Los editores han hecho todos les esfuerzos para localizar a los poseedores del copyright del material fuente utilizado. Si inadvertida- mente hubieran omitido alguno, con gusto hardn los arregles necesarios en la primera oportunidad que se les presente para tal fin Gracias por comprar el original. Este libro es producto del esfuerzo de profesionales como usted, o de sus profesores, si usted es estudiante, Tenga en cuenta que fotocopiarlo es una falta de respeto hacia ellos y un robo de sus derechos intelectuales. Las ciencias de la salud estin en permanente cambio, A medida que las nuevas investigaciones y la experiencia cifnica amplan nues- tro conocimiento, se requieren modificaciones en las modalidades terapéuticasy en los tatamierios farmscolégicos. Les autores de es- {a obra han verificado toda la informacién con fuentes confiables para asegurarse de que ésta sea completa y acorde con los estindares Aceptados en el momento de la publicacion. Sin embargo, en vista de la posiblidad de un error hummano o de cambios en las clencias de la salud, ni los autores, ni la editorial o cualquier ot persona implicata en la preperacién o la publicacidn de este trabaio, garanti- an que la totalidad de la informaci¢in aqui contenida sea exacts 0 completa y no se responsabilizan por errores u omisiones 0 por los resultados obtenidos del uso de esta informacién. Se aconseja a los lectores confirmarla con otras fuentes. Por ejemplo, y en particular, se recomienda a ls lectores revisar el prospecto de cada férmaco que planean acministrar para cerciorarse de que la informaciéa con- {enida en este libro sea correcta y que no se hayan producido cambios en las dosis sugeridas o en las coniraindicaciones para su admi- nistraci6n. Esta recomendaciGn cobra especial importancia con relacién a frmacos nuevos o de uso infrecuente, ESPANA EDITORIAL MEDICA Alberto Alcover 24, @ (28036) - Madrid, Espata ¢ panamericana >) “Tel. (34) 91-1317800 / Fax: (34) 91-1317805 / (34) 914570919. e-mail info@ medicapanamericana.es MEXICO Visie nuestra pigiaa web: Hegel N* 141, 2° piso ‘ntpiwww.medicapanamericana.com Colonia Chapultepec Moraes DelegaciGn Miguel Hidalgo- C.P. 11570 -México DE. "Tels (62-55) 5250-0668 / 5262-9470 / Fan: (52-55) 26242827 ‘email: infomp@medicaparamericana com mx ARGENTINA Marcelo T. de Alvear 2145 (C122AAG) Bueros Aires, Argentina Tel. (54-11) 4821-5520 / 2066 J Fax (54-11) 4821-1214 ‘VENEZUELA e-mail: info@medicapanamericana.com Eifico Polar, Torre Oeste, Piso 6, Of. 6C Paza Venezuela, Urbanizacién Los Caobos, COLOMBIA Purroquia £1 Recteo, Municipic Libertador, Caracas Carrera Ta A N° 69-19 - Santa Fe de Bogots D.C., Colombia epto. Capital, Venewwela Tel. 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Titulo (22000; | BDITORIAL MEDICS PANAMERICANA Atiadia DD 617.6 aa edi termi de imprimir yencuadernar fenel mes de ene de 2009 enlostlleres de Compaf Grfcs Internacional S.A ‘Agustin de Vedis 2948, Buenos Aires, ArgentinaPrélogo 1 ix Ira. Parte, Generalidades br] Prologo 2 xi Prefacio xiii 2da Parte, Metabolismo fiingico. Acciones patégenas de los hongos 87 PARTE L. GENERALIDADES DE MICROBIOLOG{A SS SBCCION 4. Parasitologta 8 1. Introduccién a la microbiol 3 10, Pardsitos: generalidades 95 Marta Negroni Marta Negroni SECCION 1. Bacteriologt: 9 “ . aaa, ,—————_ SECCION 5. Accién de los agentes fisicos 1. Martatedis waerectanis? 11 quimicos y fisicos. 105 2. Morfologia bacteriana ———— Marte Negron. 11. Agentes quimicos. Antisépticos 4h 17 ¥desinfectantes 107 Marta Negroni 4. Mollicutes 2 Marta Negroni, Liliana Turcot y Luis Somaglia 5. Rickettsias, clamidias y nanobacterias 37 Marta Negroni, Liliana Turcot y Luis Somaglia Ira. Parte. Rickettsias y clamidias 32 Luis Somaglia 6. Crecimiento, nutricién y metabolismo Marta Negroni ic teriana_ 55 Cecilia M. Alpuche Aranda y Luis Romano Massoiti SECCION 2. Virologia 63 8. Virus: generalidades 65 Marta Negroni SECCION 3. Micologia 15 9. Hongos 1 Ricardo Negroni Alcira C. Rosa y Maria Inés Gonzélez 12. Antimicrobianos, antimicéticos, antiparasitarios y antivirales 123 Marta Negroni 13. Agentes fisicos para el control de los microorganismos 133 Alcira C. Rosa y Marfa Inés Gonzdlez PARTE II, INMUNOLOGIA 147 14. Generalidades sobre la inmunidad idad i Kumiko Eiguchi 15, Inmunidad especifica, adaptativa o adquirida 165 1° Parte. Organos linfoides. Anticuerpos. Inmunoglobulinas. Linfocitos B y T, Células presentadoras de antigenos 165 2° Parte. Respuesta inmune 185 Kumiko Eiguchi 16, Respuesta inmune alterada 197 17, Relacién agente infectante-hospedador 213 Marta Negroniinoice PARTE IIL MICROBIOLOGIA BUCAL _223 1° Parte. Estreptococos_ 347 18. Ecologia de la cavidad bucal 225 2 Parte, Estafilocacos 353 Mabel Marcantoni 3° Parte, Neisseria_y bacterias relacionadas 359 y vacunas para su control 247 4° Parte. Micobacterias 365 Mabel Marcantoni Marta Negroni y Marfa del Carmen Domenech 1° parte. Caries dental 2a7 Parte. Espiroquetas 3B 2° parte. Antimicrobianos y vacunas para 6° Parte, Corynebacterium 30 la prevencién de las caries dental 263 7° Parte. Bacilos grampositivos esporulados 383 20. Microbiologia de las enfermedades gigivoperiodontal, de la periimplantitis, 8° Parte. Enterobacterias y otras bacterias de los conductos radiculares y de los gramnegativas 389 procesos perirradiculares 2715 Ba : 5 waa 39 Marta Negroni 1° Parte. Microbiologia de las enfermedades gigivoperiodontales 275 yop, Candidos’ 399, 2° Parte. Antimicrobianos locales y 3° Parte, Histopiaamasa 405 cael a 2/Lurte, Histoplismosis _405, diferentes formas clinicas de enfermedad 2° Parte Ps dicidomicosis 09 periodontal 299 4° Parte. Criptococosis 413 3° Parte. Microbiologia e implantes 313 . 25. Infecciones virales _____419 4° Parte. Microbiol malpar: Maria Rosa Ramella, Marta Inés Gonzdlez perirradicular 319 y Norberto Sanjudn 21, Familia Actinomycetaceae y i Parte, Virus herpes 419 actinomicosis 329 Marta Negroni 2° Parte, Virus papiloma Humano (HPV) 433 22. Complicaciones sistémiecas por la 3° Parte. Hepatitis” 439 ae = a7 . see Marta Negroni 4° Parte. Virus de la inmunodeficiencia Marta Negroni humana 5° Parte. Fiebre hemorragica argentina _ 455 26. Enfermedades de etiologia parasitaria_459 Marta Negroni y Carlos Aceto2" Parte. Toxoplasmosis 465 3° Parte. Enfermedad de Chagas 0 tripanosomiasis americana a7 4° Parte. Paludismo 475 5° Parte. Miasis 479 PARTE V. MICROBIOLOGIA E INMUNOLOGIA APLICADA DE INTERES ODONTOLOGICO 483 27. Guia para la obtencién de muestras en el consultorio odontolégico 485 Marta Negroni 28. Diagnéstico molecular 493 1 Parte. Técnicas moleculares 493 Susana Carnovale 2 Parte. Biologia molecular en Odontologia. Biologia molecular de Streptococcus mutans 501 Jorge Antonio Yanez Santos 29, Medidas aconsejadas para lograr bioseguridad en la prictica odontolégica 507 Marta Negroni 30 Aplicaciones de la inmunologia. Inmunoprofilaxis 513 Marta Negroni y Pablo Bonvehi PARTE VI. GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS 523 31. Guia practica 525 1° Parte. Normas de trabajo e instrumental basico del laboratorio microbiolégico 525 Susana Molgatini y Maria del Carmen Manto 2 Parte. Microscopia 533 3" Parte. Métodos de observacién de los microorganismos 543 4° Parte. Medios de cultivo, y siembra 551 5° Parte. Pruebas de sensibilidad in vitro a los agentes antimicrobianos 561 6° Parte. Reacciones inmunolégicas 573 Susana Molgatini, Maria del Carmen Manto y José Lewkowiez 7 Parte. Tratamiento del intrumental recuperable y materiales de un solo uso utilizados en la préctica odontolégica 595 Alcira Rosa, Susana Molgatini, Maria det Carmen Manto y Marta Inés Gonzdlez PARTE VII. APENDICE, 609 32. Lista de acontecimientos histéricos importantes para la evoluci6n de la microbiologia general y estomatolégica_ 611 Maria Isabel Bernat y Liliana Turcot Respuestas de los problemas 615 indice analitico 629GENERALIDADES , DE MICROBIOLOGIA1 INTRODUCCION A LA MICROBIOLOGIA iO Marta Negroni Contenidos Microbiologia. Definicién y alcances. Habitat de los microorganismos. Ubicacin de los microorga- nismos en la naturaleza. Ubicacién de los seres vivos. Virus: concepto. Disciplinas que abarca la microbiologia. Nociones de sistematica bacteriana. Unidades de medida de |os microorganismos. Acciones de los microorganismos. Importancia de la microbiologia y su relacién con las demas ciencias odontolégicas. Objetivos © Describir la ubicacion de los microorganismos en la naturaleza. © Enumerar y definir las distintas disciplinas de las que se ocupa la microbiologia. * Citar las acciones de los organismos. Enumerar cuatro de elas. © Mencionar como se designan los microorganismos. * Nombrar ciencias odontoldgicas relacionadas con microbiologia. MICROBIOLOGIA tos asombrosos, que contribuyeron a brindar importantes jalones a esta ciencia, no es la finali- Definicién y alcances dad de este texto profundizar en esos aspectos, de mado que el lector que desee ahondar en este tema Hay evidencias que permiten afirmar que exis- deberé hacerlo en otras fuentes o remitirse a la lista ten rastros de bacterias, en la tierra, desde el perf- de descubrimientos que figura en el capftulo 32. odo precdmbrico, 0 sea, 3.300 millones de afios atrés. Sin embargo, la ciencia que se ocupa del , . . estudio de estos organismos {s relativamente Habitat de los microorganismos nueva en comparacidn con ese perfodo. Como se mencioné mas arriba, se considera que El término microbiologia (de micro-= pequefio, su origen se remonta a unos cuatro billones de bios = vida y logos = estudio 0 tratado) fue acufie- _afios y se cree que fueron las formas vivientes més do por el sabio francés Louis Pasteur (1822-1895), _primitivas. para incluir el estudio de los organismos que s6lo Entre los miles y miles de seres microscépicos eran visibles con el auxilio del microscopio (véase que existen algunos viven en la tierra y otros habi- cap. 31 segunda parte) y que se designaron como tan en las aguas o en los vegetales, o forman parte micoorganismos, microbios o gérmenes. de la biota normal de los organismos superiores. No obstante, la microbiologia, que abarca el Recientemente se anuncié que se descubrieron estudio de las bacterias, los hongos, los protozo- _bacterias a tres kil6metros de profundidad, en la 0s, los virus (a los que se han agregado algunas tierra, sin contacto con el exterior y que estarfan algas microscpicas causantes de alteraciones en _viables. Muchos se encuentran aislados, mientras humanos), en realidad habfa nacido doscientos que otros se agrupan en comunidades que se han afios antes, con el descubrimiento de los “animélcu- dado en llamar biofilme 0 biopelicula, capaces de los” por parte de Antony van Lecuwenhock, depositarse aun en superficies inertes. que los visualiz6 en el material tomado desu boca _—Por fortuna sdlo unos pocos producen dafio en (véase cap, 31 segunda parte) y que por ese moti- los animales, incluido el hombre, o en plantacio- vo fue, sin saberlo, el primer microbiélogo oral. _nes. Estos tiltimos constituyen el grupo de los ‘Aunque Ia historia de la microbiologia esté microorganismos patégenos o agentes que cau- tachonada de nombres ilustres y de descubrimien- _ san infecciones en los seres humanos, los animalesEGR Generauinaves pe Microsio.ocia Cuadro 1-1. Clasificacién de reins Reino Procariotae (reino Monera (Pro- segdin Whittaker) que carecen Reino Protista Reino Fungi Reino Plantae Reino Animalia antes, primitivo, Adryon = miicleo). Bacterias de vida libre 0 parasitaria lc membrana nuclear. Unicelulares Eucariotas, con nucleo verdadero, Hongos mucosos, protozoos y algunas algas Eucariotas, s6lo hongos unicelulares 0 pluricelulares Ciertas algas, musgos, helechos, coniferas y plantas sin flores Abarca esponjas, gusanos, insectos y vertebrados © las plantas. A los patégenos humanos conocidos recientemente se han sumado los patégenos “emergentes”, 0 sea, patégenos nuevos como el virus HIV y el Hanta virus, o “reemergentes”, como el virus Ebola. El grupo constituido por los gérmenes que con su metabolismo intervienen en procesos de gran utilidad es mucho més amplio. Por lo tanto, 1a microbiologfa tiene muchas especialidades: microbiologia humana (dentro de ella est la microbiologia bucal 1 oral), ani mal, vegetal, industrial, alimenticia, ambiental, del suelo y muchas més. La microbiologia también se ocupa de la res- puesta del organismo ante la agresién microbiana y lo hace a través de la inmunologia, una rama en constante y rapido desarrollo que brinda conoci- mientos inapreciables para el estudio y Ia preven- cidn de muchas enfermedades infecciosas, asi como para el manejo de las respuestas no deseadas 0 “alesgias”. UBICACION DE LOS MICROORGANISMOS EN LA NATURALEZA Tradicionalmente se hablaba de los reinos ani- mal, vegetal y mineral. Con el descubrimiento de los microorganismos surgié el problema de su ubi- caci6n dentro de estos reinos y la imposibilidad de hacerlo. En 1866 el zodlogo aleman Emst Haeckel propuso el término “protista” para los microorga- nismos unicelulares, Este reino comprendfa los protistas inferiores con un nucleo primitivo, sin membrana nuclear o procariotas y los protistas supe- riores, con una organizacion celular mas compleja y, por ende, con membrana nuclear 0 eucariotas. icacién de los seres vivos Como todo lo que implica nomenclatura y clasi- ficaciones, la ubicacién de los organismos fue motivo de revisiones y redenominaciones. En 1969 Robert Whittaker clasificd a estos organismos y a ‘otros superiores en cinco reinos: Reino Procariotae (pro = antes 0 primitivo; kd ryon = niicleo, reino Monera, segin Whittaker). Este reino incluye distintos tipos de bacterias, sean de vida libre o parasitaria, que carecen de mem- brana nuclear. Son organismos unicelulares. Reino Protista. Esta designacién se reserva para eucariotas (nticleo verdadero) del tipo de los hon- gos mucosos, los protozoos y algunas algas. Reino Fungi. Este reino solo incluye eucariotas del tipo de los hongos unicelulares 0 levadurifor- mes, pluricelulares 0 filamentosos y hongos carnosos, Reino Plantae. Este reino est4 constituido por ciertas algas, musgos, helechos, coniferas y plan- tas sin flores. Reino Animalia. Esta designaci6n abarca espon- jas, gusanos, insectos y vertebrados (cuadro 1-1). Posteriormente se expuso otra clasificacin para los _microorganismos; que considera tres grupos: Archaebacterias, Eubacte-rias (procariotas de la anterior) y Eucariotas (hongos y protozoos). Las Archaebacterias difieren de las Eubacterias en el Acido ribonucleico ribosémico y cuando poseen pared celular, carecen de peptidoglucano (cuadro 1-2). En 1978, Carl Woese sugirié hacer una clasifi- caci6n con el rango de Dominios, que esté por encima de los Reinos. Asi establecié ¢l Dominio Eukarya, que comprende los reinos Animalia, Plantae, Fungi y Protista. Ei Dominio Bacteria incluye bacterias patégenas, no patégenas, bacte- rias del agua, del suclo y las fotoautétrofas (véase cap. 6). E] Dominio Archae se creé para los pro- cariotas, sin peptidoglucano (véase cap. 3) que habitan en ambientes extremos (de calor y otras condiciones desfavorables) (cuadro 1-3). Virus: concepto Los virus no pueden ser ubicados en ninguno de estos reinos, porque poseen una estructura subce- Cuadro 1-2. Ubicacién de los microorganismos seguin otro criterio Archaebacterias Sin interés médico. Difieren de las, eubacterias en el acido ribonu- cleico ribosémico y no contienen peptidoglucano en sus paredes Eubacterias Corresponden al reino Procariora Eucariotas Tncluyen hongos y protozoosCuadro 1-3. Clasificacién segtin Woese Dominio Eukarya Comprende reinos Animalia, Plantae, Fungi, Protista Dominio Bacteria Comprende bacterias patégenas y no patégenas, del agua, del suelo y fotoautotrofas Dominio Archae barca bacterias que no contienen peptidoglucano y viven en ambien- {es extremos lular de tamafio ultramicroscépico y carecen de vida propia; son pardsitos endocelulares estric- tos. Por tal motivo, sélo se desarrollan en otros seres vivos. Se conocen en la actualidad alrededor de 1550 especies. DISCIPLINAS QUE ABARCA LA MICROBIOLOGIA Pese al significado etimolégico del término “microbiologia” esta ciencia también se ocupa del estudio de pardsitos pluricelulares que pueden ser visibles sin el auxilio del microscopio. Estos pard- sitos son gusanos planos 0 cilfndricos, pero en parte de su ciclo vital se presentan como quistes u otras formas de tamafio microscépico. En definitiva, la microbiologfa médica, que incluye la estomatolégica, esté compuesta por varias ramas que son la bacteriologia, la mi- cologia, 12 virologia, la parasitologia y la in- munologfa (cuadro 1-4). La inmunologfa ha aclarado en gran medida los mecanismos de los que ella se ocupa, se analizan los mediadores quimicos que intervienen. Estos conocimientos han sido aprovechados para otras aplicaciones, como por ejemplo con fines diagnés- ticos 0 también en la preparacién de inmunégenos. Esta ciencia se ha desdoblado con la inclusién de la psiconeuroinmunobiologia. En ella se rela- ciona la respuesta inmune del hospedante con aspectos del funcionamiento del Sistema Nervioso Central (SNC). Cuadro 1-4. Ramas de la microbiologia —_——— Bacteriologia Micologia La microbiologia comprende 4 Inmunologia Parasitologia Virologia INTRODUCCION A LA Microsiotocia Sa La biologia molecular ha pesado a ocupar un lugar preponderante dentro de esta especiali- dad, porque gracias a sus aportes es posible explicar la accin de ciertos factores de virulen- cia de los microorganismos, identificarlos con més certeza, establecer relaciones filogenéticas entre ellos y otras aplicaciones que se veran en otros capitulos. A partir de lo anterior es posible afirmar que los inicios de la microbiologia se deben fundamen- talmente a un quimico, Louis Pasteur, y que en la actualidad la quimica molecular brinda otro inusi- tado impulso a esta ciencia. Nociones de sistematica bacteriana De acuerdo con el ciemtifico sueco Carl von Linneus o Karl von Linné (1707-1778), los seres vivos deben recibir una designacién binominal en latin (Sistema naturae, 1758); a saber, el nombre del género y de la especie. El nombre de 1a especie, que es el segundo, se escribe con mintiscula y alude a alguna caracteristica muy particular de ese micro- organismo, o a quien lo describié por primera vez, o al lugar donde se lo encuentra, oa alguna accién que posee. El nombre del género antecede al de la especie, se escribe con mayéscula y es compartido por varias especies que poseen la misma caracteris- tica a la que se refiere ese término, Esos nombres siempre deben destacarse mediante su subrayado 0 escribiéndolos en negrita, 0 en itélica 0 bastardilla. Por ejemplo, en el caso de Actinomyces israeli y Actinomyces odontolyticus, Actinomyces significa hongoen forma de rayo (miketos o myokes = hongo; actino = rayos 0 radiado), porque se crey6 que este microorganismo era un hongo y debido a su aspec- to microscépico radiado, ¢ israeli por Israel, que fue quien lo describié primero, en tanto que el nom- bre odontolyticus se le dio porque se lo hallé en el fondo de una cavidad cariosa, 0 sea, diente en lisis. Puede abreviarse el nombre del género colocando s6lo la inicial en maydiscula seguida del nombre de la especie, p. ej., A. israelii. Los géneros que poseen similitudes constituyen familias, cuyo nombre debe terminar en -aeae, Pp. ej., familia Actinomycetaceae. Varias familias integran un orden, cuyos consti- tuyentes son individualizados por el sufijo -ales (p. ¢j., Actinomycetales); Estos a su vez. se agrupan en una clase. También existen divisiones, subérde- nes, tribus, phylum, subphylum, Reinos y Dominios, etc. Esto constituye el capitulo de la sistemética, que es algo confuso porque esti en constante reubicacién en la medida en que los avances técnicos permiten descubrir otras caracte- risticas de estos seres.GENERALIDADES DE MicROBIOLOsIA El Manual de Bergey acumula esta informacién y, através de las distintas ediciones, la actualiza. Como este tema carece de interés desde el punto de vista de la patologia, el lector que desee profundi- zar en estos conceptos deberd consultar otros textos. Unidades de medida de los microorganismos Las dimensiones de los agentes infecciosos va- rfan de acuerdo con el grupo al que pertenecen y hay patégenos microsc6picos, como las bacterias, los hongos patégenos y los protozoos, que se miden en micrémetros (jum) (la milésima parte de un milimetro). Los gusanos y los artrépodos son visibles sin microscopio y se miden en milfmetros © sus mUltiplos. Los virus son submicroscépicos, s6lo pueden ser visualizados con el auxilio del microscopio electrénico (véase cap. 8) y se miden en nanémetros (nm) (un nanémetro equivale a la millonésima parte de un milfmetro). Exist una medida aun menor, el decinanéme- tro, 0,1 nm, antes conocido como Angstrim, A, que equivale @ 1 x 10°? mm. En cada capitulo se yerdn las dimensiones aproximadas de cada grupo. Acciones de los microorganismos Los microorganismos estin ampliamente distri- buidos en la naturaleza y, dado que como resulta- do de su desarrollo se producen diversas reaccio- nes bioquimicas, puede decirse que contribuyen a mantener el ecosistema ambiental mediante su participacién en ciclos, como el del carbono, el nitrégeno y otros elementos vitales. Otros microorganismos, como ya se ha dicho, forman parte de la llamada biota normal de las cavidades y las superficies corporales del hombre 6 de los animales. Hay microorganismos en Ia tierra; muchos de ellos colaboran con vegetales, favoreciendo su nutricién, aunque hay otros que les producen dafios. El estudio de los genes microbianos, por su sim- plicidad y rapido desarrollo de las bacterias, ha aportado las bases para iniciar los estudios genéti- cos en seres superiores. Actualmente, la ingenieria genética utiliza los microbios con distintos fines, como por ejemplo para producir vacunas, insulina y otros farma- cos. Lamentablemente, estos conocimientos pue- den ser utilizados con fines bélicos, como se des- taca con cierta frecuencia en los periddicos El hombre aprovecha la capacidad de algunos gérmenes para disponer de elementos biodegradables. Los microorganismos constituyen una fuente de energia no convencional. Todos conocen la participacién de los gérmenes en Ia elaboracién de diversos alimentos, como yogur, quesos, bebidas, etc. S6lo unos pocos microorganismos son capaces de ejercer acciones perjudiciales y, por lo tanto, se los conoce como patégenos. Hay patégenos humanos, patégenos para animales, de plantas y cultivos. Importancia de la microbiologfa y su relacién con las ciencias odontolégicas Desde el inicio de! descubrimiento de los micro- organismos, se los ha vinculado con la cavidad bucal. Baste recordar que Antony van Leeuwenhock hizo el hallazgo de estos seres en su propia boca. Casi doscientos afios después se los relacion6 con el deterioro de las estructuras denta- rias y en cl siglo pasado qued6 demostrada la ctio- logia microbiana de la caries y las enfermedades gingivo-periodontales, lo que indica la intima telacién con estas disciplinas. La microbiologfa requicre conocimicntos de quimica 0 bioquimica para poder dilucidar las estructuras que componen a los microorganismos y estudiar su metabolismo, ademas ya se mencio- né el papel de la quimica frente a los descubri- mientos microbiolégicos. Debe conocerse la histologia, embriologia y anatomfa del tejido sanguineo, asi como de los 6rganos linfoideos para poder entender los proce- sos inmunitarios. Es igualmente importante tener presentes estos conocimientos para advertir el dafio que produce el biofilme o biopelfcula (véase caps. 19 y 20) en tejidos dentarios, periodontales y circundantes. Seria imposible realizar el diagnéstico y el tra- tamiento de diversas patologfas infecciosas que se asientan en la cavidad bucal, si no se contara con el apoyo del Laboratorio de microbiologia y de anatomfa patolégica. Este tiltimo permite detec- ar el tipo de respuesta de los tejidos ante una infeccién 0 el daiio que en ellos produce. Por esto otra disciplina fntimamente emparentada es la estomatologia. Es indispensable mantener los instrumentos que se utilizan en las practicas odontalégicas libres de microorganismos. Para este fin la microbiologia sienta las bases de las técnicas de antisepsia y esterilizacién y los métodos de control biolégico de éstas. Por este motivo debe tenérselas presente en todas las clinicas. Es un arma importante en las campafias de pre- vencién de patologias bucales y ayuda en losestudios epidemiolégicos, por lo que auxilia ala odontologia preventiy: Los conocimientos microbiolégicos ayudan a pre- venir que se produzean infecciones cruzadas (véase cap. 29) en los pacientes en atencidn odontolégica. La microbiologia, hace afios, era la “Ceni INTRODUCCION A LA MicrosioLocia [iI de 1a odontologia; pero cada vez més los profesio- nales advierten que son los “médicos de la boca”; en este Momento estos conocimientos estén adqui- riendo el protagonismo que siempre debieron tener. El organismo humano es una unidad biol6- gica, como se veré en el capitulo 22. Resumen La microbiologia es la ciencia que se ocupa del estudio de organismos visibles con el auxilio de! microscopio, aunque esto tiene sus excepciones. Las ramas de la microbiologia son la bacteriologia, la micologia, la parasitologia, la virologia y la inmunologia (cuadro 1-4). Las bacterias carecen de membrana nuclear; los hongos y los parasitos son mas complejos, pose- en membrana nuclear (son eucariotas); estos ultimos pueden ser unicelulares o pluricelulares. Pertenecen a los reinos Procariotae, Protista, Fungi o Animalia, segun cuales sean (cuadro 1-1). Otros autores consideran las Archaebacterias, Eubacterias y Eucariotas (cuadro 1-2). Finalmente, hoy se consideran tres Dominios. Dominio Eukarya, Dominio Bacteria y Dominio Archae (cuadro 1-3). Todos los microorganismos reciben una designacién binominal: nombre de género y nombre de especie. Los gérmenes que dafian al hombre, a los animales y a las plantas se conocen como patége- nos humanos, animales o vegetales respectivamente. Los virus poseen una estructura subcelular y no se ubican en ningin reino; de su estudio tam- bién se ocupa la microbiologia. Hay grupos importantes de microorganismos que desempefian funciones iitiles para la naturaleza La inmunologia es la ciencia que estudia las relaciones entre los microorganismos y el hospede- ro en el que éstos se encuentran y también analiza la respuesta frente a otras sustancias extrafias. La microbiologia esta relacionada con la periodoncia, cariologia, estomatologia, anatomia patolégica, bioquimica, prevencidn y todas las especialidades con practicas odontoldgicas. Preguntas de revision 1. GPodria mencionar los reinos en los que se agrupan los seres vivos? 2. éPodria indicar dos caracteristicas del reino Procoriotae? 3. 2Qué tipo de microorganismos se ubican en el reino Protista? 4. Mencione tres caracteristicas del reino Fungi. 5. 2Qué dominios se consideran en la actualidad? 6. éCémo se designan los microorganismos? 7. éCuales son las ramas de la microbiologia médica y estomatolégica? 8, Mencione las acciones beneficiosas de los microorganismos 9, Seguin su criterio, {con qué ciencias odontoldgicas esta mas relacionada la microbiologia?BGI Gewerauioaves pe Microsio.osia BIBLIOGRAFIA De Torres R. Capitulo 1: Evolucién de las ideas bésicas en el desarrollo de Ia microbiologia biomédica. En: Microbiologia biomédica. Bacteriologia. Micologia. _Virologfa. Parasitologia. Inmunologia. 2* ed. Buenos Aires: Editorial Atlante, 2006, pp. 3-32. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Introduccién a la mictobiologia médica. En: Microbiologia médica. 5* ed, ‘Madrid: Elsevier Mosby, 2006, pp. 4. Negroni M. Capitulo 1: Introcuccién 2 la Microbiologfe. En: Negroni M, Microbiologia estomatol6gica. Fundamentos y gnia préctica, Buenos Aires: Editorial Médice Panamericana, 1999, pp. 3-6. Tonora GJ, Funke BR, Case CL. Chapter 10; Classification ‘of microorganisms. In: Microbiology. An introduction. 8% ed. San Francisco: Pearson Benjamin Cummings, 2004, pp. 276-303. ‘Tortora GJ, Funke BR, Case CL. The microbial world and you. In: Microbiology. An introduction. 8 ed. San Francisco: Pearson Benjamin Cummings, 2004, pp. 1-25.Bacteriologia2 MORFOLOGIA BACTERIANA as Marta Negroni Contenidos Bacterias: caracteristicas generales. Formas y agrupaciones bacterianas. Cocos, Bacilos, Formas espiraladas. Morfologias prevalentes en la cavidad bucal. Tamafio de las bacterias. Composicién quimica de las bacterias. Objetivos * Identificar las formas bacterianas. © Describir las agrupaciones de los cocos y los bacilos. © Dibujar las distintas apariencias de los bacilos. © Citar los tipos de microorganismos espiralados. ¢ Enumerar las morfologias bacterianas prevalentes en la cavidad bucal de las personas sanas. © Citar los componentes quimicos principales de la célula bacteriana. * Citar los tamafios aproximados de las bacterias. © Definir las caracteristicas generales de las bacterias. BACTERIAS: CARACTERISTICAS GENERALES Las bacterias son microorganismos que per- tenecen al reino Procariota de modo que presen- tan una estructura celular simple y sin membrana nuclear. De acuerdo con el concepto actual, son integrantes del Dominio Bacteria. Pueden crecer sin el auxilio de un organismo superior, por lo que se dice que son de vida libre, Las bacterias se reproducen por division simple o fision binari: lo que en algunos géneros da origen a agrupacio- nes caracteristicas, al quedar las células unidas de determinada forma. No obstante, cada célula es fisiologicamente independiente, vale decir que las bacterias son seres unicelulares. FORMAS Y AGRUPACIONES BACTERIANAS Dentro de estas formas basicas hay variantes. Si bien las formas esféricas se denominan cocos, también responden a esta denominacién morfologfas arrifionadas, ovaladas o ligeramente lanceoladas. Cocos Segiin los planos del espacio en los que se pro- duzca la divisi6n y la incapacidad de las células para separarse completamente, pueden originarse Diplococos. cuando la divisién se produce en un solo plano y quedan dos elementos; Estreptococos, sila divisién tiene lugar en un plano pero en forma sucesiva se originan cadenetas. Si la divisi6n se produce en dos planos, el resultado es la Tétrada y cuando la division afecta los tres planos en forma ordenada, se esti frente a una Sarcina; la forma irregular conduce a un aspecto comparable con un racimo de uvas 0 Estafilococo. Si los cocos son de tamafio mas pequefio y sin agrupacién especial, son micrococos (fig. 2-1). Bacilos Las formas alargadas reciben el nombre de bacilos (del latin, bacillus: bastén); cuando éstos se visualizan individualmente, pueden tener extremos redondeados y un didmetro menor bien uniforme; otros géneros muestran sus extremos afilados en forma de huso y se denominan fusi- formes. Algunos bacilos poseen una de sus termi- naciones abultada en forma de clava 0 maza. PorGENERALIDADES DE MIcROBIOLOGIA. Oa o Fig. 2-1. Formas y agrupaciones de los cocos. A. Micrococos. B. Diplococos. C. Etreptococos. D. Tétradas, E. Sarcina, F, Estafilococos. ltimo, cicrtos bacilos parecen cortados a pico, 0 en forma recta. Hay un grupo de bacilos que durante muchos affos se consideraron hongos, porque se ven como filamentos y con cortas ramificaciones; son los bacilos filamentosos. Los bacilos también pueden quedar agrupados en forma caracterfstica. Existen agrupaciones en cadcnas, Estreptebacilos, y cuando los bacilos sc presentan unidos uno al lado del otro seguin su eje mayor, se dice que estén en empalizada. Otra forma es la que se origina cuando quedan unidos por algtin punto, lo que produce formaciones asi- milables a las letras L, T, X, V, Y (fig. 2-2). = Uf G woo Entre los cocos y los bacilos hay microorganis- mos de apariencia intermedia por su tamafio y morfologfa que se conocen como eocobacilos. Formas espiraladas Las formas incurvadas se clasifican segtin e! mime- ro de curvaturas que poseen y de acuerdo a si su cuer- pocs rigido o posecn filamentos internos contractiles, Jo que les confiere flexibilidad. Hay una forma espi- ralada de cuerpo rigido y una sola curvatura, como si fuera una coma que se denomina Vibrio. Algunos lo consideran un bacilo curvo. Si tiene mds de una cur- vatura, como una S, es un Espirito (fig. 2-3). H ' Jj LY, ry "009 0% Fig. 2-2. Formas y agrupaciones de los bacilos. A. Bacilo comin. B. Claviforme. C. Fusiforme. D. Cortado a pico. E. Filamentoso. F. Agrupaci6n en estreptobacilo. G. Agrupacién en empalizada. H. Agrupacién en letras. I. Pleomérficos. J. Cocobacilos.Un cuerpo flexible con varias curvaturas seme- jante a un tirabuz6n puede ser una Borrelia si las espiras son amplias, un Treponema si las espiras son més apretadas 0 una Leptospira si ademés de tener muchas espiras los extremos estin incurva- dos hacia adentro (fig. 2-3). En estas formas no aparecen agrupaciones especiales, sus células se mantienen aisladas. Recientemente se han descrito bacterias en forma de estrella, piriformes, discoidales, con apéndices o yemas y planas cuadrangulares, pero hasta el momento carecen de interés médico. La bacteria que se presenta como un coco siempre lo hace de esa manera, dado que esa carac- teristica es consecuencia de la informacién genética. No obstante, algunas condiciones del ambiente en alguna especie pueden modificar esto y la bacteria puede visualizarse con distintas for- mas, como ocurre con el género Corynebacterium, y entonces se dice que se trata de una bacteria pleomérfica (fig. 2-2). MORFOLOGIAS PREVALENTES EN LA CAVIDAD BUCAL Las morfologias bacterianas que prevalecen en la cavidad bucal de las personas sanas consisten en diversos tipos de estreptococos, variados baci- los (especialmente del tipo de los filamentosos) y diplococos. Cuando cambian las condiciones loca- les, por ejemplo si disminuye la tensién de oxige- no oO aumentan ciertas sustancias, es posible individualizar casi todos los morfotipos, de interés médico, descritos (véase cap. 20). Al examinar una preparacién microscépica, hay que prestar atencién al tipo de morfologta y agru- MosroLocia BACTERIANA pacién que prevalece, dado que la manipulacion a que se someten las muestras alteran algo el tipo de presentaci6n. El aspecto morfolégico de las bacterias es uno de los primeros criterios que se tiene en cuenta para su identificacién y clasificacién por medio de fenotipificacién. Luego se tienen en cuenta otras caracteristicas, como el tipo de tincién que toman y sus propieda- des metab6licas; es la biotipificacién. Posteriormente se incluyeron otros criterios, como los antigenos (véase cap. 15) que las confor- man y asi se llega a la serotipificacién. Puede avanzarse si se incluye la respuesta a los antimicrobianos y la susceptibilidad a ciertos virus que infectan bacterias, esto es, la lisotipificacién (véase cap. 8). Lo més preciso, en la actualidad, es el anélisis del material genético de los microorganismos, que no solo sirve para identificarlos, sino también como método auxiliar de diagndstico y, en espe- cial, para aquellos microorganismos que no son cultivables; es la genotipificacién (véase cap. 28). TAMANO DE LAS BACTERIAS El tamafio término medio es de 1 im, que es el didmetro de los cocos y el didmeto menor de los bacilos y os espirilos. #1 largo de algunos bacilos o formas espiraladas puede alcanzar los 20 um 0 més. Son visibles s6lo con el auxilio del microscopio. Datos recientes notifican el hallazgo de una bac- teria sin necesidad de magnificacién, dado que su tamafio es cien veces mayor que el de las demas; también existe otro grupo denominado nanohacte- rias 0 ultramicrobacterias, que son de tamaiio om Fig. 2-3. Formas incurvadas 0 espiraladas. A. Vibrio. B. Espirilo. C. Borrelia. D. Treponema. E, Leptospira.GENERALIDADES DE MicrosioLociA mucho més reducido que las convencionales. Algunos investigadores suponen que no es conclu- yente que formen parte de las bacterias pat6genas para el hombre. COMPOSICION QUIMICA DE LAS BACTERIAS Las bacterias, como todos los seres vivos, con- tienen un alto porcentaje de agua (casi el 70%). El 30% restante consiste en sustancias que forman su peso seco. A grandes rasgos en ese peso seco los compuestos que alcanzan mayor proporcién son las proteinas; también hay Acidos nucleicos, DNA y RNA, lipopolisacaridos, fosfolfpidos, otras sustancias quimicas y trazas de otros ele- mentos inorgdnicos que integran otras moléculas. No obstante la composicién quimica puede variar de un tipo de bacteria a otra y esto permite diferenciarlas, en ocasiones por medio de reactivos colorantes. Resumen Los microorganismos unicelulares del reino Procariota o Dominio Bacteria (de vida libre) poseen tres morfologias predominantes, a saber, cocos (esféricos), bacilos (alargados) y espirala— dos 0 incurvados con una o mas curvaturas, de cuerpo rigido o flexible. Hay formas intermedias como los cocobacilos. La division simple de estos microorganisms produce agrupaciones caracteristicas en algunos géneros. Los que tienen la capacidad de cambiar de forma se denominan pleomérficos. Existen otras morfologias, pero carecen de interés médico. En la cavidad bucal de las personas sanas hay predominio de estreptococos, bacilos, espe cialmente del tipo filamentoso, y algunos diplococos. Si se modifican las condiciones, se visuali- Zan casi todas las morfolagias citadas. Las bacterias pueden clasificarse con criterios fenotipicos, biotipicos, serotipicos 0 genotipicos. El diémetro menor de las bacterias es de aproximadamente 1 jm y en algunos bacilos o for- mas espiraladas el largo puede llegar a ser de 20 um 0 mas. Las bacterias estén compuestas por agua, proteinas, acidos nucleicos, lipoproteinas, fosfolipi- dos y otros compuestos organicos y trazas de elementos inorganicos que constituyen parte de otras moléculas. Preguntas de revision 1. 2Qué morfologias principales pueden tener las bacterias? 2. Mencione las agrupaciones que pueden presentar los cocos. 3. Enumere distintos tipos de bacilos segun su aspecto. 4. Como se designan las distintas formas espiraladas? 5. Dibuje los distintos tipos de bacterias. 6. éPodria indicar el tamaiio aproximado de las bacterias? 7. éCuales son las morfologias bacterianas prevalentes en la cavidad bucal de las personas sanas? 8. ZCuales son los componentes quimicos principales de una célula bacteriana?Mosrotocia Bacteriana [i mil Wawa GL geumny cameteucnD 4. {Qué diémetro aproximado tiene cada céhula? 5. Si se tomara una sola célula 0 coco de esta agrupaci6n; 2a qué daria origen al reproducirse? 6. Si quisiéramos clasificarlas, ,a qué métodos deberiamos recurrir? BIBLIOGRAFIA Santillin MA. Capftalo 3: Morfologfa y estructura bacteriana. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Capitulo 3: Morfologia, En: ‘Microbiologia. biomédica. Bucteriologia. Micologia. sfntesis y estructuras de la pared celular de las bacteria. Ex Virologfa. Parasitologia. Inmunologfa. 2* ed. Buenos Aires: “Microbiologia médica, 5*ed. Madrid: Elsevier, 2006, pp. 1-24. _Atlante, 2006, pp. 54-78. Negioni M. Capfuulo 2: Morfologia bacieriana. En: Negroni M. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. ‘The prokaryotic cell. In: ‘Microbiologia estomatoligica, Fundamentos y guia prictica. Microbiology. An introduction. 8 ed. San Francisco: ‘Buenos Aires: Editorial Médica Panamericana, 1999, pp.9-12. Pearson, Benjamin Cummings, 2004, pp. 76-96. pyrighted material3 CELULA BACTERIANA Pe Marta Negroni Contenidos Elementos habituales de la célula bacteriana. Pared celular. Membrana citoplasmatica o celular. Citoplasma, Ribosomas. Nucleoide, 0 nucleoplasma, o genoide, 0 gendforo, o regién nuclear. Elementos no habituales. Capsula. Glicocalix, 0 sustancia laxa, 0 capa de limo. Flagelos. Fimbrias 0 pili. DNA extracromosémico. Inclusiones. Espora 0 endosporas. Objetivos « Enumerar las estructuras de una célula bacteri iana completa. Mencionar las tres caracteristicas mas sobresalientes de la célula bacteriana. © Diferenciar los tipos de pared celular. Enumerar las funciones de cada una de las estructuras bacterianas. Relacionar las funciones de ciertas estructuras bacterianas con la capacidad de producir enfermedad. © Describir la importancia de las esporas bacteri INTRODUCCION Con el auxilio del microscopio 6ptico compues- to es posible diferenciar formas bacterianas y agru- paciones. Las células se observan sin color, o bien, fijadas y coloreadas (véase caps. 31-2 y 31-3) pero es imposible saber c6mo estan conformadas. El advenimiento del microscopio electrénico de transmisi6n (MET) (véase cap. 31-3) ha permitido apreciar, gracias a los cortes ultrafinos y la gran magnificaci6n, las estructuras constitutivas de los microorganismos. Las células bacterianas presentan estructuras que son comunes a todas ellas, independientemen- te de la forma que tengan. Estas estructuras son la pared celular, la membrana citoplasmitica o celu- lar y el citoplasma, en el que se encuentran los ribosomas y el nucleoide. Otras estructuras aparecen slo en algunos géneros 0 especies, como la cdpsula, el glicocdlix, los flagelos, los pili, el DNA extracromosémico, diversas inclusiones y las esporas. Por este motivo las primeras estructuras se conocen como elementos habituales, imprescindi- bles, u obligados o esenciales y las segundas se consideran elementos no habituales, o facultativos © no esenciales, porque incluso las células que ianas. normalmente las presentan podrian llegar a vivir sin ellos. Es importante conocer Ja estructura bacteriana (fig. 3-1) porque ella explica el porqué de la pre- sencia de estos microorganismos en algunos ambientes y su posible capacidad para causar enfermedades. Ademis, el conocimiento de la estructura de las bacterias permite establecer diag- nésticos y lograr sustancias para contrarrestarlas 0 para preparar inmundgenos o vacunas (ver cap. 30) con parte de ellas. ELEMENTOS HABITUALES DE LA CELULA BACTERIANA Pared celular En la mayorfa de las bacterias la pared es la estructura mas externa y es bastante rigida. En estado natural las bacterias pat6genas para el hombre son incoloras. Un bacteriélogo danés Ma- mado Gram ide6 una técnica de coloracién que permitié distinguir dos grupos fundamentales de bacterias segiin el colorante que tomaran (véase cap. 31), Luego se individualizé un tercer grupo‘GENERALIDADES DE MicrosioLocia Fig, 3-1, Esquema de una célula bacteriana completa: a: pared celular, b: membrana celular, c: mesosomas; d: citoplasma © citosol; ¢: ribosom: j: flagelo; k: fimbria o pili; |: inclusiones. que no tomaba bien esta tincién. Ademés, las bacterias no patégenas pueden tener otro tipo de pared. La distinta forma en que se comportan las bac- terias frente a las soluciones colorantes se debe a que cada grupo posce una composicién quimica diferente. Por lo tanto, ésta varia si se trata de eélu- las grampositivas, gramnegativas 0 dcido-alcohol resistentes, que son las del tercer grupo. Hay auto- tes que opinan que el comportamiento frente al colorante depende de la conformacién fisica de esa estructura mas que de la composicién quimica. Lo que podriamos lamar el esqueleto de la pared celular es un complejo de mucopolisacérido © peptidoglucano o murefna. Este complejo repre- senta una verdadera red formada por cadenas para- lelas de N-acetil-glucosamina unida a N-acetil- murimico (de murus: pared), entrelazadas por aminofcidos 0 cadenas laterales tetrapeptidicas (fig. 3-2). En las bacterias grampositivas esta capa es bas- tante gruesa (puede Hegar a tener 200 moléculas de espesor) y est atravesada por Acidos teicoicos. Estos dcidos le confieren a esta capa una carga eléctrica negativa, lo que facilita la unién del microorganismo al diente, como se vera mas ade- lante, 0 a la mucosa (cap. 18) y permite la unién 0 la agregacién interbacteriana, por lo que son fac- tores de virulencia (véase cap. 17). En realidad, hay mds de cien variedades de mureina, lo que permite hacer parte de la caracte- tizaci6n de las bacterias. La penicilina acta sobre la pared de las bacterias grampositivas y rompe las uniones peptidicas de ese mucocomplejo. f: genoide o nucleoide; g: cépsula; h: polirribosomas; i: espora; Una enzima que se encuentra en las secreciones humanas y en ciertas células eucariotas, la lisozi- ma (véanse caps. 14 y 18), también ataca a esa estructura pero en las uniones polisacarfdicas. Los protoplastos, que son células grampositivas que han perdido la pared celular, pueden originarse como resultado de la accion de esa enzima. Las bacterias gramnegativas contienen menos Peptidoglucano; el peptidoglucano esta incluido en una zona que con el microscopio electronico de transmisién se ve de color claro; esa zona se desig- na espacio periplasmico. Las bacterias gramnegati- vas carecen de dcidos teicoicos. La capa mas exter- na esté formada por lipopolisacdridos y protefnas, y se conoce como lipopilisacarido (LPS) o antigeno . Parte de los lipopolisacdridos son reemplazados por fosfolfpidos, lo que confiere una caracterfstica asimétrica a esta estructura. La zona més intema es el lipido A 0 endotoxina. En suma, hay mayor canti- dad de lipoproteinas y fosfolfpidos (fig. 3-3). En estas paredes hay protefnas denominadas porinas, que brindan cierta permeabilidad a esta capa y permiten el pasaje de moléculas pequefias. Entre la membrana citoplasmatica y la parte mas externa existen zonas de unién conocidas como uniones de Bayer. Las células gramnegativas pueden perder parcial © totalmente la pared y en estas circunstancias se las conoce como esferoplastos (cuadro 3-1). En la enfermedad periodontal las_bacterias gramnegativas son muy numerosas y la constitu- cién de su pared celular seria responsable en parte de las alteraciones que se producen en esos tejidos.@ N-acetii-giucosamina (NAG) @ Acido N-aceti-murémico (NAM) @ rninoacico CELULA BACTERIANA Fig, 3-2. Esquema de la murefna ¢: uniones cruzadas interpeptidi Cuadro 3-1. Diferencias entre bacterias grampositivas y gramnegativas Caracteristica Grampositivas Gramnegativas Tincién con Gram violeta tojiz0 Pared celular sf sf Peptidoglucano ‘en gruesa capa una capa fina Acido teicoico presente ausenic Lipopolisacéridos ausentes, presentes Espacio periplsmico ausente presente Susceptibilidad a lisozima alta baja Susceptibilidad a penicilina alta. baja Produccién de toxinas en general, exotoxinas fundamentalmente, endotoxinas EI dafio de la pared origina protoplastos esferoplastosBIOMI Generauionoes ve Microsiotocia A Fig. 3-3. Esquema de las paredes celulares. A. Pared celular de una bacteria grampositive, B. Pared celular de una bacteria gramnegativa, C. Pared celular de una bacteria écido-alcohol resistente. A) 1: membrana celular; 2: pared celular; 3: dcidos lipoteicoicos; 4: peptidoglucano; 5: acidos teicoicos; 6: citoplasma, B) 1: membra” na celular; 2: espacio periplasmético; 3: ipopolisacarido y protefna; 4: peptidoglucano, 5: lipoproteina, 6: pro- teinas, 7: citoplasma. 8: fosfolfpidos, C) 1: membrana celular; 2: peptidoglucano con N-glucosamil-muréni- co; 3: arabino-galactano con Acido micélico; 4: lipidos (ceras, factor cuerda, micésidos); 5: citoplasma.Entre los microbios de interés médico, hay bacilos, cocos y formas espiraladas con pared gramnegativa, Las bacterizs écido-aleohol resistentes 0 mico- bacterias son bacilos que contienen peptidoglucano en Ia zona interna de la pared. En este complejo, el N-acetil-murdmico es reemplazado por N-glucosa- mil-murdmico. Estas bacterias poseen un 60% de lipidos del tipo dcidos micolicos en la parte exter- na y una zona intermedia de arabino-galactano. El bacilo que produce la tuberculosis tiene este tipo de pared (fig. 3-3). La capa lipidica es un factor de agregacion de las micobacterias (cord factor o factor cuerda) responsable de la virulencia y resistencia a la fagocitosis. La capa lipfdica no es permeable a los colorantes, de gram; la técnica de coloracién écido-alcohol resis- tente empleada permite visualizarlas de color rojo con la coloracién de Ziehl Neelsen (véase cap. 31-3). Otros bacilos poseen dcidos micélicos en su pared y pertenecen a los géneros Corynebacterium y Nocardia; son parcialmente Acido resistentes. La sintesis de la pared, 0 sea, la unién de las moléculas que la conforman se produce en cuatro etapas: una etapa en el citoplasma, otra etapa trans- membrana y las tltimas en la pared propiamente dicha. En esta etapa, el transporte molecular es facilitado por un fosfolipido hidréfobo, el bacto- prenol, que actiia slo como un transporte. Existen antibidticos capaces de interferir en alguna de estas etapas y en eso radica la importan- cia practica de conocer este mecanismo. Funciones La pared celular es la encargada de mantener la forma ce la bacteria, a la que protege del medio que la rodea. La pared se colorea de distinta forma segiin su composicién quimica. Hay quienes sostie- nen que la capacidad para retener el colorante es producto de su conformacién fisica mas que de su composicin quimica debido a que hay un hongo que con una estructura quimica totalmente diferen- te de la de las bacterias se colorea también como grampositivo. Ademés, la pared celular es responsa- ble de los rasgos taxonémicos, sirve de sitio de accion para determinados antibisticos 0 antimicro- bianos, permite la fijacién de virus bacterianos especificos o bacteridfagos (véase cap. 8), deja pa- sar los flagelos, interviene en la division celular y posee antigenicidad, por lo que modula la respuesta inmune especifica. Los fcidos teicoicos contribuyen a la adhesién a superficies como el diente y a otras células del organismo. También almacena fosfato y autorregula la integridad de estos organismos. Céwwia Bacreriana x Hay bacterias que pierden con facilidad la pared y que se conocen como formas L (debido a que fueron reconocidas en el Instituto Lister). Algunas de estas formas pueden volver a la forma original, si el medio les es favorable; son las formas L ines- tables. Empero, existen formas L estables y esio tiene gran importancia médica porque pueden ser causa de resistencia a los antibisticos. Hay un grupo de bacterias que genéticamente carecen de pared celular; se las describe en el capitulo 4. Se reconocen las archibacterias que tienen la particularidad de no tener peptidoglucano en la composicién de su pared celular; por el momento no tienen interés médico. Membrana citoplasmatica o celular Esta membrana, que esté situada por dentro de Ja pared celular, unida 0 no al espacio periplasmé- tico, contiene el citoplasma con sus estructuras. Compuesta fundamentalmente por fosfolipidos y algunas proteinas, es més flexible que las membra- nas de los eucariotas. En las observaciones efec- tuadas a través del microscopio electrénico de transmisién (MET) se ven dos capas y puede decirse que la membrana es una bicapa lipidica que aparece como dos lineas electrodensas separa- das entre sf por una zona clara, Contiene gran can- tidad de enzimas. Las protefnas son superficiales o integrales, estas titimas de aspecto globular. Las primeras son més féciles de extraer por procesos quimicos (fig. 3-4). Ademés, la capa interna est4 cubierta por unas proyecciones proteicas, denomi- nadas actinas, que son las que determinan la forma de la bacteria. La membrana tiene plegamientos en forma de invaginaciones: los mesosomas. Estos, que son mucho més numerosos en las bacterias gramposi- tivas que en las gramnegativas, se diferencian en mesosomas septales o de tabique y mesosomas transversales 0 laterales, seguin su ubicacién y su funcién (fig. 3-Ic). Sin embargo, se piensa que podrian ser artifi- cios producidos durante la preparacién de las muestras para su observacién mediante microsco- pfa electrénica. Funciones La membrana citoplasmética acttia como una membrana semipermeable que permite el paso de determinadas moléculas. Tiene gran actividad enzimética, degrada nutrientes, produce energia y permite el pasaje de productos de excrecién. En algunas bacterias no patégenas asientan enBRIE Geweraioaves ve Microsiotocia Fig. 3-4, Esquema de a membrana celular. |: proteinas integrales; 2: protefnas de superficie; 3: fosfolipidos; 4: enzimas. ella pigmentos fotosintéticos (eromatéfores 0 cloroplastos). Se cree que a través de los mesosomas intervie- ne en el proceso de divisién celular. Los que ase- guran la validez de esta formacién sugieren que le confiere mayor superficie a la membrana, lo que permite un pasaje mds dgil de sustancias nutritivas 0 de excrecién. Es el sitio de accién de numerosos antimicro- bianos, como las polimixinas, y también es sensi- ble a determinados desinfectantes. En las bacterias gramnegativas se aprecia una zona clara alrededor de la membrana que es el espacio periplasmatico; allf tiene lugar el transporte y el procesamiento de diversas molé- culas. Este espacio permite diferenciar a través del MET una bacteria grampositiva de una gramnegativa, aun sin la técnica de coloracién, debido a que en las grampositivas esta zona esti ausente. En realidad, se trata de un espacio vir- tual, ya que en las bacterias gramnegativas esta ocupado por una delgada capa de mureina y diversas enzimas. Citoplasma EI citoplasma, que es la poreién celular con mas contenido acuoso (80%), es como un coloide que tiene en suspension protefnas, azticares, Ifpi- dos, iones inorgénicos y compuestos de bajo peso molecular. En el citoplasma se encuentran los ribo- somas y el nucleoide. La zona donde se ubican los ribosomas es de aspecto granular y se llama citosol. Ribosomas Los ribosomas son elementos esféricos o lige- ramente aplanados, presentes en una cantidad de 10,000 0 més, lo que confiere al citoplasma el aspecto granuloso. Estén aislados o reunidos de a tres o de a cuatro mediante un trozo lineal de RNA. mensajero (RNAm) y asf forman polisomas. Se ha comprobado que los ribosomas estin constituidos fundamentalmente por protefnas y RNA ribosémico. Por su velocidad de sedimenta- cién estos ribosomas son 70S (S: unidades Svedberg, de velocidad de ultracentrifugacién), con dos subunidades principales, una es 30S (con- tiene una molécula de RNAr) y la otra SOS (encie- rra dos moléculas de RNAr). Funciones Alli se realiza la sintesis de proteinas y tiene lugar la accién de antibacterianos, tales como las tetraciclinas. Otros antimicrobianos actian especi- ficamente sobre cada una de las subunidades (véase cap. 12).Nucleoide, o nucleoplasma, o genoide, 0 gendéforo, o region nuclear Se lo denomina indistintamente de cualquiera de estas formas para sefalar que carece de membra- na nuclear. Se trata de una sola molécula de DNA bicate- nario larga, enrollada, cerrada, sin cubierta, ubi- cada en la parte central de la célula y adherida a la membrana citoplasmitica. Las cadenas del DNA se abren y cada una sirve de molde para que se produzca otra, con el auxilio de varias enzimas (véase caps. 6 y 7) En realidad, esté constituido en su mayor parte por DNA, pero también se detectan RNA y pro- tefnas. Ocupa aproximadamente el 20% dei volu- men de la célula. Funcion La funcién del nucleoide consiste en la trans- misién de la informacién genética para conservar las estructuras y las funciones de cada especie. Algunos antimicrobianos actuan a este nivel. Desde hace algunos aitos las bacterias se tipifi- can por la secuencia y los tipos de genes, es decir, por el “mapa genético”. ELEMENTOS NO HABITUALES Cépsula La cépsula es la estructura més externa en las células que cuentan con la informacién genética necesaria para poseerla, Esta situada por fuera de Ja pared celular. En general, es de constitucién polisacaridica, aunque las hay peptidicas, Esti muy hidratada. Tiene un espesor uniforme y se encuentra firmemente adherida a la pared celu- lar. Nose colorea con las técnicas comunes. Puede ser puesta en evidencia por técnicas de tincién negativa (véase cap. 31-3). Es mds notoria en los microorganismos en vivo y en cultivos primarios. Por el tipo de cultivo que origina puede supo- nerse si una bacteria es eapsulada o no, dado que las primeras producen colonias lamadas lisas 0 mucoides. Funciones La cApsula les confiere a los microorganismos que la poscen una mayor capacidad de agresién 0 virulencia. Protege aa bacteria del mecanismo de fagocitosis que ejecutan las células encargadas de la defensa del organismo. Les permite resistir la aceién de los antibacterianos. Acta favoreciendo Cé.uLé Bacreriana SRE la adhesin, Es fuente de reserva de nutrientes moy antigénica, El antigeno capsular se deno1 na K de Kapsel (en alemén) o Vi de virulencia. La presencia de cépsula en algunas bacterias sirve para pruebas de identificacién. Glicocalix, o sustancia laxa, 0 capa de limo El glicocdlix es una capa externa de aspecto gelatinoso y pegajoso que est compuesta por poli- sacéridos, polipéptidos 0 ambas cosas. Es genera- daen el interior de la célulay luego vertida al exte- rior. No es tan uniforme como la cdpsula y est menos adherida a la pared celular. En los cultivos las colonias de estos microorganismos tienen un aspecto mucoide. Si el glicocdlix estd compuesto s6lo por aztica- res, se designa como polisacarido extracelular (EPS) (véase cap. 19). Funciones El glicocélix brinda a las bacterias facilidad para adherirse a distintas superficies. Esto ocurre con Streptococcus mutans, que se une firmemente a la superficie libre de los dientes. Ademés de evitar la deshidratacién del microor- ganismo, impide la salida de sustancias alimenti- cias y, eventualmente, puede ser utilizado como fuente de nutrientes. Flagelos Los flagelos son apéndices filamentosos extrace- lulares, largos, flexibles, ondulados y delgados que hacen que las bacterias que los poseen gocen de movilidad. Aparecen en algunos bacilos rectos 0 curvos, tanto grampositivos como gramnegativos. Tipos de flagelos Los flagelos se clasifican segiin el ntimero y la ubicacién. Se dice que la bacteria es at (trico pelo, a = prefijo negativo) si no presenta flagelos, monétrica (mono: uno) si tiene un solo flagelo, anfitrica cuando presenta un flagelo o un penacho en cada polo, lofétrica cuando posee un solo pena- cho en un extremo y peritrica si ticne flagelos a lo largo de toda su superficie (fig. 3 Estas estructuras estén compuestas por una pro- tefna globular denominada flagelina, que esta enrolada en forma helicoidal y sin envoltura. Los flagelos presentan tres zonas bien diferen- ciadas: el apéndice o filamento, un codo 0 gan- cho, también de composicion proteica, y un cuer- po basal, en el que se superponen dos 0 cuatro ani-