Testul FISH

Hibridizarea fluorescenta in situ(FISH) este o

tehnic/ de citoge-netic/ molecular/ utilizat/ \n
scopulidentific/rii anomaliilor cromozomi-ale, numerice ]
i structurale (care nupot fi detectate prin cariotipare).
Principiul acestei metode const n ataarea
lasecvena-int a unei sonde de ADN monocatenar(de
circa 40 kb), marcat fluorescent, pe baza complementaritii, de o secven-int a unui cromo-zom.
Hibridizarea sondei cu ADN-ul celular este vi-zualizat la
microscopul cu fluorescen echipat cufiltre de
excitaie i emisie, ceea ce permite citireasemnalelor
specifice zonei-int. Se numr i seanalizeaz
semnalele prezente n o sut de celule(de ex., trei
semnale fluorescente specifice pentrucromozomul 21
indic sindromul Down).Tehnica FISH permite
detectarea mozaicismelor,identificarea rearanjrilor
cromozomiale complexe.Mai multe sindroame
dismorfice (sindromulWilliams, Prader Willi, Angelman,
Di George) pro-duse de microdeleii sau
microduplicaii, suspectateclinic, imposibil de observat
prin tehnicile citogene-tice convenionale, pot fi
evideniate prin FISH meta-fazic. ntruct aceast
metod presupune ca primetap de lucru obinerea
unor culturi celulare (limfo-cite din snge periferic sau
amniocite recoltate prinamniocentez n sptmnile
15-17 de sarcin), re-zultatul investigaiei este obinut
n dou sptmni. FISH-ul interfazic permite punerea n
eviden aanomaliilor numerice, detecia sexului
genetic ntr-un timp scurt (48-72 h). Se realizeaz pe
nuclei inter-fazici fr s fie nevoie de efectuarea de
culturicelulare. Se folosesc sonde de ADN corespunz-

toare regiunilor centromerice ale cromozomilor18, X, Y

(CEP18, CEPX, CEPY), respectiv sondelocus specifice
pentru cromozomii 13 i 21(LSI13, LSI21). Metoda este
mai puin informativ n cazul contaminrii cu celule
materne (compar-ativ cu alte tehnici).Analiza FISH este
o metod specific, perfor-mant, dar laborioas, care
necesit celuleintacte; nu se substituie celorlalte
metode deanaliz cromozomial i are indicaii foarte
pre-cise. FISH-ul interfazic este indicat a fi folosit catest
de screening rapid atunci cnd exist semnede alert
ecografic sau biochimic (dublu test,triplu test), iar
ulterior se recomand o evaluarecitogenetic complet.
Bibliografie:
Molecular diagnosis of viral materno-fetal infections,Grangeot-Keros
L.,Ann.Pharm Fr.2003 ,61(4),259-64.