Sunteți pe pagina 1din 40

Metabolismul nucleotidelor

Nucleotidele ocup un loc central n


procesele biochimice, deoarece ele sunt:
precursori n biosinteza acizilor nucleici
principalele rezervoare de legturi macroergice
componeni ai mai multor coenzime
efectori allosterici.

ARN din diferite celule i clase este


continuu hidrolizat la nucleotide i
resintetizat dup necesiti n toate
celulele.

Procesul este mai rapid n acele celulel sau


organe n care eliminarea de secreii bogate n
proteine sau restructurarea diferitelor ci
metabolice necesit o biosintez proteic activ:
glandele digestive exocrine i ficat.
Unele tipuri de celule au o via relativ scurt
(celulele epidermei mucoasei intestinale,
celulele sanguine), n cazul lor fiind supus unui
proces asemntor i ADN, evident la nivelul
ntregului organism.
Transformrile metabolice ale nucleotidelor
libere formeaz o schem unitar n care
biosinteza este corelat cu biodegradarea la
diferite nivele prin circuite de recuperare.

1. Nucleotidele sunt constant degradate pn


la nucleozide i apoi la bazele azotate
corespunztoare i ribozo-1-fosfat )sau
dezoxiribozo-5-fosfat)
2.Nucleozidele, bazele azotate i ribozofosfatul
pot fi reutilizate n ci de recuperare pentru
resintez de nucleotide
3.O parte din bazele purinice sunt catabolizate
pn la acid uric care se elimin, iar cele
pirimidinice pn la intermediari metabolici din
alte ci.
4.Ribozofosfatul poate fi utilizat n calea
pentozofosfatului

5.Nucleotidele pot fi sintetizate de novo


pornind de la intermediari simpli anumii
aminoacizi (glicocol, acid aspartic, glutamina),
dioxid de carbon i grupri C1 activate (legate
de acizi tetrahidrofolici).
6.Reutilizarea bazelor i biosinteza lor de novo
sunt controlate prin disponibilitatea formei
activate a ribozo-5-fosfatului cum ar fi 5-ribozo -D-ribozil pirofosfat (PRPP); enzima care-l
formeaz PRPP-sintetaza (sau ATP fosforil
transferaza) este activat de fosfatul anorganic
i nhibat allosteric de nucleotide, asigurnd
concentraia lor constant.

Hidroliza acizilor nucleici

Lanurile lungi a acizilor nucleici sunt


hidrolizate de ctre nucleaze n fragmente
scurte.
Ele sunt, n general, de dou tipuri:

I. Exonucleazele care desfac succesiv nucleotidele


de la una din capete, fiind 5 sau 3specifice i
necesit un anumit mod de terminare (cu sau
fr fosfat) a captului atacant.
II.Endonucleazele care desfac legturile situate n
interiorul lanului formnd astfel lanuri
oligonucleotidice.

Sunt cunoscute numeroase enzime de acest tip


cu localizri i roluri diferite.
Aciunea lor poate specific pentru un anumit de
acid nucleic (ADN sau ARN) sau nespecific
hidrolizndu-le pe amndou.
Specificitatea poate privi i alte aspecte cum ar
fi existena ADN ca molecul dublu sau
monolan, mai ales pentru unele exonucleaze,
recunoaterea unui anumit nucleotid dintre cele
dou sunt unite prin legtura atacat (unele
exndonucleaze) sau a unei secvene ntregi de
nucleotide din vecintate (enzime de restricie).

Nucleazele intervin n digestia acizilor


nucleici din alimente sau n prelucrarea i
distrugerea acizilor nucleici endogeni (cu
numeroase aspecte).
Digestia acizilor nucleici are loc n duoden.
Sub aciunea endonucleazelor pancreatice
(ribonucleaza i dezoxiribonucleaza) se
elibereaz oligonucleotide din care
diesterazele intestinului subire elibereaz
5 i 3 nucleotide.

Lanturi polinucleotidice
H2O ribonucleaza
dezoxiribonucleaza
Oligonucleotide + Nucleotide
H2O

fosfodiesteraze

5'_Nucleotide

H2O
P

nucleotidaza
fosfomonoesteraze

Nucleozide
P
nucleozidfosforilaze
R1_P
(dR1_P)
Baze purinice
Baze pirimidinice

R5_P
(dR5_P)

Calea
pentozofosfatului

Catabolismul general al nucleotidelor la


baze purinice i pirimidinice
Nucleotidele sunt hidrolizate specific de ctre 5nucleozide i fosfat.
Exist o mare varietate de asemenea enzime,
unele secretate de mucoasa intestinal cu rol n
digestie, altele n general rspdite n organism
cu localizare pe membrana periplasmatic, n
lizozomi, microzomi sau citoplasm, care intervin
n metabolismul nucleotidelor endogene.
Membrana perplasmatic este impermeabil
pentru nucleotide dar permite ptrunderea
nucleozidelor.

Ecto-5-nucleotidaza fixat pe faa extern a


plasmei d posibilitatea utilzrii nucleotidelor,
extracelulare (mai ales a AMP) hidrolizndu-le
vectorial la nucleozide (adenozin).
n hematii exist o 5-nucleotidaz specific
pentru nucleotidele pirimidinice.

Cea mai mare parte din adenozin-5monofosfat este catabolizat printr-o dezaminare
la inozin-5 - monofosfat.

Adenilat deaminaza are mai multe


izoenzime, una din ele fiind abundent n
muchi.
Aa cum se va vedea IMP este primul nucleotid
purinic format prin sinteza de novo i prezint un
punct de ncruciare ntre cile catabolice i cele
anabolice.


Adenozina care rezult din restul AMP-ului
este, la rndul ei, dezaminat de ctre adenozin
deaminaz la inozin.
O mare parte de adenozin provine n urma
hidrolizei S-adenozilhomocisteinei (SAH),
format din S-adenozilmetionin n urma
procesului de metilare.
Un caz particular l prezint celulele musculare
ale miocardului.
Ele sunt lipsite de adenilatdeaminaz iar AMP
produs, n urma contraciei, este fie hidrolizat la
adenozin, care se elibereaz n snge, fie
refosforilat pn la ATP.
Ajungnd pn la arterele coronare, adenozina
cauzeaz vasodilatia i consecutiv creterea
debitului circulator.

Deoarece producerea adenozinei crete


proprional cu hipoxia, efectul ai primete
semnificaia unei autoreglri a fluxului sanguin n
funcie de necesitile miocardului.

Desfacerea nucleozidelor poate decurge pe


dou tipuri de aciuni enzimatice i anume
hidrolitic i fosforolitic.
Nucleotidazele, ntr-o reacie ireversibil,
hidrolizeaz nuclozidele la baze purinice i
pirimidinice i riboz (sau dezoxiriboz).
nucleozidaza
Nucleozida +
Baza
H2O

purinica
pirimidinica

+ Riboza(dezoxiriboza)

Astfel de enzime sunt rspndite n diferite


esuturi fr a se cunoate numrul i
specificitatea lor exact.
Nucleozifosforilazele scindeaz cu ajutorul
fosfatului anorganic i elibereaz din nucleozide
bazele azotate i ribozo-1-fosfat (sau
dezoxiribozo+1+fosfat).
Exist nucleozid fosforilaze specifice pentru
purine i pentru pirimidine.
Purinucleozid fosforilazele nu pot folosi ca
substrat adenozina.
Din acest motiv este necesar ca AMP i
adenozina s fie n prealabil dezaminate.

Aciunea acestor fosforilaze este reversibil, ele


putnd servi i n biosintez, dei sensul
fiziologic este catabolic.

Nucleozida +

purin_pirimidin
nucleozifosforilaza purinica
+ R _P (dR _P )
fosfat
baza
1
1
pirimidinica

n digestie se absorb nucleozide, catabolizate n


interiorul celulelor intestinale ca produi finali.
Din acest motiv majoritatea bazelor azotate din
nucleotidele alimentare nu pot fi utilizate de
ctre organismul uman.

Catabolismul bazelor purinice


Din catabolismul nucleotidelor purinice rezult
dou baze azotate principale: hipoxantina (din
inozin) i guanina (din guanizin).
Ele sunt oxidate mai departe pn la acid uric,
produs final de catabolism la om, primate, psri
i unele reptile.
Guanina este dezaminat, n prealabil, pn la
xantin de ctre o xantioxidaz sau o
xantindehidrogenaz.
n mod normal, n celule, se formeaz foarte
puin adenin liber, provenind din fosforilarea
5-metioninadenozinei.

Adenina nu poate fi catabolizat direct


organismul uman fiind lipsit de
adenindeaminaz, prezent doar la bacterii i
nevertebrate, care s-o transforme n hipoxantin.
Cea mai mare parte din adenin este utilizat n
cile de recuperare.
n cazul unor deficite enzimatice ereditare sau n
aportul alimentar crescut, excesul de adenin
este oxidat de ctre xantinoxidaz la 8hidroxixantin i apoi la 2,8-dihidroxiadenin,
substan puin solubil, care formeaz calculi
renali.

OH

OH
N

H2N
-2
O3PO

H2C

fosfomonoesteraza
H2O

N
N

N
H2C

N
H

O
N

HN
H2N

N
H

HN

guanaza
O

N
H
xantina

guanina

R_1_P

OH

H2N

H2N
HO

purin_nucleozid
fosforilaza

OH OH
guanizina

OH OH
guanizin_5'_fosfat

N
H

OH

OH
N

N
-2

O3PO

H2C

fosfomonoesteraza
H2O

O
N
N
H
hipoxantina

HN
N

N
H

R_1_P

OH OH
inozina

OH

H2C

purin_nucleozid
fosforilaza

N
HO

OH OH
inozin_5'_fosfat

NAD+ NADH + H+ HN
H2O + O2 H2O2

N
H
xantina

N
H

n organismul uman xantinoxidaza se gsete


mai ales n mucoasa intestinal i n ficat,
restul organelor prezentnd doar urme de
activitate.
n consecin purinele din alimente formeaz
direct acid uric, iar sursa major de acid uric
endogen este ficatul.
O parte din acidul uric este excretat n intestin
prin bil. n general acidul uric din organismul
uman (n jur de 1,2g) provine din trei surse
principale:
1.din nucleotidele alimentare
2.catabolismul purinelor endogene
3.transformarea direct a IMP sintetizat de novo

Concentraia normal de acid uric n ser este


ceva mai mare la brbai (6,9-7,5mg/dl) dec la
femei (5,7-6,6 mg/dl).
Hiperurinemii apar n guta primar i
secundar, hipouricemii n deficienele de
xantinoxidaz ereditar sau n cadrul unei
insuficiene hepatice.
Eliminarea urinar este ntre 400 i 800 mg/24
ore variind i n funcie de alimentaie.
Rinichiul uman elimin acidul uric ntr-un proces
destul de complicat.
La nivelul glomerulilor este filtrat, apoi
reabsorbit n tubii contori distali.

O serie de medicamente interfereaz cu aceste


procese renale.
O

O
N

HN
O

N
H
xantina

N
H

H2O

+O

H2O 2

HN
O

NAD+

NADH

+ H+

H
N
O

N
N
H
H
acid uric

n afara semnificaiei sale de produs final al


catabolismului purinic, acidul uric servete
pentru eliberarea amoniacului la psri i unele
reptile, fiind puin solubile acestea se elimin
sub form de past economisindu-se ap.

Astfel de animale se numesc uricotelice i nu


posed enzimele necesare formrii de uree.

Mamiferele, cu excepia primatelor,


descompun n continuare acidul uric n prezen
de uricaz la alantoin pe care o elimin prin
urin.
La alte specii degradarea merge mai departe
prin aciunea alantoinazei la acid alantoic, sau
continu datorit alantoicazei pn la uree i
acid glioxilic.
Deci, flora intestinal descompune ureea cu
ureeaz la dioxid de carbon i amoniac, la unele
nevertebrate.

O
H
N

HN
O

H2N

uricaza
O

N
H
acid uric

N
H

H2N
O

O
O2

H2O 2

COOH NH2

N
N
H
H
acid alantoic

NH
N
H

CO 2

H2O

O
O

N
H

H2O

alantoina

H2N
O

NH2

COOH

NH2

alantoicaza
H2O

alantoinaza

H2N

CHO
acid glioxilic

ureea
ureaza

(CO 2

2NH3)

La om se elimin prin urin n mod normal i cantiti


mici de hipoxantin, xantin i adenin.
Bazele purinice minore, de exemplu, 7-metilguanina,
nu pot fi catabolizate i se elimin ca atare.

Biosinteza de novo a nucleotidelor


purinice

Nucleotidele purinice pot fi sintetizate n


citoplasm printr-o succesiune de 10 reacii
enzimatice, heterociclul bazei fiind construit
direct din robozo-5-fosfat.
Primul compus purinic format este un nucleotid,
acidul inozinic (IMP), nu o purin liber.

1. Prima etap este catalizat de o


aminotransferaz care trece gruparea aminic a
glutaminei pe PRPP (fosforibozopirofosfat)
pentru a forma fosforibozil amina. Enzima are
proprieti allosterice i este etapa principal de
reglare a biosintezei de novo.
O
HO

P
OH

O
H2C

O P O P OH
OH

aminotransferaza HO

OH

OH
Gln + H2O

OH OH

H2C

NH2

Glu + PP
OH OH

2. n a doua etap prin hidroliza ATP se asigur


energia necesar condensrii glicocolului cu
fosforibozilaminpentru a da fosforibozilglicinamida, sub aciunea unei sintetaze.
Reacia este reversibil dar produsul reaciei
este ndeprtat n mod continuu deplasnd
echilibrul.
CH2 NH2
O

O
HO P
OH

H2C

sintetaza

NH2
+ HOOC

OH

Mg+2

CH2 NH2
ATP

OH OH

HO P

OC
H2C

NH

ADP + P
OH OH

3.De pe N5, N10 metenil-tetrahidrofolat, o


transferaz, trece, folosind o molecul de ap, o
grup formil pe atomul de azot provenit din
glicocol.
n acest fel se completeaz atomii din ciclul
pentatomic al purinei.
CH2
O
HO

P
OH

NH2

CH2

OC
H2C

O
NH

OH OH

transferaza

HO

P
OH

N5N10_metilen THF
THF

OC
H2C

NH
CH O

NH

OH OH

4.Fosforibozil - N formilglicina din etapa


precedent se transform prin aciunea unei
sintetaze care schimb CO a amidei cu NH
provenit de la glutamin.
Reacia necesit hidroliza ATP. Produsul
format este fosforibozil-N-formil glicinamidin.
CH2
O
HO

P
OH

OC
H2C

NH
CH O Gln
Mg+2

NH
ATP

OH OH

Glu

H2O P

HO

HN

H2C

OH

CH2

NH

CH O

NH

ADP
OH OH

5.Utiliznd energia liber eliberat prin


hidroliza unui rest fosfat din ATP, o alt
sintetaz nchide ciclul de cinci atomi i
formeaz 5-fosforibozil-5-aminoimidazol.
Grupa =NH adugat, n reacia anterioar,
apare acum ca un substituient amino al
ciclului.

HO

HN

H2C

OH

CH2

NH

CH

O
HO

NH
Mg
AT P

OH OH

ADP

NH

CH

H2N

H2C

OH

+2

HC

+P

OH OH

6.n etapa urmtoare se adaug un grup


carboxil din dioxid de carbon.
Carboxilaza este enzima care formeaz,
astfel, 5-fosforibozil-5-aminoimidazol-4carboxilat nu are ca grupare prostetic
biotina i difer ca mecanism de alte
enzime care adaug grupri carboxil.

HO

HC

NH

CH

H2N

H2C

OH

carboxilaza
CO 2

OH OH

HO

HOOC

NH

H2N

CH

H2C

OH

OH OH

7.O sintetaz condenseaz acidul aspartic cu


produsul anterior de reacie consumnd o
legtur macroergic din ATP.
Condensarea are loc ntre grupa amino a
acidului aspartic i carboxilul imidazolului.
Intermediarul 5-fosforibozil-4-(Nsuccincarboxamid)-5-aminoimidazol, care
rezult, servete pentru introducerea atomului
N1 din inelul purinic.
HOOC

CH2
CH

HO

HOOC C

NH

H2N C

CH

H2C

OH

NH

N
+

HOOC

CH2

ADP
ATP
+2
Mn
CH COOH sintetaza

+P

HO

COOH

CO

NH

H2N C

CH

H2C

OH

NH2
OH OH

OH OH

8. Produsul reaciei anterioare este scindat de


ctre o liaz la 5 fosforibozil-4-carboxamidaminoimidazol i acid fumaric. Reaciile 7 i 8 se
aseamn sintezei argininei din citrulin din
ciclul ureogenetic
HOOC

CH2

COOH

CH
HN CO
HO

NH

H2N C

CH

H2C

OH

OH OH

adenilatsuccinat liaza
acid fumaric

H2N
HO

CO

NH

H2N C

CH

H2C

OH

OH OH

9.n etapa urmtoare este transferat o grup


formil de pe N10formil tetrahidrofolat ducnd la
5-fosforibozil-4-carboxamid-5formamidoimidazol, care conine toi atomii
ciclului purinic.
H2N
HO

CO

H2N

H2C

OH

NH

CH

OH OH

H2N

10

N _formil
THF
THF
formiltransferaza

OHC
P

CO

NH

HN C

CH

H2C

OH OH

10. n fine, n ultima etap prin eliminare de ap


de ctre ciclohidrolaz se nchide i inelul de
ase atomi ducnd la apariia primului nucleotid
purinic, acidul inozinic (IMP).
OH
N
H2N
P

CO

OHC

HN

H2C

NH

CH

OH OH

N
N
ciclohidrolaza

H2C

N
O

_CO 2
OH OH

Se poate observa c pentru sinteza IMP se


consum ase legturi macroergice, considernd
i formarea PRPP.

Aspecte de patologie din metabolismul


nucleotidelor
Guta este una din cele mai rspndite boli de
metabolism cu o frecven de 0,3% din populaia
Europei.
Sub acest denumire sunt incluse un grup
heterogen de boli caracterizate toate prin
hiperuricemie, care duce la depunerea uratului
de sodiu n sinoviala articulaiilor, atacuri acute
de artrite, formarea de depozite masive de urat
i apariia urolitiazei.

Hiperuricemia poate aprea din numeroase


cauze, unele determinate genetic, altele
dobndite.

Nu orice uricemie duce la apriia gutei, n unele


cazuri aceasta poate persista toat viaa fr a
provoca modificri patologice.
Guta poate s fie primar, ca boal ereditar de
metabolism n sine, sau secundar dezvoltnduse ca o consecin a altor boli ereditare sau
dobndite.
Guta secundar poate s apar n deficien de
glucozo-6-fosfataz sau n deficiena total a
hipoxantin-guanin fosforibozil transferazei,
precum i n boli de distrugeri celulare masive:
anemii hemolitice, leucemii, policitemii, etc.

Tratamentul cu medicamente citotoxice n

neoplazii poate declana apariia secundar a


gutei, ceea ce impune asocierea acestora cu
inhibitori ai xantinoxidazei.

O alt posibilitate a gutei secundare este n


urma unei afeciuni renale cu scderea
capacitii de excreie.
n majoritatea cazurilor de gut primar n se
cunoate defectul enzimatic cauzal, putndu-se
evidenia doar diferite situaii generale.

Astfel poate s fie vorba de:


1. o hiperproducie endogen crescut a acidului uric
2. o scdere a eliminrii renale
3. o scdere a proteinei serice de vehiculare: 1 - 2
globulina de legare a uratului.

Xantinuria ereditar este o boal relativ blnd,


acesea asimptomatic ce se datoreaz
deficitului de xantinoxidaz.
Bolnavii prezint adesea hiperuricemie i
hiperuricozurie cu eliminri renale de xantin i
hipoxantin.
Xantina fiind mai puin solubil dect acidul uric
poate forma calculi renali.