CURS 2

METABOLISMUL BACTERIAN
Metabolismul bacterian se caracterizeaz prin:
este un metabolism unicelular, ce se desfoar ntr-o
singur celul
este un metabolism necompartimentat (lipsa organitelor
citoplasmatice)
este un metabolism teleonomic, n sensul c posed cile
metabolice i mecanismele de reglare ce asigur o
eficien maxim
mare flexibilitate metabolic, de unde rezult o capacitate
crescut de adaptare la condiii variate de mediu
este un metabolism de mare intensitate, ceea ce asigur o
multiplicare rapid
n complexitatea genetic a lumii bacteriene acioneaz o
restricie genetic, determinat de cantitatea de
informaie.
Metabolismul bacterian cuprinde:
metabolismul energetic (catabolismul)

Metabolismul energetic (catabolismul)

Cuprinde dou procese fundamentale:
fermentaia bacterian
respiraia bacterian.
Fermentaia bacterian
O putem defini drept catabolism n care energia rezult din
folosirea substanelor organice, att ca donatori, ct i ca
acceptori de electroni. Numrul de molecule C, H, O din
substanele iniiale este egal cu cel din moleculele
rezultate.

Produii primari sunt reprezentai de acidul piruvic, NADH

i ATP. Acidul piruvic este transformat ntr-o varietate de
compui organici. Transferul electronilor de pe substratul
donator pe cel receptor se face dependent de potenialul
de oxido-reducere (potenial redox). Fluxul de electroni
strbate un ir de cupluri redox cu o orientare bine definit
de valoarea potenialelor lor. Substanele care accept i
doneaz cu mare uurin electroni sunt numite
transportori de electroni. Produii finali ai fermentaiei i
modul n care se formeaz sunt specifici pentru speciile sau
grupurile microbiene.

 n timpul glicolizei, glucoza este oxidat la acid piruvic. Unele

bacterii fermentative reduc acidul piruvic numai la acid lactic
(bacterii homofermentative specii de Bacillus, Lactobacillus,
Streptococ), altele produc i acid acetic, formic, alcool i
aceton (bacterii heterofermentative fungi, cteva bacterii
din genul Clostridium, Streptococ).
Un alt tip de reacie fermentativ este reprezenat de
aciunea Clostridiilor asupra aminoacizilor, n care caz
particip doi aminoacizi (fermentaie cuplat) n care unul
este oxidat, iar cellalt redus.
n fermentaia bacterian sursa de energie este reprezentat
de gruparea atomilor de H i O, de la forma hidroxi (-OH) cu
energie mai mare la forma carboxi (-COOH) cu energie mai
mic, precum i de descompunerea ATP n ADP i radicali
acizi (similar proceselor de respiraie bacterian).
Fermentaia implic intervenia unor molecule de
biocatalizatori enzimatici, factorul esenial revenind
feredoxinei, care particip i la unele fenomene de
fotosintez. n final, n procesul de glicoliz, energia necesar
pentru a se ajunge la molecula cheie de acid piruvic este
conferit de descompunerea ATP cu eliberarea legturilor
macroergice; regenerarea moleculei ATP din ADP i radical
fosforic are la baz oxidarea i reducerea ritmic a

Cele mai importante forme de fermentaii la bacterii sunt:

lactic la lactobacili, streptococi grup A
acid-mixt E. coli i alte bacterii intestinale
butilen-glicolitic Enterobacter, Bacillus
propionic anaerobi nesporulai
butir-butanolic Clostridium butyricum
acetic Clostridium aceticum
alcoolic la drojdii i specii de Erwinia, Sarcina.
Respiraia bacterian
Reprezint totalitatea proceselor de oxidoreducere, prin
care celula elibereaz energia necesar activitii sale
vitale.
n funcie de sursa de energie n respiraie, bacteriile sunt
de dou feluri:
fotosintetizante utilizeaz ca surs energetic lumina
solar. Sunt bacterii ce se dezvolt n general n
anaerobioz. Pigmenii fotosintetici sunt numii
bacterioclorofila a, b, c, d, fiind alturi de pigmenii
carotenoizi variai care le coloreaz coloniile.
Chimiosintetizante folosesc drept surs de energie
substanele chimice din mediul de cretere (oxidarea unei
substane anorganice NH3, NO2, H2S, Fe++, Fe+++, S,
tiosulfit = bacterii autotrofe, precum i oxidarea unor
substane organice = bacterii heterotrofe). Aici se

Dup necesitile oxigenului molecular n mediu, bacteriile pot fi:

strict aerobe se dezvolt numai n prezena oxigenului
atmosferic, care constituie singurul acceptor de H, utiliznd
numai procesele de respiraie.
strict anaerobe se dezvolt numai n mediu lipsit de oxigen,
folosind pentru obinerea energiei numai procese de
fermentaie, acceptorul final de H fiind de obicei molecula de
nitrat, sulfat sau carbonat.
microaerofile pot folosi procese de respiraie sau
fermentaie, creterea fiind favorizat de o presiune sczut
de oxigen (prin cultivare n atmosfer de 5-20% CO2).
Mecanismul respiraiei bacteriene
Respiraia bacterian are loc n trei etape:
I. Sistemul transportor de electroni care include:
flavoproteinele (proteine ce conin o coenzim derivat din
riboflavin), citocromii (aparin unui grup ce conine fier) i
quinonele (substane neproteice cu funcie de transport a
proteinelor).
Reaciile debuteaz cu oxidarea NAD care va reduce FAD,
rezultnd formarea de NADH cu eliberare suficient energie
pentru formarea ATP.

Enzimele activatoare de oxigen sunt:

citocromoxidaza
citocromii a, b, c
Enzimele activatoare de hidrogen sunt:
dehidrogenarea nicotinamidic (NAD, NADH)
flavinproteina
ubiquinona
enterobactin transferaza
II. Fosforilarea oxidativ. Sub aciunea catalitic a ATP-azei,
ATP este descompus n ADP i radical fosforic, cu eliberarea
de energie prin desfacerea unei legturi macroenergice.
ATP-ul este generat prin diverse mecanisme metabolice, ce
includ respiraia i fermentaia. n acest mecanism
substratul care se oxideaz este un donator de electroni iar
substartul care primete electronii este numit acceptor de
electroni.
III. Respiraia terminal se realizeaz prin placa
turnant a cilcului acizilor tricarboxilici (Krebs), n final
rezultnd CO2 i H2O.

Metabolismul de biosintez (anabolismul)

La bacterii se disting dou tipuri metabolice:
tipul autotrof include bacteriile care i sintetizeaz
toi metaboliii eseniali pornind de la compui
anorganici, contribuind la circuitul substanelor n
natur.
Bacteriile autotrofe sunt de dou feluri: sulfobacterii i
nitrobacterii, ultimele mprindu-se n nitrifiante
(Nitrobacter, Nitrosomonas) i denitrifiante (anaerobe).
tipul heterotrof - cuprinde majoritatea speciilor
bacteriene, necesitnd pentru biosintezele proprii
materie organic i compuii anorganici.
Aceste bacterii pot utiliza lumina ca surs de energie i
componente organice ca surs primar de carbon
(fotoheterotrofe) sau pot obine necesarul de carbon i de
energie din metabolismul unui singur compus organic
(chimioheterotrofe).

Exist mai multe tipuri de bacterii heterotrofe:

bacterii care fixeaz azotul folosesc surse organice de
carbon i azot molecular atmosferic - ex. Azotobacter,
Clostridium.
bacterii care folosesc carbon organic din glucide (n
special), alcooli, acizi grai (rar) i azot din combinaii
anorganice ex. Bacterii saprofite din mediul extern, E. coli
nepatogen din intestin.
bacterii care folosesc carbon i azot organic. Aici se
ncadreaz bacterii saprofite din mediul extern, din
intestin, de pe mucoas.
Tot heterotrofe sunt i bacteriile ce nu pot fi cultivate pe
medii artificiale (ex. Treponema pallidum) sau cele cu
parazitism intracelular strict (rickettsii, chlamydii,
mycoplasme).
Mecanismul de baz a biosintezelor celulei bacteriene implic
existena moleculelor informaionale (memoria
informaional este nscris la nivelul moleculei de ADN
nuclear, astfel nct o anumit secven a codonilor la acest
nivel asigur mesajul pentru sinteza unei proteine) i

 Se tie c sinteza unei enzime celulare este n relaie de

feed-back (conexiune invers) cu substratul asupra cruia
acioneaz. Potrivit modelului Jacob-Monod, de-a lungul
moleculei de ADN nuclear exist sute de codoni grupai
n gene.
Genele sunt de 2 tipuri:
structurale (codific sinteza unei proteine)
funcionale (influeneaz activitatea genelor
structurale). Ele pot fi reglatoare (inhibitorii) sau
operatoare (activatoare).
O gen structural mpreun cu gena operatoare din
vecintatea sa formeaz o unitate numit operon. n
cadrul creterii unui substrat n celula bacterian gena
operatoare din operon activeaz gena structural din
acelai operon. Gena structural determin sinteza enzimei
care catalizeaz descompunerea substratului. Astfel, prin
diminuarea substratului sub aciunea enzimei, se activeaz
gena reglatoare care codific sinteza unei proteine
specifice denumit represor, care inhib gena operatoare
din operon ncetnd astfel sinteza enzimei.
n acest fel sintezele celulei bacteriene se adapteaz la
necesitaile celulei, n raport cu variaiile mediului.

CRETEREA, MULTIPLICAREA I CULTIVAREA BACTERIILOR

Ca orice fiine vii, microorganismele cresc, se multiplic i dup o
perioad mor.
Creterea se caracterizeaz prin adugarea de protoplasm, ca urmare
a predominrii fenomenelor anabolice asupra celor catabolice.
Multiplicarea este consecutiv creterii i const n nmulirea prin
diviziune n generaii succesive a indivizilor dintr-o populaie
bacterian.
Cultivarea se refer la asigurarea in vitro a unor condiii adecvate
necesitilor metabolice ale speciei respective.
Din punct de vedere al posibilitii cultivrii microorganismelor, se
disting culturi bacteriene n mediul lichid i n mediul solid.
Aceste fenomene presupun cteva condiii principale:
- suportul nutritiv este asigurat de prezena donatorilor i
acceptorilor de hidrogen, surse de carbon, surse de azot, substane
minerale (S, P, Mg, Fe, K, Ca) i factori de cretere (aminoacizi,
vitamine B, A, D, acizi grai).
- pH-ul (concentraia ionilor de hidrogen). Majoritatea bacteriilor
patogene necesit pentru nmulire un pH optim, ntre 6-8;
tolerana la diferite valori de pH este n funcie de specie i tulpin.
- temperatura. Flora adaptat organismului uman se dezvolt bine la
temperatura de 37gradeC i poart numele de flor mezofil. Alte
bacterii sunt adaptate la temperaturi sczute i reprezint flora
criofil.
- presiunea de oxigen bacteriile aerobe necesit obligatoriu
existena unei presiuni optime de oxigen, iar eventualul peroxid de
H din mediu este distrus de catalazele i peroxidazele bacteriene
prezente la unele specii.

Bacteriile anaerobe cresc numai n absena oxigenului molecular n

mediu, acesta fiind toxic pentru celule prin formare de superoxid.
Bacteriile facultativ anaerobe suport oxigenul n mediu pentru c
superoxidul format este degradat de superoxid dismutaz.
- presiunea ionic n anumite limite, variaiile de osmolaritate sunt
tolerate de majoritatea speciilor bacteriene, fenomenul fiind reglat n
special de transportul activ de ioni de potasiu. Excepie face flora
halofil (osmofil) din apa mrilor i oceanelor, necesitnd
hiperosmolaritate.
Fenomenului de nmulire a germenilor n mediul lichid i se descriu
urmtoarele faze: faza de lag, faza de cretere exponenial
(logaritmic), faza staionar i faza de declin.
Faza de lag succede imediat nsmnrii germenului n mediul lichid i
corespunde adaptrii acestuia la condiiile oferite de mediu. n
aceast faz asistm la producerea de enzime i metabolii care,
atingnd un prag limit de concentraii, declaneaz multiplicarea
bacterian.
Faza de cretere exponenial (logaritmic), urmeaz fazei de lag i
prezint o rat nalt de multiplicare bacterian n progresie
geometric.

N = numrul de celule n cultur n timpul t

N0 = numrul iniial de celule n cultur
K = constant ce indic rata n care
logaritmul natural al numrului de celule

Aceast faz continu pn cnd asistm la epuizarea

rezervelor nutritive din mediu, la acumularea produilor toxici
rezultai din metabolismul bacterian i la scderea pH-ului.
Faza staionar proporia de celule care mor este aproximativ
egal cu cea a celulelor care se multiplic, aa nct numrul
de celule nu se modific cantitativ. n aceast faz bacteriile
prezint cele mai caracteristice proprieti ale speciei.
Faza de declin proporia de celule care mor depete rata de
multiplicare a celulelor viabile pn cnd multiplicarea
nceteaz complet.
Pentru celula bacterian moartea nseamn pierderea
capacitii de a se divide.
n mediul lichid germenii pot fi cultivai dup mai multe
metode:
culturi n vas nchis
culturi continue (agitate)
culturi sincrone conin bacteriile n aceeai etap de
diviziune.

Pentru aprecierea creterii i multiplicrii bacteriene n mediul

lichid se folosesc urmtoarele metode:
msurarea concentraiei celulare prin:
metoda nefelometric aprecierea turbiditii culturii prin
comparaie cu o scar etalon obinnd concentraia de
celule (volum mediu)
metoda colorimetric sau spectrofotometric aprecierea
se bazeaz pe raportul dintre numrul de celule din
cultur i gradul de absorbie a unor radiaii (luminoase,
ultraviolete, etc.)
numrarea celulelor bacteriene se execut pe preparat
proaspt pe un numr determinat de cmpuri
microscopice.
msurarea densitii celulare prin:
determinarea greutii uscate a germenilor din
sedimentul culturii centrifugate.
determinarea concentraiei de azot n masa microbian
evaluarea depunerii corpilor microbieni prin centrifugare
la o anumit vitez de rotaie n timp determinat.
Unei culturi bacteriene n mediul lichid i se poate aprecia:
turbiditatea (uniform, cu depozit, cu formare de vl)
culoarea (pigmentare)
mirosul (fetid, aromat, etc.)

Cultivarea germenilor n mediul solid prezint avantajul c,

dintr-un individ bacterian nsmnat, rezult o colonie creia
i se pot descrie urmtoarele caractere:
mrimea (colonii punctiforme, mici, medii, mari)
forma sau conturul (margini rotunde, festonate, cu
prelungiri)
suprafaa (neted, rugoas)
transparena sau opacitatea (colonii pigmentate,
nepigmentate, dobndirea unei culori prin virarea
indicatorului din mediu)
producerea de hemoliz pe mediile solide cu snge
(hemoliz complet sau incomplet, hemoliz cu diametrul
mare sau mic n raport cu diametrul coloniei)
mirosul (fetid, aromat)
consistena (colonii apoase, filante, untoase)
aderena (colonii aderente sau uor detaabile de pe
suprafaa mediului)
n raport cu unele caractere, coloniile sunt: n faza S (netede,
lucioase, umede) pentru majoritatea speciilor bacteriene n
cultur proaspt i n faza R (aspre, rugoase, uscate,
suprafa neregulat) pentru culturile mbtrnite sau
tulpinile izolate de la bolnavi tratai cu antibiotice. Excepie
de la aceast regul fac Corynebacterium diphteriae,
Mycobacterium tuberculosis sau Bacillus anthracis, care
prezint colonii R la tulpinile proaspt izolate.

ACIUNEA AGENILOR FIZICI, CHIMICI I BIOLOGICI ASUPRA

BACTERIILOR

Viaa microorganismelor se desfoar sub aciunea

factorilor fizici, chimici i biologici din mediul nconjurtor,
efectul acestora fiind influenat de natura
microorganismelor, compoziia chimic, faza de dezvoltare,
densitatea suspensiei bacteriene, precum i de concentraia
agentului, timpul de expunere, pH, etc.
Pentru clarificarea aciunii acestor factori e necesar
definirea unor noiuni:
agent bacteriostatic agent care inhib multiplicarea
bacterian, fenomen reversibil dup ndeprtarea acestuia.
agent bactericid are proprietatea de a produce moartea
celulei bacteriene, fenomen ireversibil, prin lezarea
integritii sau funciilor bacteriene.
sterilizarea modalitatea prin care toate formele de via
microbian, vegetativ i sporulat, sunt omorte
dezinfecia inactivarea microorganisnelor n forma
vegetativ de pe suprafee
dezinfectant substan folosit n scopul inactivrii
microorganismelor de pe unele suprafee dar care,
posednd toxicitate marcat, nu poate fi aplicat n esuturile
umane.
septic prezena microorganismelor patogene n esuturi

Aciunea agenilor fizici asupra bacteriilor

Cldura are n general (cu excepia bacteriilor termofile) o
aciune bactericid prin denaturarea macromoleculelor
proteice care se coaguleaz, prezena apei mrind labilitatea
legturilor chimice.
Metodele cele mai practice de sterilizare sunt cele care
utilizeaz cldura, sub form uscat sau umed, existnd o
corelaie temperatur timp n ceea ce privete efectul
sterilizant.
Uscciunea (desicarea) n general, bacteriile sunt
rezistente la uscciune n form sporulat i, pentru unele
specii, chiar n form vegetativ (b. Koch).
Presiunea mecanic majoritatea bacteriilor rezist la
presiuni foarte mari (3000 atmosfere formele vegetative,
12000 20000 atmosfere formele sporulate). Asistm n final
la coagularea proteinelor plasmatice.
Presiunea osmotic este cunoscut faptul c bariera
osmotic a celulei este membrana citoplasmatic. n mediul
hiperton are loc ieirea apei din celul n mediu (plasmoliza),
retractarea membranei citoplasmatice i a citoplasmei, n
timp ce peretele celular i pstreaz rigiditatea. n mediul
hipoton apa ptrunde n celula bacterian (plasmoptiz)
ajungndu-se n final la liz celular (mai ales dac n
prealabil peretele celular a fost ndeprtat prin lizozim
protoplati, sau prin antibiotice inhibitorii ale sintezei
acestuia sferoplati. Variaiile brute de la o presiune
osmotic nalt la una mai joas, sunt mortale mai ales

Electricitatea are efecte minore ca atare asupra bacteriilor,

n schimb poate influena compoziia chimic a mediului cu
efecte secundare bactericide.
Ultrasunetele sunt vibraii cu frecven mai mare dect cea
a undelor sonore (peste 16000 hertzi), cu efect puternic
bactericid relativ rapid. Ultrasonarea unei culturi bacteriene
reprezint o metod eficient de dezintegrare a celulelor
bacteriene n scopul analizei chimice a acestora.
Filtrarea proces de reinere a microorganismelor din
lichidele termolabile, permind trecerea lichidului astfel
sterilizat. n acest scop se folosesc filtre Seitz, Chamberland,
Berkefeld i filtre de metilen celuloz (Millipore, Sartorius).
Radiaiile sunt definite ca propagarea sau transmiterea de
energie n spaiu; propagarea se face prin micarea undelor,
sau cu ajutorul particulelor atomice sau subatomice animate
de aciunea cmpurilor electrice sau prin emiterea lor prin
substanele reactive.
Radiaiile pot fi ionizate (X, Y, catodice) i ultraviolete. Se
folosesc pentru sterilizarea materialului plastic de laborator,
a medicamentelor sau produselor biologice termolabile, n
tratamentul afeciunilor neoplazice (mpiedic diviziunea
celular).
Radiaiile ultraviolete au activitate bactericid maxim la
260 nm, fiind absorbite de acizii nucleici, cu precdere ADN,
gsindu-i utilizarea ca ageni sterilizani (ncperi, boxe,
sli de operaii, mese de laborator etc.)

Aciunea agenilor chimici asupra bacteriilor

Dezinfecia este metoda de aplicare a unui agent chimic prin
care se obine distrugerea formelor vegetative.

Un dezinfectant este un agent chimic care omoar

micoorganismele patogene i nepatogene.

Un antiseptic este un agent chimic care, aplicat pe

esuturi vii, inhib sau omoar microorganismele.

Un agent chimic poate fi bacteriostatic (inhib

multiplicarea bacterian care se reia dup ndeprtarea
aciunii agentului respectiv, fenomen reversibil) sau bactericid
(determin moartea celulei bacteriene, fenomen ireversibil).
Un dezinfectant bun trebuie s ndeplineasc urmtoarele
condiii:
s aib aciune bactericid n concentraii mici
spectru microbian larg
s aib stabilitate n timp, sub form activ (remanent)
s fie solubil i stabil n ap
s fie relativ netoxic pentru organsimul uman
s fie ct mai penetrant i s nu se combine cu materiile
organice de pe tegumente care s-l inactiveze
s nu fie coroziv
s nu coloreze
s nu degaje miros neplcut
s aib un cost relativ sczut

Principalii ageni chimici cu aciune asupra bacteriilor sunt:

Fenolul i derivaii fenolici - se utilizeaz pentru dezinfecia
obiectelor, meselor, podelelor etc.
Acizii i alcalii
Alcooli alcoolul metilic este mai puternic bactericid dect cel
etilic, dar se utilizeaz mai puin datorit toxicitii mai nalte
pentru organsimul uman.
Halogenii i compuii halogenai iodul i clorul. Iodul se
folosete sub form de tinctur de iod pentru dezinfecia
tegumentelor. Compuii cu clor sunt utilizai sub form
gazoas, sub form de hipoclorii de calciu sau sodiu (pentru
dezinfecia, minilor n soluie 1%, gleilor de gunoi
concentraie de 5-20%, material moale sol. 20%) i sub
form de cloramin (pentru dezinfecia suprafeelor,
minilor).
Srurile.
Ionii metalelor grele se folosesc fie metale ca atare (argint,
cupru, cu puternic aciune oligodinamic) fie sub forma
compuilor cu metale grele, precum:
compui cu mercur (clorur mercuric sau sublimatul
corosiv, mertiolatul, mercurocromul, metafenul). Se
utilizeaz pentru dezinfecia suprafeelor,
instrumentarului, materialului moale, etc.
compui cu argint nitratul de argint, utilizat pentru
profilaxia oftalmiei gonococice a nou-nscutului.
compui cu cupru au utilizare restrns, mai ales ca

 Peroxidul de hidrogen (H2O2) soluie 3% este un bun

antiseptic, dar cu aciune scurt.
Permanganatul de potasiu n diluie 1% este folosit n
afeciuni urologice, curarea rnilor, etc.
Formolul se gsete n soluie apoas de 37%, iar
efectul bactericid e cauzat de alchilarea proteinei
microbiene. Se mai utilizeaz ca fixator i conservant de
esuturi pentru studiile microscopice, pentru
mblsmare, etc.
Coloranii probabil interfer cu sinteza acizilor nucleici.
Coloranii bazici sunt mult mai eficieni, datorit afinitii
fa de gruparea acid a acidului fosforic a
nucleoproteinelor. Din aceast categorie amintim violetul
de geniana, cristalul violet, verdele briliant, verdele
malachit, tripaflavina, etc.
Detergenii sunt clasificai n 2 grupri:
detergeni cationici cei mai importani sunt grupul
compuilor de amoniu cuaternar, fiind la fel de activi
fa de bacteriile gram pozitive i gram negative. Se
folosesc n industria alimentar, a laptelui,
restaurante. Zefiranul se folosete n concentraie
de 1% - 1 n soluie apoas sau ca tinctur
alcoolic.
detergenii anionici efect pe bacteriile gram
pozitive. n aceast categorie intr spunurile
(sruri de sodiu ale acizilor carboxilici cu lanuri
lungi), sruri biliare i detergeni sintetici.

 Antagonitii metabolici sunt ageni chimici care

interfer n procesul metabolic la nivelul reaciei
normale ntre o enzim specific i substratul respectiv.
Antagonitii metalici pentru bacterii pot fi antagoniti ai
proceselor energetice (oxid de carbon, cianuri,
dinitrofenol) i ai biosintezelor p-fluorofenil alanina, care
nlocuiete competitiv fenilalanina din lanul proteic
normal, ceea ce duce la apariia unei proteine
nefuncionale.
Testarea activitii bactericide a dezinfectantelor
Indicele fenolic. Pentru stabilirea valorii bactericide a unui
dezinfectant prin metoda cantitativ, se compar
activitatea bactericid a unui compus chimic cu aceea a
fenolului fa de un numr egal de bacterii standard
(Salmonella typhi i Staphylococcus aureus) obinnduse coeficientul sau indicele fenolic- valoare numeric
relativ care arat dac compusul este mai activ sau mai
slab, n comparaie cu fenolul. Valoarea semnificativ a
indicelui fenolic este mai mare de 3,00 (peste aceast
valoare se consider c dezinfectantul prezint caliti
optime pentru uzul curent), iar o valoare peste 10,00
atest o nalt activitate bactericid.
Concentraia bactericid echivalent. Principiul este similar
cu cel descris mai sus, dar dezinfectantul etalon este
hipocloritul de sodiu n concentraii crescnde, iar timpul
de incubare dezinfectant/suspensie germen este foarte
mic.

Aciunea agenilor biologici asupra bacteriilor

Bacteriofagul

Bacteriofagii au fost descoperii de Twort (1915) n culturi

de stafilococ i d'Herelle (1917) n culturi de bacili Shiga
izolate de la bolnavi cu dizenterie, identificai drept virusuri
ale bacteriilor.

Bacteriofagii sunt denumii dup bacteria gazd de la care

au fost izolai sau pe care sunt meninui. Spectrul de
germeni, specii i tipuri bacteriene parazitate de un anumit
bacteriofag este foarte divers; n general restrns la un gen
sau specie, cuprinde uneori genuri nrudite, alteori doar unele
tulpini ale speciei.
O particul de bacteriofag cu morfologie tipic este format din:
cap conine un nveli proteic (capsida) format din
subuniti identice de acid nucleic(ADN)
coada i se descriu 3 pri: miezul lacunar, teaca
contractil i placa bazal terminal ce are ataate fibrele
cozii. Prin intermediul acesteia bacteriofagul se ataeaz
de suprafaa celulei bacteriene.
Coada bacteriofagului se poate afla n dou stadii funcionale:
stadiul relaxat (teaca contractil acoper n ntregime miezul
lacunar, iar fibrele cozii nu sunt vizibile) i stadiul contractat
(teaca contractil scurtat ceea ce permite ca miezul lacunar
s fie vizibil, iar fibrele cozii sunt evidente).
Proteinele din diferitele elemente structurale ale bacteriofagului
sunt distincte. Exist i forme atipice de bacteriofagi:
bacteriofagi fr coad sau filamentoi.

ntre bacteriofag i bacterie se pot stabili dou categorii de relaii:

a. relatia de tip litic ptrunderea n celula bacterian a
bacteriofagului duce la moartea acesteia i la eliberarea din
celul a particulelor de bacteriofagi neoformate.
n acest caz infecia fagic parcurge mai multe etape:
adsorbia are loc la nivelul receptorilor de pe suprafaa celulei
bacteriene lizosensibile prin ataarea fibrelor cozii
bacteriofagului.
penetrarea acidului nucleic fagic contactul cu receptorii
declaneaz contractarea tecii, tija central strpunge peretele,
acidul nucleic fagic este injectat n celul i proteina de nveli
rmne n exteriorul acesteia, cu excepia bacteriofagilor
filamentoi fd care ptrund n ntregime n celula bacterian.
replicarea intracelular dup cteva minute de la ptrunderea
acidului nucleic fagic, ADN-ul comand prin genele sale sinteza
n celula bacterian de proteine timpurii sau precoce (early
proteins) din care fac parte enzimele necesare sintezei de ADN
fagic, cea mai important fiind ADN-polimeraza (fagdependent), n paralel avnd loc i sistarea sintezelor celulare
codificate de ADN propriu. Sub aciunea enzimelor precoce
apar copiile de ADN fagic care determin formarea de
neoproteine fagice tardive (late proteins) care prin
asamblarea n jurul moleculelor de ADN fagic dau natere la fagii
neoformai. n cadrul bacteriofagilor ARN, acidul nucleic respect
comanda sintezelor celulare ale bacteriei; n acest caz asistm la
o faz intermediar i anume la formarea unui ADN dublu
catenar ce rezult din lanul de ARN fagic ptruns n celul (lan
plus) ce se leag complementar cu un lan minus rezultat
din aciunea ARN-sintetazei de tip fagic.

eliberarea particulelor fagice neoformate acumularea de

particule fagice neoformate duce la ruperea celulei bacteriene i
la eliberarea acestora care, ntlnind celule bacteriene
lizosensibile, reiau ciclul de tip litic. Excepie fac bacteriofagii
filamentoi fd care trec prin peretele celular fr producere de
liz.
b. relaia de tip simbiotic - dup ptrunderea n celula
bacterian, asistm la integrarea acidului nucleic fagic n ADN-ul
celular, replicndu-se odat cu acesta. Acest fenomen poart
numele de lizogenie, bacteriofagii respectivi profagi sau
bacteriofagi temperai, iar bacteriile ce conin fagi temperai,
bacterii lizogene, ele fiind rezistente la infecia cu un alt
bacteriofag homolog. Relaia de tip simbiotic dintre bacterie i
bacteriofag este posibil prin eliberarea unei proteine represor
ce inhib biosinteza fagic.
Exist posibilitatea ca un bacteriofag temperat dintr-o celul
lizogen s treac n form litic, prin desprinderea acidului su
nucleic din cromozomul bacterian i iniierea sintezei de particule
fagice neoformate fenomen ce poart numele de inducie,
produs prin inactivarea sau distrugerea substanei represor.
Prin lizogenizare pot apare noi proprieti ale celulei bacteriene;
astfel unele tulpini de C. dyphteriae devin toxigene; la fel, unii
streptococi hemolitici pot sintetiza toxigen eritrogen numai
dac bacteria este lizogen. Aceast modificare a unor proprieti
ale celulei bacteriene n prezena bacteriofagului temperat,
poart numele de conversie care se explic prin exprimarea
unor gene celulare preexistente represate pn atunci.

Bacteriocinele
Reprezint substane proteice produse de anumite specii
bacteriene i au efect letal asupra unor tulpini de bacterii
sensibile din aceeai specie sau specii nrudite, pe suprafaa
crora se fixeaz prin intermediul unor receptori specifici.
Bacteriocinele se difereniaz de antibiotice prin spectrul lor, n
general, ngust de activitate i modul de aciune la nivel celular.
Ele se fixeaz pe receptorii celulari specifici de la suprafaa
bacteriei i strbat un numr de bariere (membrana extern a
peretelui celular i membrana citoplasmatic) pentru a atinge
intele celulare, determinnd alterri biochimice care duc n
final la liza celulei bacteriene. Alterrile biochimice celulare sunt
variate:
la nivelul membranei interne alterarea fosfolipidelor i
proteinelor, interferarea cu metabolismul energetic, liza
membranei.
intracitoplasmatic sistarea glicolizei, blocarea sintezei ATP,
inhibarea sintezei lipidelor, polizaharidelor, proteinelor la
nivel ribozomal.
la nivelul acizilor nucleici: inhibarea sintezei ARN i ADN.
Testarea spectrului de activitate al unei bacteriocine
(bacteriocinotipie) poate fi utilizat ca indicator, gsindu-i
aplicabilitatea n studiile epidemiologice, alturi de lizo i serotipie.