaional:
RCF

ac
g

4 2n 2r
g

1,12 10 6 r n 2

Instrumentele cu care se efectueaz aceast operaie se numesc centrifuge i au fost construite


Instrumentele
care de
sevaloarea
efectueaz
aceast pot
opera
ie se nnumesc c
pentru prima dat
de ctre Svedberg.cu
In funcie
lui RCF, centrifugele
fi clasificate
construite pentru prima dat de c tre Svedberg. In func ie de
trei grupe:
centrifugele
fi clasificate n trei grupe:[10]
- centrifuge normale,
avnd RCFpot
< 3.000;
- supercentrifuge, avnd
RCF > 3.000;normale, avnd RCF < 3.000;
- centrifuge
- ultracentrifuge, avnd
RCF
ntre 106 - 108. avnd RCF > 3.000;
- supercentrifuge,
8
Aplicarea simultan de centrifugare i ultrafiltrare cunoate aplicaii
n biochimie,
cum ar fi
- ultracentrifuge, avnd RCF ntre 106 - 10
.
concentrarea soluiilor de proteine. In acest caz se utilizeaz membrane din materiale cu pori
simultan
de centrifugare
i ultrafiltrare
cunoa te aplica
controlai, cum ar fiAplicarea
din: nitrat de
celuloz, acetat
de celuloz, policlorur
de vinil, poliamide,
polietersulfon,ar
etc.fi concentrarea solu iilor de proteine. In acest caz se utilize
materiale
cu pori
controla
i, cum
fi din: nitrat
de celuloz
, acetat de
Procesele
fizice bazate
pe transfer
de faz
suntarconsiderate:
distilarea,
vaporizarea,
sublimarea, condensarea,
uscarea sau cristalizarea.
Aceste ,metode
de vinil, poliamide,
polietersulfon
etc. se bazeaz pe proprietile
diferite ale componenilor Procesele
unei probe de a trece
n alt
stare de agregare
dect cea nde
care se
fizice
bazate
pe transfer
fazgsetesunt con
proba. Altfel spus, n cadrul acestor metode principiul de separare ale componentelor unei probe se
vaporizarea, sublimarea, condensarea, uscarea sau cristalizarea.
bazeaz pe punctele lor diferite de topire, evaporare sau chiar sublimare. Chiar dac ele sunt
bazeazn scopuri
pe propriet
ileunele
diferite
alecucomponen
ilor pot
uneifi probe
utilizate mai degrab
preparative,
aplicaii
scopuri analitice
totui de a tr
agregare dect cea n care se g se te proba. Altfel spus, n cad
ntlnite.
principiul
dedeseparare
ale componentelor
unei
probe numai
se bazeaz
pe
Tot procese
de transfer
faz pot fi considerate
i solubilizarea sau
precipitarea,
c
n acest caz pede
lng
intervenia
unui parametru
(cumsublimare.
este temperatura)
au locdac
i procese
topire,
evaporare
saufizic
chiar
Chiar
eledesunt utiliz
natur chimic scopuri
(reacii de precipitare,
efecteunele
de hidratare/solvatare
complexare).
preparative,
aplica ii cusau
scopuri
analitice pot fi totu i nt
Procesele de separare ntre faze nemiscibile se bazeaz pe transportul diferit al speciilor de
Tot procese de transfer de faz pot fi considerate
separat n care fora motrice poate fi: potenialul chimic diferit al speciilor de separat, potenialul
numai chimic,
c n etc.
acest
caz pe
lng
interven
ia unui param
electric aplicat precipitarea,
asupra probei, reactivitate
Intervenia
cu un
parametru
extern conduce
temperatura)
aun dou
loc mari
i clase:
procese
natur In capitolele
chimic urmtoare,
(reac ii de pr
la clasificarea metodelor
de separare
statice de
i dinamice.
hidratare/solvatare
saumai
complexare).
o parte a acestor
metode de separare cu cele
largi aplicaii n chimia analitic vor fi discutate
att din punct de vedereProcesele
al principiilor
teoretice,
ct ntre
i din faze
punct nemiscibile
de vedere al aspectelor
de separare
se bazeaz pe
instrumentale. speciilor de separat n care for a motrice poate fi: poten ialul chimic

separat, poten ialul electric aplicat asupra probei, reactivitate chimic


un parametru extern conduce la clasificarea metodelor de separare
statice
i dinamice.
In heterogene
capitolele urm toare, o parte a acestor metode
Definiii generale
despre solveni
i sisteme
mai largi aplica ii n chimia analitic vor fi discutate att din punct de
In general,
separareact
reprezint
modificare
a concentraiilor
relative a instrumentale.
unuia sau mai
teoretice,
i din opunct
de vedere
al aspectelor
Noiuni extra-analitice privind procesele de separare

multor componeni dintr-o anumit vecintate, ca urmare a unui transfer de mas a unor specii
chimice dintr-o regiune n alta. Acest transfer atinge un echilibru la un moment dat i este
caracterizat prin viteza cu care acesta este atins. Sistemele de separare la echilibru sunt n mod
necesar heterogene, implicnd o repartiie a componenilor ntre dou sau mai multe faze distincte,
22unei probe, extraciile
numite nemiscibile. Din multitudinea de sisteme de separare a componenilor
lichid-lichid i lichid-solid au cele mai multe aplicaii n chimia analitic.
Prin extracie se nelege un proces de distribuie a unei substane ntre dou faze
nemiscibile lichide sau ntre o faz lichid i una solid. Procesul se supune legii fazelor, formulat
de Gibbs:

F+N=K+2,
unde: F este numrul de faze; N - numrul gradelor de libertate; K - numrul componentelor.
Pentru un numr de componeni, K, se poate prezice numrul de faze F care pot coexista
pentru un numr dat de grade de libertate N. Gradele de libertate corespund variabilelor
independente ale sistemului (temperatur, presiune i concentraiile componenilor n fazele date).
De exemplu, pentru un sistem cu un singur component (K=1) aflat ntr-o singur faz (F=1) va
rezulta c are dou grade de libertate (N=2): presiunea i temperatura pot fi alese arbitrar pe un
anumit domeniu de valori. Atunci cnd componentul se gsete n dou faze aflate la echilibru
(F=2), va rezulta un singur grad de libertate: presiunea i temperatura sunt interdependente printr-o
relaie explicit. Dac componentul se gsete n trei faze (F=3), atunci N=0, adic starea lui este
complet determinat de aa-numitul punct triplu n care cele trei faze coexist.
Pentru un sistem coninnd doi componeni, va rezulta c F + N = 4. In acest caz avem
situaiile: a) o singur faz (F=1), numit amestec sau soluie, cu trei grade de libertate
(concentraia, temperatura i presiunea); b) dou faze (nemiscibile) cu dou grade de libertate
(concentraia i temperatura sau presiunea); c) trei faze i un singur grad de libertate (concentraia).
Un proces de extracie presupune distribuia unui compus ntre dou faze nemiscibile, K=3 i F=2,
de unde va rezulta c numrul gradelor de libertate sunt 3 (concentraia, presiunea i temperatura).
Procesul de extracie este un proces reversibil ce atinge un echilibru, numit i repartiie sau
distribuie ntre dou faze. Dac cele dou faze sunt lichide, atunci acestea sunt nemiscibile ntre
ele, iar extracia se numete lichid-lichid. Specia chimic asupra creia se acioneaz n acest proces
se numete analit. Dintre aplicaiile analitice ale extraciei lichid-lichid, cele mai importante se
refer la cazul n care unul dintre lichide este apa sau o soluie parial apoas.
Solventul este o substan sau un amestec omogen de substane n stare lichid, care poate
fi: a) miscibil sau nemiscibil cu faza apoas; b) cu afinitate (solubilitate) mai mare sau mai mic
fa de anumii compui de interes (analii). O clasificare general a solvenilor, n funcie de
volatilitatea i miscibilitatea lor cu apa, este dat n tabelul de mai jos.
Tabel 1. Clasificare i exemple de solveni utilizai n procese de solubilizare.
Solveni volatili,
nemiscibili cu apa

Solveni volatili,
miscibili cu apa

Solveni nevolatili,
nemiscibili cu apa

Solveni nevolatili,
miscibili cu apa

Alcooli alifatici superiori (ncepnd cu C4); Esteri;


Cetone superioare (ncepnd cu C4); Acetali;
Eteri;
Hidrocarburi alifatice i aromatice; Derivai halogenai, alifatici i aromatici;
Nitroalcani;
Sulfur de carbon.
Acizi carboxilici inferiori (formic, acetic, propionic); Baze (piridina i derivai,
piperidina, amine alifatice inferioare);
Alcooli inferiori;
Aldehide inferioare; Cetone inferioare;
Nitrili alifatici inferiori; Hexametilfosfotriamida.
Baze, precum: anilina, N-alchilanilina, chinolina; Amide (ex. formamida).
Cetone (mixte, ciclice sau 1,4-dicetone);
Alcooli (termeni superiori, aromatici);
Eteri (termeni superiori alifatici, eteri ai glicolului); Unii esteri (ex. triacetat de
glicerin);
Hidrocarburi alifatice superioare;
Hidrocarburi aromatice superioare (ex. tetralin, cumen);
Terpene (ex. pinen);
Nitroderivai aromatici (ex. nitrobenzenul);
Derivai polihalogenai ai hidrocarburilor superioare; Derivai halogenai aromatici.
Hidroxi-acizi (acid lactic);
Baze, precum mono-, di- i trietanolamina; Alcooli polihidroxilici (glicol, glicerin);
Amide (ex. formamida).

Chiar dac iniial au fost utilizate ca solveni n sintezele organice, lichidele ionice i-au
gsit un domeniu de aplicare i n procesele de extracie. Acestea sunt sruri organice, cu puncte de
topire mai mici de 100C. Principalele lor caracteristici: a) sunt nevolatile; b) sunt buni solveni
pentru un numr mare de compui anorganici i organici; c) sunt insolubile fa de unii solveni
organici nepolari; d) lichidele ionice hidrofobe sunt nemiscibile cu apa i, prin urmare, pot fi
utilizate n procese de extracie lichid-lichid.
Cele mai comune lichide ionice sunt derivaii de imidazoliu i piridiniu, dar pot fi utilizai i
derivai tetraalchilamoniu sau fosfoniu. Structurile ctorva exemple de substane din aceast clas
sunt redate n continuare.

H3C

SO3
H3C

CH3-(CH2)7-O-SO3

+
N

+
N

CH2

CH3
(tosilat de 1-etil-3-metilimidazoliu)

(CH2)3 CH3
(octilsulfat de 1-butil-3-metilimidazoliu)

H3C

H3C

+
N CH2CH2CH2CH3 ] Cl

(clorura de 1-butil-4-metilpiridiniu)

Formulele structurale ale unor substane cunoscute ca lichide ionice.


[15]
Fig. 2.1. Formulele structurale ale unor substan e cunoscute ca lichide ionice.
Din punct de vedere experimental procedura extraciei se efectueaz ntr-un dispozitiv numit
extractor, dar de multe ori, n special cnd volumul de prob este mic, aceasta se poate improviza cu
Din punct de vedere experimental procedura extrac iei se efectueaz ntr-un
destul succes i n dispozitive simple, precum plnii, baloane, sau recipiente, supuse unei agitri
dispozitiv numit extractor, dar de multe ori, n special cnd volumul de prob este mic,
controlate.
aceasta
se poate improviza cu destul succes i n dispozitive simple, precum plnii,
Re-extracia reprezint procesul de extracie invers a analitului din extractul organic ntr-o
baloane, sau recipiente, supuse unei agit ri controlate.
faz apoas sau uneori n alt faz organic. Noua faz n care analiii se separ se numete
Re-extrac ia reprezint procesul de extrac ie invers a analitului din extractul
reextract. Splarea este un proces de reextracie, parial sau total, a unor impuriti din extract sau
organic ntr-o faz apoas sau uneori n alt faz organic . Noua faz n care anali ii se
reextract, care se face cu o soluie de splare ce poate fi o soluie apoas sau organic.

separ se nume te reextract. Sp larea este un proces de reextrac ie, par ial sau total ,
a unor impurit i din extract sau reextract, care se face cu o solu ie de sp lare ce poate fi
o solu ie apoas sau organic .
2.2. Elemente de termodinamic a proceselor de reparti ie
Distribu ia este un termen general care se refer la transferul de substan ntre
dou (sau mai multe) faze: lichid-lichid, lichid-gaz; lichid-solid, gaz-solid i chiar solidsolid. De exemplu, extrac ia lichid-lichid se bazeaz pe distribu ia ntre dou lichide
nemiscibile aflate n contact.
Distribu ia lichid-lichid este un proces de echilibru, c ruia i putem aplica legile
termodinamicii ale proceselor de echilibru.[11] Pentru aceasta s consider m distribu ia
unei singure specii chimice A ntre dou faze, notate cu
i :
(A)
Poten ialele chimice

(A)

ale speciei A n cele dou faze sunt:

Separarea cromatografic aspecte generale


Clasificarea metodelor cromatografice
nceputurile separrilor cromatografice se datoreaz lui vet (1903), care a realizat primele
separri de colorani vegetali pe coloan umplut cu carbonat de calciu. Termenul de eluie
cromatografic a fost introdus mai trziu, de ctre Reichstein i van Euw (1938), care s descrie
principial procesul cromatografic de separare a componenilor probei la trecerea printr-o faz
staionar. Tot n acelai an, Izmailov i Shraiber i-au publicat rezultatele privind primele separri
cromatografice pe strat subire.
Separarea cromatografic are la baz interacia difereniat a componenilor unei probe fa
de dou faze, numite: faza staionar i faza mobil (aflat n micare fa de faza staionar).
Procesul se petrece ntr-o coloan cromatografic, sau pe suprafaa plan a unei plci pe care este
depus faza staionar. Analiza cromatografic este un proces cuplat ntre separarea cromatografic
i determinarea (detecia) compuilor separai (proces care se bazeaz pe msurarea unei proprieti
fizice).
Din aceast prezentare, rezult c separrile cromatografice pot fi clasificate fie din punct de
vedere al naturii celor dou faze (staionar i mobil), fie din punct de vedere al mecanismului de
separare, sau fie din punctul de vedere constructiv al ansamblului de faze.
Din punct de vedere al naturii celor dou faze distingem urmtoarele clase de separri
cromatografice:
- cromatografie de gaze (GC) n care faza mobil este un gaz inert; n funcie de natura fazei
staionare se disting urmtoarele tehnici gaz-cromatografice:
a) separarea gaz-lichid n care faza mobil este un gaz inert, iar faza staionar este un lichid,
depus pe un suport inert, sau pe peretele unei coloane cromatografice;
b) separare gaz-solid (SGC), n care faza mobil este un gaz inert, iar faza staionar este un solid;
- separare prin cromatografia de lichide (LC), n care faza mobil este un lichid, iar faza staionar
este de regul un solid;
- cromatografie n fluide supercritice (SFC), n care faza mobil este un fluid supercritic.
Mecanismul care st la baza de separrii cromatografice se poate baza pe: 1) adsorbie; 2)
repartiie; 3) schimb ionic; 4) excluziune steric, etc. Adeseori, procesele cromatografice pot
decurge printr-o combinaie a acestor mecanisme.
In funcie de mecanismul de separare cromatografia de lichide (n care polaritatea i
hidrofobicitatea analiilor, a fazei staionare i a fazei mobile joac un rol determinant) se mparte n
trei variante:
i) cromatografia de lichide n faza normal (denumit aa mai degrab din punctul de vedere
istoric), n care faza staionar este polar, iar faza mobil este nepolar;
ii) cromatografia de lichide n faza invers, n care faza staionar este nepolar i hidrofob, iar
faza mobil este polar.
iii) cromatografie de lichide prin mecanism de schimb ionic, n care faza staionar este un
schimbtor de ioni, iar faza mobil este apoas cu pH controlat.
Din punct de vedere constructiv se disting: cromatografia pe coloan i cromatografia
planar (pe hrtie sau pe strat subire). In prezent, cromatografia pe coloan, n una din clasele
menionate anterior reprezint una dintre cele mai importante tehnici de investigare a probelor
multicomponent n chimia analitic. Dup cum spune i denumirea, rolul central n separarea
cromatografic l are coloana cromatografic, n care se gsete faza staionar.

9.2. Parametrii unei separ ri cromatografice

Cromatograma reprezint dependen a n timp a propriet ii m surate de


ectorul sistemul
cromatografic.
Intr-o cromatogram ntlnim picuri cromatografice i o
Parametrii
unei separri cromatografice
de baz (constant sau variabil ). O separare cromatografic a unui amestec de n
Cromatograma
reprezintladependena
n timp a proprietii
de detectorul
sistemul
mponen i trebuie
s conduc
o cromatogram
cu msurate
n picuri
cromatografice.
De
cromatografic.
Intr-o
cromatogram
ntlnim
picuri
cromatografice
i
o
linie
de
baz
(constant
sau
mplu, n figura 9.1 este redat cromatograma HPLC a unei probe con innd 14
variabil). O separare cromatografic a unui amestec de n componeni trebuie s conduc la o
ocarburi cromatogram
aromatice cupolinucleare
n acetonitril. Dup cum se poate observa, num rul
n picuri cromatografice. De exemplu, n figura 2 este redat cromatograma HPLC
picuri cromatografice
este14egal
cu 14;aromatice
dintrepolinucleare
acestea ndoar
picurile
i 11
a unei probe coninnd
hidrocarburi
acetonitril.
Dup 10
cum se
poatenu sunt
ect separate
nnumrul
linia de
.
observa,
de baz
picuri cromatografice
este egal cu 14; dintre acestea doar picurile 10 i 11 nu

Absorbanta (mAU)

sunt perfect separate n linia de baz.

60

55

50

45
40
35

9
7

30

25
20

10
11

14

1
56

15

12

10

13

5
0
0

10

12

14

16

18

20

22

24

26

28

30

32

T im p (m in )

Fig. 2. Cromatograma unui amestec de 14 compui.

Fig.
9.1. Cromatograma
unui amestec
compu
(amestec de
14 hidrocarburi
aromatice polinucleare
separatede
prin14
HPLC
n fazi.invers i detecie
(amestec de 14 hidrocarburi
aromatice
polinucleare
separate
prin HPLC
prin spectrometrie
de absorbie
molecular
UV).
n faz invers i detec ie prin spectrometrie de absorb ie molecular UV).

Semnalul cromatografic este numit pic cromatografic, a crui form red de fapt o imagine a
echilibrelor de distribuie ale moleculelor de analit ntre faza mobil i faza staionar, care se
petrec ncromatografic
coloana cromatografic.
matematici
ai unui pic cromatografic
ideal (picul
Semnalul
esteParametrii
numit pic
cromatografic,
a c rui form
red5 din
de fapt o
Fig.
2,
apropiat
de
forma
Gauss)
sunt
dai
n
figura
de
mai
jos
(fig.3.),
care
la
rndul
lor
sunt
gine a echilibrelor de distribu ie ale moleculelor de analit ntre faza mobil
i faza
utilizai la determinarea aa-numiilor parametri cromatografici ai unei separri.

ionar , care se petrec n coloana cromatografic . Parametrii matematici ai unui pic


matografic ideal (picul 5 din Fig. 9.1, apropiat de forma Gauss) sunt da i n figura de
jos, care la rndul lor sunt utiliza i la determinarea a a-numi ilor parametri
matografici ai unei separ ri.[85]
134

10

13
12

Semnal

11 8
15

10 7

14

96

13

85

12
10

63

52

Punct de infle

w1/2
Y0

74

11

Y0/2
Y0/10 Punct de inflexiune

3 0 Y0/10
w1/2
2

6
5

Y0/2

Y0/10

w1/2

w10%

41

Y0

Y0

7.2

Y0/2

7.3

7.4

7.5

7.7

Linia dewbaz

7.2

tRw10%
7.6

w10%7.3

7.4

7.5

tR 7.6

7.7

7.8

Fig. 9.2. Parametrii unui pic cromatografic ideal (d


w

0
7.2

7.3

7.4

7.5

tR 7.6

7.7

7.8

7.9

8.0 min

FormaFig.
ideal
a piculuiunui
cromatografic
este
descris
9.2. Parametrii
pic cromatografic
ideal
(de for
w
forma urm toare:

Fig. 3 Parametrii unui pic cromatografic ideal (de form Gauss).


Forma
ideal a ideal
picului cromatografic este descris
Fig. 9.2. Parametrii unui
pic cromatografic
4( t t R ) 2 (de form Gauss).
Forma ideal aforma
piculuiurm
cromatografic
ln 2ecuaia de tip Gauss, n forma
toare: este descris de
w
1/ 2
urmtoare:
Y Y e

de

0 este descris de ecua ia de tip Gauss, n


Forma ideal a picului cromatografic
4( t t R ) 2
forma urm toare:
ln 2

, n careY YoYeste
nw1l/ 2imea maxim a picului cromatografic,
e
0
,
4( t t R ) 2
numit
timp
de
reten
ie
(t
),
w valoarea
estetimpului,
semi-l
imea piculu
ln
2
R
n care Y0 este nlimea
maxim a picului cromatografic, msurat la1/2
numit timp
w1/ 2
(9.1)
Y0 e(tR), w1/2 este
tatea
l imii);
ln 2picului
= 0,693.
,jum
nsemi-limea
care
Yo n
este
n (limea
l imea
maxim
a picului
cromatografic,
m su
deYretenie
picului
msurat
la jumtatea
nlimii);
ln 2 = 0,693.
Forma
unuiiepicul
simetric,
dar mai(l la
numit timp
de reten
(tR),cromatografic
w1/2 este semi-l
imea picului
, n care Yo este
nunui
l imea
maxim
a picului
cromatografic,
mbaz
surat
la
valoarea
timpului,
Forma
picul
cromatografic
simetric,
dar
mai
larg
n
poate
fi
descris
la
fel
de
bine
jum
tatea
n li imii);
ln 2ia= Cauchy:
0,693.
bine
de func
numit timp de reten ie (tRfel
), wde
la
1/2 este semi-l imea picului (l imea picului m surat

i de funcia Cauchy:
jum tatea n l imii); ln 2 = 0,693. Forma unui picul cromatografic simetric, dar mai larg n
de bine isimetric,
de funcY
ia
Forma unui picul fel
cromatografic
dar
mai larg n baz poate fi descris la
0 Cauchy:
Y
fel de bine i de func ia Cauchy:
2( t t R ) 2

1 [ Y0

Y
Y0
2( t wt1R/ )2 2
Y
(9.2)
1
[
]
2
(
t
t
)
2
R
unde, de
Y]0 este nlimea picului pentru
1 asemenea:
[
w1 / 2t = tR, iar w1/2 este limea picului la jumtatea
w
nlimii (semi-lime).
Forma celor
dou funcii nu difer
foartenmult,
aa dup
cum sepentru
poate
unde,
de asemenea:
Y0 este
l imea
picului
1/ 2

t = tR ,
funw
iar
[87]
[87]
dup
cum
poate
regresiile
respective
tatea
n se
l imii
(semi-l
ime).
Forma
celor
dou
n
jum tatea n l imii (semi-ljum
ime).
Forma
celor
douobserva
func
ii nudin
difer
foarte
mult,
a a func iiap
urm
toare,
prelucrat
din
cele
redate
n
Fig
9.1.
dup cum se poate observa
regresiile
respective
aplicate
pic real
n figura aplicat
dup din
cum
se poate
observa
din unui
regresiile
respective
[87] (fig. 4.) prelucrat din
observa din regresiile respective
aplicate
unui
pic real
n figura ime).
urmtoare,
jum
tatea
n
l
imii
(semi-l
Formapentru
celor t dou
unde,
asemenea:
Y0 teste
picului
= tR ,
unde, de
n lde
imea
picului pentru
= tR, n
iar lwimea
celeasemenea:
redate n Fig Y
2 0 este
1/2 este l imea picului la

urm toare, prelucrat din cele


n prelucrat
Fig 9.1. din cele redate n Fig 9.1.
urmredate
toare,

135

135
135

65
60

45 20 35

50
45

30

45

25

40

20

35
30

40 15 30

40

35 10 25

35

10

25

20

30

Gauss
5 20

65

25

60

15

45

10

4.4

4.5

4.6

10
5

4.7

25

4.8
55

4.9

5.0

5.1

5.2

5.3

5.4

Timp de retentie (min)

50

4.4

4.4
4.5

4.5

4.6

25
20

4.6

35
4.7

4.8

30 5.0
4.9

4.9

5.0

5.1

5.2

5.3

0
4.3

20

5.5

5.4

15

4.4

4.5

10

15
10

40

4.3
4.3

30
Cauchy

45

30

15

4.3

35

55

15

50

40

Semnal

Sem

25 40

20

55

Semnal

50

30 45

Semnal

Semnal

55

4.3

5.5 0

4.4

5.4
5.5 de
Timp

4.8
retentie
(min)4.3 4.4 4.5 4.6
pic
cromatografic
real4.7 (pun

Fig. 9.3.
Modelarea
unui
25
Timp de retentie (min)
20 ia Gauss, respectiv prin func ia Cauchy (lini
func

4.7

4.8

15

15

10

10

5.1

5.2

5.3

Fig.
9.3.
Modelarea
unui
pic cromatografic
rea
Fig.un
9.3.
Modelarea
unui
real (punctat
gro
Pentru
pic
simetric
depic
tipcromatografic
Gauss,
l imea
acestuia
func iafunc
Gauss,
respectiv
prin
func
ia
Cauchy
(linie
continu
Gauss, respectiv prin func ia Cauchy
inflexiune
este
2 . Cum ia
punctele
de inflexiune
sunt mai dific
Timp de retentie
(min)
Timp de retentie (min)
se m sura l imea picului la jum tatea n l imii acestuia, nota
Pentru
un ia
picsimpl
simetric
de funcia
tip Gauss,
l imea acestuia
m sur
exista
rela
: simetric
Fig. 4. Modelarea unui pic icromatografic
real
(punctat
gros)
prin
Gauss,
Pentru
un pic
de
tip respectiv
Gauss,prinl imea ace
5

4.3

4.4

4.5

4.6

4.7

4.8

4.9

5.0

5.1

5.2

5.3

5.4

4.3

5.5

4.4

4.5

4.6

4.7

4.8

4.9

5.0

5.1

5.2

5.3

5.4

5.5

Fig. 9.3. Modelarea


unui
pic cromatografic
real (punctat
prin
inflexiune
este
2 . (linie
Cumcontinu).
punctele
de gros)
inflexiune
sunt mai dificil de ev
funcia
Cauchy
func iase
Gauss,
respectiv
prin
func
ia
Cauchy
(linie
continu
).
inflexiune
estepicului
2 . Cum
sunt mai
m sura l imea
la jumpunctele
tatea n lde
imiiinflexiune
acestuia, notat
mai s

w1/2 = 2,35

m Gauss,
sura
imea
la jum
tatea de
n inflexiune
l imii acestuia,
i se
exista
rela limea
ial simpl
: picului
Pentru un pic simetric
de
tip
acestuia
msurat
ntre punctele
Pentru
un picde
simetric
tip
Gauss,
l ia
imea
acestuia
m
surat
punctele
de , ce dep
este 2. Cum
punctele
inflexiune
sunt
mairela
dificil
de
evideniat,
se prefer
se msura
limea
i deexista
simpl
: este
Aria
picului
(A)
care
o m antre
rime
cantitativ
wde
=
2,35
inflexiune
este 2 .nlimii
Cum punctele
inflexiune
dificil de eviden iat,
se prefer
a
1/2
picului
la jumtatea
acestuia,
notat
mai sussunt
cucromatografic
wmai
relaia
1/2. Intre w1/2 i exista
injectat
n coloana
, se ob
inesimpl:
din integrarea f
se m sura l imea picului la jum tatea n l imii acestuia, notat mai sus cu w1/2. Intre w1/2
w

= 2,35

1/2
Aria picului
(A) care este o m rime cantitativ , ce depinde de
exista rela ia simpl :
Aria picului (A) care
este o mrime
cantitativ,
ce depinde de cantitatea
de analit
injectat n func iei G
injectat
n coloana
, se ob ine
din integrarea
1 cromatografic
w
=
2,35
(9.3)
A
Y
w
1/2
Aria
picului
(A)
care
este
o
m
rime
cantitativ , ce
0
1 /Gauss:
2
coloana cromatografic, se obine din integrarea funciei

ln 2

n coloana
, se obdeine
din
Aria picului (A) careinjectat
este o m 1rime
cantitativ cromatografic
, ce depinde de cantitatea
analit
A
Y
w
[88]
1 / 2 integrarea func iei Gauss:
injectat n coloana cromatografic , se2ob0ine din
ln 2

sau a funciei Cauchy:


1
A
Y0 w1 / 2
2

sau a func iei Cauchy:


1
A
Y0 w1 / 2
sau a func iei Cauchy:
2
ln 2
Y0 w1 / 2
A
2

ln 2

integra

(9.4)

Yiei
wCauchy:
sau a func
iei Cauchy:
0 n
1mod
/ 2 automat cu ajutorul soft-ul sistemului de
aAfunc
In practic,
integrareasau
picurilor
se2 face
In practic
integrarea
picurilor
se face
n mod
automat
cu a
achiziie i prelucrare a datelor
cu care ,este
dotat sistemul
cromatografic.
Analistul
trebuie
s
Y
w
(9.5)
A
0
1de
/ 2 pic
precizeze aria minim
care poate
Sub
aceast
limit
picurile
cromatografice
din
ie , fiintegrarea
imsurat.
prelucrare
a datelor
cu
care
este dotat
sistem
Inachizi
practic
picurilor
se face
n mod
automat
cu ajutorul
2
Y
w
A
cromatograma nregistratachizi
nu
vor
fi
raportate
de
ctre
soft-ul
sistemului
de
achiziie
i
prelucrare
a
0
1
/
2
ie si prelucrare
a aria
datelor
cu care
sistemulfi cro
trebuie
precizeze
minim
de este
pic dotat
care poate
m
2 ctre
datelor.
Integrarea
se poate
face
i
manual
de
analist.
Problema
alegerii
liniei
de
baz
In practic
, integrarea
picurilor
se
face
n
mod
automat
cu
ajutorul
soft-ul
sistemului
de
trebuie
s
precizeze
aria
minim
de
pic
care
poate
fi
m
surat
picurile cromatografice din cromatograma nregistrat nu vor.
achizi
ie
i
prelucrare
a
datelor
cu care este
este
dotat
sistemul
cromatografic.
Analistul
(baseline), fa de care se
va
face integrarea,
dificil
atunci
cnd picurile
cromatografice
(fig.vor fi rapo
picurile
cromatografice
din
cromatograma
nregistrat
nu
sistemului
de
achizi
ie
i
prelucrare
a
datelor.
Integrarea
se po
In
practic
,
integrarea
picurilor
se
face
n
mod
trebuie
s precizeze
minim
de
pic
care
poate
fi
m
surat
.
Sub
aceast
limit
5.)
se apropie
ca mrimearia
de
semnalele
din
linia
de
baz
(analitul
se
gsete
n
proba
injectat
la automat
sistemului
de
achizi
ie
i
prelucrare
a
datelor.
Integrarea
se
poate
fac
analist.
Problema
alegerii
liniei
de baz
fa de
picuriledecromatografice
din
cromatograma
nregistrat
nu caz,
vor
fianalistul
raportate
de(baseline),
c tre
soft-ul
limita
detecie a detectorului
cromatografic).
In
acest
trebuie
ntr-o
bun
achizi
ie
i
prelucrare
a
datelor
cu
care
este
dotat
s
analist.
Problema
alegerii
liniei
de baz
(baseline),
fatre de care se
sistemului
de
achizi
ie
i
prelucrare
a
datelor.
Integrarea
se
poate
face
i
manual
de
c
este
dificil
atunci
cnd
picurile
cromatografice
se
apropie
c
aproximaie vizual s stabileasc
media atunci
semnalului
de baz
fa
decromatografice
care
vor alege
X
i Y ca
trebuie
s (baseline),
precizeze
aria
minim
depunctele
picapropie
care
poate
f
este
dificil
cnd
picurile
se
m rim
analist.
Problema
alegerii
liniei
de
baz
fa
de
care
se
va
face
integrarea,
linia
de
baz
(analitul
se
g
se
te
n
proba
injectat
la
limit
n care se va integra picullinia
cromatografic.
Aceast
situaie
este
ilustrat
n
figura
de
mai
jos,
cu
de cromatografice
baz cromatografice
(analitulseseapropie
g sedin
te cromatograma
n rime
proba
ladinlimita de de
picurile
nregistrat
nu
este dificil atunci cnd picurile
ca
m
de injectat
semnalele
alegerea greit i corect a punctelor
de integrare. In acest caz, analistul trebuie ntr-o bun
cromatografic).
cromatografic).
In injectat
acest ie
caz,
analistul
ntr-oIntegrarea
bun apro
linia de baz (analitul se
gsistemului
se te n proba
la
limita
de detec trebuie
ieaadatelor.
detectorului
de
achizi
i prelucrare
stabileasc
media
semnalului
de
baz
fa
de
care
vor puncte
alege
cromatografic). In acest
caz,
analistul
trebuie
ntr-o
bun
aproxima
ie
vizual
s
stabileasc media semnalului de baz fa de care vor alege
analist.
Problema
alegerii
liniei
de
baz
(baseline),
fa
stabileasc media semnalului de baz fa de care vor alege punctele X i Y n care se

este dificil atunci cnd picurile cromatografice se aprop


136 injectat la
linia de baz136(analitul se g se te 136
n proba
cromatografic). In acest caz, analistul trebuie ntr-o
stabileasc media semnalului de baz fa de care vor
136

Linia medie

va integra picul cromatografic. Aceast


situa
de
bazie este ilustrat
de baz
alegerea gre it i corect a punctelor de integrare.

n figura de mai jos, cu

Semnal
Pic
cromatografic
de integrat
X

Linie de baz gre it

Linie de baz gre it

Linia medie
de baz

Fig. 9.4. Fereastra unei por iuni dintr-o cromatogram n c


este corect integrat prin alegerea punctelor X i Y n linia me
Fig.
9.4. Fereastra unei por iuni dintr-o cromatogram n c
(ales neconstant cu drift).

estedecorect
integrat
Linie
baz gre
it

prin alegerea punctelor X i Y n linia me


(ales neconstant cu drift).

In general, ntre aria picului (Apic)

i cantitatea de

tR (min) pg, etc) exis


( Q injectat
, exprimat
g, picului
sau n ng,
analit
In general,
ntrenaria
(Apicsau
) incantitatea
de
Fig. 5 Fereastra unei poriuni
dintr-o
cromatogram
n careia
picul
este corect
integratiei asupra
conformitate
cu func
decromatografic
r spuns 1.3
i a discu
( QXinjectat
,
exprimat
n
g,
sau
n
ng,
sau
n
pg, etc) exis
prinFig.
alegerea
punctelor
i
Y
n
linia
media
a
semnalului
de
baz
(ales
neconstant

cu
drift).
cap.
9.4. Fereastra analit
unei
por 1.2:
iuni dintr-o cromatogram n care picul cromatografic

este corect integrat


prin alegerea punctelor
X ia
i Yde
n linia
media a 1.3
semnalului
de baz iei
conformitate
cu func
r spuns
i a discu
injectat
In general, ntre aria picului
(Apic
) i cantitatea
analit
injectat
n
coloan
( Qanalit
,
(ales
neconstant
cude
drift).
injectat
cap. 1.2:
A pic a b Q analit
exprimat n g, sau n ng, sau n pg, etc) exist o relaie de linearitate:

asupra

injectat
A pic (A
In general, ntre aria
)biQ
cantitatea
de analit
injectat
n coloan
M picului
rimea
Qapicpoate
fi substituit
i prin
concentra
ia probei
analit
injectat
procedura
de
i cea
volumele
de solu ii
( Q analit Mrimea
, exprimat
n g,
sau n ng,
saucalibrare
n pg, etc)probei
existde
oanaliz
rela cu
ie ,condiia
de
linearitate
Q poate
fi substituit
i prin
concentraia
injectate,
ca n n

, s i afiediscu
procedura decu
calibrare
i
de
analiz,
volumele
de
soluii
standard,domeniului
respectiv
prob
analizat,
conformitate
func ia
derimea
ranalizat
spuns
iei asupra
de linearitate
Mcea
Q1.3
poate
fiidentice.
substituit
i prindeconcentra
ia din
probei
Factorul
de
r
spuns
(F
de iiu
i) al unui detector fa
s fie
identice.
cap.
1.2:
procedura de calibrare i cea de analiz , volumele de solu

coloana
este dat
de raportul
dint
Factorul de rspuns (Fie
unui din
fa de cromatografic
un anumit analit i detectat
la ieirea
din
i) alirea
analizat
, s detector
fie identice.
injectat
coloanaAcromatografic
este datanalitului
de raportul idintre
aria picului de
corespunztor
analitului
cantitatea
i cantitatea
analit (unit
i dei imas
) injectat n
(9.6)
pic a b Q analit
Factorul
de
r
spuns
(F
)
al
unui
detector
fa de u
i
de analit (uniti de mas) injectat n coloan:

ie irea din coloana cromatografic este dat de raportul dintr


n

A pic,i ia probei injectate, cu condi ia ca n


M rimea Q poate fi substituit
i prin concentra
Fcantitatea
analitului
i
i
de
(unit i de
mas de
) injectat
i
procedura de calibrare i cea de analiz , volumele
de analit
solu ii standard,
respectiv
prob
Qinjectat
analit
,
i
analizat , s fie identice.
A pic
Factorul de r spuns (Fi) al unui
detector
fa de un anumit analit i detectat la
,i
F
Atunci
cnd
picul
cromatografic
crete
ca
arie,
poriunea
de ariearia
rezultat
prin
integrarea tor
ie irea din coloana cromatografici esteinjectat
dat de raportul dintre
picului
corespunz
Qi analit
mai puini corect,
ilustrat
figura(unit
de mai
sus,mas
devine
nesemnificativ
n raport
analitului
i cantitatea
denanalit
de
n coloan
: cu aria acestuia,
, i ) injectat
137corecte
astfel c n practic nu se mai mrete imaginea semnalului de fond pentru a gsi punctele
de integrare. A pic,i
FDe
(9.7)
i foarte
multe ori, forma picurilor este asimetric. In acest caz, alegerea unei funcii
utile
Qinjectat
analit
,
i
n descrierea formei picului cromatografic este mai dificil. De regul, asimetria se datoreaz
137 unei
aa-zise cozi (tailing) a picului cromatografic, care poate fi n faa picului (pre-tailing) sau n
spatele picului (post-tailing).
Simetria unui pic cromatografic (notat 137
cu Sim) poate fi exprimat n mai multe moduri.
Dac aceasta se msoar n punctele de inflexiune a curbei picului redat n Fig. 3, Sim devine:

este
mp r itunui
de pic
verticala
din maximul(notat
picului n
cnd
w1/2Sim
Simetria
cromatografic
cudou
Sim
Sim
9.2,
devine:
Baceasta
iC
n partea
stng
. In acest
moduri.
Dac
secaz
m simetria
soar ndevine:
punctele de inflex

Sim
C '
9.2, Sim devine:
B fi m surat mai exact la jum tatea n l imii p
Simetria poate
Sim
Sim
verticala din maximul picului n dou
cnd w1/2 este
C mp
In mod
practic,
picurilor cromatografice
' r it decozile
i C n partea
Sim stng . In acest caz simetria devine:
n Simetria
l imii maxime
afi picului
poate
m cozile
suratcromatografic.
mai exact
la In
jumacest
tateacaz
n evid
lsim
im
In mod
practic,
picurilor
cromatografice
se
nu
mai
sunt
corecte.
De
aceea,
se
prefer
m
surarea
rnlimii
itcromatografic.
de picului
verticala
dinacest
maximul
picului n
w1/2 este
Simetria poate fi msurat
maimaxime
exact
la jumtatea
cromatografic,
atuncisimetriile
B
n lcnd
imii
a mp
picului
In
caz
Sim
cnd w1/2 este mprit de verticala
dinsunt
picului
n dou
pri: se
B caz
nprefer
partea
dreapt
i baz
C ntatea
Simetria
poate
fi mai
m
surat
mai
exact
jum
cromatografic
ct
aproape
de
linia
, dar
iC
nmaximul
partea
stng
.aceea,
In
acest
simetria
devine:
nu
mai
corecte.
De
mlade
surarea
lui
Bn is
C
partea stng. In acest caz simetria
devine:
mp aproape
r it de
verticala
din
maximul
cnd
w1/2 este
erorile
legate
delimitarea
picului
(mdesurarea
lui suficient
wpicului
este
cromatografic
ct
mai
de
linia
baz
, dar
B
In
mod
practic,.m
cozile
picurilor
cromatografice
se e
n recomandat
partea
stng
In
acest
caz
simetria
ceai C
mai
surare
este
la
10%
din
erorile
legate
delimitarea
picului
(m
surarea
lui wdevine:
estemaximu
afectat
Sim
l imii
maxime
picului
cromatografic.
Indin
acest
caz simetriil
cea
recomandat
mB10%
surare
este la 10%
maximul
n are
l im
B nimai
C
sunt
nota Ciacu
, respectiv
C10%
, iar
simetria
aceea, dup
se
prefer
mnlimii
surarea
lui B
B B10%
In mod practic, cozile
picurilor
cromatografice
seDe
jumtatea
B nu
i Cmai
suntsunt
notacorecte.
i cu
,evideniaz
respectiv
C10%
, iar simetria
are expres
Sim
ct
mai aproape
de cromatografice
baz
, dar suficies
maxime a picului cromatografic.cromatografic
De aceea, In
se prefer
lui
B i de
C, picurilor
lalinia
o nlime
a picului
mod
practic,
cozile
B
Cmsurarea
10
%
Sim
cromatografic ct mai aproape de
de
baz,
dar
de picului
mare
ca s
evite erorile
legate
erorile
legate
delimitarea
(mse surarea
w este
B10
nlinia
l imii
maxime
a picului
cromatografic.
Inluiacest
cazafect
sim
%suficient
Sim
C
delimitarea picului (msurarea cea
lui
w
este
afectat
de
erori).
In
acest
caz,
cea
mai
recomandat
10
%
mai
recomandat
m
surare
este
la
10%
din
maximul
n
nu mai In
sunt
corecte.
De aceea,
se prefer cromatografice
m surarea lul
practic,
cozile picurilor
Cmod
10
%
msurare este la 10% din maximul
picului,
cndBparametrii
B i CCsunt
cu B10%, are expr
B
ilnlimii
Cimii
sunt
nota ct
i cu
respectiv
,notai
iarde
simetria
10%,aproape
cromatografic
de10%
linia
, dar
n
maxime
a mai
picului
cromatografic.
Inbaz
acest
cazsu
s
respectiv C10%, iar simetria are expresia:
Un
parametru
important
a
unei
separ
ri
cromato
erorile
delimitarea
surarea
lui
este a
Un legate
parametru
important
a unei(m
separ
ri cromatografice
nu
mai
sunt
corecte.
De picului
aceea,
se
prefer
mw
surarea
B
Acesta
semnific
durata
de
timp
n
care
faza
mobil
p
tt00).).Acesta
10
%
cea maiSim
recomandat
surare
lafaza
10%
din
maximul
semnific
timp neste
carelinia
mobil
parcurge
cromatografic
ctdurata
maimde
aproape
de
de
baz
, dar
Cse
Acest
se
m
sura
cunoscnd
debitul
fa
Acest
m , sura
cunoscnd
debitul
mo
10
%
B parametru
i parametru
C sunt
nota
ipoate
cupoate
B10%
respectiv
C10%
, iar
simetria
e
erorile
legate
delimitarea
picului
(m
surarea
luifazei
w are
este
(nacea
cromatografia
gaze)
sau
introducnd
n
in
(n
cromatografia
de de
gaze)
introducnd
injectat
Un parametru important
unei
separri
cromatografice
este
timpul
mort
(notat la
cun10%
t0).proba
Acesta
mai
recomandat
msau
surare
este
dinproba
maxim
Un parcurge
parametru
important
a unei
separ
ride
cromatografic
semnific durata de timp n care
mobil
coloana
Acest
parametru
selichide),
fa
de
faza
stasta
ionar
(ncromatografic.
cromatografia
de
lichide),
care va
fa Bfaza
de
faza
ionar
(n
cromatografia
B10
%
i
C
sunt
nota
i
cu
B
,
respectiv
C
,
iar
simetria
ar
10%
10%
Sim
). Acesta
durata
de
timp
nie
care
mobil
parcur
t0fazei
poate msura cunoscnd debitul
mobile semnific
i lungimea
coloanei
(n cromatografia
defaza
gaze)
sautajutorul
cromatografic
la la
timpul
de
reten
ie
notat
cu
t
.
Cu
cromatografic
timpul
de
reten
notat
cu
.
Cu
aja
0
0
C
10
%
introducnd n proba injectat
un
component
inertse
fapoate
de faza
(n cromatografia
Acest
mstaionar
sura
cunoscnd
fazei
m
calcula
alparametru
foarte
importan
i ai unei
risep
c
calcula
ali doi
i total
doiparametrii
parametrii
foarte
importan
idebitul
aidesepar
unei
B
lichide), care va elua astfel din
coloana
cromatografic
la
timpul
de
retenie
notat
cu
t
.
Cu
ajutorul
0
10
%
(n
cromatografia
de
gaze)
sau
introducnd
n
proba
injectat
reten
ieieajustat,
numit
i timp
de reten
ie netie(tnet
factorul
de c
R) i (t
Simparametru
reten
ajustat,
numit
iimportant
timp
deseparri
reten
) i facto
Rcromatogr
Un
a
unei
separ
ri
acestui parametru se pot calcula
ali doi
parametrii
foarte
importani
aicromatografia
unei
cromatografice:
fa
de
faza
sta
ionar
(n
de
lichide),
care
C
rela
iile:
10%
rela
timpul de retenie ajustat, numit
timp
de retenie
net timpul
(tR) durata
i factorul
capacitate
(k),
Acesta
semnific
dedetimp
n care
faza
mobil
pa
ti0).iile:
cromatografic
la
de reten
ie notat
cu definii
t0. Cu
ajutoru
prin relaiile:
Acestt 'Rparametru
se poate
m sura
cunoscnd
debitul
calcula
alUn
it Rdoi
foarte
importan
isepar
ai unei
separfaz
ri
t 0parametrii
parametru
important
a
unei
ri
cromato
t
'
t
t
(n cromatografia
de igaze)
sau
introducnd
ni factorul
proba
inje
R
R de
0vedere
punct
practic,
minimul
separ
rii mobil
croma
reten
ie ajustat,
numit
timp
de
reten
ien
net
(t
de
R)faza
Acesta
semnific
durata
de
timp
care
t0). Din
fai (nota
de tfaza
sta tionar
cromatografia
lichide),
injecta
i n ordinea
elu iei(ncresc
toare cu i de
i j) n
coloanaca
rela
iile:
'se
R t0
R poate m sura cunoscnd debitul f
Acest
parametru
k
'
atuncicromatografic
cnd picurile
lor timpul
cromatografice
ajung
lin
notatncusemnalul
t0. Cu aju
tt R t 0la
t 'R de reten ie
tpractic,
(n
cromatografia
de
gaze)
sau
introducnd
n
proba
i
Din
punct
de
vedere
minimul
separ
rii
cromatografic
0
0
k
'
t 'R
separare
cromatografic
exprimat
prin rezolu
cromatog
calcula
al i tdoi
foarte importan
i aiia unei
sepa
Rt tparametrii
0 este
t
isimetrice
(nota
nformula
ordinea
elu
ieiionar
cresc
toare
cu i i j)
neste
coloana
cromato
Din punctinjecta
de vedere
practic,
separrii
cromatografice
a doi
compui
injectai
(notai
fai minimul
de
faza
(n
cromatografia
de
lichide),
0sta
0a acestui
de
calcul
parametru
dat
de
exp
reten
ie
ajustat,
numit
i
timp
de
reten
ie
net
(t
)
i
factoru
R
n ordinea eluieiatunci
cresctoare
cucromatografic
i picurile
i j) n coloana
cromatografic
se
obine
atunci
cnd
picurile
lor
cnd
lor cromatografice
ajung
n
semnalul
liniei
de
de reten ie notat cu t0. Cu a
t RGradul
t 0ladetimpul
tseparare
'R
rela
cromatografice ajung
n semnalul
linieiiile:
dekbaz.
cromatografic
este
exprimat
separare
cromatografic
este
exprimat
print rezolu
ia cromatografic
(R
'
t Rparametrii
calcula al( tiR ,doi
i ai unei se
138 parametru
jtsimetrice
,i ) tformula( t de
R ,foarte
jcalcul
R ,ia)importan
prin rezoluia cromatografic
(Rs).
Pentru
picuri
acestui
0a acestui
0 2parametru este dat de expresia:
R sde
simetrice formula
reten
ie calcul
ajustat,
i timp
ie net
(t ) i fact
0t,'5R ( wt Ri numit
wt 0j )
( w1 de
w 2reten
)
este dat de expresia:
138 R
rela
iile: t )
(t
(t
t )
R, j

R ,i

R, j

R ,i

t)R 2poate
t 0 ( w t 'Rdeduce
InR s felul
c minimul
lui Rs pentr
0,5 acesta
( w i tk'R'w jse
138
t
t
1 w2)
R
0
cromatografice i i tj s fiet separare n linia de baz este 1
0
0
separate,
surarea
wi cele
i wdou
poate
avea loc. i innd co
j nupicuri
In felul acesta se poate
deduce cmminimul
lui Rpentru
cromatografice
s pentru ca
In felul2w
acesta
se
poate
deduce
c
minimul
lui
R pentru ca c
t R iei
tnu
t 'R
formula
devine:
i j s fie separare n linia de baz
1. Dacrezolu
picurile
separate, msurarea pentru swi i wj
1/2,j,este
0 sunt
k
'
cromatografice
i 1/2,i
j si wfie
separare nrezoluiei
linia de
baz este 1. Dac
nu poate avea loc.
innd cont c: wi =i 2w
devine:
j =t 2w1/2,j, formula
t
0
0
separate, m surarea pentru
cont c : w
t R, j w
t Ri ,i i wj nu poate avea loc. innd
138
Rs
2w1/2,j, formula rezolu
iei devine:
w 1 / 2, i w 1 / 2, j
t R , j este
t R ,idat de factorul de separare (notat cu ij) a doi
O msur a selectivitii cromatografice
138dat de fac
Rs
sur
a selectivit
ii cromatografice este
compui i i j (elund n aceast ordine),
care
este
definit
prin
relaia:
w1O/ 2,m
w
i
1 / 2, j
cu ij) a doi compu i i i j (elund n aceast ordine), care este de

O m sur a selectivit
t 'R , j k ' j ii cromatografice este dat de factorul de
cu ij) a doi compu
ij i i i j (elund1n aceast ordine), care este definit pri
t 'R , i k 'i

t' , j k' j
O m ijsur Ra
selectivit
este dat de
1 ii ricromatografice
Eficien a t ' unei
separ
cromatografice
se re
k
'
cu ij) a doi compuR , ii i i ji (elund n aceast ordine), care este

cromatografic: cu ct picul cromatografic este mai ngust, c


separ rii cromatografice.
Cantitativ,
eficien a unui proces
t 'R , j a k 'unei
Eficien
separ ri cromatografice se re
j
1 (notat
numcromatografic:
rul deij talere cu
teoretice
cu N). Conceptul
de talec
ct
picul
cromatografic
este mai ngust,
t
'
k
'
R ,i
teoria
distilriirii,
care
ni cazul Cantitativ,
unei separeficien
ri cromatografice
separ
cromatografice.
a unui process
Eficiena unei separri
cromatografice
reflectteoretice
nn
lrgimea
picului
cromatografic:
cu ct de
coloana
cromatografic
care(notat
se stabile
echilibrul
detale
di
num
rul de se
talere
cu
N).te
Conceptul
Eficien
a
unei
separ
ri
cromatografice
se
refle
picul cromatografic este
mai
ngust,
cu
att
mai
mare
este
eficiena
separrii
cromatografice.
mobilteoriai distil
fazarii,sta
ionar
. Formula
de ricalcul
a num s
care
n cazul
unei
separ
cromatografice
cromatografic:
ct
picul
cromatografic
este[90]
mai
cu a
Cantitativ, eficiena unui proces
de separare secu
exprim
prin numrul
de talere teoretice
(notat ngust,
cu
corespunz
tor
unui
analit
i
este
urm
toarea:
coloana
cromatografic
n
care
se
stabile
te
echilibrul
de
d
N). Conceptul de taler teoretic este mprumutat din teoria distilrii, care n cazul unei separri

separ rii cromatografice. Cantitativ, eficien a unui proces de

mobil
i faza
sta ionar
. Formula
dese stabilete
calcul de
a taler
numt
cromatografice s-ar traduce
prinrul
poriunea
din coloana
cromatografic
care
num
de talere
teoretice
(notat
cu nN).
Conceptul
[90]
t
corespunz
tor
unui
este separ
urmFormula
toarea:
echilibrul de distribuie alteoria
analitului
ntrerii,
faza
i faza iunei
staionar.
de calcul a
R
, i mobil
2 n analit
distil
care
cazul
ri cromatografice
s-a
N
(
)
i
numrului de talere teoretice Ni corespunztor unui analit i este urmtoarea:

coloana cromatografic
n care se stabile te echilibrul de distr
i t
R
,
i
2
mobil
i N
faza
sta )ionar . Formula de calcul a num ru
i (
[90]
corespunz
tor unui
analit
este urmde
toarea:
innd
cont de
rela iia
9.3,i formula
calcul a parametrului

Formula de calcul a parametrului N devine:


innd contt Rde
formula de calcul a parametrului
, i rela
2 t R ,iia 9.3,
2
N
(
)
i
N i 5,54 (
)
i w
1 / 2t,iR ,i 2
N i 5,54 (
)
nlimea talerului teoretic
cu rela
h) se ia
poate
cunoscnd
lungimea
coloanei
w
innd (notat
cont de
9.3,
de calcul
a parametrului
N
1 /calcula
2,formula
i
n l imea talerului teoretic (notat cu h) se poate
cromatografice L: h = L/N.
Cu aceste ultimecoloanei
noiuni, se poate
reveni la formulaL:
de hcalcul
a rezoluiei. innd cont de
cromatografice
=teoretic
L/N.
t talerului
n de
l imea
(notat
cu h)dese poate
Rrezoluiei,
,i 2
relaiile anterioare se poate deduce Cu
formula
calcul
a
pentru
picuri
cromatografice
N iaceste
5,54 (ultime)no iuni, se
poate
reveni
la formula
coloanei
h = eficien
L/N. (N):
w1 / 2,i deL:
arii aproximativ egale i caracterizate
ntr-ocromatografice
bun aproximaie
aceiai
Rs

N
4,7

cont de relaCu
iileaceste
anterioare
formula
de ca
ultimese
no poate
iuni, sededuce
poate reveni
la formula
k 'cromatografice
de
arii aproximativ
egale
i caracterizate
i
de lrela
iiletalerului
anterioare
se poate
deduce
de ca
(9.18)
( ijcont
1) n
imea
teoretic
(notat
cu
h)formula
se poate
ca
k 'i aceia
1
i
eficien
(N):
cromatografice
de
arii
aproximativ
egale
i
caracterizate
coloanei cromatografice L: h = L/N.

aceia
i eficien
(N): no iuni,
Ecua ia de baz pentru rezolu
ia ntre
2 picuri cromatografice
inegale
ca arie,reveni
notate cu
Cu
aceste
ultime
se poate
la i formula d
i j poate fi propus princont
modificarea
celei
de
mai
sus,
n
forma:
de rela iile anterioare se poate deduce formula de calcu
Rs

139
cromatografice de arii aproximativ egale i 139
caracterizate
k'
(9.19)
( ij 1) i eficien (N):
aceia

N
4,7 k ' 1

, unde k ' este media aritmetic a celor doi factori de capacitate pentru anali ii i i j, ki i
139
devine:
respectiv kj. Cu aceste preciz ri, rezolu ia dintre cele dou picuri cromatografice
Rs

N k ' j k 'i k 'i k ' j


4,7
k 'i
k 'i k ' j 2

Maximul raportului

(9.20)

k 'i k ' j
este 1, atunci cnd ki i kj sunt foarte mari. Pe de alt parte,
k 'i k ' j 2

pentru k mare, picurile cromatografice devin foarte largi, cu timp de reten ie foarte mare,
uneori greu de integrat. De aceea, valoarea lui k ntre 1 i 20 este considerat ca
acceptabil .
9.3. Teoria talerelor
Aceasta teorie este una dintre cele mai importante teorii n modelarea procesului
cromatografic, ini iat de Martin i Singh i apoi dezvoltat de Said.[91] Teoria talerelor
descrie practic curba de elu ie (cromatograma) unui anumit compus chimic. Aceast
teorie propune c un analit participant la un proces cromatografic particip la un echilibru
de reparti ie (distribu ie) ntre faza mobil i faza sta ionar , pe o por iune mai mult sau

Separarea prin cromatografie de gaze (GC)


Scurt istoric
Cele dou direcii ale cromatografiei de gaze (GC) s-au dezvoltat aproximativ n acelai
timp; n anul 1951 Erika Cremer punea bazele cromatografiei gaz-solid, iar n 1952 James i Martin
publicau prima lucrare consacrat cromatografiei gaz-lichid. Un salt imens n acest domeniu se
datoreaz lui Golay, cel care n anul 1957 a introdus coloanele capilare n separarea GC. Trebuie
menionat faptul c n prezent, mai mult de 90% din aplicaiile GC se efectueaz utiliznd coloane
capilare, pe peretele crora sunt depuse fazele staionare. De asemenea, trebuie menionate
contribuiile majore aduse de Giddings n teoria optimizrii separrilor cromatografice i corelrii
cu condiiile experimentale de lucru.
Alte contribuii majore la dezvoltarea acestei tehnici sunt legate de introducerea programrii
de temperatur n procesele de separare GC (Stephen Dal Nogare, 1958), realizarea fazelor
staionare de tip polisiloxanic sau dezvoltarea tehnicilor de detecie, universale sau specifice. O dat
cu cuplarea cromatografiei de gaze cu spectrometria de mas, demonstrat pentru prima dat de
Holmes i Morrell (1957), aceast tehnic analitic cunoate un mare succes. Un pionier uitat, din
pcate, al cromatografiei de gaze este Clark Hamilton, cel care a realizat primele microseringi care-i
poart numele i care sunt foarte utilizate i astzi.
Tipuri de coloane n cromatografia de gaze
Procesul de separare cromatografic se desfoar n coloana cromatografic. Coloanele n
cromatografia de gaze pot fi clasificate n urmtoarele tipuri:
1) Coloane umplute, n care umplutura este reprezentat de ctre faza staionar depus pe un suport
inert, iar materialul astfel rezultat este introdus mecanic ntr-o coloan (metalic sau silice topit, cu
diametrul de ordinul mm i lungimea de pn la 1 m).
2) Coloane capilare (WCOT wall coated open tubular) avnd pe peretele interior un film lichid
imobilizat, cu grosime de strat ntre 0,1 i 5 m (de regul 0,25 m). Coloanele capilare sunt
construite din silice topit sau borosilicat, acoperite la exterior dintr-un strat protector de polimer.
Lungimea acestora este de pn la 100 m, iar diametrul interior ntre 0,05 1 mm. Eficiena
acestora este foarte mare, separrile cromatografice pe astfel de coloane atingnd 5.000-10.000
talere/m lungime de coloan.
3) Coloane capilare avnd pe peretele interior depus un strat cu grosimea de cel mult 30 m, alctuit
din particule ale unui suport inert (de exemplu, pmnt diatomeic) pe care este depus faza
staionar propriu-zis dat de un film lichid cu grosimea de maximum 1 m (SCOT supportcoated open tubular). Imaginile seciunilor acestor dou tipuri de coloane capilare sunt redate n
figura 6.

SCOT

WCOT

Perete

Strat
imobilizat

Particule de
suport
Fig. 6. Seciunea printr-o coloan de tip WCOT i SCOT.

Fig. 10.1. Sec iunea printr-o coloan de tip WCOT i SCOT.


Faze staionare n cromatografia gaz-solid (GSC)

10.3. Faze
sta ionare
n cromatografia
gaz-solid
(GSC)
Faza staionar
este solid
i este dat de un adsorbant.
De aceea
GSC mai este denumit i

cromatografie de adsorbie. O serie de avantaje ale acestor faze staionare fa de cromatografia


gaz-lichid
menionate:
Faza
sta(GLC)
ionarpot fieste
solid i este dat de un adsorbant. De aceea GSC mai
- stabilitateai mare
peste un intervalde
de temperaturi
mai larg;
este denumit
cromatografie
adsorb ie.
O serie de avantaje ale acestor faze
mai
puin
sensibile
la
aciunea
oxigenului;
sta ionare fa de cromatografia gaz-lichid (GLC) pot fi men ionate:
- fenomenul de degradare a fazei staionare (aa-numitul efect de bleeding) este practic
stabilitatea
mare peste un interval de temperaturi mai larg;
inexistent;
mai pu in
sensibile mai
la ac
oxigenului;
- selectivitatea
buniunea
la separarea
de izomeri geometrici sau izotopici;
fenomenul
de
degradare
a
fazei
sta
(a sau
a-numitul
de bleeding) este practic
- selectivitatea mai bun fa de compuiionare
anorganici,
organici cuefect
mase moleculare
mici.
inexistent;
Principalii
adsorbani
utilizai
ca faze staionare
n cromatografia
gaz-solid
selectivitatea
mai
bun la
separarea
de izomeri
geometrici
sausunt:
izotopici;
1)
SiO2
(silice),
tratat
termic
la
temperaturi
de
700
950C.
selectivitatea mai bun fa de compu i anorganici, sau organici cu mase moleculare
2) Alumina (Al2O3), tratat termic.
mici.
Aceti doi adsorbani pot fi utilizai la separarea de hidrocarburi
saturate i
[93]
Principalii
adsorban
i
utiliza
i
ca
faze
sta
ionare
n
cromatografia
gaz-solid
sunt:
nesaturate, cu mase moleculare mici, a derivailor halogenai inferiori, sau chiar a unor derivai
ai
1)benzenului.
SiO2 (silice), tratat termic la temperaturi de 700 - 950 C.
3) C grafitizat
nclzirea negrului de fum la temperaturi ridicate (aproximativ
2) Alumina
(Al2O3se
), obine
tratatprintermic.
3000C),
ntr-o
atmosfer
de
gaz
inert.
Astfel, ni timpul
procesului termic
loc formarea unor
Ace ti doi adsorban i pot fi utiliza
la separarea
de are
hidrocarburi
saturate i
microcristalite
de
tip
grafit.
nesaturate, cu mase moleculare mici, a deriva ilor halogena i inferiori, sau chiar a unor
Retenia analiilor pe C grafitizat poate fi explicat pe baza accesibilitii acestora la dou
deriva i aitipuri
benzenului.
de centre active de adsorbie:
3) C grafitizat
se ob aine
prinsunt
ncnepolare
lzireai negrului
de reele
fumdelaatomi
temperaturi
a) Marea majoritate
acestora
corespund unei
de C de tip ridicate
aproximativ
3000
C),
ntr-o
atmosfer
deo preferin
gaz inert.
Astfel,
timpulgrupri
procesului
termic are
grafitic.
Aceste
centre
de adsorbie
nu arat
pentru
analiiin
coninnd
funcionale
polare.
Forele
de dispersie stau la
oc formarea
unor
microcristalite
debaza
tipseparrilor
grafit. ntre analii.
de adsorbie
polare sunt ntr-o
mic
proporie n matricea
adsorbantului
de tipiiCacestora
Reten b)
ia Centrele
anali ilor
pe C grafitizat
poate
fi explicat
pe baza
accesibilit
grafitizat, dar pot da interacii puternice cu analiii polari. Tratamentul preliminar al acestui
a dou tipuri de centre active de adsorb ie:
adsorbant poate conduce la o reducere semnificativ a acestora. Astfel, prin nclzirea la 1000C,
a)ntr-un
Marea
majoritate a acestora sunt nepolare i corespund unei re ele de atomi
curent de H2, are loc o dezactivare a centrilor activi alctuii din compleci de suprafa ai
de C de oxigenului,
tip grafitic.
centre
de
adsorb ie nu arat o preferin pentru anali ii
n timpAceste
ce splarea
cu HClO
4 sau H3PO4 elimin complecii bazici carbon-oxigen sau
con inndsulful
grup
func
ionale polare. For ele de dispersie stau la baza separ rilor ntre
sub ri
form
de sulfuri.

anali i.

b) Centrele de adsorb ie polare sunt ntr-o mic propor ie n matricea


adsorbantului de tip C grafitizat, dar pot da interac ii puternice cu anali ii polari.
Tratamentul preliminar al acestui adsorbant poate conduce la o reducere semnificativ a

4) zeolii, bile polimerice poroase sau ciclodextrine sunt utilizate la separarea de compui
anorganici sau organici gazoi, cu dimensiuni moleculare mici, principiul de separare fiind acela al
excluziunii sterice. De exemplu, componentele aerului (N2, O2, Ar, CO2), dar i unii poluani
anorganici (CO, CH4) pot fi separate pe coloane umplute cu zeolii (faza staionare numite i site
moleculare), cu diametrul porilor de 5. Dac se utilizeaz polimeri poroi, O2, N2, Ar, NO sau CO,
nu pot fi separate, din cauza porilor prea mari.
Cteva exemple din cei mai importani adsorbani, de tip anorganic sau organici, utilizai n
GSC i comercializai sunt redai n tabelul 2
Tabelul 2. Adsorbani anorganici sau organici utilizai n GSC.
Tip adsorbant

Silice

C grafitizat

Polimeri poroi

Nume comercial

Suprafaa specific
(m2/g)

Diametrul porilor
(nm)

Spherosil XOA 400


Spherosil XOA 200

300 500
140 - 230

8
15

Spherosil XOB 075


Spherosil XOB 030
Spherosil XOB 015

75 125
37 62
18 - 31

30
60
125

Spherosil XOC 005

5 - 15

300

Porasil B
Porasil C

125 250
50 - 100

10 20
20 - 40

Carbopack B
Carbopack C

100
12

Carbosieve

1000

1,3

Spherocarb

1200

1,5

Chromosorb 101 (rini


poliaromatice)

< 50

300 - 400

Porapak P sau Q
(copolimeri ai stirenului
cu etilvinilbenzen)

> 500

7,5

Ciclodextrinele sunt oligozaharide, coninnd uniti de glucopiranoz, conformaia scaun,


legate ntre ele n poziiile 1,4. -Ciclodextrina conine 6 uniti de glucoz, -ciclodextrina conine
7 astfel de uniti, iar -ciclodextrina conine 8 uniti. Geometria acestor molecule este de trunchi
de con, cu ambele capete deschise. Interiorul cavitii conine doar grupri metilenice sau puntea
glicozidic, structur ce confer compui unele proprieti hidrofobe i o densitate electronic mare
(datorit O), care s participe la formarea de asociaii moleculare cu compuii de separat. Astfel c
separarea componenilor unei probe are la baz stabilitatea acestor asociaii moleculare: cu ct
moleculele unui component formeaz asociaii mai stabile cu ciclodextrinele, cu att retenia
acestuia este mai mare. Molecule mari de compui care nu pot ptrunde n cavitatea ciclodextrinei
nu vor interaciona cu ea i astfel vor elua mai rapid din coloan prin comparaie cu unele molecule
mici, ce pot ptrunde n interiorul cavitii. Gruprile hidroxil libere sunt alchilate sau acilate total,
astfel nct nu vor interaciona prea puternic cu eventuale grupri polare ale compuilor separai.
Fixarea acestor faze staionare pe pereii unei capilare se poate face prin dizolvarea lor n
polidimetilsiloxan (total apolar), care ader astfel la pereii coloanei. Domeniul de temperatur n
care pot fi folosite ciclodextrinele ca faze staionare este 30 - 250C. Principala utilizare a acestor
faze staionare este n separarea izomerilor de poziie, geometrici sau optici (enantiomeri sau

care
ader astfel la pere ii coloanei. Domeniul de temperatur
cisai 2-metilciclohexanolului.

n care pot fi folosite


ciclodextrinele ca faze sta ionare este 30 - 250 C. Principala utilizare a acestor faze
sta ionare este n separarea izomerilor de pozi ie, geometrici sau optici (enantiomeri sau
[96]
De ionare
exemplu,
-ciclodextrina poate
separa izomerul
diasteroizomeri).
10.4. Faze
sta
n cromatografia
gaz-lichid
(GLC) trans- de izomerul
diasteroizomeri).[96]
De exemplu, -ciclodextrina poate separa izomerul trans- de izomerul cis- ai
cisai 2-metilciclohexanolului.

2-metilciclohexanolului.
Fazele lichide n GC nu sunt lichide propriu-zise; ele au aspect de clei, sau gum

(de unde i denumirea lor n englez de gums). Mobilitatea lor le aseam n cu lichidele,
10.4. Faze
sta ionare n
cromatografia gaz-lichid (GLC)
staionare
n cromatografia
iar Faze
aceast
proprietate
este gaz-lichid
utilizat (GLC)
la depunerea lor pe pere ii capilarei sau pe
particuleleFazele
unui lichide
suportninert.
Particulele
inerte
pot fi pele
mnturi
diatomeice
saugum
silicagel
GC nu
sunt lichide
propriu-zise;
au aspect
de clei, sau
Fazele
lichide
n
GC
nu
sunt
lichide
propriu-zise;
ele
au
aspect
de
clei,
sau
gum
(de
unde
i
silanizat
(inertizat)
prin una
procedurile
urm Mobilitatea
toare:
(de unde
i denumirea
lor ndin
englez
de gums).
lor le aseam n cu lichidele,
denumirea lor n englez de gums). Mobilitatea lor le aseamn cu lichidele, iar aceast

iar aceast proprietate este utilizat la depunerea lor pe pere ii capilarei sau pe
proprietate este utilizat la depunerea lor pe pereii capilarei sau pe particulele
unui suport inert.
CH3
particulele unui suport inert. Particulele inerte pot fi p mnturi
diatomeice sau silicagel
Particulele inerte potOH
fi pmnturi diatomeice sau silicagel silanizat (inertizat) prin una din
silanizat (inertizat)Siprin
una din procedurile urm toare: Si O Si CH3
procedurile urmtoare:
O

+ (CH3)3SiCl

Si
Si OH
OH

+ (CH3)3SiCl

Trimetilclorsilan

Si OH

- HCl

Trimetilclorsilan

CH3

CH3

Si SiO OH
Si CH3
O

- HCl

CH3

Si OH

+ (CH3)3Si-NH-Si(CH3)3
Hexametildisilazan

Si OH
OH
Si

+ (CH3)3Si-NH-Si(CH3)3

Hexametildisilazan

Silicagel
Si OH

Si

CH3

Si O CH
CH3 3
O Si CH
3
Si Si
O CH
O CH3
3
Si CH3
O

Si OH
O

CH3

- NH3
- NH3

Si O CH3CH3
Si CH3

Silicagel

[97]
CH3
Cele mai cunoscute faze sta ionare n GLC sunt uleiurile polisiloxanice.
Acestea sunt
Celecadrul
mai cunoscute
n GLC
polisiloxanice.
Acestea
sunt uleiurilor
utilizate n
celor faze
dou staionare
variante
de sunt
GLCuleiurile
(WCOT,
SCOT).[97]
Sinteze
Cele
mai ncunoscute
faze
GLC
sunt al
uleiurile
polisiloxanice.
Acestea
utilizate
cadrul
celorte
dou
variante
de n
GLC
(WCOT,
SCOT).
Sinteze
uleiurilor
polisiloxanice
polisiloxanice
porne
desta
laionare
derivatul
dietoxiR,R-silanului
i urmeaz
urmsunt
toarele
utilizate
n
cadrul
celor
dou
variante
de
GLC
(WCOT,
SCOT).
Sinteze
uleiurilor
de lachimice
derivatul de
dietoxial R,R-silanului i urmeaz urmtoarele dou procese chimice de
doupornete
procese
transformare:

polisiloxanice
transformare: porne te de la derivatul dietoxi- al R,R-silanului i urmeaz
dou procese chimice de
R transformare:
R
C2H5O Si OC2H5
R

C2H5O R
Si OC2H5
R
R

n HO Si
R OH
n HO R
Si OH
R

+ 2 HOH

+(hidroliza)
2 HOH
(hidroliza)

(policondensare)
(policondensare)

HO Si OH
R

HO Si ROH

urm toarele

+ 2 C2H5OH

+ 2 C2H5OH

RR

( Si O )
+ n HOH
R
n
( Si RO )
+ n HOH
n

R
poli(R,R-siloxan)
poli(R,R-siloxan)

Func
ie de
denatura
natura
radicalului
se cunosc
mai
multe
tipuri
de faze
ionare din
Funcie
radicalului
R se R
cunosc
mai multe
tipuri
de faze
staionare
dinsta
clasa
Func
ie
de
natura
radicalului
R
se
cunosc
mai
multe
tipuri
de
faze
sta
ionare
polimerilor
siloxanici,
avnd structurile
generice date
n tabelul
3. Caracteristicile
acestor
faze din
clasa
polimerilor
siloxanici,
avnd structurile
generice
date
n tabelul 10.2.
Caracteristicile
clasa
polimerilor
siloxanici,
structurile generice date n tabelul 10.2. Caracteristicile
staionare
acestor
fazesunt
staurmtoarele:
ionare
suntavnd
urm toarele:
acestori)i)
faze
sta
ionare sunt
urm
Masa
molecular
medie
(sautoarele:
gradul
policondensare,
n);
Masa
molecular
medie
(saude
gradul
de policondensare,
n);
i)
Masa
molecular
medie
(sau
gradul
de
policondensare,
n);
ii)
Polaritatea;
ii) Polaritatea;
ii) Polaritatea;
Stabilitatea termic;
iii)iii)
Stabilitatea
termic ;
iii) Domeniul
Stabilitatea
termic (clasa
;
iv)
de aplicaii
de compui separai);
v) Selectivitatea separrilor.
151
Stabilitatea termic a fazei staionare este 151
important,
pentru c la temperaturi mai mari ale
regimului de separare, faza staionar s nu se descompun i astfel s induc produi care s

iv)
Domeniul de aplica ii (clasa de compu i separa i);
iv) Domeniul de aplica ii (clasa de compu i separa i);
v)
separ rilor.
rilor.
v) Selectivitatea
Selectivitatea separ
Stabilitatea
termic aa fazei
fazeista
staionare
ionareeste
esteimportant
important, pentru
, pentru
la temperaturi
Stabilitatea termic
c cla temperaturi
mai
mari
ale
regimului
de
separare,
faza
sta
ionar
s
nu
se
descompun
i astfel
interfere
analiii
din prob.de
In separare,
plus, prin faza
degradare
calitile
fazei
se diminueaz.
maicumari
ale regimului
sta ionar
s nu
se staionare
descompun
i astfel
s s
induc
produ
interfere
cuanali
anali
dinprob
prob
. de
Inplus,
plus,
prin
degradare
calit
Domeniul
de temperatur
n care
pot fi utilizai
aceti
polimeri
este
la
temperatura
ambiant
induc
produ ii care
care
ss interfere
cu
ii iidin
. In
prin
degradare
calitpn
ile ile
fazei
sta
ionare
se
diminueaz
.
Domeniul
de
temperatur
n
care
pot
fi
utiliza
i
ace
fazei sta
. Domeniul
de temperatur
pot fi utiliza
i ace ti ti
la 300-350
C, ionare
exceptnd diminueaz
polietilenglicolul
care peste
175-200 C nsecare
descompune.
Stabilitatea
polimeri
este
de
temperatura
ambiant
pn
300-350
exceptnd
polietilenglicolul
polimeri
este
de la temperatura
pn
lala300-350
C,C,
exceptnd
polietilenglicolul
termic
depinde
de natura
radicalilor R ambiant
(de
exemplu,
trifluorpropil
este
cel
mai stabil
termic) i de
care
peste
175-200
C
se
descompune.
Stabilitatea
termic
depinde
de
natura
radicalilor
care
peste
175-200
se
descompune.
Stabilitatea
termic
depinde
de
natura
radicalilor
gradul de policondensare: cu ct n este mai mare, cu att stabilitatea termic a fazei staionare
este
R
(de
exemplu,
trifluorpropil
este
cel
mai
stabil
termic)
i
de
gradul
de
policondensare:
cu cu
R
(de
exemplu,
trifluorpropil
este
cel
mai
stabil
termic)
i
de
gradul
de
policondensare:
mai mare.
ct
n
este
mai
mare,
cu
att
stabilitatea
termic
a
fazei
sta
ionare
este
mai
mare.
ctSen cunosc
este mai
cu att
termic
a fazei
este
mai
faze staionare
de stabilitatea
tip polisiloxanic
n care
ntresta
doiionare
atomi
de
Siatomi
suntmare.
intercalate
Se cunosc
cunosc
faze
ntre
doidoi
de
Si sunt
Se
faze sta
sta ionare
ionarede
detip
tippolisiloxanic
polisiloxanicnncare
care
ntre
atomi
de
Si sunt
grupriintercalate
aromatice,grup
aa cum
se
poate
observa
din
exemplul
urmtor:
ri aromatice,
dindin
exemplul
urm
tor:tor:
intercalate grup ri
aromatice, aa aacum
cumse
sepoate
poateobserva
observa
exemplul
urm
3

[[ Si O ] ][ Si
Si O x [ Si
CH3

CH
3
CH

CH
3
CH

CH
CH3

Si

Si

CH3

CH3

O y

CH3

CH3

CH3

O ] y]

Polimerul de tip silfenilen este caracterizat de un domeniu mai larg de stabilitate


Polimerul
de tip
este caracterizat
de structuri
un mai
domeniu
larg de
stabilitate
Polimerul
de tip
silfenilen
esteasemenea,
caracterizat
de un
domeniu
larg
demai
stabilitate
termic
termic
(pn
la 400
C).silfenilen
De
s-au
realizat
polisiloxanice
con
innd
termic
(pn
la
400
C).
De
asemenea,
s-au
realizat
structuri
polisiloxanice
con
(pn structuri
la 400 tridimensionale
C). De asemenea,
s-au realizat
structuri
polisiloxanice
de tip carboranic,
care
s-au dovedit
a fi utile nconinnd
separ rile structuri
GC. innd
structuri tridimensionale
tip s-au
carboranic,
s-au
fi utile n separ rile GC.
tridimensionale
de tip carboranic,decare
dovedit acare
fi utile
n dovedit
separrilea GC.
CH3

CH3

CH3

CH3

CH3

CH3

[ Si O ] [ Si
x

Si

[ Si O ] [ Si
x
CH3

CH3

Si

CH3

CH3

O]y

O]y

CH3

CH3

La temperaturi ridicate, peste valorile indicate anterior, fazele sta ionare de tip
polisiloxanic
ncep s se
degradeze,
fenomen
cunoscut
sub numele
de bleeding.
La temperaturi
ridicate,
peste
valorile
indicate
anterior,
fazele
sta
ionare De
de tip
La temperaturi
ridicate,
peste valorile
indicate
anterior,
fazele
staionare
de tip
polisiloxanic
asemenea,
prezen
a
oxigenului
i
a
vaporilor
de
ap
n
gazul
purt
tor
utilizat
ca faz De
polisiloxanic
ncep
s
se
degradeze,
fenomen
cunoscut
sub
numele
de
bleeding.
ncep mobil
s se degradeze,
fenomen
cunoscut
sub numele
de bleeding. De asemenea, prezena
n GC
conduce
n timp
la diminuarea
performan
asemenea,
prezen
a oxigenului
i a vaporilor
de apelorncoloanei.
gazul purt tor utilizat ca faz
oxigenului i a vaporilor de ap n gazul purttor utilizat ca faz mobil n GC conduce n timp la
mobil nCa
GCfaze
conduce
n timp
diminuarea performan
coloanei.
stacoloanei.
ionare
n la
cromatografia
de gaze nelor
variantele
WCOT sau SCOT,
diminuarea performanelor
men ionate anterior, mai pot fi utilizate i urm toarele materiale:
Ca faze
staionare
cromatografia
de gaze n de
variantele
sau SCOT,
Ca
faze stanionare
n cromatografia
gaze nWCOT
variantele
WCOTmenionate
sau SCOT,
- polietilenglicolsuccinat;
anterior,
pot
fianterior,
utilizate i
urmtoarele
materiale:
menmai
ionate
mai
pot fi(EGA);
utilizate
i urm toarele materiale:
- polietilenglicoladipat
-- polietilenglicolsuccinat;
- polietilenglicolsuccinat;
polietilenglicoltereftalat;
-- polietilenglicoladipat
- polietilenglicoladipat
(EGA); (EGA);
polibutandiolsuccinat;
polietilenglicoltereftalat;
- acizi gra i nemodifica i;
- polietilenglicoltereftalat;
- polibutandiolsuccinat;
deriva i de tip polimeric halogena i;
- polibutandiolsuccinat;
acizi
gra
i nemodifica
Triton
X-100;
X-305; i;
- acizi grai nemodificai;
-- deriva
i
de
tip
polimeric halogena i;
polipropilenglicol;
- derivai de
tip polimeric halogenai; - Triton X-100; X-305;
sorbitol;
-- Triton
X-100; X-305;
- polipropilenglicol;
tricrezilfosfat.
-- polipropilenglicol;
- sorbitol;
- sorbitol;
- tricrezilfosfat.
- tricrezilfosfat.
152

152

Squalan
(nepolar)

Hidrocarburi alifatice cu p.f.


jos, amide inferioare, esteri
C30H62*
ai acizilor gra i, terpene,
etc,
Tabel
10.2.
Tipuri
de
faze
sta
ionare
cu
caracter
lichid
utilizate
nnGC.
Tabel
10.2.
Tipuri
de
faze
sta
ionare
cu
caracter
lichid
utilizate
GC.
Tabelul 3.
Tipuri de faze staionare cu caracter lichidCompu
utilizate
GC. n de
i
polari;
ex.
Polidimetilsiloxan
CH
3
Structura
chimic
Denumire/caracter
Aplica iiAplica ii
Structura
chimic
Denumire/caracter
Tabel
10.2.
Tipuri
de
faze
sta
ionare
cu
caracter
lichid
utilizate
n
GC.
TabelTipuri
10.2.de
Tipuri
de
sta cu
ionare
lichid utilizate
alcaloizi,
deriva
i volatili
(practic
nepolar
) cu caracter
10.2.
faze
stafaze
ionare
caracter
lichid utilizate
n
GC. n GC.
( Si Tabel
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
cu p.f.ai cu p.f.
O )chimic
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
Tabel
10.2.
Tipuri
de
faze
sta
ionare
cu
caracter
lichid
utilizate
n
GC.
Structura
Denumire/caracter
Aplica
ii
Structura
chimic
Denumire/caracter
Aplica
ii
n chimic
Structura
chimic
Denumire/caracter
Aplica ii
Structura
Denumire/caracter
Aplicaii
amino-acizilor,
pesticide,
(nepolar)
jos,
amide
inferioare,
esteri esteri
Tabel
10.2. Tipuri
de faze
sta
ionare cu caracter lichid utilizate
n
GC.
(nepolar)
jos,
amide
inferioare,
Structura
chimic
Denumire/caracter
Aplica
iip.f. cu
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
p.f.p.f.
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
cu
CH
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
cu
C
H
*
30
62
fenoli
derivatiza
i,
etc
Denumirea
comercial :
3 C30H
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
cu
p.f.
jos,
62*
Structura
chimic
Denumire/caracter
Aplica
ii
ai inferioare,
acizilor
gra
i, terpene,
aiinferioare,
acizilor
gra
i, terpene,
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
p.f.
(nepolar)
jos,
amide
esteri
(nepolar)
jos,
amide
inferioare,
esteri
(nepolar)
jos, amide
esteri cu
OV-1;
SE-30
C
H
*
Squalan
Hidrocarburi
alifatice
cu
p.f.
C30
(nepolar)
amide
inferioare,
esteri
CH
H*62
30* 62
etc,
3062
(nepolar)
jos,
amide
inferioare,
esteriai
ai
acizilor
gra
etc,
ai acizilor
gra
i,inferioare,
terpene,
aiamide
acizilor
grai, i,terpene,
terpene,
C30H62*
(nepolar)
jos,
esteri
CH3
CH
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
acizilor
grai,
terpene,
etc, de ex.
acizilor gra
i, terpene,
Compu
i polari;
ex.
Polidimetilsiloxan
CHC3 303CH
etc,
H62*
etc, ai ai
etc,
ide
polari;
Polidimetilsiloxan
acizilor
graCompu
i, terpene,
etc,
( Si CH
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
)
Si O )(CH
O) )33
alcaloizi,
deriva
i
volatili
(practic
nepolar
)
Compu
i
polari;
de
ex.
Polidimetilsiloxan
Compu
iCompui
polari; de
ex. de
Polidimetilsiloxan
Polidimetilsiloxan
ex.
i polari;
polari;
dederiva
ex.alcaloizi,
Polidimetilsiloxan
3
alcaloizi,
iaivolatili ai
(practic
nepolar )(practic
etc,Compu
CH
n Si

(3 Si
CH O )
CH
( )3Si3n3O ) n
( Si O
( CH
Si 3(CH
OSi
n ) O )n
3) n
CH3 ( SiCH
CHOn
CH3 CH 3 n
3
CH
CH
CH3 3
CH3 3 CH
CH
CHCH
CH
33
33 3

Compu
i polari;
de
ex.
Polidimetilsiloxan
alcaloizi,
deriva
iaivolatili
ai
(practic
nepolar
alcaloizi,
deriva
i volatili
volatili
ai
(practic
nepolar
)
amino-acizilor,
nepolar)
derivai
aminoCompu
i polari;
dei volatili
ex.
Polidimetilsiloxan
alcaloizi,
deriva
ipesticide,
volatili
(practic
nepolar
)) )
amino-acizilor,
pesticide,
alcaloizi,
deriva
ai ai
(practic
nepolar
amino-acizilor,
pesticide,
amino-acizilor,
pesticide,
fenoli
derivatiza
i,
etc
Denumirea
comercial
:
alcaloizi,
deriva
i
volatili
ai
(practic
nepolar
)
Denumirea
comercial:
OV-1;
acizilor,
pesticide,
fenoli
amino-acizilor,
pesticide,
derivatiza
i, etc
Denumirea
:
amino-acizilor,
pesticide,
fenoli
derivatiza
i,fenoli
etc
Denumirea
comercial
: comercial
fenoli derivatiza
i, etc
Denumirea
comercial
:
OV-1;
SE-30
amino-acizilor,
pesticide,
Denumirea
comercial
:
fenoli
derivatiza
i,
etc
Denumirea
comercial
:
SE-30
derivatizai,
etc
fenoli
derivatiza
i,
etc
Denumirea
comercial
:
OV-1;
SE-30
OV-1;Denumirea
SE-30
OV-1;
SE-30
fenoli
derivatiza
i, etc
comercial :
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
OV-3;
SE-52
OV-1;
SE-30
OV-1;
SE-30
Unele medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
OV-1;
SE-30
) ( Si
)
( SiCH
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
)
O CH
OCH
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
CH
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
3
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
( Si CH
(nSi3O
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
)
O (3)(3CH
O)) )3(CH
)
m
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
)
Si
O
Si
O
)
(
pesticide,
PAHs, PCBs,
(slab
polar
)
Unele
medicamente,
Poli(fenilmetildimetil)siloxan
Si
Si
O
3
3
n
m
n
m
) n(OSi) O ) m
( Si
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar)polar)
))
) CH
( Si (O
(OCH
(slab
Unele
medicamente,
pesticide,
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
Si
steroizi,
etc.
(mediu
polar
3
)
)
(
n
m
pesticide,
PAHs,
PCBs,
(slab
polar
)
CH
Si
O
Si
O
)
( Si O n 3n CH
m
3 m
3
CH
nCH CH 3
Denumirea comercial: OV-3; PAHs, PCBs,
3 3
Denumirea
::
Denumirea
comercial
:
Denumirea
comercial
SE-52comercial
Denumirea
comercial
:
Denumirea
comercial
:
OV-3;
SE-52
OV-3;
SE-52
OV-3;
SE-52
Denumirea
comercial
:
Denumirea comercial :
Denumirea
comercial
:
OV-3;
SE-52
OV-3;
CH
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
OV-3;
SE-52SE-52
CH
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
3 3 CH3
OV-3;
SE-52
CH3
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
OV-17
steroizi,
etc.
(mediu
polar
)
CH
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
CH
)
Pesticide,
medicamente,
Poli(fenilmetil)siloxan
( (Si CH
steroizi,
etc.
(mediu
polar
)
O
steroizi,
etc.
(mediu
polar
)
3
Pesticide,
Poli(fenilmetil)siloxan
3 )
Si) O
Si ((O
Poli(fenilmetil)siloxan
(mediusteroizi,
3n
steroizi,
etc. medicamente,
(mediu
polar) )
)n
O
etc.
(mediu
polar
n
Compu
i
halogena
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
CH3
CH
)
((SiSi
Pesticide,
medicamente,
steroizi,
etc. i,
(mediu
)
steroizi,
etc.
(mediu
polar polar
)
3 )O On n)
( Si OSi
polar)
n
aldehide
(polar)
steroizi,
etc. i cetone, unele
( Si O ) ( Si On )
Denumirea
comercial
: comercial:
Denumirea
OV-17
Denumirea
comercial
:
n
m
medicamente, fenoli
Denumirea
comercial
Denumireacomercial
comercial: ::
OV-17
Denumirea
OV-17
CH2
CH3
OV-17
OV-17
Denumirea
comercial
:
Denumirea comercial :
OV-17
i derivatiza
halogena
i, i, aminoacizi
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
CH3 CH CH3 CH
Compu
i halogena
Polimetiltrifluorpropilsiloxan CompuCompu
3
3
i
halogena
i, i, i,
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
CH3 CHCH
CH3
OV-17
derivatiza
i, i,etc.
Compu
i cetone,
halogena
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
OV-17
Compu
i halogena
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
CHO3 CH
aldehide
i cetone,
unele
(polar)
CH
3
3
3
)
)
aldehide
i
unele
(polar)
( Si
(
Si ) O( Si O )
2
(( Si
aldehide
ii cetone,
unele
(polar) comercial :
Compui
halogenai,
n O
m
aldehide
i
cetone,
unele
(polar)
medicamente,
fenoli
Compu
halogena
i,aldehide
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
)
)
(
aldehide
i
cetone,
unele ii,
(polar)
CH
CH
Denumirea
Si
O
Si
O
Compu
i
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
)
)
(
(
n Si
m
medicamente,fenoli
fenolihalogena
Si ) O
O
3CH
3
) 3 m
( CH
( Si
Si O
OCH
Polimetiltrifluorpropilsiloxan
n
3CH
medicamente,
n
m
medicamente,
fenoli
derivatiza
i, aminoacizi
3
cetone,
unele
medicamente,
aldehide
i aminoacizi
cetone,
(polar)(polar)
medicamente,
fenoli
CF(3 Si2 OCH
CH)3m
OV-210
derivatiza
i,aminoacizi
iunele
cetone, unele
CH
CH
)n22O( )Si
derivatiza
i,aldehide
CH
(polar)
(O
derivatiza
i,
aminoacizi
Si
derivatiza
i,
etc.
2n CHCH
3 3mO )
CH2(2 Si
CH
medicamente,
fenoli
derivatiza
i,
aminoacizi
fenoli
derivatizai,
aminoacizi
derivatiza
i,
etc.
3
n
m
CH
fenoli
derivatiza
i,medicamente,
etc.
CHCH
2
derivatiza
i, etc.
Denumirea
OV-210
Denumirea
comercial
: comercial:
Nitrili,
sisteme
aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
CH
CH3CH2CH
CH
derivatiza
i,i,aminoacizi
22
Denumirea
comercial
:
derivatiza
etc.
3 3 CH
derivatizai,
etc.
CH
Denumirea
comercial
:
derivatiza
i,
aminoacizi
CF3 2
Denumirea comercial :
2
3 OV-210
steroizi i, etc.
(polar)
CF
OV-210 comercial :
derivatiza
Denumirea
CF
3
)
CH)2CF
( Si O
( 3Si
OV-210
O
3
OV-210
derivatiza
CH
Nitrili,
sisteme
aromatice, i, etc.
Polimetilcianopropilsiloxan
n
m
CH
CF3 3 CH2CH3 CH
Denumirea
comercial :
OV-210
Nitrili,
sisteme
aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
Nitrili, sisteme
sisteme aromatice,
aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
CH33
CH33
Denumirea comercial steroizi
: Nitrili,
Polimetilcianopropilsiloxan
CH
CH
(polar)
CH
OV-210
) (3CH
( Si
2 CF
O3(CF
Si )3O( ) 3
steroizi
(polar)
steroizi
(polar)
steroizi
(polar)
Nitrili, sisteme aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
CH(3(SiSi
OV-210
Si
n 3OO
m O ))
) ( (Si
Si
O)CH
Polimetilcianopropilsiloxan
comercial :
n 3 Si OO) mm
m Denumirea
n
CHCH
n
Nitrili,
sistemearomatice,
aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
CH
CH
CH
steroizisisteme
(polar)
Nitrili,
3 3
3 CH
)33
( 2Si 2 O
O
CH
CH) 2 22( Si CH
Nitrili,
sisteme
aromatice,
Polimetilcianopropilsiloxan
(polar)
OV-275
CH
CH
steroizi
(polar) comercial :
CH
steroizi
)n3 ( Si O 3 )m3 Denumirea
Si2CN
OCH
Denumirea
comercial
:
Denumirea
comercial
:
Denumirea
comercial
:
CH(2CH
steroizi
(polar)
Denumirea comercial: OV-275
CH2n2O CH
) (3 Si mO OV-275
)
(2 Si
OV-275
OV-275
OV-275
CH
CN
CH
CH
n
m
2 2
Denumirea comercial :
CH2 2 CN
CN 3 CH
Polietilenglicol
Aldehide, esteri, eteri, fenoli
CH
2CH
CH
[ CHCH
]
O
Denumirea comercial :
2
3
2
2
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri, eteri,i fenoli
CH
OV-275
[ CH22 CH2 O ] n
(Denumirea
comercial(Denumirea
:
derivatiza
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri,
eteri,
fenoli
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri,
eteri,
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri,
eteri,
fenoli
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri,
eteri,
fenoli
OV-275
Denumirea
comercial
:
[CH
n
(Denumirea
comercial
:
derivatiza
i
]
]
CH
CH
CH2 [CH
CN
CH
O
O
22
22 2
Carbovax
20M)
nnn Carbovax
(Denumirea
comercial
:
derivatiza
i
(Denumirea
comercial
:
derivatiza
i
(Denumirea
comercial
:
derivatiza
i
comercial:
Carbovax
20M)
derivatizai
CH2 CN
20M)
OV-275
Carbovax
20M)
Carbovax
20M)
Carbovax
20M)
Polietilenglicol
Aldehide, esteri, eteri, fenoli
[98]

[ CH
CHCH
CN :[98]
2toarea
2 O
2urm
ructura
este
urm
* Structura
toarea
: ]]n
[este
CH
CH

CH3
CH3CH
CH CH3 CH
Polietilenglicol
Aldehide,
esteri,
eteri, fenoli
[98]
[98]
CHCH
CHCH
CHCH
comercial
:CH
derivatiza
i
[98] (Denumirea
CH
CH
O
CH
CH3
***Structura
2 toarea
2 este
Structura
urm
toarea
Structura
esteurm
toarea
n : ::
H
CH C
(Denumirea
comercial
:
derivatiza
i
CH
CHCH
3 Polietilenglicol
Aldehide,
esteri, eteri, fenoli
HH
CHCC 20M)
[ CH2 CH2 O ] Carbovax
CH
CH
CH
Carbovax
20M)
CH
CH
CH
3
3
3
CH
CHCH
(Denumirea
comercial
:CHCHCH CHCHCH derivatiza
i
* Structura este urmtoarea:
[98] n
CH
CH
CH
* Structura este urm toarea: [98]
CH
CH
CH
Carbovax 20M)
CH
* Structura este urm toarea:
H3C
CH
HC
Componentele unui sistem
[98] GC
CH3 CH
CH3
CH3
CH
CH
3

33

33

3 3

3 33

* Structura este urm toarea:

3 3

CH3

HC

CH3

CH3

CH3

3
Un cromatograf de gaze are trei
componente principale: injectorul,
cameraCHde termostatare
a
CH3
CH3
3
coloanei cromatografice i sistemul de detecie (unul sau mai muli detectori). Acestora li se altur
sursa de gaz purttor pentru realizarea
fazei mobile a separrii prin GC. Injectorul permite plasarea
153
153
probei n captul coloanei, ntr-o zon ct153
mai
153ngust cu putin. Proba n GC poate fi gazoas sau
153
lichid; atunci cnd proba este lichid, componenii
probei trebuie s fie volatili i stabili termic la

153
153

153

temperatura injectorului, precum i pe intervalul de temperatur n care se face separarea


cromatografic (domeniul de temperatur obinuit pentru separrile GC este 20 - 400C).
O reprezentare schematic a unui sistem GC este redat n Fig. 7
Cilindru cu
gaz purt tor

Injector
Cromatograf de gaze
Detectori

Controlor
de debit

D1

D2

Absorbanta (mAU)

Coloan

Incint termostat
(cuptor)

60

55

50

45
40
35

9
7

30

25
20

10
11

14

56

15

12
13

10
5
0
0

10

12

14

16

18 20

22

24

26

28

30

32

Timp (min)

10.2. Reprezentarea schematic a structurii unui cromatograf de gaze + anexe.


Figura Fig.
7. Reprezentarea
schematic a structurii unui cromatograf de gaze + anexe.

Faza mobil n GC trebuie s fie inert din punct de vedere chimic, de puritate
nalt
(f
r n
urme
ap sau
oxigen),
cu vedere
tipul dechimic,
detec ie de
aplicat
i nalt (fr
Faza mobil
GCdetrebuie
s fie
inert compatibil
din punct de
puritate
convenabil din punct de vedere al costului. Faza mobil n GC mai este cunoscut i ca
urme de ap
compatibil
tipul
de detecie
convenabil
din punct de vedere
gaz sau
purt oxigen),
tor, putnd
fi H2, N2, Hecu
sau
Ar; gazul
purt toraplicat
poate fiiprodus
de un generator
de
gaz
(H
sau
N
),
sau
se
g
se
te
stocat
n
cilindri
metalici,
de
unde
este
adus
2
2
al costului. Faza mobil n GC mai este cunoscut i ca gaz purttor, putnd fi Hcu
N2, He sau Ar;
2, un
debit controlat de un reductor de presiune n sistemul cromatografic. Uneori debitul
gazul purttor
poate
fi
produs
de
un
generator
de
gaz
(H
2 sau N2), sau se gsete stocat n cilindri
gazului purt tor este prea mic fa de volumul detectorului (n special cnd se folosesc
metalici, coloane
de unde
este iar
adus
cu un
controlat necesarul
de un reductor
capilare),
n acest
caz debit
se suplimenteaz
cu un debitde
de presiune
a a-numit n sistemul
make-up
gas.
cromatografic. Uneori debitul gazului purttor este prea mic fa de volumul detectorului (n special
Incinta termostatat (cuptorul) asigur regimul termic n coloana cromatografic .
cnd se folosesc
coloane
capilare),
iaresen
n acest
caz se suplimenteaz
un debit de aaTemperatura
fiind un
parametru
ial n separarea
GC trebuie s necesarul
fie uniform cu
pentru
toat lungimea
numit make-up
gas. coloanei; fluctua ii de temperatur influen eaz procesul de reten ie
cromatografic i astfel exactitatea timpilor de reten ie ai anali ilor din prob , conducnd
Incinta
termostatat (cuptorul) asigur regimul termic n coloana cromatografic.
n unele cazuri chiar la splitarea picurilor cromatografice. Instrumentele GC
Temperatura
fiind un asigur
parametru
esenial
GC trebuie
s fie
uniform
comercializate
ajustarea
rapidn isepararea
controlul temperaturii
ntr-un
interval
de 50- pentru toat
450
C.
Operarea
n
regim
termic
subambiental
presupune
utilizarea
unui
sistem
criogenic
lungimea coloanei; fluctuaii de temperatur influeneaz procesul de retenie cromatografic i
de r cire, bazat pe N2 sau CO2 lichid.
astfel exactitatea
timpilor de retenie ai analiilor din prob, conducnd n unele cazuri chiar la
Sistemul de achizi ie i prelucrare a datelor este utilizat i pentru programarea
splitarea unor
picurilor
cromatografice.
Instrumentele
GC comercializate
asigur
ajustarea
rapid i
parametrii
ai separ rii (regimul
de temperatura)
sau parametrii
sistemului
de
detec
ie.
Cromatograma
poate
fi
v
zut
n
timp
real,
iar
gradul
de
prelucrare
a
acesteia
controlul temperaturii ntr-un interval de 50- 450 C. Operarea n regim termic subambiental
depinde de complexitatea softului cu care este dotat calculatorul sistemului.

presupune utilizarea unui sistem criogenic de rcire, bazat pe N2 sau CO2 lichid.
Sistemul 10.8.
de Sisteme
achiziiedeiinjec
prelucrare
a datelor este utilizat i pentru programarea unor
ie n GC
parametrii ai separrii (regimul de temperatura) sau parametrii sistemului de detecie.
Injectorul
GC este
subansamblu
cromatografic
avnd depinde de
Cromatograma poate
fi nvzut
n untimp
real, iarintegrat
gradulsistemului
de prelucrare
a acesteia
rolul de a realiza transferul exact i reproductibil, selectiv sau neselectiv, al probei luate n
complexitatea
care este
dotat calculatorul
sistemului.
analizsoftului
, de la cu
operatorul
sistemului
c tre coloana
cromatografic , f r ns a induce
Sisteme

perturba ii majore n raport cu parametrii procesului de separare cromatografic .


Injectorul
o interfa
ntre operator i sistemul cromatografic, care permite
de
injecieeste
n GC
introducerea manual sau automat a probei i transferul acesteia c tre coloan .

Injectorul n GC este un subansamblu159


integrat sistemului cromatografic avnd rolul de a
realiza transferul exact i reproductibil, selectiv sau neselectiv, al probei luate n analiz, de la
operatorul sistemului ctre coloana cromatografic, fr ns a induce perturbaii majore n raport
cu parametrii procesului de separare cromatografic. Injectorul este o interfa ntre operator i
sistemul cromatografic, care permite introducerea manual sau automat a probei i transferul
acesteia ctre coloan.
Sistemul de injecie poate aciona asupra probei, fie n sensul diluiei, fie n cel al
concentrrii acesteia. Prin diluie nelegem, n acest caz, c doar o fraciune din volumul probei, n
integralitatea ei, este transferat coloanei, prin intermediul injectorului. Prin efect de concentrare

nelegem acel mod de lucru, specific sistemului de injecie, prin care, imediat naintea transferului
ctre coloan, are loc o eliminare (parial sau total) a solventului probei, ceea ce face ca aceasta s
ajung n procesul de separare n integralitatea ei, la concentraii mai mari ale componenilor
individuali n raport cu concentraia probei iniiale.
Sub aspect calitativ, selectivitatea sistemelor de injecie se refer la capacitatea acestora de a
transfera ctre coloan doar acei componeni ai probei care se bucur de o anumit proprietate fizic
sau chimic.
Injectorul are uneori i rolul de a aduce analiii din proba luat n lucru, ntr-o form
analizabil de ctre sistemul cromatografic. El poate aciona, de exemplu, n sensul vaporizrii
compuilor individuali, fapt ce permite analiza acestora prin cromatografie de gaze.
Injectorul nu trebuie, n general, s acioneze asupra analiilor, n sensul modificrii naturii
lor chimice. In cazul n care, totui, modificarea naturii chimice a analitului (analiilor) este dorit,
este absolut necesar ca operarea i construcia injectorului s permit o reproductibilitate nalt a
condiiilor care genereaz transformarea n cauz.
Un exemplu n acest sens l reprezint analiza prin cromatografie de gaze a polimerilor
organici. Deoarece materialele polimere sunt compui nevolatili (datorit masei moleculare nalte),
apare imposibilitatea analizei acestora prin cromatografie de gaze. Dac, ns, sistemul de injecie
permite degradarea termic a analitului (piroliz), produii de descompunere rezultai (substane cu
molecul mic) vor putea fi analizabili prin cromatografie de gaze, genernd o cromatogram
specific tipului de polimer studiat, doar n condiiile reproductibilitii perfecte a procesului de
piroliz.
Este evident necesitatea existenei unei inerii chimice pronunate a materialelor din care
sunt confecionate acele pri ale injectorului aflate n contact direct (permanent sau temporar) cu
faza mobil. De asemenea, construcia sistemului de injecie nu trebuie s afecteze parametrii fizici
ai fazei mobile (debit, vitez, etc.).
In general, volumul de prob este mic (1-10 L). Sistemele de injecie n GC pot fi mprite
n dou clase mari: selective i neselective. Sistemele de injecie neselective pentru cromatografia
de gaze (cu transferul integral, sub aspect calitativ i cantitativ, al probei ctre coloana
cromatografic) sunt cunoscute sub denumirile:
i) Injectoare fr divizarea fluxului de faz mobil (splitless);
ii) Injectoare cu injecie direct n coloan, la rece (cool-on-column);
iii) Injectoare de tip valv rotativ pentru gaze sau lichide;
iv) Injectoare de tip diafragm pentru probe lichide.
Sistemele de injecie selective utilizate n cromatografia de gaze sunt:
i) Injectoare cu divizarea fluxului de faz mobil (split);
ii) Injectoare cu i fr divizarea fluxului de faz mobil (split / splitless);
iii) Injectoare de tip head space;
iv) Injecie de tip purge and trap;
v) Injecie cu piroliz (pirolizoare);
vi) Injectoare cu programare de temperatur (program temperature vaporizer - PTV).
Cazurile i) i ii) se refer la o selectivitate cantitativ a sistemului de injecie, n sensul
diluiei probei (doar o fraciune din proba, n integralitatea ei, va fi transferat n coloana
cromatografic).
Cazurile iii) - iv) se refer la o selectivitate calitativ, n sensul c doar analiii volatili din
prob vor fi transferai n coloana cromatografic.
Cazul v) se refer la acele sisteme de injecie destinate analiilor nevolatili, dar care pot
suferi procese de degradare termic reproductibil, n condiii de temperatur strict controlate. In

acest caz injectorul acioneaz asupra naturii chimice a analitului, n coloana cromatografic
transferndu-se doar produii volatili de degradare termic ai analitului.
Injectoarele cu programare de temperatur sunt sistemele de injecie cele mai complexe,
destinate cromatografiei de gaze. Ele permit att diluia sau concentrarea analiilor din prob, ct i
discriminarea n raport cu volatilitatea intrinsec a analiilor.
Injector fr divizarea fluxului de vapori, cu introducere direct
Este un sistem neselectiv, n sensul c proba injectat cantitativ, n integralitatea sa, este
transferat n urma volatilizrii, n coloana cromatografic. Exist, din punct de vedere constructiv,
dou variante: i) prima variant, cunoscut sub denumirea cu vaporizare extra-coloan, presupune
vaporizarea analiilor n tubul de vaporizare i transferul, prin intermediul gazului purttor, a
vaporilor astfel generai n coloana cromatografic; ii) a doua variant, denumit cu vaporizare
intra-coloan, permite generarea vaporilor de analit n chiar captul coloanei cromatografice.
Aceast ultim variant constructiv nu trebuie ns confundat cu injecia n coloan, la rece
(cool-on- column). In cazul injectorului fr divizarea fluxului de vapori, cu introducere direct i
vaporizare intra-coloan, proba de analit este vaporizat cvasi-instantaneu ntr-o poriune bine
determinat din extremitatea coloanei, aflat la o temperatur adecvat acestui proces.
Elementul constructiv care permite, n cazul injectoarelor pentru cromatografia de gaze,
introducerea acului seringii, fr ca operaia n cauz s aib ca rezultat dezetanarea sistemului,
poart denumirea de septum i reprezint un disc de un anumit diametru (corelat cu tipul constructiv
specific i geometria injectorului) i cu o grosime de 2 - 4 mm, confecionat din cauciuc siliconic cu
rezisten termic i elasticitate mecanic nalt.
Durata de via a unui septum este limitat. Datorit proceselor de strpungere multipl de
ctre acul seringii, se pot crea macro-orificii care cu greu mai pot fi obturate prin compresia
exterioar a materialului polimeric elastic i, n consecin, genereaz neetaneiti. In astfel de
condiii se impune schimbarea septumului, operaie care, prin construcia injectorului, trebuie s fie
ct mai simpl i direct cu putin.
Ferula reprezint o pies de etanare extrem de utilizat n construcia sistemelor
cromatografice (att de gaze, ct i de lichide). Prezint o geometrie conic i un orificiu central cu
diametru bine precizat. Ferula poate fi confecionat din materiale dure (oel, alam), atunci cnd
este destinat etanrilor pe metal, sau din materiale moi (grafit, material polimeric - vespel), atunci
cnd este destinat etanrilor pe suprafa de sticl sau cuar.
Prin strngerea cu ajutorul piuliei, geometria conic a ferulei se deformeaz plastic,
etannd coloana sau tubul de transport, introdus prin orificiul central, la nivelul pereilor exteriori,
dar i la nivelul pereilor exteriori ai piesei n care se face strngerea.
Injector cu divizarea fluxului de vapori (split)
Este un sistem de injecie selectiv sub aspect cantitativ. El acioneaz n sensul transferrii
unei fracii bine definite din cantitatea de vapori, generat prin vaporizarea probei, ctre coloana
cromatografic. Transferul fraciei din proba iniial, volatilizat n sistemul de injecie, nu trebuie
s genereze discriminri calitative (n sensul c fraciunea injectat reprezint proba n integralitatea
sa constitutiv), dar reduce n mod semnificativ cantitatea analiilor supui efectiv separrii
cromatografice. Se poate afirma c injectorul cu divizarea fluxului de faz mobil acioneaz asupra
probei prin diluie, limitnd cantitatea absolut de substan transferat n coloan, n raport cu
cea iniial, generat prin volatilizarea probei injectate (Fig. 8).

Cronologic vorbind, sistemul de injec ie cu divizarea fluxului de vapori (sau, mai


scurt, injector cu splitare) este primul sistem de injec ie dedicat coloanelor capilare.
Deoarece fluxurile de gaz purt tor prin injector sunt mari, transferul frac iei de prob c tre
este rapid,
iarsistemul
frontuldeini
ial de
injec iefluxului
este de
foarte
ceeainjector
ce favorizeaz
coloan Cronologic
vorbind,
injecie
cu divizarea
vapori ngust,
(sau, mai scurt,
cu
splitare)
este
primul
sistem
de
injecie
dedicat
coloanelor
capilare.
Deoarece
fluxurile
de
gaz
eficien a separ rii.
purttor prin injector sunt mari, transferul fraciei de prob ctre coloan este rapid, iar frontul
iniial de injecie este foarte ngust, ceea ce favorizeaz eficiena separrii.
piesa strngere
septum
septum

admisie
gaz purt tor
(inlet)
evacuare gaz de purjare
septum (exit)

tub de vaporizare
corp injector
sistem de incalzire

coloan capilar
ferula (element de etan are
a coloanei la injector)
piuli de strngere

Figura 8. Reprezentare schematic a sistemului de injecie cu splitare.

Injectorul cu sau fr divizarea fluxului de vapori (split/splitless)

Fig.
10.3.
Reprezentare
schematic
a sistemului
de 9).
injec
ie cu splitare.
Este un
sistem
de injecie neselectiv
sub aspect
cantitativ (fig.
Construcia
sa se bazeaz
pe configuraia injectorului cu divizarea fluxului de vapori, dar este operat pentru o perioad bine
definit, din momentul introducerii probei, ca sistem de injecie fr splitare. Acest tip de injector
este utilizat n cazul separrilor pe coloane capilare. Datorit dimensiunilor mici ale acestora,
162
cantitatea de prob ncrcat n capul coloanei trebuie s fie foarte mic. Aceasta este practic
imposibil de realizat prin injecia direct. Prin acest tip de injector se realizeaz introducerea unei
cantiti mici din prob injectat: prin volatilizarea acesteia i amestecarea cu un curent de gaz
purttor, proba se dilueaz, iar din amestecul format doar o parte este introdus n coloan, restul
fiind eliminat (splitat) cu ajutorul unei valve. Aceast variant de funcionare a injectorului este
numit split. In situaii n care ntreaga prob trece n coloana cromatografic varianta de
funcionare se numete splitless.

(splitat ) cu ajutorul unei valve. Aceast variant de func ionare a injectorului este numit
split. In situa ii n care ntreaga prob trece n coloana cromatografic varianta de
func ionare se nume te splitless.
Corpul injectorului este nc lzit pentru ca proba s fie volatilizat . In interior se
injectorului este
proba numit
s fie volatilizat.
un tub
afl un tubCorpul
de vaporizare
(o nclzit
capilarpentru
de casticl
liner) In
peinterior
pere se
ii afl
c reia
vaporii
de vaporizare (o capilar de sticl numit liner) pe pereii creia vaporii probei injectate sunt mai
probei injectate sunt mai stabili dect pe un perete metalic nc lzit. Vaporii probei
stabili dect pe un perete metalic nclzit. Vaporii probei injectate se amestec cu gazul purttor
injectate se amestec cu gazul purt tor nc lzit, iar o parte a amestecului format trece n
nclzit, iar o parte a amestecului format trece n coloana cromatografic, iar cealalt parte este
coloana
cromatografic , iar cealalt parte este eliminat .
eliminat.
capac de strngere
a septumului
septum

sistem de ghidaj al acului


flux de purjare a septumului
admisie
gaz purt tor

agent criostatic
(evacuare)

tub de vaporizare
garnitur etan

sistem de nc lzire
(electric)

agent criostatic
(admisie)

flux de purjare
al vaporilor
electroventil
ferul
piuli de strngere
a coloanei
coloan capilar

FiguraReprezentare
9. Reprezentareschematic
schematic aasistemului
de de
injecie
Fig. 10.4.
sistemului
injecsplit/splitless.
ie split/splitless.
Raportul ntre debitul gazului purttor introdus (D1) i debitul fluxului eliminat (D2) din injector d
aa-numitul raport de splitare. Condiiile optime163
de operare a acestui tip de injector sunt descrise n
tabelul urmtor.

Tabelul 4. Valori optime ale parametrilor de exploatare a injectorului split/spilless.


Parametru

Vapoare optim

Temperatura injectorului

200 - 280 C

Volumul tubului de
vaporizare

> 0,8 mL

Explicaii
- asigur volatilizarea instantanee;
- reduce efectul de degradare.
Observaie: de folosit valori mai mari n
cazul probelor cu efect puternic de
matrice i analii cu p.f. ridicate
n cazul injeciei automate

< 0,7 mL

n cazul injeciei manuale

fr umplutur

numai n cazul injeciei manuale


pentru autoinjecie, probe cu efect de
matrice pronunat

Tipul tubului de vaporizare


Volumul injectat
Debit n circuitul de purjare
a vaporilor
Timpul de splitare
Temperatura intern a
coloane
Debitul gazului purttor prin
coloan
Debitul de gaz purttor
utilizat la purjarea
septumului

cu vat de sticl silanizat


0,5 - 3 L
20 - 50 mL/min

nu e un parametru critic

20 - 80 sec

n funcie de natura probei

p.f.solv.= 25 C

n cazul focusrii prin solvent

> 2 mL/min
1 - 5 mL/min

Injector cu introducere direct n coloan, la rece (cool-on-column)


Este un sistem de injecie neselectiv, destinat n special analiilor cu rezisten sczut la oc
termic.
Injecia direct n coloan, la rece, presupune utilizarea unei seringi de injecie special, al
crui ac are un diametru exterior mai mic dect diametrul interior al coloanei cromatografice
utilizate.
Atunci cnd coloana cromatografic aleas are un diametru interior cuprins n intervalul 0,2
- 0,3 mm, acul seringii necesare injeciei n coloan la rece este extrem de fin i este confecionat
din cuar. Fragilitatea acului face ca o astfel de tehnic de injecie s nu poat fi condus n regim
automat. Dac diametrul interior al coloanei cromatografice este mai mare de 0,3 mm, acul seringii
poate fi confecionat din oel, iar automatizarea injeciei este posibil.
Introducerea acului seringii direct n interiorul captului rcit al coloanei cromatografice i
ejecia probei n stare lichid trebuie s aib loc n condiiile n care parametrii fizici ce
caracterizeaz faza mobil nu trebuie s fie afectai, iar etaneitatea sistemului n raport cu mediul
s fie conservat. Etanarea la nivelul unor ace de lungimi mari i fragilitatea avansat nu este un
proces uor de realizat tehnic, fapt ce confer injectorului o oarecare complexitate i un cost mai
ridicat.
De asemenea, ca o caracteristic general, injectoarele cu introducere direct n coloan, la
rece, sunt lipsite de tub de vaporizare. Captul coloanei cromatografice acioneaz n acest sens, ca
zon de depunere a probei lichide i vaporizare progresiv.

coloan , la rece, sunt lipsite de tub de vaporizare. Cap tul coloanei cromatografice
ac ioneaz n acest sens, ca zon de depunere a probei lichide i vaporizare progresiv .
Detectori n cromatografia de gaze
10.9. Detectori n cromatografia de gaze
Detectorii n GC pot fi universali sau specifici, funcie de clasa de compui care dau
Detectorii
n GC
pot fiinformaia
universali
sau specifici,
ie de clasa
de compu
i carei
rspuns. Lund drept
criteriu
produs,
acetia potfunc
fi detectori
de informaie
cantitativ
daudetectori
r spuns.
Lund
drept
criteriu
informa
ia
produs
,
ace
tia
pot
fi
detectori
de
informa
de informaie cantitativ + structural n acelai timp (detectorul bazat pe spectrometrieie
de
cantitativ
i
detectori
de
informa
ie
cantitativ
+
structural
n
acela
i
timp
(detectorul
mas - MS, sau detectorul bazat pe spectrometrie n infrarou cu transformat Fourier - FTIR).
bazat
pe spectrometrie
de mas -pot
MS,cuprinde
sau detectorul
bazat
pedetectori,
spectrometrie
n lor
infraro
u
Configuraiile
GC comercializate
doi sau mai
muli
aranjarea
n serie
cu transformat
Fourier
- FTIR).distructiv
Configura
GC comercializate
pot cuprinde
sau
fiind determinat
de caracterul
sau iile
nedistructiv
al analiilor care
elueaz dindoi
coloana
mai mul i detectori, aranjarea lor n serie fiind determinat de caracterul distructiv sau
cromatografic.
nedistructiv al anali ilor care elueaz din coloana cromatografic .
Dintre detectorii de informaie cantitativ, cei mai importani sunt prezentai n continuare.
Dintre detectorii de informa ie cantitativ , cei mai importan i sunt prezenta i n
Spectrometria de mas urmeaz a fi tratat ntr-un capitol separat, dat fiind importana sa deosebit
continuare. Spectrometria de mas urmeaz a fi tratat ntr-un capitol separat, dat fiind
ca sistem de detecie n cromatografia de gaze sau de lichide.
importan a sa deosebit ca sistem de detec ie n cromatografia de gaze sau de lichide.
Detectorulde
deconductivitate
conductivitate termic
Detectorul
termic

Detectorul
(TCD thermal
conductivitydetector)
detector)este
este
Detectoruldedeconductivitate
conductivitate termic
termic (TCD
thermal conductivity
un
un detector
universal,
nedistructiv,
pe m conductivitii
surarea conductivit
termice
a fluxului
detector universal,
nedistructiv,
bazatbazat
pe msurarea
termice a iifluxului
gazos
care iese
gazos
iese
din coloanaAtunci
cromatografic
cnd fluxul
gazos
con inedin
compu
i
din care
coloana
cromatografic.
cnd fluxul. Atunci
gazos conine
compui
care elueaz
coloan,
careconductivitatea
elueaz din
coloan
,
conductivitatea
termic
se
modific
,
propor
ional
cu
termic se modific, proporional cu concentraia de analit din fluxul gazos ce
concentra
ia
de
analit
din fluxul acestor
gazos detectori
ce ajunge
detector.
Sensibilitatea
ajunge n detector. Sensibilitatea
este n
slab,
astfel nct
acesta are oacestor
utilizare
detectori
este
slab
,
astfel
nct
acesta
are
o
utilizare
limitat
.
Gazul
tor utilizat
n
limitat. Gazul purttor utilizat n funcionarea acestui detector poate fi H2 saupurt
He, deoarece
acestea
funcauionarea
detector poate
H2restul
saucompuilor
He, deoarece
au cea mai mic
cea mai acestui
mic conductivitate
n raportfi cu
gazoi acestea
sau volatili.
conductivitate
n raport
cu restul compu
ilor ogazo
volatili.
Principiul
de funcionare
are la baz
puntei sau
de tip
Wheatstone utilizat n compensarea
Principiul
de
func
ionare
are
la
baz
o
punte
tip Wheatstone
utilizat
rezistenei R1 din celula de msurare a efluentului care iese de
din coloana
cromatografic
(analitn+
compensarea
ei R1 dinR2celula
de mde surare
efluentului
care
iese
dinpurttor).
coloanaO
gaz purttor)rezisten
fa de rezistena
din celula
referina (prin
care trece
doar
gazul
cromatografic (analit + gaz purt tor) fa de rezisten a R2 din celula de referin (prin
schem a acestui detector este redat n figura 10.
care trece doar gazul purt tor). O schem a acestui detector este redat n figura
urm toare.

Amplificator
R3

Semnal
electric

R4

R1

2
Efluent
din
coloan

Gaz
purt tor

Figura Fig.
10. Principiul
de funcionare
al unui al
detector
de conductivitate
termic bazat
10.5. Principiul
de func ionare
unui detector
de conductivitate
termicpe dou celule
(de
msur
i
de
referin).
bazat pe dou celule (de m sur i de referin ).
165

TCD este util n determinarea unor compu i gazo i, greu de detectat prin alt
metode
cum
ar fi uniiunor
compu
anorganici
separa
prin
cromatografie
TCD fizice,
este
n n
determinarea
compui
gazoi, igreu
de
detectat
metodeprin
fizice,
TCD
esteutilutil
determinarea
unor i compu
gazo
i, greui prin
de alte
detectat
altegaz-solid
CO,
CO
, SO
Hseparai
CS
2, NO,
2fi
2S, COS,
2.
cum
ar fizice,
fi unii
compui
cromatografie
gaz-solid:
CO, CO2, NO, NO
2, SO2,
metode
cumNO
aranorganici
unii2,compu
i prin
anorganici
separa
i prin cromatografie
gaz-solid:
H2S,
COS,
CS2NO
. 2, SO2, H2S, COS, CS2.
CO,
CO
2, NO,

Detectorul de ionizare n flac r

Detectorul de
n flacr
Detectorul
deionizare
ionizare
n flac r

Detectorul de ionizare n flac r (FID flame ionization detector), este u


Detectorul
ionizare
nbazat
flac (FID
rpe(FID
flame
ionization
detector),
este
un fl c ri d
detector
aproape
universal,
m
surarea
conductivit
ii electrice
a unei
Detectorul
dedeionizare
n flacr
flame
ionization
detector),
este un detector
detector
aproape
universal,
bazat ce
pe
m surarea
conductivit
iiflcri
electrice
a unei
fl c ri deo cre ter
hidrogen;
compu
elueaz
din
coloana
cromatografic
determin
aproape
universal,
bazat iipeorganici
msurarea
conductivitii
electrice
a unei
de hidrogen;
compuii
hidrogen;
compu
ii
organici
ce
elueaz
din
coloana
cromatografic
determin
o
cre ce
tere
a conductivit
a fl c rii, propor
ional
cu cantitatea
de analit
organici
ce elueaz iidinelectrice
coloana cromatografic
determin
o cretere
a conductivitii
electrice
a ajunge
a flcrii,
conductivit
ii
electrice
a
fl
c
rii,
propor
ional
cu
cantitatea
de
analit
ce
ajunge
n
flac rproporional
. Acest detector
a fostdeinventat
n 1958
de douAcest
echipe
independente:
McWilliam
cu cantitatea
analit ce ajunge
n flacr.
detector
a fost inventat n
[100]
flac
r .deAcest
detector
aprecum
fost inventat
n 1958
echipe
independente:
McWilliam
Dewar
(Australia),
i McWilliam
Harley,
Nel
idou
Pretorius
(Africa
de
1958
dou
echipe independente:
ideDewar
(Australia),
precum
i Harley,
Nel i i
[100]Sud).
Dewar
(Australia),
precum
i
Harley,
Nel
i
Pretorius
(Africa
de
Sud).
Pretorius (Africa
de Sud). de formare a speciilor ionice, care s asigure conductivitate electric
Mecanismul
Mecanismul
deformare
formare
a speciilor
ionice,
care s asigure
conductivitate
electric
de desf
a speciilor
ionice,
care s asigure
conductivitate
electric
zoneiS-a
n propus u
zoneiMecanismul
n care se
oar
flac ra
de hidrogen
nu este
pe deplin
n eles.
zonei n care se desf oar flac ra de hidrogen nu este pe deplin n eles. S-a propus un
care
se
desfoar
flacra
de
hidrogen
nu
este
pe
deplin
neles.
S-a
propus
un
mecanism
de
mecanism
de degradare
a structurii
organice
la un atom
singur
de C,care
proces
care are lo
mecanism
de degradare
a structurii
organice
la un singur
deatom
C, proces
are loc
degradare
a
structurii
organice
la
un
singur
atom
de
C,
proces
care
are
loc
n
regiunea
bogat
n
n regiunea
bogat
n hidrogen
c rii, care
dup o care
o cu
reac
ie cudeatomii
n regiunea
bogat
n hidrogen
a fl c arii,fl dup
reac ie
atomii
oxigendearoxigen a
hidrogen
a
flcrii,
dup
care
o
reacie
cu
atomii
de
oxigen
ar
conduce
la
specii
pozitive:
conduce
la specii
pozitive:
conduce
la specii
pozitive:
+

O + +CHO
+e
CH + CH
O +CHO
e-

+
+
+
CHO+CHO
+ H2O
+ HCO
3O + H3O
2O + HCO

Acest
proces
are loc aproximativ
la 100.000
de atomi ce
C adu iCnadu
flac ir n
. Procesul
Acest
proces
locaproximativ
aproximativ
la 100.000
flac r . Procesu
Acest
procesare
are loc
la 100.000
de atomi de
ce Catomi
adui nce
flacr. Procesul
depinde
depinde
de
temperatura
fl
c
rii
i
de
raportul
H
/O
.
Speciile
nc
rcate
electric
2
2 H2/O2. Speciile nc rcate sunt
deflcrii
temperatura
fl Hc2/O
rii2. Speciile
i de raportul
electric sun
dedepinde
temperatura
i de raportul
ncrcate electric
sunt colectate de un electrod
colectate
de
un
electrod
(numit
colector),
iar
curentul
electric
realizat
este
amplificat
i
colectate
deiaruncurentul
electrod
(numit
colector),
iar curentul
(numit
colector),
electric
realizat
este amplificat
i nregistratelectric
(Fig. 11).realizat este amplificat
nregistrat
(Fig.
10.6).
nregistrat (Fig. 10.6).
Evacuare gaze

Evacuare gaze
Electrod colector

Electrod colector

Amplificator

Amplificator

Semnal

Semnal

Flac r

Flac r
Contra-electrod

Contra-electrod

Aer
H2
Aer
Make-up gas
Coloan capilar

H2
Make-up gas

Coloan
capilar n flac r (FID).
Fig. 10.6. Schema de func ionare a unui detector
de ionizare

Figura 11. Schema de funcionare a unui detector de ionizare n flacr (FID).


Fig. 10.6. Schema de func ionare
166 a unui detector de ionizare n flac r (FID).

166

Dintre to ii detectorii GC, FID are cel mai larg domeniu linear de r spuns (7 ordine de
m rime). Limita de detec ie se situeaz la valoarea 10-13 g C/s.
Detectorul
termoionic
Dintre
toii
detectorii
GC, are
FID cel
are mai
cel mai
domeniulinear
linearde
de rrspuns
Dintre
to
ii detectorii
GC, FID
larglarg
domeniu
spuns (7(7ordine
ordinedede
-13
mrime).
la valoarea
10-13 g10
C/s.
m
rime). Limita
Limitade
dedetecie
detec se
ie situeaz
se situeaz
la valoarea
g C/s.

Detectorul pentru compu i cu azot sau fosfor (NPD nitrogen-phosphorus


detector), numit
i detector
termoionic, este un detector specific compu ilor organici care
Detectorul
termoionic
Detectorul
termoionic
con in elementele N i P. Acesta a fost conceput i realizat pentru prima dat de c tre
Detectorul
pentru
compu
i cu
azot
sau(NPD
fosfor
(NPD
nitrogen-phosphorus
Kolb i Bischoff
(1974).
Este
asem
n sau
tor
detectorului
de ionizare
n detector),
flac r , cu
Detectorul
pentru
compui
cu azot
fosfor
nitrogen-phosphorus
detector),
numit
i
detector
termoionic,
este
un
detector
specific
compu
ilor
organici
care
numit ic detector
termoionic,
este un
compuilor
organici careo conin
N o
deosebirea
n zona
de formare
a detector
fl c rii specific
de hidrogen
se plaseaz
pastilelementele
con innd
con
in
elementele
N
i
P.
Acesta
a
fost
conceput
i
realizat
pentru
prima
dat
de
c
P. Acesta
a fost
conceput
i realizatRb
pentru
prima
de ctresensibilitate
Kolb i Bischoff
Estetreii
sare aiunui
metal
alcalin
(n special,
). Aredat
o mare
fa (1974).
de compu
2SO4
Kolb
Bischoff
(1974).
Este nasem
n cu
tordeosebirea
detectorului
r ,de
cu
asemntor
detectorului
deelemente.
ionizare
flacr,
n de
zonaaionizare
de
formarendetector
a flac
flcrii
organici
coni innd
aceste
Schema
de
func c
ionare
acestui
este
deosebirea
c
n
zona
de
formare
a
fl
c
rii
de
hidrogen
se
plaseaz
o
pastil
con
innd
se de
plaseaz
pastil coninnd o sare a unui metal alcalin (n special, Rb2SO4). Are o mare o
redat hidrogen
n figura
mai ojos.
sare
a unui fa
metal
alcalin (n
special,
Rb2SOaceste
o mareSchema
sensibilitate
fa dea compu
4). Are
sensibilitate
de compuii
organici
coninnd
elemente.
de funcionare
acestui ii
Exhaust
organici
conredat
inndn figura
aceste12.elemente. Schema de func ionare a acestui detector este
detector este
redat n figura de mai jos.
Exhaust

Electrod
colector

Sursa de
termoionizare

Sursa de
termoionizare

Electrod
colector

+
Surs c.c.

-+
Surs c.c.

Fir rezistiv
NiChrome
o
Fir rezistiv
T ? 600-800
C

Electrometru

NiChrome

Electrometru

CeramicT ? 600-800 oC
dopat cu Rb
Ceramic
dopat cu Rb

Gaz de make-up
(op ional)

Gaz de make-up

Aer
60 mL/min
Aer

(op ional)
Hidrogen (4-6
mL/min)
Hidrogen (4-6 mL/min)

60 mL/min

Efluent

Efluent

Figura 12. Schema unui detector termoionic (NPD) i principiul de obinere a rspunsului acestuia
Fig. 10.7.
Schema
detector
termoionic
i principiul
ob inere a r spunsului acestuia
fa de
untermoionic
compus(NPD)
coninnd
H, O,de
N,
2H
O2+unui
H22Odetector
Fig.
10.7.
Schema
unui
(NPD) i (C,
principiul
deP):
ob inere a r spunsului acestuia
2+
2H
O2
H
O
2
2
2
fa fa
de un
concon
innd
(C,(C,H,H,O,O,N,N,P):
de compus
un compus
innd
P):
+
+ e +
(C,H)
+ O+ O CHO
+ CN
Rb* Rb*
+ CN+ CNRb+Rb
(C,H)
CHO+ +
e
+
CN
+
+
+e
- Rb*
+
+
Rb
+ PO
Rb* Rb*
+ PO+ PORb Rb
Rb*
Rb + e
+ PO
+ +
- Rb*
+
- + (C,N)
+
+ CN
Rb*
Rb
+ CN+
(C,N)
Rb
+ PO
Rb* Rb*
+ PO+2 PO2Rb Rb
+ PO
2 2
+ +
- -

Rb*Rb*
+ (P,O)
+ PO
+ (P,O) RbRb+ PO
+ +
- + PO
+ (P,O) RbRb
+ PO
Rb*Rb*
+ (P,O)
2 2

NPD
NPD
167167

Mecanismul dup care doar compuii organici care conin N sau P n molecul dau rspuns
n acest tip de detector nu nu este pe deplin explicat pn n prezent (n figura anterioar se propune
un mecanism de formare a speciilor ioni ce care s explice creterea conductivitii flcrii n
prezena compuilor ce conin aceste elemente). Cteva exemple de aplicaii ale acestui tip de
detector este utilizat la determinarea cantitativ a unor pesticide coninnd N sau P, sau chiar a unor
medicamente de abuz, datorit limitei de detecie foarte sczute pe care o atinge (10-13 g/s).
Domeniul de linearitate al rspunsului acestui detector este de 5 ordine de mrime.
Detectorul cu captur de electroni
Detectorul cu captur de electroni (ECD electron capture detector) este un detector
specific compuilor ce conin elemente electronegative, cu precdere halogeni (X). Cu ct numrul
de atomi de halogeni din molecul este mai mare, cu att i rspunsul detectorului este mai mare
(sensibilitatea detectorului crete). Contribuiile majore n realizarea acestui detector se datoreaz
lui Lovelock (1960).
Principiul de baz este msurarea conductivitii electrice a unei zone dintre doi electrozi,
asigurat de o populaie de electroni primari, notati cu e-p (radiaie ), produs de o surs 63Ni In
momentul n care n zona deteciei ajung molecule ce conin elemente electronegative (halogeni, n
special), electronii sunt captai de acestea. Ca urmare, se nregistreaz o micorare a populaiei de
electroni din zona de detecie i astfel conductivitatea electric a zonei scade, cu att mai mult cu
ct numrul moleculelor captatoare este mai mare.
Gazul purttor n acest tip de detecie poate fi N2 sau Ar, cu un coninut de 5-10% CH4.
Adugarea unui dopant n gazul purttor poate mri sensibilitatea deteciei pn la 1000 de ori.
Astfel, adugarea de cantiti mici de O2 sau N2O poate determina unele reacii ioni molecule n
interiorul camerei detectorului.
Acest detector (reprezentat schematic in Fig. 13) este considerat un detector de tip distructiv,
aa dup cum se poate deduce i din procesele care au loc, reprezentate mai sus. Prin urmare, ntr-o
configuraie n serie de mai muli detectori, acesta este plasat ultimul n configuraie. De cele mai
multe ori, ns, acest detector este plasat ntr-o configuraie paralel cu ali detectori, fiind utilizat
alternativ fa de FID sau NPD.
Exhaust

Colector
(Catod)

Izolator

Corp detector

Surs
( 63Ni)

Electrod
(Anod)

Izolator
Make - up
(op ional)
Efluent
(f.m. N 2 sau Ar + 10%CH4

Figura Fig.
13.10.8.
Shema
detectorului
cu captur
de electroni.
Shema
detectorului cu captur
de electroni.
Limita de detec ie atins de acest detector este 10-13 10-14, lund lindanul ca analit-test,
iar domeniul de linearitate se situeaz pe 4 ordine de m rime de semnal analitic (104).
Cercet ri recente s-au ndreptat pentru eliminarea sursei radioactive i realizarea unei
surse de electroni bazat pe desc rc ri electrice. R spunsul detectorului n acest caz

Efluent
(f.m. N 2 sau Ar + 10%CH4

Fig. 10.8. Shema detectorului cu captur de electroni.

Limita de detecie atins de acest detector este 10-13 10-14, lund lindanul ca analit-test, iar
Limita
de detec
ie atinsse situeaz
de acest
este
10-13desemnal
10-14, analitic.
lund lindanul
analit-test,
domeniul
de linearitate
pe detector
4 ordine de
mrime
Cercetrica
recente
s-au
4
iarndreptat
domeniul
de
linearitate
se
situeaz
pe
4
ordine
de
m
rime
de
semnal
analitic
pentru eliminarea sursei radioactive i realizarea unei surse de electroni bazat(10
pe ).
Cercet
ri recente
s-au
ndreptat
pentru eliminarea
radioactive
i realizarea
unei
descrcri
electrice.
Rspunsul
detectorului
n acest cazsursei
este puternic
influenat
de variaiile
surse
de electroni
bazat pe desc rc ri electrice. R spunsul detectorului n acest caz
debitului
fazei mobile.

este puternic influen at de varia iile debitului fazei mobile.


Detectorul de fotonizare

Detectorul de fotonizare
Acest detector a fost introdus de Price i colaboratorii (1968). Detectorul de fotoionizare
Acest detector a fost introdus de Price i colaboratorii (1968).[102] Detectorul de
(PID photoionization detector) este un detector aproape universal, bazat pe ionizarea
fotoionizare
(PID photoionization detector) este un detector aproape universal, bazat
moleculelor cu ajutorul radiaiei UV, cu lungimea de und n domeniul 110- 150 nm (ce corespunde
peunei
ionizarea
moleculelor cu ajutorul radia iei UV, cu lungimea de und n domeniul 110energii de 8-12 eV). Ionii rezultai sunt colectai de ctre un electrod de msur, iar curentul
150 nm (ce corespunde unei energii de 8-12 eV). Ionii rezulta i sunt colecta i de c tre un
electric nregistrat este proporional cu cantitatea de analit care ajunge n detector. PID prezint
electrod de m sur , iar curentul electric nregistrat este propor ional cu cantitatea de
sensibilitate mare fa de compui organici aromatici sau cu heteroatomi n molecul. Este un
analit care ajunge n detector. PID prezint sensibilitate mare fa de compu i organici
detector de tip distructiv, astfel c ntr- o configuraie cu alt detector nedistructiv, PID se plaseaz
aromatici sau cu heteroatomi n molecul . Este un detector de tip distructiv, astfel c ntrultimul.
o configura ie cu alt detector nedistructiv, PID se plaseaz ultimul.
Fotoionizarea are la baz tranziii electronice n molecula notat cu AB, de pe nivelul de
Fotoionizarea are la baz tranzi ii electronice n molecula notat cu AB, de pe
baz pe nivelele superioare, conducnd la ionizare:

nivelul de baz pe nivelele superioare, conducnd la ionizare:


AB + h

AB*

AB+ + e-

Energia necesar unor astfel de tranziii


este de 5-20 eV i pentru aceasta se utilizeaz
169
radiaie din domeniul ultraviolet ndeprtat.
Sensibilitatea detectorului depinde de randamentele de ionizare ale analiilor care elueaz din
coloan. In general, randamentul de ionizare a unui compus depinde de: natura sa, presiunea din
celula de detecie, intensitatea i mai ales de lungimea de und a radiaiei utilizate. Cele mai
utilizate surse de fotoionizare sunt lmpile cu hidrogen (avnd puterea standard de 10,2 eV) i
fereastra optic confecionat din MgF2.
Sensibilitatea deteciei PID (a crui schem este redat n Fig. 14) crete n general cu
creterea numrului de atomi de carbon din molecul. Pe clase de compui organici aceasta poate fi
ordonat astfel:
1
- hidrocarburi aromatice > alchene > alcani;
2
- cetone > aldehide > esteri > alcooli > alcani;
3
- compui ciclici > compui aciclici;
4
- compui cu catene ramificate > compui fr catene ramificate;
5
- compui cu -I > -Br > -Cl > -F.

compu- i ciclici
> >compu
i aciclici;
cetone
aldehide
> esteri > alcooli > alcani;
compu
i ciclici
> compu
i aciclici; i f r catene ramificate;
compu- i cu
catene
ramificate
> compu
compu
i cu>catene
ramificate > compu i f r catene ramificate;
compu- i cu
-I > -Br
-Cl > -F.
-

compu i cu -I > -Br > -Cl > -F.

Ie ire

Ie ire

Electrod Electrod
colector colector

Gaz de
purjare

Sursa
de radia
ie ie
Sursa
de radia

Gaz de
purjare

Coloana capilar

Coloana capilar
Fig. 10.9. Schema simplificat a unui detector bazat pe fotoionizare.
Figura 14. Schema simplificat a unui detector bazat pe fotoionizare.

Fig. 10.9. Schema simplificat a unui detector bazat pe fotoionizare.

Limita de detec ie a acestui detector (10-11 10-12 g/s) este mai slab dect la cei de mai
-11
-11
-12
sus, exceptnd
TCD,
dar aare
un domeniu
de
linearitate
maimai
larg
(7 ordine
m mai
rime).
Limita de
detecie
acestui
detector
(10
10-12 g/s) este
slab
dect la de
cei de
sus,

a de detec ie a acestui detector (10 10 g/s) este mai slab dect la cei de mai
exceptnd TCD, dar are un domeniu de linearitate mai larg (7 ordine de mrime).
exceptnd TCD,
dar aredeun
domeniu
de linearitate
Detectorul
emisie
molecular
n flac r mai larg (7 ordine de m rime).
Detectorul de emisie molecular n flacr

ca detector n
flame-fotometric
(FPD flame-photometric detector),
DetectorulCunoscut
de emisiei molecular
flac r

acesta este
un detector
specific
compu ilor(FPD
organici
con innd atomi
de S acesta
i P. Ace
Cunoscut
i ca detector
flame-fotometric
flame-photometric
detector),
este tia
ard un
ntr-o
rdetector
u orcompuilor
reduc
toare,
formnd
specii
PO, care
au proprietatea
Cunoscut
iflac
caspecific
flame-fotometric
(FPD
Sflame-photometric
detector),
detector
organici
coninnd
atomide
de
S2isau
P. Acetia
ard ntr-o
flacr
uor de
a
emite
radia
ie
specific
:
specii
de S2 sauilor
PO, organici
care au proprietatea
de a emite
radiaie
a este unreductoare,
detectorformnd
specific
compu
con innd
atomi
de specific:
S i P. Ace tia

ntr-o flac r u or reduc toare, formnd


specii
de S2Ssau PO, care au proprietatea de
reducere
Slegat
te radia ie specific :
S S

Slegat

S
reducere 2

S2

Un proces similar l pot da i compu ii cu P, cu formarea speciilor PO sau HPO, care emit
Un proces similar l pot da i compuii
cu P, cu formarea speciilor PO sau HPO, care emit
*
radia ie specific . Liniile spectrale
specifice
sulfului
sunt situate la 394 nm, iar n cazul
S
S
S
S
h
2
2
radiaie specific. Liniile spectrale specifice sulfului sunt situate la 394 nm, iar n cazul fosforului la
fosforului la 526 nm.
526 nm.

oces similar l Se
potcunosc
da dou
i compu
cu P, cu formarea
speciilor
PO
sau HPO,
emit
varianteii constructive
a acestui detector.
Una cu
o singur
flacrcare
(schema
dat. nLiniile
Fig. 15)spectrale
i alt variant
bazat pesulfului
dou flcri,
diferind
de cea
priniar
rolul
ie specific
specifice
sunt
situate
la anterioar
394 nm,
ncelor
cazul
dou
flcri: n prima (cea inferioar) are loc170
combustia probei, iar n cea de a doua flacr
ului la 526
nm.
(superioar) se realizeaz procesul de emitere a radiaiei speciilor excitate. In felul acesta, unele
probleme legate de stingerea flcrii la eluia din coloan a solventului probei sunt eliminate.
O variant modern a acestui detector, cunoscut sub numele de detector flame- fotometric
n puls (pulsed-flame photometric detector PFPD), se bazeaz pe realizarea unei flcri
170
discontinue (pulsat). Hidrogenul, aerul i efluentul din coloan ajung n arztor, unde sunt aprinse,
iar flacra rezultat se propag napoi n camera de combustie producnd auto-stingerea sa, dup ce
amestecul combustibil este ars. Fluxul de gaze aer, H2 i efluent din coloan ndeprteaz produsele
de ardere, iar procesul de aprindere a flcrii este reluat. Acest proces este repetat cu o frecven de
aproximativ 4 Hz. Emisia de radiaie datorat arderii carbonului este complet n cca 2-5 ms; n
schimb emisia speciilor excitate menionate anterior poate dura pn la 20 ms.

aprindere a fl c rii este reluat. Acest proces este repetat cu o frecven de aproximativ 4
Hz. Emisia de radia ie datorat arderii carbonului este complet n cca 2-5 ms; n schimb
emisia speciilor excitate men ionate anterior poate dura pn la 20 ms.
Filtru optic

Fotomultiplicator

aer
H2

Capilar

Figura 15. Schema unui detector bazat pe emisie molecular n flacr (FPD).

Fig. 10.10. Schema unui detector bazat pe emisie molecular n flac r (FPD).

Sensibilitatea detecie prin FPD depinde de intensitatea radiaiei emise de speciile excitate,
care crete cu scderea temperaturii flcrii. Acest parametru trebuie bine controlat pentru a avea o
Sensibilitatea
ie prin
FPDIn cazul
depinde
de cuintensitatea
iei emise de
bun
reproductibilitatedetec
a semnalelor
analitice.
compuilor
fosfor, rspunsulradia
detectorului
speciileesteexcitate,
care
cre te cu pescunderea
c rii. Acest
parametru
proporional
cu concentraia
domeniutemperaturii
de 4 ordine defl mrime.
In schimb,
n cazul trebuie
bine controlat
a avea
o bun
reproductibilitate
a semnalelor
analitice.
compuilor pentru
cu sulf, relaia
de calibrare
este una
de tipul log IntensitateSemnal
log Concentraie
pe In cazu
domeniu
de trei ordine
de mrime.
Limita de detecie
estepropor
de aproximativ
pentru P i ia pe un
compuunilor
cu fosfor,
r spunsul
detectorului
este
ional 0,5
cupg/s
concentra
50 pg/s
S. In cazul
acest parametru
analitic
la 0,1 pg/s
i 1sulf,
pg/s S,rela ia de
domeniu
de pentru
4 ordine
de PFPD,
m rime.
In schimb,
ncoboar
cazulpan
compu
ilor Pcu
lund
metilparationul
ca
analit-test.
calibrare este una de tipul log Intensitate
log Concentra ie pe un domeniu de tre
Semnal

ordine de m rime. Limita de detec ie este de aproximativ 0,5 pg/s pentru P i 50 pg/s
Detectorul de emisie atomic
pentru S. In cazul PFPD, acest parametru analitic coboar pan la 0,1 pg/s P i 1 pg/s S
lund metilparationul
ca emisie
analit-test.
Detectorul de
atomic (AED atomic emission detector) este un detector

universal, bazat pe trecerea analiilor la eluarea din coloan ntr-o tor de plasm unde sunt
descompui
n atomi
care emitatomic
radiaie specific. Spectrul de emisie poate fi instantaneu nregistrat
Detectorul
de emisie
cu ajutorul unei reele de fotodiode i a unei reele de difracie (dup principiul DAD).
Elementele
unui detector
AEDsunt
urmtoarele:
Detectorul
decomponente
emisie ale
atomic
(AED
atomic
emission detector)[104] este un
interfaa dintre
coloana
capilar
plasmeidin
indus
prin microunde
detector -universal,
bazat
pe cromatografic
trecerea anali
ilorilacamera
eluarea
coloan
ntr-o tor de
(microwave
induced
plasma

MIP);
plasm unde sunt descompu i n atomi care emit radia ie specific . Spectrul de emisie
camera plasmei;
poate fi instantaneu
nregistrat cu ajutorul unei re ele de fotodiode i a unei re ele de
sistemul de rcire a camerei plasmei;
difrac ie (dup
principiul DAD).
reeaua de difracie ce separ i focalizeaz spectrul de emisie ctre reeaua de
Elementele
fotodiode; componente ale unui detector AED sunt urm toarele:
sistemul de achiziie i prelucrare a datelor.
Gazul pentru susinere a plasmei este Ar de nalt puritate. Puterea microundelor pentru
171
susinerea plasmei este de 50 - 450 W.
Prin soft-ul sistemul se pot monitoriza una sau mai multe lungimi de und, n vederea
creterii sensibilitii determinrilor. Sensibilitate bun au compuii organici care conin
semimetale, precum i compuii organo-metalici. Limitele de detecie ating valori de 0,1 pg/s 1
ng/s, depinznd de elementul a crui linie de emisie este monitorizat.

CAPITOLUL 11
Separarea prin cromatografie de lichide (LC)

Separarea prin cromatografie de lichide (LC)


Istoric

11.1. Istoric

nceputul cromatografiei de lichide este atribuit lui wet (1903), care a reu it
cromatografiei
de lichide
este atribuit
lui vet
(1903),
careo acoloan
reuit pentru
prima cu
pentrunceputul
prima dat
separarea
unor compu
i naturali
colora
i pe
umplut
dat
separarea
compui
naturali
pe o coloan
umplut
cu carbonat
de calciu,
utiliznd
carbonat
deunor
calciu,
utiliznd
o colorai
faz mobil
alc tuit
din solven
i organici.
Dezvoltarea
de lichide
ca tehnic
analitic
are loccromatografiei
ceva mai trziu
i este
ocromatografiei
faz mobil alctuit
din solveni
organici.
Dezvoltarea
de lichide
ca legat
tehnic de
necesitatea
crescnd
de separare
a compu
ilor organici
din matrici
complexe.
analitic
are loc
ceva mai trziu
i este legat
de necesitatea
crescnd
de separare
a compuilor
In
iunie
1941,
Societatea
Britanic
de
Biochimie,

i
inea
cea
de-a
214-a edin
organici din matrici complexe.
de comunic
la Institutul
Na Britanic
ional de de
Cercet
ri Medicale.
aceast
ntlnire
Martin
In iunieri,1941,
Societatea
Biochimie,
i ineaLacea
de-a 214-a
edin
de i
Synge,
doi
tineri
chimi
ti
(Martin
avea
31
de
ani;
Synge

26),
au
prezentat
o
lucrare
comunicri, la Institutul Naional de Cercetri Medicale. La aceast ntlnire Martin i Synge, doi
despre
separarea
determinarea
N-acila
i dinoprobe
ln , separarea
printr-o nou
tineri
chimiti
(Martin i avea
31 de ani;amino-acizilor
Synge 26), au
prezentat
lucrarededespre
i
metod
analitic
.
Ace
tia
au
separat
acetil-prolina
de
acetil-leucina,
utiliznd
o
coloan
determinarea amino-acizilor N-acilai din probe de ln, printr-o nou metod analitic. Acetia au
umplutacetil-prolina
cu silicagel
impregnat cuutiliznd
ap (un
material
foartecupolar)
caap
faz
separat
de acetil-leucina,
o coloan
umplut
silicageli cloroform
impregnat cu
mobil
. Luafoarte
na tere
astfel
cromatografia
demobil.
parti ie,
recunoscut
apoi
ca separarede
prin
(un
material
polar)
i cloroform
ca faz
Lua
natere astfel
cromatografia
[106,107]
Exact
10
ani
mai
trziu,
Martin
i
un
alt
cromatografie
de
lichide
n
faz
normal
.
partiie, recunoscut apoi ca separare prin cromatografie de lichide n faz normal. Exact 10 ani
tn r cercet tor (A.James 29 ani) trimiteau spre publicare o lucrare descriind un proces
mai trziu, Martin i un alt tnr cercettor (A.James [108,109]
29 ani) trimiteau spre publicare o lucrare
cromatografic n care faza mobil este un gaz.
Se puneau bazele cromatografiei
descriind un proces cromatografic n care faza mobil este un gaz.[108,109] Se puneau bazele
de parti ie gaz-lichid. In anul 1948 Martin i grupul s u de cercetare ncep cercet ri la
cromatografiei de partiie gaz-lichid. In anul 1948 Martin i grupul su de cercetare ncep
Institutul Na ional din Londra cu privire la problema separ rii cromatografice a acizilor
cercetri
la caten
Institutulhidrocarbonat
Naional din Londra
cu Aplicarea
privire la problema
cromatografice
gra i, cu
mare.
separ riiseparrii
cromatografice
n faza acizilor
normal
grai,
cu
caten
hidrocarbonat
mare.
Aplicarea
separrii
cromatografice
n
faz
normal
nu
nu a dat rezultatele dorite, deoarece coeficien ii de parti ie ai acestor compu ai dat
erau
rezultatele
coeficienii
de partiie
acestoriacompui
aproape total
n favoarea
aproape dorite,
total ndeoarece
favoarea
fazei mobile.
Deciai reten
i astfelerau
separarea
lor pe
o coloan
fazei
Deciloc.
retenia
i de
astfel
separarearolurile
lor pe celor
o coloan
aveaimediat.
loc. Ideea
de a au
polarmobile.
nu avea
Ideea
a schimba
dou polar
faze anuvenit
Astfel
schimba
imediat.prin
Astfel
au realizat
prima fazcustaionar
realizatrolurile
prima celor
faz dou
sta faze
ionara venit
nepolar
tratarea
kiselgurului
Si(CH3)nepolar
2Cl2, care
prin
tratarea
kiselgurului
cu de
Si(CH3)2Cl2,
carei devine
neaderent
ctreurm
solveni
polari
i
devine
total
neaderent
c tre solven
polari total
i hidrofili.
In de
anul
tor au
realizat
hidrofili.
In
anul
urmtor
au
realizat
pentru
prima
dat
separarea
acidului
lauric
(C12)
de
acidul
pentru prima dat separarea acidului lauric (C12) de acidul stearic (C18). Mai trziu,
stearic
(C18).
Mai pe
trziu,
tehnica
bazatavea
pe acest
principiu
avea s
cunoscutprin
ca separare
prin
tehnica
bazat
acest
principiu
s fie
cunoscut
cafieseparare
cromatografie
cromatografie
lichide
n faz, de
invers,
dein
pn
n 1970
i IUPAC
considera aceast
aceast tehnic
de lichide ndefaz
invers
i pn
1970
chiarchiar
i IUPAC
considera
tehnic
analitic
doar
de
interes
istoric.
Prin
realizarea
fazelor
sta
ionare
chimic
legate
aceast
analitic doar de interes istoric. Prin realizarea fazelor staionare chimic legate aceast tehnic ia o
tehnic
ia o mare
dezvoltare,
n mai
prezent
fiind cea
maianalitic
important
tehnic Contribuiile
analitic de
mare
dezvoltare,
n prezent
fiind cea
important
tehnic
de separare.
[110]
separare.
Contribu
iile esen
iale ale luicromatografiei
Martin i Synge
la rspltite
dezvoltarea
cromatografiei
eseniale
ale lui Martin
i Synge
la dezvoltarea
au fost
n anul
1952 prin
au
fost
r
spl
tite
n
anul
1952
prin
acordarea
Premiului
Nobel
n
Chimie.
acordarea Premiului Nobel n Chimie.
Prima
sta ionar
sintetizat
esteautorilor
atribuitHalasz
autorilor
Halasz
i Sebastian
Prima
faz faz
staionar
sintetizat
este atribuit
i Sebastian
(1969),
care au
(1969),
care
au
refluxat
silicagelul
cu
1-octanol,
ob
innd
eterul
avnd
la
baz
o structur
refluxat silicagelul cu 1-octanol, obinnd eterul avnd la baz o structur destul de instabil
n
destul
de
instabil
n
prezen
a
apei,
caraterizat
de
leg
turile
Si-O-C:
prezena apei, caraterizat de legturile Si-O-C:
Si OH + HO-(CH2)7CH3

Si O

(CH2)7CH3 + HOH

In 1970 Kirkland i DeStefano au ataat lanuri hidrocarbonate la structura silicagelului prin


In 1970 Kirkland i DeStefano au ata at lan uri hidrocarbonate la structura silicagelului
utilizarea reactivilor de derivatizare de tip silanic, obinnd structuri mult mai stabile pe baz de
prin utilizarea reactivilor de derivatizare de tip silanic, ob innd structuri mult mai stabile
pe baz
de leg
Si-O-Si, ca
n exemplul urm tor:
legturi
Si-O-Si,
ca turi
n exemplul
urmtor:
CH3
Si OH + Cl

Si (CH2)7CH3
CH3

CH3

179

Si O Si (CH2)7CH3 + HCl
CH3

Horvath,
Knox,
Soczewinski,Snyder,
Snyder,Scott,
Scott,Kirkland,
Kirkland, Guiochon
Horvath,
Knox,
Soczewinski,
Guiochon sunt
suntdoar
doarcteva
cteva nume
nume
mari
de
oameni
de
tiin
care
au
adus
contribu
ii
fundamentale,
teoretice
sau
mari de oameni de tiin care au adus contribuii fundamentale, teoretice sau experimentale,
la
experimentale, la dezvoltarea cromatografiei de lichide ca tehnic analitic de mare
dezvoltarea cromatografiei de lichide ca tehnic analitic de mare performan.
performan .
11.2. Clasificarea separ rilor prin cromatografia de lichide
Reten ia n cromatografia de lichide este un proces complex, care implic

Clasificarea separrilor prin cromatografia de lichide


Retenia n cromatografia de lichide este un proces complex, care implic interacii ale
speciilor din proba injectat att cu faza mobil, ct i cu faza staionar. Cunoaterea mecanismului
dup care se desfoar procesul de retenie are ca prim avantaj pentru analist posibilitatea
prediciei acestuia i mai ales alegerea acelor condiii experimentale pentru atingerea unor
selectiviti maxime ntre analii. Cea mai important clasificare a separrilor LC este bazat pe
mecanismul care st la baza separrii, care la rndul su depinde de natura celor faze (staionar i
mobil) participante n procesul de separare cromatografic. Cele mai importante clase de separri
LC sunt urmtoarele:
A) Cromatografia de lichide n faz normal (NP-LC normal-phase liquid
chromatography) n care faza staionar este polar, iar faza mobil este alctuit dintr- un solvent
nepolar cu un coninut mic de modificator polar.
B) Cromatografia de lichide n faz invers (RP-LC reversed-phase liquid
chromatography) n care faza staionar este nepolar i hidrofob, iar faza mobil este alctuit
dintr-un solvent polar.
C) Cromatografia de lichide prin mecanism de schimb ionic (IC ion chromatography),
n care faza staionar este un schimbtor de ioni, iar faza mobil este apoas cu un pH controlat.
D) Cromatografie de lichide prin mecanism de excludere (sau cromatografie pe gel), n care
faza staionar este un gel cu porozitate controlat, iar componenii probei sunt separai n funcie
de forma i dimensiunea molecular.
E) Cromatografie de lichide bazat pe interacia diferit a compuilor asimetrici cu anumite
structuri din faza staionar (numite selectori de chiralitate).
Cele mai importante separri cromatografice se efectueaz n prezent pe o coloan
cromatografic (tab. 5.), confecionat dintr-un metal. In interiorul coloanei se gsete faza
staionar, fixat la capete ntre dou frite. Diametrul i lungimea sunt parametri constructivi,
funcie de care coloanele se mpart n mai multe clase, descrise n tabelul urmtor.
Cromatografia de lichide planar este o tehnic cu aplicaii din ce n ce mai puin utilizate n
practic analitic. Cromatografia pe hrtie sau cromatografia n strat subire n diverse variante
(ascendent sau descendent) pot decurge prin unul din mecanismele de mai sus, iar vizualizarea
compuilor separai sub forma de spoturi se poate face utiliznd proprietatea de absorbie sau de
fluorescen a analiilor separai, cu sau fr reactiv de derivatizare (aa-numita developare). Exist
i posibilitatea ca spoturile rezultate s fie izolate i apoi printr-o procedur de extracie cu un
solvent adecvat, analitul coninut s fie determinat printr-o tehnic spectrometric.
Tabelul 5. Clasificarea coloanelor n LC n funcie de dimensiuni.
Descriere

i.d. (mm)

d.p. (m)

Coloane deschise
Coloane nanobore
Coloane capilare
Coloane microbore
Coloane narrow-bore
Coloane normal-bore
Coloane semi-preparative
Coloane preparative

< 0,025
0,025 0,1
0,1 - 1
1-2
2-4
4-5
5 - 10
> 10

3-5
3-5
3-7
5 - 12
5 - 20

Debit optim faz


mobil
< 25 nL/min
25-4000 nL/min
0,4 200 L/min
0,05 1 mL/min
0,3 3 mL/min
1 10 mL/min
5 40 mL/min
> 20 mL/min

Faze mobile n cromatografia de lichide


Faza mobil (nepolar) n cromatografia de lichide n faz normal (NP-LC) este alctuit
din dou componente principale:
a) solventul nepolar, care poate fi unul dintre solvenii: pentan, hexan, ciclohexan;
b) modificator polar (ntr-un procent foarte mic): tetrahidrofuran, 2-propanol, acetonitril, eteri,
esteri, cloroform, etc.
Acetia pot fi clasificai n solveni slabi (cu putere elutropic mic) i solveni tari (putere
elutropic mare).
Faza mobil (polar) n RP-LC este n general alctuit din dou componente principale:
componenta apoas i componenta organic. Parametrii fazei mobile care influeneaz retenia n
RP-LC sunt urmtorii:
Natura modificatorului organic (acetonitril, metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol,
tetrahidrofuran, dioxan, etc); puterea elutropic a modificatorului organic este o msur a
capacitii sale de a micora factorul de capacitate (timpul de retenie) al analiilor: cu ct puterea
elutropic este mai mare, cu att timpul de retenie va fi mai mic.
Coninutul modificatorului organic (% n volume): de regul, cu ct concentraia
modificatorului organic este mai mare, cu att timpul de retenie al analiilor este mai mic (prin
creterea solubilitii analiilor n faza mobil);
pH-ul i componentei apoase din faza mobil influeneaz retenia analiilor cu proprieti
acido-bazice;
Natura acidului (acizi formic, acetic, trifluoracetic, tricloracetic) sau a tamponului utilizat n
componenta apoas (se pot utiliza soluii tampon pe baz de fosfat, borat, acetat, etc, cu amoniac,
trietilamina, dar cu pH-ul cuprins ntre 2 i 8);
Tria ionic a componentei apoase (care depinde de concentraia unor sruri adugate, sau
de concentraia soluiei tampon);
Natura i concentraia agenilor de formare de perechi ionice (R4N+; R-SO3-; R-O-SO3-,
etc).
Solvenii folosii n LC trebuie s fie filtrai (pentru a nu conine particule n suspensie), degazai i
de puritate cromatografic. Folosirea unor solveni cu particule solide n suspensie conduce la
colmatarea coloanei cromatografice i a sistemului cromatografic. Prezena unor gaze (N2 sau O2)
dizolvate n faza mobil poate influena detecia, deoarece dup ieirea din coloana cromatografic
fluxul mobil are o presiune mai mic dect n coloan i astfel se pot forma bule gazoase care pot
perturba n procesul de detecie.
Faze staionare n cromatografia de lichide
Faz normal
Cea mai important faz staionar n cromatografia de lichide n faz normal este
silicagelul (SiO2). Acesta este considerat un adsorbant foarte polar, datorit gruprilor silanol
reziduale din matricea sa. De asemenea, Al2O3, ZrO2, sau TiO2 sunt menionate des ca faze
staionare polare n NP-LC. Fazele staionare polare legate sunt derivate din silicagel; acestea conin
grupri funcionale polare X, precum hidroxil, nitro, cian, sau amino, legate printr-un lan
hidrocarbonat scurt R:
Utiliznd tehnica derivatizrii amino-silicagelului cu acidul dodecamolibdofosforic s-au
realizat noi faze staionare polare, utilizate n separarea compuilor aromatici. Retenia puternic a

compuilor aromatici pe astfel de faze staionare polare se explic prin interacia puternic a
orbitalilor din nucleele aromatice cu orbitalii d ai Mo.
Faz invers
In cromatografia de lichide n faz invers (RP-LC) fazele staionare sunt hidrofobe. Acestea
se pot obine prin modificarea chimic a silicagelului (sau chiar aluminei) sau pot fi de natur
polimeric. De aceea, aceste faze staionare se mai numesc i faze chimic legate (bonded phases).
Principiul de sintez a fazelor chimic legate se bazeaz pe reacia gruprilor silanol reziduale din
matricea silicagelului tratat termic cu un agent de silanizare. In figura urmtoare, prin reacia de
derivatizare, n una din cele dou modaliti menionate, s-a introdus radicalul hidrocarbonat
octadecil legat de matricea silicagelului.
In funcie de natura radicalului R grefat prin intermediul reactivului de derivatizare de tip
silanic se disting urmtoarele faze staionare (redate n ordinea descresctoare a hidrofobicitii lor):
-C18H37 (octadecil-silicagel, sau C18);
-C8H17 (octil-, sau C8);
C6, C4, C2
-C6H5 (fenil-);
-C6H4-NO2 (nitrofenil);
-(CH2)3-CN(cianopropil).
Cu toate acestea, n materialul rezultat dup reacia de silanizare o parte nsemnat a
gruprilor silanol rmn intacte. Prezena acestora n compoziia fazei staionare poate influena
mecanismul de separare, datorit interaciunilor dipol-dipol sau prin legturi de hidrogen cu grupri
similare din moleculele de analit. Derivatizarea complet a acestora conduce la faze staionare
complet inertizate (cunoscute n literatura de specialitate ca faze staionare de tip end-capped) i
se poate efectua prin utilizare unui reactiv de derivatizare trifuncional, plus aplicarea n final a unei
silanizri cu trimetilclorsilan, care datorit volumului su mai mic poate accesa restul de grupri
silanol, ecranate steric de gruprile chimic legate deja introduse anterior.
Fazele staionare chimic modificate de tip monolitic, coninnd radicali hidrocarbonai R, se
obin prin procese sol-gel. Aceste materiale au un aspect ceramic, caracterizate de o porozitate
nalt, iar radicalii R sunt orientai n afara matricei solide. Prepararea unor astfel de materiale de tip
ceramic pornete de la reactivul de baz tetrametoxisilan, care prin hidroliz acid (n prezen de
HCl) formeaz compui intermediari cu legturi Si-OH.
Fazele staionare modificate din silicagel au o mare aplicabilitate n cromatografia de
lichide, dar prezint i unele inconveniente. Dou dintre inconvenientele cele mai serioase ale
acestor faze staionare sunt:
- domeniul de pH al componentei apoase utilizate este relativ restrns (2-8); la pH-uri sub 2 are loc
hidroliza gruprilor O-Si(CH3)2-R, iar la pH-uri mai mari de 8 are loc dizolvarea silicagelului;
- acestea nu pot fi utilizate n separri cromatografice pentru concentraii ale componentei apoase n
faza mobil apropiate de 100%. In acest caz lanurile hidrocarbonate legate de structura
silicagelului colapseaz, ele neputnd a reveni la conformaia iniial dup utilizarea de faze mobile
total sau aproape total apoase (mai mari de 98%).
Colapsarea lanurilor hidrocarbonate este similar formrii micelelor, lanurile
hidrocarbonate avnd tendina de a micora suprafaa de contact cu mediul apos.
Acest ultim inconvenient s-a putut rezolva prin realizarea de faze staionare chimic
modificate, coninnd grupri polare intercalate ntre lanul hidrocarbonat i atomul de siliciu. O
astfel de structur este mai flexibil la faze mobile total sau aproape total apoase. Sinteza lor
presupune dou etape, una de introducere a gruprii polare, urmat de introducerea radicalului

hidrofob R. Dou dintre posibilitile aplicate n obinerea fazelor staionare chimic legate cu
grupri polare intercalate sunt prezentate n continuare.
Introducerea gruprii polare influeneaz procesul de retenie cromatografic. Gruparea
polar poate interaciona cu grupri polare din moleculele de analit. In cazul gruprilor polare
intercalate de tip amidic sau carbamic, pot interveni interacii - ntre analit i gruparea polar din
faza staionar. Astfel, ordinea de eluie se poate modifica n cazul perechii de analii trans-stilben i
dibenzil la eluia printr-o coloan umplut cu faz staionar C18 cu grupare polar intercalat,
comparativ cu una C18 clasic. Spre deosebire de dibenzil, molecula de trans-stilben posed n plus
o dubl legtur carbon-carbon, care determin o interacie mai puternic cu legturile din
gruprile polare ale fazei staionare. In schimb, n cazul separrii pe o coloan clasic C18, ordinea
de eluie este dat de ordinea hidrofobicitii; trans-stilbenul este mai puin hidrofob dect
dibenzilul, datorit dublei legturi, astfel c va elua primul din coloana cromatografic.
Componentele unui sistem HPLC
Componentele de baz ale unui cromatograf de lichide (LC) sunt: sistemul de distribuire a
solvenilor (SDS), care asigur obinerea i transportul fazei mobile n coloana cromatografic,
compartimentul coloanei (termostatate), injectorul i sistemul de detecie. Sistemele HPLC moderne
sunt echipate cu un sistem de achiziie i prelucrare a datelor (calculator), care totodat are rolul de
a controla
parametrii
n procesul
cromatografic.
Sistemul
de implicai
distribuire
a solven
ilor
Sistemul
de distribuire
a solvenilora solven ilor (SDS) este alc tuit din mai multe componente
Sistemul
de distribuire

principale, a c rui configura ie i loc n cadrul sistemului general HPLC sunt redate
Sistemul de distribuire a [128]
schematic
n Fig. 11.16. solvenilor (SDS) este alctuit din mai multe componente principale, a
crui configuraie i loc n cadrul sistemului general HPLC sunt redate schematic n Fig. 16.

Calculator
Termostat
SDS

Proba

Detector

Coloana

Injector

Coloan
de gard

Fluxul fazei mobile n sistem


Fluxul informa ional n sistem

SDS:
A
Cabinet de
solven i
(incluznd
degazor)

Senzor de
presiune
Sistem
de
propor ionare
cu valve

Pomp
de
mare
presiune

Damper
Purjare de
faz mobil

Precoloan

Fluxul fazei mobile n sistem


Fluxul informa ional n sistem

SDS:
A

Senzor de
presiune

Cabinet de
solven i
(incluznd
degazor)

Sistem
de
propor ionare
cu valve

Pomp
de
mare
presiune

Damper

Precoloan

Purjare de
faz mobil

Cabinet de
solven i
(incluznd
degazor)

Pompa
1
Pompa
2

Mixer

Senzor de
presiune

Damper

Precoloan

Purjare de
faz mobil

Figura 16. Configuraia unui sistem HPLC, cu dou variante SDS.


Fig. 11.16. Configura ia unui sistem HPLC, cu dou variante SDS.

Funciile SDS, n una din variantele date n figura de mai sus, sunt urmtoarele:
condiionarea
componentelor
(apoase i organice)
din faza
mobil;
c)a) pomparea
fazei
mobile
ia date
realizat
spre
, cu un
Func iile
SDS,
n unacu
dincompozi
variantele
n figura
decoloana
mai sus,cromatografic
sunt urm toarele:
b)
amestecarea
acestora
n
proporia
necesar
separrii
cromatografice;
debit
stabilit
i f componentelor
r varia ii (pulsuri)
ale acestuia;
a)
condi
ionarea
(apoase
i organice) din faza mobil ;
c)
pomparea
fazei
mobile
cu
compoziia
realizat
spre
coloana
cromatografic,
cu un debit
stabilit iii
d)
m
surarea
presiunii
n
interiorul
sistemului
cromatografic,
care poate
da indica
b) amestecarea acestora n propor ia necesar
separ
rii cromatografice;
fr variaii
ale acestuia;
privitoare
la (pulsuri)
func ionarea
unor elemente ale sale;
e)d)protejarea
coloanei
cromatografice
de posibile
deterior care
ri cauzate
deindicaii
faza mobil
.
msurarea presiunii n interiorul sistemului
poate da
privitoare
la
207cromatografic,
Recipien
ii pentrualesolven
funcionarea
unor elemente
sale; i sunt utiliza i pentru stocarea, filtrarea on-line i
degazarea
ilor cromatografice
stoca i. De regul
, ace tideteriorri
recipien icauzate
sunt vase
de sticl
, deRecipienii
volume
e) protejareasolven
coloanei
de posibile
de faza
mobil.
i geometrii
variabile.
In cazul
rar) n
care amestecul
de solven
i este sensibil
la
pentru
solveni
sunt utilizai
pentru(mai
stocarea,
filtrarea
on-line i degazarea
solvenilor
stocai. De
prezen
a
luminii,
se
recomand
vase
de
sticl
brune.
regul, aceti recipieni sunt vase de sticl, de volume i geometrii variabile. In cazul (mai rar) n
Degazorul
are rolul
a ndep
rta aerul
dizolvat
n solvenvase
ii utiliza
i pentru
care amestecul
de solveni
estede
sensibil
la prezena
luminii,
se recomand
de sticl
brune. faza
mobil , care poate influen a negativ detec ia (n special prin fluorescen ) sau procesul
Degazorul are rolul de a ndeprta aerul dizolvat n solvenii utilizai pentru faza
de reten ie. Degazarea se poate face prin ultrasonare, naintea nceperii experimentelor
mobil, care poate influena negativ detecia (n special prin fluorescen) sau procesul de retenie.
cromatografice, sau prin barbotarea de He, care ar antrena cu el componen ii aerului,
ultrasonare,
experimentelor
cromatografice,
dizolva Degazarea
i n solvensei.poate
Cea face
maiprin
utilizat
metodnaintea
este nceperii
aplicarea
vidului, la trecerea
fazei
sau
prin
barbotarea
de
He,
care
ar
antrena
cu
el
componenii
aerului,
dizolvai
n
solveni.
Cea din
mai
mobile prin dreptul unei membrane permeabile, a a dup cum se poate observa
[128]
utilizat
figura
urmmetod
toare.este aplicarea vidului, la trecerea fazei mobile prin dreptul unei membrane
permeabile, aa dup cum se poate observa din figura 17.
Pomp de
vid
Membran

Spre pompa
HPLC

Faza mobil

Figura 17. Componentele unui degazor ale unei configuraii HPLC.

Fig. 11.17. Componentele unui degazor ale unei configura ii HPLC.

Pompele de nalt presiune au rolul de a pune n mi care fluxul fazei mobile de la


vasele de stocare, pn la ie irea fazei mobile din sistemul cromatografic. Faza mobil
ntmpin o rezisten
mare n coloana cromatografic datorit compactit ii fazei
sta ionare i astfel se realizeaz presiuni mari la intrarea fazei mobile n coloana

Pompele de nalt presiune au rolul de a pune n micare fluxul fazei mobile de la vasele de
stocare, pn la ieirea fazei mobile din sistemul cromatografic. Faza mobil ntmpin o rezisten
mare n coloana cromatografic datorit compactitii fazei staionare i astfel se realizeaz presiuni
mari la intrarea fazei mobile n coloana cromatografic. Se cunosc multe variante constructive de
pompe de nalt presiune pentru sistemele HPLC. In principiu, micarea unui piston n corpul
pompei (de form cilindric) asigur distribuirea fazei mobile n sistemul cromatografic. Pistonul
este confecionat din safir sintetic sau oxid de zirconiu, iar corpul pompei este realizat din titan, oel
inoxidabil sau chiar materiale polimerice rezistente la frecarea pistonului (PEEK).
Rolul damperului este acela de a atenua fluctuaiile de debit ale fazei mobile n sistem.
Principiul de funcionare se bazeaz pe atenuarea fluctuaiilor de debit al fazei mobile cu ajutorul
unei membrane elastice ce separ dou caviti. In una se gsete un lichid avnd o compresibilitate
joas (un ulei), iar prin cealalt trece faza mobil.
Mixerul are rolul de a omogeniza faza mobil constituit din cel puin dou componente
(una apoas i alta organic). Amestecarea se poate face static, prin trecerea solvenilor printr-o
coloana umplut cu bile mici de oel inoxidabil, sau dinamic, prin utilizarea agitrii magnetice.
Precoloana menionat n configuraiile de mai sus este opional, atunci cnd se utilizeaz n
separarea cromatografic mecanismul de separare n faz normal. In acest caz, solvenii organici
trebuie s nu conin urme de ap, care s-ar reine n coloana cromatografic (cu faza staionar silicagel) modificnd drastic proprietile sale adsorbante.
Sistemul de injecie
Injectorul n HPLC este o interfa realiznd transferul exact i reproductibil al volumul de
prob ntre sistemul operator i coloana cromatografic ntr-un front (band) ct mai ngust posibil.
Injectorul este poziionat ntre sistemul de pompe i coloana cromatografic. De regul, proba n
analiza prin HPLC este lichid. Tubulatura folosit pentru conectarea injectorului cu coloana
cromatografic trebuie s minimizeze pierderea de eficien (prin lrgirea frontului probei
injectate). Unul dintre cei mai importani parametrii n analiza cromatografic este volumul de
injecie. In funcie de acest parametru, metodele LC pot fi clasificate n urmtoarele clase:
a) micro (cu un volum de injecie n intervalul 2 - 500 nL);
b) analitice (0,5 L 1 mL);
c) preparative (0,1 10 mL).
Solventul probei trebuie s fie n concordan cu mecanismul aplicat n separarea
cromatografic, iar de cele mai multe ori compoziia sa este identic (n special la volume mari de
prob) sau foarte asemntoare cu cea a fazei mobile.
Injectorii n HPLC se mai numesc i valve de comutare (switching valves). Ele sunt
compuse din dou pri principale: statorul i rotorul. Statorul are rolul de a face legtura cu
cellalte componente ale sistemului HPLC, prin intermediul tubulaturii i elementelor de etaneitate
(ferule sau nuturi). Rotorul este o pies mobil care face conexiunea cu diferitele porturi ale
statorului. Dup cum se poate observa din Fig. 18 operaia de injecie cuprinde dou etape:
ncrcarea buclei de injecie (LOAD)i apoi rotirea valvei pentru ca volumul probei s se situeze
n direcia fluxului fazei mobile (INJECT). Acestea pot fi efectuate manual sau automat.

rotirea valvei pentru ca volumul probei s se situeze n direc ia fluxului fazei mobile
(INJECT). Acestea pot fi efectuate manual sau automat.

Injectarea n coloan

nc rcarea buclei

Bucla de injec ie

Bucla de injec ie

Spre coloan

Spre coloan

Prob

Prob

Pomp

Pompa

Reziduu

Reziduu

Figura 18. Schema valvei cu 6 porturi (tip Rheodyne), utilizat n injecia HPLC.

Fig. 11.18. Schema valvei cu 6 porturi (tip Rheodyne), utilizat n injec ia HPLC.

Detectori n cromatografia de lichide


209

Detectorul n cromatografia de lichide trebuie s ndeplineasc cel puin dou condiii: 1) s


aib un rspuns rapid (n timp real); 2) proprietatea msurat trebuie s fie diferit pentru analiii de
interes care elueaz din coloan i componentele fazei mobile.
Primul detector realizat n cromatografia de lichide a fost cel bazat pe msurarea indicelui
de refracie. Dei este un detector universal, sensibilitatea acestuia este foarte slab, putnd fi
utilizat la determinarea concentraiilor mari de analii din probe (peste 10 ppm).
Cei mai importani detectori n HPLC sunt cei spectrometrici UV-VIZ. Principiul de detecie
poate fi absorbia molecular sau emisie molecular (fluorescena). Detectorii de absorbie
molecular UV-VIZ se bazeaz pe msurarea absorbanei unui fascicul monocromatic n
concordan cu legea Lambert-Beer. Analiii trebuie s conin n structura lor un cromofor. Limita
de detecie a detectorilor bazai pe absorbie molecular este de 0,1 1 ng analit injectat n coloan.
Detectorii bazai pe absorbie molecular n domeniul UV-VIZ sunt n principal de dou
feluri:
1) detectori cu lungime de und variabil, de tip dispersiv:
2) detectori bazai pe reea de diode (diode-array detector DAD).
Detectorul cu lungime variabil utilizeaz o surs de radiaie continu pe domeniul UV/VIZ,
iar selectarea lungimii de und la care are loc detecia se face cu ajutorul unei reele de difracie
(holografic). Alegerea lungimii de und pentru nregistrarea cromatogramei se face cunoscnd
spectrele de absorbie ale analiilor detectai. O schem a acestui detector este redat n figura 19.

domeniul UV/VIZ, iar selectarea lungimii de und la care are loc detec ia se face cu
ajutorul unei re ele de difrac ie (holografic ). Alegerea lungimii de und pentru
nregistrarea cromatogramei se face cunoscnd spectrele de absorb ie ale anali ilor
detecta i. O schem a acestui detector este redat n figura de mai jos.

Sursa de
radia ie

Faza
mobil
Re ea
holografic

Celula de cuar

Fotodiode

Fig. 11.19.
Detectorcunlungime
ultraviolet
lungime
de und
,
Figura 19. Detector
n ultraviolet
de cu
und
variabil,
n carevariabil
1 este fotodioda
pentru
n care 1 este fotodioda pentru detec ie, iar 2 este fotodioda de referin .
detecie, iar 2 este fotodioda de referin.

Sistemele
deteccuiereea
cu re
desunt
diode
cele mai performante
n (tehnica
analiza
Sistemele dede
detecie
de ea
diode
cele sunt
mai performante
n analiza HPLC
HPLC
(tehnicacueste
abreviat Tehnica
cu HPLC-DAD).
Tehnica
spectrometric
DAD
un caz
este abreviat
HPLC-DAD).
spectrometric
DAD este
un caz particular
de este
caracterizare
particular
de
caracterizare
spectral
a
interac
iei
dintre
radia
ia
electromagnetic
i
spectral a interaciei dintre radiaia electromagnetic i prob (n cazul HPLC, fluxul mobilprob
care
(najunge
cazulnHPLC,
fluxul
mobil
care
ajunge
n
celul
),
prin
m
surarea
simultan
a
intensit
celul), prin msurarea simultan a intensitii luminii pe intervale de lime spectralii
egal. Aceasta se realizeaz prin cteva etape secveniale, dup cum urmeaz:
- interacia probei cu un fascicul policromatic de radiaie;
210
- dispersia spaial a radiaiei transmise (eventual reflectat sau emis de prob) dup lungime
de und prin utilizarea unui element optic fix;
- focalizarea radiaiei dispersate ntr-un plan focal plat;
- eantionarea simultan a radiaiei dispersate la intervale egale cu ajutorul unor detectori
fotosensibili, poziionai precis n planul focal plat.
Fiecare dintre detectori de tip fotodiod, aranjai unul lng altul, are capacitatea
de msurare a intensitii de radiaie pe intervale spectrale. Rezoluia msurtorilor spectrale
depinde de numrul de fotodiode utilizate. Dac de exemplu, pe domeniul spectral 200 1100 nm
rezoluia msurtorilor spectrale este de 1 nm, numrul de fotodiode plasate n reea este de 900. In
felul acesta, acest detector poate surprinde spectrul de absorbie UV-VIZ n timp real (instantaneu).
Schema unui detector bazat pe reea de diode este redat n figura 20.

fotodiode plasate n re ea este de 900. In felul acesta, acest detector poate surprinde
spectrul de absorb ie UV-VIZ n timp real (instantaneu).
Schema unui detector bazat pe re ea de diode este redat n figura urm toare.
Faza
mobil

Lentil

Celula de cuar

1) SI = 0, unul dintre spectre este linia de baz (

A( i )

0 , sau

BRe
( i ea
) 0 , oricare
iholografic

din UV-VIZ);
2) SI = 100, cele dou spectre sunt identice;
3) SI
> 99,
cele dou spectre sunt similare;
Sursa
UV-VIZ:
Celul
4) 90 <lamp
SI < 99, exist similaritate ntre cele dou spectre, dar interpretarea trebuie f cut
n flux
cu
ie; +
cuaten
deuteriu
5) SI < lamp
90, practic cele dou spectre sunt diferite.
Re ea de
cu halogeni
fotodiode
Obs.: cu ct num rul de puncte este mai mare, cu att gradul
de similaritate este
mai obiectiv n compararea celor dou spectre.
Figura 20. Detector n ultraviolet cu reea de fotodiode (DAD).
Detec
de fluorescen
(FLD) este
n cazul(DAD).
anali ilor fluorescen i.
Fig.ia11.20.
Detector n ultraviolet
cu reutilizat
ea de fotodiode
Abrevierea
acestei
tehnici
analitice
este
HPLC-FLD.
In
felul
acestaeluai,
selectivitatea
Spectrele nregistrate prin DAD pot fi utilizate la identificarea compuilor
prin
determin
rilor
este
asigurat
i
de
proprietatea
anali
ilor
de
a
emite
radia
ie
n
vizibil,
compararea spectrelor obinute cu cele din librria spectral.
atunci cnd sunt excita i cu radia ie n ultraviolet. Parametrii detec iei de fluorescen sunt
Spectrele
nregistrate
DAD
fi utilizate
identificarea
compu
Detecia de
fluorescen prin
(FLD)
este pot
utilizat
n cazullaanaliilor
fluoresceni
(fig. ilor
21).elua i,
i emisie. Exemple de compu i organici cu propriet i fluorescente sunt
excita ie
prin Abrevierea
compararea
spectrelor
ob inute
cele dinInlibr
spectral
. Gradul
de similaritate
acestei
tehnici analitice
este cu
HPLC-FLD.
felulriaacesta
selectivitatea
determinrilor
hidrocarburile aromatice polinucleare (de exemplu cele 16 PAHs din Tabel 2.5). In cazul
este asigurat
i de proprietatea
analiilor
de a emite
radiaiecu
n A
vizibil,
atunci
cnd sunt excitai
(similarity
index
ntre dou
spectre,
notate
(cel
experimental)
i B cu
(celprin
din
compu
ilor f r SI)
propriet
i fluorescente
se
poate aplica
o reac
ie de derivatizare,
nn ultraviolet.
Parametrii
denfluorescen
sunt
excitaie
i(grupare
emisie.cu
In cu
cazul
libr radiaie
riacare
spectral
), exprimat
procentual,
domeniul
UV-VIZ
se calculeaz
ajutorul
structura
anali
ilor
sdeteciei
se introduc
o grupare
fluorogen
propriet
i
compuilor
fr
proprieti
fluorescente
se
poate
aplica
o
reacie
de
derivatizare,
prin
care
n
rela iei:fluorescente).
structura analiilor
introduc
o grupare
fluorogen
(grupare
proprieti
fluorescente).
Detecsiesede
fluorescen
este
influen at
de ocuserie
de factori
care in de natura
Detecia
de
fluorescen
este
influenat
de
o
serie
de
factori
care
in
de
natura
analiilor
sauultimi
1
anali ilor sau de condi iile experimentale ale separ rilor cromatografice.
Ace ti
2
A
(
)
B
(
)]
[
A
(
)
B
(
)
i
i
i
i
de condiiile
separrilor
cromatografice.
ultimi parametri sunt redai i
parametriexperimentale
sunt reda i ale
i discuta
i n tabelul
n i11.7. Aceti
i
i
discutai
n
tabelul
6.
(11.21)
SI 100

A(

i)

1
[
n

A(
i

i )]

2
} {LampBcu
( Xe
i)
i

1
[
n

B(

i )]

, unde i este lungimea de und n care seFante


m de
soar
absorban ele celor dou spectre de
colimare
comparat, A( i) i B( i).
Oglind
In func ie de valorile lui SI putem distinge urm toarele situa ii:
Re ea holografic excitare

Re ea
holografic

211

1
2
Lentil

Celul n flux

Fotomultiplicator

Figura 21. Schema unui detector de fluorescen cu monocromator, utilizat n HPLC.


Fig. 11.21. Schema unui detector de fluorescen

212

cu monocromator, utilizat n HPLC.

Tabel 6 Influena unor parametrii experimentali asupra deteciei de fluorescen.


Parametrul fazei
Efectul asupra fluorescenei
mobile
Att lungimea de und a emisiei, ct i intensitatea fluorescenei, n cazul
compuilor aromatici cu grupri funcionale disociabile sunt puternic
pH
dependente de valoarea pH-ului, precum i de interaciile prin legturi de
hidrogen.
Influen cu un ordin de mrime asupra intensitii i deplasarea lungimii de
und de emisie maxim datorit interaciunilor puternice cu solventul. O
deplasare a benzii de emisie ctre lungimea de und mai mare se observ la
Solvent
creterea constantei dielectrice a solventului. Dac solventul absoarbe fie la
lungimea de und de excitaie, fie de emisie, atunci are loc o scdere a
sensibilitii deteciei analiilor din prob.
Randamentul de fluorescen este influenat de temperatur: prin creterea
Temperatura
temperaturii randamentul de fluorescen scade de ordinul 1- 2%/C.
Prezena impuritilor, n special a oxigenului dac solvenii nu sunt
corespunztor degazai, poate produce un efect de stingere (quenching) a
Impuriti
semnalului de fluorescen, n special atunci cnd concentraiile analiilor
sunt mici, la limita domeniului de detecie.
Sursele cu intensitate mare a radiaiei utilizate pentru excitare pot produce n
unele cazuri descompunerea unor analii, proces care depinde de timpul de
Debit
staionare al analiilor n celula de detecie, care, la rndul lui, depinde de
debitul fazei mobile.
Un detector aproape universal, dar cu sensibilitate sczut, este detectorul bazat pe
msurarea radiaiei mprtiate (evaporative light scattering detector ELSD). Acesta este utilizat
cu precdere pentru detecia compuilor organici nevolatili. Este considerat un detector de tip
distructiv i de aceea ntr-o configuraie cu mai muli detectori va fi plasat ultimul n serie. Schema
unui astfel de detector este redat n Fig. 22. Relaia dintre aria picului cromatografic obinut cu un
astfel de detector pentru un compus i (Ai) i cantitatea de analit injectat n coloana cromatografic
(mi) este nelinear, fiind printre puinele relaii de nelinearitate n chimia analitic ntre cantitate de
analit i rspunsul deteciei.

Efluent din coloan


Camer de
nebulizare
N2 sau aer
Celul de
detec ie
Surs de
radia ie

Fotomultiplicator
Figura 22. Elementele componente ale unui detector ELSD.

Fig. 11.22. Elementele componente ale unui detector ELSD.

11.14. Derivatizarea n analiza HPLC

Achizi ie
de date

a cromatografiei planare, n care faza sta ionar solid


(de ire
regul
, o plac
de sticl ). Datorit
simplit
ii sale
Cromatografia n strat sub
(thin-layer
chromatography
TLC) este
o variant
cromatografiei planare, n care
sta ionar
solid
este depus pe
o suprafa
inert un
cufaza
destul
succes
n laboratoare
pentru
separarea
de regul Cromatografia
, o plac densticl
). Datorit
simplit tehnicile
ii sale, aceast
tehnic este aceasta
nc utilizat
Dintre toate
cromatografice,
ofer
strat subire
u destul succes n laboratoareunui
pentru
separarea
unormare
amestecuri
de compu
num
r foarte
de probe
(pni organici.
la 50-6
Dintre toate tehnicile
cromatografice,
aceasta
ofer
posibilitatea
separ
rii
simultane
Cromatografia n strat
subire (thin-layer
chromatography
TLC) este o nc
variantprev
a
European
, Britanic
sau American
d ame
nui num cromatografiei
r foarte mare
probe
(pn solid
la 50-60
depeprobe).
planare,de
n care
faza staionar
este depus
o suprafaAstfel,
inert (deFarmacopeile
regul, o
impurit
i
corelate
n
unele
substan
e
active
din unor
formu
de sticl).sau
Datorit
simplitii nc
sale, aceast
este nc
utilizat
cu destul
succes n
uropean plac
, Britanic
American
prev tehnic
d metode
TLC
pentru
determinarea
Proba
este
aplicat
a a-numita
linie de s
laboratoare npentru
unor
amestecuri
compui
organici.peDintre
toate tehnicile
mpurit i corelate
unelesepararea
substan
e active
din de
formula
ii farmaceutice.
cromatografice, aceasta oferforma
separrii
simultane
a unui
numr
foarte mare
probe . Cap
unui
spot,de
ct
mai
in
ntins
cudeputin
Proba
este aplicat pe aposibilitatea
a-numita
linie
start
de pu
pe
placa
cromatografic
sub
(pn la 50-60 de probe). Astfel, Farmacopeile European, Britanic sau American nc prevd
orma unuimetode
spot,TLC
ctpentru
mai determinarea
pu in ntr-un
ntinsunor
cuimpuriti
putin ce
.corelate
Cap
tuline
inferior
pl cii este
apoi plasat
tanc
con
fazaalmobil
necesar
sepa
n unele substane active din formulaii
ntr-un tanc
ce con ine faza mobil
rii. Aceasta
va migra
stratul necesar
de faza separ
sta ionar
. Componen
ii vertical
probei prin
vor p
farmaceutice.
tratul de faza Proba
sta ionar
.
Componen
ii
probei
vor
participa
la
procesul
de
parti
ie
ntre
este aplicat pefaza
aa-numita
linie dei start
de pe
placa
cromatografic
sub forma
mobil
faza
sta
ionar
; cei care
vorunui
avea o af
maista
puin
ntins ;cucei
putin.
Captul
inferior
al
plcii estemai
apoimare
plasat fa
ntr-unde
tanc
cemobil
aza mobilspot,i ct
faza
ionar
care
vor
avea
o
afinitate
faza
vor
fi
mai
apropia
i
de
frontul
fazei
mobile,
iar
cei car
conine faza
mobil
necesar
separrii.
Aceasta
va migra
prin stratul
de faza staionar.
or fi mai apropia
i de
frontul
fazei
mobile,
iar cei
carevertical
vor avea
o afinitate
mai mare fa
de pu
faza
stadeionar
vor
mai
pudeplaseaz
in cei
de-a
Componenii
probei
vor participa
la procesul
partiie
fazamigra
mobil
faza staionar;
care lungul
e faza sta
ionar vor
migra
mai
in de-a
lungulntre
direc
iei
n icare
se
faza
vor avea o afinitate mai maremobil
fa de fazape
mobil
vor fi cromatografic
mai apropiai de frontul.fazei
mobile,
iar cei
placa
Din
acest
punct
mobil pe placa cromatografic . Din acest punct de vedere reten ia n cromatografia pede
care vor avea o afinitate mai mare fa de faza staionar vor migra mai puin de-a lungul direciei
asem
n toare
celei care. are loc pe
trat sub ire
este asem n toarestrat
celeisub
careire
areeste
loc pe
o coloan
cromatografic
n care se deplaseaz faza mobil pe placa cromatografic. Din acest punct de vedere retenia n
de
ie
(notat
cu Rf,icu
) alajutorul
unui c
Factorul
de reten
(notat
cu RFactorul
unui
compus
se
calculeaz
f,i) alcelei
cromatografia
pe strat ie
subire
este asemntoare
care
arereten
loc pe o(i)
coloan
cromatografic.
arametrilor
de reten
ie, descri
i n
11.23,
utiliznd
urm
toarea
ie: 11.23,
Factorul
de retenie
(notat cu
Rf,iFig.
) al unui
compus
(i) se calculeaz
cu ajutorul
de utilizn
parametrilor
de
reten
ie, descri
irela
n parametrilor
Fig.
retenie, descrii n Fig. 23, utiliznd urmtoarea relaie:

R f ,i

zi
z fm

R f ,i

zi
z fm

(11.25)

alorile lui Rf,i variaz ntre 0 (analitul nu migreaz ) i 0,999 (analitul migreaz odat cu
Valorile
Rf,i variaz
migreaz)
i ntre
0,999 (analitul
migreaznu
odat
cu
Valorile
lui are
Rnu
variaz
0 (analitul
migreaz
)
f,i o
ontul solventului
fazeiluimobile,
fantrede0 (analitul
care
mare afinitate/solubilitate).
frontul solventului fazei mobile, fa de care are o mare afinitate/solubilitate).

frontul solventului fazei mobile, fa

de care are o ma

Frontul fazei mobile


Componen i
nesepara i

Componen i
nesepara i
zfm
zi

zi
Linia de start

Figura. 23. Parametri cromatografici msurai din separarea TLC a unui amestec (zi msurat din
linia de start pn m
n centrul
analitului i).
Fig. 11.23. Parametri cromatografici
sura ispotului
din separarea
TLC a unui amestec

(zi m surat din linia de start pn n centrul spotului analitului i).

Cu ajutorul factorului de reten ie se poate calcula un al

Cu ajutorul factorului
de sretenie
se poate
calcula de
un reten
alt parametru
(descriptor)
s
care
descrie
procesul
ie, notat
cu RM,i care
i calculat
prin r
descrie procesul de retenie, notat cu RM,i i calculat prin relaia:

R M ,i

log

1 R f ,i
R f ,i

Din punctul
de vedere
al mecanismului
separare, crom
Din punctul de vedere al mecanismului
de separare,
cromatografia
n strat subire de
se mparte
senmparte
i cromatografia pe coloana n doua clase princip
ca i cromatografia pe coloana
doua claseca
principale:
1) separri TLC n faz normal
faz (NP-TLC);
normal (NP-TLC); 2) separ ri TLC n faz invers (RP-TLC
2) separri TLC n faz invers (RP-TLC).
Faza sta ionar n NP-TLC este un adsorbant anorganic
Faza staionar n NP-TLC
este
un adsorbant
anorganic
(de exemplu,
silicagel,
alumina sau
alumina sau
Florisil),
sau silicagel
chimic
modificat
cu grup ri
Florisil), sau silicagel chimicmecanism
modificat cufaza
grupri
cian
sau
diol.
In
acest
mecanism
faza
mobil
este
mobil este organic f r urme de ap . Faza sta
organic fr urme de ap.cazul
Faza staionar
i
faza mobil
RP-TLC
sunt i asemntoare
RP-TLC sunt
asemnncazul
toare
aceluia
mecanism desf u
aceluiai mecanism desfurat
n
cromatografia
pe
coloan.
coloan .
Detecia n TLC se face prin spectrometrie de absorbie molecular UV-VIZ (cnd compuii
Martin i Synge au propus un model simplu care s des
sunt colorai ori absorb n ultraviolet, sau cnd se aplic reacii de derivatizare cu introducerea unui
cromatografic pe strat sub ire, pornind de la rela ia ce define te fa
cromofor), spectrometrie de emisie molecular UV-VIZ (cnd compuii sunt fluoresceni sau cnd
un analit:
se aplic o reacie de derivatizare cu introducerea sau inducerea unei grupri fluorogene), prin
spectrometrie n infrarou (un fascicol IR este focalizat cu ajutorul unei oglinzi reflectante pe spotul
ndemo alt oglind ctre detectorul spectrometrului),
analitului, iar fascicolul reflectat este direcionat
Rf
n mradiaiei
n s mprtiate), sau spectrometrie de mas (o
prin spectrometrie Raman (bazat pe msurarea
poriune a spotului analitului este ionizat cu ajutorul unui fascicul laser, sub vid, i direcionat ctre
separatorul i apoi detectorul, de
al spectrometrului
de mas). num rul de moli de analit din faza
nioni
care
nm i ns reprezint

sta ionar . Aceste m rimi se coreleaz cu concentra iile respec


mobil (Vm) i faz sta ionar (Vs), astfel c formula de mai sus po

Analiza prin absorbie atomic (AA)

1
cs Vs
1 analiza
Metoda analizei prin absorbie atomic (AA), introdus n
chimic din anul 1952 de
m Vm o sut de ani nainte
ctre australianul A. Walsh, se bazeaz pe fenomenul cunoscut cu caproape
Rf

c m Vm
c m Vm cs Vs

(1859) - descoperit de germanul G. R. Kirchhoff - i anume inversia liniilor spectrale. Principiul,


Considernd
defizic
parti- ie
a analitului
faza mobil
stabilit pe baze experimentale,
se poate enunacsubechilibrul
form de lege
legea
lui Kirchhoffntre
- astfel:
ia 11.27 poa
caracterizat
de constanta
de echilibru
= cs/ccondiii,
fiecare element chimic absoarbe
acele radiaii
pe care le poate
emite n K
aceleai
m, rela bine
determinate, de temperatur i presiune. Primul instrument folosit a fost o improvizaie pentru a se
1 cu flacr (un spectrometru de emisie n care
obine absorbia atomic n cadrul unui fotometru
Rf
excitarea atomilor se realizeaz ntr-o flacr).
1 Acesta,
K ca i celelalte instrumente care au urmat,
msoar concentraia unui element dintr-o prob, prin determinarea absorbiei realizate de ctre
atomii probei, adui ntr-o flacr
sau, mai
general, n faz
gazoas
(la o, temperatur
suficient de
, n care
reprezint
raportul
Vs/V
m numit raportul volumetric al
ridicat) asupra unei radiaii monocromatice furnizate de o surs extern. Evident c radiaia
parte la procesul de separare TLC.
respectiv este astfel aleas nct s fie caracteristic unui anumit atom.
Detec ia n TLC se face prin spectrometrie de absorb ie m
Spectrometrul de absorbie atomic msoar radiaia absorbit de atomii care rmn n stare
compu ii sunt colora i ori absorb n ultraviolet, sau cnd se aplic
fundamental (neexcitai) n stare gazoas. Numrul acestora fiind de obicei mult mai mare dect a
cudeintroducerea
unui(AAS)
cromofor),
spectrometrie
mo
celor excitai, spectrometria
absorbie atomic
este o metod
caracterizatde
de emisie
o
ii sunt
fluorescen
i sau cnd
se aplic
reac ie de deriv
sensibilitate mult mai bun, compu
cel puin pn
la temperaturi
de 5000K.
Remarcm
faptul coaparatura
sau
inducerea
uneii grup
ri fluorogene),
prin spectrometrie n i
pentru absorbie atomic poate
fi utilizat,
la nevoie,
pentru lucrul
n emisie.

este focalizat cu ajutorul unei oglinzi reflectante pe spotul analitul


este direc ionat de o alt oglind c tre detectorul spectrometr
Raman (bazat pe m surarea radia iei mpr tiate), sau spe
por iune a spotului analitului este ionizat cu ajutorul unui fas
direc ionat c tre separatorul i apoi detectorul de ioni al spectrom

9
Principiul metodei

evaporarea solventului pn la un reziduu solid;

Ionii din soluia de analizat, prin pulverizare (sau nebulizare) ptrund o dat cu gazul
vaporizarea solidului i disocierea n atomii componen i, care dau, ntr
purttor ntr-o zon cu temperatura ridicat (de ex. o flacr) i devin atomi. Acetia trebuie adui
ntr-o stare energetic
n vederea favorizrii
absorbiei i reducerii la minim a emisiei.
atomi npotrivit
stare fundamental
;
Acest lucru se realizeaz n flcri cu temperaturi din domeniul 2000-3000K (obinute de exemplu
folosind arztoare
final,cuoaer-acetilen).
parte din atomii de la punctul b) pot fi adu i n stare excitat , prelu
Modul n care se produc atomii metalici n stare gazoas este descris mai amnunit n continuare
(fig. 24). La flac
aspirarea
ntr-o flacr
se petrec,
ntr-o
rapid, urmtoarele
r soluiei
i devenind
atomi
excita
i, succesiune
care constituie
ei n i etape:
i surse de radia
evaporareasolventuluipnlaunreziduusolid;

linii caracteristice
maietap,
ales ale atomilor da
soliduluirezultant
i disociereaconst
n atomii din
componeni,
care dau, ntr-o prim
vaporizareaemisie
reziduu solid;
atomi n stare fundamental;
excita i care pot ap rea (procesul 4 din fig. 1). O parte dintre atomi se pot
final, o parte din atomii de la punctul b) pot fi adui n stare excitat, prelund cldura din
i devenind atomi
excitai,
care ntr-o
constituieprim
ei nii surse
radiaii. Spectrul de emisie
ea n atomii
i, MO,
care
dau,
etap1)de,cnd
flacrcomponen
alte specii
MOH
(procesul
5 pe fig.
nu mai iau parte la proce
rezultant const din linii caracteristice mai ales ale atomilor dar i ale ionilor excitai care pot
aprea (procesul
4 din. fig. 24). O parte dintre atomi se pot transforma i n alte specii MO, MOH
atomic
(procesul 5 pe fig. 24) cnd nu mai iau parte la procesul de absorbie atomic.

ctul b) pot fi adu i n stare excitat , prelund c ldura din

i, care constituie ei n i i surse de radia ii. Spectrul de


caracteristice mai ales ale atomilor dar i ale ionilor

4 din fig. 1). O parte dintre atomi se pot transforma i n


pe fig. 1) cnd nu mai iau parte la procesul de absorb ie

Fig. 2. Absorb
este una din ce
Figura 24.
Transformri
posibile ale
dispozitivul
de atomizare
(flacr) - zona
linii n analiza
Fig.
1. Transform
ri analitului
posibilenale
analitului
n dispozitivul
de cenuie
absorb ie
atomizare (flac r ) - zona cenu ie

De aceea, pentru a se realiza o selectivitate bun , sursa de radia ii ce

care urmeaz s parcurg celula, trebuie s fie o surs monocromatic avnd o


cu cea a liniei de rezonan

a atomilor din proba de analizat (vezi fig. 2). O as

are loc la trecerea unui electron de pe stratul de valen , dintr-un atom n star
conven
ie luat
egal
cuchimic
0) pn
avnd
o energie
E02.(energie
Fig.
Absorb
iacele
de
rezonan
Figura
25. Absorbia
de
rezonan
este unaprin
din
mai
utilizate
linii n
analiza
prin la
absorbie
este una din
celeatomic
mai utilizate

primul ni

deasupra sa, E1. Aceast tranzi ie are loc ca urmare a absorb iei de radia ie e

alitului n dispozitivul de linii n analiza chimic prin


monocromatic , adic corespunz toare unei cuante h = E1-E0. Absorb ia,
absorb ie atomic
ona cenu ie

De aceea, pentru a se realiza o selectivitate bun, sursa de radiaii ce emite fascicolul care urmeaz
s parcurg celula, trebuie s fie o surs monocromatic avnd o frecven egal cu cea a liniei de
prin
ie atomic
(AA)
rezonan a atomilor din proba de analizat (vezi fig. 25). O astfel de Analiza
tranziie are
locabsorb
la trecerea
unui
de pe stratul de valen, dintr-un atom n stare fundamental, avnd o energie E0 (energie
unde N1electron
este num
rul de atomi n stare excitat pe nivelul 1, N0 - num rul de atomi afla i n
prin convenie luat egal cu 0) pn la primul nivel accesibil, de deasupra sa, E1. Aceast tranziie
are loc ca urmare
de radiaie raportul
electromagnetic
monocromatic,
adic
corespunztoare
/g0 - reprezint
ponderilor
statistice
pentru
starea excitat
stare fundamental
, ga1absorbiei
unei cuante h = E1-E0. Absorbia, n urma creia apare tranziia de pe starea fundamental pe
respectivprimul
fundamental
, m serimi
ce depind
numerelei icuantice
aleo linie
nivelelor
existente n
nivel de energie,
numeste
absorbiede
de rezonan
corespunde
de rezonan,
aceeai att n absorbie ct i n emisie.
fiecare atom nDesigur,
parte,electronii
E = hpot- trece
variaprin
ia absorbie
de energie
tranzi
k - constanta
lui Boltzmann, T
i pe aalte
niveleiei,
de energie
ns cu o probabilitate
mai mic, adic dau linii mai puin intense. n emisie, tranziiile au loc n sens invers. Relaia dintre
- temperatura
absolut n K. n mod obi nuit raportul N1/N0 este subunitar. Se poate observa
numrul de atomi excitai, N1, i cei aflai n stare fundamental, N0, este cunoscut din chimia
sub denumirea:
lui Boltzmann
se poate
scrie: a temperaturii i o sc dere a valorii
att deecuaia
E ct
i de T.iO
cre tere
c N1/Nfizic,
0 depinde

intervalului energetic,

E, va conduce
la o m rire a raportului N1/N0. Calculele
N1/N0 implicit
= (g1/g0)exp(-E/kT)

cele de
mai
favorabile
condipeii,nivelul
doar1,oN0mic
parte
g sesc n
demonstreaz
, n
unde N1ceste
numrul
atomi
n stare excitat
- numrul
de din
atomiatomi
aflai nsestare
fundamental, g1/g0 - reprezint raportul ponderilor statistice pentru starea excitat respectiv
stare excitat
, lucru vizibil i din datele prezentate n tabelul 1, pentru cteva linii de
fundamental, mrimi ce depind de numerele cuantice ale nivelelor existente n fiecare atom n
E = h - variaia de energie a tranziiei, k - constanta lui Boltzmann, T - temperatura
rezonan parte,
tipice.
absolut n K. n mod obinuit raportul N1/N0 este subunitar. Se poate observa c N1/N0 depinde att
de E ct i de T. O cretere a temperaturii i o scdere a valorii intervalului energetic, E, va
implicitdintre
la o mrire
N1/N0.din
Calculele
cele mai favorabile
Tabelulconduce
1. Raportul
numa raportului
rul de atomi
st riledemonstreaz
excitat , Nc,1, nrespectiv
fundamental
condiii, doar o mic
parte
atomi se gsesc
n stare
excitat,4000
lucru K
vizibil i din datele
N0, la
doudin temperaturi,
2000,
respectiv
prezentate n tabelul 7, pentru cteva linii de rezonan tipice.

Element

E Lungime de und
N1/N0
(eV) de atomi(nm)
2000K
4000K
Tabelul 7. Raportul dintre numrul
din strile excitat,
N1, respectiv
fundamental, N0, la
-6
-3
Na
2.1
589.0
9.86.10
4.44.10
dou temperaturi, 2000, respectiv 4000 K
-3
K E (eV)2.93Lungime
422.7de und (nm) 1.91.10-6 6.03.10
Element
N1/N0
-6
2000K
Zn
5.79 213.9
7.31.10
1.48.10-7 4000K

Walsh

Na
aK fost
Zn

cel

2.1
2.93 a
care
5.79

propus

589.0
422.7
primul,
213.9

pentru

9.86.10-6
-6
1.91.10
aceast
metod
7.31.10-6

, n

4.44.10-3
6.03.10-3
calitate
1.48.10-7

de surse de

lumin , ni te l mpi de construc ie special denumite l mpi cu catod cavitar [87] (fig. 3) care
Walsh
a fost cel
care a propus
primul,
pentru aceast metod,
n calitate
de surse de lumin,
emit un spectru
atomic,
format
din linii,
caracteristice
materialului
(metalului)
din care este
nite lmpi de construcie special denumite lmpi cu catod cavitar (fig. 26) care emit un spectru

confec ionat
ajutorul
monocromatorului
se selecteaz
linia catodul.
dorit , Cu
de obicei
atomic,catodul.
format dinCu
linii,
caracteristice
materialului (metalului)
din care este doar
confecionat
ajutorul monocromatorului se selecteaz doar linia dorit, de obicei linia de rezonan a elementului

linia de rezonan
respectiv. a elementului respectiv.

Fig.
3. Lampa
cucucatod
cavitar
Figura
26. Lampa
catod cavitar

n afara sursei, deosebit de toate sursele utilizate n celelalte metode optice, schema
bloc a acestei metode (fig. 4) este cu totul analog spectrofotometriei de absorb ie n general.
Deosebirea este aceea c , n cazul absorb iei atomice, n loc de solu ii lichide, probele se afla

n afara sursei, deosebit de toate sursele utilizate n celelalte metode optice, schema
bloc a acestei metode (fig. 4) este cu totul analog spectrofotometriei de absorb ie n general.
Deosebirea
estesursei,
aceea deosebit
c , n cazul
absorb
iei atomice,
de solu
ii lichide,
afla
n afara
de toate
sursele
utilizate n
n loc
celelalte
metode
optice,probele
schema se
bloc
a
27) este
absorbiecin din
general.
Deosebirea
nacestei
staremetode
gazoas(fig.ntr-o
flaccu rtotuli analog
nu suntspectrofotometriei
constituite din de
molecule
atomi
n stare
este aceea c, n cazul9absorbiei atomice, n loc de soluii lichide, probele se afla n stare gazoas

9
fundamental
. nu sunt9
ntr-o flacr i
constituite din molecule ci din atomi n stare fundamental.

Legea
absorb
radia
iilor
Legeaabsorb
absorbieiiei
iei
radia
iilor
Legea
radia
iilor

Lamp cu catod cavitar (surs ) Flac r sau cuptor (celul ) Monocromator Detector
Analogia
cu
metoda
de absorb
ie mer
mem
Fig.
4. Schema
blocbloc
a spectrometrului
de
absorb
ie atomic
Analogia
cu
spectrofotometriei
ie merge
Analogia
cumetoda
metoda
spectrofotometriei
Figura
27. Schema
a spectrometrului
despectrofotometriei
absorbie
atomic de absorb

absorb iei radia iilor n cazul unui fascicol incident,


monocromatic
e
incident,
monocroma
monocroma

absorb
absorbiei
ieiradia
radia iilor
iilor n
n cazul
cazul unui
unui fascicol
Legea absorbiei radiaiilor

Dac un fascicul incident, de intensitate I , n urma trecerii

0 I , n urma tre
Dac un
un fascicul
fascicul
incident,
Dac
incident,
de departe
intensitate
Analogia cu metoda spectrofotometriei
de absorbie
merge mai
i anume0 legea urma tre
[87] hallow cathode lamp n limba englez .
absorbiei radiaiilor ngrosime
cazul unui l,
fascicol
incident,
aceeai.
ununmonocromatic
intensitate
I, rela
ia dintre
I i
grosime
devine
fasciculdeeste
de
intensitate
I, rela
ia
dintre
grosime
l,l, devine
devine
unfascicul
fascicul
Dac un
fasciculi Instrumental
incident,
de intensitate
I0, n urma
trecerii prin de
stratul absorbant, de grosime131
l, dintre
Chimie
Analitic
devine un fascicul de Lambert-Beer
intensitate I, relaiascris
dintre diferit:
I i I0 este dat tot de legea Lambert-Beer scris
scris
diferit:
Lambert-Beer
scris
diferit:
Lambert-Beer
diferit:
-KlN
I = I0e -KlN
-KlN
II == II00ee

unde: K este coeficientul de absorb ie atomic , l - lungimea flac r

unde: K este coeficientul de absorb ie atomic , l - lungimea f

unde:
K esteatomic,
coeficientul
absorb
ie atomic
, laflai
- lungimea
f
unde: K este coeficientul
de absorbie
l - lungimeade
flacrii,
N - numrul
de atomi,
n
afla
i
n
stare
fundamental
,
din
unitatea
de
volum.
Anal
stare fundamental, din
volum. fundamental
Analog cu cele nvate
spectrofotometria
aflaunitatea
i n de stare
, din la unitatea
de de
volum. A
afla
i
n
stare
fundamental
,
din
unitatea
de
A
absorbie, dac notm spectrofotometria
cu A absorbana:
de absorb ie, dac not m cu A absorbanvolum.
a:
spectrofotometria de absorb ie, dac not m cu A absorban a:

spectrofotometria
absorb
ie, dac not m cu A absorban a:
A = de
ln (I
0/I)
A = ln (I0/I)

A =devine
ln (I0/I)
ecua ia de mai sus
prin logaritmarea ambilor membri:

ecuaia de mai sus devine prin logaritmarea ambilor membri:

ecua ia de mai sus devine prin logaritmarea ambilor membri:

= KlN
ecua ia de maiAsus
devine prin logaritmarea ambilor membri:

A = KlN

Deci A, A
pentru
un atom dat, pentru parametrii fizici ai siste
= KlN
Deci A,parametrii
pentru un aiatom
dat,optic
pentru
parametrii
fizici ai
Deci A, pentruflac
un atom
constani
o flacr
r dat,
fix pentru
, este propor fizici
ional sistemului
cu N. Cum
num
rulide
atomi din uni

Deci
A, depentru
ununitatea
atomdedat,
parametrii
fix, este proporional cu N. Cum
numrul
atomi din
volumpentru
N depinde
de mai muli fizici ai
flac
r
fix
,
este
propor
ional
cu
N.
Cum
num
ruldar
denmai
atomi
din
factori constani (debit,
dar maiconstan
ales de concentraia
C a soluiei pulverizate
devscozitate
mai muletc.)
i factori
i (debit, vscozitate
etc.)
ales
d
flac r fix
, este
propor
ionalN, cu
N. Cum num rul de atomi din
flacr, introducnd concentraia
n locul
numrului
de atomi,
ecuaia
de mai mulni factori
i (debit,
vscozitate
darnum
mai ru
a
pulverizate
flac r constan
, introducnd
concentra
ia netc.)
locul
devine:

de
mai mul i n
factori
i (debit, vscozitate
a
pulverizate
flac constan
r , introducnd
concentra iaetc.)
n dar
loculmai
num
devine:

A = kC

pulverizate
n flac r , introducnd concentra ia n locul nu
devine:
A = kC

unde k este un coeficient constant, propriu fiecrui element la lungimea de und aleas i n
devine:
condiiile unui instrument
ale unei
stabile.constant,
Relaia, liniar
n coordonatele
este la lung
A = kC
undedatkieste
un flcri
coeficient
propriu
fiec ruiA-C,
element
util pentru analiza cantitativ propriu-zis i exploatat cu totul analog ca n spectrofotometria de
Acoeficient
= kC dat
absorbie UV-VIS. condi
unde iile
k este
constant,
propriu
rui element
unuiuninstrument
i ale unei
fl c rifiec
stabile.
Rela ia, la
lin

unde
esteunui
un coeficient
este
util
pentru
analiza constant,
cantitativ
propriu-zis
i element
exploatat
condik
iile
instrument
dat i alepropriu
unei
fl fiec
c ri rui
stabile.
Relalaia

spectrofotometria
de absorb
UV-VIS.
este iile
util unui
pentru
analizaie
exploa
condi
instrument
datcantitativ
i ale uneipropriu-zis
fl c ri stabile.i Rela
i

spectrofotometria
absorb cantitativ
ie UV-VIS. propriu-zis
este
util pentru deanaliza

spectrofotometria de absorb ie UV-VIS.

i explo

Aparatura
fi completat cu mai multe amnunte (fig. 28). ntre electrozii lmpii cu catod cavitar se
aplic 400V i un curent de 10-40mA, foarte bine stabilizat, pentru a emite un flux luminos de
intensitate constant. Soluia coninnd proba etalon, sau cea de analizat, este transformat ntr-un
aerosol fin, n interiorul unei incinte numite sistem de pulverizare, sau pulverizator (nebulizor).
Aerosolul, amestecat intim cu amestecul de gaze, oxidant plus carburant, este condus apoi n flacr
(fig. 28).

Figura 28. Schem ilustrnd principul funcionrii analizorului prin AA


Se pot utiliza variate amestecuri carburant - comburant prezentate n tabelul alturat (vezi
tabelul 8). Flacra sau cuptorul tubular din grafit - o variant mai puin frecvent folosit a metodei n care se introduce proba, se extinde pe direcia sursei de lumin, respectiv a fantei
monocromatorului. Acesta selecteaz un interval foarte ngust din spectrul luminos.
Tabelul 8. Tipuri de flcri n funcie de carburantul i comburantul folosit
Flacr
Elemente de analizat
Aer + propan sau
Li, Na, K, Mg, Ca, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Ga, As,
Aer + oxid de carbon
Mo, Ag, Au, Pb, Bi
Aceleai ca mai sus dar Cr, Co, Au, Fe, Mg se
Aer + acetilen
determin mai bine n flacar aer - acetilen
Aer + hidrogen sau Oxigen + hidrogen
Ca, Sn
Oxigen + acetilen
Be, B, Al, Ti, V, Nb, Y, Sn, La i lantanide
(flacr bogat n acetilen)
Protoxid de azot - Acetilen (N2O + C2H2)
Al, Si, B, Zr
Atomii unui anumit element absorb doar lumina cu lungimea de und specific elementului
respectiv. Tocmai aceste lungimi de und caracteristice sunt emise de surs i trecute prin flacr iar
diminuarea, exprimat n unitai de absorban, este proporional cu numrul de atomi ai
elementului de analizat, prezeni n flacra. Atomii celorlalte elemente nsoitoare nu absorb lumina

la aceeai lungime de und ci fiecare la alte valori ale acesteia. Acest lucru se asigur prin selectarea
lungimii de und i cunoaterea elementelor nsoitoare. Detectorul, de regul un foto-multiplicator,
msoar intensitatea luminii monocromatice - obinut dup parcurgerea unui monocromator.
Metoda descris este o metod relativ, adic pentru etalonare se msoar mai nti cel puin
o prob cunoscut (numit prob etalon). Operaia este denumit n mod curent calibrare sau
etalonare. Se lucreaz de cele mai multe ori prin metoda curbei de etalonare sau prin metoda
adaosului standard. Analiza chimic prin absorbie atomic este extrem de specific, lrgimea benzii
de absorbie, fiind foarte ngust - de ordinul a 10-3 nm - face aproape imposibile orice confuzii
privind analitul. De aceea cu aceast metod se pot analiza 66 elemente metalice sau semimetalice,
fiind puin recomandat pentru nemetale. Metoda analizei prin AA este
principala
metodiede
analiz(AA)
Analiza
prin absorb
atomic
a elementelor metalice minore din materiale sau din mediu, inclusiv poluarea organismelor cu
Probleme
acestea. Liniile
specifice speciale
cad n domeniul 190-850 nm permind analize de ordinul microgramelor
(g) iar n anumite cazuri chiar a nanogramelor (10-9g) dintr-un mililitru de soluie. Sensibilitatea
n practic apar totu i interferen e cu alte elemente din prob , de exemplu are loc
practic difer de la element la element i este acea concentraie ce d o crestere de 0.00434 uniti
de absorban
(aproximativ
1% din
intensitatea
luminii
Aceasta
se 4exprim
n g/ml
ii greu
disociabile
(Mg
Ca3PO
etc.) sau
efectesau,
legate
formarea
unor combina
2P2Oincidente).
7, ZrO2 sau
ceea ce este acelai lucru, n ppm (pri per milion).

de temperatura fl c rii cu care se lucreaz - prea mare sau prea mic - ceea ce afecteaz

speciale
numProbleme
rul atomilor
n stare fundamental . Acestea, indiferent de natura lor fizic , au c p tat

denumirea de efect de matrice. De aceea trebuie luate contram suri. Toate aceste probleme se
n practic apar totui interferene cu alte elemente din prob, de exemplu are loc formarea
unor combinaii greu disociabile (Mg2P2O7, ZrO2 sau Ca3PO4 etc.) sau efecte legate de temperatura
flcrii
carejoas
se lucreaz
- prea mare
sau prea micfluctua
- ceea ce
afecteaz
numrul
atomilor
stares-au
detec
ie ctcumai
, este necesar
neutralizarea
iilor
fondului.
Pentru
acestnscop
fundamental. Acestea, indiferent de natura lor fizic, au cptat denumirea de efect de matrice. De
pus aceea
la punct
instrumente
cu dubluToate
fascicul,
c ror se
detectoare
primesc alternativ
semnale de
trebuie
luate contramsuri.
aceste ale
probleme
studiaz individual,
folosind publicaiile
de specialitate.
se asigura
o limit de
detecie
ct ra
maisau
joas,
este necesar
neutralizareatrece
la raza
incident Pentru
care, aodat
traverseaz
proba
(flac
cuptorul)
i, alternativ,
fluctuaiilor fondului. Pentru acest scop s-au pus la punct instrumente cu dublu fascicul, ale cror
nemodificat
sub form
de radia
ie de
referin
. n cazul
flac(flacra
r efectul
detectoare primesc
alternativ
semnale
de la
raza incident
care,atomizoarelor
odat traverseazcuproba
sau de
cuptorul) i, alternativ, trece nemodificat sub form de radiaie de referin. n cazul atomizoarelor
matrice este mai redus. n cazul utiliz rii cuptoarelor tubulare efectul devine foarte important
cu flacr efectul de matrice este mai redus. n cazul utilizrii cuptoarelor tubulare efectul devine
foarteconcentra
important iei
datorit
mai ridicate
a acesteia.
Cele mai importante
deie a
datorit
mai concentraiei
ridicate a acesteia.
Cele
mai importante
mijloace mijloace
de corec
corecie a fondului sunt cele bazate pe lmpi cu deuteriu (fig. 29.) i cele care utilizeaz efectul
fondului
sunt cele bazate pe l mpi cu deuteriu i cele care utilizeaz efectul Zeeman.
Zeeman.

studiaz individual, folosind publica iile de specialitate. Pentru a se asigura o limit de

Fig. 6.
Instrument
la carela corec
ia fondului
seseface
uneilmpi
l mpi
de deuteriu
Figura
29. Instrument
care corecia
fondului
facecu
cuajutorul
ajutorul unei
cu cu
arc arc
de deuteriu

n cazul dispozitivelor cu l mpi cu deuteriu (fig. 6) flac ra este traversat de lumina


care iese din lampa cu catod cavitar amestecat cu raza emis de o lamp cu arc de deuteriu

n cazul dispozitivelor cu lmpi cu deuteriu (fig. 29) flacra este traversat de lumina care
iese din lampa cu catod cavitar amestecat cu raza emis de o lamp cu arc de deuteriu
(250-350nm). Cu ajutorul unei oglinzi semitransparente i a unui chopper, amestecul celor dou
raze este trimis alternativ prin flacr i pe un drum care ocolete flacra, constituind raza de
referin. Detectorul primete, cu frevena dictat de chopper, att semnalul de referin ct i cel de
msur, iar raportul celor dou raze se nregistreaz dup corecia de fond, sub form de absorban.
Un alt mare
avantajevoluate
al metodei analizei prin AA l constituie posibilitatea de a utiliza solveni
Metode
organici pentru concentrarea probei. Acetia, prin posibilitatea lor de a extrage doar anumii ioni din
metoda
cuptorului
(sauispectrometria
de absorb
ie atomic
Varianta
denumit
soluie
apoas,
ntr-un volum
mic,
mresc i tubular
sensibilitatea
specificitatea metodei.
Cei mai
adecvai solveni par a fi esterii i cetonele alifatice.

f r flac r ) utilizeaz un cuptora tubular (fig. 7), din grafit, nc lzit electric, men inut n azot
evoluate
sau alt Metode
atmosfer
inert la 2000-3000K dar pornindu-se de la temperatura camerei. Aceast

variant prezint avantajul de a se putea lucra i pe probe solide, f r o dizolvare chimic a

Varianta denumit metoda cuptorului tubular (sau spectrometria de absorbie atomic fr


probei.flacr)
Proba,utilizeaz
solu ieunsau
solidtubular
, se (fig.
introduce
n cuptor
intrmeninut
prin nc
lzire
n drumul
cuptora
30), din grafit,
nclzitsau
electric,
n azot
sau alt
atmosfer inert la 2000-3000K dar pornindu-se de la temperatura camerei. Aceast variant
razelorprezint
din cuptor,
utilizndu-se
seringi
(ceo dizolvare
m soar chimic
probea de
ordinul
avantajul
de a se putea lucra
i pemicrometrice
probe solide, fr
probei.
Proba,l). Are
soluie sau solid, se introduce n cuptor sau intr prin nclzire n drumul razelor din cuptor,
loc consecutiv
uscarea, calcinarea, evaporarea i m surarea absorb iei, ob inndu-se limite de
utilizndu-se seringi micrometrice (ce msoar probe de ordinul l). Are loc consecutiv uscarea,
-13
evaporarea
i msurarea
absorbiei, obinndu-se limite de detecie de 10-10-10-13 g/
g/prob
.
detec iecalcinarea,
de 10-10-10
prob.

Fig. 7. Figura
Cuptorul
tubulartubular
din grafit,
ncnclzit
lzit electric,
permite
volatilizarea
30. Cuptorul
din grafit,
electric, permite
volatilizarea
probelorprobelor
n ultimul
timp, n
datelor
calculatorul,
aprut lmpile au
multielement,
n ultimul
timp,
nafar
afarde achiziia
de achizi
ia cudatelor
cu au
calculatorul,
ap rut l mpile
ce permit analize pe grupuri de elemente, nemaifiind necesar schimbarea lmpii cu catod cavitar,
multielement,
ce permit
analize
pe grupuri
nemaifiind
necesar
schimbarea
ci doar a lungimii
de und
din monocromator
fiindde
maielemente,
uor de automatizat.
De asemenea
au aprut

l mpii cu catod cavitar, ci doar a lungimii de und din monocromator fiind mai u or de
automatizat. De asemenea au ap rut instrumentele cu dou

drumuri optice, majoritatea

instrumentele cu dou drumuri optice, majoritatea instrumentelor avnd posibilitatea utilizrii


ambelor variante - cu flacr sau cu cuptor tubular (fr flacr). n sfrit, utilizarea efectului
Zeeman - despicarea liniilor spectrale atomice prin plasarea sursei n cmp magnetic - a mrit i mai
mult selectivitatea metodei.
Metoda vaporilor reci. Elementele volatile, de mare interes n protecia mediului - mercur,
arsen, staniu, stibiu, bismut, seleniu - au dou proprieti importante pentru analiza lor chimic. Se
Analiza prin absorb ie atomic (AA)
reduc cu dificultate la elemente n flacr n schimb dau uor hidruri volatile. De aceea, nainte de
introducerea
n flacr
coninnd
acestenelemente,
proba se supune
unui proces
chimic de
volatile
respective.
Acesta probelor
lucru se
realizeaz
ni te accesorii
denumite
generatoare
necesar transformrii elementelor chimice amintite n hidrurile volatile respective. Acest lucru se
. n acestea,
reacdenumite
ia cu borohidrur
sodiun sau
cu prin
clorur
stanoas
, n mediu
hidruri
realizeaz
n nite prin
accesorii
generatoare dede
hidruri.
acestea,
reacia
cu borohidrur
de sodiu sau cu clorur stanoas, n mediu acid, se petrece transformarea elementelor amintite n
acid, hidruri
se petrece
transformarea
ntermic.
hidruri
conduse
flac r , la
care, conduse
n flacr,elementelor
la nclzire, seamintite
descompun
De care,
exemplu,
n cazulnarsenului
au locsereaciile:
nc lzire,
descompun termic. De exemplu, n cazul arsenului au loc reac iile:

As3

NaBH 4

AsH 3

800o C

As 3 / 2H 2

Hidrura
volatil
gazul
purt ntr-un
tor ntr-un
cuar
, plasat n
Hidrura
volatileste
este antrenat
antrenat dede
gazul
purttor
cuptoracuptora
din cuar,din
plasat
n flacr
de fapt
i reacia
descompunere
n atomi. n acest
fel s-aunobinut
de inut
flac runde
unde
de are
faptlocare
loc i dereac
ia de descompunere
n atomi.
acestsensibiliti
fel s-au ob

100 de ori mai bune, n cazul acestor elemente. n cazul particular al mercurului, care nu d o
sensibilit
de 100
de ori mai
bune,speciale
n cazul
acestor
n scazul
particular
hidruri stabil,
se utilizeaz
nite celule
din care
Hg nu elemente.
mai are nevoie
fie transferat
n al
flacr. Metoda, denumit metoda vaporilor reci, se aplic n dispozitive specifice n care reducerea
mercurului,
care nu d o hidrur stabil , se utilizeaz ni te celule speciale din care Hg nu mai
are loc cu SnCl2.

are nevoie s fie transferat n flac r . Metoda, denumit metoda vaporilor reci, se aplic n
dispozitive specifice n care reducerea are loc cu SnCl2.