Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Bacteriologie general
DEFINIIE
Microbiologia este o disciplin biologic care studiaz un grup
heterogen de vieuitoare uni-sau pluricelulare cu dimensiuni
microscopice (nu pot fi evideniate cu ochiul liber) numite
microorganisme.
Discipline microbiologice
Microbiologia medical uman
Microbiologia medical veterinar
Microbiologia ecologic
Microbiologia geologic
Microbiologia medicamentoas
Microbiologia analitic
Microbiologia fitopatologic
Microbiologia marin
Microbiologia genetic
ISTORIC
Din cele mai vechi timpuri s-a ncercat stabilirea unei legturi
cauzale ntre bolile epidemice i existena unor vieuitoare
extrem de mici. Marcus Terentius Varro (Reatinus) (116-27 .e.n.)
formuleaz cu claritate natura microbian a bolilor epidemice,
atunci cnd scrie: Dac n acele locuri vor fi mlatini, acolo se
dezvolt fiine vii foarte mici ce determin boli grele. Titus
Lucretius Carus (99-55 .Hr.) n singura sa lucrare cunoscut - De
Rerum Natura- respinge ideea mniei zeilor drept cauz a
pestei, explicnd-o prin germenii bolii i ai morii termeni ce
desemneaz microbii patogeni. Hieronimus Fracastor (14781553) a emis prin metafore, idei valoroase, ca exemplu aceea
despre variabilitatea virulenei microorganismelor patogene n
cursul epidemiilor.
Contribuii nepreuite n dezvoltarea microbiologiei ca tiin
revin savanilor Louis Pasteur i Robert Koch. De numele lui
Pasteur se leag interpretarea biologic a efectelor chimice
produse de microbi, teoria microbian a bolilor infecioase,
vaccinarea ca metod de profilaxie a bolilor infecioase,
atenuarea virulenei microbiene prin cultivare pe medii adecvate
n vederea obinerii tulpinilor vaccinale atenuate stabile, crearea
Institutului Pasteur din Paris.
ISTORIC
Robert Koch a pus bazele tehnicilor bacteriologiei clasice,
tehnologiei descoperirii de noi bacterii i metodologiei
diagnosticului bacteriologic, a elaborat cunoscutele postulate
ce-i poart numele (microorganismul cauzal trebuie gsit n
leziunile cazurilor de boal, trebuie cultivat i izolat n cultur
pur, cultura pur inoculat la un animal sensibil trebuie s
reproduc boala specific, iar microorganismul s fie gsit n
leziunile animalului sensibil).
Una dintre cele mai importante descoperiri n microbiologie a
fost fcut n anul 1928 de Alexander Fleming (n. 6 august
1881 - d.11 martie 1955); este vorba de descoperirea
penicilinei din ciuperca Penicillium notatum.
ISTORIC
CLASIFICAREA BACTERIILOR
Comitetul International de Sistematizare al procariotelor (ICSP)
este un comitet internaional din cadrul Uniunii Internaionale a
Societilor de Microbiologie (IUMS), care este responsabil
pentru nomenclatura i taxonomia organismelor procariote.
Clasificarea bacteriilor se poate face pe mai multe criterii:
Clasificarea uzual (taxonomic)
Grupul Bacteria (Schizomycetes) din cadrul prostitelor
inferioare este mprit n ordine. n cadrul fiecrui ordin exist
familii, care la rndul lor se mpart n triburi sau direct n
genuri, iar acestea din urm cuprind mai multe specii. n
interiorul unei specii pot exista tipuri i subtipuri. Tipul sau
subtipul poate fi serologic (cu antigenitate distinct) sau lizotip
(permite liza celulei bacteriene de ctre anumii bacteriofagi
specifici).
n taxonomia bacterian
ordinul prezint sufixul ales
familia sufixul aceae
genul sufixul variabil um, us, a, as.
specia este denumit prin 2 cuvinte latinizate (ex.
Staphylococcus aureus)
CLASIFICAREA BACTERIILOR
Clasificarea taxonomic mparte grupul Bacteria n 5 ordine
(Eubacteriales, Pseudomonales, Actinomycetales,
Spirochaetales, Mycoplasmatales) la care se adaug ordinul
Rickettsiales cu anumite caracteristici (structur celular
similar bacteriilor, dar cu parazitism intracelular obligatorii.
Clasificarea pe criteriul relaiilor cu celelalte
vieuitoare
Pe aceste criterii bacteriile pot fi:
bacterii utile:
saprofite omului i animalelor (habitat intestinal)
folosite n industria alimentar
Exemplu:
Staphylococcus aures 32-34 moli%
CLASIFICAREA BACTERIILOR
-
MORFOLOGIA BACTERIAN
Dimensiunile bacteriilor se situeaz sub limita vizibilitii cu
ochiul liber (100m) i de aceea observarea lor se poate
realiza numai cu ajutorul microscopului. Cunotinele privind
morfologia bacterian au evoluat paralel cu perfecionarea
microscopului i a aparaturii tehnice, precum i cu succesele
din domeniul fiziologiei bacteriene.
Metodologia de studiu a morfologiei i compoziiei chimice a
bacteriilor:
1) Microscopia optic
Reprezint metoda de vizualizare a elementelor bacteriene,
elemente cu dimensiuni de ordinul micronilor.
Examinarea se poate efectua:
pe preparate proaspete, evideniindu-se forma i
micrile bacteriene.
pe preparate fixate i colorate obinnd informaii asupra
formei i dispoziiei, dimensiunii i structurii bacteriene.
Dintre metodele de colorare cea mai larg utilizare o are
coloraia Gram. Se mai folosete coloraia cu albastru de
metilen, coloraia Ziehl-Neelsen (pune n eviden bacilii
acidoalcoolorezisteni) precum i coloraii speciale pentru
evidenierea capsulei, cililor, sporilor bacterieni, nucleului,
incluziilor metacromatice din citoplasma celular.
2) Microscopia electronic
Metod modern de cercetare, permite evidenierea elementelor de
finee, de form i structur bacterian, puterea de rezisten fiind
pn la 0,001m.
Tehnici:
tehnica colorrii negative
tehnica umbririi
tehnica includerii i secionrii
tehnica de baleiaj (scanning)
3) Metoda de ndeprtare a peretelui celular cu lizozim. n cazul
bacteriilor Gram pozitive, tratarea cu lizozim n mediul hiperton,
duce la apariia protoplatilor (formaiuni sferice, delimitate de
membrana citoplasmatic). La bacteriile gram negative, lizozimul
nu reuete s lizeze n totalitate peretele celular, deci nu se obin
protoplati adevrai; n schimb tratamentul acestor bacterii cu
antibiotice ce inhib sinteza peretelui celular (ex. Penicilin) n
mediu hiperton, duce la apariia sferoplatilor, identici ca
morfologie cu protoplatii.
4) Autoradiografierea permite localizarea acizilor nucleici i aduce
informaii asupra biosintezei proteinelor celulare prin marcarea
celulei bacteriene cu izotopi radioactivi, acoperirea preparatului cu
emulsie fotografic pentru receptarea radiaiilor emise de izotopi,
numararea granulelor de emulsie.
5) Analiza chimic prin dezintegrare, ultracentrifugare,
cromatografie, electroforez, se obin date privind sediul diferitelor
Nucleul (nucleoidul)
Citoplasma
Reprezint sediul celor mai importante procese metabolice al cror
rezultat final este creterea i multiplicarea celulei. Ea reprezint un
sistem coloidal complex alctuit din ap, proteine, nucleoproteine
(ARN), glucide, lipide, enzime, pigmeni, sruri minerale. Este intens
bazofil datorit bogiei n ARN.
n citoplasma bacteriilor au fost descrise o serie de formaiuni
structurale:
ribozomii corpusculi foarte numeroi, sferici, liberi n citoplasm,
coninnd ARN ribozomal (70%) i proteine strns asociate ntre
ele. La nivelul lor se realizeaz biosinteza proteinelor.
mezozomul structur ce se formeaz prin invaginarea membranei
citoplasmatice, de obicei unic, ntlnindu-se mai ales la bacteriile
Gram pozitive i ocazional la cele Gram negative.
Mezozomul particip la sinteza peretelui celular, la replicarea ADNului, la diviziunea celular (segregarea materialului nuclear la
celulele fiice), la procesul de sintez i secreii a unor exoenzime,
probabil i la oxidoreducerile celulare. Este specific celulei
procariote.
plasmidele sunt uniti genetice extracromozomiale (ADN)
prezente numai la unii indivizi bacterieni, cu capacitate de transfer
de la un individ la altul. Intervin n mecanismul transmiterii
rezistenei la antibiotice. Sunt specifice celulei procariote.
Peretele celular
Reprezint nveliul exterior al celulei, care prin rigiditatea sa
menine forma i integritatea bacteriei. De asemenea, permite
schimburile ntre celul i mediu, intervine n fenomenul de diviziune
celular prin formarea pereilor despritori care separ bacteriile
nou formate, are rol esenial n fixarea fagilor pe celula bacterian i
posibil rol n fenomenul de conjugare i morfogeneza cililor.
Dac peretele celular este lizat cu lizozim, sau celula bacterian este
supus aciunii unor antibiotice care inhib sinteza peretelui celular,
n mediul hiperton apar formaiuni celulare sferice delimitate de
citoplasm, protoplati, respectiv sferoplati. Peretele celular este
alctuit din reeaua mucopeptidic comun (peptidoglican), alturi
de elemente particulare la bacterii Gram pozitive fa de cele Gram
negative.
a. Reeaua mucopeptidic (peptoglican) este elementul structural
comun al tuturor bacteriilor. Ea este format din 3 poriuni:
- scheletul de baz, un polimer heteroproteic coninnd
monomeri alternani de N-acetil-glucozamin i acid N-acetilmuramic.
- puni tetrapeptidice alctuite din lanuri de cte 4 aminoacizi; Lalanin; D-glutamin, L-lizin (sau diaminopimelic) i D-alanin,
ce leag monomeri de acid N-acetil-muramic situai fa n fa la
dou niveluri vecine ale scheletului de baz.
- puni ncruciate de pentaglicin ce cupleaz 2 puni
tetrapeptidice alturate.
Capsula
Unele bacterii posed n afara peretelui celular un nveli denumit
capsul, care se poate evidenia la microscopul optic prin colorare
cu tu de China sau rou de Congo sau coloraii speciale, la
microscopul electronic, sau prin contactul bacteriilor capsulate cu
anticorpi specifici anti-antigene capsulare i colorare simpl
(exemplu reacia de umflare a capsulei la pneumococ).
Capsula poate fi:
microcapsul (grosime sub 0,2m), ataat intern la peretele celular
capsul propriuzis (grosime 1-3m), morfologic distinct.
material vscos amorf n jurul peretelui bacterian.
Ea mrete rezistena germenilor la ageni nefavorabili din mediu, la
uscare, mrete virulena germenilor pe care i apr de
fagocitoz i are rol antigenic, fiind sediul unor antigene complete
sau incomplete (antigenele capsulare sunt constituite de regul
din polizaharide complexe), este promotor al aderenei i factor
de colonizare pe suprafee inerte.
n compoziia chimic a capsulei, pe lng polizaharide, se mai pot
gsi acizi uronici (abseni n perete bacterian) i homopolimeri de
acid alfa-glutamic.
Fimbriile (pilii)
Sunt elemente mai scurte, mai groase i mai rezistente dect cilii,
totdeauna dispuse peritriche, fiind ntlnite la majoritatea bacteriilor
Gram negative.
Pot fi evideniate prin examinare la microscopul electronic sau prin testul
de hemaglutinare fimbrial, bazat pe proprietatea de aderen la
hematii. Natura proteic a fimbrilor le confer proprieti diferite de
cele flagelare.
Fimbriile nu au rol n mobilitatea bacteriilor, dar au rol important n
fenomenele de transfer genetic ntre dou celule bacteriene (fimbrii de
conjugare, sexuale) formnd puni ntre celula donoare i cea
receptoare, n ataarea bacteriilor la celulele epiteliale ale gazdei
favoriznd colonizarea, precum i n rezistena bacteriilor la fagocitoz.
Sporul bacterian
Sporul reprezint o form de rezisten a unor genuri microbiene
(Bacillus, Clostridium) care poate supravieui timp ndelungat n condiii
nefavorabile de mediu. Rezistena sa este determinat de cantitatea
redus de ap, existena enzimelor sub form inactivat, cantitate
crescut de lipide i calciu care determin scderea permeabilitii
sporului, rezisten ce variaz cu specia, vrsta, temperatura i mediul
n care s-a fcut sporularea.