Sunteți pe pagina 1din 6

DETERMINAREA

HEMOGLOBINEI SANGUINE
Dr.Ariela OLTEANU

Hemoglobina(Hb): cromoproteina formata din hem si

globina;
Rol in transportul oxigenului la tesuturi si in
mentinerea echilibrului acido-bazic;
Valori scazute : anemii, aplazie medulara, dislocari
medulare, stari posthemoragice..
Valori crescute: policitemii , altitudine mare, boli
cardiace cianogene, boli pulmonare hipoxice, fumat
excesiv, boli renale, deshidratari, arsuri;
Recoltarea sangelui : venos (K2, K3 EDTA) sau
capilar
Metode de masurare : cianhemoglobina,
oxihemoglobina, SLS-hemoglobina;

METODA DRABKIN:
Principiu :hemoglobina este oxidata de ferocianura de potasiu la

la methemoglobina care sub actiunea cianurii de


potasiu formeaza cianmethemoglobina de culoare
galben-roscata (compus stabil)
citirea se face la spectrofotometru la = 546 nm
intensitatea culorii este direct proportionala cu
concentratia de Hb din proba
Tehnica si reactivi :
1.Solutia Drabkin :K3Fe(CN) :200mg
KCN
50mg
KH2PO4 140mg
apa distilata ad 1000
se corecteaza pH-ul la 7.3-7.5 cu NaOH 20%
se pastreaza la intuneric la 4C in sticle de culoare inchisa 1 an

2. se

calculeaza factorul (coeficientul) F de etalonare a aparatului


folosind Hb standard a carui concentratie o cunoastem (C)

3.se pipeteaza intr-o eprubeta 5ml de Hb standard


4. se citeste absorbanta (A) acestei solutii fata de martor(5ml sol.Drabkin)
5.se calculeaza factorul (F) pentru calculul Hb(g/dl) folosind formula

F=C/A
6.tehnica de lucru :

Produsul
pipetat

Martor

Solutia Drabkin

5 ml

Sange recoltat pe EDTA

Se lasa la temperatura camerei 20 min.

Proba
5ml
0.02 ml

Se citeste absorbanta (AP) fata de martor la 546 nm


Calcularea concentratiei ( C ) de Hb din proba:
C(g/dl) = Absorbanta probei x F
C ( mmol/l = C(g/dl) x 0.621
Controlul intern de calitate cu sange de control cu concentratie
cunoscuta de HB
Liniaritate : pana la 210 g/dl ( 13 mmo;/l)
Aceasta metoda a fost recomandata de catre ICSH in 1966 ca
metoda standard internationala.
Nu este potrivita pentru masurare prin metoda automata deoarece
viteza de conversie este mica.
Genereaza deseuri lichide toxice ce trebuie tratate special.

Alte metode:
Metoda oxihemoglobinei:

Viteza de conversie a Hb in oxihemoglobina este mare


( instantanee);
Nu poate converti methemoglobina in oxihemoglobina,
dezavantah in cazul probelor care contin cantitati mari
de methemoglobina, cum ar fi sangele de control;
Metoda SLS-hemoglobina (Sodiun-Lauryl-Sulfat Hb):
Viteza de conversie a Hb este mare;
Se poate folosi si pentru sangele de control
Ambele metode folosesc reactivi nontoxici;