Ghid de Biosiguranta 2005

MINISTERUL SNTII
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARELE MEDICALE
2005
Ghid naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale reprezint traducerea i adaptarea n limba
romn a lucrrii Laboratory biosafety manual ediia a III-a, Organizaia Mondial a Sntii, Geneva,
2004, completat cu Clasicarea agenilor biologici care reprezint traducerea Anexei III a Directivei
2000/54 a Parlamentului European i Consiliului din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea
lucrtorilor mpotriva riscurilor presupuse de expunerea la ageni biologici la locul de munc.
Responsabilitatea pentru ediia n limba romn revine grupului de lucru.
Lucrarea n limba romn a fost realizat cu asistena tehnic din partea Uniunii Europene prin urmtoarele
proiecte Phare:
- RO-2002/000-586.04.11.01 Restructurarea Reelei de Centre Regionale HIV/SIDA cu
scopul de a mbunti activitile de prevenire i accesul la ngrijiri al persoanelor infectate HIV
- RO 0107.14 Creterea ecienei sistemului romnesc de supraveghere epidemiologic
i control ale bolilor transmisibile
Grup de lucru (n ordine alfabetic)
Daniela Bdescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Dana Brehar Cioec - Institutul de Sntate Public Timioara
Dan Butur - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Andrei Aubert-Combiescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i
Imunologie Cantacuzino
Elena Crucerescu - Institutul de Sntate Public Iai
Lenua Filipa - Direcia de Sntate Public Dolj
Silvia Filipiuc - Direcia de Sntate Public Suceava
Maria Hncu - Direcia de Sntate Public Galai
Carmen Hura - Institutul de Sntate Public Iai
Luminia Smaranda Iancu - Institutul de Sntate Public Iai
Gabriel Ionescu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
tefan Maximencu - Institutul de Sntate Public Cluj
Mihaela Mihailov - Direcia de Sntate Public Bacu
Eugenia Negu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Daniela Piigoi Universitatea de Medicin i Farmacie Carol Davila Bucureti
Elena Schiopu - Direcia de Sntate Public Sibiu
Mariana Solomon - Direcia de Sntate Public Hunedoara
Ecaterina Texe - Direcia de Sntate Public Bihor
Olivia Vizitiu - Institutul Naional de Cercetare-Dezvoltare pentru Microbiologie i Imunologie
Cantacuzino
Coordonatorul ediiei: Gabriel Ionescu
Alese mulumiri coordonatorilor de proiecte: Marc Lejars, Rob Stevens, Barbara Pearcy
Ghid naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale
Ministerul Sntii, Romnia, 2005
ISBN 973-99-893-7-3
Tiprit n 700 exemplare
MINISTERUL SNTII
GHID NAIONAL
DE BIOSIGURAN
PENTRU
LABORATOARELE MEDICALE
2005
Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei

Ghid naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale
Ediia a I-a, Bucureti, Editura Medical 2006
Coordonatorul ediiei: Gabriel Ionescu
format: 210x297mm, copert laminat, 166 pagini, 700 exemplare
ISBN 973-99-893-7-3
Traducere dup Laboratory biosafety manual ediia a III-a,
Organizaia Mondial a Sntii, Geneva, 2004,
Cuvnt nainte la ediia n limba romn

Ghidul naional de biosiguran pentru laboratoarele medicale este traducerea n limba
romn a celei de a treia ediii a publicaiei OMS Laboratory Biosafety Manual aprute n anul 2004,
completat cu unele prevederi coninute n Directiva Comisiei Europeene nr. 2000/54. Realizarea i
tiprirea acestui ghid a fcut parte din obiectivele a dou proiecte desfurate sub egida Ministerului
Sntii i nanate din programul PHARE i anume:
- RO-2002/000-586.04.11.01 Restructurarea Reelei de Centre Regionale HIV/SIDA cu scopul
de a mbunti activitile de prevenire i accesul la ngrijiri al persoanelor infectate HIV i
- RO 0107.14 Creterea ecienei sistemului romnesc de supraveghere epidemiologic i
control ale bolilor transmisibile.
Dat ind c prezentul ghid a fost redactat sub egida Ministerului Sntii, cu contribuia unor
specialiti care lucreaz n laboratoare de diagnostic i sntate public din domeniul medicinii umane,
el se dorete n primul rnd un ndreptar pentru aceast categorie de instituii. Menionm totui c
riscurile de accidente care cad sub incidena preocuprilor de biosiguran i biosecuritate se ntlnesc
i n laboratoarele din domeniul veterinar, tosanitar, din laboratoarele care controleaz ecacitatea
substanelor bactericide i bacteriostatice i, n unele situaii, n laboratoarele care fac controlul apei i
alimentelor etc.
Reamintim c n anul 1996 a aprut, ca un numr special al revistei Studii i cercetri de
Virusologie, un Manual pentru Bioprotecie n Laborator, care coninea traducerea n limba romn
a celei de a doua ediii a aceluiai manual publicat de OMS n anul 1993. Aceast publicaie a avut la acea
vreme un rol important de informare i documentare a specialitilor din ara noastr asupra problematicii
respective, ntr-un moment n care lipseau aproape cu desvrire texte romneti n materie.
Apariia acestei noi ediii, aduse la zi, se impunea avnd n vedere c n prezent toate laboratoarele
care manipuleaz microorganisme potenial patogene nu pot autorizate dac nu posed i nu aplic
manuale proprii de biosiguran, pentru a cror elaborare prezentul ghid este practic indispensabil.
Problema terminologiei romneti n acest domeniu a constituit o dicultate major ntmpinat
de toi specialitii care au tradus i adaptat textele respective. Autorii versiunii de fa s-au strduit s
adopte i s contribuie la ncetenirea unor termeni care s corespund ct mai del ca neles cu
cei utilizai la ora actual n documentaia internaional, evitnd n msura posibilului introducerea de
neologisme nc neintrate n limba romn curent.
Este ns evident c n orice disciplin tehnic exist n toate limbile un jargon adoptat prin
consens de toi specialitii. De acest lucru au fost contieni i traductorii respectivi, care au convenit
asupra unor termeni tehnici care s e ct mai apropiai de sensul curent al termenului respectiv n limba
romn, dar care s nsemne acelai lucru cu cei din textul englez de origine. n cele ce urmeaz ne vom
opri asupra ctorva exemple mai relevante n aceast privin.
Lucrarea a fost denumit Ghid i nu Manual, ntruct aceast lucrare este gndit s serveasc
drept ndrumar pentru ca instituiile n care funcioneaz laboratoare biomedicale s i alctuiasc
propriile lor Manuale de biosiguran.
S-au adoptat termenii Biosiguran i, respectiv, Biosecuritate pentru traducerea termenilor
anglo-saxoni Biosafety i, respectiv, Biosecurity, renunndu-se la termenul Bioprotecie utilizat n
textele anterioare. Motivul este c, prin consens internaional, termenul Bioprotection are o sfer mai
larg de cuprindere. Alegerea de mai sus s-a fcut chiar dac n limbajul curent termenii de siguran i
securitate sunt cvasi-sinonimi n limba romn. Termenii respectivi sunt denii adecvat la locul potrivit n
text; menionm aici c biosigurana se refer la prevenirea accidentelor iar biosecuritatea la prevenirea
incidentelor generate de utilizarea cu rea intenie a unor ageni infecioi.
I
Aceast difereniere a aprut n ultima ediie a manualului OMS, ind generat de evoluia
evenimentelor din societatea uman n ultimul deceniu, care au impus ateniei omenirii problema riscurilor
bioteroriste.
O dicultate deosebit a fost ntlnit pentru traducerea del i corect n limba romn a
termenului anglo-saxon Containment (tradus n textele franceze de specialitate prin Connement).
Iniial, acest termen fusese tradus prin interdicie (vezi Manualul pentru bioprotecie n laborator publicat
n 1996 n revista Studii i Cercetri de Virusologie). Au mai fost de asemenea avute n vedere ca variante
posibile termeni ca ngrdire, restricie, izolare, dar s-a considerat c nici unul nu acoper integral
sensul n care este folosit termenul de containment (respectiv connement) n textele de specialitate
pentru a indica pstrarea, manipularea i transportul n condiii de securitate pentru lucrtori i pentru
mediul nconjurtor a microorganismelor cu risc patogen. Am convenit prin consens s adoptm n acest
scop termenul de securizare (respectiv adjectivul securizat) pentru a evita utilizarea unor locuiuni mai
mult sau mai puin lungi.
A fost preferat termenul de hot de lucru, respectiv hot de siguran biologic sau hot de
protecie chimic pentru traducerea termenului anglo-saxon cabinet (v. biological safety cabinet) n
locul variantelor incint sau ni utilizate n alte texte, considernd c hota a intrat mai degrab n
limba romn cu nelesul cel mai apropiat de cel desemnat de englezescul cabinet folosit n acest
context.
Suntem convini c s-ar putut gsi n numeroase locuri din Ghid formulri mai potrivite i
ateptm sugestiile cititorilor pentru a ameliora textul n vederea publicrii unor ediii viitoare. Aceste sugestii
i critici pot adresate Dr. Gabriel Ionescu, I.N.C.D.M.I. Cantacuzino, Splaiul Independenei 103, Bucureti,
fax 021 3184414, email: gionescu@cantacuzino.ro.
Considerm c datele cuprinse n Ghidul de biosiguran ar trebui s fac parte i ele, ca i
cele din cadrul capitolului mare al demersului de calitate, din curricula formrii profesionale a cadrelor
superioare, medii i ajuttoare care se dedic lucrului n laboratoare biomedicale. Bineneles c aceste
noiuni vor trebui prezentate, mprosptate i actualizate cu ocazia instructajelor iniiale i a celor periodice
din cadrul ecrui laborator.
Pornind de la toate considerentele de mai sus, considerm c Ghidul naional de biosiguran
pentru laboratoarele medicale va constitui un ndreptar indispensabil pentru activitatea tuturor
laboratoarelor biomedicale din Romnia.
Prof. Dr. Andrei Aubert-Combiescu
Prof. Dr. Marian Negu
II
Cuvnt nainte
Organizaia Mondial a Sntii (OMS) a recunoscut de mult timp c sigurana i, n particular,

sigurana biologic reprezint probleme importante pe plan internaional. OMS a publicat prima ediie
a Manualului de biosiguran n laborator n anul 1993. Acest manual a ncurajat statele s accepte
i s implementeze noiunile de baz privind sigurana biologic i s elaboreze coduri naionale de
practic pentru manipularea n condiii de siguran a microorganismelor patogene n laboratoarele aate
pe teritoriile lor. Din anul 1983, multe ri au urmat ndrumrile din acest manual pentru a elabora astfel
de coduri de practic. A doua ediie a manualului a fost publicat n 1993.
OMS continu s dein un rol coordonator n probleme legate de biosiguran la nivel internaional
prin aceast a III-a ediie a manualului n care sunt abordate sigurana i securitatea biologic cu care ne
confruntm n acest mileniu.
Cea de-a III-a ediie subliniaz importana responsabilitii personale. Au fost adugate noi capitole
privind evaluarea riscului, utilizarea n siguran a tehnologiei ADN recombinant i transportul materialelor
infecioase. Recentele evenimente pe plan mondial au dezvluit noi ameninri pentru sntatea public
prin utilizarea ru intenionat i eliberarea n mediul nconjurtor de ageni microbieni i toxine. De aceea,
cea de-a III-a ediie introduce conceptele privind biosecuritatea protejarea materialului microbiologic
mpotriva furtului, pierderii sau al diversiunii, care pot conduce la utilizarea neadecvat a acestor ageni
i la afectarea sntii publice. Aceast ediie include i informaii privind sigurana cuprinse n publicaia
OMS din 1997 Sigurana n laboratoarele din unitile sanitare (1).
A III-a ediie a Manualului OMS de biosiguran n laborator constituie un preios material de
referin i un ghid pentru naiunile care sunt contiente de necesitatea de a elabora i stabili coduri
naionale de practic pentru securizarea materialului microbiologic, asigurnd n plus disponibilitatea
acestuia pentru scopuri clinice, de cercetare i epidemiologice.
Dr. A. Asamoa-Baah
Assistant Director-General
Communicable Diseases
World Health Organization
Geneva, Switzerland
III
Mulumiri
Elaborarea acestei a III-a ediii a Manualului de biosiguran n laborator a fost posibil prin contribuia
deosebit a urmtorilor :
Dr W. Emmett Barkley, Howard Hughes Medical Institute, Chevy Chase, MD, USA
Dr Murray L. Cohen, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA, USA (pensionat)
Dr Ingegerd Kallings, Swedish Institute of Infectious Disease Control, Stockholm, Sweden
Ms Mary Ellen Kennedy, Consultant in Biosafety, Ashton, Ontario, Canada
Ms Margery Kennett, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia
(pensionat)
Dr Richard Knudsen, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta,
GA, USA
Dr Nicoletta Previsani, Biosafety programme, World Health Organization, Geneva, Switzerland
Dr Jonathan Richmond, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta,
GA, USA (pensionat)
Dr Syed A. Sattar, Faculty of Medicine, University of Ottawa, Ottawa, Ontario, Canada
Dr Deborah E. Wilson, Division of Occupational Health and Safety, Ofce of Research Services, National
Institutes of Health, Department of Health and Human Services, Washington, DC, USA
Dr Riccardo Wittek, Institute of Animal Biology, University of Lausanne, Lausanne, Switzerland
Asistena urmtorilor specialiti este, de asemenea, apreciat:
Ms Maureen Best, Ofce of Laboratory Security, Health Canada, Ottawa, Canada
Dr Mike Catton, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, North Melbourne, Australia
Dr Shanna Nesby, Ofce of Health and Safety, Centers for Disease Control and Prevention, Atlanta, GA,
USA
Dr Stefan Wagener, Canadian Science Centre for Human and Animal Health, Winnipeg, Canada
Autorii i referenii doresc s mulumeasc, de asemenea, pentru contribuiile originale ale numeroilor
specialiti a cror munc a fost inclus n prima i a doua ediie a Manualului de biosiguran n laborator
precum i n publicaia Sigurana n laboratoarele din unitile de ngrijire a sntii, OMS, 1997.
IV
CUPRINS
Cuvnt nainte la ediia n limba romn
Cuvnt nainte
III
Mulumiri
IV
Cuprins
1. Principii generale
2. Evaluarea riscului microbiologic
3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2
4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3
17
5. Laboratorul nalt securizat Nivelul de Biosiguran 4
21
6. Biobazele
25
7. Recomandri pentru calicarea laboratorului/facilitilor acestuia
31
8. Recomandri pentru certicarea laboratorului/facilitilor acestuia
33
9. Conceptul de biosecuritate n laborator
45
10. Hotele de siguran biologic
47
11. Echipamente de siguran
57
12. Practici microbiologice corecte. Tehnici de laborator
63
13. Planuri pentru intervenii n caz de accidente i msuri de urgen
71
14. Dezinfecia i sterilizarea
75
15. Noiuni introductive privind transportul materialelor infecioase
85
16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant
89
17. Substane chimice periculoase
93
18. Pericole adiionale n laborator
97
19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de biosiguran
103
20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar
105
21. Programele de instruire
107
22. List-chestionar
109
Anexa 1 - Primul-ajutor
115
Anexa 2 - Imunizarea personalului
117
Anexa 3 - Centre colaboratoare ale OMS n domeniul biosiguranei
119
Anexa 4 - Sigurana microbiologic a echipamentelor
121
Anexa 5 - Substanele chimice: pericole i precauii
125
Anexa 6 - Clasicarea agenilor biologici
151
Bibliograe
163
V
1. PRINCIPII GENERALE
1. Principii generale
Introducere
Prezentul ghid se refer la pericolul infecios implicat de manipularea diferitelor microorganisme,
lund n considerare grupurile de risc crora le aparin (Grupurile de Risc OMS 1, 2, 3 i 4, vezi Anexa 6).
Aceast clasicare a grupurilor de risc este valabil doar pentru activitatea de laborator. Tabelul 1
descrie grupurile de risc.
Tabel 1. Clasicarea microorganismelor infecioase pe grupuri de risc
Grup de risc 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent)
Microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal
Grup de risc 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s reprezinte
un pericol sever pentru personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu. Expunerile n laborator
pot cauza infecii severe dar pentru care exist tratament ecace i msuri prolactice, iar riscul de
rspndire al infeciei este limitat.
Grup de risc 3 (risc individual ridicat, risc comunitar sczut)
Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de regul,
nu se rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament ecace i msuri prolactice.
Grup de risc 4 (risc individual i comunitar ridicat)
Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot
transmite spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament ecace
i msuri prolactice.
Din punctul de vedere al biosiguranei, laboratoarele se clasic astfel :

- de baz - Nivel de biosiguran 1
- de baz - Nivel de biosiguran 2
- securizat - Nivel de biosiguran 3
- nalt securizat - Nivel de biosiguran 4
Aceast clasicare are la baz un complex de caracteristici ce se refer la proiectarea i construcia
laboratorului, nivelul de securizare, dotarea cu echipamente, practicile i procedurile operaionale pe care
le implic manipularea microorganismelor din diferite grupuri de risc. Fr a exhaustiv, Tabelul 2 prezint
corespondena dintre grupul de risc n care se ncadreaz microorganismul i nivelul de biosiguran al
laboratorului n care acesta se manipuleaz.
GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE
Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran

Grup de
risc
Nivel de
biosiguran
Tip de laborator
Practici de laborator
De baz - Nivel de nvmnt,

biosiguran 1
cercetare
GMT plus
Servicii de asisten
De baz - Nivel de
mbrcminte de
primar; diagnostic,
biosiguran 2
protecie i semn de
cercetare
pericol biologic
Securizat
Nivel de
biosiguran 3
Servicii speciale
de diagnostic,
cercetare
nalt securizat
- Nivel de
biosiguran 4
Similar cu nivelul 3
plus intrare etan,
Uniti pentru ageni
du la ieire,
patogeni periculoi
eliminare special a
deeurilor
GMT
Similar cu nivelul 2
plus mbrcminte
special, acces
controlat, ux de aer
direcionat
Echipamente de
protecie
Nici un fel; suprafa
de lucru deschis
Suprafa de lucru
deschis plus HSB
pentru producerea
eventual de aerosoli
HSB i/sau alte
dispozitive primare
pentru toate
activitile
HSB clasa a III-a sau
costum cu presiune
pozitiv combinat cu
HSB clasa a II-a,
autoclav cu dou ci
de acces (transmural),
aer ltrat
GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte)

HSB = Hot de siguran biologic
OMS recomand elaborarea la nivel naional sau regional a unei clasicri a microorganismelor,
pe baza grupurilor de risc, lund n considerare urmtoarele :
1. Patogenicitatea microorganismului.
2. Modul de transmitere i tipul de gazd caracteristice microorganismului, elemente ce pot
inuenate de nivelul de imunitate al populaiei, densitatea i mobilitatea populaiei gazd,
prezena vectorilor i de nivelul de igien a mediului.
3. Posibilitile locale de aplicare a unor msuri preventive ecace. Acestea pot include : prolaxia
prin imunizare activ (vaccinare) sau pasiv (administrare de antiseruri / imunoglobuline
specice); aplicarea de msuri sanitare, ca de exemplu cele privind igiena alimentelor i a apei;
controlul rezervorului animal sau al vectorilor reprezentai de artropode.
4. Posibilitile de administrare a unor tratamente ecace. Acestea pot include: imunizarea pasiv,
vaccinrile postexpunere, folosirea de antibiotice, antivirale i ageni chimioterapici, lund n
considerare i posibilitatea emergenei de tulpini rezistente la acestea.
n Anexa 6 este prezentat clasicarea agenilor biologici conform Anexei III a Directivei 2000/54/
CE a Parlamentului European i Consiliului, din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea
lucrtorilor mpotriva riscurilor pe care le implic expunerea la ageni biologici la locul de munc.
Desemnarea nivelului de biosiguran pentru lucrul n laborator trebuie s se bazeze pe evaluarea
riscului. Pentru stabilirea nivelului corect de biosiguran, evaluarea va lua n considerare grupul
2
1. PRINCIPII GENERALE
de risc cruia i aparine microorganismul, dar i ali factori ce pot interveni. Pentru exemplicare, un
microorganism aparinnd grupului de risc 2 necesit n general localuri i utiliti, echipamente, practici
i proceduri pentru desfurarea n siguran a activitilor caracteristice Nivelului de biosiguran 2. Dac
totui anumite experimente sunt generatoare de aerosoli n concentraii mari, Nivelul de biosiguran 3
este mai indicat, asigurnd un grad superior de limitare a aerosolilor la spaiul de lucru al laboratorului.
Aprecierea nivelului de biosiguran necesar desfurrii unei anumite activiti este ghidat de judecata
profesional bazat pe evaluarea riscului, i nu doar pe desemnarea mecanic a unui nivel de biosiguran
a laboratorului dupa grupul de risc cruia i aparine microorganismul patogen care urmeaz a manipulat
(vezi Capitolul 2).
Tabelul 3 prezint principalele cerine pentru ecare nivel de biosiguran.
Tabel 3. Rezumat al cerinelor nivelelor de biosiguran
Izolarea(a) laboratorului
ncpere etanabil pentru decontaminare
Ventilaia:
- ux de aer direcionat spre interior
- sistem de ventilaie controlat
- evacuarea aerului prin ltre HEPA
Intrare cu u dubl
Sas (c)
Sas cu du
Anticamer
Anticamer cu du
Tratarea euenilor
Autoclav:
- n institutie/cldire
- n laborator
- cu acces dublu (transmural)
Hote de siguran biologic:
Capacitate de monitorizare a siguranei
personalului (e)
1
Nu
Nu
Nivel de biosiguran
2
3
Nu
Da
Nu
Da
4
Da
Da
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
De dorit
De dorit
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Nu
Da
Da
Da / Nu(b)
Da
Nu
Nu
Da
Da / Nu(d)
Da / Nu(d)
Da
Da
Da
Da
Da
Da
Da
Nu
Da
Da
Nu
Nu
Nu
Nu
Da
Nu
Nu
De dorit
Nu
Da
De dorit
De dorit
Da
De dorit
Da
Da
Da
Da
Da
(a) Izolarea zic i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului.

(b) Depinde de locul de evacuare (vezi Capitolul 4).
(c) Sas - Incint prevzut cu dou sau mai multe ui interpus ntre dou sau mai multe ncperi
(de exemplu cu presiuni diferite), pentru a controla uxul de aer ntre acestea. Un sas poate
proiectat i utilizat, e pentru personal, e pentru materiale sau probe.
(d) Depinde de agenii microbieni manipulai n laborator.
(e) De exemplu, fereastr de vizualizare, sistem de supraveghere video, dou ci de comunicare
n consecin, stabilirea nivelului de biosiguran ia n consideraie microorganismul (agentul
patogen) folosit, facilitile disponibile, echipamentele i procedurile necesare desfurrii activitii de
laborator n condiii de siguran.
3
2. EVALUAREA RISCULUI MICROBIOLOGIC
2. Evaluarea riscului microbiologic
Coloana vertebral a practicilor de biosiguran este evaluarea riscului. Dei exist o multitudine
de instrumente destinate a ajuta evaluarea riscului pentru o procedur sau pentru un experiment, cel mai
important component este reprezentat de evaluarea (judecata) profesional. Evaluarea riscului ar trebui
realizat de ctre specialitii cei mai familiarizai cu caracteristicile specice ale microorganismelor ce vor
utilizate, cu procedurile i echipamentele, cu animalele ce pot folosite ca model i cu echipamentele i
facilitile disponibile pentru o manipulare securizat. eful laboratorului sau investigatorul principal sunt
rspunztori pentru evaluarea adecvat i la timp, precum i pentru conlucrarea strns cu colectivul
de protecia muncii i personalul de biosiguran n vederea asigurrii echipamentului i facilitilor
necesare desfurrii activitii pentru care s-a fcut evaluarea. Dupa evaluarea iniial a riscului, acesta
se reevalueaz periodic i se revizuiete dac se consider necesar, lund n considerare acumularea de
noi date corelate cu problema gradului de risc i informaiile din literatura de specialitate.
Unul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului microbiologic este listarea grupurilor
de risc pentru agenii microbiologici (vezi Capitolul 1). Simpla referire la grupurile de risc pentru un anumit
agent microbian este insucient pentru evaluarea riscului. Ali factori ce vor trebui luai n considerare
sunt urmtorii:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
Patogenitatea agentului infecios i doza infectant

Consecinele posibile ale expunerii
Calea natural de infectare
Alte ci de transmitere, rezultate n urma manipulrii n laborator (parenteral, aerian,
ingerare)
Stabilitatea agentului infecios n mediul extern
Concentraia agentului infecios i volumul de material concentrat ce se manipuleaz
Disponibilitatea unei gazde adecvate/susceptibile (umane sau animale)
Informaii disponibile din studii pe animale, raportri privind infecii dobndite n laborator
(profesionale) sau raportri de cazuri clinice
Intenia de a utiliza anumite tehnici in laborator (ultrasonarea, aerosolizarea, centrifugarea, etc)
Orice manipulare genetic a microorganismului care poate duce la extinderea gamei de gazde
susceptibile sau poate modica sensibilitatea acestuia la terapiile considerate ecace
Accesul efectiv la msuri prolactice sau terapeutice ecace.
Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabilete nivelul de siguran biologic
necesar desfurrii activitii planicate, se selecteaz echipamentul corespunztor proteciei
personalului i procedurile operaionale standard (POS) ce vor include aspecte de siguran a muncii, cu
scopul desfurrii activitii n modul cel mai sigur posibil.
Probe despre care exist informaii limitate

Procedurile de evaluare a riscului descrise mai sus se aplic cu succes atunci cnd dispunem
de suciente informaii. Sunt ns situaii cnd informaiile existente sunt insuciente pentru a permite o
evaluare corect a riscului, cum este cazul probelor clinice sau al celor epidemiologice colectate pe teren.
n aceste situaii este prudent s se adopte o atitudine precaut n manipularea probelor.
1. Precauiile standard (3) trebuie respectate ntotdeauna i se vor folosi barierele de protecie
(mnui, halate, protecie ocular), ori de cte ori probele provin de la pacieni.
2. Aplicarea practicilor i procedurilor pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie s reprezinte cerina
minim pentru manipularea probelor.
3. Transportul probelor trebuie s respecte regulile i reglementrile naionale i/sau
internaionale.
Anumite informaii pot de mare ajutor pentru a uura determinarea riscului de manipulare a
acestor probe :
1. Datele medicale privind pacientul
2. Datele epidemiologice (date de morbiditate i mortalitate, calea de transmitere suspectat, alte
date privind investigarea focarului)
3. Informaii privind originea geograc a probei.
n cazul unor episoade epidemice de origine necunoscut, se pot elabora ad hoc ghiduri adecvate,
care s e difuzate/publicate de autoritile naionale competente i/sau OMS prin World Wide Web (aa
cum s-a procedat n anul 2003, n condiiile emergenei sindromului respirator acut sever (SARS)), ghiduri
care s indice modalitatea de transport a probelor i nivelul de biosiguran ce se impune n procesul de
analiz a acestora.
Evaluarea riscului i microorganismele modicate genetic
O discuie detaliat privind evaluarea riscului n cazul microorganismelor modicate genetic
(genetically modied organisms = GMOs) este prezentat n Capitolul 16.
3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2
3. Laboratoarele de baz
Nivelele de Biosiguran 1 i 2
Acest ghid prezint cerinele minime pentru laboratoare clasicate pe toate nivelele de
biosiguran, care manipuleaz microorganisme din Grupurile de risc 1-4. Dei unele precauii pentru
anumite microorganisme din Grupul de risc 1 pot prea mai puin justicate, se recomand aplicarea lor
cu scopul nsuirii i promovrii practicilor microbiologice corecte.
Toate laboratoarele medicale (de sntate public sau de diagnostic clinic n ambulatorii, spitale,
etc) trebuie concepute conform unui Nivel de biosiguran 2 sau peste. Deoarece nici un laborator nu
are un control complet asupra probelor pe care le primete, personalul din laborator poate expus
la microorganisme din grupuri de risc superioare celor anticipate. Aceast posibilitate trebuie luat n
considerare cnd se elaboreaz planurile i politicile de biosiguran. De regul, precauiile standard
trebuie adoptate i aplicate ntotdeauna.
Regulile pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 1 i 2, prezentate n acest manual,
sunt cuprinztoare i detaliate, ele ind fundamentale pentru toate laboratoarele, indiferent de nivelul de
biosiguran.
Recomandrile pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran 3 i nalt securizate Nivel de biosiguran 4, care urmeaz (Capitolele 4 i 5), constituie de fapt modicri i suplimentri ale
acestor reguli, destinate lucrului cu ageni patogeni mai periculoi.
3.1. Codul de practici
Acest cod este o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau la baza
practicilor microbiologice corecte (good microbiological techniques = GMT). n multe laboratoare i
programe naionale n care acestea particip, acest cod se poate utiliza pentru elaborarea de reguli i
proceduri scrise pentru efectuarea n siguran a operaiunilor n laborator.
Fiecare laborator trebuie s adopte un manual de siguran sau de operaiuni care s identice
pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specice pentru eliminarea sau
reducerea la minimum a acestor pericole. GMT sunt fundamentale pentru sigurana activitilor de
laborator. Echipamentul special de laborator este un element suplimentar, care nu va putea ns niciodat
s nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte. Cele mai importante concepte sunt enumerate mai jos.
3.1.1. Accesul
1. Sigla internaional de avertizare i inscripia Pericol biologic (Figura 1) trebuie s e aate pe uile
ncperilor unde sunt manipulate microorganisme aparinnd grupului de risc 2 sau mai mare.
2. Numai persoanele autorizate vor lsate s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
3. Uile laboratorului trebuie s stea nchise.
4. Copiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
5. Accesul n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale.
6. Nu se admite accesul altor animale n afara celor folosite pentru activitile de laborator
Figura 1. Sigla de pericol biologic

3.1.2. Protecia individual a personalului
1. Salopetele de laborator, halatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul ct se lucreaz n
laborator.
2. Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate n timpul tuturor procedurilor care pot implica
contactul direct sau accidental cu snge, cu alte umori sau uide ale organismului, cu alte materiale
potenial infecioase sau cu animale infectate. Dup utilizare, mnuile se scot aseptic i se spal
minile.
3. Personalul trebuie s se spele pe mini dup manipularea materialelor infecioase i a animalelor
infectate i nainte de prsirea zonei de lucru a laboratorului.
4. Ochelarii de protecie, ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie purtate ori
de cte ori este necesar protecia ochilor i a feei de stropi, obiecte impactante i surse articiale de
radiaii ultraviolete.
5. Este interzis purtarea mbrcminii protectoare de laborator n afara laboratorului, de exemplu n
cantine, camere de ociu, biblioteci, toalete, etc.
6. nclmintea decupat n partea din fa (sandale) este improprie purtrii n laborator.
7. Consumul de alimente, buturi, machiajul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise n zonele
de lucru ale laboratorului.
8. Depozitarea de alimente sau buturi oriunde n zona de lucru a laboratorului este interzis.
9. mbrcmintea i nclmintea de protecie ce a fost utilizat n laborator nu trebuie s e depozitat
n aceleai dulapuri cu mbrcmintea i nclmintea de strad.
3.1.3. Procedurile
1. Pipetarea cu gura este strict interzis.
2. Nici un material nu trebuie dus la gur. Etichetele nu trebuie umectate cu limba nainte de lipire.
8
3. Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum formarea de
aerosoli i picturi.
4. Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca substituente ale
dispozitivelor de pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint injecii parenterale sau
aspirarea de uide de la animalele de laborator.
5. Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate
responsabilului laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente.
6. Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate.
7. Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau zic) naintea evacurii lor n reeaua de
canalizare. n funcie de riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lichide.
8. Documentele ce urmeaz a scoase din laborator trebuie s e protejate pe toat perioada ct se a
n laborator, pentru a nu contaminate.
3.1.4. Zonele de lucru ale laboratorului
1. n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu sunt
necesare pentru munca desfurat n laborator.
2. Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup ecare vrsare de materiale potenial periculoase
precum i la sfritul zilei de lucru.
3. Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a ndeprtate
sau curate pentru refolosire.
4. Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale n vigoare.
5. Ferestrele ce pot deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.
3.1.5. Managementul biosiguranei
1. eful de laborator (persoana care poart n mod direct responsabilitatea laboratorului) are obligaia
s asigure elaborarea i adoptarea unui plan de management al biosiguranei i ale unui manual de
siguran i operaiuni.
2. Responsabilul cu activitatea laboratorului (subordonat efului laboratorului) trebuie s asigure
instruirea periodic a personalului laboratorului n domeniul siguranei.
3. Personalul trebuie avertizat asupra pericolelor speciale i are obligaia s citeasc manualul de
siguran i operaiuni i s respecte procedurile i practicile standard. Responsabilul laboratorului
trebuie s se asigure c toi membrii personalului i-au nsuit aceste reguli. O copie a manualului de
siguran i operaiuni trebuie s existe permanent n laborator pentru a putea consultat n orice
moment.
4. Trebuie s existe un program de dezinsecie i deratizare.
5. Trebuie asigurate, n caz de necesitate, pentru toi membrii personalului, o evaluare medical adecvat,
supraveghere i tratament, i trebuie inute evidene medicale adecvate.
3.2. Conceperea structurii i facilitilor laboratorului
n proiectarea laboratorului i stabilirea efecturii anumitor activiti n spaiul acestuia, se va
acorda o atenie deosebit situaiilor despre care se tie c ridic probleme de siguran. Acestea sunt:
1. Formarea de aerosoli
2. Manipularea de volume mari i/sau de concentraii ridicate de microorganisme
3. Supraaglomerarea spaiului de lucru sau acumularea de prea multe echipamente
4. Infestarea cu roztoare i insecte
5. Accesul neautorizat
6. Circuit de lucru: folosirea anumitor probe sau a unor reactivi specici.
9
Exemple de design pentru laboratoare cu Nivel de biosiguran 1 i 2 sunt prezentate n Figura

2 i, respectiv, 3.
Figura 2. Laborator cu nivel de biosiguran 1

(prin amabilitatea CUH2A, Princeton, NJ, USA).
3.2.1. Caracteristici de proiectare:
1. Trebuie asigurat un spaiu sucient pentru desfurarea n siguran a muncii de laborator i pentru
curenie i ntreinere
2. Pereii, tavanele i pavimentele trebuie s e netede, uor de curat, impermeabile la lichide i
rezistente la substanele chimice i dezinfectantele folosite uzual n laborator. Pavimentele nu trebuie
s e alunecoase.
3. Suprafaa meselor de lucru trebuie s e impermeabil la ap, rezistent la dezinfectante, acizi, baze,
solveni organici i la cldur.
4. Iluminatul trebuie s e adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Reexiile i strlucirile
nedorite trebuie evitate.
5. Mobilierul de laborator trebuie s e rezistent. Spaiile deschise ntre i sub mese, hote i echipamente
trebuie s e accesibile pentru curenie.
6. Trebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat, prevenind
astfel aglomerarea acestora pe mesele de lucru i n spaiile libere dintre acestea. Trebuie, de
asemenea, prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe termen lung, localizate corespunztor
n afara zonelor de lucru.
7. Trebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea n siguran a
solvenilor, materialelor radioactive, a gazelor comprimate i licheate.
10
Figura 3. Laborator cu nivel de biosiguran 2

Procedurile care genereaz aerosoli se execut n Hota de siguran biologic. Uile
sunt meninute nchise i marcate cu semne de pericol adecvate. Deeurile potenial
contaminate sunt colectate separat de restul deeurilor.
8. Spaiile pentru pstrarea mbrcminii i nclmintei de strad i a obiectelor personale trebuie
asigurate n afara zonelor de lucru.
9. Spaiile pentru mncat, but i odihn trebuie asigurate n afara zonelor de lucru.
10. Chiuvete cu ap curent pentru splarea minilor trebuie s existe n ecare ncpere a laboratorului,
preferabil lng ua de ieire.
11. Uile trebuie s aib geamuri sau vizoare, s e conforme cu normele de protecie contra incendiilor
i, de preferat, s se nchid singure.
12. Pentru Nivelul de biosiguran 2 trebuie ca un autoclav sau alte mijloace de decontaminare s e
accesibile n imediata apropiere a laboratorului.
13. Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia mpotriva focului, urgenelor electrice, s
prevad duuri de urgen i faciliti pentru splarea ochilor.
14. Trebuie s existe zone sau camere de prim ajutor echipate adecvat i accesibile (vezi Anexa 1).
15. La proiectarea de faciliti noi, trebuie luat n considerare asigurarea de sisteme mecanice de
ventilaie, care s asigure un ux de aer direcionat spre interior, fr recirculare. Dac nu exist
ventilaie mecanic, ferestrele trebuie s se poat deschide i trebuie prevzute cu plase mpotriva
ptrunderii insectelor.
16. Aprovizionarea cu ap curent de bun calitate este esenial. Nu trebuie s existe interconectri ale
surselor de ap ale laboratorului cu cele de aprovizionare cu ap potabil. Un dispozitiv anti-reux
trebuie s protejeze sistemul public de aprovizionare cu ap.
11
17. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru
situaiile de urgen care s faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv este de dorit
pentru susinerea echipamentelor eseniale (incubatoare, hote de biosiguran, congelatoare, etc.) i
pentru ventilarea cutilor cu animale.
18. Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este obligatorie.
19. Laboratoarele i cldirile biobazelor sunt uneori inta vandalizrilor. Trebuie avute n vedere securitatea
zic i mpotriva incendiilor. Uile solide, ferestrele protejate i eliberarea controlat a cheilor de
acces sunt obligatorii. Alte msuri trebuie luate n considerare i aplicate dac este necesar pentru
creterea siguranei.
3.3. Echipamentele de laborator
mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor de siguran contribuie
la reducerea riscului. Acest capitol trateaz principiile de baz legate de echipamentele utilizate n toate
laboratoarele, indiferent de nivelul de biosiguran. Exigenele legate de echipamentul de laborator pentru
nivelele superioare de biosiguran sunt tratate n capitolele respective.
eful de laborator are obligaia ca, dup consultarea cu responsabilul cu biosigurana i colectivul
de siguran, s asigure ca echipamentul adecvat s e procurat i folosit corespunztor. Echipamentul
va ales lund n considerare cteva principii generale, de exemplu:
1. S e conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i materialul
infecios.
2. S e confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i corespunztoare
ca structur.
3. S e confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile neprotejate.
4. S e proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea, curarea,
decontaminarea i testarea n vederea certicrii; ori de cte ori este posibil, se va evita utilizarea
sticlriei i a altor materiale casante.
Este util s se consulte n detaliu documentaia privind performanele i specicaiile de construcie
ale echipamentelor pentru a dobndi convingerea c prezint caracteristicile de siguran necesare (vezi
Capitolele 10 i 11).
3.3.1. Echipamente eseniale pentru asigurarea biosiguranei
1. Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele.
2. Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:
- se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot centrifugate n spaiul deschis
al laboratorului dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt
introduse i descrcate ntr-o hot de biosiguran
- exist risc crescut de infecii aerogene
- se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea, mojararea,
secionarea, agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic, deschiderea containerelor
cu material infecios cu presiune intern diferit de presiunea ambiant, inocularea intranazal a
animalelor i recoltarea de esuturi infectate de la animale i ou, etc.
12
3. Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de aerosoli, n
interiorul hotei de biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer.
4. Tuburi i acoane cu capace prevzute cu let.
5. Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios.
6. Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea celor din sticl.
7. Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode adecvate
nainte de a introduse n uz. Acestea trebuie recerticate la intervale regulate de timp, n acord cu
instruciunile productorului (vezi Capitolul 7).
3.4. Supravegherea strii de sntate a personalului
Autoritatea angajatoare, prin eful de laborator, este responsabil de asigurarea unei supravegheri
adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului. Obiectivul acestei supravegheri este
monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile ce trebuie desfurate pentru
ndeplinirea acestor obiective sunt:
1. Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 2).
2. Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator.
3. Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau persoanele
imunodeprimate, din locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut.
4. Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri ecace.
3.4.1. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme
la Nivelul de biosiguran 1
Experiena activitii n acest tip de laboratoare arat c, n cazul manipulrii microorganismelor la
acest nivel, este improbabil producerea de mbolnviri ale oamenilor sau de afeciuni ale animalelor cu
importan sub raport veterinar. Se recomand, totui, efectuarea unui control medical nainte de angajare
la tot personalul, cu nregistrarea antecedentelor medicale. Se recomand raportarea prompt a strilor
de boal sau a accidentelor de laborator, iar ntreg personalul trebuie s e contient de importana
respectrii practicilor corecte microbiologice.
3.4.2. Reguli pentru supravegherea personalului de laborator care manipuleaz microorganisme
la Nivelul de biosiguran 2
1. Este necesar un control medical nainte de angajare. Ar trebui nregistrate antecedentele personale
medicale i evaluat starea de sntate n relaie cu factorul ocupaional.
2. nregistrrile privind mbolnvirile i absenele ar trebui pstrate de ctre eful laboratorului.
3. Femeile de vrst fertil ar trebui informate cu privire la riscul expunerii ftului prin factor ocupaional
la anumite microorganisme (ex. virusul rubeolic). Precauiile pentru protejarea ftului variaz n funcie
de microorganismele la care pot expuse viitoarele mame.
3.5. Pregtirea personalului
Erorile umane i tehnica decitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de siguran
menite a proteja personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de exigenele impuse
de regulile de siguran, bine informat pentru recunoaterea i stpnirea pericolelor din laborator, este
13
cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i accidentelor. n acest scop, instruirea continu
la locul de munc privind msurile de siguran este esenial. Un program ecace de siguran ncepe
cu conducerea laboratorului, care trebuie s se asigure c practicile i procedurile de siguran sunt
integrate n instruirea de baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de siguran trebuie
s e parte integrant a instruirii noilor salariai din laborator. Salariailor trebuie s li se prezinte codul
de practici i reglementrile locale, inclusiv manualul de siguran i de operaiuni. Se vor lua msuri
care s demonstreze c salariaii le-au citit i neles, spre exemplu, prin semntur. Responsabilii
laboratorului joac un rol cheie n pregtirea personalului n ceea ce privete tehnicile corecte de laborator.
Responsabilul cu biosigurana poate s sprijine procesul de instruire prin punerea la dispoziie a unei
documentaii specice i a altor mijloace ajuttoare (vezi Capitolul 21).
Instruirea personalului ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele sigure n
cazul procedurilor cu risc crescut, cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete n mod curent i
care implic :
1. Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii plcilor cu
agar, pipetrii, etalrii frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi, recoltrii de probe de snge
/ ser, centrifugrii, etc.
2. Riscul de ingerare, cu ocazia manipulrii probelor, frotiurilor i culturilor.
3. Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor.
4. Mucturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor.
5. Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase.
6. Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase.
3.6. Manipularea deeurilor
Se consider deeuri toate materialele care se arunc.
n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i eliminarea
nal a acestora sunt strns legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate necesit ndeprtarea
efectiv din laborator sau distrugerea. Majoritatea sticlriei, instrumentelor i articolelor de mbrcminte
sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce trebuie s funcioneze este c toate materialele
infecioase vor decontaminate, autoclavate sau incinerate n laborator.
Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din
laboratoarele ce lucreaz cu microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale, sunt:
1. Au fost obiectele sau materialele respective ecient decontaminate sau dezinfectate printr-o procedur
autorizat?
2. Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa locului sau
pentru transfer ntr-o alt locaie cu posibiliti de incinerare?
3. Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole adiionale,
biologice sau de alt tip, pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni n
contact cu obiectele eliminate n afara perimetrului respectiv?
3.6.1. Decontaminarea
Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de decontaminare.
Materialele care urmeaz s e decontaminate i eliminate vor puse n containere adecvate (ex. saci
14
din plastic autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavare
i/sau incinerare). Pot luate n consideraie i metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau
omoar microorganismele (pentru mai multe detalii vezi Capitolul 14).
3.6.2. Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor
Trebuie adoptat un sistem de identicare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor
respective. Vor obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale n domeniu. Categoriile
care se includ sunt urmtoarele:
1. Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot refolosite, reciclate sau eliminate ca deeuri
generale sau menajere
2. Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite i cioburi
de sticl); acestea vor ntotdeauna colectate n containere rezistente la nepare-tiere, prevzute
cu capace i vor tratate ca infecioase.
3. Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau
reciclare.
4. Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii.
5. Materialul contaminat destinat incinerrii directe.
Obiectele ascuite
Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din seringile de
unic folosin. ntregul ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic
folosin, folosite separat sau cu ace, trebuie plasate n containere i incinerate, cu autoclavare prealabil
dac este necesar.
Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s e rezistente la neparetiere i nu trebuie umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste containere trebuie
plasate n containere pentru deeuri infecioase i incinerate, cu autoclavare prealabil dac practica
laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul
nconjurtor.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii
Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios) destinat
autoclavrii i refolosirii. Orice curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau
dezinfecie.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii
n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate materialele
contaminate (potenial infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de exemplu saci de plastic
autoclavabil, colorai conform unui cod de culori, nainte de a eliminate. Dup autoclavare, materialul poate
plasat n containere de transfer ctre incinerator. Dac este posibil, materialele rezultate din activitile de
asisten medical nu trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de depozitare a deeurilor, nici dup
decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea se poate omite:
deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu culori corespunztoare
unui cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte
scurgeri i s aib capace etane.
15
Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la ecare punct de lucru. Cnd
se folosete un dezinfectant, deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu acesta (ex.
neprotejate de bule de aer) un interval de timp corespunztor, n conformitate cu instruciunile de folosire
a dezinfectantului utilizat (vezi Capitolul 14). Containerele de colectare i transport vor decontaminate
i splate nainte de refolosire.
Incinerarea deeurilor contaminate trebuie s se fac n conformitate cu prevederile autoritilor
de sntate public i de protecie a mediului, ca i cu normele de biosiguran din laborator (vezi
seciunea despre incinerare n Capitolul 14).
3.7. Sigurana chimic, mpotriva incendiilor, electric, mpotriva radiaiilor i a echipamentelor
O bre/discontinuitate n sistemul de securizare al microorganismelor patogene poate rezultatul
indirect al unor accidente chimice, incendii, accidente electrice sau legate de radiaii.
Este esenial meninerea unor standarde ridicate de siguran n aceste domenii, n orice
laborator microbiologic. Reguli i regulamente de funcionare pentru toate aceste domenii trebuie elaborate
de autoritatea naional sau local competent, al crei sprijin trebuie solicitat n caz de necesitate.
Pericolele chimice, electrice, de incendiu i cele radioactive sunt tratate mai detaliat n Capitolele 15-17.
16
4. LABORATORUL SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 3
4. Laboratorul securizat
Nivelul de Biosiguran 3
Laboratorul securizat - Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu

microorganisme din Grupa de risc 3, i cu volume sau concentraii mari de microorganisme din Grupa de
risc 2 care implic un risc de diseminare sub forma de aerosoli. Securizarea cu Nivel de biosiguran 3
necesit ntrirea programelor operaionale i de siguran peste cele descrise pentru laboratoarele de
baz - Nivel de biosiguran 1 i 2 (vezi Capitolul 3).
Regulile descrise n acest capitol sunt prezentate sub forma de suplimentri la cele pentru
laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 si 2, care trebuie prin urmare aplicate naintea celor
specice pentru laboratoarele securizate - Nivel de biosiguran 3. Principalele adugiri i modicri se
refer la:
1. Codul de practici
2. Designul (concepia structural i funcional) i facilitile laboratorului
3. Supravegherea strii de sntate a personalului.
Laboratoarele din aceast categorie trebuie nregistrate la autoritile naionale i regionale din
domeniul sanitar.
Se aplic codul de practici pentru laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 si 2, excepie fcnd
situaiile unde apar modicri dup cum urmeaz :
1. Sigla internaional de avertizare i inscripia Pericol biologic aate pe uile de acces, vor trebui
s e nsoite de menionarea nivelului de biosiguran, de numele responsabilului din laborator
ce controleaz accesul, i s precizeze condiiile de intrare n acest perimetru (ex. imunizarea
prealabil).
2. mbrcmintea de protecie de laborator trebuie s e de tipul : halate care se nchid la spate sau
care se ncheie prin nfurare, costume sau salopete, bonete, iar acolo unde este necesar huse
protectoare pentru nclminte sau nclminte special. Nu sunt acceptate halatele de laborator
cu nasturi n fa sau cu mneci scurte. mbrcmintea de laborator nu trebuie purtat n afara
acestuia i trebuie decontaminat nainte de splare. Atunci cnd se lucreaz cu anumii ageni (ex.
ageni zoonotici, patogeni vegetali), este obligatoriu s se nlocuiasc mbrcmintea de strad cu
mbrcminte de laborator, destinat exclusiv acestui scop.
3. Manipularea deschis a tuturor materialelor potenial infecioase trebuie s se execute n hote de
siguran biologic sau n orice alt incint de izolare primar (vezi Capitolul 10).
4. Echipamentul de protecie respiratorie este necesar pentru anumite proceduri de laborator sau n
cazul lucrului cu animale infectate cu anumii patogeni (vezi Capitolul 11).
17
4.2. Designul i facilitile laboratorului

Se aplic design-ul i facilitile laboratorului de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2, cu urmtoarele
modicri :
1. Laboratorul trebuie s e separat de zonele cu trac nerestricionat din cldire. O separare suplimentar
se poate realiza prin plasarea laboratorului e la captul nchis al unui coridor e prin construirea unei
separaii i a unei ui, sau accesul printr-o anticamer (ex. intrarea printr-o u dubl sau printr-un
laborator de baz - Nivel de biosiguran 2), delimitnd o zon special proiectat pentru meninerea unei
diferene de presiune ntre spaiul laboratorului i spaiile adiacente acestuia. Anticamera trebuie s aib
faciliti de separare a mbrcminii curate de cea contaminat i, dac este necesar, un du.
2. Uile anticamerei trebuie s se blocheze alternativ (recomandabil automat), astfel nct o singur u
s e deschis la un moment dat. Se poate asigura o ieire de siguran pentru situaiile de urgen,
reprezentat de un panou de sticl ce se poate sparge la nevoie.
3. Suprafaa pereilor, a pardoselilor i tavanelor trebuie s e rezistent la ap i uor de curat.
Deschiderile aprute n aceste suprafee (ex. de trecerea evilor instalaiilor), trebuie etaneizate pentru
a facilita decontaminarea ncperilor respective.
4. Camera laboratorului trebuie s poat nchis etan pentru decontaminare. Sistemele de ventilaie
trebuie construite astfel nct s permit decontaminarea gazoas.
5. Ferestrele trebuie s e nchise etan i incasabile.
6. Lng ecare u de ieire trebuie prevzut o chiuvet pentru splarea minilor, a crei surs de ap
s nu e acionat cu mna.
7. Trebuie s existe un sistem de ventilaie care s menin un ux de aer direcionat ctre interiorul
laboratorului. Trebuie s e instalat un sistem de monitorizare, cu sistem de atenionare vizual cu sau
fr alarm, astfel nct personalul s se poat asigura c se menine direcionarea corect a uxului de
aer spre interiorul laboratorului.
8. Sistemul de ventilaie al cldirii trebuie construit astfel nct aerul din laboratorul securizat - Nivel de
biosiguran 3 s nu e recirculat spre alte zone ale cldirii. Aerul poate ltrat prin ltre HEPA (High
Efciency Particulate Air), recondiionat i recirculat n interiorul laboratorului. Cnd aerul din laborator
(altul dect cel din hotele de biosiguran) este eliminat n afara cldirii, acesta trebuie evacuat la distan
de cldiri locuite sau de zonele de ventilaie. n funcie de agentul biologic manipulat, aerul poate
eliminat prin ltre HEPA. Se recomand un sistem de control al nclzirii, ventilaiei i aerului condiionat
(HVAC = heating, ventilation and air-conditioning), cu scopul prevenirii instalrii unei presiuni pozitive n
laborator. Se recomand, de asemenea, instalaii de alarm sonor sau vizual care s atrag atenia
personalul asupra defectrii sistemului HVAC.
9. Toate ltrele HEPA trebuie instalate astfel nct s permit decontaminarea gazoas i vericarea
acestora.
10. Hotele de siguran biologic trebuie amplasate la distan de zona de circulaie i n afara zonei de
intersectare a curenilor de aer formai ntre u i sistemul de ventilaie (vezi Capitolul 10).
11. Evacuarea aerului din hotele de biosiguran clasa I sau II (vezi Capitolul 10), trecut prin ltre HEPA,
trebuie fcut astfel nct s se evite interferena cu uxul aerian al hotei sau al sistemului de ventilaie
a cldirii.
12. Un autoclav pentru decontaminarea deeurilor contaminate trebuie s e disponibil n laboratorul
securizat. Dac pentru decontaminare i eliminare deeurile infecioase trebuie transportate n afara
laboratorului securizat, ele vor transportate n containere sigilate, incasabile i etane la scurgeri, n
conformitate cu regulamentele naionale sau internaionale, dupa caz.
13. Sistemul de aprovizionare cu ap trebuie prevzut cu dispozitive anti-reux.
14. Design-ul facilitilor i procedurile operaionale pentru laboratoarele securizate Nivel de biosiguran
3 trebuie documentate (s constituie obiectul unor documente).
18
4. LABORATORUL SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 3
Un exemplu de design pentru laboratorul de Nivel de biosiguran 3 este prezentat n Figura 4.
Figura 4. Laborator cu Nivel de biosiguran 3.

Laboratorul este separat de tracul general i intrarea se face printr-o anticamer
(intrare cu u dubl sau prin laboratorul cu nivel de biosiguran 2) sau printr-un sas.
Un autoclav pentru decontaminarea deeurilor naintea eliminrii este disponibil n
interiorul laboratorului. O chiuvet a crei surs de ap s nu e acionat cu mna
este disponibil. Fluxul de aer este direcionat spre interiorul laboratorului i toate
activitile cu materiale infecioase se desfoar n hot de siguran biologic.
Dotarea cu echipamente a laboratorului
Principiile pentru selectarea echipamentelor de laborator, inclusiv pentru hotele de siguran
biologic (vezi Capitolul 10), sunt aceleai ca pentru laboratoarele de baz Nivel de biosiguran 2. n
orice situaie, n cazul Nivelului de biosiguran 3, manipularea tuturor materialelor potenial infecioase
trebuie s se fac ntr-o hot de biosiguran sau n alt incint de izolare primar.
O atenie special trebuie s se acorde anumitor echipamente, precum centrifuga, care necesit
accesorii adiionale, de exemplu cuve sau rotoare etane. Unele centrifugi sau alte tipuri de echipamente,
cum ar instrumentele folosite la separarea celulelor infectate, pot necesita n plus, pentru o securizare
ecace, o ventilaie proprie de evacuare cu ltru HEPA.
4.3. Supravegherea strii de sntate a personalului
Obiectivul programelor de sntate i supraveghere a strii de sntate a personalului pentru
laboratoarele de baz - Nivel de biosiguran 1 i 2 se aplic i n cazul laboratoarelor securizate - Nivel
de biosiguran 3 i 4, cu urmtoarele modicri :
19
1. Examenul medical al ntregului personal care lucreaz n laboratorul securizat - Nivel de biosiguran
3 este obligatoriu. Acesta include nregistrarea detaliat a antecedentelor medicale i un examen
medical intit asupra aspectelor legate de factorul ocupaional.
2. O prob de ser se recolteaz la angajare i se pstreaz ca referin pentru comparaii ulterioare.
3. Dup evaluarea clinic corespunztoare, salariatului examinat i se va nmna un card medical
de noticare (ex. aa cum apare n Figura 5) care dovedete c acesta lucreaz ntr-un laborator
securizat - Nivel de biosiguran 3. Cardul va cuprinde i o fotograe a posesorului cardului, va
avea o mrime care s-i permit a purtat ntr-un portmoneu i se va aa n permanen n posesia
acestuia.
A. Faa anterioar a cardului

CARD MEDICAL DE NOTIFICARE
NUME_______________________________
____________________________________
(Fotograa posesorului)
.....................................
PENTRU ANGAJAT
Pstrai acest card asupra Dvs. In caz de boal febril neexplicat, prezentai acest card medicului Dvs. i anuntai pe unul
dintre cei de mai jos, n ordine.
_______________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
_______________________________________________________________________
Dr.
Tel (serviciu):
Tel (acas)
B. Faa posterioar a cardului

PENTRU MEDIC
Posesorul acestui card lucreaz la: _____________________________________________ ntr-o zon unde se
manipuleaz virusuri patogene, rickettsii, bacterii, protozoare sau helmini. n eventualitatea unei boli febrile inexplicabile,
v rugm contactai angajatorul pentru informaii asupra agenilor patogeni la care acest angajat ar putut expus.
Denumirea laboratorului: ____________________________________________________
Adresa: __________________________________________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Tel: _____________________________________________________________________
Figura 5. Format recomandat pentru cardul medical de noticare
20
5. LABORATORUL NALT SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 4
5. Laboratorul nalt securizat

Nivelul de Biosiguran 4
Laboratorul nalt securizat Nivel de biosiguran 4 este destinat lucrului cu microorganisme

din Grupa de risc 4. nainte ca un asemenea laborator s e construit i pus n funciune, sunt necesare
consultri cu instituiile care au experiena operrii cu laboratoare similare. Aceste laboratoare trebuie s
e sub controlul autoritilor naionale sau a altor autoriti sanitare corespunztoare. Pentru informaii
suplimentare, instituiile ce i propun dezvoltarea unui laborator cu Nivel de biosiguran 4, ar trebui s
contacteze Programul O.M.S. de Biosiguran1.
Se aplic codul de practici al Nivelului de biosiguran 3, cu urmtoarele modicri:
1. Se aplic regula lucrului n doi, conform creia se interzice desfurarea activitii de ctre o
singur persoan n incinta laboratorului nalt securizat.
2. Este necesar schimbarea complet a mbrcminii i nclmintei nainte de intrarea n i dup
ieirea din laborator.
3. Personalul trebuie instruit pentru aplicarea procedurilor de scoatere de urgen din laborator a
celor ce au suferit accidente sau sunt bolnavi.
4. Trebuie asigurate mijloace de comunicare de rutin i pentru situaii de urgen, ntre personalul
ce lucreaz n laboratorul nalt securizat Nivel de biosiguran 4 i personalul ajuttor, aat n
afara laboratorului.
5.2. Design-ul i facilitile laboratorului
Caracteristicile laboratorului securizat - Nivel de biosiguran 3 se aplic i n cazul laboratorului
nalt securizat - Nivel de biosiguran 4, cu urmtoarele adugiri:
1. Securizare primar. Trebuie s existe un sistem ecient de securizare primar reprezentat de unul
sau o combinaie a urmtoarelor elemente:
- Laboratorul cu hot de biosiguran clasa III. Este necesar trecerea prin minim dou ui
nainte de a intra n camera ce conine hota (hotele) de siguran biologic clasa III (camera
cu hote). n aceast conguraie a laboratorului, hota de siguran biologic clasa III asigur
securizarea primar. Este de asemenea necesar existena unui du pentru personal,
cu camere de schimbare a mbrcminii/nclmintei la intrare i ieire. Materialele i
consumabilele ce nu sunt aduse n camera cu hote prin zona de trecere vor introduse
printr-un autoclav cu dou ui sau printr-o camer cu fumigaie. Odat ce ua exterioar
a fost nchis etan, personalul din laborator poate deschide ua interioar pentru a trece
materialele. Uile autoclavului sau ale camerei de fumigaie sunt prevzute cu un sistem de
blocare alternativ astfel nct ua exterioar s nu se poat deschide dect dac autoclavul
a realizat un ciclu de sterilizare sau camera de fumigaie a realizat un ciclu de decontaminare
(vezi Capitolul 10).
1
Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue Appia,
1211 Geneva 27, Switzerland (http://www.who.int/csr/).
21
Laboratorul cu izolare n costum protector. Laboratorul cu izolare n costum protector cu

sistem autonom de respiraie (tip scafandru), difer semnicativ ca design i faciliti de
laboratorul de Nivel de Biosiguran 4 dotat cu hote de siguran biologic clasa III. Camerele
laboratorului cu izolare n costum protector sunt astfel dispuse nct s direcioneze trecerea
personalului prin zona de dezechipare-echipare i decontaminare, nainte de a intra n spaiul
unde se manipuleaz material infecios.
Accesul n laboratorul cu izolare n costum protector se face printr-un sas cu ui etane
interblocante.
Costumul de protecie tip scafandru este alctuit dintr-o singur pies, este presurizat
pozitiv i alimentat cu aer printr-un ltru HEPA. Alimentarea cu aer a costumului se realizeaz
printr-un sistem prevzut cu dou surse independente de aer, una ind destinat cazurilor
de urgen.
Trebuie s existe un du special pentru decontaminarea costumului de protecie, care s e
folosit de personalul ce prsete zona securizat a laboratorului.
De asemenea trebuie s existe un du separat pentru personal, intercalat ntre camera
(box) de dezbrcare de hainele purtate n laborator i cea de mbrcare cu hainele purtate
n spaiile din afara laboratorului.
Trebuie s se asigure o modalitate de avertizare a personalului ce lucreaz n laboratorul cu
izolare n costum protector pentru situaiile n care apar defeciuni n sistemul mecanic sau
de alimentare cu aer (vezi Capitolul 10).
2. Accesul controlat. Laboratorul nalt securizat Nivel de Biosiguran 4 trebuie s e amplasat ntr-o
cldire separat sau ntr-o zon clar delimitat dintr-o cldire cu acces controlat. Intrarea i ieirea
personalului i a materialelor trebuie s se fac printr-un sas ce se nchide etan sau printr-un sistem
special de acces. La intrare, personalul trebuie s i schimbe complet mbrcmintea, iar nainte de
ieire trebuie s fac un du i abia dup aceea va mbrca hainele de strad.
3. Sistemul de control al aerului. n toate aceste incinte trebuie s se menin o presiune negativ. Att
aerul introdus ct i cel evacuat trebuie ltrat printr-un ltru HEPA. Exist diferene semnicative ntre
sistemele de ventilaie ale laboratoarelor cu hote de biosiguran clasa III i cele ale laboratoarelor cu
izolare n costume protectoare:
- Laboratorul cu hot de biosiguran clasa III. Alimentarea cu aer a hotei de siguran biologic
clasa III trebuie s se fac cu aerul din camer dup ce acesta a fost ltrat n prealabil
prin ltrul HEPA montat pe hot sau furnizat direct prin sistemul de asigurare cu aer. Aerul
evacuat din hota de siguran biologic clasa III trebuie ltrat prin dou ltre HEPA nainte
de a eliminat n afara laboratorului. Presiunea aerului din interiorul hotei va ntotdeauna
inferioar celei din restul laboratorului. Laboratorul cu hote trebuie dotat cu un sistem de
ventilaie propriu care s nu recircule aerul.
- Laboratorul cu izolare n costum de protecie. Sunt necesare sisteme proprii de alimentare
cu aer i evacuare a acestuia. Acestea sunt astfel echilibrate nct s genereze n spaiul
laboratorului o circulaie direcionat a aerului, dinspre zona cu cel mai mic spre cea cu cel
mai mare pericol potenial. Sistemul de evacuare a aerului trebuie s asigure meninerea
unei presiuni negative permanente n toate incintele. Se monitorizeaz presiunile difereniale
din interiorul laboratorului cu izolare n costum de protecie i dintre acesta i incintele
adiacente. Se monitorizeaz circulaia aerului n componentele sistemului de ventilaie.
De asemenea, va trebui s funcioneze un sistem de control pentru prevenirea creterii
presiunii n laborator. n zona unde este necesar purtarea costumului, n zona duurilor de
decontaminare, n sas-uri sau n camerele de decontaminare, aerul trebuie ltrat prin ltre
HEPA. Aerul din laborator va ltrat printr-o serie de dou ltre HEPA nainte de a eliminat
22
5. LABORATORUL NALT SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 4
n spaiul din afara laboratorului. Alternativ, dup dubla ltrare prin ltre HEPA, aerul evacuat
poate recirculat, dar numai n interiorul laboratorului. Aerul evacuat din laboratorul de Nivel
de Biosiguran 4 cu izolare n costum protector nu va sub nici un motiv recirculat n alte
zone de lucru din afara laboratorului. Dac se opteaz pentru recircularea aerului n laborator
se impun precauii extreme. Se iau n considerare particularitile cercetrii desfurate,
caracteristicile echipamentului, ale substanelor chimice i ale altor materiale folosite n acest
tip de laborator, precum i speciile de animale folosite n timpul cercetrii.
Toate ltrele HEPA trebuie s e testate i certicate anual. Locaurile ltrelor HEPA sunt astfel
concepute nct s permit decontaminarea in situ a ltrelor nainte de ndeprtarea lor. Ca
alternativ, ltrele pot ndeprtate n containere sigilate, impermeabile pentru circulaia aerului,
urmnd ca ulterior s e decontaminate i/sau distruse prin incinerare.
4. Decontaminarea euenilor. Toi euenii din zona de utilizare a costumului protector, din camera i
duul de decontaminare sau din hota de biosiguran clasa III trebuie s e decontaminai nainte de
eliminarea nal. Metoda preferat este tratarea termic a acestora. Produsele reziduale pot necesita
o corectare a pH-ului la neutru nainte de eliminare. Apa folosit pentru duul personalului i toalet
poate evacuat direct n sistemul de canalizare, fr tratare prealabil.
5. Sterilizarea deeurilor i materialelor. Un autoclav cu dou ui trebuie s e accesibil din interiorul
laboratorului. Trebuie s existe i alte metode de decontaminare pentru echipamentul i produsele ce
nu suport sterilizare umed.
6. Ci de acces prevzute cu sas-uri trebuie asigurate de asemenea pentru probe, materiale i
animale.
7. Trebuie s existe circuite electrice special destinate de alimentare din reea precum i o surs
alternativ (generator) de energie electric.
8. Trebuie asigurate sisteme de canalizare securizate.
Avnd n vedere complexitatea ridicat din punct de vedere al proiectrii, realizrii construciei
i instalaiilor specice facilitilor pentru Nivelul de biosiguran 4, lucrarea de fa nu cuprinde o
reprezentare schematic a acesteia.
Datorit complexitii ridicate a activitii din laboratorul cu Nivel de biosiguran 4, trebuie elaborat
i testat prin exerciii de instruire un ghid detaliat de lucru. Suplimentar trebuie s e conceput un program
de aciune pentru situaiile de urgen (vezi Capitolul 13). Pentru pregtirea acestui program, trebuie
stabilite cooperri active cu autoritile naionale i locale de sntate. Vor cooptate alte servicii de
urgen, de exemplu pompieri, poliie i spitale special desemnate pentru primirea eventualelor urgene.
23
24
6. BIOBAZELE
6. Biobazele
Personalul laboratoarelor care folosesc animale n scopuri experimentale i de diagnostic are

obligaia legal i moral de a evita producerea unor dureri sau suferine inutile animalelor. Animalelor
trebuie s le e asigurat un adpost igienic i confortabil i s li se ofere sucient hran de calitate i
ap. La sfritul experimentului, animalele trebuie s e tratate cu omenie.
Din motive de biosiguran, biobaza trebuie s e o unitate separat i independent. Dac
biobaza funcioneaz n aceeai cldire cu laboratorul, aceasta trebuie s e izolat de zona n care
publicul are acces nerestricionat. De asemenea, biobaza trebuie s dispun de mijloace proprii i condiii
adecvate pentru decontaminare i deparazitare.
n funcie de grupul de risc al microorganismelor manipulate, Biobazele pot clasicate n 4 niveluri
de biosiguran (Tabelul 4).
Tabel 4. Nivelele de securizare ale biobazelor - rezumat al practicilor i echipamentelor de
biosiguran
Grupul de risc
(microorganisme)
Nivel de
securizare
n biobaza
Practici i echipamente de siguran

-
acces limitat
mbrcminte de protecie i mnui
Practicile de la nivelul 1 plus :

- semne de avertizare asupra pericolului
- HSB clasa I sau II pentru activitile care
genereaz aerosoli
- decontaminarea reziduurilor i cutilor nainte de
splare
Practicile de la nivelul 2, plus :

- acces controlat
- HSB i haine de protecie speciale pentru toate
activitile
Practicile de la nivelul 3 plus :

- acces strict limitat
- schimbarea hainelor nainte de intrare
- HSB clasa III sau costume de protecie cu
presiune pozitiv
- du la ieire
- decontaminarea tuturor deeurilor naintea
evacurii
HSB (BSC, Biological Safety Cabinet): Hot de siguran biologic

n funcie de evaluarea riscului i de grupul de risc n care se ncadreaz agenii microbieni cu
care se lucreaz, biobazele, ca i laboratoarele, pot clasicate n patru categorii: Biobaza cu nivel 1, 2,
3 i 4 de biosiguran.
25
n aceast clasicare, factorii care in de agenii microbieni investigai / utilizai i care trebuie
luai n considerare sunt:
1.
2.
3.
4.
Calea normal de transmitere

Volumele i concentraiile de ageni microbieni utilizate
Calea de inoculare
Dac i pe ce cale sunt excretai aceti ageni
Factorii care in de animalele utilizate n laborator i care trebuie luai n considerare sunt:
1.
2.
3.
4.
Comportamentul natural al animalelor (de exemplu: agresivitatea, tendina de a muca i zgria).

Ecto- i endoparaziii naturali ai animalelor
Infeciile zoonotice la care sunt susceptibile
Diseminarea posibil de alergeni.
Ca i n cazul laboratoarelor, cerinele de proiectare, construcie, echipament i precauii cresc n
exigen n funcie de Nivelul de biosiguran din biobaz. Acestea sunt descrise detaliat mai jos i prezentate
rezumativ n Tabelul 4. Aceste cerine au un caracter aditiv, astfel nct ecare nivel superior incorporeaz
i cerinele nivelurilor inferioare.
6.1. Biobaza cu nivel de biosiguran 1
Este destinat gzduirii i ntreinerii majoritii animalelor dup carantinare (cu excepia primatelor,
n privina crora trebuie consultat legislaia naional n materie) i a celor inoculate deliberat cu ageni
microbieni din grupul de risc 1.
1. Se impune ca activitatea s rspund cerinelor unor bune tehnici de microbiologie (GMT, Good
Microbiological Techniques).
2. Responsabilul biobazei trebuie s stabileasc regulile, procedurile i protocoalele pentru toate
operaiunile i pentru accesul la vivarium.
3. Trebuie instituit un program adecvat de supraveghere medical a personalului.
4. Trebuie redactat, aprobat i aplicat un manual de biosiguran.
Este destinat lucrului cu animale inoculate cu microorganisme din grupul de risc 2. Se aplic
urmtoarele precauii de siguran:
1. Trebuie s e ndeplinite toate cerinele de la nivelul de biosiguran 1.
2. Semnele de avertizare asupra pericolului biologic trebuie s e aate pe ui i alte locuri potrivite (cuti,
recipiente, etc) cu precizarea agenilor infecioi folosii.
3. Biobaza trebuie astfel conceput nct s e uor de curit i ntreinut.
4. Uile trebuie s se deschid spre interior i s se nchid singure.
5. nclzirea, ventilarea i iluminatul trebuie s e corespunztoare.
6. Dac se instaleaz ventilaie mecanic, aerul trebuie s circule spre interior. Aerul evacuat trebuie scos
n exterior i nu trebuie s e recirculat n nici o parte a cldirii.
7. Accesul va permis numai persoanelor autorizate.
8. n biobaz trebuie admise numai animalele destinate uzului experimental.
9. Trebuie s existe un program de supraveghere i combatere a insectelor i roztoarelor.
10. Dac exist ferestre, acestea trebuie s e asigurate, incasabile, iar dac se deschid, trebuie s e
prevzute cu plase de protecie mpotriva artropodelor.
26
6. BIOBAZELE
11. Dup lucru, suprafeele de lucru trebuie decontaminate cu dezinfectante ecace (vezi Capitolul 14).
12. Vor prevzute cu HSB (clasele I i II) sau/i cuti izolatoare cu circuit separat de alimentare cu aer i
evacuare prin ltre HEPA pentru activitile potenial generatoare de aerosoli.
13. Trebuie s existe un autoclav n biobaz sau n imediata ei apropiere.
14. Materialele din aternutul animalelor trebuie s e ndeprtate n aa fel nct s se reduc la minimum
producerea de aerosoli i praf.
15. Toate dejectele, deeurile i aternutul animalelor trebuie decontaminate nainte de evacuare.
16. Folosirea instrumentelor neptoare/tietoare trebuie s e restricionat la minimum posibil. Obiectele
ascuite trebuie colectate n containere rezistente, prevzute cu capace, etichetate i tratate ca
infecioase.
17. Materialul destinat autoclavrii sau incinerrii trebuie s e transportat asigurat n containere nchise.
18. Dup folosire, cutile animalelor trebuie decontaminate.
19. Cadavrele animalelor trebuie incinerate.
20. n incinta biobazei trebuie purtate echipamente de protecie care nu vor purtate n afara acesteia. Se
vor folosi mnui de protecie corespunztoare.
21. Trebuie asigurate condiii pentru splarea minilor. Personalul trebuie s se spele pe mini nainte de
prsirea biobazei.
22. Toate rnirile, orict de mici, trebuie raportate i nregistrate.
23. Se interzice n incinta biobazei: consumul de alimente i buturi, fumatul i aplicarea de cosmetice.
24. Tot personalul trebuie instruit n mod corespunztor.
Acest nivel de biosiguran se impune atunci cnd se lucreaz cu animale inoculate deliberat cu ageni
din grupul de risc 3 i/sau atunci cnd o evaluare a riscului impune acest lucru. Toate sistemele, practicile i
procedurile trebuie s e analizate i recerticate anual. Se aplic urmtoarele precauii de biosiguran:
1. Trebuie s e ndeplinite toate cerinele de la nivelurile de biosiguran 1 i 2 .
2. Accesul n biobaz trebuie s e controlat cu strictee.
3. Biobaza trebuie separat de alte zone ale laboratorului sau ale adpostului pentru animale printr-o
camer cu dou ui (anticamer).
4. n anticamer trebuie s existe condiii pentru splarea minilor.
5. n anticamer trebuie s existe, de asemenea, duuri.
6. Trebuie s se prevad un sistem de ventilare mecanic pentru a asigura un ux continuu de aer prin
toate camerele. Aerul evacuat trebuie s treac prin ltre HEPA nainte de a eliberat n atmosfer i nu
va recirculat. Sistemul trebuie proiectat i realizat astfel nct s previn inversri ale uxului de aer i
presurizri pozitive n oricare parte a biobazei.
7. Trebuie s existe un autoclav accesibil din zona securizat a biobazei. Deeurile contaminate microbian
trebuie autoclavate nainte de transferarea lor n alte zone ale biobazei.
8. Biobaza trebuie dotat cu un incinerator propriu permanent accesibil sau trebuie stabilite mpreun cu
autoritile modaliti alternative de evacuare a animalelor moarte n vederea incinerrii.
9. Animalele infectate cu microorganisme din grupul de risc 3 trebuie adpostite n cuti plasate n izolatoare
sau n camere cu guri de ventilaie plasate n spatele cutilor.
10. Materialele utilizate pentru aternutul animalelor ar trebui, pe ct este posibil, s nu genereze praf.
11. mbrcmintea de protecie purtat n incinta biobazei trebuie decontaminat nainte de splare.
12. Ferestrele trebuie s e nchise etan i rezistente la spargere.
13. Personalul care lucreaz n biobaz trebuie s e imunizat corespunztor.
27

n mod resc, activitatea n aceste biobaze este legat de cea din laboratoarele nalt securizate
de nivel 4, iar reglementrile naionale i regulamentele locale trebuie armonizate i aplicate n ambele
locaii unitar. Dac activitile trebuie s se desfoare n laboratoare cu izolare n costume speciale
tip scafandru vor elaborate i aplicate practici i proceduri adiionale care vor suplimenta prevederile
descrise n Capitolul 5.
1. Trebuie ndeplinite toate cerinele pentru biobazele cu nivelurile de biosiguran 1, 2 i 3.
2. Accesul trebuie s e strict controlat; numai personalul desemnat de eful biobazei poate avea
acces.
3. Nu trebuie permis activitatea individual; trebuie aplicat regula accesului i lucrului n doi.
4. Personalul trebuie s e foarte bine instruit n domeniul microbiologic i s e avizat n privina pericolelor
implicate de munca sa i a precauiilor necesare.
5. Sectoarele destinate adpostirii animalelor infectate cu microorganisme din grupul de risc 4 trebuie
s respecte aceleai criterii de securizare descrise i aplicate pentru laboratoarele nalt securizate, nivel
de biosiguran 4.
6. Intrarea din sectorul curat n aria cu acces restricionat ale biobazei se va face printr-o anticamer-sas
dotat cu faciliti de schimbare a vestimentaiei i de du.
7. La nceputul zilei de lucru, personalul biobazei va schimba hainele de strad cu echipament special
de protecie. La plecare, echipamentul de lucru va dezbrcat i autoclavat. Vestimentaia de strad va
reluat dup efectuarea prealabil a unui du.
8. Biobaza cu nivel 4 de biosiguran trebuie ventilat printr-un sistem de exhaustare prevzut cu ltre
HEPA care asigur o presiune negativ n aria / incintele de risc (uxul de aer este direcionat centripet,
ctre ariile de risc maxim).
9. Sistemul de ventilaie trebuie proiectat astfel nct s previn inversrile de sens ale uxului de aer i
presurizarea pozitiv n ariile de risc.
10. Schimbul de materiale dintre aria cu risc i restul facilitii se va face printr-un autoclav cu dublu acces
(transmural) avnd extremitatea curat ntr-o camer din afara ariei restricionate.
11. Pentru transferul materialelor neautoclavabile, va prevzut o modalitate de acces cu sas avnd
extremitatea curat ntr-o camer din afara ariei restricionate. Materialele contaminate nu vor prsi aria
de risc dect dup un tratament adecvat de inactivare / sterilizare.
12. Toate manipulrile de animale infectate cu microorganisme din grupul de risc 4 se vor efectua n condiiile
prevzute pentru laboratorul de nalt securizare - cu nivel de biosiguran 4.
13. Toate animalele vor adpostite n izolatoare.
14. Materialele provenite din aternutul animalelor i dejectele vor autoclavate nainte de a evacuate
din biobaz.
15. Personalul biobazei va supravegheat medical.
6.5. Nevertebratele
Ca i n cazul vertebratelor, nivelul de biosiguran al biobazei va determinat de grupul de risc
al agenilor investigai sau de rezultatul unei evaluri a riscului.
Nevertebratele folosite n scopuri experimentale n laboratoare sunt de obicei rezervoare sau
vectori de patogeni, sau, aa cum se ntmpl n investigaiile ecologice i ambientale, pot infectate
ntmpltor cu patogeni ingerai odat cu hrana.
28
6. BIOBAZELE
n cazul unor artropode, n special al insectelor zburtoare sunt necesare urmtoarele precauii
suplimentare.
1. Trebuie s se asigure ncperi separate pentru nevertebratele infectate i pentru cele care nu sunt
infectate.
2. ncperile trebuie s poat nchise etan atunci cnd se face dezinfecia prin fumigaie.
3. Trebuie s existe la ndemn spray-uri cu insecticide.
4. Trebuie s e asigurate instalaii de rcire, pentru a reduce, acolo unde este necesar, activitatea
nevertebratelor.
5. Accesul n complex trebuie s se fac printr-o anticamer avnd uile prevzute cu capcane pentru
insecte i ecrane de protecie mpotriva artropodelor.
6. Toate conductele de evacuare din sistemul de ventilaie i ferestrele care pot deschise trebuie s e
prevzute cu ecrane de protecie contra artropodelor.
7. Sifoanele de la chiuvete i cele din pardoseal nu trebuie lsate niciodat s se usuce asigurnd
obarier umed pentru a preveni evadarea nevertebratelor.
8. Toate deeurile trebuie decontaminate prin autoclavare, deoarece unele nevertebrate nu sunt omorte
de dezinfectani.
9. Trebuie s e meninut o eviden strict a numrului de forme larvare i adulte de artropode
zburtoare, trtoare i sritoare.
10. Containerele pentru cpue i acarieni trebuie plasate n tvi cu ulei.
11. Insectele zburtoare infectate sau potenial infectate trebuie s e nchise n cuti cu plas dubl.
12. Artropodele infectate sau potenial infectate trebuie s e manipulate pe platouri cu rcire (care le
amoresc), plasate la rndul lor n hote de biosiguran sau n izolatoare.
Pentru informaii suplimentare, consultai referinele bibliograce 3-6.
29
30
7. RECOMANDRI PENTRU CALIFICAREA LABORATORULUI / FACILITILOR ACESTUIA
7. Recomandri pentru calicarea

laboratorului / facilitilor acestuia
Calicarea laboratorului/facilitilor acestuia poate denit ca un proces sistematic de examinare

i documentare, ce demonstreaz c elementele de structur ale laboratorului, precum i ale sistemelor
i/sau componentelor de sistem au fost instalate, inspectate i testate din punctul de vedere al funcionrii
n concordan cu standardele naionale i internaionale.
Laboratoarele concepute s corespund Nivelelor de biosiguran de la 1 la 4 au exigene de
calicare diferite, cu nivel cresctor de complexitate. Condiiile geograce i climaterice, cum ar umiditatea
sau temperaturile extreme, pot de asemenea inuena structura laboratorului, i prin aceasta exigenele
de calicare ale acestuia. Odat cu ncheierea procesului de calicare, componentele semnicative de
structur i sistemele anex vor fost supuse operrii n condiii variate inclusiv de lucru n condiii limit
logic posibile, i abia dup aceea vor fost aprobate.
Procesul de calicare i criteriile de acceptare vor trebui s e stabilite nc din faza de concepie
a proiectului de construcie sau renovare. Prin cunoaterea de la bun nceput a exigenelor calicrii,
arhitecii, inginerii, personalul nsrcinat cu sigurana i cu evaluarea sntii, precum i personalul
laboratorului, vor putea nelege mai bine performanele ce trebuie atinse de laboratorul n cauz.
Procesul de calicare furnizeaz instituiei i comunitii n cadrul creia funcioneaz, un grad
mai mare de ncredere n faptul c elementele de structur, sistemele electrice, mecanice, de canalizare,
sistemele de izolare i decontaminare precum i sistemele de securitate i alarm vor funciona dup cum
au fost proiectate, asigurnd manipularea securizat n laborator sau n biobaz a oricrui microorganism
potenial periculos.
Activitile de calicare se realizeaz n general nc din faza de proiectare, continundu-se n
timpul construciei i instalrii laboratorului i a facilitilor acestuia, precum i n perioada de garanie,
care trebuie s acopere un an din momentul drii n folosin.
Agentul ce realizeaz calicarea acioneaz ca un avocat pentru instituia ce construiete sau
renoveaz laboratorul i trebuie considerat ca un membru al echipei de concepie, implicarea lui nc
de la nceputul concepiei proiectului ind esenial. n unele situaii, instituia poate aciona ca propriul
su agent de calicare. n cazul unor faciliti de laborator mai complexe (Nivel de biosiguran 3 sau 4),
instituia poate apela la serviciile unui agent de calicare din afara instituiei, cu experien demonstrat n
realizarea cu succes a calicrii laboratoarelor i biobazelor cu nivele complexe de biosiguran. Cnd se
apeleaz la un agent independent de calicare, instituia continu s rmn i ea un membru al echipei
de calicare. Se recomand ca pe lng agentul de calicare, din echip s fac parte i responsabilul
cu sigurana de la nivelul instituiei, responsabilul de proiect, managerul programului i un reprezentant
al serviciului tehnic de intreinere i intervenie.
n continuare este prezentat o list a sistemelor laboratorului i a componentelor ce pot incluse
n planul de calicare, pentru testarea funcionrii corelat cu gradul de securizare a facilitilor ce urmeaz
a construite sau renovate. Lista nu este exhaustiv. n mod evident, planul efectiv de calicare trebuie
s reecte complexitatea laboratorului vizat.
1. Sisteme de automatizare ce aparin cldirii, incluznd posibilitile de monitorizare i control de
la distan
2. Sisteme electronice de supraveghere i detecie
31
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
ncuietori electronice de securitate i dispozitive de recunoatere

Sisteme de nclzire, ventilaie (alimentare i evacuare) i instalaii de aer condiionat
Sisteme de ltrare HEPA
Sisteme de decontaminare a ltrelor HEPA
Sisteme de control ale nclzirii, ventilaiei, aerului condiionat, evacurii aerului i al sas-urilor
Etaneitatea vanelor/robineilor de aer
Sisteme de frig ale laboratorului
Generatoare de abur i ap cald
Sisteme de protecie i alarm contra incendiilor
Sisteme de prevenire a refulrii apelor uzate
Sisteme de tratare a apei (ex. revers-osmoza, distilarea apei)
Sisteme de tratare i neutralizare a lichidelor rezultate din activiti specice
Sisteme de canalizare
Sisteme de decontaminare chimic
Sistem de asigurare cu diverse gaze utilizate n laborator
Sisteme de respiraie autonom
Sisteme de aer tehnic (vid, aer comprimat etc.)
Vericarea diferenelor de presiune n laboratoare i n zonele adiacente
Reelele informatice locale i sistemele de date computerizate
Asigurarea cu electricitate din reea
Surse alternative de electricitate pentru situaii de avarie
Surse nentreruptibile de electricitate (UPS)
Sisteme de iluminare n caz de avarie/urgen
Semnalizarea luminoas a ieirilor de urgen
Sisteme de etanare acionate electric i mecanic
Reeaua telefonic
Sistemul de control al interblocrii uilor sas-urilor
Etaneizarea uilor
Etaneizarea ferestrelor i vizoarelor de siguran
Ieiri de urgen prin penetrarea barierelor
Vericarea integritii structurale a pavimentelor, pereilor i tavanelor
Vericarea integritii straturilor protectoare ale pavimentelor, pereilor i tavanelor
Funcionarea sistemelor de izolare i presurizare ale spaiilor ce nconjoar laboratorul nalt
securizat - Nivel de biosiguran 4
Hote de biosiguran
Autoclave
Sisteme de azot lichid i alarmele aferente
Sisteme de detectare a scurgerilor de ap (ex. n cazul inundrii zonelor securizate)
Duuri de decontaminare i sisteme chimice adiionale
Dispozitive de splare a cutilor animalelor i de neutralizare a euenilor
Managementul deeurilor
32
8. RECOMANDRI PENTRU CERTIFICAREA LABORATORULUI / FACILITILOR ACESTUIA
8. Recomandri pentru certicarea

laboratorului/facilitilor acestuia
Laboratoarele reprezint un mediu complex i dinamic. n zilele noastre, laboratoarele de cercetri

biomedicale i laboratoarele de diagnostic medical i cele de sntate public trebuie s se adapteze cu
rapiditate la continua cretere a necesitilor de sntate ale populaiei i presiunilor acesteia. Un exemplu
n acest sens este reprezentat de necesitatea ajustrii prioritilor laboratoarelor astfel nct acestea s
fac fa provocrilor reprezentate de bolile infecioase emergente i reemergente. Pentru a se asigura
c acest proces de adaptare i meninere se realizeaz prompt i de o manier corespunztoare i
sigur, att laboratoarele de cercetri ct i cele medicale trebuie certicate cu regularitate. Certicarea
laboratoarelor ajut la garantarea faptului c:
1. Se exercit un control tehnic corespunztor iar funcionarea este n concordan cu caracteristicile
proiectate
2. Exist i se aplic un control administrativ adecvat al spaiilor i protocoalelor specice
3. Echipamentul de protecie personal este corespunztor cu activitile desfurate
4. Decontaminarea reziduurilor i materialelor a fost conceput corespunztor i se aplic proceduri
corecte de tratare i manipulare a deeurilor
5. Se aplic proceduri corecte pentru sigurana general a laboratorului, incluznd sigurana zic,
electric i chimic.
Certicarea laboratoarelor difer de activitile de calicare a laboratoarelor (Capitolul 7) n
cteva direcii importante. Certicarea laboratoarelor este un proces sistematic de examinare a tuturor
caracteristicilor i proceselor cu relevan pentru sigurana laboratorului (control tehnic, echipament de
protecie individual i control administrativ). Sunt de asemenea examinate practicile i procedurile de
biosiguran. Certicarea laboratorului este o activitate continu de meninere a calitii i siguranei, care
se desfoar planicat.
Activitile de certicare a laboratoarelor pot conduse de personal adecvat instruit i de
ctre specialiti din domeniul sntii i biosiguranei. Instituiile pot angaja personal cu pregtire
corespunztoare pentru efectuarea de audituri, activiti de supraveghere i inspecie (aceti termeni pot
similari) asociate cu procesul de certicare. Instituiile pot lua n considerare sau li se poate solicita s
angajeze teri care s furnizeze aceste servicii.
Laboratoarele de cercetri biomedicale i cele medicale pot dezvolta instrumente de auditare,
supraveghere sau inspecie pentru a asigura consistena procesului de certicare. Aceste instrumente
trebuie s e sucient de exibile pentru a permite existena diferenelor zice i procedurale dintre
laboratoare, rezultate din tipul de activitate pe care o desfoar ecare laborator, dar n acelai timp s
ofere o abordare unitar n cadrul instituiei. Trebuie acordat atenie faptului ca aceste instrumente s
e folosite numai de ctre un personal instruit corespunztor, precum i faptului c ele nu reprezint un
substitut pentru evaluarea profesional a biosiguranei. Exemple ale unor asemenea instrumente sunt
prezentate n Tabelele 5-7.
Informaiile rezultate n urma auditului, supravegherii sau inspeciei trebuie discutate cu personalul
laboratorului i cu conducerea. Se stabilesc responsabiliti individuale pentru a se garanta c se aplic
aciuni corective pentru toate decienele identicate n procesul de audit. Certicarea laboratorului nu se
va acorda i laboratorul nu va declarat funcional pn cnd nu vor fost tratate corespunztor toate
decienele identicate.
33
Complexitatea operaiilor laboratorului cu Nivel de biosiguran 4 depete scopul acestui ghid.

Pentru mai multe detalii i informaii, se poate consulta Programul O.M.S. de Biosiguran1 (vezi de
asemenea Anexa 3).
WHO Biosafety programme, Department of Communicable Disease surveillance and Response, World Health Organization, 20 Avenue
Appia, 1211 Geneva, Switzerland (http://www.who.int/csr/)
34
Tabel 5. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 1. Chestionar pentru evaluarea

biosiguranei
Locaie laborator:
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Laborator
Semnalizare adecvat pentru sursele de
UV, laser, surse de radioactivitate,etc
Ghid de Biosiguran adecvat, accesibil i
aplicat efectiv
Inscripionare/marcare corect
a echipamentelor: risc infecios,
radioactivitate, toxicitate
Proiectarea laboratorului
Conceput pentru a uor de curat
Comutator alternativ cu lumina pentru
sursele de UV din ncperi, accesibil i din
exterior
Fixarea solid a tuturor etajerelor / rafturilor
Blaturile meselor sunt impermeabile pentru
ap i rezistente la acizi, baze, solveni
organici i temperaturi ridicate
Iluminare adecvat
Existena unor spaii de depozitare
adecvate i corect utilizate
Cilindri cu gaze
Toi cilindrii cu gaze sunt pstrai n condiii
de siguran
Cilindrii de rezerv sunt pstrai cu
capacele de siguran montate
Gazele asxiante i/sau periculoase
sunt utilizate doar n incinte cu ventilaie
suplimentar
Prezena n laborator de cilindri cu gaze
supranumerari fa de necesiti i/sau
cilindri golii
Substane chimice
Substanele chimice inamabile sunt
depozitate n ncperi special destinate
acestora
Substanele generatoare de peroxizi
sunt inscripionate cu data intrrii i data
deschiderii
Substanele chimice sunt pstrate separat,
pe categorii
Da
35
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Substanele chimice periculoase sunt
depozitate la un nivel superior nivelului
ochilor.
Existena de substane chimice depozitate
pe pardoseal
Existena de containere cu substane
chimice neacoperite
Toate soluiile sunt etichetate corect ?
Se folosesc termometre cu mercur ?
Da
Frigidere / congelatoare/ camere

frigorice
Sunt prezente n ele alimente pentru
consum uman
Materialele inamabile se a numai n
uniti echipate anti-deagraie
Prezena etichetelor externe de avertizare
pe echipamentele care conin substane
carcinogene, radioactive, toxice, i/sau
elemente care implic pericol biologic.
Camerele frigorice sunt prevzute cu
dispozitive de siguran care s permit
deschiderea uilor din interior
Echipament electric
Prezena de cabluri prelungitoare ntre
echipament i priz
Prize i aparate cu mpmntare i
polaritate corecte
Existena de conectri electrice n
apropierea chiuvetelor, sub duuri, etc
Existena de echipamente cu cabluri
electrice care prezint semne de
deteriorare
Existena de prize sau conductori electrici
suprasolicitai
Existena de cabluri electrice montate pe
pardoseal
Existena de sigurane electrice adecvate n
circuite
Prizele electrice plasate lng surse de ap
respect reglementrile naionale
Existena de cabluri electrice cu
mpmntare
Existena de surse de nclzire electrice
mobile n ncperi
36
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Da
Echipament de protecie individual

pentru personal
Posibilitatea efecturii lavajului ocular n
laborator
Existena duurilor de siguran
Echipament de protecie individual
disponibil : mnui, halate, ochelari
Purtarea corect a echipamentului de
protecie (halate, oruri, bonet, etc)
Echipamentul de protecie individual nu
este purtat n afara laboratorului
Existena echipamentului de protecie
individual pentru activitatea de stocaj
criogenic
Managementul deeurilor
Existena de indicii care probeaz
depozitarea incorect a deeurilor
Deeurile sunt sortate i depozitate n
containere separate ?
Existena de containere cu deeuri chimice
etichetate, marcate, datate i pstrate
nchise
Containerele cu deeuri chimice sunt
manipulate i depozitate corect ?
Containerele pentru obiecte neptoare/
tietoare sunt utilizate i ndeprtate n mod
corect ?
Pardoseala nu prezint urme de deeuri
Procedurile de ndeprtare a deeurilor
sunt aate n laborator
Programe de siguran i sntate
ocupaional
S-a fcut comunicarea riscului?
Asigurarea proteciei cilor respiratorii
Asigurarea proteciei auzului
Monitorizarea formaldehidei
Monitorizarea etilen dioxidului
Monitorizarea gazelor anestezice
Controale tehnice generale
Fluxul de aer din laborator nu este orientat
ctre celelalte sectoare de activitate,
coridoare, ociu, vestiar, birouri
Exist chiuvete i sifoane de pardoseal ce
permit refularea aerului din canalizare ?
Sunt disponibile chiuvete pentru splarea
minilor oriunde trebuie ?
37
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Exist componente mobile neprotejate ale
echipamentelor ?
Da
Instalaia de vid este prevzut cu ltre i

dispozitive care impiedic rupturile de vid
(capcane de vid) la nivelul meselor de lucru ?
Exist pericol de reuare n reeaua de
alimentare cu ap ?
Existena unor echipamente de distilare a
apei n bun stare de funcionare
Program activ i efectiv de control al
roztoarelor i artropodelor
Practici i proceduri generale
Se pstreaz alimente pentru consumul
uman n aria laboratorului ?
Cuptoarele cu microunde din laborator
sunt n mod clar etichetate: Doar pentru
uz de laborator. Este interzis prepararea
alimentelor!
Consumul de alimente i buturi,
fumatul, aplicarea de cosmetice n incinta
laboratorului
Recipientele de sticl aate sub presiune
sunt protejate
Este interzis pipetarea cu gura
Exist i sunt folosite dispozitive mecanice
de pipetare
mbrcmintea de protecie pentru laborator
este pstrat separat de mbrcmintea de
strad
Gospodrirea general a laboratorului
Existena unor recipiente de sticl pstrate
pe pardoseal
Se constat erori evidente potenial
periculoase
Existena unor materiale absorbante curate
disponibile la posturile de lucru
Cioburile de sticl sunt manipulate cu
mijloace mecanice: perie, fra, pens
Protecia mpotriva incendiilor
Capetele de stropire (sprinklere) sunt libere
i degajate
Deschiderile din tavan, paviment, perei
sunt lsate libere
Exist cabluri sau tubulaturi care trec prin
spaiul deschiderii uilor
Lime minim de 1m a uilor laboratorului
38
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Da
Nu
NA
Observaii
Depozitare de materiale peste conducte,

hidrani sau instalaia de semnalizare
luminoas
Depozitarea n laborator a unor substane
inamabile n exces
Bi termostatate
Existena unor sisteme de oprire automat
n caz de nivel prea sczut al apei i/sau
supranclzire
Confecionate din materiale necombustibile
Data auditului:..........................
Nume, prenume auditor

..................................................................
Semntura
..................................................................
39
Tabelul 6. Laboratorul de baz Nivel de Biosiguran 2. Chestionar pentru evaluarea

Biosiguranei
Acest formular se folosete nsoit obligatoriu de formularul pentru evaluarea biosiguranei n Laboratorul
de baz - Nivel de Biosiguran 1 (vezi Tabelul 5)
Locaie laborator:
Data:
ef Laborator:
Element evaluat
Da
Hota de Biosiguran (HSB)

Certicare n ultimele 12 luni
Suprafaa HSB este curat cu un dezinfectant
adecvat dup ecare utilizare
Grila frontal i ltrele de exhaustare sunt lsate
libere
Se utilizeaz acr deschis n interiorul hotei
Liniile de vacuum sunt echipate cu ltre n serie i
cu capcane cu dezinfectant
Performanele HSB sunt afectate de amplasarea
hotei sau de cureni de aer
HSB este utilizat ori de cte ori exist riscul
potenial de formare a aerosolilor
Laboratorul
Acces limitat / restricionat. Permisiune de a intra
doar pentru personalul laboratorului
Acces limitat doar pentru personalul avizat asupra
tuturor pericolelor poteniale
Sigla de Pericol biologic este aat n mod
corespunztor pe ua laboratorului
- Sigla este nsoit de nscrierea unor informaii
precise i actuale
- Sigla i informaiile sunt lizibile i nedeteriorate
Toate uile sunt meninute nchise
Decontaminarea
Decontaminanii utilizai sunt activi asupra
agenilor microbieni manipulai n laborator
Toate accidentele i mprtierile (stropiri,
deversri) care implic material infecios sunt
raportate efului de laborator
Folosirea unor decontaminani adecvai pentru
neutralizarea materialului infecios mprtiat
Suprafeele de lucru sunt decontaminate nainte
i dup ecare procedur, zilnic i dup ecare
mprtiere accidental
40
Nu
NA
Observaii
Locaie:
Marc:
Tip:
Serie Nr.:
Element evaluat
Da
Manipularea deeurilor contaminate

Containerele pentru deeuri potenial infecioase
sunt folosite corect
nu sunt umplute pn la refuz
sunt corect etichetate i nchise
Culturile i deeurile obinuite sunt decontaminate
corect nainte de evacuare
Materialele care se decontamineaz n afara
laboratorului sunt transportate n containere
etane,nchise i rezistente, n concordan cu
procedurile locale i reglementrile naionale
Deeurile mixte sunt decontaminate din punct de
vedere biologic nainte de a eliminate ca deeuri
chimice i/sau radiologice
Protecia personalului
Personalul laboratorului este informat periodic
asupra imunizrilor/testrilor corespunztoare
agenilor microbieni manipulai
Contactarea unor servicii medicale adecvate
pentru examene de bilan periodic, supraveghere
i tratament pentru expunerile profesionale
Materialele i echipamentele contaminate biologic
se manipuleaz cu mnui
Protecia feei ori de cte ori se lucreaz cu
material contaminat biologic n afara hotelor de
biosiguran
Splarea minilor :
- dup ndeprtarea mnuilor
- dup lucrul cu ageni infecioi
- nainte de a prsi laboratorul
Sunt disponibili ageni antimicrobieni pentru un
prim ajutor prompt
Practici
Utilizarea HSB ori de cte ori exist riscul potenial
de a generai aerosoli, respectiv mprtieri
accidentale
Existena unui ghid de biosiguran corect elaborat
i aplicat
Personalul citete, revede (cel puin anual) i
aplic instruciunile privind practicile i procedurile
de laborator, inclusiv pe cele cuprinse n ghidul de
biosiguran
Procedurile sunt aplicate n practic astfel nct s
se reduc la minimum formarea de aerosoli i/sau
de dispersii accidentale
41
Nu
NA
Observaii
Element evaluat
Pentru ageni infecioi se utilizeaz seringi de
unic utilizare i/sau seringi cu ac nedetaabil
Cupele i rotoarele de centrifug se deschid numai
n HSB
Probele biologice cu risc infecios sunt transportate
n afara HSB n containere autorizate i n acord
cu reglementrile de transport
Da
Nu
NA
Observaii
Faciliti
Exist chiuvete pentru splarea minilor lng
ieirea din laborator
Nume, prenume auditor
..................................................................
Semntura
..................................................................
Data auditului :......................
42
Tabel 7. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3. Chestionar pentru evaluarea

biosiguranei
Acest formular se foloseste nsoit obligatoriu de formularele pentru evaluarea biosiguranei n Laboratoarele
de baz - Nivel de Biosiguran 1 i 2 (Vezi Tabelele 5 i 6)
Locaie laborator:
Data:
ef laborator
Element evaluat
Da
Faciliti
Laboratorul este separat de circulaia nerestricionat
din restul cldirii
Accesul controlat n laborator se face printr-o
anticamer ale crei ui se nchid automat, ind
interconectate (nu se poate deschide dect o singur
u la un moment dat)
Toate cile de acces n laborator se pot nchide etan
pentru decontaminare
Aerul exhaustat nu este recirculat i este evacuat n
exterior la distan de spaii locuite
Exist un sistem de ventilaie controlat pentru
monitorizarea direcionrii uxului de aer
Protecia personalului
n laborator se poart halate nchise la spate
Echipamentul individual de protecie este purtat doar
n incinta laboratorului
Sunt disponibile chiuvete cu robinete automate sau
manevrabile cu ajutorul pedalei / cotului
Protecia minilor
Sunt purtate cte dou perechi de mnui atunci
cnd se manipuleaz material contaminat biologic,
echipament potenial contaminat i la curenia
suprafeelor de lucru
Protecia respiratorie
Mijloace de protecie respiratorie sunt purtate de
ntreg personalul atunci cnd aerosolii nu sunt
reinui n siguran de HSB
43
Nu
N/A
Observaii
Practici
Asigurarea proteciei mucoaselor atunci cnd se
lucreaz cu material infecios n afara HSB
Personalul este instruit asupra pericolelor asociate
cu manipularea anumitor ageni microbieni
Personalului i se impune s citeasc i s urmeze
toate instruciunile privitoare la practicile i
procedurile din laborator, inclusiv cele din ghidul de
biosiguran
Personalul este instruit anual i ori de cte ori apar
modicri ale procedurilor
Toate deeurile contaminate microbian sunt
autoclavate nainte de a ndeprtate
Nume, prenume auditor..............................................

Semntura...................................................................
44
Data auditului:..........................
9. CONCEPTUL DE BIOSECURITATE N LABORATOR
9. Conceptul de biosecuritate n laborator
Ghidurile privind biosigurana n laborator s-au concentrat n mod tradiional pe formularea de

recomandri generale pentru protejarea celor care lucreaz n laborator. Aceste ghiduri subliniau rolul
practicilor corecte microbiologice, al echipamentelor de securizare, al unor faciliti concepute, utilizate
i ntreinute corespunztor, al msurilor administrative pentru reducerea riscului de accidente sau
mbolnvirii personalului. Ca o consecin a acestui mod de abordare au fost neglijate riscurile pentru mediu
i comunitate. n zilele noastre a aprut necesitatea extinderii conceptului tradiional de biosiguran, prin
includerea msurilor de biosecuritate n laborator. Evenimentele produse la nivel mondial n trecutul
recent subliniaz necesitatea protejriii laboratoarelor i a materialelor pe care acestea le dein, pentru
a nu putea utilizate intenionat mpotriva sntii populaiei i a faunei, a agriculturii sau a mediului.
nainte de a deni nevoile de biosecuritate ale laboratorului, este important s se neleag deosebirea
dintre noiunile de biosiguran n laborator i biosecuritate n laborator.
Conceptul de biosiguran n laborator se folosete pentru a descrie principiile de securizare,
tehnologiile i regulile ce trebuie urmate pentru a preveni expunerea neintenionat la ageni patogeni i
toxine sau eliberarea lor accidental n mediu.
Conceptul de biosecuritate n laborator se refer la msuri de securitate luate la nivel instituional
i personal cu scopul prevenirii diversiunilor/atentatelor sau a eliberrii intenionate de patogeni sau toxine
precum i pentru prevenirea pierderii, furtului sau folosirii greite a acestora.
Practicile ecace de biosiguran stau de fapt la baza msurilor de biosecuritate n laborator.
Prin evaluarea riscului, realizat ca parte integrant a programului de biosiguran al instituiei, se obin
informaii despre tipurile de microorganisme manipulate, localizarea lor zic, personalul care solicit
acces la ele i se identic persoanele responsabile pentru pstrarea lor. Aceste informaii pot utilizate
pentru a aprecia dac o instituie posed material biologic ce poate prezenta interes pentru cei ce doresc
a-l utiliza n mod impropriu.
Pentru ecare sector din laborator trebuie elaborat i aplicat un program specic de biosecuritate
n acord cu caracteristicile facilitii respective, cu tipul de activitate desfurat i cu condiiile locale. n
consecin, msurile de biosecuritate n laborator trebuie s e reprezentative pentru variatele necesiti
ale instituiei i ar de dorit s cuprind i contribuii din partea directorului tiinic, a responsabilului
cu biosigurana, a personalului tiinic al laboratorului, a personalului de intreinere, a personalului
responsabil cu tehnologia informaiei i a consilierilor juridici i personalului de securitate, dac este
cazul.
Msurile de biosecuritate n laborator trebuie s se bazeze pe un program cuprinztor de
inventariere a agenilor patogeni i a toxinelor, incluznd o eviden la zi ce va cuprinde i locul de stocare,
identicarea personalului ce are acces la acestea, descrierea utilizrii lor, documentarea transferului
intern (n i ntre diferitele sectoare ale laboratorului) i extern, precum i orice inactivare i/sau eliminare
de materiale. De asemenea, trebuie stabilit la nivel instituional un protocol de biosecuritate n laborator
pentru identicarea, raportarea, investigarea i remedierea breelor din sistemul de biosecuritate al
laboratorului, incluznd i eventualele neconcordane rezultate din activitatea de inventariere. Implicarea,
rolurile i responsabilitile autoritilor de sntate public i ale celor de securitate n cazul unei infraciuni
de biosecuritate trebuie s e clar denite.
ntregul personal trebuie instruit n domeniul biosecuritii n laborator, instruire distinct de cea din
domeniul biosiguranei. Aceast instruire trebuie s ajute personalul s neleag necesitatea de protecie
pentru astfel de materiale i raionamentul pe care se bazeaz msurile specice de biosecuritate i
trebuie s includ o trecere n revist a standardelor naionale relevante i a procedurilor specice ale
45
instituiei. De asemenea, n cursul instruirii trebuie prezentate proceduri ce descriu rolul i responsabilitile
personalului n cazul producerii unei infraciuni de biosecuritate.
Un element central n cadrul msurilor ecace de biosecuritate n laborator, l constituie, de
asemenea, compatibilitatea profesional i etic de a lucra cu patogeni periculoi a tuturor persoanelor
autorizate a avea acces regulat la materialele cu regim special.
n rezumat, precauiile de biosecuritate trebuie s devin parte a activitilor de rutin din laborator,
chiar dac se aplic tehnici aseptice sau alte practici microbiologice sigure. Msurile de biosecuritate
n laborator nu trebuie s stnjeneasc schimbul ecient de materiale de referin, probe clinice i
epidemiologice i nici circulaia informaiilor adiacente necesare pentru bunul mers al investigaiilor clinice
i de sntate public. Managementul competent al biosecuritii nu trebuie s interfere n mod nepotrivit
cu activitatea de zi cu zi a personalului tiinic sau s e un impediment n desfurarea cercetrilor.
Trebuie pstrat accesul legitim la materialele importante pentru cercetare i diagnostic. Evaluarea
compatibilitii personalului, instruirea specic n materie de biosecuritate i respectarea procedurilor de
protecie fa de ageni patogeni constituie mijloace de cretere a nivelului de biosecuritate a laboratorului.
Toate aceste eforturi trebuie iniiate i meninute prin evaluri periodice ale riscurilor i ale ameninrilor i
printr-o revizuire i actualizare regulat a procedurilor. Trebuie vericat corespondena acestor proceduri
i instruciuni cu standardele naionale privind biosecuritatea laboratorului.
46
10. HOTELE DE SIGURAN BIOLOGIC
10. Hotele de siguran biologic1
Hotele de siguran biologic (HSB) sunt destinate a proteja operatorul, mediul din laborator i
materialele de lucru fa de expunerea la aerosoli i picturi care se pot produce n cursul manipulrii
materialelor coninnd ageni infecioi, cum ar culturile primare, tulpinile de colecie i probele de
diagnostic. Aerosolii sunt produi de orice activitate care determin apariia de miniparticule sau stropi
de material lichid sau semilichid, cum ar agitarea, turnarea, amestecarea sau picurarea unui lichid
pe o suprafa sau ntr-un alt lichid. Activitile de laborator precum nsmnarea plcilor de agar prin
efectuarea de striuri paralele, inocularea acoanelor de culturi de celule cu o pipet, folosirea unei pipete
mono- sau multicanal pentru a distribui suspensii de ageni infecioi n plci de microcultur, efectuarea
de diluii n tuburi sau plci, omogenizarea i agitarea prin producerea de vrtej a materialelor infecioase,
centrifugarea lichidelor contaminate sau manipularea animalelor, pot genera aerosoli infecioi. Particulele
de aerosoli cu diametrul sub 5 m i picturile mici, cu diametrul de 5-100 m nu sunt vizibile cu ochiul liber.
Tehnicianul de laborator nu este, n general, avertizat asupra formrii acestor particule i asupra faptului
c ele pot inhalate sau pot contamina suprafee i materiale. HSB, folosite corect, sunt foarte eciente
n reducerea frecvenei infeciilor dobndite n laborator, evit contaminarea ncruciat a culturilor prin
expunere la aerosoli i protejeaz mediul.
Tabelul 8. Alegerea unei HSB n funcie de tipul de protecie dorit.
TIP DE PROTECIE
Protecia personalului fa de microorganisme
din Grupurile de Risc 1-3
HSB INDICAT
Clasa I, Clasa II, Clasa III

din Grupul de Risc 4, manipulare din exterior,
prin panou cu mnui
Clasa III

din Grupul de Risc 4, laborator cu izolare n
costum protector (tip scafandru)
Clasa I, Clasa II
Protecia produselor
Clasa II, Clasa III cu ux laminar
Protecia fa de radionuclizi volatili i

protecie chimic, expunere de ordinul
minutelor
Clasa II B1, Clasa II A2 cu evacuare spre

exterior
Protecie fa de radionuclizi volatili i

protecie chimic
Clasa I, Clasa II B2, Clasa III
De-a lungul anilor, concepia clasic a HSB a suferit numeroase modicri. O modicare major
a constat n adugarea unui ltru de nalt ecien pentru particulele din aer (HEPA - High Efciency
Particulate Air) la sistemul de evacuare. Filtrul HEPA reine 99,97% din particulele cu diametrul de 0,3 m
i 99,99% din particulele cu dimensiuni mai mari sau mai mici. n acest fel, ltrul HEPA are capacitatea
de a reine ecient toi agenii infecioi cunoscui i de a asigura evacuarea din hot a unui aer complet
1
Denumiri echivalente : cabinet (incint) de siguran biologic - BSC (BioSafety Cabinet) sau post de securitate microbiologic
- PSM (poste de scurit microbiologique)
47
puricat de ori ce fel de microbi. A doua modicare de concepie a constat n direcionarea aerului ltrat
prin HEPA ctre suprafaa de lucru, protejnd-o pe aceasta i materialele cu care se lucreaz. Aceast
caracteristic este frecvent denumit protecia produsului. Aceste modicri au dus la apariia a trei clase
de HSB. Tipul de protecie conferit de ecare dintre ele este specicat n Tabelul 8.
Nota: Hotele cu ux de aer orizontal sau vertical (incinte de lucru cu aer puricat) nu sunt de fapt HSB
i nu trebuie folosite n locul acestora.
10.1. HSB de Clasa I
Figura 6 conine o prezentare schematic a HSB de Clasa I. Aerul din ncpere este preluat
printr-o deschiztur frontal cu o vitez minim de 0,38m/s, trece pe deasupra suprafeei de lucru i este
evacuat din hot prin conducta de evacuare. Fluxul de aer direcionat dinspre operator ctre conducta
de evacuare ndeprteaz particulele de aerosoli care pot generate la nivelul suprafeei de lucru.
Deschiztura frontal permite operatorului s ajung cu minile la suprafaa de lucru din interiorul hotei
i, n acelai timp, el poate s vad aceast suprafa printr-un panou frontal transparent. Acest panou
poate la rndul su ridicat complet pentru a permite accesul la suprafaa de lucru n scopul currii sau
n alte scopuri.
Aerul din hot este evacuat printr-un ltru HEPA: (a) n laborator i apoi n exterior prin sistemul
de aerisire al cldirii; (b) ctre exterior prin sistemul de evacuare a aerului din cldire; sau (c) direct n
exterior. Filtrul HEPA poate amplasat e n sistemul de evacuare al HSB e n cel al cldirii. Unele
HSB de Clasa I sunt echipate cu un ventilator propriu de evacuare, n timp ce altele folosesc ventilatorul
sistemului de evacuare a aerului din cldire.
HSB de Clasa I a fost prima HSB recunoscut ca atare i, datorit concepiei sale constructive
simple, este nc larg folosit n ntreaga lume. Ea prezint avantajul de a conferi protecie personalului i
mediului, dar poate folosit i pentru lucrul cu radionuclizi i substante chimice toxice volatile. Deoarece
aerul nesterilizat din ncpere ptrunde peste suprafaa de lucru prin deschiztura frontal, hota nu
asigur protecia produsului.
Figura 6. Reprezentare schematic a HSB de Clasa I
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent; C: ltru HEPA de evacuare; D: spaiul de evacuare.
48
10.2. HSB de Clasa II

Pe msur ce s-a extins utilizarea culturilor de celule i esuturi n scopul cultivrii virusurilor sau
pentru alte scopuri, s-a ajuns la concluzia c nu este admisibil ca aerul nesteril din ncpere s ajung
pe suprafaa de lucru. HSB de Clasa II au fost concepute nu numai pentru a proteja personalul, ci i
pentru a proteja materialele de pe suprafaa de lucru de aerul contaminat din ncpere. HSB de Clasa II,
cu cele patru tipuri (A1, A2, B1 i B2), difer de cele de clasa I prin faptul c permit doar accesul unui aer
steril, ltrat prin ltre HEPA, la nivelul suprafeei de lucru. HSB de clasa II poate utilizat atunci cnd se
lucreaz cu ageni infecioi din Grupurile de Risc 2 i 3. HSB de Clasa II pot folosite n cazul lucrului
cu ageni infecioi din Grupul de Risc 4 doar dac se folosesc costume de izolare cu presiune pozitiv
(tip scafandru).
HSB de Clasa II tipul A1
HSB de Clasa II tip A1 este prezentat n Fig. 7. Un ventilator intern absoarbe aer din ncpere
(aer de alimentare) n interiorul hotei prin deschiztura frontal i apoi prin grilajul de captare frontal.
Viteza de ptrundere a aerului trebuie s e de cel puin 0,38 m/s la nivelul deschizturii frontale. Apoi,
aerul de alimentare trece printr-un ltru HEPA de alimentare, urmnd s e trimis n jos, ctre suprafaa
de lucru. Pe msur ce coboar, uxul de aer se desparte la aproximativ 6-18 cm deasupra suprafeei
de lucru, jumtate din ux trecnd prin grilajul frontal de evacuare i jumtate prin grilajul posterior de
evacuare. Toate particulele de aerosoli generate la nivelul suprafeei de lucru sunt imediat captate de
uxul descendent de aer, care trece apoi prin grilajele de evacuare frontal i posterior, oferindu-se astfel
cel mai nalt nivel de protecie a produselor. Aerul este apoi descrcat prin conducta comun posterioar n
spaiul dintre ltrele de alimentare i de evacuare, plasate n partea superioar a hotei. Datorit diferenei
de mrime dintre aceste ltre, aproximativ 70% din uxul de aer este recirculat prin ltrul de alimentare,
pentru a ajunge napoi n zona de lucru; restul de 30% trece prin ltrul de evacuare pentru a ajunge n
ncperea de lucru sau la exterior.
Aerul din HSB de Clasa II A1 poate recirculat ctre ncpere sau evacuat ctre exteriorul cldirii,
prin conectare etan e la o conduct special destinat, e la sistemul general de evacuare a aerului
din cldire.
Recircularea aerului de evacuare n ncperea de lucru prezint avantajul reducerii costurilor de
nclzire ale cldirii, deoarece aerul cald sau rece din ncpere nu trece n mediul extern. Conectarea
la un sistem de conducte de evacuare permite, de asemenea, folosirea unor asemenea HSB n cazul
lucrului cu radionuclizi volatili i cu substane chimice toxice volatile (Tabelul 8).
HSB de Clasa II tip A2 ventilate la exterior, tip B1 i tip B2

HSB de Clasa II tip A2 ventilate ctre exterior, tip B1 (Fig.8) i tip B2 - sunt variante ale tipului
IIA1, iar caracteristicile lor, precum i cele ale HSB de Clasa I i de Clasa III, sunt prezentate n Tabelul
9. Fiecare variant de HSB este adecvat utilizrii n scopuri specializate (vezi Tabelul 8). Aceste HSB
difer ntre ele prin mai multe aspecte:
- viteza de ptrundere a aerului prin deschiztura frontal;
- cantitatea de aer recirculat la nivelul suprafeei de lucru i eliminat din hot;
- sistemul de evacuare, care poate elimina aerul din hot ctre ncpere sau ctre exterior, printr-un
sistem de evacuare special destinat sau prin sistemul general de evacuare a aerului din cldire;
- caracteristicile de presiune (conductele contaminate biologic i spaiul de evacuare sunt e sub
presiune negativ, e nconjurate de alte spaii i conducte sub presiune negativ).
49
Figura 7. Reprezentare schematic a unei HSB de Clasa II A1
A: deschiztura frontal; B: panou frontal transparent mobil; C: ltrul HEPA de evacuare; D: conducta comun
posterioar; E: ltrul HEPA de alimentare; F: ventilator suant.
Figura 8. Reprezentare schematic a unei HSB Clasa II tip B1
A=deschiderea frontal, B=panoul frontal transparent, C=ltrul HEPA de evacuare, D=ltrul HEPA de alimentare,
E=spaiul de evacuare cu presiune negativ, F=ventilatoare, G=ltrul HEPA de alimentare. Este necesar conectarea
evacurii HSB la sistemul general de evacuare a aerului din cldire.
50
Descrierea complet a diferitelor HSB de Clasa II A i B poate obinut consultnd referinele

bibliograce (7) i (8) precum i crile tehnice ale echipamentelor.
Tabelul 9. Diferene ntre HSB de Clasa I, II si III
HSB
Viteza de intrare
m/s
I*
% de aer
Sistem de evacuare
recirculat
evacuat
0,36
100
conduct rigid
IIA1
0,38 0,51
70
30
spre ncpere sau prin

conduct special
IIA2 cu ventilare spre

exterior *
0,51
70
30
spre ncpere sau prin

conduct special
IIB1*
0,51
30
70
conduct rigid
IIB2*
0,51
100
conduct rigid
III*
nu se aplic**
100
conduct rigid
* Toate conductele contaminate sunt sub presiune negativ sau sunt nconjurate de alte conducte sau
spaii cu presiune negativ
** Panoul frontal cu mnui este xat n deschiztura frontal.
10.3. HSB de Clasa III
Acest tip de hot (Fig.9) ofer cel mai nalt nivel de protecie a personalului i este folosit, n
special, pentru lucrul cu ageni din Grupul de Risc 4. Orice comunicare ntre interiorul i exteriorul hotei
este blocat n ambele sensuri, printr-un sistem etan. Aerul de alimentare este ltrat HEPA (devenind
astfel steril), iar aerul evacuat trece prin dou ltre HEPA succesive pentru decontaminare. Fluxul de aer
este meninut printr-un sistem de ventilaie special conceput, amplasat la exteriorul hotei, care menine
interiorul hotei sub presiune negativ (de aproximativ 124,5 Pa). Accesul la suprafaa de lucru se face
prin intermediul unor mnui de cauciuc foarte rezistente, care fac corp comun cu un panou frontal xat
etan.
HSB de Clasa III trebuie s aib ataat un compartiment de trecere, sterilizabil i echipat cu ltre HEPA de
evacuare, prin care se scot obligatoriu toate materialele care s-au introdus i s-au gsit n hot n timpul
lucrului n vederea sterilizrii lor. Hota poate conectat la un autoclav cu dou ui, pentru a decontamina
toate materialele care sunt introduse sau scoase din hot. Panoul frontal poate prevzut cu mai multe
perechi de mnui pentru a extinde suprafaa de lucru. HSB de Clasa III sunt recomandate pentru lucrul
n laboratoarele cu Nivel de Biosiguran 3 i 4.
10.4. Conexiunile pentru evacuarea aerului din hota de siguran biologic.
Hotele de siguran biologic de Clasa II tip A1 i tip A2 conectate ctre exterior sunt prevzute
cu un tub exibil de tip manon sau cu un capion (ca tubul/conducta de evacuare de la hota de
buctrie), n care este presiune negativ. Acesta este xat pe traiectul de evacuare al hotei i conduce
aerul din hot, decontaminat prin ltrare HEPA, spre conductele generale de evacuare a aerului din
cldire. ntre manon i traiectul de evacuare al hotei se pstreaz o mic fant de 2,5 cm diametru.
Aceast mic deschiztur permite i absorbia aerului din ncpere ctre sistemul de evacuare a aerului
din cldire. Capacitatea sistemului de evacuare a aerului din cldire trebuie s e sucient pentru
eliminarea att a aerului din camer, ct i a aerului din HSB. Manonul de conexiune trebuie s e uor de
scos sau s e conceput n aa fel nct s permit efectuarea testelor operaionale asupra hotei.
51
n general, funcionarea unei HSB conectate prin manon nu este inuenat prea mult de uctuaiile
uxului de aer din cldire.
HSB de Clasa II tip B1 i tip B2 sunt prevzute cu conducte de evacuare rigide, de tipul celor
conectate etan, (fr nici o deschiztur), la sistemul de evacuare al aerului din cldire sau, mai bine, la
un sistem de evacuare special destinat, cu presiune negativ. Sistemul de evacuare al aerului din cldire
trebuie s e perfect adaptat la cerinele de ux specicate de productor, referitoare la volum, precum
i la presiunea static. Certicarea unei HSB cu conduct rigid necesit mai mult timp de lucru dect
cea a unei HSB care recircul aerul din ncpere sau care are conexiune prin manon deoarece trebuie
validat i etaneizarea perfect.
Figura 9. Reprezentare schematic a unei HSB de Clasa III (panou frontal cu mnui):
A: guri pentru montarea de mnui de lungimea braelor; B: panou frontal transparent;

C: ltre HEPA duble pentru evacuare; D: ltru HEPA de alimentare cu aer;
E: autoclav cu dou intrri sau compartiment de trecere; F: container (tanc) pentru deeuri chimice.
Se impune conectarea sistemului de evacuare al hotei la un sistem independent de cel de evacuare a aerului
din cldire.
10.5. Alegerea unei hote de siguran biologic

HSB trebuie aleas, n primul rnd, n funcie de tipul de protecie necesar: protecia produselor,
protecia personalului fa de microorganisme din Grupurile de Risc 1-4 i fa de expunere la radionuclizi
si substane chimice toxice/volatile sau o combinaie a acestora, precum i protecia mediului nconjurtor.
Tabelul 8 arat care HSB este recomandat pentru ecare tip de protecie.
52
Substanele chimice toxice sau volatile nu trebuie manipulate n HSB care recircul aerul de
evacuare prin ncpere, cum ar cele de Clasa I care nu au conducte de comunicare cu sistemul de
evacuare al cldirii, sau cele de Clasa II tip A1 sau tip A2. HSB de Clasa II tip B1 sunt acceptabile pentru
lucrul timp de cteva minute cu radionuclizi i substane toxice/volatile. Hotele de Clasa II tip B2, numite
i hote cu evacuare complet, se impun atunci cnd se manipuleaz radionuclizi i substane chimice
volatile n cantiti mari.
10.6. Folosirea HSB n laborator

Amplasarea
Viteza de intrare a uxului de aer prin deschiztura frontal n HSB este de aproximativ 0,45 m/s.
La aceast vitez, uxul de aer direcionat i menine cu greu integritatea i poate ntrerupt de ctre
curenii de aer generai de micrile persoanelor n jurul HSB, de ferestrele deschise, de sistemele de
alimentare cu aer, de nchisul i deschisul uilor. HSB trebuie amplasate ntr-un loc ferit de trac i de
cureni de aer potenial perturbatori. Oricnd este posibil, se va lsa un spaiu liber de 30 cm n spatele
i n prile laterale ale hotei pentru a permite un acces uor pentru ntreinere. Este necesar pstrarea
unui spaiu liber de 30-35 cm deasupra hotei, pentru a permite msurarea exact a vitezei aerului prin
ltrul de evacuare i pentru a schimba ltrele.
Operatorii
Dac HSB nu sunt folosite corect, protecia oferit de ele poate mult diminuat. Operatorii
trebuie s aib grij s menin integritatea uxului de aer care ptrunde prin deschiztura frontal, atunci
cnd i mic braele spre interiorul sau exteriorul hotei, n timpul lucrului. Micrile braelor trebuie fcute
lent, perpendicular pe deschiztura frontal. Materialele din hot vor manipulate dup un minut de la
introducerea braelor, pentru a permite acomodarea i pentru a mtura cu aer steril suprafaa minilor i
a braelor. Numrul micrilor fcute prin deschiztura frontal trebuie redus, plasnd n interiorul hotei
toate materialele necesare nainte de nceperea lucrului.
Plasarea materialelor
Grila frontal de captare a aerului din HSB din clasa II nu trebuie s e blocat cu hrtie,
echipamente sau alte obiecte. Suprafaa materialelor care vor plasate n hot trebuie decontaminat
cu alcool de 70. Zona de lucru din hot se poate acoperi cu prosoape de hrtie absorbant, mbibate
sau nu cu dezinfectant, pentru a reine eventuale scurgeri i stropi. Toate materialele trebuie plasate
n hot spre marginea posterioar a suprafeei de lucru, ct mai n spate posibil, fr a bloca grilajul
posterior. Echipamentele generatoare de aerosoli (de ex. mixere, centrifugi etc.) trebuie aezate spre
partea posterioar a hotei. Deeurile colectate pe categorii n recipiente speciale (precum sacii de
colectare pentru materialele contaminate, recipientele cu vrfuri de pipete folosite, recipientele cu probe,
etc.) trebuie plasate ntr-o latur a hotei. Fluxul de operaii trebuie s se desfoare dinspre zona curat
spre zona contaminat a suprafeei de lucru.
Pungile de colectare pentru deeuri periculoase sau containerele i recipientele pentru colectarea
deeurilor tietoare - neptoare ( ex. vrfuri de pipete ), care urmeaz s e autoclavate, nu trebuie
plasate n afara hotei. Micrile repetate nuntru/n afar, fcute pentru utilizarea acestor containere, pot
ntrerupe bariera de aer a hotei i pot compromite att protecia personalului, ct i pe cea a produselor.
53
Operare i ntreinere
Majoritatea HSB sunt concepute pentru a utilizate non-stop, iar inspectorii consider c folosirea
continu este util i pentru controlul nivelului particulelor de praf i al altor particule din laborator. HSB de
Clasa II tip A1 i A2 cu evacuare spre ncpere sau cu conectare prin manon la o conduct proprie de
evacuare pot oprite n perioadele n care nu sunt folosite. Alte tipuri, precum HSB de Clasa II-B1 i B2,
prevzute cu instalaii cu conduct rigid, necesit un ux de aer permanent cu presiune negativ, pentru
a menine echilibrul cu aerul din ncpere. Hotele trebuie pornite cu cel puin 5 minute nainte de a ncepe
lucrul i oprite dup cel puin 5 minute de la terminarea lucrului, pentru a permite hotei s se curee,
adic pentru a permite aerului contaminat s e evacuat din hot.
Orice reparaie a HSB trebuie fcut de ctre un tehnician calicat (autorizat). Orice disfuncie
n operare trebuie raportat i reparat nainte de a relua utilizarea HSB. nainte de orice reparaie sau
control (inspecie), HSB trebuie s e dezinfectate.
Radiaiile ultraviolete
Folosirea radiaiilor ultraviolete n HSB nu este necesar. Dac se folosesc, lmpile UV trebuie
curate sptmnal pentru a nltura praful care reduce efectul germicid al radiaiei. Intensitatea
radiaiei UV trebuie vericat la ecare recerticare a hotei, pentru a vedea dac emisia de UV este
corespunztoare. Lmpile UV trebuie nchise n timpul lucrului sau cnd exist persoane n ncpere,
pentru protecia ochilor i a pielii de expuneri nedorite, dar pot lsate s funcioneze dac panoul frontal
transparent este nchis.
Flacra deschis
Trebuie evitat folosirea crii deschise n mediul aproape steril din interiorul HSB. Aceasta
poate modica traseul uxului de aer i poate periculoas atunci cnd se utilizeaza substane volatile
sau inamabile. De asemenea, utilizarea crii deschise poate afecta ltrele HEPA. Pentru a steriliza
ansele bacteriologice, exist micro-arztoare electrice sau cu gaz.
Scurgerile / stropirile
Instruciunile privind conduita de urmat n cazul producerii unor scurgeri sau stropiri cu lichide
contaminate trebuie citite i nsuite de ntregul personal al laboratorului; un exemplar va aat la loc
vizibil. n cazul n care are loc o scurgere de material contaminat n interiorul HSB, curarea trebuie
nceput imediat, n timp ce hota continu s funcioneze. Se va folosi un dezinfectant ecace, care va
aplicat n aa fel nct generarea de aerosoli s e ct mai redus. Toate materialele care au venit n
contact cu substana vrsat trebuie dezinfectate i/sau autoclavate.
Certicarea
Funcionalitatea i integritatea ecrei HSB trebuie supus unui control de certicare dup
standarde naionale i internaionale, att n momentul instalrii, ct i ulterior, n mod periodic, control
fcut de tehnicieni calicai (autorizai), n conformitate cu instruciunile productorului. Evaluarea
ecacitii hotei trebuie s cuprind : teste de integritate a hotei, a ltrelor HEPA, prolul vitezei uxului
descendent de aer i cel al vitezei aerului care ptrunde, raportul presiune negativ/ventilaie, analiza cu
fum a uxului de aer, vericarea sistemelor de alarm i de interblocare. Pot fcute i testri opionale
pentru scurgeri de curent, intensitatea luminii, intensitatea radiaiilor UV, nivelul zgomotelor i vibraiilor.
Aceste teste necesit echipamente i aptitudini speciale, de aceea este recomandat ca ele s e executate
de personal calicat.
54
Curarea i dezinfecia
Toate obiectele din interiorul HSB, inclusiv aparatura, trebuie decontaminate la suprafa i
scoase din hot dup terminarea lucrului, deoarece resturile de medii de cultur favorizeaz creterea
germenilor.
Suprafeele interioare ale HSB trebuie decontaminate nainte i dup ecare utilizare.
Suprafaa de lucru i pereii interiori trebuie terse cu un dezinfectant care s distrug toate
microorganismele care s-ar putea aa n hot. La sfritul zilei de lucru, decontaminarea nal a
suprafeelor trebuie s includ i pe cea a suprafeei de lucru, a prilor laterale i posterioare i a feei
interioare a panoului frontal transparent. Se va folosi o soluie clorigen sau alcool de 70, dac sunt
active pe microorganismele manipulate. Dac se folosete un dezinfectant coroziv, cum sunt soluiile
clorigene, este necesar o cltire ulterioar cu ap steril.
Se recomand ca HSB s e lsat n funciune. Dac nu, nainte de a oprit, trebuie lsat s
funcioneze cel puin 5 minute pentru evacuarea aerului contaminat din interior.
Decontaminarea
HSB trebuie decontaminate nainte de operaiuni precum schimbarea ltrelor sau mutarea
hotei. Cea mai utilizat metod de decontaminare este cea prin fumigaie cu formaldehid gazoas.
Decontaminarea HSB trebuie realizat de ctre personal calicat.
Echipamentul de protecie individual

Echipamentele de protecie trebuie purtate ntotdeauna cnd se lucreaz la HSB. n laboratoarele
cu Nivel de Biosiguran 1 i 2 se pot folosi halate obinuite. n laboratoarele cu Nivel de Biosiguran 3 i
4, se asigur o protecie bun cu halate cu faa din material rezistent, care se ncheie la spate (cu excepia
laboratoarelor cu izolare n costum protector). Mnuile se vor purta peste mnecile halatului i nu sub
ele. Pentru protecia ncheieturilor minii se recomand purtarea de halate cu manete elastice. Pentru
unele tehnici este necesar portul mtii i al ochelarilor de protecie.
Alarme
HSB pot echipate cu unul sau dou tipuri de alarme. Alarma conectat cu panoul frontal
transparent se gsete numai la HSB cu panou mobil. Alarma se declaneaz ori de cte ori operatorul
a aezat panoul ntr-o poziie incorect. Aciunea corectiv const n poziionarea corect a panoului.
Alarma acionat de uxul de aer semnaleaz perturbarea uxului normal de aer n hot, care poate
reprezenta un pericol imediat pentru operator sau pentru produs. Cnd se declaneaz acest din urm
tip de alarm, se oprete imediat lucrul i se anun responsabilul de laborator. Detalii suplimentare se
gsesc n crile tehnice ale hotelor. Personalul trebuie instruit i asupra acestor aspecte.
Informaii suplimentare
Alegerea tipului adecvat de HSB, instalarea, folosirea corespunztoare i certicarea anual
a operrii HSB sunt procese complexe. Se recomand ca aceste procese s se desfoare sub
supravegherea unor specialiti bine instruii i cu experien n materie de biosiguran; acetia trebuie
s e familiarizai cu literatura recomandat n capitolul de Bibliograe i trebuie s fost instruii asupra
tuturor aspectelor privind HSB. Operatorii trebuie s urmat forme speciale de instruire pentru operarea
i utilizarea HSB.
55
56
11. ECHIPAMENTE DE SIGURAN
11. Echipamente de siguran
Deoarece aerosolii reprezint o important surs de infecie, trebuie luate msuri pentru a reduce
formarea i rspndirea acestora. Aerosoli periculoi pot aprea n cursul unor variate operaiuni de
laborator, de ex: amestecare, triturare, agitare, ultrasonare, centrifugare de material infecios. Ca urmare,
chiar dac se folosete echipament de siguran, se recomand ca aceste operaiuni s se efectueze, pe
ct posibil, ntr-o HSB (Capitolul 7). Datele privind HSB, utilizarea i testarea acestora, sunt prezentate n
Capitolul 10. Simpla utilizare a echipamentului de siguran confer protecie doar dac operatorul este
bine instruit i folosete tehnici corecte. Echipamentul trebuie vericat cu regularitate pentru a garanta
performane constante de protecie.
Tabelul 10 conine o list a echipamentelor destinate eliminrii sau reducerii unor pericole i
denete succint caracteristicile lor de siguran. Detalii suplimentare pentru multe din aceste echipamente
sunt redate n paginile urmtoare. Alte informaii privind utilizarea corect a acestor echipamente se
regsesc n Capitolul 12.
Informaii referitoare la echipamentele i operaiunile care pot genera pericole sunt prezentate n
Anexa 4.
Tabel 10. Echipamente de biosiguran
Echipament
Hot de securitate
biologic
(HSB)
Clasa I
Pericole vizate
Clasa II
Aerosoli i
stropi
Clasa III
Aerosoli i
stropi
Izolator din folie

exibil cu presiune
negativ
Ecran de protecie
Aerosoli i
stropi
Dispozitive de
pipetare
Aerosoli i
stropi
Stropi de substane
chimice
Pipetarea cu gura,
(ingestia de patogeni,
inhalarea de aerosoli
produi prin aspirarea
cu pipeta, picurarea de
lichid, contaminarea
captului de suciune al
pipetei )
Caracteristici care confer siguran

Flux minim de aer orientat spre interiorul hotei
de la nivelul fantei de acces pentru lucru (vitez
redus de acces frontal al aerului)
Filtrare adecvat a aerului eliminat
Nu asigura protecia produsului
Flux minim de aer orientat spre interiorul hotei
de la nivelul fantei de acces pentru lucru (viteza
redus de acces frontal al aerului)
Filtrare adecvat a aerului eliminat
Asigur protecia produsului
Nivel maxim de securizare
Asigur protecia produsului dac este prevzut
cu ux de aer laminar
Nivel maxim de securizare
Ecran ntre operator i aria de lucru
Uor de folosit.
Controlul contaminrii captului de suciune
al pipetei, protejnd utilizatorul, dispozitivul de
pipetare i instalaia de vacuum.
Se poate steriliza.
Evit scurgerile din pipet.
57
Echipament
Microarztoare
pentru anse
Anse de unic
folosin
Pericole vizate
Stropi din ansele de
transfer
Recipiente sigure
pentru colectarea
i transportul
materialelor
infecioase n
vederea sterilizrii
Containere pentru
obiecte tietoare/
neptoare
Containere de
transport ntre
laboratoare sau
instituii.
Aerosoli, mprtiere i
scurgere
Autoclave manuale
sau automate
Materiale infecioase
(decontaminare n
vederea eliminrii sau
reutilizrii)
Aerosoli i scurgeri
Recipiente cu capac
nurubat
Dispozitiv de
protecie a instalaiei
de vid

Arztorul cu gaz sau electric este introdus ntr-un
tub de sticl sau ceramic, deschis la gur
Ansele de unic folosin nu impun tratament
termic
Recipient impermeabil nchis cu capac
Robustee mecanic
Autoclavabil
Rni prin nepare.
Autoclavabil.
Robust, rezistent la nepare/tiere
Contaminare
accidental cu
microorganisme.
Robust.
Containere primare i secundare impermeabile
pentru lichide
Conin materiale absorbante pentru reinerea
lichidelor vrsate.
Model aprobat
Sterilizare ecace prin cldur
Contaminarea cu
aerosoli sau lichide a
sistemului de vacuum al
laboratorului
Securizare ecace
Filtre tip cartu pentru a mpiedica trecerea de
aerosoli (mrimea particulelor cu dimensiunea de
0,45 m).
Recipiente cu dezinfectante adecvate, utilizate
drept capcane de vid . Dispozitiv de cauciuc
(supap) pentru a nchide automat vacuumul cnd
recipientul este plin.
ntreg dispozitivul este autoclavabil
11.1. Izolatoare din folie exibil cu presiune negativ

Izolatorul din folie exibil cu presiune negativ este un dispozitiv de izolare primar de sine stttor,
care confer protecie maxim mpotriva materialelor biologice periculoase. Poate montat pe un suport
mobil. Spaiul de lucru este n ntregime nchis ntr-un nvelis din PVC transparent suspendat de un cadru
de oel. n interiorul izolatorului se menine permanent o presiune inferioar celei atmosferice. Admisia
aerului se face printr-un ltru HEPA i evacuarea prin 2 ltre HEPA, evitndu-se astfel necesitatea evacurii
aerului n afara cldirii. Izolatorul poate dotat cu incubator, microscop i alte echipamente (centrifugi,
cuti pentru animale, surse de cldur, etc). Materialele sunt introduse i scoase din izolator prin ci
speciale de acces pentru materiale i probe, fr a compromite sigurana microbiologic.
Manipularea n interiorul izolatorului se face prin intermediul unor mneci cu mnui prevzute la
rndul lor cu mnui de unic folosin.
Presiunea din interiorul izolatorului este monitorizat cu ajutorul unui manometru.
Acest tip de izolator este folosit pentru lucrul cu microorganisme periculoase (Grupul de Risc 3 sau 4) pe
teren, acolo unde nu exist posibilitatea instalrii i utilizrii unei HSB convenionale.
58
11.2. Dispozitive de pipetare

Dispozitivul de pipetare trebuie folosit ntotdeauna atunci cnd se pipeteaz. Este strict interzis
pipetarea cu gura.
Importana dispozitivelor de pipetare nu trebuie subapreciat. Cele mai frecvente pericole asociate
cu pipetarea sunt rezultatul aspirrii cu gura. Aspirarea i ingestia de materiale sunt cunoscute a cauza
a numeroase infecii de laborator.
Germeni patogeni mai pot transferai i prin degete contaminate puse pe captul de suciune al pipetei.
Un risc mai puin cunoscut este inhalarea de aerosoli rezultai prin aspirare. Un dop de vat nu constituie
un ltru microbian ecace la presiune negativ sau pozitiv i anumite particule pot trece prin el. Un dop
de vat prea dens poate determina o pipetare violent, urmat de aspirarea dopului, a unor aerosoli i
chiar a lichidului. Ingestia de patogeni este evitat prin folosirea dispozitivelor de pipetare.
Aerosoli se mai pot forma i prin picurarea unui lichid din pipet pe suprafaa de lucru, prin
aspirare i barbotare sau cnd se su ultima pictur din pipet. Inhalarea aerosolilor a cror producere
nu poate evitat n cursul operaiunilor de pipetare poate ns prevenit prin lucrul ntr-o HSB.
Dispozitivele pentru pipetare trebuie alese cu grij. Tipul utilizat nu trebuie s genereze riscuri
suplimentare i trebuie s e uor de sterilizat i curat. Conuri de prelevare prevzute cu ltru trebuie
folosite ori de cte ori se manipuleaz microorganisme i culturi celulare.
Pipetele cu capetele de suciune ciobite sau rupte nu trebuie folosite deoarece deterioreaz lcaul
dispozitivelor de pipetare i prin aceasta genereaz pericole.
11.3. Omogenizatoare, agitatoare, mixere i aparate de ultrasonare
Mixerele de buctrie nu sunt etane i elibereaz aerosoli. Se vor folosi doar cele special
concepute pentru uzul n laboratoare, care prin construcie reduc sau evit eliberarea de aerosoli.
Omogenizatoarele nchise de tip stomacher disponibile n prezent pentru prelucrarea de volume mici
sau mari, pot genera i ele aerosoli.
Omogenizatoarele folosite pentru microorganisme din Grupul de Risc 3 vor ncrcate i deschise
numai n HSB. Aparatele de ultrasonare pot genera, de asemenea, aerosoli. Ele trebuie manipulate n
HSB sau acoperite/ecranate n timpul folosirii. Capacele i exteriorul aparatelor de ultrasonare trebuie
decontaminate dup folosire.
11.4. Anse de unic folosin
Avantajul anselor de unic folosin este c nu trebuie sterilizate i pot folosite n HSB unde
becurile Bunsen i microarztoarele perturb uxul de aer.
Dup folosire, ansele trebuie plasate n dezinfectant i evacuate ca orice material contaminat
(vezi Capitolul 3).
11.5. Microarztoare
Microarztoarele cu gaz sau electrice sunt prevzute cu ecrane de sticl borosilicat sau
ceramice, ceea ce reduce formarea stropilor i dispersia materialului infecios n momentul sterilizrii
anselor. Microarztoarele modic totui circuitul aerului i de aceea trebuie plasate n HSB ct mai n
spate.
59
11.6. mbrcminte i echipament de protecie individual

mbrcmintea i echipamentul de protecie individual constituie o barier care reduce riscul
de expunere la aerosoli, stropiri i inoculri accidentale i vor alese n funcie de specicul activitii
desfurate. mbrcmintea de protecie trebuie purtat ori de cte ori se lucreaz n laborator. La
prsirea laboratorului, mbrcmintea de protecie se ndeprteaz i se spal minile.
Tabelul 11 prezint cteva tipuri de echipamente de protecie individual folosite n laborator i
protecia pe care o confer.
Tabel 11. Echipament de protecie personal
Echipament
Pericole vizate
Halate, costume
i salopete de
laborator
Contaminarea hainelor
ncheiate la spate.
S acopere hainele de strad
oruri de plastic
Contaminarea hainelor
Impermeabile pentru lichide
nclminte
Impact i stropire
Fr decupare n fa
Ochelari de
protecie
Impact i stropire
Lentile rezistente la impact (pot optic corectoare sau

aplicate peste ochelari)
Aprtori laterale
Ochelari de lucru
Impact
Lentile rezistente la impact, optic corectoare

Aprtori laterale
Ecrane
protectoare
pentru fa
Impact i stropire
S protejeze ntreaga fa
S e uor de ndeprtat n caz de accident
Dispozitive
de protecie
respiratorie
Inhalare de aerosoli
Modele variate: de unic folosin ; puricatoare de

aer ce acoper jumtate sau ntreaga fa ; masc sau
glug cu puricator de aer asistat mecanic; aparat de
respiraie asistat
Mnui
Contact direct cu
microorganismele
De unic folosin, avizate pentru uz microbiologic,

confecionate din latex, vinil sau nitril
Protecia minii
Tiere
Plas metalic
mbrcminte de laborator, halate, oruri

Halatele de laborator ar trebui s se ncheie pn sus. Modelele de halate cu mnec lung,
nchise la spate i salopetele confer o protecie mai bun dect halatele i bluzele obinuite i sunt de
preferat n laboratoarele de microbiologie sau pentru lucrul la HSB. orurile purtate peste halate ofer o
protecie suplimentar fa de stropirea cu substane chimice sau materiale biologice, cum ar snge sau
culturi n mediu lichid. Trebuie prevzut o spltorie pentru echipamentul de lucru, situat n laborator
sau n vecintatea acestuia.
Ochelari de protecie, ochelari de lucru i ecrane protectoare pentru fa
Alegerea echipamentului de protejare a ochilor sau a feei depinde de activitatea desfurat.
Ochelarii de lucru cu sau fr dioptrii vor confecionai cu rame speciale n care lentilele se monteaz
60
numai dinspre partea anterioar; lentilele sunt confecionate din material incasabil ind curbate sau cu
aprtori laterale. Ochelarii de protecie ar trebui purtai peste ochelarii de vedere sau peste lentilele
de contact, care nu confer protecie mpotriva pericolelor biologice sau chimice. Ecranele pentru fa
(vizoare) sunt confecionate din material plastic incasabil, protejeaz ntreaga fa i se xeaz pe cap cu
o band sau bonet.
Dispozitive de protecie respiratorie
Protecia respiratorie este necesar cnd se execut proceduri cu mare periculozitate
(ex. curarea unei deversri de material infecios).
Alegerea tipului de dispozitiv depinde de tipul de pericol. Exist dispozitive la care se pot monta
diferite tipuri de ltre : pentru protecie mpotriva diferitelor gaze, vapori, particule sau microorganisme.
Este absolut necesar ca ltrul s e montat la dispozitivul de protecie respiratorie potrivit.
Pentru a obine o protecie maxim, dispozitivul ar trebui adaptat pentru faa ecrei persoane
i testat pentru ecacitate. Aparatele de asisten respiratorie cu containere proprii, cu butelie de aer,
ofer protecie total. Mtile de tip chirurgical sunt utile numai pentru protecia pacientului, dar nu ofer
protecie operatorului. Pentru protecia mpotriva agenilor biologici au fost concepute i dispozitive de
unic folosin (ISO 13.340.30).
Dispozitivele de protecie respiratorie nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Mnui
Minile pot contaminate n timpul lucrului n laborator. De asemenea pot rnite de obiecte
ascuite. Pentru munca obinuit de laborator precum i pentru manipularea de ageni infecioi, snge
i uide biologice, se folosesc mnui chirurgicale de unic folosin, avizate pentru uz microbiologic,
confecionate din latex, vinil sau nitril. Pot folosite i mnui reutilizabile, dar trebuie acordat atenie
splrii, scoaterii, currii i dezinfeciei lor corecte.
Mnuile se scot i minile se spal bine dup manipularea de material infecios, dup lucrul la
o HSB sau nainte de prsirea laboratorului. Mnuile de unic folosin utilizate se ndeprteaz odat
cu deeurile infecioase.
Au fost semnalate reacii alergice de tip dermatit i de hipersensibilitate imediat la personalul
din laborator i la ali lucrtori care au purtat mnui din latex, mai ales din cele cu pudr. De aceea ar
trebui s e disponibile i alte tipuri de mnui dect cele din latex cu pudr.
Mnuile din plas de oel inoxidabil ar trebui folosite cnd exist o expunere potenial la
instrumente tioase, ex. examinri postmortem. Astfel de mnui protejeaz mpotriva tierii, dar nu i a
neprii.
Mnuile nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Pentru alte informaii consultai indicaiile bibliograce 12, 17 i 18.
61
62
12. TEHNICI DE LABORATOR
12. Tehnici de laborator
Eroarea uman, tehnicile defectuoase de laborator i folosirea incorect a echipamentelor sunt

cauzele majoritii accidentelor de laborator i infeciilor aprute la locul de munc. Acest capitol ofer un
compendiu de metode tehnice care sunt indicate pentru a evita sau minimaliza problemele de aceast
natur cel mai frecvent raportate.
12.1. Manipularea n siguran a probelor n laborator
Recoltarea, transportul i manipularea necorespunztoare a probelor n laborator prezint risc de
infecie pentru personalul implicat.
Containerele pentru probe
Containerele pentru probe pot din sticl sau preferabil din plastic. Ele trebuie s e rezistente
i nu trebuie s permit scurgerea materialului din ele cnd capacul sau dopul este corect aplicat. Nimic
din materialul recoltat nu trebuie s rmn n afara containerului. Containerele trebuie corect etichetate
pentru o identicare uoar. Documentele de nsoire nu trebuie nfurate n jurul containerului, ci plasate
separat, preferabil ntr-un nveli impermeabil.
Transportul probelor n laborator
Pentru evitarea scurgerilor accidentale sau a vrsrii probelor, trebuie utilizate containere
secundare, cum sunt cutiile cu stative, astfel nct recipientele cu probe s rmn n picioare atunci
cnd containerele sunt manipulate corect. Containerele secundare pot din metal sau plastic, trebuie
s e autoclavabile sau s e rezistente la aciunea dezinfectanilor chimici, iar capacul ar trebui s e
prevzut cu o garnitur. Ele trebuie decontaminate regulat.
Primirea probelor
Laboratorul care primete un mare numr de probe trebuie s aib o ncpere separat sau un
spaiu special pentru acest scop.
Deschiderea pachetelor
Personalul care primete i despacheteaz probele trebuie s e contient de potenialul pericol
asupra strii de sntate i trebuie instruit s adopte precauiile standard (2), n special cnd se confrunt
cu spargerea sau vrsarea containerelor. Containerele primare cu probe ar trebui deschise ntr-o HSB.
Trebuie s existe dezinfectante la ndemn.
12.2. Utilizarea pipetelor i a dispozitivelor de pipetare
1. Dispozitivul de pipetare trebuie utilizat ntotdeauna. Pipetarea cu gura este interzis.
2. Toate pipetele trebuie s aib ltru de vat pentru a reduce contaminarea dispozitivului de pipetare.
3. Nu trebuie suat niciodat ntr-un lichid care conine ageni infecioi.
4. Materialul infecios nu trebuie niciodat amestecat prin aspirare i expulzare alternant, prin pipet
5. Lichidele nu trebuie niciodat expulzate forat din pipete.
6. Pipetele gradate neterminal sunt preferabile altor tipuri de pipete deoarece nu necesit expulzarea
ultimei picturi.
63
7. Pipetele contaminate vor imersate complet ntr-un dezinfectant adecvat, aat ntr-un container incasabil.
Ele trebuie lsate n dezinfectant atta timp ct este necesar nainte de a scoase din laborator.
8. Containerul pentru pipete folosite trebuie plasat n interiorul HSB, nu n afara ei.
9. Seringile cu ace hipodermice nu trebuie utilizate pentru pipetare.
10. Trebuie utilizate dispozitive speciale pentru deschiderea acoanelor prevzute cu capsule cu septuri
de cauciuc care s permit apoi utilizarea pipetelor, evitndu-se utilizarea n acest scop a acelor
hipodermice i a seringilor.
11. Pentru a evita dispersia picturilor de material infecios din pipet, pe suprafaa de lucru va aezat
un material absorbant ; dup utilizare acesta va evacuat ca material infecios.
12.3. Evitarea dispersiei materialului infecios
1. Pentru evitarea pierderii premature a ncrcturii sale, inelul ansei bacteriologice trebuie s aib un
diametru de 2-3 mm i trebuie s e complet nchis. Firul ansei nu trebuie s e mai lung de 6 cm
pentru a reduce vibraia.
2. Riscul stropirii cu material infecios cu ocazia sterilizrii ansei la acra becului Bunsen poate
evitat prin utilizarea pentru sterilizare a unui microarztor electric. Sunt de preferat ansele de unic
folosin, care nu au nevoie de sterilizare.
3. Trebuie luate msuri de precauie atunci cnd se usuc probele de sput pentru a evita formarea de
aerosoli.
4. Probele i culturile a cror utilizare s-a ncheiat i care trebuie autoclavate i / sau evacuate, trebuie
plasate n containere impermeabile, ex. saci speciali pentru deeuri de laborator. Partea de sus a
sacilor trebuie nchis etan (ex. cu band adeziv martor de autoclavare) nainte de plasarea lor n
containerele pentru deeuri infecioase.
5. Locul de munc trebuie decontaminat cu dezinfectante corespunztoare la sfritul ecrei etape i
zile de lucru.
Pentru informaii suplimentare vezi referina (12).
12.4. Utilizarea Hotelor de Siguran Biologic
1. Modul de utilizare i limitele de siguran ale HSB trebuie aduse la cunotina tuturor utilizatorilor
poteniali (vezi capitolul 10) pe baza standardelor naionale i a literaturii de specialitate. Protocoale
scrise sau ghiduri de operare/de siguran trebuie puse la dispoziia personalului. Trebuie s e clar,
n mod particular, c HSB nu protejeaz pe cel ce lucreaz n caz de spargere, vrsare sau tehnici
greite de manipulare.
2. HSB trebuie utilizat numai dac funcioneaz corect.
3. Panoul frontal transparent de sticl nu trebuie deschis n timpul lucrului.
4. Aparatele i volumele de materiale utilizate n HSB trebuie s e reduse la minimum. Circulaia aerului
n partea din spate a incintei HSB nu trebuie blocat.
5. Becurile Bunsen nu trebuie utilizate n hot. Cldura produs perturb uxul de aer i poate avaria ltrele.
Microarztoarele electrice sunt permise, dar ansele de unic ntrebuinare utilizare sunt de preferat.
6. ntreaga activitate din HSB trebuie s se desfoare n centrul sau n partea posterioar a ariei de
lucru, bine vizibil prin panoul frontal de sticl.
7. Tracul n spatele operatorului trebuie s e minim.
8. Operatorul nu trebuie s perturbe uxul de aer prin micri repetate de du-te vino ale braelor.
9. Grilele frontale de admisie a aerului nu trebuie blocate cu foi, caiete, pipete sau alte materiale
deoarece aceste ntreruperi ale uxului de aer pot determina contaminarea materialului i expunerea
operatorului.
10. Suprafaa HSB trebuie tears cu dezinfectante adecvate dup ecare etap de lucru i la sfritul
programului de lucru.
64
11. Ventilarea HSB trebuie pornit cu minimum 5 minute nainte de nceperea lucrului i oprit dup
minimum acelai interval de la terminarea lucrului n HSB.
12. Documentele de lucru nu trebuie puse niciodat n interiorul HSB.
Pentru alte informaii vezi capitolul 10.
12.5. Evitarea ingestiei de material infecios i a contactului cu pielea i ochii
1. Particulele mari i picturile cu diametrul mai mare de 5 m, aprute n timpul manipulrii materialului
microbiologic, trebuie ndeprtate rapid de pe suprafaa de lucru i de pe minile operatorului. Trebuie
purtate mnui de unic folosin. Lucrtorii din laborator trebuie s evite atingerea gurii, ochilor i a
feei.
2. Este interzis depozitarea i consumul de alimente i butur n laborator.
3. Este interzis introducerea n gur a oricror obiecte (creioane, pixuri, gum de mestecat)
4. Este interzis aplicarea cosmeticelor n laborator;
5. Faa, ochii i gura trebuie protejate cu un ecran sau prin alte modaliti, n timpul oricrei operaii care
se poate solda cu mprocarea de material infecios.
12.6. Evitarea injectrii de material infecios
1. Inocularea accidental ca urmare a rnilor provocate de sticla spart sau ciobit, poate evitat prin
creterea ateniei n timpul procedurilor de lucru. Obiectele din sticl ar trebui nlocuite cu cele din
material plastic, ori de cte ori este posibil.
2. Injectarea se poate produce accidental prin nepare cu ace de sering, pipete Pasteur din sticl i
cioburi de sticl.
3. Accidentele prin nepare cu acul pot reduse prin: a) reducerea utilizrii seringilor i acelor (exist
dispozitive simple pentru deschiderea acoanelor nchise cu capsul i dop de cauciuc, astfel nct
pot folosite pipete n locul seringilor cu ac) ; b) utilizarea unor dispozitive de siguran mpotriva
neprii atunci cnd seringile i acele sunt absolut necesare.
4. Acele nu trebuie niciodat reacoperite cu capacul de protecie. Ele nu se desprind de sering ci se
arunc mpreun cu seringa ntr-un container special, rezistent la nepare, prevzut cu capac.
5. Pipetele Pasteur de plastic ar trebui s nlocuiasc pipetele de sticl.
12.7. Separarea serului
1. Aceast operaiune trebuie efectuat numai de personal bine instruit / calicat.
2. Trebuie folosite mnui i trebuie protejai ochii i mucoasele.
3. Aerosolii i stropirile pot evitate sau reduse la minim numai printr-o bun tehnic de laborator.
Sngele i serul trebuie pipetate cu atenie. Este interzis pipetarea cu gura.
4. Dup utilizare, pipetele trebuie imersate complet n dezinfectantul corespunztor i meninute ct
este necesar, nainte de evacuare sau splare i sterilizare pentru reutilizare.
5. Tuburile (vacutainerele) care au coninut probele utilizate, coninnd cheaguri de snge, etc trebuie
introduse (cu dopul pus) ntr-un container impermeabil n vederea autoclavrii i/sau incinerrii.
6. Trebuie s existe la ndemn dezinfectante adecvate pentru curarea stropilor i lichidelor vrsate
(vezi Capitolul 14).
12.8. Utilizarea centrifugii
1. Performanele mecanice bune sunt o condiie primordial pentru utilizarea centrifugilor n condiii de
siguran microbiologic.
2. Centrifuga trebuie utilizat cu respectarea instruciunilor productorului.
65
3. Centrifuga trebuie plasat astfel nct lucrtorii s poat vedea n interiorul cuvei acesteia pentru a
putea xa corect suporturile pentru cupe i cupele cu probe.
4. Tuburile de centrifug i containerele cu probe care urmeaz a centrifugate trebuie s e confectionae din
sticl groas sau preferabil din plastic i trebuie vericate pentru absena defectelor nainte de utilizare.
5. Cupele de centrifug i containerele cu probe trebuie bine astupate/acoperite (de preferat cu capace
cu let).
6. Cupele trebuie ncrcate, echilibrate, nchise i deschise ntr-o HSB.
7. Suporii pentru cupele de centrifug trebuie grupai cte doi, dup greutate i echilibrai corect cu
cupele n poziie.
8. Trebuie respectat (conform instruciunilor din manualul de utilizare) spaiul dintre nivelul lichidului
centrifugat i gura cupei.
9. Apa distilat sau alcoolul (propanol 70%) pot utilizate pentru echilibrarea cupelor goale. Soluiile
saline (ser ziologic) sau de hipoclorit nu pot utilizate deoarece sunt corozive.
10. Numai tuburile de centrifug sau supori pentru cupe cu nchidere etan (cupe de siguran) trebuie
utilizate cnd se lucreaz cu microorganisme din grupele de risc 3 i 4.
11. La folosirea rotoarelor de centrifug angulare trebuie avut grij ca tuburile s nu e suprancrcate
pentru a evita scurgerile.
12. Cuva centrifugii trebuie controlat zilnic, pentru a verica eventuala apariie de urme de culoare
sau murdrie la nivelul corespunznd rotorului. n caz de murdrie evident, trebuie reevaluate
protocoalele de centrifugare.
13. Rotorul centrifugii i suporii pentru cupe trebuie examinate zilnic pentru a depista eventualele corodri
sau suri.
14. Rotorul, suporturile pentru cupe i cuva centrifugii trebuie decontaminate dup ecare utilizare.
15. Dup utilizarea centrifugii, suporii pentru cupe trebuie pstrai (cu deschiderea n jos) pentru scurgerea
lichidului de echilibrare.
16. n timpul funcionrii unei centrifugi pot ejectai din aceasta aerosoli infecioi. Aceste particule
circul cu vitez prea mare pentru a putea reinute de uxul de aer al HSB dac centrifuga este
plasat ntr-o hot tradiional cu deschidere frontal de Clasa I sau de Clasa II. Izolarea centrifugilor
n HSB de Clasa III previne dispersarea n afara hotei a aerosolilor produi. Totui, o tehnic corect
de centrifugare i folosirea cupelor sau suporilor cu capace etane asigur o protecie adecvat
mpotriva aerosolilor i particulelor infecioase dispersate.
12.9. Utilizarea omogenizatoarelor, agitatoarelor, mixerelor/blenderelor i aparatelor de
ultrasonare
1. Omogenizatoarele obinuite (mixere de buctrie) nu pot utilizate n laborator deoarece pot genera
scurgeri i aerosoli. Blenderele i dispozitivele de tiere special concepute pentru laborator sunt mai
sigure.
2. Cupele si capacele sau sticlele trebuie pstrate n bune condiii, fr defecte. Capacele trebuie s
aib garnitura bun i s poat bine nletate.
3. Presiunea n vas crete n timpul operaiilor de omogenizare, amestecare i ultrasonare. Aerosolii
coninnd material infecios se pot strecura ntre capac i vas. Vasele din plastic, n special cele din
politetrauoroetilen (PTFE), sunt recomandate deoarece sticla se poate sparge, elibernd material
infecios i poate rni operatorul.
4. n timpul funcionrii, omogenizatoarele, agitatoarele i aparatele de ultrasonare trebuie acoperite cu
un ecran/clopot rezistent, din plastic transparent, ce se dezinfecteaz dup utilizare. Atunci cnd este
posibil, aceste aparate trebuie utilizate sub ecranele lor de plastic, n HSB.
5. La sfritul operaiilor, containerele trebuie deschise ntr-o HSB.
6. Cei ce lucreaz cu aparate de ultrasonare vor utiliza cti de protecie.
66
12.7. Utilizarea mojarelor i a omogenizatoarelor de esuturi

1. Dac se utilizeaz mojare/omogenizatoare din porelan/sticl, mna cu care se in trebuie protejat
cu mnu i un tampon de vat sau orice alt material absorbant. Mojarele din plastic (PTFE) sunt
mai sigure.
2. Mojararea i deschiderea omogenizatoarelor trebuie efectuat n HSB.
12.8. Utilizarea i ntreinerea frigiderelor i congelatoarelor
1. Frigiderele, congelatoarele i lzile cu ghea carbonic trebuie dezgheate i curate periodic, iar
olele, eprubetele etc. care s-au spart n timpul stocrii trebuie ndeprtate. n timpul currii se vor
folosi mti de protecie i mnui groase de cauciuc. Dup curare, suprafeele interioare trebuie
dezinfectate.
2. Toate containerele pstrate n frigider trebuie inscripionate clar cu denumirea tiinic a materialului
coninut, data stocrii i numele celui care a fcut stocarea. Materialele nvechite i neinscripionate
vor autoclavate i ndeprtate.
3. Trebuie inut un inventar al tuturor materialelor pstrate n congelator.
4. Soluiile inamabile nu trebuie stocate n frigider, dac acesta nu este rezistent la explozie.. Notie de
avertizare n acest sens trebuie aate pe ua frigiderului.
12.9. Deschiderea olelor coninnd material infecios liolizat
Fiolele care conin material infecios liolizat trebuie deschise cu precauie deoarece coninutul
poate s e la o presiune sczut i deschiderea poate provoca o ptrundere brusc de aer n interiorul
olei, cu dispersia unei pri din coninut n atmosfera nconjurtoare. Fiolele trebuie deschise ntotdeauna
ntr-o HSB.
Sunt recomandate urmtoarele proceduri pentru deschiderea olelor:
1. nti se decontamineaz suprafaa exterioar a olei.
2. Se pilete gtul olei la nivelul mijlocului dopului de bumbac sau celuloz dac ola e prevzut cu
un astfel de dop.
3. Fiola se ine n vat mbibat cu alcool pentru a proteja mna de rnire, n momentul deschiderii
olei.
4. Vrful olei (cu eventualul dop) se ndeprteaz cu atenie i se consider a material contaminat.
5. Dac dopul rmne n interior se ndeprteaz cu o pens steril.
6. Se adaug lichidul de reconstituire ncet pentru a mpiedica formarea spumei n ol.
12.10. Pstrarea olelor coninnd material infecios
Fiolele coninnd material infecios nu trebuie niciodat introduse n azot lichid pentru c cele
surate sau nchise imperfect pot exploda la scoatere. Dac este recomandat pstrarea la o temperatur
foarte joas, olele pot stocate numai n faza gazoas, deasupra azotului lichid. n caz contrar, materialul
infecios trebuie pstrat n congelatoare sau n ghea carbonic. Personalul de laborator trebuie s-i
protejeze ochii i minile cnd scoate olele stocate la temperatur joas.
Suprafaa olelor pstrate n acest mod trebuie dezinfectat cnd olele sunt scoase de la
conservare.
12.11. Precauii standard privind sngele i alte lichide biologice, esuturi, secreii sau excreii.
Precauiile standard (care includ precauiile universale [19]) sunt destinate reducerii riscului transmiterii
microorganismelor din surse de infecie att cunoscute ct i necunoscute (2).
67
Colectarea, etichetarea i transportul probelor

1. Precauiile universale trebuie respectate ntotdeauna: se va lucra de ecare dat cu mnui de
protecie.
2. Sngele trebuie recoltat de la pacieni i animale de ctre personal instruit.
3. Pentru ebotomie, acele clasice i sistemele cu sering trebuie nlocuite cu dispozitive de unic
folosin cu vid, care permit recoltarea direct a sngelui n recipiente nchise de transport sau de
cultur i care fac imposibil reutilizarea acului.
Tuburile trebuie plasate n containere speciale pentru transportul ctre laborator (vezi capitolul 15 pentru
cerinele de transport) i n cadrul laboratorului (vezi seciunea Transportul probelor n laborator din acest
capitol). Formularele de solicitare a prestaiilor de laborator trebuie plasate separat n containerul de
transport (n plicuri sau pungi impermeabile).
4. Personalul care face recepia probelor NU trebuie s deschid aceste plicuri .
Deschiderea tuburilor cu probe i repartizarea coninutului
1. Tuburile cu probe trebuie deschise ntr-o HSB .
2. Este obligatoriu s se foloseasc mnui. De asemenea, este recomandat protecia ochilor i a
mucoaselor (ochelari de protecie sau ecrane de protejare a feii).
3. mbrcmintea de protecie trebuie completat cu un or de plastic.
4. Dopul trebuie apucat printr-o bucat de hrtie sau tifon pentru a preveni mprocarea (stropirea).
Sticlria i obiectele tietoare/neptoare (acele, seringile, acele hipodermice, pipetele Pasteur)
Ori de cte ori este posibil, plasticul trebuie s nlocuiasc sticla. Vor folosite numai obiectele
din sticl special de laborator (borosilicat) i orice articol ciobit sau crpat trebuie nlturat.
Nu vor utilizate pentru pipetare acele de sering (vezi i seciunea Evitarea injectrii de
material infecios din acest capitol).
Lamele i frotiurile pentru microscopie
Fixarea i colorarea frotiurilor de snge, sput, materii fecale pentru microscopie nu omoar
obligatoriu toate organismele sau virusurile de pe frotiu. Aceste obiecte trebuie manipulate cu pensa,
depozitate corespunztor i decontaminate i/sau autoclavate naintea evacurii.
Echipamentul automatizat (aparate de ultrasonare, mixere, vortex-uri)
1. Echipamentul trebuie s e de tip nchis, pentru a preveni dispersia picturilor mici i a aerosolilor.
2. Reziduurile trebuie colectate n vase nchise n vederea autoclavrii i/sau evacurii.
3. Echipamentul trebuie dezinfectat dup ecare utilizare, urmnd instruciunile productorului.
esuturile
1. Formolul trebuie folosit ca xator.
2. Secionarea probelor congelate trebuie evitat. Dac este necesar, criostatul trebuie s e ecranat,
iar operatorul s poarte un ecran de protecie facial.
Pentru decontaminare, temperatura instrumentului trebuie s e ridicat la cel puin 20 Celsius.
Decontaminarea
Pentru decontaminare se recomand hipocloritul i dezinfectantele n concentraie mare.
Soluiile de hipoclorit proaspt preparate trebuie s conin clor 1 g/l pentru uz general i 5 g/l
pentru decontaminarea sngelui.
Glutaraldehida poate folosit pentru decontaminarea suprafeelor (vezi Capitolul 14).
68
12.12. Precauii privind materialele ce ar putea conine prioni

Prionii (desemnai i ca virusuri lente) sunt asociai cu encefalopatiile spongiforme transmisibile
(TSE), cum ar maladia Creutzfeldt-Jakob (CJD, inclusiv noua variant, sindromul Gerstmann
-Straussler Scheinker), insomnia letal familial i boala Kuru la om, Boala oii i caprei nebune,
encefalopatia spongiform bovin (BSE) i alte encefalopatii transmisibile la cprioare, elani i nurci.
Dei CJD se transmite la om, nu este dovedit apariia bolii n laborator ca urmare a manipulrii acestor
ageni infecioi. Totui sunt necesare precauii legate de manipularea materialului infecios sau potenial
infecios provenind de la oameni i animale.
Selectarea nivelului de biosiguran cnd se lucreaz cu materiale asociate TSE va depinde de
natura agentului i de probele de studiat i trebuie decis cu consultarea autoritii naionale. Concentraia
cea mai mare de prioni se gsete n esutul sistemului nervos central. Studii pe animale sugereaz c se
pot gsi concentraii ridicate de prioni i n splin, timus, noduli limfatici i plmni. Studii recente arat c
prionii din muchii scheletici i ai limbii pot prezenta de asemenea un risc infectios potenial.
Deoarece inactivarea complet a prionilor este greu de realizat, este important s se pun accent
pe folosirea instrumentarului de unic folosin ori de cte ori este posibil i s se foloseasc materiale de
unic folosin pentru protecia suprafeei de lucru a HSB.
Principala precauie este prevenirea ingestiei de material contaminat sau neparea pielii celor care
lucreaz n laborator.
Deoarece prionii nu sunt omori prin metodele obinuite de dezinfecie i sterilizare din
laborator, trebuie luate urmtoarele precauii suplimentare :
1. Folosirea de echipamente special destinate, care nu sunt folosite i n alte laboratoare, este insistent
recomandat.
2. Trebuie folosit mbrcminte de protecie de unic folosin (halate, oruri), precum i mnui
(pentru anatomopatologi mnui din plas de oel, ntre dou de cauciuc ).
3. Este insistent recomandat folosirea obiectelor de unic utilizare din plastic ce pot tratate i evacuate
ca deeuri uscate (vezi mai jos).
4. Dispozitivele de procesare a esuturilor nu se utilizeaz din cauza problemelor pe care le ridic
dezinfecia lor. n locul lor se utilizeaz borcane i pahare de plastic.
5. Toate manipulrile se fac n HSB.
6. Trebuie avut mult grij pentru evitarea producerii de aerosoli, ingestiei accidentale i tierii sau
neprii pielii.
7. esuturile xate cu formol trebuie considerate n continuare infecioase, chiar dup expunere
ndelungat la aciunea formolului.
8. Probele histologice coninnd prioni sunt n mare msur inactivate dup expunerea la acid formic
96% timp de 1or.
9. Deeurile, inclusiv mnuile, halatele i orurile de unic folosin, trebuie autoclavate folosind un
sterilizator cu aburi la 134-137C pentru un singur ciclu de 18 min sau 6 cicluri succesive a cte 3
min. ecare, apoi incinerate.
10. Instrumentarul reutilizabil (cum ar mnuile din plas de oel) trebuie colectate pentru
decontaminare.
11. Reziduurile lichide infecioase contaminate cu prioni trebuie tratate cu soluie de hipoclorit de sodiu
coninnd clor liber n concentraie nal de 20g/l (2%) timp de 1 or
12. Procedura de vaporizare cu paraformaldehid nu diminueaz titrul prionilor iar acetia sunt rezisteni
la radiaiile UV. Cu toate acestea, hota trebuie decontaminat prin metode standard (ex. formaldehid
gazoas) pentru inactivarea altor microorganisme ce pot prezente.
13. HSB contaminate cu prioni i celelalte suprafee pot decontaminate cu hipoclorit de sodiu 20g/l (2%)
timp de 1 or .
69
14. Filtrele HEPA trebuie incinerate la minimum 1000C dup scoatere. Aciunile recomandate nainte de
incinerare :
a. pulverizarea cu lac de pr spray a feei expuse a ltrului, nainte de a-l scoate ;
b. acoperirea ltrului cu un sac de plastic n momentul scoaterii ;
c. scoaterea ltrului HEPA din camera de lucru astfel nct restul hotei s nu e contaminat.
15. Instrumentarul trebuie inut n soluie de hipoclorit de sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%) timp de 1
or, apoi cltit bine cu ap naintea autoclavrii.
16. Instrumentarul ce nu poate autoclavat se cur prin splare repetat cu soluie de hipoclorit de
sodiu coninnd clor liber 20g/l (2%) timp de > 1 or. Cltirea instrumentarului este necesar pentru
ndeprtarea hipocloritului de sodiu rezidual.
Pentru orice alte informaii privind manipularea agenilor neconvenionali vezi referinele
12, 26 i 27.
70
13. PLANURI PENTRU INTERVENII N CAZ DE ACCIDENTE I MSURI DE URGEN
13. Planuri pentru intervenii n caz de accidente i

msuri de urgen
Fiecare laborator care lucreaz cu materiale infecioase trebuie s instituie msuri de siguran
adaptate gradului de periculozitate al organismelor i animalelor manipulate. Existena unui plan scris
pentru msurile de aplicat n caz de accidente n laborator sau n biobaz este o necesitate n orice
instituie care manipuleaz sau gzduiete microorganisme din grupurile de risc 3 sau 4 (laborator de
biosiguran securizat - nivelul 3 i laborator nalt securizat - nivelul 4). Autoritile sanitare locale i/sau
naionale trebuie s se implice n elaborarea planurilor de intervenie n caz de accidente.
13.1. Planul de intervenie n caz de accidente
Planul de intervenie n caz de accidente trebuie s cuprind proceduri operaionale privind:
1. precauii pentru prevenirea i limitarea urmrilor dezastrelor naturale, de exemplu: incendii, inundaii,
cutremure i explozii
2. evaluarea riscului de contaminare biologic
3. conducerea i coordonarea aciunilor n caz de expunere la accidente i al celor de decontaminare
4. evacuarea de urgen a populaiei i a animalelor din zona afectat
5. tratamentul medical de urgen al rniilor i al persoanelor expuse la infecii
6. supravegherea medical a persoanelor expuse
7. organizarea adecvat a spitalizrii persoanelor expuse
8. msurile de investigaie epidemiologic
9. continuarea operaiunilor dup incident
n alctuirea acestui plan trebuie incluse urmtoarele obiective:
1. identicarea organismelor cu risc crescut
2. localizarea ariilor de risc maxim, de exemplu: laboratoare, spaiile de depozitare, biobazele
3. identicarea personalului i a populaiei la risc
4. nominalizarea personalului cu responsabiliti i a atribuiilor acestuia, de ex: persoana responsabil
de biosiguran, personalul de securitate, autoritatea local de sntate, medici, microbiologi, veterinari,
epidemiologi i serviciile de pompieri i poliie
5. listele cu unitile medicale ce pot asigura tratamentul i izolarea persoanelor expuse sau infectate
6. transportul persoanelor expuse sau infectate
7. listele cu sursele de seruri imune, vaccinuri, medicamente, echipamente speciale i materiale consumabile
8. aprovizonarea cu echipament de urgen, de ex.: mbrcminte de protecie, dezinfectante, truse
personale pentru tratarea contaminrilor cu substante chimice i biologice, echipament i materiale
pentru decontaminare.
13.2. Msuri de urgen pentru laboratoarele de microbiologie
Rni prin nepare, tiere i zgriere
Individul afectat trebuie s scoat mbrcmintea de protecie, s se spele pe mini i pe prile
afectate, s aplice dezinfectantul corespunztor i s solicite asisten medical dac este nevoie. Cauza
rnii i microorganismele implicate trebuie raportate i se vor pstra consemnri medicale complete i
conforme cu cele ntmplate.
Ingestia accidental de produse potenial periculoase
71
mbrcmintea de protecie trebuie s e nlturat i trebuie solicitat asisten medical.

Identicarea produsului ingerat i circumstanele n care s-a petrecut incidentul trebuie raportate. Se vor
pstra consemnri medicale complete i conforme cu cele ntmplate.
Eliberarea de aerosoli potenial periculoi (n exteriorul unei HSB)
Toate persoanele trebuie imediat evacuate din aria contaminat i orice persoan expus trebuie
supus unui control medical. eful laboratorului i persoana rspunztoare de biosiguran trebuie
informai imediat. Nimeni nu trebuie s intre n camer pentru o perioad de timp corespunztoare
(ex. 1 or), pentru a permite evacuarea aerosolilor i depunerea particulelor mai grele.
Dac laboratorul nu are sistem central de evacuare a aerului, intrarea n laborator trebuie amnat
(ex. pentru 24 h).
Trebuie aate semnalizri care s indice c intrarea este interzis. Dup timpul necesar trebuie
efectuat decontaminarea, care va supervizat de responsabilul cu biosigurana. Pentru acest scop
trebuie purtat mbrcminte de protecie i dispozitiv pentru protecie respiratorie.
Recipiente sparte si substane infecioase vrsate
Recipientele contaminate cu substane infecioase care s-au spart i substanele infecioase
rspndite trebuie acoperite cu crpe sau prosoape de hrtie. Dezinfectantul se toarn peste acestea
i se las att ct este necesar. Crpele sau prosoapele de hrtie precum i obiectele sparte pot
apoi ndeprtate; fragmentele de sticl trebuie apucate i ndeprtate cu pense. Suprafaa contaminat
trebuie apoi tears cu dezinfectant. Dac a fost utilizat un fra pentru ndeprtarea obiectelor sparte,
acesta trebuie autoclavat sau imersat ntr-un dezinfectant corespunztor. Crpele, prosoapele de hrtie
i tampoanele utilizate pentru curare trebuie aruncate n containerul pentru deeuri contaminate. Pentru
toate aceste proceduri trebuie folosite mnui de protecie.
Dac formularele i alte materiale tiprite sau scrise au fost contaminate, informaia trebuie
copiat n alte formulare iar originalele trebuie aruncate n containerul pentru deeuri contaminate.
Spargerea eprubetelor cu material potenial infecios n centrifugi fr cupe sau supori nchii etan
Dac n timpul centrifugrii se sparge eprubeta sau se suspecteaz spargerea acesteia, centrifuga
se va opri i se va lsa n repaus, nchis (ex. pentru 30 minute) pentru a permite depunerea.
Dac se observ spargerea dup terminarea centrifugrii, capacul trebuie nchis imediat la
loc i lsat astfel (ex. pentru 30 minute). n ambele cazuri trebuie informat persoana responsabil cu
biosigurana.
Pentru operaiunile ulterioare trebuie purtate mnui din cauciuc gros, acoperite dac este
necesar cu mnui de unic folosin. Pentru a ndeprta cioburile de sticl se utilizeaz pense sau pense
cu tampon de vat.
Toate eprubetele sparte, cioburile de sticl, cupele, suporii pentru cupe i rotorul centrifugii
trebuie introduse ntr-un dezinfectant necoroziv cunoscut a activ mpotriva microorganismului implicat
(vezi Capitolul 14). Eprubetele cu dop nesparte se pun n dezinfectant ntr-un vas separat. Cuva
centrifugii trebuie curat cu acelai tip de dezinfectant, utilizat n diluia necesar, apoi tears din nou,
splat cu ap i uscat. Toate materialele care au fost folosite pentru curare trebuie tratate ca deeuri
infecioase.
Spargerea eprubetelor n cupele nchise etan
Toate cupele de centrifug care se nchid etan trebuie umplute i golite ntr-o HSB. Dac se
suspecteaz o spargere n interiorul suportului pentru cupe nchis etans, capacul acesteia trebuie deurubat
puin, iar cupa trebuie autoclavat. Alternativ, se poate face o dezinfecie chimic a cupei i a suportului.
Incendiile i dezastrele naturale
72
13. PLANURI PENTRU INTERVENII N CAZ DE ACCIDENTE I MSURI DE URGEN
Pompierii i alte instituii trebuie implicate n elaborarea planurilor de intervenie n caz de urgen.
Acetia trebuie informai dinainte care ncperi conin materiale potenial infecioase. Este recomandabil
ca aceste servicii s viziteze laboratorul pentru a cunoate planul i interiorul acestuia.
Dup un dezastru natural, serviciile de urgen local sau naional trebuie prevenite asupra
pericolelor poteniale din cldirile laboratorului i/sau din mprejurimile acestora. Personalul acestor
servicii poate intra n laborator numai nsoit de un angajat instruit al laboratorului. Materialele infecioase
trebuie colectate n cutii impermeabile pentru lichide sau n saci groi de unic folosin. Recuperarea
sau eliminarea trebuie decise de personalul responsabil cu biosigurana, pe baza informaiilor de la locul
accidentului.
Serviciile de urgen: persoanele de contact
Lng telefoanele din instituie trebuie aate numerele de telefon i adresele urmtoare:
1. Laboratorul sau instituia (adresa i locaia s-ar putea s nu e cunoscut n detaliu de ctre cel care
sun sau serviciul apelat)
2. Directorul instituiei
3. eful laboratorului
4. Responsabilul cu biosigurana
5. Pompierii
6. Spitalul sau serviciul de ambulan sau personalul medical (numele clinicii, departamentele, i/sau
personalul medical dac este posibil)
7. Poliia
8. Responsabilul pentru probleme medicale al instituiei (laboratorului)
9. Tehnicianul ef
10. Serviciile de ap, gaz i electricitate
Echipament de urgen
Pentru cazurile de urgen trebuie s existe la ndemn urmtorul echipament de protecie:
1. Trusa de prim ajutor care s includ antidoturi universale i speciale
2. Extinctoare, pturi ignifuge
n funcie de circumstanele locale, se recomand i urmtorul echipament de urgen care poate
adaptat n funcie de particularitile locale:
1. mbrcminte complet pentru protecie (salopet, mnui, echipament de protecie a capului (glugi),
acestea ind utilizate n cazul incidentelor cu microorganisme din grupurile de risc 3 i 4)
2. masc respiratorie cu ltre specice chimice i pentru particule
3. aparat de dezinfecie a camerei, de exemplu: spray i vaporizator cu formaldehid
4. targ
5. unelte, de ex.: ciocan, topor, chei mecanice, urubelni, scar, frnghie
6. echipamente i ae/pancarte pentru delimitarea zonei de pericol.
Pentru alte informaii vezi referinele 12 i 28.
73
74
14. DEZINFECIA I STERILIZAREA
14. Dezinfecia i sterilizarea
Cunotinele de baz privind dezinfecia i sterilizarea sunt extrem de importante pentru sigurana
biologic n laborator. Din moment ce obiectele puternic contaminate nu pot dezinfectate ecient i nici
sterilizate cu uurin, este la fel de important i nelegerea principiilor precurrii, operaie anterioar
dezinfeciei. Din acest punct de vedere, capitolul de fa este dedicat principiilor generale care se aplic
tuturor claselor de microorganisme patogene, cu excepia notabil a prionilor.
Cerinele specice pentru decontaminare vor depinde de tipul activitii i de tipul de agent(i)
infecios(i) cu care se lucreaz. Prin urmare, este necesar s e folosite informaiile generale prezentate
aici, pentru a elabora att proceduri standard ct i msuri specice adaptate particularitilor de
periculozitate din ecare laborator.
Timpii de contact pentru dezinfectante sunt specici pentru ecare substan, sunt precizai n
prospectele produselor i vor utilizai conform indicaiilor productorilor.
14.1. Deniii
n procesele de decontaminare i sterilizare n condiii de siguran biologic sunt utilizai numeroi
termeni. Dintre acetia enumerm pe cei mai frecvent utilizai:
Antimicrobian - un agent care omoar microorganismele sau le suprim creterea i
multiplicarea.
Antiseptic o substan care inhib creterea i dezvoltarea microorganismelor fr s le omoare
neaprat. Antisepticele se aplic uzual pe suprafaa corpului.
Biocid un termen general care se aplic oricrui agent care ucide organismele.
Germicid chimic o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizat pentru
omorrea microorganismelor.
Decontaminare orice proces utilizat pentru ndeprtarea i/sau omorrea microorganismelor.
Acelai termen se aplic i pentru ndeprtarea sau neutralizarea substanelor chimice periculoase
i a materialelor radioactive.
Dezinfectant o substan chimic sau un amestec de substane chimice utilizate pentru
omorrea microorganismelor, dar nu neaprat i a sporilor acestora. Dezinfectantele sunt de
obicei aplicate pe suprafee sau obiecte inerte.
Dezinfecie metodele zice sau chimice utilizate pentru omorrea microorganismelor, dar nu
neaprat i a sporilor acestora.
Microbicid o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele. Acest termen se utilizeaz adesea n loc de biocid, germicid, sau
antimicrobian.
Sporocid - o substan chimic sau un amestec de substane chimice care omoar
microorganismele i sporii.
Sterilizare proces care omoar i/sau ndeprteaz toate clasele de microorganisme i sporii.
14.2. Precurarea i curarea materialelor de laborator
n termeni practici, curarea este ndeprtarea murdriei, materiilor organice si a coloranilor.
Curarea include perierea, aspirarea sau curarea de praf uscat, splarea sau tergerea umed cu
ap i spun sau detergent.
75
Acolo unde riscul de contaminare cu microorganisme patogene este crescut i este necesar
decontaminarea, precurarea este o manevr de rutin. Aceasta este necesar deoarece petele i
murdrirea cu substane organice pot forma un scut de protecie pentru microorganisme i astfel interfer
cu aciunea distrugtoare a decontaminanilor (antiseptice, germicide chimice i dezinfectani).
n aceste cazuri, precurarea este esenial pentru a asigura o dezinfecie sau sterilizare
corespunztoare. Se tie c multe produse germicide sunt eciente numai asupra materialelor precurate.
Precurarea trebuie efectuat cu precauii deosebite, pentru a evita expunerea la ageni patogeni.
Dup precurare, pentru curarea i dezinfecia propriu-zis trebuie s e aplicate substane
chimice cu aciune germicid.
Pentru precurare i dezinfecie este important s se utilizeze substane germicide chimice
compatibile ntre ele. Adeseori se folosesc n aceste scopuri aceleai substane.
14.3. Germicidele chimice
Multe tipuri de substane chimice pot utilizate ca dezinfectante i/sau antiseptice. Numrul
produselor comercializate este n continu cretere. Compoziiile acestora trebuie selectate cu grij n
funcie de nevoile specice.
Activitatea germicid a multor substane chimice este rapid i ecient la temperaturi nalte. n
acelai timp ns, temperaturile nalte pot accelera evaporarea i degradarea substanelor folosite.
Multe germicide pot duntoare oamenilor, animalelor i mediului nconjurtor. De aceea
trebuie alese, manipulate, depozitate i evacuate cu foarte mult grij, respectndu-se recomandrile
productorului. Pentru sigurana personalului se impune utilizarea de mnui, halate i ochelari de
protecie, atunci cnd se prepar soluiile diluate ale acestor germicide.
De regul, germicidele chimice nu sunt recomandate pentru curarea de rutin a podelelor,
pereilor, echipamentelor i mobilierului. Ele pot totui utilizate n cazuri excepionale, cum ar focarele
de boli infecioase.
Utilizarea corespunztoare a germicidelor chimice contribuie la sigurana locului de munc, prin
reducerea riscului de expunere a personalului i a mediului la agenii infecioi.
Pe ct posibil, numrul germicidelor chimice utilizate va limitat din raiuni economice, de
simplicare a aprovizionrii i inventarului i pentru limitarea polurii mediului.
Clasele cele mai utilizate de germicide chimice sunt descrise n cele ce urmeaz, cu prezentarea
informaiilor generale n ceea ce privete utilizarea i sigurana manipulrii. Concentraiile germicide sunt
redate n termeni de greutate pe volum (g/v), cu unele excepii menionate la locul potrivit. Tabelul 12
rezum diluiile de lucru recomandate pentru compuii care degaj clor.
Tabel 12. Diluiile recomandate ale produselor pe baz de clor
Condiii curatea)
Condiii murdrieb)
Concentraie de clor necesar
0,1% (1g/l)
0,5% (5g/l)
Soluie de hipoclorit de Na (5% Cl)
20 ml/l
100 ml/l
Hipoclorit de Ca (70% Cl)
1,4 g/l
7,0 g/l
Diclor-izocianurat de Na pudr (60% Cl)
1,7 g/l
8,5 g/l
Diclor-izocianurat de Na tablete (1,5 g Cl/tablet)
o tablet /litru
4 tablete/litru
Cloramina (25% Cl) c)
20 g/l
20 g/l
) Dup precurare (ndeprtarea grosului materialului organic (ex. snge)

) Se toarn peste materialul organic (ex. snge nainte de ndeprtarea acestuia)
c
) Vezi textul
a
b
76
Clorul (hipoclorit de Na)

Clorul este un oxidant puternic i rapid, cu spectru larg de utilizare. Este comercializat n mod
normal, ca nlbitor: o soluie de hipoclorit de Na (NaOCl), care poate diluat cu ap pentru a obine
soluii de diferite concentraii.
Soluia clorinat, n mod special sub forma de nlbitor, este foarte alcalin i poate corosiv
pentru metal. Aciunea sa este redus considerabil de unele substane organice (proteine). Pstrarea
soluiilor stoc sau de lucru se va face n containere nchise, deoarece cnd acestea sunt deschise, mai ales
la temperaturi crescute elibereaz Clorul, reducndu-se potenialul lor germicid. Frecvena cu care aceste
soluii de nlbire trebuie rennoite, depinde de concentraia lor iniial, de mrimea i tipul recipientelor
n care sunt inute (de ex. cu sau fr capac etan), frecvena i condiiile utilizrii, de condiiile de mediu.
Ca regul general se recomand ca soluiile de hipoclorit utilizate pentru materiale murdrite cu cantiti
importante de substane organice s e schimbate la ecare 24 de ore cu altele proaspete, n timp ce
soluiile folosite mai rar pot schimbate mai rar (la cel mult o sptmn).
Un dezinfectant de uz general pentru toate scopurile laboratorului trebuie s aib o concentraie
de 1 g/l clor disponibil. O soluie mai puternic, coninnd 5 g/l clor disponibil este recomandat pentru
decontaminarea suprafeelor contaminate, n prezena de materii organice. Soluia de hipoclorit de Na, ca
nlbitor casnic, conine 50 g/l clor i trebuie diluat 1:50 sau 1:10 pentru a obine concentraii nale de
1 g/l i, respectiv, de 5 g/l, respectiv. Soluiile industriale de nlbitor au o concentraie de hipoclorit de Na
apropiat de 120 g/l i trebuie diluate corespunztor pentru a se obine concentraiile indicate mai sus.
Granulele sau tabletele de hipoclorit de Ca (Ca(ClO)2) conin, de obicei, peste 70% Cl disponibil.
Soluiile preparate din tablete sau granule coninnd 1,4 g/l i 7,0 g/l, trebuie s aib concentraii de Clor
de 1 g/l i respectiv 5 g/l.
nlbitorul nu este recomandat ca antiseptic, dar poate utilizat pe scar larg ca dezinfectant
de uz general i pentru obiectele nemetalice. n condiii de urgen, nlbitorul poate utilizat pentru
dezinfectarea apei potabile, ntr-o concentraie nal de Cl disponibil de 1-2 mg/l.
Clorul gazos este foarte toxic. Soluiile clorinate trebuie depozitate i utilizate numai n camere bine
aerisite. De asemenea, ele nu trebuie amestecate cu acizi, pentru c elibereaz foarte repede clorul
gazos. Multe derivate de clor pot vtmtoare pentru om i mediul nconjurtor, de aceea trebuie
evitat utilizarea abuziv a acestora, n special a hipocloritului de sodiu.
Diclorizocianuratul de Na
Diclorizocianuratul de Na (NaDCC) sub form de pulbere conine 60 % clor. Soluiile preparate
cu NaDCC pulbere la 1,7 g/l i 8,5 g/l conin 1 g/l sau respectiv 5 g/l clor. Tabletele de NaDCC conin
echivalentul a 1,5 g Cl / tablet. Prin dizolvarea unei tablete sau a 4 tablete ntr-un litru de ap, se vor
obine concentraiile de lucru: 1 g/l sau 5 g/l. NaDCC sub form de pulbere sau tablete este foarte uor i
sigur de depozitat. NaDCC poate aplicat ca atare (n stare solid) pe petele de snge sau alte lichide
contaminate, lsndu-l cel puin 10 minute nainte de a ndeprtat.
Cloraminele
Cloraminele sunt disponibile sub form de pulbere coninnd aproximativ 25% clor. Cloraminele
elibereaz clor ntr-o proporie mai mic dect hipocloritul. Prin urmare pentru o ecien echivalent cu
cea a hipocloritului se impun concentraii iniiale superioare de cloramin. Pe de alt parte ns, soluiile
de cloramin nu sunt inactivate de materia organic, n aceeai msur ca soluiile de hipoclorit. Se
recomand utilizarea concentraiei de 20 g/l pentru ambele situaii: pe suprafee curate i suprafee
murdare.
Soluiile de cloramin sunt n principiu inodore. Cu toate acestea, obiectele nmuiate n aceste
soluii trebuie cltite insistent, pentru a ndeprtat orice urm de substan adjuvant adugat de
productori pulberii de cloramin T (sodium tosylchloramid).
77
Dioxidul de clor
Dioxidul de clor (ClO2) este un germicid puternic cu aciune imediat, adesea activ la concentraii
mai joase dect cele de hipoclorit recomandate. Dioxidul de clor este instabil sub forma de gaz i se
descompune n clor gazos (Cl2) i oxigen gazos (O2), cu degajare de cldur. Totui, dioxidul de clor este
solubil n ap i este stabil sub forma de soluie apoas. El se poate obine e prin amestecarea de acid
clorhidric i clorit de sodiu (NaClO2), e se poate comanda sub forma de soluie apoas stabilizat, care
este activat n momentul folosirii.
Dintre biocidele cu efect oxidant, dioxidul de clor este oxidantul cel mai selectiv. Ozonul i clorul
sunt mult mai reactive dect dioxidul de clor i se vor consuma mai rapid n cazul deeurilor care conin
substante organice n cantitate mare ; el reacioneaz selectiv, n special asupra compuilor sulfurici,
aminelor secundare i teriare i asupra altor compui organici intens redui. Ca urmare, folosind dioxid
de clor se poate asigura o cantitate mai stabil de clor rezidual cu doze mult mai mici dect dac s-ar
folosit clor sau ozon. Dac se recurge la un sistem adecvat de generare a sa, dioxidul de clor poate
folosit cu mai mult ecacitate dect clorul sau ozonul n prezena unor ncrcturi organice importante,
tocmai datorit selectivitii aciunii sale.
Formaldehida
Formaldehida (HCHO) este un gaz care distruge microorganismele i sporii acestora, la
temperaturi mai mari de 20C. Formaldehida nu este activ fa de prioni, are o vitez de aciune relativ
redus i necesit o umiditate relativ mai mare de 70%. Este vndut, e sub form de polimer solid
(para-formaldehid), ca fulgi sau tablete, e ca formol - o soluie a gazului n ap de aproximativ 370 g/l
(37%), coninnd metanol (100 ml/l) ca stabilizator. Ambele forme sunt nclzite pentru a elibera gazul,
care este utilizat pentru decontaminarea i dezinfecia spaiilor nchise, cum ar hotele de biosiguran
(HSB) i alte incinte sau ncperi (vezi mai jos seciunea intitulat Decontaminarea spaiului nconjurtor).
Formaldehida (5% formol n ap) poate utilizat ca dezinfectant lichid.
Formaldehida este suspectat a cancerigen. Are un miros neptor, iar vaporii si pot irita
ochii i mucoasele. De aceea, trebuie depozitat i utilizat n nie speciale de protecie chimic (hote
chimice) sau ncperi foarte bine aerisite.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normele naionale de folosire precum i precauiile ce in de
sigurana chimic.
Glutaraldehida
Ca i formaldehida, glutaraldehida (OHC(CH2)3CHO) este de asemenea activ mpotriva formelor
vegetative ale bacteriilor, sporilor, ciupercilor, precum i a viruilor ce conin lipide, dar i a celor fr
lipide. Este necoroziv i reacioneaz mai rapid dect formaldehida. Cu toate acestea, sunt necesare
cteva ore pentru a distruge sporii bacterieni.
n general, este furnizat ca o soluie cu concentraie de aprox. 20 g/l (2%). Majoritatea acestor
produse trebuie activate (alcalinizate) nainte de utilizare, prin adugare de bicarbonat, furnizat mpreun
cu produsul. Soluia activat poate utilizat timp de 1-4 sptmni de la preparare, n funcie de activare,
condiiile i frecvena utilizrii. Baghetele de scufundat n soluie pentru a aa dac mai este activ,
furnizate de unii productori, dau numai indicaii orientative. Soluiile de glutaraldehid trebuie aruncate,
dac devin tulburi.
Glutaraldehida este toxic i iritant pentru piele i mucoase; de aceea, contactul cu acestea
trebuie evitat. Glutaraldehida se utilizeaz numai sub ni (hot) sau n spaii bine aerisite. Nu este
recomandat sub form pulverizat sau soluii pentru decontaminarea suprafeelor din mediu.
naintea utilizrii trebuie consultate regulile i normativele naionale de folosire precum i
precauiile ce in de sigurana chimic.
78
Compuii fenolici
Compuii fenolici, un grup larg de ageni au fost printre primele germicide folosite. n ciuda acestui
fapt, anumite probleme recente pe care le ridic sigurana utilizrii lor, recomand restrngerea folosirii.
Sunt activi mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor i asupra virusurilor ce conin lipide. n cazul unei
formulri corespunztoare, compuii fenolici prezint activitate i mpotriva mycobacteriilor. Nu sunt activi
mpotriva sporilor, iar activitatea asupra virusurilor non-lipidice (nenvelite sau nude) este variabil. Muli
produi fenolici sunt utilizai pentru decontaminarea suprafeelor de lucru i a celor ambientale; triclosanul
i cloro-xylenolul fac parte din soluiile antiseptice cele mai utilizate.
Triclosanul se regsete frecvent n produsele destinate splrii minilor. El este activ cu
precdere mpotriva bacteriilor vegetative i nu este duntor pielii i mucoaselor. Cu toate acestea,
studiile de laborator au demonstrat c bacteriile care au devenit rezistente la concentraii mici de triclosan,
prezint de asemenea rezisten la unele antibiotice. Importana acestei descoperiri pentru utilizarea
fenolilor n teren nu a fost nc evaluat.
Anumii compusi fenolici sunt sensibili i pot inactivai de srurile din apa dur; de aceea se
recomand ca diluarea lor s se fac cu ap distilat sau ap deionizat.
Compuii fenolici nu sunt recomandai pentru suprafeele care vin n contact cu mncarea, i nici
pentru spaiile destinate copiilor mici (pot absorbii de cauciuc i pot ptrunde n piele). Se vor respecta
i reglementrile de siguran chimic.
Compuii de amoniu cuaternari
Multe tipuri de compui de amoniu cuaternari sunt utilizai sub form de amestecuri i deseori
n combinaie cu alte substane germicide, cum ar alcoolul. Acetia prezint o bun activitate mpotriva
formelor vegetative ale bacteriilor i a virusurilor lipidice. Anumite tipuri (ex. clorura de benzalconiu) sunt
folosite ca antiseptice.
Activitatea germicid a anumitor tipuri de compui de amoniu cuaternari este considerabil redus
de ctre substanele organice, apa cu duritate mare sau de detergenii anionici. Prin urmare, atunci cnd
se intenioneaz utilizarea acestor produi pentru dezinfecie, este necesar alegerea cu grij a produselor
pentru precurare. Unele bacterii potenial patogene se pot dezvolta n soluiile de compui cuaternari de
amoniu. Datorit biodegradabilitii reduse, aceti compui se pot acumula n mediul nconjurtor.
Alcoolii
Etanolul (C2H5OH) i 2-propanolul (izopropil alcoolul, (CH3)2CHOH) au proprieti dezinfectante

similare. Ei sunt activi mpotriva formelor vegetative ale bacteriilor, ciupercilor precum i mpotriva virusurilor
lipidice (nvelite), dar nu i mpotriva sporilor. Aciunea lor mpotriva virusurilor nude este variabil. Pentru
o mai mare ecien, alcoolii trebuie utilizai la o concentraie de aproximativ 70% (v/v) n soluie apoas.
Concentraiile mai mici sau mai mari pot s nu aib aceeai aciune germicid. Soluiile alcoolice nu las
nici un reziduu pe suprafeele de lucru sau pe obiectele tratate, ceea ce reprezint un avantaj major.
Amestecurile cu alte substane chimice sunt de asemenea mai eciente dect alcoolul singur, de
exemplu: alcool 70% (v/v) cu 100 g/l formaldehid sau alcool coninnd 2 g/l clor.
O soluie alcoolic de 70% (v/v) etanol poate utilizat pentru piele, suprafee de lucru ale
meselor de laborator i din hotele de biosiguran, precum i pentru imersarea diferitelor instrumente
chirurgicale. Deoarece etanolul usuc pielea, adeseori se amestec cu substane emoliente. Frecarea/
splarea minilor cu alcool este recomandat pentru decontaminarea minilor uor murdare, n situaiile
n care splatul minilor nu este posibil. Oricum trebuie avut n minte c etanolul este inecient mpotriva
sporilor i poate s nu distrug toate tipurile de virusuri nude.
Alcoolii sunt substane volatile, uor inamabile i este bine s nu e utilizate lng cri
deschise. Soluiile de lucru trebuie s e depozitate n containere adecvate pentru a mpiedica evaporarea
alcoolilor. Acetia pot ntri cauciucul i dizolv anumite tipuri de lipici. Este foarte important inventarierea
79
i depozitarea adecvat a etanolului n laborator pentru a se evita utilizarea acestuia n alte scopuri dect
cele de dezinfectare. Sticlele cu soluii pe baz de etanol trebuie s e etichetate vizibil, pentru a evita
autoclavarea din greeal.
Iodul i substanele iodate
Aciunea acestor dezinfectani este similar cu cea a clorului, dei sunt n general mai puin
inhibai de substanele organice. Iodul poate pta suprafeele de lucru i esturile i, n general, nu
este recomandat ca dezinfectant. Pe de alt parte, soluiile iodate i tincturile sunt antiseptice bune. n
general, antisepticele pe baz de iod nu sunt recomandate pentru ustensilele medicale i stomatologice.
Iodul nu trebuie utilizat pe obiectele din aluminiu sau cupru.
Iodul poate toxic. Produsele organice pe baz de iod trebuie depozitate la 4 - 10C pentru a
mpiedica dezvoltarea n ele a unor bacterii potenial nocive.
Peroxidul de hidrogen i peracizi
Ca i cloramina, peroxidul de hidrogen (H2O2) i peracizii sunt oxidani puternici i germicide
puternice, cu spectru larg de aciune. De asemenea, aceste produse sunt mai puin duntoare dect
cloramina att pentru oameni ct i pentru mediul nconjurtor. Peroxidul de hidrogen este furnizat e ca
soluie gata de utilizare n concentraie 3%, e ca soluie apoas de concentraie 30 %, care trebuie diluat
ulterior cu ap distilat, de 5 pn la 10 ori volumul su. Cu toate acestea, soluiile de peroxid de hidrogen
cu concentraie 3-6%, sunt relativ lente i cu aciune germicid limitat. Produsele disponibile la ora
actual conin stabilizatori speciali ai concentraiei de peroxid de hidrogen, ceea ce duce la accelerarea
aciunii germicide i le face mai putin corozive.
Peroxidul poate utilizat pentru decontaminarea suprafeelor de lucru, a meselor de laborator
i a hotelor de biosiguran. Soluiile n concentraie mai ridicat pot utilizate pentru dezinfectarea
instrumentarului medical sau stomatologic sensibil la cldur. Utilizarea peroxidului de hidrogen vaporizat
sau a acidului peracetic (CH3COOOH) pentru decontaminarea instrumentelor (dispozitivelor) medicale /
chirurgicale termosensibile necesit un echipament adecuat.
Peroxidul de hidrogen i peracizii pot avea aciune coroziv asupra metalelor cum ar aluminiul,
cuprul, alama i zincul i pot de asemenea decolora esturile, prul, pielea i mucoasele. Articolele tratate
cu aceste substane trebuie cltite riguros cu ap, nainte de a veni n contact cu ochii i mucoasele.
Aceste substane trebuie depozitate n spaii protejate de cldur i lumin.
14.4. Decontaminarea mediului de lucru (laboratorului)
Decontaminarea laboratorului, a mobilierului i a echipamentului acestuia necesit o combinaie
de dezinfectani lichizi i gazoi. Suprafeele pot decontaminate prin utilizarea unor soluii de hipoclorit
de sodiu coninnd 1g/l clor activ. Soluii mai puternice cu o concentraie de 5g/l sunt recomandate pentru
decontaminarea suprafeelor cu risc crescut. Pentru decontaminarea spaiului de lucru soluii coninnd
3% peroxid de hidrogen pot utilizate ca nlocuitori pentru soluiile de nlbitor.
ncperile i echipamentele pot decontaminate prin fumigare cu gaz de formaldehid, generat
prin nclzirea para-formaldehidei sau prin erberea unei soluii de formol. Procedeul este foarte periculos
i necesit personal special instruit. n aceste situaii ferestrele i uile laboratorului trebuie sigilate mai
nti cu band adeziv sau cu produse similare, nainte de eliberarea gazului. Fumigarea trebuie s e
efectuat la o temperatur ambiental de minim 21C i la o umiditate relativ de 70% (vezi seciunea
privind decontaminarea hotelor de biosiguran, mai jos).
Dup fumigare incinta trebuie s e foarte bine aerisit i abia apoi va permis accesul
personalului. Persoanele care trebuie totui s ptrund n aceste spaiii, o pot face numai dac poart
aparate de protecie respiratorie adecvate. Bicarbonatul de amoniu, sub form gazoas, poate utilizat
pentru neutralizarea formaldehidei.
80
Este ecace i fumigarea spaiilor foarte mici cu vapori de peroxid de hidrogen, dar pentru aceast
metod trebuie s se utilizeze un echipament adecvat.
14.5. Decontaminarea hotelor de biosiguran
Pentru decontaminarea hotelor de biosiguran de clas 1 i clas 2 exist echipament special,
portabil, pentru generarea, circularea i neutralizarea formaldehidei gazoase. n lipsa acestor echipamente
specializate, se pot folosi 2 tigi plasate pe 2 plite (reouri) electrice aezate n hot, care conin una
para-formaldehid (sucient pentru a obine o concentraie nal de 0,8 % para-formaldehid n aerul
din hot), i cealalt bicarbonat de amoniu (cu 10% mai mult dect para-formaldehida). Plitele sunt
conectate la curent electric n afara hotei, astfel nct conectarea i deconectarea plitelor s se fac din
exterior. Dac umiditatea relativ se situeaz sub 70%, n hot trebuie s e amplasat i un vas deschis
cu ap erbinte. Panoul frontal se etaneizeaz cu band adeziv solid (de ex. cea folosit pentru
conducte). Se lipete o folie groas de plastic peste deschiderea hotei, xnd-o etan de jur mprejur inclusiv n jurul relor electrice care ptrund n hot spre cele dou plite - ; n acelai mod se etaneizeaz
i racordul hotei la gura de exhaustare, evitndu-se astfel orice scpare a formaldehidei gazoase n
atmosfera laboratorului.
Se deschide ntreruptorul pentru formaldehid, care este apoi nchis dup ce s-a evaporat paraformaldehida. Incinta va rmne nchis cel puin 6 ore. Se pornete apoi a doua plit pentru evaporarea
bicarbonatului de amoniu. Dup aceea, se deconecteaz a doua plit i se pornete ventilatorul hotei
de dou ori cte dou secunde, permind astfel circulaia gazului degajat de bicarbonatul de amoniu n
ntreaga hot. Ulterior, dup cel puin 30 min, etanrile de la panoul frontal i conducta de exhaustare
pot ndeprtate, iar hota poate din nou folosit, dup o curare prealabil.
14.6. Splarea minilor /decontaminarea minilor
Atunci cnd este posibil, trebuie purtate mnui adecvate n timpul manipulrii materialelor care
prezint risc biologic. Cu toate acestea, purtarea mnuilor nu nlocuiete necesitatea splrii pe mini a
personalului din laborator. Minile trebuie splate dup manipularea materialelor sau animalelor cu risc
biologic i nainte de ieirea din laborator.
n multe situaii, splarea insistent a minilor cu spun obinuit i cu ap este sucient pentru
a le decontamina, dar se recomand, totui, utilizarea spunurilor germicide pentru situaii cu risc biologic
crescut. Minile trebuie spunite foarte bine, iar splarea se face printr-o frecare riguroas, care trebuie
s dureze minim 10 secunde, urmat de cltire din abunden cu ap curat i apoi uscate cu erveele
de hrtie sau un prosop curat (se pot folosi usctoarele de mini cu aer cald cnd exist la ndemn).
Se recomand instalarea n acest scop de robinete acionate cu cotul sau cu piciorul. Unde
acestea nu exist, se recomand utilizarea unui prosop de hrtie sau textile pentru nchiderea robinetului,
pentru a evita contaminarea minii proaspt splate.
Aa cum s-a menionat mai sus, atunci cnd nu este posibil splarea adecvat a minilor, se
poate recurge la frecarea lor cu soluii pe baz de alcool, pentru decontaminare.
14.7. Dezinfecia prin cldur i sterilizarea
Cel mai utilizat agent zic pentru decontaminare este cldura.
Cldura uscat (care este total non-coroziv) este utilizat pentru multe materiale din laborator,
care pot suporta temperaturi de 160C sau mai nalte, timp de 2-4 ore. Arderea sau incinerarea (vezi
mai jos) este, de asemenea, o form de cldur uscat. Autoclavarea este preferabil altor metode de
sterilizare deoarece genereaz cldur umed, care este mai ecient dect cldura uscat.
Fierberea nu garanteaz distrugerea tuturor microorganismelor i a agenilor patogeni, dar poate
folosit ca un procedeu minim de dezinfecie, atunci cnd alte metode (ex. dezinfecie chimic, sterilizare
prin autoclavare) nu pot efectuate.
81
Obiectele sterilizate trebuie manipulate i depozitate astfel nct s rmn necontaminate pn

la urmtoarea utilizare.
14.7.1. Autoclavarea
Cea mai ecient i mai sigur metod de sterilizare pentru materialele din laborator este cea cu
vapori saturai sub presiune i anume autoclavarea. Pentru majoritatea scopurilor, urmtoarele cicluri vor
asigura sterilizarea n autoclavele ncrcate corect (este indicat timpul necesar pentru omorrea bacteriilor
dup atingerea a diverse temperaturi):
1. 3 minute la 134C
2. 10 minute la 126C
3. 15 minute la 121C
4. 25 minute la 115C.
Exemple de autoclave:
Autoclave cu evacuare gravitaional a aerului. Figura 10 prezint schema general de
construcie a autoclavelor cu evacuare gravitaional. Vaporii intr n compartimentul de
sterilizare sub presiune i deplaseaz aerul, mai greu, printr-o valv, n compartimentul
de drenaj, echipat cu ltru HEPA.
Autoclave cu pre-vacuum. Aceste instalaii permit ndeprtarea aerului din camer
nainte de intrarea vaporilor. Aerul este evacuat printr-o valv echipat cu ltru HEPA. La
sfritul ciclului aburii sunt evacuai automat. Aceste autoclave pot funciona la 134C,
iar ciclul de sterilizare poate redus la 3 minute. Ele nu pot utilizate pentru sterilizarea
lichidelor din cauza vacuumului, dar sunt ideale pentru obiectele poroase.
Autoclave cu surs de nclzire proprie. Acestea vor utilizate numai atunci cnd nu
sunt disponibile autoclave cu evacuare gravitaional sau alte tipuri de autoclav. Acestea
sunt ncrcate vertical i sunt nclzite cu gaz, electricitate sau alte tipuri de combustibil.
Vaporii sunt generai prin nclzirea apei de la baza vasului, iar aerul este mpins n sus
i eliminat prin intermediul unui oriciu de evacuare. Atunci cnd tot aerul a fost nlturat,
se nchide valva oriciului de evacuare i se reduce aportul de cldur. Temperatura i
presiunea cresc, apoi, pn cnd valva de siguran acioneaz la un nivel prestabilit
anterior. Acesta este momentul din care se consider c ncepe de fapt sterilizarea. La
sfritul ciclului, sursa de cldur se nchide i se ateapt scderea temperaturii pn
la 80C sau chiar mai jos, nainte de deschiderea capacului.
82
Figura 10. Schema autoclavului gravitaional

ncrcarea autoclavului
Materialele trebuie mpachetate i aranjate cu grij n compartimentul de sterilizare sau n coul
autoclavului pentru a permite ptrunderea i circulaia aburului printre obiecte precum i eliminarea
aerului. Ambalajele saci autoclavabili, containere, cutii, etc. - trebuie s permit aburului s ptrund
pn la coninutul acestora.
Precauii n utilizarea autoclavului
Pericolele inerente mnuirii recipientelor sub presiune pot minimizate prin respectarea
urmtoarelor reguli:
1. Responsabilitatea pentru efectuarea acestor operaii trebuie atribuit numai unor persoane
special instruite.
2. Programul de intreinere periodic trebuie s cuprind msuri preventive cum sunt inspeciile
periodice ale compartimentului de sterilizare al autoclavului, ale uilor, valvelor, supapelor,
robinetelor i instrumentelor de msur, controlul ind efectuat de persoane special instruite i
autorizate n acest scop.
3. Vaporii trebuie s e saturai i s nu conin substane chimice (de exemplu inhibitori ai coroziunii)
care ar putea contamina obiectele ce urmeaz a sterilizate.
4. Toate materialele care urmeaz a sterilizate, trebuie s e puse n containere care s permit
eliminarea complet a aerului i ptrunderea nestnjenit a cldurii, respectiv a aburului; camera
nu trebuie ncrcat la refuz, iar vaporii trebuie s ajung uniform n toate colurile compartimentului
de sterilizare.
5. Pentru autoclavele care nu sunt prevzute cu dispozitiv de blocare a uilor, care s previn
deschiderea acestora, ct vreme compartimentul de sterilizare este sub presiune robinetul
principal de admisie pentru aburi trebuie nchis, iar temperatura trebuie s scad sub 80C,
nainte ca ua (capacul) s e deschise.
83
6. Cnd se autoclaveaz lichide, dup ncheierea sterilizrii se va aplica un program de evacuare

lent a aburului, pentru a evita erberea lichidelor n momentul deschiderii autoclavului; recipientele
vor umplute pn la cel mult 75% din volum.
7. Operatorul trebuie s poarte mnui adecvate i scut transparent de protecie a feei cnd
deschide autoclavul, chiar dac temperatura a sczut sub 80C.
8. Pentru monitorizarea performanelor autoclavului, indicatorii biologici sau termocuplurile trebuie
amplasate n centrul ncrcturii. Este preferabil monitorizarea permanent cu termocupluri i
dispozitive de nregistrare amplasate n zonele cele mai critice ale ncrcturii, pentru a determina
ciclurile de operare cele mai potrivite.
9. Daca autoclavul este prevzut cu ltru pe canalul de scurgere al compartimentului de sterilizare
al autoclavului, acesta trebuie ndeprtat i curat zilnic.
10. Trebuie vericat ca supapa de siguran s nu e blocat de hrtie sau alte materiale n momentul
ncrcrii aparatului.
14.8. Incinerarea
Incinerarea este util pentru ndeprtarea cadavrelor de animale, precum i pentru ndeprtarea
pieselor anatomice sau altor deeuri de laborator, care au fost sau nu decontaminate anterior (vezi
seciunea Evacuarea materialelor contaminate n Capitolul 3). Incinerarea materialelor infecioase poate
constitui o alternativ a autoclavrii, numai dac incineratorul este sub controlul laboratorului.
Incinerarea corect necesit un control ecient al temperaturii i o camer de ardere secundar.
Multe incineratoare, n special cele cu o singur camer de combustie, nu sunt corespunztoare pentru
lucrul cu materiale infecioase, cadavre de animale i materiale plastice. Astfel de materiale ar putea
s nu e complet distruse, iar ceea ce se elimin prin coul incineratorului ar putea polua atmosfera
cu microorganisme, substane chimice toxice i fum. Exist totui mai multe conguraii satisfctoare
pentru camerele de combustie; ideal ar ca n camera principal temperaturile s e de minim 800C iar
n camera secundar, de minim 1000C.
Materialele pregtite pentru incinerare, chiar dac au fost decontaminate anterior, vor
transportate n saci, preferabil de plastic. Operatorii incineratorului trebuie s primeasc instruciuni clare
n ceea ce privete ncrcarea incineratorului i controlul temperaturii. Nu trebuie uitat c funcionarea
corespunztoare a incineratorului depinde foarte mult de amestecul corect de materiale care urmeaz a
incinerate.
Exist preocupri active referitoare la impactul negativ asupra mediului nconjurtor al
incineratoarelor existente sau n curs de montare. n acest sens, se fac eforturi continue pentru a realiza
i instala incineratoare mai eciente din punct de vedere energetic i care s respecte integral normele
de protecie a mediului nconjurtor.
14.9. ndeprtarea deeurilor
ndeprtarea deeurilor medicale i de laborator face obiectul a diverse reglementri regionale,
naionale i internaionale.
naintea elaborrii i aplicrii unor programe pentru manipularea, transportul i evacuarea
deeurilor cu risc biologic potenial este obligatoriu s e consultate versiunile la zi ale reglementrilor
amintite. n general, cenua de la incineratoare poate manipulat ca orice alte resturi menajere,
ndeprtarea acesteia ind efectuat de rmele de salubritate. Deeurile decontaminate prin autoclavare
pot e s e incinerate n afara incintei instituiei, e s e evacuate la locurile special amenajate pentru
aruncarea gunoaielor (vezi Capitolul 3).
Pentru alte informaii vezi referinele 13 i 29-39.
84
15. NOIUNI INTRODUCTIVE PRIVIND TRANSPORTUL MATERIALELOR INFECIOASE
15. Noiuni introductive privind transportul

materialelor infecioase
Transportul materialelor infecioase i potenial infecioase face obiectul unor reglementri stricte
naionale i internaionale. Aceste reglementri descriu modalitile corecte de utilizare a materialelor de
ambalare precum i alte cerine legate de transport.
Personalul laboratorului trebuie s expedieze substanele infecioase n acord cu reglementrile
de transport n vigoare, urmrindu-se prin aceasta :
1. reducerea probabilitii de deteriorare a ambalajului i de producere a unor scurgeri i astfel
2. reducerea riscului de apariie a infeciilor
3. mbuntirea ecienei sistemului de expediere a coletelor
15.1. Reglementrile internaionale pentru transport
Reglementrile internaionale privind transportul materialelor infecioase (pe orice cale) se bazeaz
pe modelul reglementrilor ONU - Regulations on the Transport of Dangerous Goods (40), elaborat de
Comitetul de Experi ONU pentru Transportul Mrfurilor Periculoase (United Nations Committee of Experts
on the Transport of Dangerous Goods (UNCETDG)). Pentru a dobndi putere de lege, reglementrile
ONU trebuie s e introduse n reglementrile naionale i internaionale de ctre autoritile competente
(de ex. Technical Instructions for the Safe Transport of Dangerous Goods by Air (41) of the International
Civil Aviation Organization (ICAO) pentru transportul aerian i European Agreement concerning the
International Carriage of Dangerous Goods by Road (ADR) (42).
Asociaia Internaional de Transport Aerian (IATA) public n ecare an Ghidul de transport al
substantelor infecioase (Infectious Substances Shipping Guidelines) (43). Ghidul IATA trebuie s respecte
Instruciunile tehnice ale ICAO (Technical Instructions) ca standard minim, dar poate impune restricii
suplimentare. Ghidul IATA trebuie urmat ori de cte ori transportul este efectuat de membrii IATA .
De cnd Reglementrile ONU au devenit un set dinamic de recomandri, care este amendat bianual,
cititorul trebuie s consulte i s aplice cele mai recente reglementri naionale i internaionale.
OMS furnizeaz sugestii i expertiz grupului de experi ai ONU (UNCETDG). Schimbri majore
ale reglementrilor privind transportul legate de transportul substanelor infecioase au fost introduse n
ediia a 13-a (2003) a Modelului Reglementrilor ONU. Aceste amendamente pot consultate pe larg n
documentele OMS (44).
Reglementrile internaionale nu sunt concepute pentru a se substitui celor naionale sau locale.
Totui, n situaiile n care nu exist reglementri pe plan naional, se vor respecta cele internaionale.
Este important de menionat c, n plus, transportul internaional al substanelor infecioase se
supune de asemenea i este subiect al reglementrilor naionale privind importul i exportul.
15.2. Sistemul ambalajului triplu
Sistemul ambalajului triplu este utilizat pentru transportul substanelor infecioase sau potenial
infecioase (Figura 11). Acest sistem de ambalare const n 3 straturi : container primar, ambalaj secundar
i ambalaj extern.
Containerul primar, care conine proba, trebuie s e nchis etan, impermeabil pentru lichide
i etichetat corespunztor coninutului. El trebuie s e nvelit n sucient material absorbant pentru a
absorbi integral lichidele pe care le conine n caz de spargere sau scurgere.
85
Ambalajul secundar etaneizat i impermeabil pentru lichide este folosit pentru a proteja
containerul(erele) primar(e). Mai multe containere primare pot introduse ntr-un singur ambalaj secundar.
Exist diverse reglementri care stabilesc limite privind volumul i/sau greutatea materialelor infecioase
incluse ntr-un colet.
Ambalajul extern protejeaz ambalajul secundar de deteriorri zice n timpul transportului.
Formularele cu date despre probe, scrisorile i alte tipuri de informaii care identic sau descriu proba,
expeditorul i destinatarul, precum i orice alte documente solicitate trebuie s e furnizate n conformitate
cu ultimele reglementri n vigoare.
Modelul de reglementri (Model Regulations) al Naiunilor Unite descrie 2 tipuri diferite de sisteme
cu triplu ambalaj pentru transport. Sistemul obinuit de ambalaj triplu se folosete pentru transportul a
diferite materiale infecioase; totui microrganismele cu risc crescut trebuie transportate conform unor
reglementri mai stricte. Pentru mai multe detalii despre utilizarea diferitelor ambalaje corespunztoare
materialelor transportate, se recomand consultarea reglementrilor naionale i internaionale pentru
prevederile aplicabile.
15.3. Procedura de curare/tratare n cazul vrsrii materialului infecios
n cazul vrsrii de material infecios sau potenial infecios trebuie aplicat urmtoarea
procedur :
1. Se vor purta mnui, mbrcminte de protecie, inclusiv ochelari i scut transparent pentru protecia
feii, dac este cazul.
2. Se va acoperi materialul vrsat cu o crp sau cu prosoape de hrtie pentru a-l reine.
3. Se va turna dezinfectantul corespunztor peste materialul absorbant folosit i peste zona din imediata
vecintate (n general, soluie de cloramin 5% ; pentru vrsri n timpul transportului cu avionul trebuie
utilizate dezinfectante pe baz de compui cuaternari de amoniu).
4. Se va aplica dezinfectantul concentric i centripet, dinspre marginea zonei spre interior.
5. Dup timpul de aciune corespunztor (ex. 30 minute), se ndeprteaz materialele absorbante. Dac
exist cioburi de sticl sau alte obiecte ascuite se va utiliza un fra sau o bucat de carton rigid
pentru strngerea acestora i punerea lor ntr-un container pentru obiecte ascuite.
6. Se va cura i dezinfecta aria contaminat (dac este necesar, se vor repeta etapele 2 - 5).
7. Se vor evacua materialele contaminate ntr-un container pentru deeuri impermeabil, rezistent la
nepare.
8. Dup dezinfectare, se va informa autoritatea competent c locul a fost decontaminat.
86
15. NOIUNI INTRODUCTIVE PRIVIND TRANSPORTUL MATERIALELOR INFECIOASE
Ambalarea i etichetarea substanelor infecioase din categoria A
Ambalarea i etichetarea substanelor infecioase din categoria B
Figura 11. Exemple de sisteme de triplu ambalaj

(prin amabilitatea, IATA, Montreal Canada)
87
88
16. BIOSIGURANA I TEHNOLOGIA ADN RECOMBINANT
16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant
Tehnologia ADN recombinant realizeaz combinarea de material genetic provenit din diferite surse,
contribuind astfel la crearea unor organisme modicate genetic (OMG) care s-ar putea s nu existat
pn acum n natur.
La nceput, cercettorii din domeniul biologiei moleculare au fost ngrijorai de faptul c aceste
organisme ar putea avea proprieti imprevizibile i nedorite, constituind un risc biologic dac ar ajunge
n afara laboratorului. Aceast ngrijorare a constituit obiectul dezbaterilor de la conferina tiinic
desfurat n 1975 la Asilomar (SUA). Aici s-au dezbtut probleme de siguran i a fost propus primul
ghid privitor la tehnologia ADN recombinant. Experiena obinut prin cercetarea din urmtorii 25 de ani a
demonstrat c ingineria genetic poate condus ntr-o manier nepericuloas atunci cnd se evalueaz
corect riscul i se aplic msuri de siguran adecvate.
Prin intermediul tehnologiei ADN recombinant sau ingineriei genetice s-au clonat, iniial, segmente
de ADN n gazde bacteriene, pentru a supraexprima produii genici specici necesari pentru diverse studii.
Moleculele de ADN recombinant au fost, de asemenea, folosite pentru a crea OMG, precum animale
transgenice i knock-out i plante transgenice.
Tehnologia ADN recombinant are deja un impact enorm asupra biologiei i a medicinei i probabil
va cpta o inuen i mai mare odat cu cunoaterea secvenei nucleotidice a ntregului genom uman.
Folosind tehnologia ADN recombinant vor putea studiate zeci de mii de gene cu funcii nc necunoscute.
Terapia genic ar putea deveni o metod curent pentru tratarea anumitor boli i folosind tehnici de
inginerie genetic ar putea construii noi vectori de transfer genic. De asemenea, plantele transgenice
produse prin tehnologia ADN recombinant ar putea ajunge s joace un rol din ce n ce mai important n
agricultura modern.
Experienele implicnd construirea sau folosirea OMG nu trebuie fcute dect dup evaluarea
bioriscului. Proprietile patogene sau alte riscuri poteniale asociate acestor organisme pot reprezenta
proprieti noi, insucient caracterizate. Trebuie evaluate proprietile organismului donor, natura
secvenelor de ADN care vor transferate, proprietile organismului receptor i ale mediului nconjurtor.
Aceti factori vor trebui s ajute la stabilirea nivelului de biosiguran necesar pentru manipularea cu un
minimum de riscuri a OMG rezultate i la identicarea sistemelor de securizare biologic i zic la care
va trebui s se apeleze.
16.1. Criterii de biosiguran pentru sistemele biologice de expresie
Sistemele biologice de expresie sunt alctuite din vectori i celule gazd. Pentru a prezenta
ecien i siguran n folosire ele trebuie s satisfac o serie de criterii. Un exemplu de asemenea
sistem biologic de expresie este plasmidul pUC18. Frecvent utilizat ca vector de clonare n combinaie cu
celule de Escherichia coli K12, plasmidul pUC18 a fost secvenializat n ntregime. Toate genele necesare
pentru exprimarea n alte bacterii au fost ndeprtate din plasmidul su precursor, pBR322. E. coli K12 este
o tulpin nepatogen care nu poate coloniza intestinul oamenilor sntoi sau al animalelor. Experienele
de inginerie genetic de rutin pot desfurate n siguran pe sistemul E. coli K12/pUC18 n condiiile
unui nivel de biosiguran 1, cu condiia ca produii de expresie ai lanului de ADN strin inserat s nu
impun niveluri de biosiguran mai nalte.
89
16.2. Criterii de biosiguran pentru vectorii de expresie

Niveluri mai nalte de biosiguran pot necesare cnd :
1. expresia secvenelor de ADN derivate din organisme patogene poate spori virulena OMG,
2. insucienta caracterizare a anumitor secvene de ADN inserate, ca de exemplu cu ocazia preparrii
unor biblioteci de ADN genomic pornind de la microorganisme patogene,
3. produii genici sunt potenial activi farmacologic,
4. produii genici codic toxine.
16.3. Vectori virali pentru transfer genic
Vectorii virali, cum sunt vectorii de adenovirus, sunt folosii pentru transferul genelor n alte celule.
Acestor vectori le lipsesc anumite gene de replicare viral, ind capabili de propagare numai n liniile
celulare care compenseaz defectul respectiv.
Stocurile de asemenea vectori pot contaminate cu virusuri capabile de replicare, aprute prin
evenimente rare de recombinare spontan la nivelul liniilor celulare n care au fost propagai sau printr-o
insucient puricare. Aceti vectori trebuie manipulai respectnd acelai nivel de biosiguran ca i
acela aplicat n cazul adenovirusurilor parentale din care deriv.
16.4. Animale transgenice i knock-out
Animalele care poart material genetic strin (animale transgenice) trebuie manipulate n condiii
de securizare corespunztoare caracteristicilor produilor genelor strine n cauz. Animalele cu deleii
intite pentru anumite gene (animale knock-out) nu comport n general riscuri biologice particulare.
Printre exemplele de animale transgenice se includ i animalele care exprim receptori pentru
virusuri care n mod normal sunt incapabile s infecteze speciile respective. Dac aceste animale scap
din laborator sau din biobaz i transmit transgena populaiei de animale slbatice, se poate genera
teoretic un rezervor animal pentru virusul n cauz.
Aceast posibilitate a fost discutat n cazul poliovirusului i este relevant n special n contextul
eradicrii poliomielitei. oareci transgenici exprimnd receptorul pentru poliovirusul uman, obinui n
diferite laboratoare, devin sensibili la infecia cu poliovirus pe diverse ci de inoculare a acestuia, iar boala
declanat este clinic i histopatologic similar cu poliomielita uman. Totui, modelul oarece difer de
om prin aceea c poliovirusul administrat oral e c nu se replic deloc la nivelul tractului digestiv, e
se replic inecient. Astfel, este puin probabil ca asemenea oareci transgenici evadai din laborator n
populaia slbatic s poat conduce la apariia unui nou rezervor natural de poliovirus.
Acest exemplu subliniaz faptul c pentru ecare linie nou de animal transgenic trebuie studiate
n detaliu cile prin care poate infectat animalul respectiv, mrimea inocului necesar producerii infeciei
i amploarea eliminrii de virus de ctre animalele infectate. n plus, trebuie luate toate msurile pentru a
asigura izolarea acestor oareci transgenici.
16.5. Plante transgenice
Plantele transgenice care exprim gene ce confer toleran la ierbicide sau rezisten la insecte
duntoare sunt un subiect curent de controvers n multe pri ale lumii. Discuiile se refer la inocuitatea
alimentelor derivate din aceste plante i la consecinele ecologice pe termen lung ale cultivrii lor.
Plantele transgenice exprimnd gene de origine animal sau uman sunt folosite pentru a elabora
produi cu aplicaie medical i nutriional. Se impune o evaluare atent a riscului pentru stabilirea
nivelului corect de biosiguran n cazul producerii acestor plante.
16.5. Evaluarea riscului pentru OMG
Evaluarea riscului pentru lucrul cu OMG trebuie s in cont de caracteristicile organismelor
donoare i receptoare, gazd. Exemple privind aceste caracteristici sunt prezentate n continuare.
90
16. BIOSIGURANA I TEHNOLOGIA ADN RECOMBINANT
Riscuri rezultate direct din gena inserat (organismul donor)

Analiza este necesar n situaii n care produsul genei inserate are proprieti biologice i
farmacologice cunoscute, care pot duntoare, cum ar de exemplu:
1. toxine
2. citokine
3. hormoni
4. factori de reglare a expresiei genice
5. factori de virulen sau stimulatori
6. secvene din oncogene
7. rezistena la antibiotice
8. alergeni.
n analizarea acestor cazuri trebuie s se includ i o evaluare a pragului de exprimare necesar
pentru manifestarea activitii biologice sau farmacologice.
1.
2.
3.
4.
5.
Riscuri asociate cu receptorul (gazda)

Sensibilitatea gazdei
Patogenitatea tulpinii gazd incluznd virulena, infectivitatea i producia de toxine
Modicarea spectrului de gazde
Statusul imun al receptorului
Consecinele expunerii.
Riscuri generate de modicarea unor caractere de patogenitate existente

Multe modicri nu implic gene ai cror produi au o nocivitate intrinsec, dar pot aprea
efecte adverse ca rezultat al modicrii unor caractere existente, patogene sau nepatogene.
Modicarea genelor normale poate inuena patogenitatea. n ncercarea de a identica aceste
riscuri poteniale trebuie rspuns la urmtoarele ntrebri (lista nu este exhaustiv) :
s-a produs o cretere a infectivitii sau patogenitii ?
orice mutaie duntoare pentru receptor poate anihilat ca urmare a inseriei unei gene
strine ?
gena strin codic un determinant de patogenicitate provenit de la alt organism ?
dac ADN strin include un determinant de patogenitate, se poate anticipa c aceast gen va
contribui la patogenitatea OMG ?
exist vreun tratament ?
va afectat sensibilitatea OMG la antibiotice sau la alte forme de tratament ca urmare a
modicrii genetice ?
se poate eradica OMG ?
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
16.6. Alte consideraii

Problema utilizrii de animale sau plante ntregi n scopuri experimentale necesit de asemenea
o atenie deosebit. Cercettorii trebuie s se supun regulilor, restriciilor i cerinelor lucrului cu OMG
aplicate n ara n care se a i de instituiile acesteia.
rile pot avea autoriti naionale care stabilesc ghiduri de lucru cu OMG i care pot ajuta
cercettorii s-i ncadreze munca n nivelul de biosecuritate corespunztor. n unele cazuri clasicarea
poate diferi ntre ri sau rile pot decide s clasice cerinele de biosiguran ntr-un nivel mai sczut sau
mai nalt n funcie de apariia unor noi informaii referitoare la un anumit sistem vector/gazd.
Evaluarea riscului este un proces dinamic care ine cont de noile performane i de progresele
tiinei. Evalurile corecte ale riscurilor vor permite omenirii s se bucure n anii ce vin de roadele
tehnologiei ADN recombinant.
91
92
17. SUBSTANE CHIMICE PERICULOASE
17. Substane chimice periculoase
Personalul din laboratoarele de microbiologie nu este expus numai unor microorganisme

patogene, ci i unor substane chimice periculoase. De aceea este vital cunoaterea exact a efectelor
toxice ale acestor substane chimice, a cilor de expunere, ct i a pericolului care poate asociat cu
manipularea i depozitarea acestora (Anexa 5).
Fiele ce cuprind precauiile recomandate n mnuirea acestor substane, precum i alte informaii
suplimentare care descriu pericolul pe care l implic utilizarea unei anumite substane chimice, disponibile
de la productori i/sau de la distribuitori, trebuie s e prezente i uor accesibile n laboratoarele n care
aceste substane sunt utilizate, de exemplu prin includerea lor n Ghidul de biosiguran sau n Manualul
cu procedurile specice de lucru.
17.1. Deniii i clasicri
Substanele chimice periculoase sunt adeseori denite i clasicate n funcie de a reglementar
de nsoire pentru transportul bunurilor periculoase sau n funcie de riscurile i gradele de periculozitate
pe care acestea le prezint. Ele pot mprite n funcie de gradul de reactivitate, instabilitate, riscul de
incendiu, riscul pentru sntate sau n funcie de efectele toxice.
17.2. Ci de expunere
Exist mai multe ci de expunere la substane chimice periculoase :
1. Inhalare
2. Contact direct
3. Ingestie
4. nepare
5. Prin leziuni cutanate
17.3. Depozitarea substanelor chimice
n laborator se va depozita doar o cantitate minim de chimicale, necesar pentru uzul zilnic.
Stocurile de rezerv trebuie pstrate n ncperi/cldiri avnd n mod expres aceast destinaie,
dotate cu pardoseal din beton i praguri ctre exterior pentru a reine deversrile accidentale. Substanele
inamabile trebuie depozitate separat, n cldiri situate la oarecare distan. Pentru prevenirea aprinderii
vaporilor inamabili i explozivi de la scnteile contactelor electrice, ntreruptoarele trebuie plasate n
afara ncperii iar corpurile de iluminat vor protejate cu globuri etane.
Substanele chimice nu se depoziteaz n ordine alfabetic, pentru c astfel substane
chimice incompatibile (vezi lista de mai jos !) pot ajunge n proxima vecintate, iar unele substane
chimice periculoase pot plasate pe rafturi nalte. Toate recipientele mari de sticl i toate recipientele
coninnd acizi/baze puternice trebuie depozitate la nivelul pardoselii i plasate n tvi (pentru prevenirea
mprtierii accidentale). Trebuie asigurate suporturi protectoare pentru transportul recipientelor mari de
sticl i dispozitive de sifonare pentru umplerea unor recipiente mai mici din containere. Scrile mobile
sunt indispensabile acolo unde exist rafturi nalte.
93
17.4. Reguli generale privind incompatibilitile chimice

Substanele gurate mai jos, n coloana din stnga a Tabelului 13, trebuie astfel depozitate i
manipulate nct s nu poat veni n contact accidental cu substanele enumerate n dreptul lor n coloana
din dreapta.
Tabelul 13. Reguli generale pentru incompatibiliti chimice
Categoria de substane
Substane incompatibile
- Metale alcaline
(sodiu, potasiu, cesiu i litiu)
- Dioxid de carbon, hidrocarburi clorurate, ap
- Halogeni
- Amoniac, acetilen, hidrocarburi
- Acid acetic, hidrogen sulfurat,

anilin, hidrocarburi, acid sulfuric
- Ageni oxidani (acid cromic, acid azotic, peroxizi,

permanganai)
17.5. Efecte toxice ale substanelor chimice

Este binecunoscut faptul c unele substane chimice au efecte adverse asupra sntii celor care
le manipuleaz sau inhaleaz vaporii acestora. n afara substanelor reputate ca toxicitate i ncadrate ca
otrvuri, un numr de substane chimice sunt cunoscute a avea variate efecte toxice. Aparatul respirator,
sngele, catul, rinichii i aparatul gastro-intestinal, ca i alte organe i esuturi, pot afectate n diverse
grade. Unele substane chimice sunt cunoscute pentru efectele carcinogene sau teratogene.
Unii vapori de solveni sunt toxici cnd sunt inhalai. n afar de efectele toxice propriu-zise,
expunerea la vaporii toxici poate determina i efecte secundare, ca, de exemplu, lipsa de coordonare,
slbiciune i alte simptome similare, care pot duce la producerea de accidente.
Expunerea prelungit sau repetat la solveni organici n faz lichid poate duce la afeciuni ale
pielii, datorit degresrii acesteia; au mai fost semnalate reacii alergice sau efecte corozive.
Pentru informaii detaliate asupra efectelor toxice ale substanelor chimice, se va
consulta Anexa 5.
17.6. Substane chimice explozive
Azidele, adesea utilizate n compoziia soluiilor antibacteriene, nu trebuie s vin n contact cu
plumbul sau cuprul (de ex. n instalaiile sanitare de evacuare). Azida de cupru va exploda violent chiar i
la un impact de mic intensitate.
Eterii mbtrnii sau uscai sub form de cristale sunt extrem de instabili i potenial explozivi.
Acidul percloric, dac se usuc pe lemnrie, ceramic sau esturi va exploda i va arde la impact.
Acidul picric i picraii detoneaz la cldur i impact.
17.7. Vrsarea accidental de substane chimice
Majoritatea productorilor de reactivi chimici de laborator public diagrame / postere care descriu
modalitile de aciune n caz de vrsri accidentale de substane chimice. Pe pia sunt disponibile
diagrame i truse de intervenie. Postere/ae adecvate trebuie expuse n locuri vizibile din laborator. De
asemenea, vor procurate materiale cum sunt:
Truse pentru decontaminare chimic
94
17. SUBSTANE CHIMICE PERICULOASE
mbrcminte de protecie (ex: mnui groase din cauciuc; galoi sau cizme de cauciuc) aparat
pentru asisten/protecie respiratorie
Lopei i frae
Pense pentru culegerea fragmentelor de sticl
tergtor de pardoseal (mop), crpe i prosoape de hrtie
Glei
Sod de rufe (carbonat de sodiu, Na2CO3) sau bicarbonat de sodiu ( NaHCO3), pentru neutralizarea
acizilor
Nisip
Detergent neinamabil
n cazul unei deversri accidentale a unei substane chimice periculoase trebuie luate
urmtoarele msuri:
Noticarea evenimentului ctre responsabilul cu biosigurana si evacuarea din zon a personalului
care nu este necesar.
Examinarea i acordarea de ngrijiri medicale persoanelor care ar putut contaminate.
Dac lichidul deversat este inamabil, se vor stinge toate focurile deschise, se vor nchide sursele
de gaze din ncperea respectiv i din zonele adiacente i se vor opri echipamentele electrice
care pot genera scntei.
Evitarea inhalrii de vapori din lichidul deversat.
Se va conecta ventilaia de aerisire, dac operaiunea este lipsit de pericole.
Se va asigura necesarul de materiale i echipamente (vezi mai sus !) pentru a ndeprta substana
chimic deversat.
n eventualitatea unei deversri chimice masive, ncperea trebuie evacuat i ferestrele vor
deschise dac este posibil. Dac materialul deversat este inamabil, trebuie stinse toate focurile
deschise din ncperea respectiv i din cele adiacente; vor oprite toate echipamentele electrice care
genereaz scntei.
17.8. Gazele comprimate i licheate
Informaii privind condiiile de pstrare a gazelor comprimate i licheate sunt prezentate n
Tabelul 14.
95
Tabelul 14. Pstrarea gazelor comprimate i licheate

Container
Condiii de pstrare
Cilindrii cu gaze comprimate sau buteliile cu

gaze licheatea,b
xai n mod solid de perete ( colier / lan) sau

prin intermediul unui suport solid, n aa fel
nct s nu poat dislocate accidental
transportai cu capacele proprii montate i
sprijinite pe inele de cauciuc
cilindrii de rezerv trebuie depozitai ntr-o
alt cldire, la distan de laborator. Acest
loc trebuie inut ncuiat i semnalizat ca atare
printr-un a.
nu trebuie s e plasai n vecintatea surselor
de cldur, a focurilor deschise sau lng
echipamentele electrice care genereaz scntei
i trebuie evitat expunerea lor la lumina solar
direct.
Cilindrii mici (de unic utilizare) cu gazea,b
nu trebuie incinerai
Valva principal de presiune nalt trebuie s e nchis cnd echipamentul nu este utilizat i cnd n ncpere
nu este personal care lucreaz
b.
Camerele n care sunt folosii sau pstrai cilindri cu gaze inamabile trebuie marcate prin ae de avertizare
pe ui.
a.
Pentru informaii suplimentare vezi referinele bibliograce 1 i 49-51, precum i Anexa 5.
96
18. PERICOLE ADIIONALE N LABORATOR
18. Pericole adiionale n laborator
Personalul laboratoarelor se poate confrunta cu pericole generate de diverse forme de

energie: foc, electricitate, radiaii sau zgomot. Informaiile de baz despre fiecare sunt prezentate n
acest capitol.
18.1. Pericolul de incendiu
Strnsa cooperare dintre responsabilul cu biosigurana i responsabilul local cu prevenirea
incendiilor este esenial. n afar de pericolele chimice, trebuie luate n considerare i efectele unui
incendiu sub raportul unei posibile diseminri de material infecios. n funcie de aceasta se poate stabili
dac este mai bine ca focul s e stins sau izolat (limitat).
Este de dorit colaborarea cu responsabilii locali pentru prevenirea incendiilor, pentru instruirea
personalului de laborator cu privire la prevenirea incendiilor, intervenia imediat n caz de incendiu i
utilizarea corect a echipamentului de intervenie mpotriva incendiilor.
Avertizrile de incendiu, instruciunile i cile de evacuare trebuie aate la vedere, n ecare
ncpere, pe coridoare i ci de acces.
Cele mai frecvente cauze de incendiu n laboratoare sunt:
1. Suprancrcarea reelei electrice
2. ntreinerea necorespunztoare a reelei / echipamentelor electrice, de exemplu izolaia necorespunztoare i deteriorat a cablurilor
3. Lungimea excesiv a tubulaturii pentru gaze i a cablurilor i prelungitoarelor electrice aparente
4. Echipamente lsate inutil n funciune
5. Echipamente care nu au fost concepute s funcioneze ntr-un laborator
6. Focul deschis
7. Conductele pentru gaze deteriorate
8. Stocarea / manipularea necorespunztoare a materialelor inamabile sau explozive
9. Pstrarea mpreun a unor chimicale incompatibile
10. Funcionarea unor echipamente generatoare de scntei n atmosfer de substane sau vapori
inamabili
11. Ventilaie insucient sau inadecvat.
Echipamentul de intervenie mpotriva incendiilor trebuie plasat lng uile ncperilor i n puncte
strategice de pe coridoare i ci de acces. Acest echipament va include furtunuri, glei cu ap i nisip i
un stingtor de incendiu. Extinctoarele trebuie inspectate regulat i ntreinute corespunztor; trebuie s
nu e depit perioada de valabilitate nscris pe extinctor. Utilizrile diferitelor tipuri de stingtoare de
incendiu sunt prezentate n Tabelul 15.
97
Tabel 15. Tipuri de stingtoare de incendiu i utilizarea acestora

Tip*
Se utilizeaz pentru:
Nu se va utiliza pentru:
Ap
Hrtie, lemn, esturi
Incendii electrice, lichide

inamabile, metale arznde
Dioxid de carbon ( CO2 )
Lichide i gaze inamabile,

incendii electrice
Metale alcaline, hrtie
Pulbere uscat
Lichide i gaze inamabile,

metale alcaline,
incendii electrice
Echipament reutilizabil, instrumente (rezidiile sunt foarte greu

de nlturat)
Lichide inamabile
Incendii electrice
Spum
* Stingtoarele cu ap sunt propulsate de dioxidul de carbon; stingtoarele cu dioxid de carbon i pulbere trebuie
manipulate cu grij deoarece fora jetului poate mprtia materiale arznde; ncperile trebuie bine ventilate dup
utilizarea stingtoarelor care utilizeaz / genereaz dioxid de carbon.
Pentru informaii suplimentare consultai referina 49.

18.2. Pericole datorate curentului electric
ocul electric pune n pericol viaa; defeciunile electrice pot cauza incendii. De aceea este
esenial ca toate instalaiile i echipamentele electrice s e inspectate i testate cu regularitate, inclusiv
mpmntarea de electricieni calicai. Personalul de laborator nu trebuie s efectueze nici un fel de
reparaie a echipamentului electric.
Chiar tensiuni de alimentare joase pot uneori periculoase. Trebuie luate ntotdeauna precauiuni
pentru a asigura ntre sursa de alimentare i echipament sigurane calibrate corect. ntreruptoarele de
circuit i releele de deconectare n caz de absen a mpmntrii trebuie incluse n circuitele electrice
ale laboratoarelor.
Not. ntreruptoarele de circuit nu protejeaz personalul; ele au scopul de a evita supranclzirea
conductorilor i astfel previn incendiile. mpmntarea i releele de deconectare n caz de absen a
acesteia au scopul de a proteja personalul de ocurile electrice.
Toate echipamentele electrice de laborator trebuie s e prevzute cu mpmntare, preferabil cu
techere cu trei borne. Echipamentele care nu prezint mpmntare din construcie trebuie mpmntate
separat. Un echipament fr mpmntare poate deveni periculos prin apariia accidental a unui contact
electric accidental nedetectat.
Toate echipamentele electrice trebuie s e conforme cu standardele i codurile naionale de
siguran electric.
18.3. Zgomotul
Zgomotul excesiv are efect insidios n timp. Unele tipuri de echipamente de laborator, cum ar
anumite tipuri de aparatur cu laser, precum i facilitile pentru creterea i ntreinerea animalelor de
laborator pot expune personalul la zgomote excesive. Trebuie monitorizat producerea de zgomote pentru
identicarea pericolelor ce ar putea reprezentate de acestea. Acolo unde datele concrete o justic, se
pot crea bariere fonice n jurul echipamentelor productoare de zgomot sau ntre zonele zgomotoase i
alte zone ale laboratorului. De asemenea, atunci cnd nu se poate reduce nivelul zgomotelor i personalul
laboratorului este supus constant unor surse sonice nocive se poate recurge la utilizarea unor protecii
pentru urechi i se va instaura un program de monitorizare medical a efectelor zgomotelor asupra celor
supui cronic la efectul lor.
98
18.4. Radiaiile ionizante

Radioprotecia are ca obiect protejarea oamenilor mpotriva efectelor duntoare ale radiaiilor
ionizante, care includ :
1. Efecte somatice, cum sunt simptomele clinice care apar la indivizii expui. Printre efectele somatice
se numr cancere induse de radiaii (leucemii i cancere osoase, de plmni i ale pielii), care pot
debuta la muli ani de la iradiere, precum i efecte mai puin severe afectri ale pielii, cderea
prului, tulburri hematologice sau gastrointestinale, precum i formarea de cataract.
2. Efecte ereditare, cum sunt simptomele observate la descendenii indivizilor expui. Efectele ereditare
ale expunerii gonadelor includ alterri cromosomiale i mutaii genice. Iradierea celulelor germinale
din gonade cu doze mari de radiaii pot duce de asemenea la moarte celular, ceea ce conduce la
infertilitate n cazul ambelor sexe sau la modicri ale ciclului menstrual la femei. Expunerea la radiaii
a ftului n curs de dezvoltare, cu deosebire n sptmnile 8-15 de sarcin, poate crete riscurile de
malformaii congenitale, de retardare mental sau de cancere induse de radiaii care apar mai trziu
n viaa extrauterin.
18.4.1. Principiile activitilor de radioprotecie
Pentru a limita efectele nocive ale radiaiilor ionizante, utilizarea de radioizotopi va trebui s aib
loc n condiii controlate i va trebui s se conformeze standardelor naionale corespunztoare. Protejarea
fa de radiaii va trebui s e condus pe baza urmtoarelor patru principii:
1. Reducerea la minimum a timpului de expunere la radiaii ;
2. Creterea la maximum a distanei pn la sursa de radiaii ;
3. Ecranarea sursei de radiaii cu un scut radioopac;
4. Substituirea utilizrii radionuclizilor cu tehnici non-radiometrice.
18.4.2. Activitile de protecie cuprind urmtoarele :
1. Timpul. Durata de expunere cu ocazia manipulrii materialelor radioactive poate redus prin :
Recurgerea la practicarea, n perioada de formare, a unor tehnici non-radiometrice; abia dup
stpnirea acestora se vor folosi radionuclizi;
Practicarea tehnicilor radiometrice fr grab, n mod ordonat i la momentul oportun;
Returnarea n spaiul de depozitare a surselor radioactive, imediat dup lucru;
Evacuarea din laborator a rezidiilor radioactive la intervale ct mai frecvente;
Rmnerea n aria radioactiv numai timpul strict necesar;
Supravegherea ndeaproape a utilizrii timpului i a planicrii corespunztoare a operaiunilor
de laborator care presupun manipulri de substane radioactive.
Cu ct timpul petrecut n cmpul de radiaii este mai redus, cu att doza de radiaii primit de o
persoan este mai redus, dup cum reiese din ecuaia:
Doza = doza per unitatea de timp x timpul
2.
Distana. Doza per unitatea de timp este funcie de inversul ptratului distanei pn la surs, pentru
cele mai multe radiaii i X :
Doza per unitatea de timp = constant x 1 / distana2 ;
Exemplu : Dublarea distanei pn la surs va duce la o reducere a expunerii la n acelai interval
de timp. Se pot utiliza diferite sisteme sau dispozitive pentru creterea distanei de manipulare dintre
operator i sursa radioactiv cleti, pense, brae articulate, dispozitive de pipetare, etc.
De notat c o reducere mic a distanei va duce la o reducere mare a dozei efectiv primite.
99
3.
Bariera. Ecranarea, adic amplasarea ntre operatori sau alte persoane din laborator i surs a
unor scuturi / bariere care absorb sau atenueaz energia radiaiilor va limita expunerea. Alegerea
i grosimea materialelor din care sunt confecionate scuturile depind de abilitatea/capacitatea de
penetrare (tipul i energia)radiaiilor. Bariere din material acrilic, ln sau metale uoare, n grosime
de 1,3-1,5 cm se utilizeaz pentru particulele de energie nalt, n timp ce scuturi de plumb, cu
densitate nalt, se utilizeaz pentru oprirea radiaiilor de energie nalt i X .
4.
Substituia. Nu se vor utiliza materiale bazate pe radionuclizi, dac sunt disponibile se poate recurge
la alte tehnici n acelai scop. Dac substituia nu este posibil, se vor alege radionuclizii cu puterea
de penetrare sau energia cea mai sczut.
18.4.3. Proceduri de siguran n timpul lucrului cu radionuclizi

n stabilirea regulilor de lucru cu substane radioactive trebuie luate n considerare urmtoarele
patru domenii:
1. Aria de lucru cu radionuclizi
substanele radioactive se vor utiliza numai n zone special destinate ;
nu este permis prezena dect a persoanelor strict necesare;
se va utiliza echipament de protecie personal (halate, ochelari de protecie, mnui de unic
folosin );
se va monitoriza expunerea la radiaii a personalului ;
Laboratoarele n care se manipuleaz radioizotopi vor astfel concepute i amenajate nct s permit
restrngerea ariilor de lucru efectiv i s simplice la maximum curarea i decontaminarea. Aria de
lucru cu radionuclizi trebuie s e amplasat ntr-o ncpere mic adiacent spaiilor principale ale
laboratorului sau ntr-o arie special destinat n interiorul laboratorului dar separat de alte activiti.
Semne de avertizare reprezentnd sigla internaional pentru pericolul radioactiv vor aate la
intrarea n aria cu radiaii (Figura 12).
2. Masa de lucru
Se va lucra n tvi n care a fost aternut hrtie absorbant de unic utilizare ;
Se vor limita cantitile de radionuclizi utilizate ;
Se vor monta ecrane (scuturi) de radiaii pe mesele de lucru i n ariile de colectare de deeuri
radioactive ;
Containerele cu deeuri radioactive vor marcate cu sigla de radiaii, precum i cu identitatea
radionuclidului, activitatea lui i data testrii ;
Se vor utiliza detectoare/contoare de radiaii pentru monitorizarea ariilor de lucru, echipamentelor
de protecie personal i a minilor, dup terminarea lucrului.
3. Zona de depozitare a deeurilor radioactive
Deeurile radioactive vor evacuate frecvent din aria de lucru ;
Pentru transportul deeurilor se vor utiliza containere cu ecranare corespunztoare.
4. nregistrrile i interveniile de urgen.
Se vor realiza i pstra consemnri detaliate privind utilizarea i evacuarea materialelor
radioactive ;
Se vor analiza nregistrrile dozimetrice pentru materialele care depesc normele admise;
100
Se vor alctui planuri de intervenie n caz de urgen i se vor face periodic exerciii de
aplicare ;
n cazuri de urgen, se va asigura n primul rnd asistena persoanelor rnite;
Ariile contaminate se vor cura i decontamina cu mult grij ;
Se solicit asistena responsabilului cu biosigurana ;
Se vor consemna i arhiva toate raportrile de incidente.
Figura 12. Simbolul internaional de pericol de radiaii
101
102
19. RESPONSABILUL CU BIOSIGURANA I COMITETUL DE BIOSIGURAN
19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de

biosiguran
Este esenial ca ecare laborator s aib stabilit o politic atotcuprinztoare, un ghid de

biosiguran precum i programe de aciune pentru aplicarea lor. Responsabilitatea pentru acestea revine
directorului / efului instituiei sau al laboratorului, care poate delega unele sarcini responsabilului pentru
biosiguran sau altui personal specializat.
Sigurana muncii n laborator este totodat responsabilitatea tuturor, de la e i tehnicieni superiori
pn la ultimul angajat al laboratorului; ecare membru al personalului este responsabil att pentru propria
siguran ct i pentru cea a colegilor de lucru. Fiecare angajat este obligat s-i desfoare activitatea n
condiii de siguran i s raporteze superiorului orice incident, aciune sau situaie periculoas.
Este de dorit s se efectueze periodic audituri pe linia proteciei muncii prin specialiti proprii sau
din afara instituiei.
19.1. Responsabilul cu biosigurana
Oriunde este posibil trebuie numit un responsabil cu biosigurana pentru a asigura c politicile
i programele sunt aplicate cu consecven n tot laboratorul. Responsabilul cu biosigurana i execut
atribuiile n numele efului instituiei sau al laboratorului. n unitile mici, responsabilul cu biosigurana
poate un microbiolog sau un membru al personalului tehnic care ndeplinete i aceste atribuii, ind
prevzut c le consacr o anumit parte din timpul su de lucru.
Indiferent de gradul de implicare n munca de biosiguran, persoana desemnat trebuie s aib
competena profesional necesar pentru iniierea, monitorizarea i aprobarea unor activiti specice, n
concordan cu procedurile generale de biosecurizare i biosiguran.
Responsabilul cu biosigurana trebuie s cunoasc i s aplice legile, reglementrile i ghidurile
naionale i internaionale relevante; de asemenea trebuie s asiste laboratorul n elaborarea propriilor
proceduri operaionale standard. Persoana desemnat trebuie s aib o pregtire de baz n microbiologie
i cunotine de biochimie, biologie i zic. Sunt de dorit cunotine despre practici de laborator, clinice
i de biosiguran, inclusiv despre echipamente de securizare i informaii tehnologice relevante pentru
proiectarea, operarea i ntreinerea facilitilor. Persoana respectiv trebuie s e capabil s comunice
ecient cu personalul administrativ, tehnic i din serviciile auxiliare.
Activitile responsabilului cu biosigurana trebuie s includ urmtoarele:
Consultan tehnic privind biosigurana i biosecuritatea;

Efectuarea de audituri interne periodice n domeniul biosiguranei, avnd ca obiect metodele,
procedurile i protocoalele de lucru, agenii biologici, materialele i echipamentele;
Discutarea nclcrilor protocoalelor sau procedurilor de biosiguran cu persoanele n cauz;
Vericarea faptului c toi membrii personalului au fost instruii corespunztor n probleme de
biosiguran;
Asigurarea unui program de educaie continu n domeniul biosiguranei;
Investigarea tuturor incidentelor care implic o posibil diseminare de materiale infectate sau toxice i
raportarea celor constatate i a recomandrilor ctre eful de laborator i Comitetul de biosiguran;
Conlucrarea cu personalul medical n legtur cu posibilele infecii dobndite n laborator;
103
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare, n urma unor scurgeri sau a altor incidente implicnd
materiale infecioase;
Asigurarea gestionrii corecte a deeurilor;
Asigurarea unei decontaminri corespunztoare a echipamentelor nainte de a supuse unor operaii
de reparaii sau ntreinere periodic;
Meninerea interesului comunitii privind problemele de sntate i de mediu;
Stabilirea de proceduri adecvate pentru intrarea / ieirea n/din laborator a materialelor infecioase
patogene n conformitate cu reglementrile naionale;
Analizarea aspectelor de biosiguran din toate planurile, protocoalele i procedurile operaionale din
activitile de cercetare care implic lucrul cu ageni infecioi, nainte de nceperea efectiv a acestor
activiti;
Instituirea unui sistem de intervenie n caz de situaii de urgen.
19.2. Comitetul de biosiguran

Trebuie ninat un comitet de biosiguran pentru a elabora politicile instituionale n materie
de biosiguran i codurile de practici n domeniu. Comitetul de biosiguran trebuie, de asemenea, s
analizeze protocoalele de cercetare care implic utilizarea de ageni infecioi, animale de laborator,
ADN recombinant i materiale modicate genetic. Alte funcii ale comitetului pot include evaluarea
riscurilor, formularea unor noi politici de biosiguran i arbitrajul n disputele referitoare la probleme de
biosiguran.
Componena comitetului de biosiguran trebuie s reecte diversele arii de activitate i nivelul de
competen tiinic ale instituiei.
Componena de baz a unui comitet de siguran ar trebui s includ :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Responsabilul (ii) cu biosigurana;

Personal tiinic;
Personal medical;
Veterinar (i) (dac se lucreaz cu animale);
Reprezentani ai personalului tehnic;
Reprezentani ai conducerii laboratorului.
Comitetul de biosiguran trebuie s solicite sfatul responsabililor pentru siguran din diferitele
departamente (ex. specialiti n radioprotecie, securitatea muncii n industrie, prevenirea incendiilor, etc.),
iar n unele situaii se poate solicita asistena unor experi independeni din diferite domenii apropiate de
activitate, a autoritilor locale i a organismelor naionale de reglementare. Participarea unor membri
ai comunitilor locale poate de asemenea util, mai ales dac exist chestiuni controversate n
dezbatere.
104
20. REGULI DE SIGURAN PENTRU PERSONALUL AUXILIAR
20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar
ntr-un laborator, desfurarea activitii n condiii optime i de siguran depinde, n mare

msur, de personalul auxiliar i, de aceea, este esenial ca acesta s e bine instruit asupra regulilor de
siguran care trebuie respectate pentru o astfel de activitate.
20.1 Personalul tehnic i de ntreinere a cldirii
Personalul tehnic care se ocup cu ntreinerea i repararea cldirii, instalaiilor i echipamentelor
trebuie s aib anumite cunotine legate de natura activitii laboratorului respectiv, s cunoasc normele
i procedurile de biosiguran.
Testarea echipamentului dup vericare trebuie fcut i/sau supravegheat de responsabilul cu
biosigurana (de exemplu: testarea ecienei HSB dup instalarea unor ltre noi).
Laboratoarele sau instituiile care nu au tehnicieni i servicii de ntreinere proprii, trebuie s-i
asigure colaborarea cu tehnicieni abilitai existeni n localitate pe care s i pun la curent cu dotarea i
condiiile de lucru din laborator.
Inginerii i personalul de ntreinere vor avea acces n laboratoarele cu grad de biosiguran de
Nivel 3 sau de Nivel 4 numai cu aprobarea i sub supravegherea responsabilului cu biosigurana i/sau a
efului laboratorului.
20.2. Personalul responsabil cu meninerea cureniei
n laboratoarele cu grad de biosiguran de Nivel 3 i Nivel 4, curenia este de preferat s e
fcut de personalul laboratorului. Personalul angajat pentru curenie va avea acces n laboratoarele de
Nivel 3 sau de Nivel 4 numai cu aprobarea i sub supravegherea responsabilului cu biosigurana i/sau
a efului laboratorului.
105
106
21. PROGRAMELE DE INSTRUIRE
21. Programele de instruire
Un program continuu de instruire privind protecia la locul de munc este esenial pentru
meninerea vigilenei personalului laboratorului i a personalului auxiliar n domeniul biosiguranei. ei
de laborator, cu ajutorul responsabilului cu biosigurana i a altor persoane calicate au un rol cheie n
instruirea personalului. Eciena instruirii privind biosigurana, de fapt ntreaga instruire privind protecia
personal i meninerea sntii, depinde de implicarea echipei de conducere, de factori motivaionali,
instructajul profesional iniial adecvat, relaiile de comunicare bune i, n ultim instan, de elurile i
obiectivele instituiei. n cele ce urmeaz vor prezentate elementele critice ale unui program ecace de
instruire privind biosigurana.
1. Evaluarea necesitilor
Acest proces include denirea sarcinilor identicate, n ordinea importanei lor (frecven, grad de
risc, complexitate) i anumite detalii privind etapele ce trebuie parcurse pentru realizarea acestora.
2. Stabilirea obiectivelor instruirii
Acestea sunt deprinderi corecte pe care cel instruit va trebui s demonstreze, dup instruire, c
i le-a nsuit, n timpul muncii. Obiectivele pot preciza condiiile n care se desfoar anumite activiti
sau deprinderi i nivelul cerut de competen.
3. Precizarea coninutului i mijloacelor de desfurare a instruirii.
Coninutul este reprezentat de cunotinele sau aptitudinile pe care persoanele instruite trebuie
s i le nsueasc i care s-i permit atingerea obiectivelor urmrite n materie de comportament.
Acele persoane, care-i cunosc cel mai bine profesia i cerinele acesteia, sunt cele mai n msur
pentru a deni coninutul programului de instruire privind biosigurana. Alte metode folosite trebuie s se
concentreze pe includerea unor exerciii menite a nlesni rezolvarea problemelor sau pe imaginarea unor
mijloace educative menite s duc la corectarea greelilor constatate la aplicarea unor tehnici. Nu este
evident c o anumit metod de nvare (lectur, cursuri televizate, programe pe calculator, cursuri video
interactive etc.) este mai bun dect alta. Foarte multe depind de necesitile specice ale instructajului,
de componena grupului care este instruit, etc.
4. Stabilirea diferenelor individuale de instruire
Instruirea efectiv trebuie s in seama de particularitile i calitile persoanelor instruite.
Indivizii i grupurile pot diferi n ceea ce privete aptitudinile, gradul de instruire, cultur, limba vorbit
i nivelul deprinderilor profesionale preexistente instruirii. Modul n care este perceput programul de
instruire de ctre participani, ca un mijloc de a-i mbuntii performanele profesionale sau securitatea
personal, va inuena substanial modalitatea de instruire. Unii nva mai bine prin metoda vizual, alii
prin practica direct, alii prin studierea unor materiale scrise.
Cursurile trebuie s se adreseze n egal msur angajailor cu probleme speciale, de aceea
trebuie adaptate, de exemplu pentru cei cu defecte de auz. n plus, se recomand ca toi cei care concep i
desfoar programe de instruire pe probleme de biosiguran, s e familiarizai cu metodele, principiile
de pedagogie pentru nvare n cazul adulilor.
107
5. Adaptarea modalitilor de instruire

Modalitile de instruire: curs, proiecii, materiale scrise, etc. nu trebuie s vin n conict, s
genereze reacii negative sau s nu e adaptate temei abordate. De exemplu, dac scopul activitii
de instruire este acela de a dezvolta capacitatea de rezolvare a problemelor survenite, atunci ar trebui
s e stimulat mai mult gndirea/judecata/reacia prompt n cunotin de cauz, dect memorizarea
mecanic. Instruirea ar trebui s stimuleze un comportament practic i/sau un feedback corespunztor
(pozitiv/precis/credibil). n plus, programele de instruire care furnizeaz informaii pentru practic, n
condiii similare celor de la locul de munc, vor stimula transferul deprinderilor i cunotinelor dobndite
la actualul loc de munc.
6. Evaluarea instruirii
Aceasta furnizeaz informaii care ajut s se aprecieze n ce msur instruirea a avut efectul
scontat. Evalurile instruirilor sunt n general de patru feluri:
- evaluarea reaciei cursanilor la tematica i coninutul instructajului
- estimarea cunotinelor asimilate i/sau a noilor performane ale cursanilor
- estimarea schimbrilor de comportament la locul de munc
- evaluarea unor rezultate tangibile obinute n raport cu obiectivele i elurile organizatorilor
Cea mai complet evaluare a instruirii presupune cumularea celor patru modaliti menionate.
Cea mai puin ecient metod de evaluare este s se ia n considerare numai reacia cursanilor
la tematica instructajului, deoarece aceasta poate s nu coincid cu aplicarea la locul munc a informaiilor
primite i deci cu ecacitatea real a instructajului. Aceasta nu trebuie s constituie unicul criteriu pentru
aprecierea ecienei.
7. Revizuirea instruirii
Evaluarea unei instruirii arat rareori c un program de instruire a avut succes deplin sau a fost
un eec total, datorit utilizrii unui numr mare de criterii pentru msurarea rezultatelor. De obicei, datele
indic o mai bun nelegere, reinere sau aplicare a unor pri din curs, comparativ cu altele. Diferenele
sau lipsurile n cunotinele sau competenele care ar trebuit s e nsuite n timpul instruirii, arat
necesitatea unei prelungiri a timpului de instruire, a folosirii unor tehnici alternative sau a unor instructori
mai ecieni.
OMS furnizeaz o gam variat de materiale pentru instruirea n domeniul siguranei
microbiologice.
108
22. LISTA DE EXAMINARE PRIVIND SIGURANA
22. Lista de examinare privind sigurana
Prezenta list-chestionar de examinare este destinat s serveasc la evaluarea preocuprilor

unui laborator biomedical dat n domeniul biosiguranei i al biosecuritii.
ncperile n care este instalat laboratorul
1. S-au respectat criteriile de calicare i certicare atunci cnd s-a construit, respectiv cnd s-a reevaluat
localul ?
2. Localul corespunde cerinelor naionale i locale pentru construcii, inclusiv cele referitoare la precauiile
n caz de dezastre naturale, acolo unde este cazul ?
3. Cile de acces sunt bine semnalate i accesibile ?
4. Localul este curat ?
5. Exist vicii de structur la nivelul pardoselii ?
6. Pardoseala i scrile sunt netede, uniforme i nealunecoase ?
7. Spaiul de lucru permite realizarea activitilor n condiii de siguran ?
8. Spaiile de acces i coridoarele sunt adecvate pentru deplasarea persoanelor i a unor echipamente
de mari dimensiuni ?
9. Mesele de lucru, mobilierul i instalaiile sunt n stare bun ?
10.Suprafeele de lucru sunt rezistente la solveni i substane corozive ?
11. Exista cte o chiuvet pentru splarea minilor n ecare camer ?
12. Cldirile sunt construite i ntreinute astfel nct s previn ptrunderea i cuibrirea roztoarelor i
insectelor ?
13. Prile expuse ale conductelor de abur i ap erbinte sunt izolate sau mascate pentru a asigura
protecia personalului ?
14. Exist un generator electric autonom pentru cazurile de ntrerupere a curentului ?
15. Poate restricionat accesul n laborator, acesta ind permis numai persoanelor autorizate ?
16. A fost fcut o evaluare a riscului pentru a se asigura c echipamentul i facilitile sunt adecvate
pentru desfurarea activitilor prevzute ?
Facilitile i condiiile de depozitare
1. Locurile de depozitare, rafturile, etc sunt astfel amenajate nct materialele depozitate s nu alunece
sau s cad ?
2. Se pstreaz curenia, se evit acumularea de gunoaie, de materiale i obiecte de prisos ce pot
reprezenta pericol de accidentare, incendiu sau explozie ?
3. Congelatoarele i spaiile de depozitare se pot ncuia ?
Instalaii sanitare i dependine pentru personal
1. ncperile i dotrile sunt meninute curate, n ordine i corespunztoare din punct de vedere sanitar ?
2. Exist ap potabil ?
3. WC-urile i duurile sunt adecvate, curate, n bun stare ? Exist WC-uri i duuri separate pentru
brbai i femei ?
4. Exist ap rece, cald, spun i prosoape ?
109
5. Sunt vestiare pentru brbai i femei ?

6. Exist spaii (de ex.dulapuri) individuale pentru hainele de strad ?
7. Exista o camer n care se poate mnca, bea cafea etc ?
8. Nivelul zgomotului este acceptabil ?
9. Depozitarea i evacuarea gunoiului menajer se face n mod corespunztor ?
nclzire i ventilaie
1. Temperatura la locul de munc este n limitele confortului termic ?
2. Ferestrele sunt protejate de soare prin jaluzele ?
3. Este asigurat o ventilaie adecvat (ex: minimum 6 schimburi ale aerului /or), mai ales n camerele
cu sistem mecanic de ventilaie ?
4. Sistemul de ventilaie este prevzut cu ltre HEPA ?
5. Ventilaia mecanic perturb uxul de aer laminar n interiorul sau n jurul hotelor de securitate biologic
sau al hotelor de protecie chimic ?
Iluminare
1. Iluminarea este adecvat (ex. 300 400 lx.) ?
2. Exist iluminare local la nivelul meselor de lucru ?
3. Este asigurat o iluminare uniform, fr locuri ntunecoase sau slab luminate n ncperi sau pe
coridoare ?
4. Lmpile uorescente sunt dispuse paralel cu mesele de lucru ?
5. Lumina lmpilor uorescente este corespunztoare cromatic (compensat) ?
Servicii
1. Este ecare ncpere a laboratorului prevzut cu suciente chiuvete, ap, prize de electricitate i guri
de gaz pentru a permite desfurarea activitii n condiii de securitate ?
2. Exist programe adecvate de ntreinere curent i inspecie periodic pentru sigurane, prize, instalaii
de iluminat, cabluri, conducte, etc. ?
3. Defeciunile sunt remediate n timp optim ?
4. Exist un serviciu tehnic propriu de reparaii i ntreinere, cu personal calicat, care s aib cunotinte
referitoare la activitatea specic de laborator ?
5. Accesul personalului de ntreinere n diferite zone ale laboratorului este controlat i consemnat ?
6. Dac nu exist un serviciu tehnic i de ntreinere propriu, au fost contactate rme de reparaii i
ntreinere care s se familiarizat cu echipamentele i activitatea din laborator ?
7. Exist o unitate pentru ntreinerea cureniei ?
8. Accesul personalului pentru curenie n diferite zone ale laboratorului este controlat i consemnat ?
9. Sunt asigurate serviciile IT n condiii de securizare ?
Msuri de biosecuritate
1. A fost fcut o evaluare calitativ a riscurilor pentru care este necesar un sistem de alarm ?
2. S-a fcut o evaluare a riscurilor i au fost stabilite planuri de intervenie conform prioritilor ?
3. ntreaga cldire rmne ncuiat n afara programului de lucru ?
4. Uile i ferestrele sunt asigurate mpotriva spargerilor ?
5. Accesul n ncperile n care se a materiale periculoase sau aparatur scump este controlat i
consemnat ?
6. n afara programului aceste ncperi sunt ncuiate ?
110
Prevenirea i combaterea incendiilor

1. Exist un sistem de alarm n caz de incendiu ?
2. Ieirile de incendiu sunt accesibile ?
3. Sistemul de detectare a incendiilor exist, funcioneaz i este testat periodic ?
4. Exist monitorizare din partea echipelor de pompieri ?
5. Ieirile sunt semnalizate luminos n mod adecvat ?
6. Drumul ctre ieire este marcat atunci cnd nu este evident ?
7. Toate ieirile sunt accesibile i descuiate n timpul programului ?
8. Exist ieiri ascunse de elemente de decor, mobil sau aparatur ?
9. Accesul ctre ieiri este asigurat n aa fel nct s nu e necesar traversarea unor zone periculoase ?
10. Toate ieirile conduc spre spaii deschise ?
11. Coridoarele, spaiile de trecere i holurile sunt libere i fr obiecte care s mpiedice deplasarea
personalului i folosirea mijloacelor destinate stingerii incendiilor ?
12. Echipamentul pentru stingerea incendiilor este uor de identicat printr-un cod de culori adecvat ?
13. Stingtoarele de incendiu portabile sunt ncrcate cu regularitate, funcioneaz i se a n permanen
n locurile special desemnate ?
14. ncperile cu risc potenial de incendiu sunt echipate cu stingtoare i/sau echipamente contra
incendiilor ?
15. n cazul n care ntr-o ncpere se folosesc lichide i gaze inamabile, ventilaia mecanic este
sucient pentru a elimina vaporii nainte de atingerea unei concentraii periculoase ?
16. Personalul este instruit pentru a interveni n caz de incendiu ?
Stocarea lichidelor inamabile
1. Depozitul de lichide inamabile este separat de cldirea principal ?
2. Depozitul de substane inamabile este clar semnalizat ca zon cu risc de incendiu ?
3. Are un sistem de ventilaie propriu, care s e separat de cldirea principal ?
4. Comutatoarele electrice sunt protejate sau plasate n afara depozitului ?
5. Instalaia de iluminat este asigurat mpotriva aprinderii eventualilor vapori prin scnteie ?
6. Lichidele inamabile sunt pstrate n containere adecvate, ventilate, construite din materiale
neinamabile ?
7. Coninutul containerelor este corect menionat pe etichet ?
8. Stingtoarele, pturile ignifuge i alte echipamente contra incendiilor exist i sunt plasate n afara, dar
n imediata apropiere a depozitului ?
9. Inscripiile care interzic fumatul se a la vedere n afara i n interiorul depozitului de lichide inamabile ?
10. n laborator sunt stocate numai cantiti minime de substane inamabile ?
11. Sunt acestea inute n spaii special amenajate, destinate substanelor inamabile ?
12. Aceste spaii poart inscripiile Lichide inamabile-Pericol de incendiu ?
13. Personalul este instruit pentru manipularea i folosirea corect a lichidelor inamabile ?
Gazele comprimate i licheate
1.Containerele pentru gaz sunt corect etichetate i marcate cu coduri de culoare adecvate ?
2. Cilindrii cu gaz comprimat i valvele acestora pentru presiune nalt i reductorii de presiune sunt
inspectai periodic ?
3.Valvele de reducie sunt ntreinute corespunztor ?
4. Indicatorul de presiune este conectat cnd cilindrul se a n funciune ?
5. Capacul de protecie este pus n timpul transportului sau cnd cilindrul nu funcioneaz ?
6. Cilindrii cu gaz comprimat sunt depozitai corespunztor, astfel nct s nu cad n cazul unor dezastre
naturale ?
111
7.Cilindrii (buteliile) cu gaz licheat i rezervoarele de produse petroliere lichide sunt ferite de sursele de
cldur ?
8. Personalul este corect instruit pentru a folosi i transporta corect gazele comprimate i licheate ?
Pericole de natur electric
1. Toate instalaiile electrice noi, nlocuirile, modicrile i reparaiile sunt fcute n conformitate cu normele
naionale de siguran ?
2. Instalaia electric are mpmntare ?
3. Sunt protejate toate circuitele din laborator cu sigurane, sigurane de mpmntare i dispozitive de
deconectare de la reea ?
4. Dispozitivele electrice existente sunt avizate pentru a folosite n laborator ?
5. Cordoanele electrice ale aparatelor au lungime adecvat (sunt contraindicate cablurile prea lungi), sunt
n bun stare i lipsite de uzuri, crpturi i tieturi ?
6. Este ecare priz destinat unui singur aparat ? (nu se recomand folosirea de prize multiple)
Echipamentul de protecie pentru personal
1. Exist echipament de protecie specic pentru ntreg personalul, ex. mnui, halate, oruri, salopete
?
2. Exist echipament special pentru lucrul cu substane chimice, radioactive i cancerigene (soruri de
cauciuc, mnui pentru chimicale); exist mnui rezistente la cldur pentru descrcarea autoclavelor
i pupinelelor ?
3. Exist ochelari de protecie, mti, scuturi (vizoare) tranparente pentru fa ?
4. Exist dispozitive pentru splarea ochilor ?
5. Exista duuri pentru situaii de urgen ?
6. Protecia mpotriva radiaiilor se realizeaz conform standardelor naionale i internaionale, inclusiv
existena dozimetrelor ?
7. Exist mti de gaze curate, dezinfectate i controlate cu regularitate; sunt ele pstrate la ndemn
i n condiii igienice ?
8. Exist ltre corespunztoare tipurilor de mti (ex: ltre HEPA pentru microorganisme, ltre adecvate
pentru gaze sau particule ?
9. Mtile de gaze individuale au fost testate pentru etaneitate pe faa persoanelor respective ?
Protecia i starea de sntate a personalului
1. Exist un serviciu de medicin profesional pentru personal ?
2. Trusele de prim ajutor sunt plasate n locuri accesibile ?
3. Exist personal calicat pentru a acorda primul ajutor ?
4. Acetia sunt instruii pentru a face fa situaiilor de urgen specice laboratorului (contact cu substane
corozive, ingestie accidental de substane toxice sau infectante) ?
5. Personalul auxiliar (de ex. personalul care face curenia i cel administrativ) a fost instruit asupra riscurilor
poteniale pe care le prezint laboratorul i materialele pe care le manipuleaz ?
6. Sunt aate anunuri vizibile cuprinznd numele persoanelor care pot acorda primul ajutor i telefoanele
serviciilor de urgen ?
7. Femeile de vrst fertil sunt informate despre riscurile i consecinele posibile pe care le implic lucrul
cu substane carcinogene, mutagene, teratogene i cu bacterii ?
8. Femeile de vrst fertil care bnuiesc sau sunt sigure c sunt nsrcinate tiu c trebuie s-i informeze
ei n scopul eventualei schimbri a locului de munc pe perioada sarcinii ?
9. Exist un program de imunizri adaptat specicului laboratorului ?
10. Se efectueaz teste cutanate i radiologice pentru cei care lucreaz n condiii de risc TBC sau alte
112
teste specice pentru alte infecii ?

11. Exist o eviden a bolilor profesionale i a accidentelor de munc ?
12. Exist semnale, sigle i ae de avertizare pentru prevenirea i reducerea riscului de accidente ?
13. Personalul este instruit pentru respectarea precauiilor de biosiguran ?
14. Personalul este ncurajat s raporteze expunerile poteniale ?
Echipamentul de laborator
1. ntregul echipament a fost certicat ca sigur pentru folosire i autorizat sub raportul folosirii n condiii
de securitate ?
2. Exist proceduri scrise pentru decontaminarea echipamentului nainte de a supus operaiunilor de
ntreinere ?
3. Hotele de siguran biologic i hotele de protecie chimic sunt ntreinute i vericate periodic ?
4. Autoclavele i alte aparate care funcioneaz sub presiune sunt vericate periodic ?
5. Rotoarele i port-cuvele centrifugilor sunt vericate periodic ?
6. Filtrele HEPA sunt nlocuite periodic ?
7. Se folosesc pipete n locul acelor de sering ?
8. Sticlria ciobit sau crpat este ntotdeauna aruncat i nu refolosit ?
9. Exist containere speciale pentru sticlria spart ?
10. Se folosete de preferin material plastic n locul sticlriei ori de cte ori este posibil ?
11. Se folosesc containere speciale pentru obiecte neptoare/ tietoare folosite ?
Materiale infecioase
1. Primirea probelor se face n condiii de securitate ?
2. Se pstreaz nregistrri ale probelor recepionate ?
3. Probele sunt despachetate n hota de siguran biologic cu grija i atenia cuvenite pentru a evita
spargerea i scurgerea/stropirea ?
4. Se folosesc mnui i alte echipamente de protecie pentru despachetarea probelor ?
5.Personalul este instruit n ceea ce privete transportul produselor infecioase conform legislaiei naionale
i/sau internaionale ?
6. Este meninut ordinea i curenia pe mesele de lucru ?
7. ndeprtarea materialelor infecte se face cel puin o dat pe zi, iar tratarea i evacuarea lor se face
fr riscuri pentru personal i pentru mediul nconjurtor ?
8. Au fost instruii toi membrii laboratorului asupra procedurilor de urmat n cazul n care se produce
spargerea i mprtierea de culturi microbiene i materiale infecioase ?
9. Ecacitatea sterilizrii este controlat prin utilizarea de indicatori zici, chimici i biologici ?
10. Exist o procedur scris pentru decontaminarea cu regularitate a centrifugilor ?
11. Cupele sau suporii pentru cupe ai centrifugilor sunt prevzui cu capace etane ?
12. Se folosesc curent i corect dezinfectanii indicai ?
13. Personalul care lucreaz n laboratoare cu nivel de biosecuritate 3 i 4 este pregtit n mod
corespunztor prin instructaje speciale ?
Chimicale i substane radioactive
1. Chimicalele incompatibile ntre ele sunt stocate i manipulate separat ?
2. Sunt toate chimicalele etichetate corect cu menionarea denumirii corecte i avertizare asupra pericolelor
legate de manipulare ?
3. Sunt expuse la vedere ae de avertizare cu privire la riscul de accidentare legat de manipularea
unor chimicale ?
113
4. Exista truse pentru curarea/neutralizarea chimicalelor vrsate ?

5. Personalul este instruit cu privire la msurile ce trebuie luate n cazul scurgerilor sau vrsrii de
chimicale periculoase ?
6. Substanele inamabile sunt depozitate corect i n siguran n cantiti minime n locuri securizate ?
7. Exist crucioare/suporturi pentru transportul sticlelor ?
8. Exist un responsabil cu protecia mpotriva radiaiilor, sau un manual de referin la ndemna
personalului, spre consultare ?
9. Personalul este instruit corespunztor pentru lucrul cu substane radioactive ?
10. Exist evidene i nregistrri corecte ale stocurilor i consumurilor de substane radioactive folosite ?
11. Exist ecrane de protecie mpotriva radiaiilor ?
12. Este monitorizat gradul de iradiere al personalului ?
114
ANEXA 1
Anexa 1
Primul-ajutor
Primul ajutor n caz de expunere accidental la material real / potenial infecios const n
aplicarea imediat dup eveniment, de ctre o persoan avizat, a tratamentului medical adecvat, chiar
la locul producerii accidentului.
Primul ajutor se acord respectnd metoda aprobat pentru o anumit expunere, urmnd ca
ngrijirile s e continuate de ctre un medic de specialitate pentru tratarea consecinelor accidentului.
Echipamentul minim necesar pentru acordarea primului ajutor const n:
1. Trusa de prim-ajutor,
2. mbrcminte de protecie i echipament de siguran pentru persoana care asigur primul
ajutor,
3. Echipament de irigare ocular.
1. Trusa de prim-ajutor
Trusa de prim-ajutor va confecionat din materiale care s asigure protecia coninutului
mpotriva prafului i a umiditii. Trusa va pstrat la loc vizibil, uor de recunoscut i de accesat. Prin
convenie internaional, trusa de primajutor este identicat printr-o etichet cu o cruce alb pe fond
verde.
Trusa de prim-ajutor trebuie s conin:
1. Instruciuni generale de utilizare i lista de inventar a acesteia
2. Comprese sterile de diferite dimensiuni, n ambalaje individuale
3. Comprese sterile oculare cu bandaje de ataare
4. Comprese triunghiulare
5. Comprese sterile de acoperire a rnilor
6. Ace cu siguran
7. Fee sterile simple
8. Ghid / manual de acordare a primului-ajutor calicat, de exemplu, editat de Crucea Roie
Internaional.
2. Echipamentul pentru protecia celui care acord primul-ajutor
1. Piesa pentru respiraia gur-la-gur
2. Mnui de cauciuc i alte mijloace de protecie mpotriva expunerii la snge.
3. Trusa de curenie/neutralizare a dispersrilor de snge (vezi Capitolul 14).
3. Echipamentul de irigare ocular
Echipamentul de irigare ocular trebuie s e la ndemn, iar personalul bine instruit pentru
utilizarea sa corect.
115
Procedurile de prim ajutor dup expunerea accidental la material infecios

1. neparea, tierea, zgrierea, abraziunea accidental
Consider ca ind un risc de expunere semnicativ orice leziune cu corpuri ascuite, tioase,
chiar dac nu sunt urme de snge vizibile la locul leziunii i tegumentul nu pare a fost lezat
serios.
Spal imediat abundent zona afectat cu un jet de ap, apoi cu ap i spun.
Dezinfecteaz zona cu un antiseptic activ, ecient, proaspt preparat; aplic un pansament steril
dac este necesar.
Raporteaz incidentul efului de laborator i medicului epidemiolog-infecionist.
2. Contactul accidental cu material infecios
Categoria include orice contact neprotejat al tegumentului prezentnd soluii de continuitate, a
mucoasei bucale, nazale sau a globului ocular cu material potenial infecios.
Spal abundent imediat zona tegumentar cu jet de ap i spun. Folosete doar ap pentru
cavitatea bucal i, respectiv, ser ziologic steril pentru globul ocular.
Raporteaz imediat incidentul efului de laborator i medicului epidemiolog / infecionist.
3. Aciuni imediate dup expunerea accidental
Indiferent de potenialii ageni microbieni patogeni, coninui de materialul infecios implicat n
expunerea accidental potenial infectant, se impun cteva msuri imediate:
Se va preleva o prob de snge de la accidentat pentru testri de baz (armarea / inrmarea
unei / unor infecii preexistente accidentului cu etiologie: HBV +/- HDV, HCV, HIV, Treponema
pallidum, etc.).
O contraprob de ser se va pstra n congelator pentru investigaii suplimentare.
Se va preleva (dac este posibil) o prob de snge de la subiectul de la care provine materialul
biologic potenial infectios (teste paralele cu accidentatul).
Raiunea pentru care se fac aceste prelevri este de :
o a stabili caracterul profesional / neprofesional al unei / unor mbolnviri ulterioare;
o a se adopta o atitudine terapeutic imediat, raional i ecient fa de accidentat;
o a stabili durata de urmrire/ supraveghere clinic i de laborator a accidentatului (n general, pe
durata maxim de incubaie a agentului/ agenilor infecioi potenial / real existeni n materialul
infecios implicat n accident.
n cursul investigrii unei izbucniri epidemice, trebuie stabilite proceduri adecvate, specice, de
prevenie i tratament i de urmrire pe durata maxim de incubare (pentru agentul etiologic
incriminat) a personalului implicat n aciune.
n cursul unei izbucniri epidemice suspectate de a o febr hemoragic, personalul implicat n
investigarea focarului va monitorizat de dou ori pe zi, timp de trei sptmni, pentru starea
general i temperatur.
Dac un detaliu procedural este identicat drept cauza generatoare a accidentului, este necesar
a se ntreprinde o aciune corectiv.
116
ANEXA 2
Anexa 2
Imunizarea personalului
Evaluarea riscurilor pe care le implic lucrul cu diferii ageni microbieni trebuie s fac obiectul
unor discuii amnunite cu specialitii n domeniu.
Disponibilitatea i existena autorizaiilor de punere pe piaa local, avizarea de ctre Ministerul
Sntii i utilitatea unor vaccinuri i/sau medicamente (n special antibiotice) pentru cazurile de expunere
accidental trebuie s e evaluate i luate n considerare atunci cnd se intenioneaz a se lucra cu
anumii ageni microbieni.
De asemenea, screening-ul serologic prealabil al personalului expus la un anumit risc infecios
(cnd este disponibil un vaccin specic) se impune naintea unei vaccinri, deoarece poate depista starea
de imunitate dobndit (vaccinri, infecii anterioare) a unei pri a personalului pentru care vaccinarea
este inutil.
Dac un vaccin / anatoxin este avizat de Ministerul Sntii i este disponibil, vaccinarea
personalului va efectuat abia dupa evaluarea riscului unei posibile expuneri accidentale i dup
evaluarea clinic a strii de sntate a personalului vizat.
Va luat n considerare i existena / accesibilitatea la servicii clinice de specialitate pentru
managementul cazurilor posibile de expuneri accidentale la ageni microbieni.
117
118
ANEXA 3
Anexa 3
Centre colaboratoare ale OMS n domeniul biosiguranei
Informaii n privina cursurilor de instruire i a materialelor informative de prol disponibile pot

obinute prin solicitare n scris de la oricare dintre urmtoarele:
Biosafety programme, Department of Communicable Disease Surveillance and Response, World
Health Organization, 20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland
(http://www.who.int/csr/).
WHO Collaborating Centre for Biological Safety, Swedish Institute for Infectious Disease Control,
Nobels Vg 18, S-171 82 Solna, Sweden
(http://www.smittskyddsinstitutet.se/English/english.htm).
WHO Collaborating Centre on Biosafety Technology and Consultative Services, Ofce of Laboratory
Security, Health Canada, 100 Colonnade Road, Loc.: 6201A, Ottawa, Ontario, Canada K1A 0K9
(http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl).
WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Training, Ofce of Health and Safety,
Centers for Disease Control and Prevention, 1600 Clifton Road, Mailstop F05, Atlanta, GA 30333, USA
(http://www.cdc.gov/).
WHO Collaborating Centre for Applied Biosafety Programmes and Research, Division of
Occupational Health and Safety, Ofce of Research Services, National Institutes of Health, Department of
Health and Human Services, 13/3K04 13 South Drive MSC 5760, Bethesda, MD 20892-5760, USA
(http://www.nih.gov/).
WHO Collaborating Centre for Biosafety, Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory, 10
Wreckyn St, Nth Melbourne, Victoria 3051, Australia. Postal Address:Locked Bag 815, PO Carlton Sth,
Victoria 3053, Australia
(http://www.vidrl.org.au/).
119
120
ANEXA 4
Anexa 4
Sigurana microbiologic a echipamentelor
n cursul utilizrii, anumite echipamente pot genera pericole de contaminare microbiologic.

Alte echipamente sunt concepute special pentru a preveni sau reduce riscurile de contaminare
microbiologic (vezi Capitolul 11).
Echipamente care pot genera pericole de contaminare microbiologic
n Tabelul A4-1 sunt cuprinse echipamentele i operaiunile care pot genera pericole de
contaminare microbiologic precum i sugestii privind modul n care pot eliminate sau reduse aceste
riscuri.
Tabel A4-1. Echipamente i operaiuni care pot genera pericole
Echipament
Riscul
Msuri de eliminare sau reducere a riscului
Ace de sering
Inoculare
accidental,
aerosoli, stropire
Nu reacoperii acele i nu retezai acele

Folosii seringi cu sistem tip baionet de blocare a acului
sau seringi de unic utilizare, la care acul este parte integrant
a seringii pentru a preveni detaarea acului de sering
Folosii tehnici corecte de laborator, ex :
- umplei seringa cu atenie pentru a reduce la minimum
cantitatea de bule de aer sau formarea de spum n inocul
- evitai folosirea seringilor pentru a amesteca lichide
infecioase; dac totui le folosii, asigurai-v c vrful acului
este imersat n lichid i evitai expulzarea din sering cu for
excesiv
- nfurai acul i amboul ntr-un tampon de vat imbibat n
dezinfectantul corespunztor nainte de a extrage acul din
capacul/dopul de cauciuc al unui acon
- eliminai excesul de lichid i bulele de aer
innd seringa vertical ntr-un tampon de vat
imbibat n dezinfectant sau ntr-un acon
Efectuai toate operaiunile cu material infecios ntr-o HSB
Imobilizai animalele n timpul inoculrii. Folosii ace boante
sau canule pentru inocularea intranazal sau oral. Lucrai
ntr-o HSB.
Autoclavai acele de sering dup utilizare i asigurai-v
c evacuarea lor se face corect. Dac acul i seringa nu
formeaz un dispozitiv unitar, nu le dezasamblai nainte de
autoclavare
Centrifuga
Aerosoli, stropire i
spargerea cupelor
Folosii cupe cu capac sau rotoare cu capac etan.

Deschidei cupele sau rotoarele dup ce aerosolii s-au
depus (30 min) sau n HSB
121
Echipament
Riscul
Msuri de eliminare sau reducere a riscului
Ultracentrifuga
Aerosoli, stropire i
spargerea cupelor
Instalai un ltru HEPA ntre centrifug i pompa de vid

nregistrai orele de funcionare pentru ecare rotor i respectai
un program preventiv de supraveghere a funcionrii (service)
pentru a reduce riscul unor defeciuni mecanice.
Umplei i golii cupele ntr-o HSB
Exicatoare
pentru
anaerobioz
Explozie, rspndire
de materiale
infecioase
Asigurai-v de integritatea capsulei din srm din jurul

catalizatorului
Desicatoare
Implozie,
dispersarea
fragmentelor de
sticl i materiale
infecioase
Aezai-le ntr-o cuc rezistent din plas de srm
Omogenizatoare, aparate
pentru
fragmentarea
esuturilor
Aerosoli, scurgeri
i spargeri ale
containerului
Efectuai operaiunile i deschidei echipamentul n HSB

Folosii modele special concepute care previn scurgeri pe
la garniturile pieselor rotative sau ale capacelor sau folosii
aparate cu incinte etane
nainte de a deschide omogenizatorul ateptai 30 min,
pentru a permite aerosolilor s se depun. Refrigerarea
condenseaz aerosolii
Dac folosii un omogenizator manual, nfurai tubul ntrun material absorbant
Sonicatoare
i bi cu
ultrasunete
Aerosoli, tulburri
auditive, dermatite
Efectuai operaiunile i deschidei echipamentul n HSB

Asigurai izolarea mpotriva ultrasunetelor
Utilizai mnui pentru a v proteja mpotriva efectelor
chimice ale detergenilor
Agitatoare
pentru culturi,
shakere,
mixere
Aerosoli, stropire,
vrsare
Efectuai operaiunile n HSB sau n nie speciale

Utilizai pentru culturi recipiente solide, nchise etan, cu
capac nurubat, prevzute cu ltre protectoare, dac este
necesar, i bine securizate.
Liolizatoare
Aerosoli i
contaminare prin
contact direct
Utilizai ltre de aer pentru a proteja dispozitivul de vid

Utilizai o metod ecient de decontaminare, de ex. chimic
Asigurai-v de existena unor capcane pentru umezeal i
a unui condensator de vapori.
Inspectai atent toate recipientele din sticl pentru vid pentru
a observa eventuale zgrieturi sau crpturi. Utilizai numai
sticlrie special conceput pentru vid
Bi de ap
Creterea
Asigurai curarea i dezinfecia periodic
microorganismelor
Nu utilizai azida de sodiu pentru a preveni creterea
Formarea de
microorganismelor
compui explozivi ai
azidei de sodiu cu
anumite metale
122
ANEXA 4
Pe lng riscurile microbiologice, riscurile produse de echipament trebuie anticipate i prevenite.

Tabelul A4-2 prezint cteva cauze ale accidentelor generate de echipamente.
Tabel A4-2. Cauze mai frecvente ale accidentelor generate de echipamente
Accident
Cauza accidentului
Msuri de reducere sau eliminare

a riscului
Concepere sau construcie greit

Fire electrice n incubatoare
Creterea necontrolat
a temperaturii.
Electrocutri
mpmntare
defectuoas
Respectarea standardelor
naionale
Utilizare improprie
Accidente de centrifugare
Neechilibrarea cupelor
Instruirea i supravegherea
personalului
Explozia incubatoarelor
pentru anaerobioz
Utilizarea unui gaz

necorespunztor
Instruirea i supravegherea
personalului
Explozie n recipiente sub

vid de uz casnic
Transportul impropriu al
azotului lichid
Utilizarea unui echipament

corespunztor
Explozie n frigidere de uz
casnic
Chimicale periculoase
depozitate n containere
nerezistente la aprindere i explozii. Ex :
eter n recipient cu dop
nurubat care permite
scurgerea
Pstrarea solvenilor i extractelor

cu punct de aprindere sczut numai
n frigidere i containere rezistente
la aprindere i explozii
Adaptare improprie
ntreinere incorect
Foc n am-fotometru
Incorecta reasamblare a Instruirea i supravegherea

componentelor cu ocazia personalului
reparaiilor i operaiunilor
de ntreinere
123
124
ANEXA 5
Anexa 5
Substanele chimice: pericole

i precauii
Aceast anex cuprinde informaii de baz cu privire la sntate i siguran, informaii i precauii
de protecie referitoare la o list selectat de substane chimice folosite n mod obinuit n laboratoarele
de sntate public i n cele de cercetare medical. Aceast list nu este exhaustiv, absena din ea a
unei anumite substane chimice nu implic i faptul c aceasta nu este periculoas. Toate substanele
chimice din laborator trebuie manipulate cu atenie i de o manier care s minimalizeze riscurile de
expunere.
125
126
Extrem de toxic prin

ingestie, cu posibil efect
cumulativ. Afecteaz
sistemul nervos
i cardiovascular.
Vtmtor n caz de
contact cu ochii sau cu
pielea.
Acetat de taliu Cristale albe,

delicvescente ;
punct topire 110C;
TIC2H3O2
foarte solubil n
ap.
HCCH
Acetilena
Asxiant ; cauzeaz
Gaz incolor, cu
miros slab eteric
degerturi la contactul
sau de usturoi;
cu pielea.
se livreaz n
containere sub
presiune, dizolvat
n aceton ;
punct topire -81C,
sublimeaz la -84C
Iritaie moderat a ochilor

i tractului respirator.
Afecteaz SNC, tractul
respirator, rinichii. Posibil
carcinogen.
Lichid incolor
sau gaz cu miros
neptor, arom de
fructe;
punct topire-121C,
punct erbere
21C.
Acetaldehida
CH3CHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Tabel A5-1. Substane chimice: pericole i precauii
Deosebit de
inamabil ;
interval inamabil 2,5100%.
Extrem de inamabil ;
amestecul vapori / aer
este explozibil ;
punct de aprindere
-39C, interval
inamabil 4-57%.
PERICOLE DE FOC
Pentru protecia pielii se folosesc

mnui izolatoare, ochelari de
protecie i scuturi transparente
pentru fa. Se vor evita acra
deschis, scnteile i fumatul.
Se lucreaz cu ventilaie local
de exhaustare, echipamente
electrice i sisteme de iluminare
protejate contra exploziei.
Se pstreaz n recipiente bine

nchise. Se lucreaz n nia de
protecie chimic, n hot sau cu
ventilaie cu exhaustarea aerului ;
cu mbrcminte de protecie
incluznd ltru respirator pentru
pulberi, ochelari de protecie
chimic, mnui din cauciuc sau
plastic, protecia ochilor.
Se vor evita acra deschis,

scnteile, fumatul, contactul
cu suprafee erbini. Se
stocheaz n recipiente nchise
ermetic, la distan de oxidani;
se stocheaz doar dac este
stabilizat. Se va lucra n nia de
protecie chimic sau n spaii
bine ventilate, cu mnui din
cauciuc, ochelari de protecie
i protecie respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
Agent
puternic
reductor ;
reacioneaz violent cu oxidanii
i cu orurile i clorurile n
prezena luminii. Reacioneaz
cu cuprul, argintul i mercurul
sau cu srurile acestora, formnd
compui sensibili la ocuri (pericol
de explozii).
n contact cu aerul poate forma

peroxizi
explozibili.
Poate
polimeriza sub inuena acizilor,
materialelor alcaline,n prezena
urmelor de metale. Agent puternic
reductor, reacioneaz violent
cu oxidanii, cu variate substane
organice, cu halogenii, acidul
sulfuric i amine.
INCOMPATIBILITI CHIMICE
ALTE PERICOLE
Uoar iritaie a ochilor,

nasului i gtului.
Inhalarea poate cauza
ameeli, narcoz i
com.
Iritare a cilor
respiratorii, a ochilor i
pielii. Expunerea poate
determina convulsii,
pierderea cunotinei,
intoxicare cu cianuri.
Coroziv; produce arsuri

severe; vaporii sunt
iritani. Efectele pot
tardive.
Lichid incolor volatil

cu miros dulceag ;
punct topire -95C,
punct erbere 56C;
miscibil cu apa.
Lichid incolor cu
miros aromatic;
punct topire -46C,
punct erbere 82C.
Lichid incolor cu
miros neptor ;
punct topire 17C,
punct erbere
118C ;
miscibil cu apa.
Acetona
127
CH3CO2H
Acid acetic
CH3CN
Acetonitril
CH3COCH3
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se va evita inhalarea vaporilor.

n cazul contactului cu ochii se
cltete imediat cu ap i se
solicit asisten medical. Se
manipuleaz cu mnui din
nitril i cu asigurarea proteciei
oculare.
Inamabil ;
punct de aprindere
40C,
interval inamabil 5,416%.
Reacioneaz violent sau exploziv

cu oxidanii.
Reacioneaz cu soluii apoase

acide i bazice, producnd gaze
i vapori toxici. Reacioneaz
cu oxidani puternici. Atac
anumite feluri de plastic, cauciuc
i esturi. Descompunerea prin
ardere produce acid cianhidric i
oxizi de azot.

scnteile, fumatul i contactul
cu oxidani. Se manipuleaz
numai n spaii fr surs de
foc. Se stocheaz n recipiente
nchise etan, separat de
oxidani. Se lucreaz cu
ventilaie de exhaustare. Se
evit contactul cu pielea, ochii
i mucoasele. Se folosete
protecie respiratorie i mnui
din cauciuc.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
12,8C, limite
explozibile 3,0-16%.
Reacioneaz violent cu oxidanii
(acid cromic i acid nitric) i cu
cloroformul n prezena bazelor.
Incompatibil
cu
amestecuri
concentrate de acid sulfuric i
nitric.
PRECAUII DE SIGURAN
Recipientele care o conin
se stocheaz n zone bine
ventilate, la distan de surse
de foc. Se va evita inhalarea
vaporilor. Se manipuleaz
cu protecie respiratorie i
ocular.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
- 18C,
limite explozibile 2,212,8%.
PERICOLE DE FOC
Se stocheaz
n recipiente i
vase mari, cu
mpmntare
pentru a preveni
acumulrile i
descrcrile de
electricitate static.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
PROPRIETI
FIZICE
Coroziv, cauzeaz arsuri

ale pielii i ochilor.
Lichid incolor,
vscos sau cristale
albe higroscopice ;
punct topire 42C,
se descompune
sub punctul de
erbere la 213C ;
solubil n ap.
Acid fosforic
128
H3PO4
CrO3
Iritant pentru ochi, piele

i tractul respirator.
Contactul prelungit sau
repetat cu pielea poate
cauza dermatite, ulcer
cromic i sensibilizare
a pielii. Inhalarea poate
cauza reacii de tip astmatiform. Poate produce
perforare a septului nazal.
Carcinogen pentru om.
Fulgi sau pudr

rou-nchis utilizat
frecvent n soluie
apoas ;
punct topire
197C.
Coroziv pentru ochi,

sistemul respirator i
piele ; inhalarea repetat
a vaporilor poate cauza
bronit cronic.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Acid cromic
Acid clorhidric Lichid incolor,

fumegnd, cu
(10-37%)
miros neptor ;
punct erbere
HCl
-121C ;
miscibil cu apa.
SUBSTANE
CHIMICE
Atac multe metale

producnd hidrogen.
Elibereaz gaze toxice
prin expunere la foc.
Se descompune la
temperaturi de peste
250C n oxid cromic
i oxigen, cu pericol
crescut de aprindere.
Numeroase reaciii pot
genera pericole.
PERICOLE DE FOC
n caz de contact cu ochii, se

cltete cu ap i se solicit
asisten
medical. Se
lucreaz cu mnui din nitril i
protecie ocular.
Se previne contactul cu
tegumentele i ochii, i
inhalarea prafului n. Se
lucreaz n spaii cu ventilaie,
exhaustare local sau protecie
respiratorie.
Se va evita inhalarea vaporilor; se asigur protecie

respiratorie. n caz de contact
cu ochii, se cltete imediat
cu ap i se solicit asisten
medical; n caz de contact cu
pielea, se spal imediat cu ap
din abunden. Se lucreaz n
nia de protecie chimic, cu
mnui din cauciuc sau plastic
i protecie ocular (ochelari de
lucru sau ochelari de protecie)
PRECAUII DE SIGURAN
In soluie apoas este un

acid puternic ce reacioneaz
cu bazele i este coroziv.
Oxidant puternic, reacioneaz
cu substane combustibile,
materiale organice sau alte
materiale uor oxidabile (hrtie,
lemn, sulf, aluminiu , plastic,
etc.). Coroziv pentru metale.
Reacioneaza violent cu bazele

(solide i soluii concentrate),
exploziv n contact cu
permanganatul de potasiu solid.
La contactul cu numeroase
metale genereaz gaze toxice
sau explozive.
La foc elibereaz
vapori i gaze
foarte toxice.
ALTE PERICOLE
129
HClO4
Acid percloric Lichid incolor ;

miscibil cu apa.
HO2CCO2H

severe ale ochilor i
pielii; de asemenea dac
este ingerat. Vaporii sunt
corozivi pentru ochi,
piele i tractul respirator.
Inhalarea vaporilor poate
cauza edem pulmonar.
Agent puternic
oxidant. Nu este
combustibil, dar
stimuleaz combustia
altor substane.
Combustibil. Produce
gaze iritante sau
toxice prin expunere
la foc.
Vtmtor dac vine n

contact cu pielea sau
este ingerat. Pulberea
irit tractul respirator i
ochii. Soluia irit ochii
i poate cauza arsuri ale
pielii.
Cristale incolore ;
solubil n ap ;
punct topire 190C ;
se descompune.
Acid oxalic
HNO3
Oxidant ; contactul cu
materiale combustibile
poate produce foc.
Elibereaz gaze toxice
prin expunere la foc.

severe ale ochilor sau
pielii. Inhalarea vaporilor
poate cauza edem
pulmonar.
Lichid fumegnd
incolor sau galben
pal ;
punct topire -42C,
punct erbere 83C
-121C; miscibil cu
apa.
Acid nitric
(50-70%)
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se va evita inhalarea vaporilor

i orice alt expunere ; se
lucreaz cu mbrcminte de
protecie, incluznd mnui
din nitril, protecia ochilor
i protecia feei. Soluiile
erbini se manipuleaz n
nia de protecie chimic sau
sub hot.
Se evit contactul cu pielea

i ochii ; se manipuleaz cu
protecia ochilor i cu mnui.
Se evit inhalarea vaporiilor ;

se
folosete
protecie
respiratorie. n caz de contact
cu ochii se spal imediat i se
solicit asisten medical; n
caz de contact cu pielea, se
spal imediat; se ndeprteaz
mbrcmintea contaminat.
Se
lucreaz n nia de
protecie chimic, cu mnui
din PVC, or de plastic i
ochelari de protecie.
PRECAUII DE SIGURAN
Materiale combustibile i ageni

reductori ; anhidrida acetic,
bismut i aliajele acestuia, alcool,
metal, hrtie, lemn i alte materiale
organice.
Ageni oxidani; de asemenea

argintul i mercurul i compuii
acestora.
Acid acetic, acid cromic, acid

hidrocianic, anilin, carbon,
hidrogen sulfurat, baze, metale i
multe alte substane.
Agent puternic
oxidant ; poate
forma produi
explozivi dac vine
n contact cu mai
multe materiale
anorganice
sau organice ;
contamineaz
pardoselile de lemn,
bncile, etc. Poate
exploda la percuie.
Acidul nitric
concentrat este
implicat n mai
multe reacii
periculoase
dect oricare alt
substan chimic.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Toxic prin ingestie,

inhalare sau contact cu
pielea. Ingestia poate
produce cefalee, grea.
Iritant pentru ochi.
Soluia concentrat
(15%) coroziv ,
cauzeaz arsuri severe ;
vaporii sunt foarte
corozivi prin inhalare ;
soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi i
piele ; cauzeaz arsuri
i dermatite.

severe pentru ochi, piele,
tractul respirator.
Cristale galbene,
umezite cu ap
sau dizolvate n
alcool ;
punct topire
122C, puin
solubil n ap.
Lichid vscos,
incolor, inodor ;
punct topire
10C,
punct erbere
340C (cu
descompunere).
Cristale albe
higroscopice,
cu miros
ptrunztor ;
punct topire
58C,
punct erbere
197,5C;
solubil n ap,
etanol, dietileter.
Acid picric
Acid sulfuric
Acid triclor
acetic
130
CCl3COOH
H2SO4
C6H2 (NO2)3OH
2,4,6, trinitrofenol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil.
Poate emana gaze
la foc.
Poate emana gaze

toxice prin expunerea
la foc. Nu este
combustibil. Multe
reacii pot cauza foc
sau explozie. Diluarea
cu ap genereaz
cldur i poate apare
erberea. ntotdeauna
se adaug acidul n
ap, niciodat nu se
adaug ap n acid.
Exploziv cnd se
usuc.
PERICOLE DE FOC
Este un desicant oxidativ puternic

i reacioneaz violent cu muli
reactivi
incluznd
compui
organici ai azotului, permanganat
de potasiu, alcali metalici i
perclorai, materiale combustibile,
oxidani, amine, baze, ap,
exces de cldur i majoritatea
metalelor.
Reacioneaz
violent
cu
amestecuri de cupru / dimetil
sulfoxid i n contact cu baze,
ageni oxidani puternici i metale
precum erul, zincul, aluminiul.
Se evit contactul cu ochii i

pielea ; se lucreaz cu mnui
din cauciuc sau plastic i
ochelari de protecie chimic
sau scut transparent pentru
protecia feei combinat cu
protecie respiratorie. n caz
de contact cu ochii, se cltete
imediat i se solicit asisten
medical.
Formeaz sruri cu numeroase

metale, care sunt mult mai
explozive dect acidul n sine.n
contact cu cimentul poate forma
picratul de calciu, care este un
exploziv sensibil la frecare. Poate
reaciona cu ageni reductori.
n caz de contact cu ochii se

cltete imediat i se solicit
asisten medical; n cazul
contactului cu pielea se
spal imediat i se nltur
Se manipuleaz cu mnui
din nitril, asigurndu-se
protecia ochilor i a feei. Nu
trebuie s vin n contact cu
substane inamabile.
Se menine tot timpul umezit

cu ap sau se folosete doar
n soluie alcoolic.
PRECAUII DE SIGURAN
pielea
Se stocheaz
n spaii uscate.
Soluiile apoase
concentrate se
pot descompune
violent.
Dac se adaug
acid concentrat n
ap poate aparea
erbere localizat.
Coloreaz
n galben.
ALTE PERICOLE
Lcrimare. Iritaie
sever respiratorie ;
edem pulmonar la
nivele ridicate de
expunere.
Efectele pot tardive.

tract respirator i piele
sau n cazul ingestiei;
cauzeaz edem
pulmonar n cazul
expunerii masive la
gaze sau vapori.
Iritaie sever a ochilor

i a tractului respirator
superior; aciune
coroziv. Efectele pot
tardive.
Lichid incolor
sau galben, cu
miros neptor,
dezagreabil;
punct topire -87C,
punct erbere 53C
Lichid incolor cu
miros neptor ;
Pentru forma
gazoas:
punct topire -78C,
punct erbere -33C ;
Pentru soluie 25%:
punct topire -58C,
punct erbere 38C ;
miscibil cu apa.
Lichid incolor cu
miros puternic
neptor de oet ;
punct topire -73C,
punct erbere 139C.
Acroleina
131
(CH3CO) 2O
Anhidrida
acetic
amoniacale)
Amoniac
(Soluii
CH2=CHCHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Oxidani, acizi, alcali, amoniac,
amine. Polimerizeaz rapid dac
procesul nu este inhibat, n mod
obinuit cu hidrochinon. Poate
forma n timp peroxizi sensibili la
ocuri (pericol de explozii).
Reacioneaz violent cu metale
grele, cum ar mercurul i
srurile acestuia formnd produi
explozivi.
Se va evita contactul cu
tegumentele sau cu ochii. Se
lucreaz n nia de protecie
chimic sau cu o bun
ventilaie.
Se stocheaz n recipiente
nchise etan. n cazul
contactului cu ochii, se spal
imediat cu ap i se solicit
asisten
medical.
Se
chimic, cu mnui din
cauciuc sau plastic i ochelari
de protecie chimic.

scnteile, fumatul. Se previne
contactul cu pielea sau ochii.
Extrem de inamabil ;
punct de aprindere 26C, limite explozibile
2,8-31%.
Sub form de gaze

amoniacale ;
interval inamabil 1528%.
Inamabil, dezvolt
prin expunere la
foc vapori sau gaze
iritante sau toxice ;
punct de aprindere
49C,
limite inamabile 2,710,3%.
Reacioneaz violent cu apa

n erbere, cu aburii, oxidanii
puternici, alcooli, amine, baze
puternice i multe alte substane
chimice. Atac multe metale n
prezena apei
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Nu este combustibil,
cu excepia pulberii.
Inhalarea unei cantiti

mari de vapori de argint
metalic poate cauza
afectarea
plmnilor
cu edem pulmonar.
Poate cauza colorarea
gri-albstruie a ochilor,
nasului, gtului i pielii,
n condiiile expunerii
ndelungate sau repetate
(argiria).
Vtmtor n caz de
ingestie, inhalare sau
contact cu pielea. Poate
cauza iritaie a ochilor
sau a pielii. Posibil
carcinogen.
Metal alb, se
nnegrete dac
este expus la
ozon, hidrogen
sulfurat sau sulf ;
punct topire
962C,
punct erbere
2212C.
Fulgi sau pudr

galben ;
punct topire
136C ;
insolubil n ap.
Argint
Auramina
132
4,4-Carbonoimidoil bis
(N, N-dimetilenzenamina)
Ag
C6H5NH2
Combustibil;
punct de aprindere
70C, interval exploziv
1,2-11%.
Cianoz cauzat de
methemoglobinemie.
Iritaie a ochilor i pielii.
Poate absorbit prin
piele; expuneri repetate
sau prelungite pot cauza
sensibilizare.
Lichid uleios, de la
incolor la cafeniu,
cu miros de amine
aromatice ;
punct topire -6C,
punct erbere
185C.
Anilina
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se evit contactul cu pielea

sau inhalarea pulberii. Se
cauciuc sau plastic i cu
ochelari de protecie chimic.
Se lucreaz n nia de
protecie chimic sau cu ltru
respirator pentru praf.
Ageni puternic oxidani.
Incompatibil cu acetilena, compuii

de amoniu, acidul oxalic i acidul
tartric.
Oxidani puternici, acizi tari.
Se stocheaz n recipiente
nchise etan, n spaii
separate de oxidani. Se
previne contactul cu pielea
sau cu ochii. Se lucreaz n
spaii cu ventilaie local sau
protecie respiratorie, mnui
i mbrcminte de protecie,
scuturi transparente pentru
fa.
Se lucreaz cu exhaustarea
local a aerului, cu mnui
i ochelari de protecie sau
protecia ochilor combinat cu
protecie respiratorie pentru
pulberi sau gaze toxice.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Combustibil, produce
gaze toxice prin
expunere la foc.
Poate absorbit prin

piele. Poate cauza
cancer de vezicul
biliar. Se evit orice tip
de expunere.
Pudr galben
deschis ;
punct topire 128C,
punct erbere
400C ;
puin solubil n
ap, dar foarte
solubil n acizi sau
solveni organici.
Benzidina
133
1,1- Bifenil4,4 -diamina
C6H6
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
-11C, interval
inamabil 1,3-8%.
Inhalarea vaporilor
afecteaz SNC cauznd
vertij i cefalee, iar la
concentraii mai mari
pierderea cunotinei i
moarte. Risc de anemie
aplastic, leucemie,
leziuni hepatice dup
expunere prelungit
sau cronic. Poate
absorbit prin piele.
Se descompune
exploziv cnd este
nclzit peste punctul
de topire. Elibereaz
gaze toxice cnd
este nclzit ; nu se
folosete apa pentru
stingerea focului.
PERICOLE DE FOC
Lichid incolor,
volatil, cu
miros aromatic
caracteristic ;
punct topire 6C,
punct erbere
80C.
Foarte toxic prin

contact cu pielea ;
poate cauza arsuri.
Praful i soluia irit
ochii i pielea ; poate
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Benzen
Azida de sodiu Solid, cristalin,

incolor ;
punct topire
N3Na
300C;
solubil n ap.
SUBSTANE
CHIMICE
n multe ri, utilizarea sa este

interzis sau controlat prin lege.
Poate reaciona violent cu

oxidanii, incluznd acidul cromic,
permanganatul de potasiu i
oxigenul lichid.
Se stocheaz recipientele n
spaii bine ventilate, la distan
de sursele de foc. Se lucreaz
n nia de protecie chimic sau
n hote cu ventilaie adecvat;
cu protecie ocular i mnui
din PVC sau nitril. Se previne
formarea de acumulri sau
descrcri electrostatice, prin
mpmntare.
Se evit orice tip de expunere.
Se lucreaz cu protecia
ochilor i a pielii, n nia de
protecie chimic cu ventilaie
de exhaustare.
Reacioneaz exploziv cu bromul,

sulfura de carbon i clorura
de crom. Sub forma solid
reacioneaz cu metale grele,
incluznd cuprul, plumbul i
mercurul, formnd sruri metalice
ale azidelor, compui explozivi. La
contactul cu un acid, elibereaz
gaze deosebit de toxice sau
explozive.
n caz de contact cu pielea,

se spal imediat. Se evit
inhalarea
pulberii.
Se
cauciuc sau plastic i cu
protecie ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane. Multe
reacii pot cauza
foc sau explozie.
nclzirea poate
cauza creterea
presiunii cu risc de
ardere.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
Coroziv. Vaporii sunt

corozivi pentru ochi i
pentru tractul respirator ;
inhalarea poate cauza
edem pulmonar i poate
afecta SNC. Contactul cu
ochii poate cauza tulburri
de vedere, roea,
durere, arsuri severe ale
esuturilor.

Inhalarea de gaz poate
cauza pneumopatie, edem
pulmonar conducnd la
sindrom de disfuncie
reactiv a cilor aeriene.
Evaporarea rapid a
clorului lichid poate cauza
degerturi.
Expunerea
masiv poate cauza
moarte. Efectele pot
tardive; se recomand
supraveghere medical.
Lichid fumegnd,
rou-maroniu, cu
miros neptor ;
punct topire -7,2C,
punct erbere
58,8C.
Gaz galben-verzui,
cu miros neptor,
punct topire -101C,
punct erbere -34C.
134
Cl2
Clor
Br2
Brom
NaHSeO3
Toxic prin ingestie i

inhalare de pulberi ;
posibil pericol prin efecte
cumulative. Teratogen
experimental. Contactul
prelungit
cu
pielea
cauzeaz dermatit.
Pulbere cristalin,
alb, incolor ;
Solubil n ap.
Biselenit de
sodiu
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis i ventilaie;
cu mnui izolatoare i
mbrcminte de protecie,
ochelari de protecie sau
protecie ocular combinat
cu protecie respiratorie.
Se utilizeaz n sistem nchis

i cu ventilaie. Se lucreaz
cu mnui i mbrcminte
de protecie, ochelari de
protecie, scut transparent
pentru fa sau protecia
ochilor combinat cu protecie
respiratorie.
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.
PRECAUII DE SIGURAN
Soluia apoas este un acid

puternic, reacioneaz violent cu
bazele i muli compui organici:
acetilen, butadien, benzen i
alte fraciuni petroliere, amoniac,
hidrogen, carbur de sodiu,
terebentin i pulberi metalice
ne, genernd pericol de foc i
explozie.

violent cu materialele combustibile
i reductoare. Reacioneaz
violent cu soluia apoas de
amoniac, cu oxidani, metale,
compui organici i fosfor.
Ageni oxidani.
Atac multe metale

n prezena apei.
Atac materialele
plastice, cauciucul
i esturile.
Atac unele feluri

de plastic, cauciuc
i esturi.
ALTE PERICOLE
Vtmtor prin inhalare,

ingestie i contact cu
pielea ; iritant pentru
piele. Poate cauza
afectare hepatic, renal
i a SNC conducnd
la cefalee, grea,
icter slab, inapeten,
confuzie.
Expunerea
prelungit sau cronic
s-a dovedit carcinogen
la animale ; suspect a
carcinogen la om.
Afecteaz ochii, pielea

i tractul respirator;
inhalarea vaporilor poate
cauza edem pulmonar
genernd
convulsii,
pierderea cunotinei,
insucien respiratorie,
moarte.
Lichid incolor
volatil cu miros
caracteristic ;
punct topire -63C,
punct erbere 61C. ;
puin solubil n ap.
Cristale incolore
sau albe, cu miros
neptor ;
punct topire 52C,
punct erbere 61C.
Cloroform
Cianobrom
135
BrCN
Bromcian
CHCl2
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil
dar formeaz gaz
inamabil la nclzire.
Prin expunere la foc
produce emanaii
gazoase iritante sau
toxice.
PERICOLE DE FOC
ALTE PERICOLE
Dac se nclzete
pn la descompunere formeaz
fosgen gaz. Atac
materialele plastice
i cauciucul.
Baze tari; unele metale cum ar
aluminiul sau magneziul, zincul
pulbere ; oxidani puternici.
Se descompune prin nclzire i

la contactul cu acizii producnd
acid cianhidric, foarte toxic i
inamabil, i acid bromhidric,
foarte coroziv. Reacioneaz cu
oxidani puternici. Reacioneaz
ncet cu apa i umezeala
producnd acid bromhidric i acid
cianhidric. Atac multe metale n
prezena apei.
Se lucreaz n ni de protecie
chimic purtnd mbrcminte
de protecie, mnui din nitril
i protecie ocular.
Se lucreaz n sistem nchis

cu ventilaie ; cu mnui i
ochelari de siguran, cu
scut transparent pentru
protecia feii sau protecia
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
ANEXA 5
136
Inhalarea
emanaiilor
gazoase de cupru poate
cauza febra fumurilor
de metal .
Solid roiatic,
lucios, maleabil,
inodor ; pudra roie
devine verde dup
expunerea la aer i
umezeal;
punct topire
1083C,
punct erbere
2567C.
Cupru
Cu
(A-J)
Toxic prin ingestie, inhalare

sau absorbie prin piele.
Poate cauza malformaii
congenitale la ft.
Pudr alb ;
punctul de topire
variaz.
Citochalazina
Combustibil.
Poate elibera gaze

la foc.
Extrem de toxic prin

contact cu pielea ; iritant
sever pentru ochi. Poate
Expunerea
repetat
poate afecta tiroida.
Pudr alb
cristalin cu miros
de migdale ;
punct topire
563C,
punct erbere
1496C;
foarte solubil n
ap.
Cianura de
sodiu
NaCN
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Elibereaz, n contact cu acizii
sau cu apa ce conine dioxid de
carbon dizolvat, gaze deosebit de
toxice de acid cianhidric (HCN).
Poate forma amestecuri explozive
cu nitriii.
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului sau protecie
respiratorie, cu mnui i
ochelari de protecie .
Formeaz cu compuii acetilenici,

etilen oxid azid i peroxidul
de oxigen, produi sensibili la
ocuri. Reacioneaz cu oxidanii
puternici, cum ar cloraii, bromaii
sau iodaii, genernd pericol de
explozie.
Se evit contactul cu ochii, pielea Ageni puternic oxidani.

i mbrcmintea. Se vor purta
ochelari de protecie chimic i
mnui din cauciuc sau plastic.
Se va evita inhalarea de
pulberi; se foloseste protecie
respiratorie. Se evit contactul
cu ochii sau pielea ; n cazul
contactului cu pielea se
spal imediat cu ap i se
ndeprteaz mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz cu
ochelari de protecie chimic
i mnui din cauciuc sau
plastic. Se pstreaz sub
cheie, n spaii ventilate.
PRECAUII DE SIGURAN
Se trateaz stropii
de soluie cu
nlbitor pulbere
(hipoclorit de sodiu)
i se las n contact
24 ore. Substana
solid vrsat se
terge cu grij cu
o lavet care se
va scufunda apoi
n ap cu nlbitor
pulbere; se las 24
ore nainte de a
aruncat. n laborator
se pstreaz la
ndemn antidotul
cianurii.
ALTE PERICOLE
137
Iritaie sever a ochilor

i sistemului respirator;
inhalarea poate cauza
edem pulmonar.
Evaporarea rapid
poate cauza degerturi.
Soluiile sunt corozive
pentru piele i ochi.
Gaz licheat incolor

i volatil, cu miros
neptor ;
punct topire -93C,
punct erbere 7C ;
miscibil cu apa.
6 3
2 2
Pulbere cristalin
2,4-Dinitrofenil-hidrazina portocalie-roiatic ;
punct topire 200C,
puin solubil n ap.
C H (NO ) -
NHNH2
1-Hidrazin-2,4dinitro-benzen
CH3)2NH
Dimetilamina
Iritant pentru piele i

ochi. Vtmtor prin
ingestie, inhalare i
contact cu pielea.
Iritant pentru ochi i

tractul respirator. Poate
afecta SNC cauznd
somnolen i pierderea
cunotinei. Inhalarea
repetat poate cauza
dependen.
Lichid incolor,
foarte volatil, cu
miros dulceag
caracteristic ;
punct topire -161C,
punct erbere 34C ;
puin solubil n ap.
Dietil eter
C2H5OC2H5
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Foarte inamabil ;
punct de aprindere 25C, limite inamabile
2,8-14% .
Foarte inamabil ca
soluie,
punct de aprindere
-18C.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere 45C, interval inamabil
1,7-48%.
PERICOLE DE FOC
Se pstreaz umed pentru

a reduce riscul de explozie.
Se manipuleaz cu ltru
respirator pentru praf, mnui
din cauciuc sau plastic i
Poate reaciona violent cu

compuii oxidani i reductori.
Poate reaciona cu oxidanii i cu

mercurul.
Expunerea la aer i lumin poate

conduce la formarea de peroxizi
explozivi. Poate reaciona violent
cu oxidanii i halogenii.
Se pstreaz recipientele
n spaii bine ventilate, la
distan de sursele de foc, n
containere cu mpmntare
pentru a preveni acumulrile
i descrcrile de electricitate
static. Se lucreaz n nia de
protecie chimic, cu mnui
din nitril pentru a preveni
degresarea pielii.
Se ine la distan de sursele
de foc ; n cazul contactului
cu ochii se spal imediat i se
solicit asisten medical. Se
chimic, cu mnui din nitril i
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5

afecta SNC cauznd
cefalee, grea, tuse,
durere de gt, dureri
abdominale, ameeal,
somnolen, vom,
pierderea cunotinei.
Poate absorbit prin
piele. Afecteaz rinichii
i catul. Probabil
carcinogen pentru om.
Lichid incolor cu
miros caracteristic ;
punct topire 12C,
punct erbere
101C .
Dioxan
Risc de asxiere n
spaii nchise sau prost
ventilate ; contactul cu
forma solid de ghea
carbonic cauzeaz
degerturi
Iritant sever pentru

ochi, piele i tractul
respirator; inhalarea
gazului poate cauza
edem pulmonar.
Efectele pot tardive;
se recomand
supraveghere medical.
Solid, alb translucent

la -79C ;
Sublimeaz la gaz
la temperatura
mediului ambiant.
Dioxid de clor Gaz de la galben la

rou sau lichid roumaroniu ;
ClO2
punct topire -59C,
punct erbere 10C.
Dioxid de
carbon
(solid ; ghea
carbonic,
ghea uscat)
CO2
C4H8O2
Dietilen dioxid
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane ; poate
exploda cnd este
nclzit, la expunerea
la soare sau cnd este
expus la ocuri sau
scntei.
Foarte inamabil ;
posibil aprinderea la
distan ; ca rezultat
al curgerii, agitrii,
etc, pot generate
ncrcri electrostatice.
PERICOLE DE FOC
Alcali metalici, baze puternice.
Oxidant puternic ; reacioneaz

violent cu materialele combustibile
sau reductoare. Reacioneaz
violent cu fosforul, hidroxidul
de potasiu, sulful, amoniacul,
metanul, fosna i hidrogenul
sulfurat.
Se lucreaz n condiii de
sistem nchis cu ventilaie,
cu mnui izolatoare i
Poate forma peroxizi explozivi.

Reacioneaz viguros cu oxidanii
puternici i acizii tari concentrai.
Reacioneaz exploziv cu unii
catalizatori. Atac multe feluri de
plastic.
Se manipuleaz cu mnui
izolatoare. Se depoziteaz
numai n camere sau spaii
ventilate, n containere
deschise.
Se lucreaz cu ventilaie cu
exhaustare local. Se vor evita
acra deschis, scnteile,
fumatul sau contactul cu
oxidanii
sau
suprafee
erbini. Nu se folosete aer
comprimat pentru umplere,
evacuare sau manipulare ;
se folosesc dispozitive ce nu
produc scntei. Se lucreaz
cu mnui i mbrcminte
de protecie, scut transparent
pentru fa sau protecia
respiratorie.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
138
139
C6HcOH
Fenol
Etanolamina
Cristale incolore
sau roz pal,
cu miros
caracteristic ;
punct topire
41C,
punct erbere
182C ;
solubil n ap.
Lichid vscos,
incolor, nevolatil,
H2NCH2CH2OH cu miros
2-Amino-etanol amoniacal;
punct topire 10C,
punct erbere
171C ;
miscibil cu apa.
CH3CH2OH
Substanele i vaporii
sunt corozivi pentru ochi,
piele i tractul respirator,
cauznd arsuri severe ;
se absoarbe prin piele.
Tulburri ale SNC,
com. Afecteaz rinichii
i catul. Simptomele
includ dureri abdominale,
vrsturi, diaree, iritaii
ale pielii, dureri oculare.
Contactul prelungit cu
soluii diluate poate
cauza dermatite.

tractul respirator i
piele. Poate cauza
sensibilizarea pielii.
Lichid incolor,
Duntor dac este
volatil, cu miros n nghiit. Iritant pentru
caracteristic ;
ochi. Poate afecta SNC.
punct topire -117C,
punct erbere
79C ;
miscibil cu apa.
Etanol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Punct de aprindere
80C ;
interval inamabil
1,7-6%.
Punctul de aprindere
85C.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere
12C, limite inamabile
3-19% .
PERICOLE DE FOC
Se va evita inhalarea vaporilor, Reacioneaz cu oxidanii cauznd

se
folosete
protecie foc i pericol de explozie.
respiratorie. Se evit contactul
cu ochii i pielea. Se lucreaz
cu mnui din nitril i protecie
ocular. n cazul contactului cu
ochii se spal imediat cu ap i
se solicit asisten medical.
n cazul contactului cu pielea,
se ndeprteaz mbrcmintea
contaminat i se terge zona
contaminat cu glicerol, polietilen
glicol 300 sau un amestec de
polietilen glicol lichid (70%) i
spirt metilat (30%) i apoi se
cltete cu ap.
Reacioneaz cu oxidanii
puternici.

puternici.
Se pstreaz n recipiente
bine nchise, la distan de
sursele de foc.
Se manipuleaz cu mnui din

cauciuc sau plastic i protecie
ocular
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Iritant puternic pentru ochi

i piele; iritant al tractului
respirator. Expunerea
prelungit la vapori poate
cauza simptome de tip
astmatiform, conjunctivit,
laringit, bronit sau
bronhopneumonie.
Contactul cu pielea poate
cauza sensibilizare.
Posibil risc de afectare
ireversibil a strii
de sntate. Posibil
carcinogen.
Lichid incolor cu
miros neptor;
punct erbere 96C;
miscibil cu apa.
Formaldehida
soluie
(37-41%
formaldehid
cu 11-14%
metanol)
140
Poate afecta SNC cauznd

cefalee, ameeal, tuse,
durere n gt, grea,
dispnee, pierderea
cunotinei i moarte.
edem pulmonar. Roea,
dureri, arsuri profunde,
severe ale ochilor.
Gaz incolor cu miros

neplcut, puternic,
de ou stricate;
punct topire -85C,
punct erbere -60C.
H2S
Hidrogen
sulfurat
Iritant sever pentru ochi i

tractul respirator superior ;
expunerea prelungit prin
inhalare sau contactul
cu pielea pot cauza
sensibilizare.
Glutaraldehida Soluie incolor sau

galben pal, cu miros
OHC(CH2)3CHO neptor ;
punct topire -14C,
punct erbere
189C ;
miscibil cu apa.
HCHO
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Foarte inamabil ;
limite explozibile
4,3-46%.
Se lucreaz purtnd haine

de protecie de tipul orului
de cauciuc, mnuilor din
cauciuc sau plastic i ochelari
de protecie chimic n nia de
protecie chimic sau n spaii
bine ventilate.
Punctul de aprindere
50C.
Se lucreaz cu ventilaie cu
exhaustare local. Se poart
Se lucreaz n nia de
protecie chimic sau spaii
bine ventilate, cu mnui din
ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
viguros
cu
Oxidani puternici i acid nitric

puternic. Atac multe metale i
materiale plastice.
Poate reaciona
oxidanii.
Poate reaciona viguros cu

oxidanii, cu nitrometanul formnd
produi explozivi ; cu acidul
clorhidric formnd bis(clormetil)
eter, un puternic carcinogen.
Acuitatea olfactiv
scade rapid i nu
se poate pune
baz pe aceasta
pentru avertizarea
asupra continurii
prezenei gazului.
Este livrat frecvent

sub form de soluie
apoas n diferite
concentraii, adiionat cu stabilizatori
pentru creterea
stabilitii.
Soluia concentrat
de formaldehid
devine
tulbure
dac este stocat
sub 21C i trebuie
stocat la 21-25C.
Soluia
diluat
(1-5%) i soluia de
concentraie medie
(5-25%) pstreaz
multe
dintre
pericolele formei
concentrate.
ALTE PERICOLE
Coroziv pentru tractul

respirator, ochi i piele;
inhalarea prafului
cauzeaz edem
pulmonar.
Solid sau soluie

concentrat. Inhalarea
pulberii afecteaz tractul
respirator, pn la edem
pulmonar. Coroziv prin
ingestie. Soluia diluat
este iritant pentru ochi
i poate cauza leziuni
severe n condiiile unui
contact prelungit.
Coroziv pentru ochi

i piele ; coroziv prin
ingestie, pentru tractul
respirator ; inhalarea
poate cauza edem
pulmonar. Expunerea
repetat poate cauza
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
360C,
punct erbere
1320C;
foarte solubil n
ap.
Fulgi, pulbere,
pastile sau bare ;
punct topire
318C,
punct erbere
1390C;
solubil n ap.
Soluie incolor
sau galben pal,
cu miros de clor ;
miscibil cu apa.
Hidroxidul de
potasiu
Hidroxidul de
sodiu
Hipoclorit de
sodiu,
soluie
(10-14%clor)
141
NaOCl
NaOH
KOH
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Oxidant puternic.
Poate elibera gaze
toxice prin expunerea
la foc.
Contactul cu umezeala
sau apa poate
genera sucient
cldur pentru a
aprinde substanele
combustibile.
PERICOLE DE FOC
Se stocheaz n
recipiente nchise
etan, n spaii
uscate.
Elibereaz o cantitate crescut

de cldur atunci cnd este
amestecat cu apa. Reacioneaz
viguros cu amestecul cloroform
metanol i cu acizii puternici.
Elibereaz gaze foarte toxice n

contact cu acizii. Poate reaciona
viguros cu produii combustibili
i reductori. Poate reaciona
cu compui ai azotului formnd
compui N-cloro explozivi. Poate
reaciona violent cu metanolul.
n cazul contactului cu ochii,

se cltete imediat i se
solicit asisten medical; n
cazul contactului cu pielea,
se spal imediat cu ap i se
ndeprteaz mbrcmintea
contaminat. Se lucreaz cu
i cu protecie ocular chiar n
cazul soluiilor diluate.
n cazul contactului cu
ochii se cltete imediat cu
ap i se solicit asisten
medical; n caz de contact
cu pielea, se spal imediat.
Se evit inhalarea vaporiilor,
se
folosete
protecie
respiratorie. Se manipuleaz
n spaii bine ventilate, cu
i cu protecie pentru ochi.
Pe parcursul stocrii
pierde treptat
clorul ; soluiile
diluate folosite ca
dezinfectant se
deterioreaz rapid.
Se pstreaz la
distan de acizi, n
spaii ntunecoase,
rcoroase, bine
ventilate.
Atac unele metale

(aluminiu, zinc,
cositor) n condiii
de umezeal.
ALTE PERICOLE
Reacioneaz violent cu acizii,

cu nitrobenzenul i cu muli ali
detergeni. Elibereaz o cantitate
crescut de energie termic cnd
se amestec cu apa. Se pstreaz
n recipiente nchise etan.
n caz de contact cu ochii,

se spal imediat cu ap i se
solicit asisten medical ;
n caz de contact cu pielea,
se spal imediat ; se nltur
Se lucreaz cu mnui din
ocular chiar n cazul soluiilor
diluate.
PRECAUII DE SIGURAN
ANEXA 5
142
CH3OH
Metanol
Hg
(argint viu)
bine nchise, la distan de
orice surs de foc. Se evit
inhalarea vaporilor i contactul
cu pielea. Se lucreaz n nia
de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate, cu
i protecie ocular.

oxidanii. Reaciile cu magneziul
sau bromul pot violente, iar cele
cu oxidani puternici, cloroform
sau sodiu pot explozive.
Afecteaz SNC,
determinnd pierderea
cunotinei ; iritant pentru
mucoase. Expunerea
cronic poate leza retina
i nervul optic. Contactul
prelungit cu tegumentele
poate cauza dermatita.
Poate absorbit prin
piele.
Lichid incolor,
volatil, cu miros
caracteristic ;
punct topire -98C
punct erbere 65C;
miscibil cu apa.
Deosebit de
inamabil ;
punct de aprindere
-16C, intervalul
inamabil 7-37% .
Acetilena,
acidul
fulminic.
Reacioneaz cu amoniacul,
azidele i oxidul de etilen,
pentru a forma produi explozivi.
Reacioneaz violent cu bromul.
Formeaz amalgamuri cu multe
metale.
bine nchise. Se lucreaz n
nia de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate. Se vor
preveni stropirile. Se poart
mnui din nitril.
Prin expunere la foc
eman gaze iritante
sau toxice.
Poate absorbit prin

piele. Expunerea
repetat poate afecta
rinichii i SNC; poate
cauza vrsturi,
diaree, cefalee, grea,
inamarea gingiilor,
cderea dinilor.
Lichid argintiu
greu ;
punct topire -39C
punct erbere
357C;
insolubil n ap.
Mercur
I2
Reacioneaz violent cu metalele,

incluznd aluminiul, potasiul i
sodiul i amestecul etanol/fosfor,
acetilen i amoniac.
Se va evita inhalarea vaporilor

i se va evita contactul cu
ochii. Se lucreaz cu mnui
din nitril.
Nu este combustibil dar

poate stimula combustia
altor substane. Multe
reacii pot cauza foc sau
explozie. Prin expunere
la foc eman gaze
iritante sau toxice.
Iritant al ochilor, al
tractului respirator i
al pielii. Expunerea
repetat poate cauza
Poate afecta tiroida.
Solid negru albstrui,

cristalin, cu miros
caracteristic ;
punct topire 114C,
punct erbere 184C ;
practic insolubil n
ap.
Iod
PRECAUII DE SIGURAN
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Recipientele
se
stocheaz i se
manipuleaz pe tvi
de siguran pentru
a preveni stropirile;
picturile rspndite
se absorb ntr-un
acon de aspirare
cu un tub capilar i
conectat cu o pomp
de vid; suprafeele
stropite se trateaz
cu praf de zinc pentru
a forma un amalgam.
ALTE PERICOLE
Combustibil
Inamabil,
combustibil solid;
punct de aprindere
39C.
Nu este combustibil
dar stimuleaz
combustia altor
substane.
Ambele forme sunt

foarte toxice dac sunt
inhalate, ingerate sau
vin n contact cu pielea.
Carcinogen
pentru
om, producnd cancer
de vezicul biliar.
Experimental,
este
mutagen i teratogen.
Se absoarbe prin piele.
Vtmtor prin ingestie

i inhalare. Iritant pentru
ochi, sistemul respirator
i piele. Expunerea
repetat poate cauza
Poate cauza iritaii

severe i arsuri ale
ochilor i pielii. Coroziv
prin ingestie. Poate
cauza colorarea roualbstruie a pielii n cazul
expunerii prelungite sau
repetate (argiria).
Cristale de la alb la roz,

cu miros caracteristic ;
: punct topire 50C,
punct erbere 301C;
: punct topire 113C,
punct erbere 305C;
putin solubil n ap, dar
hidroclorura este solubil
n ap.
Substan solid
galben-pal, ce se
descompune nainte
de topire la 121C.
Livrat n recipiente de
tip spray 0,5% soluie
n butanol ; solubil
n ap.
Naftilamina
( si )
Ninhidrina
Nitrat de argint Cristale albe ;

punct topire 212C,
punct erbere 444C;
AgNO3
solubil n ap.
C9H6O4
C10H9N
N-fenil naftilamina
i N-fenil-naftilamina
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
143
Se va evita dispersia
pulberilor. Se respect
strict regulile de igien. Se
cauciuc sau plastic i scut
transparent pentru fa sau
protecia ochilor combinat
cu protecie respiratorie. n
caz de contact cu ochii, se
spal cu ap i se solicit
asisten medical.
Contactul cu pielea
determin apariia
unei culori violete
persistente.
Se evit inhalarea spray-ului

sau vaporilor i contactul
cu ochii. Se manipuleaz
cu mnui din cauciuc sau
plastic i ochelari de protecie
chimic.
ALTE PERICOLE
Utilizarea sa este
interzis sau
controlat legal n
multe ri.
Soluiile
amoniacale
pot
precipita exploziv nitratul de
argint n prezena bazelor sau a
glucozei. Poate forma compui
explozivi cu etanolul i poate
cauza polimerizarea exploziv
a acrilonitrilului. Poate cauza
explozie cu aprindere dac este
amestecat cu crbune, magneziu,
fosfor sau sulf.
Se evit orice fel de

expunere ; se manipuleaz
purtnd mbrcminte de
protecie, n nia de protecie
chimic sau sub hot sau cu
ventilaie de exhaustare .
PRECAUII DE
SIGURAN
ANEXA 5
144
Nu este combustibil, dar

stimuleaz combustia
altor substane.
nclzirea crete
presiunea n recipiente,
cu risc de explozie.
Nu este combustibil, dar
stimuleaz combustia
altor substane. Multe
reacii pot provoca foc
sau explozie. Elibereaz
gaze toxice prin
expunere la foc.
La concentraie foarte
Gaz incolor
ridicat, iritant pentru
comprimat ;
punct topire -218,4C, tractul respirator.
punct erbere -183C .

piele, tractul respirator,
producnd durere n
gt, tuse, senzaie
de arsur, dispnee,
arsuri ale pielii, durere,
vezicule, arsuri oculare.
edem
pulmonar.
Ingestia poate cauza
crampe abdominale,
senzaie de arsur,
diaree,
disfagii,
vrsturi.
Oxigen
P2O5
Pentoxid de
fosfor
O2
Cristale sau pulbere

alb, higroscopic ;
punct topire 340C,
punct de sublimare
360C.
Combustibil ; risc de foc

i explozie ;
punct de aprindere 88.
Methemoglobinemie
cu cianoz, leziune
hepatic; simptomele
includ cianoza buzelor
sau a unghiilor, cianoza
pielii, vertij, grea,
vrsturi,
astenie,
Se absoarbe prin piele.
Lichid uleios,
galben pal, cu miros
caracteristic ;
punct topire 6C,
punct erbere 211C.
Nitrobenzen
C6H5NO2
PERICOLE DE FOC
PROPRIETI FIZICE PERICOLE PENTRU

SNTATE
SUBSTANE
CHIMICE

cu materialele combustibile i
reductoare, cauznd pericol de
foc sau explozie. Reacioneaz
cu uleiuri, grsimi, hidrogen i
lichide, solide i gaze inamabile.
Soluia apoas este un acid
puternic ; reacioneaz violent
cu bazele i este coroziv.
Reacioneaz violent cu acidul
percloric, cauznd pericol de foc
i explozie. Reacioneaz violent
cu apa formnd acid fosforic.
Atac multe metale n prezena
apei.
Se lucreaz cu exhaustare
local a aerului pentru
protecie, cu mnui i
cu scut transparent pentru
fa sau protecia ochilor
combinat cu protecie
respiratorie.
Prin combustie genereaz

emanaii gazoase corozive,
incluznd oxizi de azot.
Reacioneaz violent cu
oxidanii puternici i agenii
reductori, cauznd pericol de
foc i explozie. Atac materialele
plastice. Formeaz substane sau
amestecuri explozive (instabile
termic) cu muli compui organici
i anorganici.
Se vor evit acra

deschis, sursele de
scntei, fumatul, contactul
cu substane inamabile.
Se lucreaz cu ventilaie
cu exhaustare local sau
protecie respiratorie, cu
mnui, mbrcminte i
PRECAUII DE
SIGURAN
ALTE PERICOLE
Coroziv dac este

nghiit sau dac praful
este inhalat. Deosebit
de iritant pentru ochi
i tractul respirator,
inhalarea prafului poate
cauza edem pulmonar.
Coroziv la concentraii
mari (60%), precum i
la concentraii sczute
(6%) n cazul contactului
prelungit cu pielea.
Soluiile diluate sunt
iritante pentru ochi,
tractul respirator i piele.
Afecteaz SNC
determinnd ameeal,
cefalee, grea, dispnee,
Poate absorbit prin
piele cauznd roea
i senzaie de arsur.
Ingestia determin dureri
abdominale, diaree,
vrsturi, astenie.
Expunerea repetat
afecteaz catul i rinichii.
Cristal purpuriu ;
punct topire
240C (se
descompune).
Se dizolv uor n
ap.
Lichid incolor ;
punct topire -39C
(70%),
punct erbere
125C
(70%);
miscibil cu apa ;
este furnizat sub
form de soluie
concentrat n
variate concentraii.
Lichid incolor,
cu miros
caracteristic ;
punct topire
42C,
punct erbere
115C.
Permanganat
de potasiu
Peroxid de
hidrogen
Piridina
145
C5H5N
H2O2
KMnO4
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Deosebit de inamabil ;
punct de aprindere 20C,
limitele explozibile 1,812,4%.
Produce gaze iritante sau
toxice prin expunere la
foc. Vaporii/amestecurile
sunt explozibile.
Agent oxidant ; contactul

cu materiale combustibile
poate provoca foc.
Agent oxidant puternic;

poate aprinde materialele
combustibile.
PERICOLE DE FOC
Se lucreaz cu ventilaie
cu exhaustare local sau
cu protecie respiratorie; cu
mnui i mbrcminte de
protecie.
n cazul contactului cu
pielea, se spal din
abunden cu ap. Dac
concentraia
depete
20% se impune protecie cu
mnui din nitril i protecie
ocular.
Se
lucreaz
purtnd
protecie ocular i ltru
respirator dac se produce
praf.
PRECAUII DE
SIGURAN

puternici i acizii tari.
Reacioneaz viguros cu o gam

variat de substane chimice,
incluznd oxidani i baze. Atac
majoritatea metalelor i srurile
acestora, lichidele inamabile
i alte materiale combustibile
(hrtie, textile), aniline i
nitrometan.
Reacioneaz
violent
sau
exploziv dac este amestecat
cu o larg varietate de compui
anorganici sau organici sau cu
pulberi de metale.
Se poate descompune genernd oxigen

liber, determinnd
creterea presiunii
n container. Se
pstreaz n locuri
ntunecoase i reci.
Nu se folosesc
recipiente sau
echipamente din
metal, ex. bronz,
cupru, er.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5

afecta SNC cauznd
cefalee, ameeal,
grea, vrsturi i
com.
Iritant pentru piele i

ochi. Inhalarea prafului
poate cauza edem
pulmonar. Expunerea
repetat poate cauza
cderea unghiilor,
afectare gastrointestinal.
Lichid incolor cu
miros alcoolic ;
punct topire -89C,
punct erbere
82C;
miscibil cu apa.
Solid inodor n
diferite forme, solid
amorf cafeniurocat nchis pn
la negru albstrui
sau cristale roii
transparente
sau cristale gri
metalizat pn la
negru ;
punct topire 170
- 217C,
punct erbere
685C.
Cristale albe, foarte Toxic prin ingestie sau

solubile n ap.
inhalarea de praf. Iritant
pentru piele i ochi.
Propan-2-ol
Seleniu
Telurit de
potasiu
146
K2TeO3
Se
(CH3)2CHOH
izopropanol
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Combustibil. Produce
gaze iritante sau
la foc.
Foarte inamabil ;
punct de aprindere
112C, interval
inamabil
2,3-12,7% .
PERICOLE DE FOC

i acizii puternici. Reacioneaz
cu apa la 50C formnd hidrogen
i acid selenios inamabile.
Reacioneaz cu incandescen
dup o nclzire uoar n contact
cu fosforul i metale precum
nichelul, potasiul, platina, sodiul
i zincul.
Se va evita dispersia pulberii.

Se urmrete respectarea
strict a igienei. Se lucreaz cu
ventilaie cu exhaustare local,
cu mnui, mbrcminte i
Se manipuleaz purtnd
mbrcminte de protecie.

oxidani, pentru a forma peroxizi
instabili n cazul expunerii
prelungite la aer i lumin.
nchise etan, la distan de
sursele de foc. Se lucreaz
n nia de protecie chimic,
cu mnui din nitril i protecie
ocular.
PRECAUII DE SIGURAN
Soluia apoas
70-85% de
propan-2-ol,
utilizat ca spray
dezinfectant,
rmne un pericol
de incendiu i nu
trebuie utilizat
n vecintatea
surselor de foc.
ALTE PERICOLE
147
OsO4
Tetraoxid de
osmiu
Tetrametilen
oxid
Cristale galben pal,

cu miros neptor ;
punct topire 40C,
punct erbere
130C ;
sublimeaz sub
punctul de erbere ;
solubil n ap.
Foarte toxic prin inhalare,

ingestie i contact cu
pielea, provocnd arsuri i
iritaie severe. Sub form
de vapori, solid sau n
soluie este coroziv pentru
edem pulmonar.
Agent oxidant puternic.

Nu este combustibil dar
stimuleaz combustia
altor substane.
Deosebit de inamabil ;
poate forma peroxizi
explozivi ; punct de
aprindere -14C. Apa
poate s nu e ecace
n
stingerea
unui
incendiu cu implicarea
tetrahidrofuranului, dar
poate utilizat pentru a
rci recipientele expuse
la foc.
Inhibitor pentru SNC,

cauzeaz narcoza. Iritant
pentru ochi, piele i tractul
respirator.
Tetrahidrofuran Lichid incolor cu

punct topire -108,5C,
C4H8O
punct erbere 66C
Dietilen oxid
PERICOLE DE FOC
Nu este combustibil. Prin
expunere la foc produce
vapori sau gaze iritante
sau toxice.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Poate absorbit prin

piele ; expunerea prelungit
poate cauza dermatite.
Iritant ocular. Poate cauza
leziuni hepatice sau
renale, tulburri ale SNC
reprezentate de cefalee,
grea, icter slab, inapeten
i confuzie. Carcinogen
pentru animale.
PROPRIETI
FIZICE
Tetraclorura de Lichid incolor

cu miros eteric
carbon
caracteristic ;
punct topire -23C,
CCl4
punct erbere
76,5C.
SUBSTANE
CHIMICE
Se pstreaz containerele bine

nchise, n spaii bine ventilate.
Forma solid sau soluiile
se manipuleaz n nia de
protecie chimic sau hot, cu
ochelari i mnui de protecie.
Prepararea soluiei: se adaug
o ol nedesfcut la volumul
propus de ap, se astup
i se agit puternic pn la
spargerea olei.

puternici, bazele tari i unele
halogenuri ale metalelor, cauznd
pericol de foc i explozie. Atac
unele forme de plastic, cauciucul i
esturile. Tetrahidrofuranul poate
polimeriza n prezena inhibitorilor
cationici. Contactul cu hidroxid de
calciu poate cauza explozie.
La contactul cu suprafee erbini

sau acr, se descompune
formnd vapori i gaze toxice
i corozive (acid clorhidric,
clor, fosgen). Reacioneaz cu
unele metale cum ar aluminiu,
magneziu, zinc.
Se evit orice contact. Se

lucreaz cu ventilaie, cu
exhaustare local sau protecie
respiratorie ; cu mnui din nitril
i mbrcminte de protecie,
scut transparent pentru fa
sau protecia ochilor combinat
Se lucreaz cu ventilaie, cu
exhaustarea local a aerului
sau cu protecie respiratorie,
mnui i ochelari de
protecie.
PRECAUII DE
SIGURAN
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
Combustibil.
Elibereaz gaze
iritante sau toxice prin
expunere la foc.
Combustibil n condiii
particulare.
Vtmtoare prin contact

cu pielea sau prin
ingestie. Pulberea irit
tractul respirator i ochii.
Probabil
carcinogen
uman.
Iritant pentru ochi, piele;

expunerea prelungit
poate cauza dermatit
i poate afecta SNC
conducnd la pierderea
memoriei. Poate afecta
catul i rinichii. Probabil
carcinogen uman.
Cristale incolore ;
punct topire 131C,
punct erbere
200C;
puin solubil n ap.
148
Lichid incolor, cu
punct topire -73C,
punct erbere 87C.
CHClCCl2
Tricloretilen
(C6H3-(3CH3)(4NH2)) 2
3,3 - Dimetil(1,1 - bifenil)
4,4 - diamina
o Toluidina
C7H8
Metilbenzen
Foarte inamabil;
vaporii pot cauza
aprindere ;
punct de aprindere
4C, interval inamabil
1,4-7%. Stingerea n
cazul focurilor mici
se face cu: substane
chimice uscate, dioxid
de carbon, spum,
vapori de ap sau gaz
inert (nitrogen).
Inhibitor pentru SNC.

Iritant pentru ochi,
mucoase i piele. La
om, expunerea repetat
poate toxic pentru
funcia reproductoare
i pentru dezvoltare.
Lichid incolor cu
punct topire -95C,
punct erbere
111C;
nu este miscibil cu
apa.
Toluen
PERICOLE DE FOC
PERICOLE PENTRU
SNTATE
PROPRIETI
FIZICE
SUBSTANE
CHIMICE
Se lucreaz cu ventilaie sau

cu exhaustare local ; cu
mnui, ochelari de siguran
sau alte mijloace de protecie a
respiratorie.
Se evit contactul ; se
lucreaz cu protecie ocular
i cu mnui.
Se descompune n contact cu
suprafee ncinse sau acr,
formnd gaze toxice i corozive
(fosgen, acid clorhidric). Se
descompune n contact cu alcali
puternici producnd diclor-acetilena;
reacioneaz violent cu pulberi de
metale precum aluminiu, bariu,
magneziu sau titan; se descompune
ncet n prezena luminii i a umezelii,
formnd acid clorhidric.
Ageni oxidani.
Se pstreaz n recipiente bine Poate reaciona cu acizii tari, alcali

nchise, la distan de sursele de i oxidani.
aprindere ; Recipientele s e cu
mpmntare pentru a preveni
acumulrile i descrcrile de
electricitate static. Se va evita
inhalarea vaporilor; se folosete
protecie respiratorie. Se lucreaz
n nia de protecie chimic sau
n spaii bine ventilate. Se poart
mnui din nitril.
PRECAUII DE SIGURAN
ALTE PERICOLE
PROPRIETI
FIZICE
Xilen
(izomeri mixti)
Lichid incolor cu
miros aromatic ;
punct topire -95C
la -13C,
C6H4(CH3)2
punct erbere 136
Dimetil-benzen - 145C ;
insolubil n ap.
SUBSTANE
CHIMICE
PERICOLE DE FOC
Lichid inamabil ;
Poate afecta SNC,
conducnd la cefalee,
Punct de aprindere
ameeal, astenie
27-32C.
i grea. Lichidul i
vaporii irit ochii, pielea,
mucoasele i tractul
respirator. Vtmtor i
prin ingestie. Degreseaz
pielea prin contact
prelungit. Afectare
neurologic nespecic.
Expunerea poate
amplica pierderea de auz
cauzat de expunerea
la zgomote. Teste pe
animale sugereaz
toxicitate pentru funcia
reproductiv uman i
pentru cretere.
PERICOLE PENTRU
SNTATE
Se evit contactul cu ochii. Se
nitril i protecie ocular. Se
stocheaz n recipiente bine
nchise, la distan de surse
de aprindere.
PRECAUII DE SIGURAN
Poate conine
etil-benzen
ca impuritate.
Etilbenzenul
este un posibil
carcinogen uman.
ALTE PERICOLE
ANEXA 5
149
150
ANEXA 6
Anexa 6
Clasicarea agenilor biologici

Clasicarea este conform Anexei III (Clasicarea Comunitii) din Directiva 2000/54/CE a Parlamentului
European i Consiliului din data de 18 Septembrie 2000, referitoare la protejarea lucrtorilor mpotriva riscurilor
presupuse de expunerea la ageni biologici la locul de munc.
Note introductive
1. n clasicare sunt introdui doar agenii care sunt cunoscui a infecta inele umane.
Acolo unde este cazul, sunt furnizate indicaii asupra potenialului toxic i alergic al acestor ageni.
Agenii patogeni pentru animale i plante cunoscui c nu afecteaz omul sunt exclui. La stabilirea
acestei liste de ageni biologici nu au fost luate n considerare microorganismele modicate genetic.
2. Lista agenilor clasicai se bazeaz pe efectul acestor ageni asupra lucrtorilor sntoi.
Efectele particulare asupra celor a cror sensibilitate ar putea modicat dintr-un motiv sau
altul, cum ar patologia preexistent, administrarea de medicamente, imunitate compromis, sarcin sau
alptare nu sunt luate n considerare n mod specic.
Riscul suplimentar la care sunt expui aceti lucrtori trebuie luat n considerare n evaluarea
riscului cerut de Directiv (52).
Msurile tehnice de precauie luate n cadrul anumitor procese industriale, anumitor lucrri de
laborator sau anumitor activiti cu animale care implic expunerea efectiv sau potenial la ageni
biologici din grupele 3 sau 4, trebuie s e n conformitate cu Articolul 16 al Directivei.
3. Agenii biologici ce nu au fost clasicai n grupele 2 - 4 nu sunt inclui implicit n grupa 1.
n cazul agenilor cu mai multe specii cunoscute ca patogene pentru om, lista va include speciile
cel mai frecvent cauzatoare de mbolnviri i o referire de ordin mai general la faptul c i alte specii ale
aceluiai gen pot afecta sntatea.
Cnd n clasicarea agenilor biologici se menioneaz un gen ntreg, se subnelege c speciile i
tulpinile care sunt non-patogene au fost excluse.
4. Atunci cnd o tulpin este atenuat sau i-a pierdut genele de virulen, securizarea cerut prin
clasicarea tulpinii parentale nu trebuie aplicat n mod necesar, sub rezerva evalurii corespunztoare
a riscului la locul de munc.
Acesta este cazul, de exemplu, cnd o astfel de tulpin este utilizat ca un produs sau parte a
unui produs n scopuri prolactice sau terapeutice.
5. Nomenclatura agenilor clasicai utilizat pentru a ntocmi aceasta list reect i este n
conformitate cu cele mai recente acorduri internaionale privind taxonomia si nomenclatura agenilor n
vigoare n momentul ntocmirii sale.
6. Lista agenilor biologici clasicai reect nivelul cunotinelor la momentul ntocmirii sale.
Ea va reactualizat imediat ce nu va mai reecta cel mai recent nivel al cunotinelor.
7. Toate virusurile care au fost deja izolate la om i care nu au fost evaluate i incluse n aceasta
anex vor clasicate cel puin la grupa 2, cu excepia cazurilor n care se dovedete c este improbabil
aceste virusuri s provoace boli la om.
8. Anumii ageni biologici clasicai n grupa 3 i care sunt marcai n lista alturat cu dou
asteriscuri (**), pot prezenta un risc limitat de infecie pentru lucrtori, ntruct n mod obinuit ei nu sunt
infecioi pe cale aerogen.
151
Se vor evalua msurile de securizare ce vor aplicate acestor ageni, innd cont de natura
activitilor specice implicate i de cantitatea agenilor respectivi, determinndu-se dac, n anumite
circumstane particulare, se poate renuna la unele din aceste msuri.
9. Cerinele de securizare care decurg din clasicarea paraziilor se vor aplica numai la stadiile
din ciclul de via al parazitului care pot infecioase pentru om la locul de munc.
10. Aceasta list conine, de asemenea, indicaii separate pentru agenii biologici care pot provoca
reacii alergice sau toxice, atunci cnd este disponibil un vaccin ecace sau cnd se recomand ca lista
lucrtorilor expui s e pstrat mai mult de 10 ani.
Aceste indicaii sunt ilustrate prin urmtoarele litere:
A: Posibile reacii alergice
D: Lista lucrtorilor expui la acest agent biologic trebuie pstrat mai mult de 10 ani de
la ncetarea ultimei expuneri cunoscute
T: Producerea de toxine
V: Vaccin ecace disponibil
Efectuarea vaccinrii preventive trebuie s respecte codul de practic menionat n Anexa VII a
Directivei.
BACTERII i organisme similare
NB: Pentru agenii biologici din list, meniunea spp indic i alte specii cunoscute ca patogene pentru om.
Agent biologic
Clasicare
Actinobacillus actinomycetemcomitans
2
Actinomadura madurae
2
2
Actinomadura pelletieri
Actinomyces gerencseriae
2
Actinomycesis israelii
2
2
Actinomyces pyogenes
Actinomyces spp.
2
Arcanobacterium haemolyticum (Corynebacterium haemolyticum) 2
Bacillus anthracis
3
Bacteroides fragilis
2
2
Bartonella bacillifonnis
Bartonella quintana (Rochalimaea quintana)
2
Bartonella (Rochalimaea) spp.
2
Bordetella bronchiseptica
2
Bordetella parapertussis
2
Bordetella pertussis
2
Borrelia burgdorferi
2
2
Borrelia duttonii
Borrelia recurrentis
2
Borrelia spp.
2
3
Brucella abortus
Brucella canis
3
3
Brucella melitensis
Brucella suis
3
152
Observaii
ANEXA 6
Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei)

Burkholderia pseudomallei (Pseudomonas pseudomallei)
Campylobacter fetus
Campylobacter jejuni
Campylobacter spp.
Cardiobacterium hominis
Chlamydia pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Chlamydia psittaci (tulpini aviare)
Chlamydia psittaci (alte tulpini)
Clostridium botulinum
Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Clostridium spp.
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium minutissimum
Corynebacterium pseudotuberculosis
Corynebacterium spp.
Coxiella burnetii
Edwardsiella tarda
Ehrlichia sennetsu (Rickettsia sennetsu)
Ehrlichia spp.
Eikenella corrodens
Enterobacter aerogenes/cloacae
Enterobacter spp.
Enterococcus spp.
Erysipelothrix rhusiopathiae
Escherichia coli (cu excepia tulpinilor nepatogene)
Escherichia coli, tulpinile verocitotoxigene
(de ex. O157:H7 sau O103)
Flavobacterium meningosepticum
Fluoribacter bozemanae (Legionella)
Francisella tularensis (Tip A)
Francisella tularensis (Tipe B)
Fusobacterium necrophorum
Gardnerella vaginalis
Haemophilus ducreyi
Haemophilus inuenzae
Haemophilus spp.
Helicobacter pylori
Klebsiella oxytoca
Klebsiella pneumoniae
Klebsiella spp.
Legionella pneumophila
Legionella spp.
Leptospira interrogans (toate serotipurile)
Listeria monocytogenes
Listeria ivanovii
Morganella morganii
153
3
3
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
T
T, V
T, V
3
2
3
2
2
2
3
2
2
3(**)
2
2
2
2
3
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3
3(**)
3
3
3
3
Mycobacterium africanum
Mycobacterium avium/intracellulare
Mycobacterium bovis (exceptnd tulpina BCG)
Mycobacterium chelonae
Mycobacterium fortuitum
Mycobacterium kansasii
Mycobacterium leprae
Mycobacterium malmoense
Mycobacterium marinum
Mycobacterium microti
Mycobacterium paratuberculosis
Mycobacterium scrofulaceum
Mycobacterium simiae
Mycobacterium szulgai
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium ulcerans
Mycobacterium xenopi
Mycoplasma caviae
Mycoplasma hominis
Mycoplasma pneumoniae
Neisseria gonorrhoeae
Neisseria meningitidis
Nocardia asteroides
Nocardia brasiliensis
Nocardia farcinica
Nocardia nova
Nocardia otitidiscaviarum
Pasteurella multocida
Pasteurella spp.
Peptostreptococcus anaerobius
Plesiomonas shigelloides
Porphyromonas spp.
Prevotella spp.
Proteus mirabilis
Proteus penneri
Proteus vulgaris
Providencia alcalifaciens
Providencia rettgeri
Providencia spp.
Pseudomonas aeruginosa
Rhodococcus equi
Rickettsia akari
Rickettsia canada
Rickettsia conorii
Rickettsia montana
Rickettsia typhi (Rickettsia mooseri)
Rickettsia prowazekii
Rickettsia rickettsii
Rickettsia tsutsugamushi
154
V
V
ANEXA 6
Rickettsia spp.
Salmonella arizonae
Salmonella enteritidis
Salmonella typhimurium
Salmonella paratyphi A, B, C
Salmonella typhi
Salmonella (alte serotipuri)
Serpulina spp.
Shigella boydii
Shigella dysenteriae (Tip 1)
Shigella dysenteriae, altele dect Tip 1
Shigella exneri
Shigella sonnei
Staphylococcus aureus
Streptobacillus moniliformis
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Streptococcus suis
Streptococcus spp.
Treponema carateum
Treponema pallidum
Treponema pertenue
Treponema spp.
Vibrio cholerae (inclusiv El Tor)
Vibrio parahaemolyticus
Vibrio spp.
Yersinia enterocolitica
Yersinia pestis
Yersinia pseudotuberculosis
Yersinia spp.
(**) Vezi paragraful 8 al notelor introductive.
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
3 (**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
VIRUSURI (*)
Clasicare
2
Agent biologic
Adenoviridae
Arenaviridae
Complexul LCM-Lassa virus (arena virusuri ale lumii vechi):
Virusul Lassa
Virusul coriomeningitei limfocitare (tulpini neurotrope)
Virusul coriomeningitei limfocitare (alte tulpini)
Virusul Mopeia
Alte virusuri ai complexului LCM-Lassa
Complexul Tacaribe-Virus (arena virusuri ale lumii noi):
Virusul Guanarito
Virusul Junin
Virusul Sabia
Virusul Machupo
Virusul Flexal
Alte virusuri ale complexului Tacaribe
155
4
3
2
2
2
4
4
4
4
3
2
V
V
Observaii
Astroviridae
Bunyaviridae
Belgrade (cunoscut i ca Dobrava)
Bhanja
Virusul Bunyamwera
Germiston
Virusul Oropouche
Sin Nombre (fostul Muerto Canyon)
Virusul encefalitei de California
Hantavirusuri:
Hantaan (febra hemoragic de Coreea)
Virusul Seoul
Virusul Puumala
Virusul Prospect Hill
Alte hantavirusuri
Nairovirusuri:
Virusul febrei hemoragice de Crimeea-Congo
Virusul Hazara
Flebovirusuri:
Febra Valley Rift
Febra mutei-de-nisip
Virusul Toscana
Alte bunyaviridae cunoscute ca ind patogene
Caliciviridae
Virusul Hepatitei E
Virusul Norwalk
Alte Caliciviridae
Coronaviridae
Filoviridae
Virusul Ebola
Virusul Marburg
Flaviviridae
Encefalita de Australia (Encefalita Murray Valley)
Virusul encefalitei Central-Europene
transmis prin cpu
Absettarov
Hanzalova
Hypr
Kumlinge
Virusul Dengue tip 1-4
Virusul Hepatitei C
Virusul Hepatitei G
Virusul encefalitei japoneze B
Kyasanur Forest
Louping ill
Omsk (a)
Powassan
Rocio
Encefalita de primvar-var rus (TBE) (a)
156
2
3
2
2
2
3
3
2
3
3
2
2
2
4
2
3
2
2
2
3(**)
2
2
2
4
4
3
3 (**)
3
3
3
3
3
3(**)
3(**)
3
3
3(**)
3
3
3
3
D
D
V
V
V
V
ANEXA 6
Encefalita de St Louis
Virusul Wesselsbron
Virusul febrei West Nile
Febra galben
Alte avivirusuri cunoscute ca ind patogene
Hepadnaviridae
Virusul Hepatitei B
Virusul Hepatitei D (Delta) (b)
Herpesviridae
Citomegalovirus
Virusul Epstein-Barr
Herpesvirus simiae (Virusul B)
Virusul Herpes simplex, tipurile 1 i 2
Herpesvirus varicella-zoster
Virusul limfotrop B uman (HBLV-HHV6)
Virusul herpes uman 7
Virusul herpes uman 8
Orthomyxoviridae
Virusurile gripale tip A, B i C
Orthomyxoviridae transmise prin capu: Dhori i Thogoto
Papovaviridae
Virusurile BK i JC
Papillomavirusuri umane
Paramyxoviridae
Virusul pojarului
Virusul oreionului
Virusul bolii Newcastle
Virusurile paragripale tipurile 1 - 4
Virusul respirator sinciial
Parvoviridae
Parvovirusul uman (B 19)
Picornaviridae
Virusul conjuctivitei hemoragice acute (AHC)
Virusul Coxsackie
Echo virusuri
Virusul Hepatitei A (enterovirusul uman tip 72)
Poliovirusuri
Rinovirusuri
Poxviridae
Virusul Buffalopox (e)
Virusul variolei taurinelor
Virusul Elephantpox (f)
Virusul Milkers node
Molluscum contagiosum virus
Virusul Monkeypox
Virusul Orf 2
Virusul Rabbitpox (g)
Virusul Vaccinia
Virusul variolei (major i minor)
157
3
3(**)
3
3
2
3(**)
3(**)
V, D
V, D
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
V(c)
2
2
D(d)
D(d)
2
2
2
2
2
V
V
2
2
2
2
2
2
2
V
V
2
2
2
2
2
3
2
2
4
Virusul Whitepox (Variola virus)

Virusul Yatapox (Tana & Yaba)
Reoviridae
Coltivirus
Rotavirusuri umane
Orbivirusi
Reuvirusi
Retroviridae
Virusurile imunodecienei umane
Virusurile limfotropice ale celulelor T umane
(HTLV), tipurile 1 i 2
SIV (h)
Rhabdoviridae
Virusul rabic
Virusul stomatitei veziculare
Togaviridae
Alfavirusuri
Encefalomielita equin estic
Virusul Bebaru
Virusul Chikungunya
Virusul Everglades
Virusul Mayaro
Virusul Mucambo
Virusul Ndumu
Virusul Onyong-nyong
Virusul Ross River
Virusul Semliki Forest
Virusul Sindbis
Virusul Tonate
Encefalomielita equin venezuelean
Encefalomielita equin vestic
Alte alfavirusuri cunoscute
Rubivirus (rubeola)
Toroviridae
Virusuri neclasicate
Virusul pojarului equin
Virusuri hepatitice nc neidenticate
Ageni neconvenionali asociai cu encefalopatiile
spongiforme transmisibile (TSEs)
Boala Creutzfeldt-Jakob
Varianta bolii Creutzfeldt-Jakob
Encefalopatia spongiforma bovin (BSE)
i alte encefalopatii spongiforme transmisibile (i)
Sindromul Gerstmann-Strussler-Scheinker
Kuru
(*) Vezi paragraful 7 al notelor introductive.
(a) Encefalita transmis de cpu.
158
4
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3(**)
3(**)
2
3
2
3(**)
3(**)
3
3(**)
3
2
2
2
2
3(**)
3
3
2
2
2
V
V
V
4
3(**)
3(**)
3(**)
D(d)
D(d)
3(**)
3(**)
3(**)
D(d)
D(d)
D(d)
ANEXA 6
(b) Virusul hepatitei D reprezint un agent patogen pentru lucrtori doar n prezena unei infecii simultane
sau secundare cauzat de virusul hepatitei B.
Vaccinarea contra virusului hepatitei B va proteja deci lucrtorii care nu sunt afectai de virusul hepatitei
B, mpotriva virusului hepatitei D (Delta).
(c) Numai pentru tipurile A i B.
(d) Recomandat pentru activitile care implic contactul direct cu aceti ageni .
(e) Sunt identicate dou virusuri: unul de tip buffalopox iar cellalt o variant a virusului Vaccinia.
(f) Variant a virusului cowpox.
(g) Varianta a virusului Vaccinia.
(h) n prezent, nu exist dovezi de boal la om provocat de alte retrovirusuri de origine simian. Ca msur
de precauie, pentru activitile cu risc de expunere la acetia, se recomand securizare de nivel 3.
(i) Nu exist dovezi de infecii provocate la om de ageni responsabili pentru alte encefalopatii spongiforme
transmisibile animale. Cu toate acestea, ca msur de precauie pentru lucrrile de laborator, se recomand
msuri de securizare pentru agenii inclui n grupa de risc 3 (**), cu excepia lucrrilor de laborator care
implic un agent scrapie pentru care nivelul de securizare 2 este sucient.
Agent biologic
Acanthamoeba castellani
Ancylostoma duodenale
Angiostrongylus cantonensis
Angiostrongylus costaricensis
Ascaris lumbricoides
Ascaris suum
Babesia divergens
Babesia microti
Balantidium coli
Brugia malayi
Brugia pahangi
Capillaria philippinensis
Capillaria spp.
Clonorchis sinensis
Clonorchis viverrini
Cryptosporidium parvum
Cryptosporidium spp.
Cyclospora cayetanensis
Dipetalonema streptocerca
Diphyllobothrium latum
Dracunculus medinensis
Echinococcus granulosus
Echinococcus multilocularis
Echinococcus vogeli
Entamoeba histolytica
Fasciola gigantica
Fasciola hepatica
Fasciolopsis buski
Giardia lamblia (Giardia intestinalis)
Hymenolepis diminuta
Hymenolepis nana
PARAZII
159
Clasicare
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
3(**)
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
Observaii
A
A
3(**)
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3(**)
2
2
2
2
2
2
3(**)
3
2
Leishmania brasiliensis
Leishmania donovani
Leishmania ethiopica
Leishmania mexicana
Leishmania peruviana
Leishmania tropica
Leishmania major
Leishmania spp.
Loa loa
Mansonella ozzardi
Mansonella perstans
Naegleria fowleri
Necator americanus
Onchocerca volvulus
Opisthorchis felineus
Opisthorchis spp.
Paragonimuswes termani
Plasmodium falciparum
Plasmodium spp. (human and simian)
Sarcocystis suihominis
Schistosoma haematobium
Schistosoma intercalatum
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Schistosoma mekongi
Strongyloides stercoralis
Strongyloides spp.
Taenia saginata
Taenia solium
Toxocara canis
Toxoplasma gondii
Trichinella spiralis
Trichuris trichiura
Trypanosoma brucei brucei
Trypanosoma brucei gambiense
Trypanosoma brucei rhodesiense
Trypanosoma cruzi
Wuchereria bancrofti
FUNGI
Agent biologic
Aspergillus fumigatus
Blastomyces dermatitidis (Ajellomyces dermatitidis )
Candida albicans
Candida tropicalis
Cladophialophora bantiana (fosta: Xylohypha bantiana,
Cladosporium bantianum sau trichoides)
Coccidioides imitis
160
Clasicare
2
3
2
2
3
3
Observaii
A
A
ANEXA 6
Cryptococcus neoformans var. neoformans

(Filobasidiella neoformans var. neoformans)
Cryptococcus neoformans var. gattii
(Filobasidiella bacillispora)
Emmonsia parva var. parva
Emmonsia parva var. crescens
Epidermophyton occosum
Fonsecaea compacta
Fonsecaea pedrosoi
Histoplasma capsulatum var. capsulatum
(Ajellomyces capsulatus)
Histoplasma capsulatum duboisii
Madurella grisea
Madurella mycetomatis
Microsporum spp.
Neotestudina rosatii
Paracoccidioides brasiliensis
Penicillium marneffei
Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii)
Scedosporium prolicans (inatum)
Sporothrix schenckii
Trichophyton rubrum
Trichophyton spp.
161
2
2
2
2
2
2
3
3
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
A
A
162
BIBLIOGRAFIE
Bibliograe
1. Safety in health-care laboratories. Geneva, World Health Organization, 1997, (http://whqlibdoc.who.

int/hq/1997/WHO_LAB_97.1.pdf).
2. Garner JS, Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Guideline for isolation precautions
in hospitals. American Journal of Infection Control, 1996, 24:2452, (http://www.cdc.gov/ncidod/hip/
isolat/isolat.htm).
3. Hunt GJ, Tabachnick WJ. Handling small arbovirus vectors safely during biosafety level 3 containment:
Culicoides variipennis sonorensis (Diptera: Ceratopogonidae) and exotic bluetongue viruses. Journal
of Medical Entomology, 1996, 33:271277.
4. National Research Council. Occupational health and safety in the care and use of research animals.
Washington, DC, National Academy Press, 1997.
5. Richmond JY, Quimby F. Considerations for working safely with infectious disease agents in research
animals. In: Zak O, Sande MA, eds. Handbook of animal models of infection. London, Academic
Press, 1999:6974.
6. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, 4th ed. Washington, DC, United States
Department of Health and Human Services/Centers for Disease Control and Prevention/National
Institutes of Health, 1999.
7. Class II (laminar ow) biohazard cabinetry. Ann Arbor, MI, National Sanitation Foundation,2002 (NSF/
ANSI 492002).
8. Richmond JY, McKinney RW. Primary containment for biohazards: selection, installation and use of
biological safety cabinets, 2nd ed. Washington, DC, United States Department of Health and Human
Services/Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health, 2000.
9. Microbiological safety cabinets. Recommendations for information to be exchanged between
purchaser, vendor and installer and recommendations for installation. London, British Standards
Institution, 1992 (Standard BS 57262:1992).
10. Microbiological safety cabinets. Recommendations for selection, use and maintenance. London,
British Standards Institution, 1992 (Standard BS 57264:1992).
11. Biological containment cabinets (Class I and II): installation and eld testing. Toronto, Canadian
Standards Association, 1995 (Standard Z316.395 (R2000)).
12. Collins CH, Kennedy DA. Laboratory acquired infections: history, incidence, causes and prevention,
4th ed. Oxford, Butterworth-Heinemann, 1999.
13. Health Canada. Laboratory biosafety manual, 2nd ed. Ottawa, Minister of Supply and Services
Canada, 1996.
14. Biological safety cabinets biological safety cabinets (Class I) for personnel and environment
protection. Sydney, Standards Australia International, 1994 (Standard AS 2252.11994).
15. Biological safety cabinets laminar ow biological safety cabinets (Class II) for personnel,
environment and product protection. Sydney, Standards Australia International, 1994 (Standard AS
2252.21994).
16. Standards Australia/Standards New Zealand. Biological safety cabinets installation and use.
Sydney, Standards Australia International, 2000 (Standard AS/NZS 2647:2000).
17. Advisory Committee on Dangerous Pathogens. Guidance on the use, testing and maintenance of
laboratory and animal exible lm isolators. London, Health and Safety Executive, 1990.
163
18. Standards Australia/Standards New Zealand. Safety in laboratories microbiological aspects

and containment facilities. Sydney, Standards Australia International, 2002 (Standard AS/NZS
2243.3:2002).
19. Centers for Disease Control and Prevention. Recommendations for prevention of HIV transmission
in health-care settings. Morbidity and Mortality Weekly Report, 1987, 36 (Suppl. 2):1S18S.
20. Bosque PJ et al. Prions in skeletal muscle. Proceedings of the National Academy of Sciences of the
United States of America, 2002, 99:38123817.
21. Bartz JC, Kincaid AE, Bessen RA. Rapid prion neuroinvasion following tongue infection. Journal of
Virology, 2003, 77:583591.
22. Thomzig A et al. Widespread PrPSc accumulation in muscles of hamsters orally infected with scrapie.
EMBO Reports, 2003, 4:530533.
23. Glatzel M et al. Extraneural pathologic prion protein in sporadic Creutzfeld-Jakob disease. New
England Journal of Medicine, 2003, 349:18121820.
24. Brown P, Wolff A, Gajdusek DC. A simple and effective method for inactivating virus infectivity in
formalin-xed tissue samples from patients with Creutzeld-Jakob disease. Neurology, 1990, 40:887
890.
25. Taylor DM et al. The effect of formic acid on BSE and scrapie infectivity in xed and unxed braintissue. Veterinary Microbiology, 1997, 58:167174.
26. Safar J et al. Prions. In: Richmond JY, McKinney RW, eds. Biosafety in microbiological and biomedical
laboratories, 4th ed. Washington, DC, United States Department of Health and Human Services,
1999:134143.
27. Bellinger-Kawahara C et al. Puried scrapie prions resist inactivation by UV irradiation. Journal of
Virology, 1987, 61:159166.
28. Health Services Advisory Committee. Safe working and the prevention of infection in clinical
laboratories. London, HSE Books, 1991.
29. Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ. Disinfection, preservation and sterilization, 3rd ed. Oxford,
Blackwell Scientic, 1999.
30. Ascenzi JM. Handbook of disinfectants and antiseptics. New York, NY, Marcel Dekker, 1996.
31. Block SS. Disinfection, sterilization & preservation, 5th ed. Philadelphia, PA, Lippincott Williams &
Wilkins, 2001.
32. Rutala WA. APIC guideline for selection and use of disinfectants. 1994, 1995, and 1996 APIC
Guidelines Committee. Association for Professionals in Infection Control and Epidemiology, INC.
American Journal of Infection Control, 1996, 24:313342.
33. Sattar SA, Springthorpe VS, Rochon M. A product based on accelerated and stabilized hydrogen
peroxide: evidence for broad-spectrum germicidal activity. Canadian Journal of Infection Control,
1998, 13:123130.
34. Schneider PM. Emerging low temperature sterilization technologies. In: Rutala WA, eds. Disinfection
& sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:7992.
35. Springthorpe VS. New chemical germicides. In: Rutala WA, eds. Disinfection & sterilization in health
care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:273280.
36. Steelman VM. Activity of sterilization processes and disinfectants against prions. In: Rutala WA, eds.
Disinfection & sterilization in health care. Champlain, NY, Polyscience, 1997:255271.
37. Taylor DM. Transmissible degenerative encephalopathies: inactivation of the unconventional causal
agents. In: Russell AD, Hugo WB, Ayliffe GAJ, eds. Disinfection, preservation and sterilization, 3rd
ed. Oxford, Blackwell Scientic, 1999:222236.
164
BIBLIOGRAFIE
38. Infection control guidelines for hand washing, cleaning, disinfection and sterilization in health care,
2nd ed. Ottawa, Laboratory Centre for Disease Control, Health Canada, 1998.
39. Springthorpe VS, Sattar SA. Chemical disinfection of virus-contaminated surfaces. CRC Critical
Reviews in Environmental Control, 1990, 20:169229.
40. Recommendations on the transport of dangerous goods, 13th revised edition, New York and Geneva,
United Nations, 2003, (http://www.unece.org/trans/danger/publi/unrec/rev13/ 13les_e.html).
41. Technical instructions for the safe transport of dangerous goods by air, 20032004 Edition. Montreal,
International Civil Aviation Organization, 2002.
42. Economic Commission for Europe Inland Transport Committee. Restructured ADR applicable as
from 1 January 2003. New York and Geneva, United Nations, 2002, (http://www.unece.org/trans/
danger/publi/adr/adr2003/ContentsE.html).
43. Infectious substances shipping guidelines. Montreal, International Air Transport Association,2003,
(http://www.iata.org/ads/issg.htm).
44. Transport of Infectious Substances. Geneva, World Health Organization, 2004, (http://www.who.int/
csr/resources/publications/WHO_CDS_CSR_LYO_2004_9/en/).
45. Berg P et al. Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science, 1975, 188:991994.
46. European Council. Council Directive 98/81/EC of 26 October 1998 amending Directive90/219/EEC
on the contained use of genetically modied microorganisms. Ofcial Journal, 1998, L330:1331.
47. OMalley BW Jr et al. Limitations of adenovirus-mediated interleukin-2 gene therapy for oral cancer.
Laryngoscope, 1999, 109:389395.
48. World Health Organization. Maintenance and distribution of transgenic mice susceptible to human
viruses: memorandum from a WHO meeting. Bulletin of the World Health Organization, 1993,
71:497502.
49. Furr AK. CRC handbook of laboratory safety, 5th ed. Boca Raton, FL, CRC Press, 2000.
50. Lenga RE. The Sigma-Aldrich Library of Chemical Safety Data, 2nd ed. Milwaukee, WI, Aldrich
Chemical Company, 1988.
51. Lewis RJ. Saxs dangerous properties of industrial materials, 10th ed. Toronto, John Wiley and Sons,
1999.
52. DIRECTIVE 2000/54/EC of The European Parliament and of The Council of 18 September 2000
on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh
individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC)
165
166

Ghid de Biosiguranta 2005

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Ghid de Biosiguranta 2005

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

MINISTERUL SNTII

Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei

Cuvnt nainte la ediia n limba romn

Organizaia Mondial a Sntii (OMS) a recunoscut de mult timp c sigurana i, n particular,

2. Evaluarea riscului microbiologic

3. Laboratoarele de baz Nivelele de Biosiguran 1 i 2

4. Laboratorul securizat Nivelul de Biosiguran 3

5. Laboratorul nalt securizat Nivelul de Biosiguran 4

7. Recomandri pentru calicarea laboratorului/facilitilor acestuia

8. Recomandri pentru certicarea laboratorului/facilitilor acestuia

9. Conceptul de biosecuritate n laborator

10. Hotele de siguran biologic

11. Echipamente de siguran

12. Practici microbiologice corecte. Tehnici de laborator

13. Planuri pentru intervenii n caz de accidente i msuri de urgen

14. Dezinfecia i sterilizarea

15. Noiuni introductive privind transportul materialelor infecioase

16. Biosigurana i tehnologia ADN recombinant

17. Substane chimice periculoase

18. Pericole adiionale n laborator

19. Responsabilul cu biosigurana i comitetul de biosiguran

20. Reguli de siguran pentru personalul auxiliar

21. Programele de instruire

Anexa 2 - Imunizarea personalului

Anexa 3 - Centre colaboratoare ale OMS n domeniul biosiguranei

Anexa 4 - Sigurana microbiologic a echipamentelor

Anexa 5 - Substanele chimice: pericole i precauii

Anexa 6 - Clasicarea agenilor biologici

Din punctul de vedere al biosiguranei, laboratoarele se clasic astfel :

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

Tabel 2. Relaia dintre grupurile de risc i nivelele de biosiguran

De baz - Nivel de nvmnt,

GMT = Good Microbiological Techniques (practici microbiologice corecte)

(a) Izolarea zic i funcional a laboratorului de circulaia general a personalului.

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

2. EVALUAREA RISCULUI MICROBIOLOGIC

2. Evaluarea riscului microbiologic

Patogenitatea agentului infecios i doza infectant

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

Probe despre care exist informaii limitate

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

Figura 1. Sigla de pericol biologic

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

Exemple de design pentru laboratoare cu Nivel de biosiguran 1 i 2 sunt prezentate n Figura

Figura 2. Laborator cu nivel de biosiguran 1

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

Figura 3. Laborator cu nivel de biosiguran 2

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

3. LABORATOARELE DE BAZ NIVELELE DE BIOSIGURAN 1 I 2

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

4. LABORATORUL SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 3

Laboratorul securizat - Nivel de biosiguran 3 este proiectat i echipat pentru lucrul cu

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

4.2. Designul i facilitile laboratorului

4. LABORATORUL SECURIZAT NIVELUL DE BIOSIGURAN 3

Un exemplu de design pentru laboratorul de Nivel de biosiguran 3 este prezentat n Figura 4.

Figura 4. Laborator cu Nivel de biosiguran 3.

GHID NAIONAL DE BIOSIGURAN PENTRU LABORATOARELE MEDICALE

A. Faa anterioar a cardului

B. Faa posterioar a cardului