Sunteți pe pagina 1din 58

Clasa 1

OXIDOREDUCTAZE EC: 1

OXIDOREDUCTAZE - Definiie i caracteristici generale


Catalizeaz procesele celulare de oxidoreducere, procese ce se desfoar
prin transport de hidrogen, electroni i oxigen de la un substrat donor la
acceptor.
Cofactorii oxidoreductazelor se pot diferenia n - transportori de hidrogen
- transportori de electroni
- transportori de oxigen.
Dehidrogenaze - catalizeaz (de obicei reversibil) transferul de hidrogen de la un
substrat donor de hidrogen (notat DH2) la acceptorul de hidrogen (notat A)

DH2 + A

D + AH2

Denumirea sistematic:
donor de echivaleni reductori : acceptor de echivaleni reductori oxidoreductaze.

Oxidaze sau oxigenaze = catalizeaz scoaterea hidrogenului de pe un substrat (DH2)


utiliznd oxigenul ca acceptor.
Produi de reacie: apa (H2O) sau peroxidul de hidrogen (H2O2).
DH2
(Red)

O2

DH2

Oxidaze
(Oxigenaze)
D
(Ox)

H2O

O2
Oxidaze
(Oxigenaze)

H2 O2

Oxigenazele - dou grupe:


A. Dioxigenaze ncorporeaz ambii atomi de oxigen n molecula substratului
(notat D):
D + O2

DO2

B. Monooxigenaze sau hidroxilaze catalizeaz ncorporarea unui singur atom


de oxigen n molecula de substrat (notat, n acest caz, DH), iar cellalt este redus la ap:
DH + O2 + AH2

D-OH + A + H2O

unde DH substrat donor de hidrogen; AH2 cosubstrat donor de hidrogen; D-OH este
substrat hidroxilat
3

Transportori de hidrogen
COENZIME NICOTINICE
(COENZIME PIRIDINICE)

COENZIME TRANSPORTOARE DE HIDROGEN


COENZIME NICOTINICE (COENZIME PIRIDINICE)
Structur chimic: cele dou forme biologic active ale amidei nicotinice (vitamina B3):
Nicotinamid adenindinucleotid - NAD+ (n forma oxidat)
Nicotinamid adenindinucleotid fosfat -NADP+ (forma oxidat).
NH2

O
C
NH2

+
N

Nicotinamid

N
O

1'

5'
CH2

2'

3'

OH

OH 4'

P
OH

P
OH

5'
CH2

N
Adenin

1'
3'

O
4'
2'

NAD+
OH

OH

Compuse din dou


nucleotide legate ntre ele
prin intermediul gruprilor
fosfat, printr-o legtur
fosfoanhidridic

NADP+ posed o
grupare fosforil
n plus, legat
de C2 al restului
de riboz legat
de adenin

esterificat cu
H3PO4
NADP+

OPO3H2

Mecanism de aciune
Nucleotidele NAD+ i NADP+ funcioneaz ca acceptori reversibili ai
echivalenilor reductori: protoni i electroni, i deci ca transportori de
hidrogen.
Reacia general :

NADH + H+

NAD+ + 2H (2e- + 2H+)

NADP+ + 2H (2e- + 2H+)

O
C NH2

+
N
R
NAD+ sau NADP+
(forma oxidat)

2[H]

NADPH + H+

H O

C NH2

2[H]

H+

N
R
NADH + H+ sau NADPH + H+
(forma redus)

H
4
5
6

H
NH2
H

3
+
N1

D
H

Substrat oxidat (D)


Substrat redus
(DH2)

O
C

NH2

1
N

R
Formula general a
coenzimelor nicotinice
oxidate (NAD+ sau NADP+)

H+

Formula general a
coenzimelor nicotinice
reduse (NADH+ sau NADPH+)

Unul din electroni este utilizat pentru neutralizarea sarcinii atomului de azot
cuaternar n poziia 1 iar un electron i un proton dau natere atomului de
hidrogen care se fixeaz n poziia 4, formdu-se NADH i NADPH.
Cel de-al doilea proton (H+) eliberat de substrat rmne liber n mediul de reacie.

Caracteristici funcionale
NAD+ i NADP+ au funcie de coenzime, adic sunt slab legate de suportul

proteic apoenzimatic
au potenial de oxidoreducere foarte sczut:
Eo= - 0,32 V

reaciile catalizate de enzimele NAD+ i NADP+ dependente sunt, n general


reversibile
formele reduse NADH + H+ intervin n prima etap n transportul de hidrogen

din cadrul lanului respirator mitocondrial (reacioneaz direct cu substratul).


formele reduse NADH + H+ i NADPH + H+ reprezint o rezerv de echivaleni
reductori necesari pentru diverse reacii de biosintez

formele reduse NADPH + H+ nu intervin n lanul respirator mitocondrial.


formele reduse NADPH + H+ intervin n reaciile de hidroxilare microzomal.
8

Exemple de enzime NAD+ dependente


Alcool dehidrogenaza denumire convenional
Alcool : NAD + oxidoreductaza, EC: 1.1.1.1

CH3-CH2-OH +

NAD+

alcool dehidrogenaza

Alcool etilic

O
H3C

NADH + H+

Acetaldehid

NAD+

NADH + H+

+ H 2O
aldehid dehidrogenaza
EC: 1.2.1.3

Acid acetic

Enzime NAD+ dependente


CH3

NADH +H+

CH3

NAD+
HO

C O
COOH

Acid piruvic

COOH
HO

lactat-dehidrogenaza
(EC:1.1.1.27)

COOH

Acid L-malic

COOH

Lactat : NAD+
oxidoreductaza
(enzim Zn2+ dependent)

Acid L-lactic

NADH + H+
NAD+

CH
CH3

CH

COOH
C O

malat-dehidrogenaza
(EC:1.1.1.37)

Malat: NAD+ oxidoreductaza

CH2
COOH

Acid oxalilacetic

10

Enzime NAD+ dependente


-Glicerofosfat : NAD+ oxidoreductaza, EC 1.1.1.95

CH2
HC
CH2

OH

-glicerofosfat-DH

OH

C
OH

OH
Acid -glicerofosforic

CH2

NAD +

OH

CH2

O
O

OH

OH
NADH + H +

Dihidroxiacetonfosfat

11

Enzime NAD+ dependente


H2O

COOH

NAD(P)H+H+

NAD(P)+

H2 N

CH

COOH
C O

glutamat-DH (EC: 1.4.1.3)

CH2
CH2

CH2

+ NH3

CH2

COOH
Acid L-glutamic

COOH
Acid -cetoglutaric

Glutamat: NAD(P)+ oxidoreductaza

12

Enzime NADP+ dependente


H2 C O PO3 H2
O

Glucozo-6-fosfat-dehidrogenaza
(EC: 1.1.1.49)

H2 C O PO3 H2
O

OH

OH
OH

OH
OH

-D-Glucozo-6-fosfat

Gly

Cys

Glu

OH

NADP+
NADPH + H+

Acid 6-fosfo-gluconic

NADPH+H+

2 Gly
glutation reductaza
(EC:1.6.4.2)

S
Cys

OH

NADP+

Gly

Glu

Glutation oxidat
(G-S-S-G)

D-glucozo-6-fosfatNADP+ oxidoreductaza

Gly- glicin (glicocol)


Cys-SH- cistein
Glu- acid glutamic

Cys

Glu

SH

NADPH2 : glutation
oxidoreductaza

Glutation redus
(G-SH)

13

Enzime NADP+ dependente


CH3
HOOC CH2 C

O
CH2 C ~ SCoA

OH -Hidroxi--metilglutaril~SCoA

(HMG~SCoA)
2NADPH + 2H+
HMG~SCoA reductaza (EC: 1.1.1.34)

HS-CoA

2NADP+

CH3
HOOC CH2 C
OH

CH2 CH2

OH

Acid mevalonic

Enzima care intervine n biosinteza colesterolului


14

Enzime NADP+ dependente


H2N

H2N
C

HN

HN
CH2

H2N

CH

CH2

NADP+

NADPH+H+
2 O2

CH2
CH2

NH2

nitric oxid sintaza


(EC: 1.14.13.39)

COOH
L-Arginin

Reacia este complex i


are mai muli cofactori:

CH2
CH2
H2N

CH

NO

2H2O

Monoxid
de azot

COOH
L-Citrulin

terahidrobiopterin (BH4)
flavin mononucleotid (FMN)
flavin adenindinucleotid (FAD)
calmodulin (CaM)

FACTOR DE
RELAXARE
ENDOTELIAL

15

Flavin-enzime.
Cofactori transportori de hidrogen
cu structur flavinic
FAD
FMN

16

Cofactori cu structur flavinic- transportori de hidrogen.


Flavin-enzime
Flavin mononucleotid FMN
Flavin adenindinucleotid FAD
Sunt grupri prostetice pentru un numr relativ mare de
flavoproteine i flavin-enzime (strns legate de partea proteic a
enzimei)
Alte denumiri: fermentul galben al lui Warburg, ovoflavin,
lactoflavin
sunt forme biologic active ale vitaminei B2 (riboflavina).
FMN are structur mononucleotidic,
FAD are o structur dinucleotidic.
17

Structura flavin mononucleotidului (FMN) = izoaloxazin-ribitil-fosfat


O
H3C

6
7

H3C

10

3 NH

Nucleul
izoaloxazin

1'CH2
2'CH

OH

3'CH

OH

6,7 dimetil, 9 ribitil


izoaloxazin = RIBOFLAVIN
(vitamina B2)

Ribitil

4'CH OH
OH
5'CH2

P OH
O

Riboflavin - fosfat
18

Structura flavin adenindinucleotidului (FAD)


O
H3C

5
6
7

H3C

N
10

3 NH
2

Nucleul
izoaloxazin

Adenin

CH2

NH 2

CH OH
CH

OH

CH OH OH
CH2

P
O

OH
O

N
N

CH2
O

OH

OH

Izoaloxazin-ribitil- fosfat - fosfat - riboz - Adenin


19

O
H3C

5
6
7

H3C

10

3 NH
2

Nucleul
izoaloxazin

Adenin

1'CH2
2'CH

OH

3'CH

OH

Ribitil

4'CH OH
OH
5'CH2 O

NH2

P
O

N
N

OH
O

P
O

CH2

N
N

OH

OH

Izoaloxazin-ribitil- fosfat - fosfat - riboz - Adenin

20

Mecanism de aciune
H

O
10

H3C

N
9

H3C

2[H]

H3C

4 NH

N
NH

10
1

N
1

2[H]

H3C

N
R

H+ + e-

H+ + e-

FAD sau FMN


(forma oxidat)

+N .

FADH2 sau FMNH2


(forma redus)

H3C drept transportori


FMN i FAD pot funciona
4 NHde hidrogen datorit
10
capacitii lor de a lega reversibil hidrogenul la atomii N1 i N10 din nucleul
H3Cizoaloxazinic.
N
N
O
n forma oxidat nucleul izoaloxazinic este plan iar n forma redus are loc
R
o pliere a sa n jurul unei axe imaginare N1-N10.

FADH sau FMN


(semichinon)

21

Caracteristici structurale
Legtura dintre ribitil i dimetil-izoaloxazin nu este N-heterozidic
Legtura cu partea proteic a enzimelor este puternic (grupare prostetic)
O grupare funcional de alcool primar din ribitil este esterificat cu H3PO4,
(FMN reprezint de fapt esterul fosforic al vitaminei B2)
sunt metal-flavoproteine, cu ioni metalici n structur:
succinat-dehidrogenaza are fier neheminic,
xantinoxidaza conine fier i molibden,
butiril ~ SCoA dehidrogenaza are cupru
Potenialul de oxidoreducere a enzimelor flavinice are valoare negativ:
FAD - Eo= - 0,05V
FMN - Eo= - 0,10V
FAD i FMN particip la lanul respirator mitocondrial, prelund hidrogenii
de la coenzimele nicotinice pe care i cedeaz coenzimelor Q (ubichinonelor)
22

CH3

H3C

6
5

CH2 C

9
10 N

OH OH OH H

4
+
3N
H

+
H

N1
2

Partea proteic
(apoenzima)

O
CH 2

NH3

H3N

CH2

CH2
O

O
C

CH

CH2

CH2

CH2

CH2
CH2

CH2

H
N

N
H

N
H

H
N

H
N
CH

CH

N
H

Legtura cu partea proteic a enzimelor este puternic


(grupare prostetic)

23

Exemple de enzime dependende de FAD


Succinat
dehidrogenaza
(SDH)
EC:1.3.99.1

COOH
CH2

CH2

Enz

HOOC

FAD

COOH

C
C

H
+ Enz

COOH

Acid fumaric

Acid succinic

CH3 CH2 CH2

Succinat:FAD
oxidoreductaza
(4 atomi de Fe
FADH2
neheminic, 4 atomi
de S legai de
protein)

O
C ~SCoA

butiril~SCoA
FAD
butiril~SCoA - DH
(EC: 1.3.99.2)

CH3

FADH2
O
H
C C ~SCoA

C
H
crotonil ~SCoA

24

Glutation redus
NADP

H2O 2

(2GSH)

Glutation peroxidaza

Glutation reductaza

Seleniu dependent

Riboflavin (FAD)

H2O
NADPH + H+

Glutation oxidat
(GSSG)

Riboflavina n ciclul redox al


glutationului

25

Enzime dependende de FAD


FAD

O
N

HN

N
H
Hipoxantina
N

FADH2

Are FAD, molibden i Fe-S


proteine n structur

Xantin oxidaza

HN

Molibden

N
N
H
H
Xantina

O2
H2O2

FAD
FADH2

O
HN
O

O2
Xantin oxidaza
(EC: 1.1.3.22)
H2O2

H
N
O

N
N
H
H
Acid uric

26

Oxidarea aminoacizilor : flavin-enzimele n reacia catalizat de


L/D aminoacid oxidaze FMN/FAD dependente (EC 1.4.32)

CH COOH + Enz

FMN

COOH +

HOH

FMNH2 + O2
O2
H 2 O2

Reactia global: R

FMNH2

C COOH +

NH3

O
Cetoacid

NH
Iminoacid

Enz

+ Enz

NH
Iminoacid

NH2
Aminoacid
R

C COOH

Enz
Catalaza

CH COOH + 1/2 O2
NH2
Aminoacid

FMN +

H 2 O2

H2O + 1/2 O2
R

COOH + NH3

O
Cetoacid

27

Localizarea flavoproteinelor cu FMN i FAD n complexele enzimatice din lanul


respirator mitocondrial cuplat cu fosforilarea oxidativ (sinteza ATP).
ATP

NADH+H+

ATP

Complexul V

Complexul I
FMN
Fe-Sulf
proteine

ATP

CoQ

1/
2

NAD+
Citocromi b
Succinat

FAD
Fe-Sulf
proteine

CoQH2

c1

Complexul III

O2

a-a3
H2O
Complexul IV

Fumarat

Complexul II

28

UBICHINONELE (COENZIMELE Q)
COFACTORI ENZIMATICI
TRANSPORTORI DE HIDROGEN

29

Ubichinonele sau coenzimele Q = grup de compui liposolubili omologi,


cu structur benzochinonic, specifici mitocondriei
Denumire:
ubi = rspndire ubicuitar: la plante, la microorganisme, la animale
chinone - au structur chinonic
prezent n toate celulele i esuturile
Structur: nucleu de benzochinon substituit cu: 2 gr. metoxi,
1 gr. metil i
1 lan poliizoprenoidic
CH3

O
H3 C O

CH2

H3 C O 5

3 CH
3

CH

CH2 H
n

n = 6 pentru ubichinonele de la levuri


n = 8 sau 9 pentru ubichinonele de la microorganisme
n = 10 pentru ubichinonele de la animale si om

2-decaprenil--5,6-dimetoxi-3-metil-1,4-bezochinona

30

Particulariti structurale ale moleculelor de


ubichinone
denumirea de coenzim este improprie deoarece ea nu intr n
componena unei enzime;
lanul poliizoprenic din structura coenzimei Q10 i permite
integrarea n zonele bogate n lipide din celul, n special n

structurile de membran;
sunt solubilizate n complexe fosfolipidice => rol de transportor de
hidrogen mobil, fcnd naveta ntre transportorii fixai la nivel
mitocondrial.

31

Mecanism de aciune
accept i cedeaz reversibil 2 atomi de hidrogen:
O

OH
R

CH3O

CH3

CH3O

+ 2H

CH3O

CH3O

CH3

- 2H

O
Ubichinona (Q)
(forma oxidat)

Potenial de oxidoreducere

OH
Ubichinol (QH2)
(forma redus)

Eo= -0,01V

=> deci n celul ele oxideaz enzimele cu potenial redox mai sczut, cum
sunt enzimele flavinice
n lanul respirator mitocondrial se plaseaz ntre sistemele enzimatice cu
potenial redox negativ flavinele, i cele cu potenial pozitiv -citocromii
32

CH3

O
CH3O

CH2

CH

CH2

Mecanism de aciune

H
10

CH3

CH3O
O

Ubichinona (Q)

+ e-

- e-

O-

CH3

CH3O

CH2

CH

CH2

H
10

CH3

CH3O

Anion semichinonic (Q.-)

O
+ 2H+
+ e-

Reducerea
ubichinonei
la
ubichinol poate avea direct cu
doi atomi de hidrogen, n trepte,
prin trei nivele de oxidare ce
includ i un compus intermediar
semichinonic, care este un
radical liber (Q)

- 2H+
- e-

CH3

OH
CH3O

CH2

CH

CH2

H
10

CH3

CH3O
OH

Ubichinol (QH2)
33

Ubichinona- component a lanului respirator mitocondrial

SH 2

Complexul I
NAD+

NADH
+H +
Fumarat

FMNH 2
FMN

FADH2

FAD

Complexul IV

Complexul III

CoQH 2
Succinat

1/ O
2 2

CoQ
Fe2+

Fe3+

Fe2+

Cyto b

Cyto c

Cyto a+a3

Fe3+

Fe2+

Fe3+

H2 O

Complexul II
34

Schema general de biosintez a coenzimei Q10


2 Acetil-CoA

Fenilalanina

Acetoacetil-CoA
Tirozina
HMG-CoA
HMG-CoA reductaza
4-OH-Fenilpiruvat

Mevalonat
Mevalonat - P

4-OH-Fenillactat

Mevalonat - PP
Izopentenil - PP

4-OH-Cinamat
4-OH-Benzoat

transPreniltransferaza
+ Decaprenoil - PP

Geranil - PP

Geranil-geranil -PP

Farnesil - PP
cis-Preniltransferaza
Scualen

Decaprenil4-OH-benzoat transferaza
Decaprenoil-4-OH-benzoat
Coenzima Q10

Poliprenil - PP
(IZOPRENE)

Colesterol
Lan lateral pentru
vitamina E,
vitamina A,
vitamina K.

Izoprenilarea
proteinelor
Dolicolpirofosfat

35

ALI COFACTORI TRANSPORTORI DE


HIDROGEN

ACIDUL LIPOIC

36

Acidul lipoic (acid tioctic) STRUCTUR CHIMIC


Acidul 6,8 ditio-octanoic
8

H2C

H2
C
7

5
6

CH2

CH

CH2
CH2
4

S
Acid -lipoic

H2
C

H2C

COOH

(CH2)4

CH

C
CH2

OH

S
Acid lipoic
37

Acidul lipoic - Particulariti structurale


compus biologic activ,
vitamin-like, sintetizat n
organismele vegetale i
animale, inclusiv n
organismul uman

potenialul de
oxidoreducere Eo = -0,29 V

H2C

CH

(CH2)4
5

SH

COOH

S
Acid -lipoic - forma oxidat
-2H

H2C

funcioneaz, reversibil,
ca acceptor-donor de
hidrogen

H2
C

H2
C
7

CH
SH

+2H
1

(CH2)4
5

COOH

Acid -lipoic - forma redus


(acid dihidro-lipoic)
38

Acidul lipoic - Particulariti structurale i funcionale


ndeplinete rolul de cofactor, dup legarea sa de proteina
apoenzimatic; aceast legtur se stabilete ntre gruparea
- COOH a acidului lipoic i gruparea -amino a lizinei din
catena polipeptidic
O

Rest de lizin din proteina


enzimatic

HN

C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH


H
C
O

Acid lipoic oxidat legat de partea proteica a enzimei (lipoil--aminolizina)


39

ACIDUL LIPOIC particulariti


funcionale

Rest de lizin din proteina


enzimatic

H2C

H2
C

H2
C

CH

C
H2

H2
C

HN

C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH


C 1 H
C
H2
O

S
S
Acid lipoic legat de proteina enzimatic
(forma oxidat)
O
R

Prin ruperea punii


disulfurice, acidul lipoic are
capacitatea de a transporta
i o grupare acil.

OH

Acid gras

H2C

H2
C

CH
S

SH

Acil

transportul concomitent
de hidrogen i de
grupri acil

H2C

H2
C

SH

HN

C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH


H
C
O
HSCoA
Acil~SCoA
O

CH
SH

HN

C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH


H
C
O

Acid lipoic legat de proteina enzimatic


(forma redus)

40

Acidul lipoic - cofactor pentru complexe enzimatice


dehidrogenazice
Acidul -lipoic, legat n forma de lipoamid, funcioneaz drept cofactor
(grupare prostetic) n structura unor complexe enzimatice mitocondriale,
care catalizeaz reacii de decarboxilare oxidativ a cetoacizilor
potenial de oxidoreducere Eo = -0,29 V, ceea ce i d posibilitatea de
a funciona mpreun cu molecula de FAD
CH3
C

COOH

Acid piruvic

TPP, acid lipoic, HS-CoA,


FAD, NAD+

COOH
C O
CH2
CH2

piruvat-dehidrogenaza

H3C

C ~SCoA

+ CO2 + NADH + H+

Acetil coenzima A
COOH

a-cetoglutarat-dehidrogenaza

CH2

TPP, acid lipoic, HS-CoA,


FAD, NAD+

CH2
O
C ~SCoA

COOH
Acid -cetoglutaric

+ CO2 + NADH + H+

Succinil-coenzima A
41

ACIDUL LIPOIC
Utilizare terapeutic
Produse farmaceutice

Este un antioxidant natural, cu reactivitate nalt fa de


radicalii liberi
Este bine absorbit la nivel gastro-intestinal
Este neuroprotector
Interacioneaz sinergic cu ali antioxidani i regenereaz
vitaminele E i C
Crete nivelul tisular al glutationului, unul dintre principalii
antioxidani endogeni, al crui nivel scade odat cu vrsta
Util n: neuropatiile diabetice, ateroscleroz, boli
neurodegenerative, (Parkinson, Alzheimer), protector hepatic
42

Oxidoreductaze transportoare de
electroni

TRANSELECTRONAZE

43

Oxidoreductaze cu fier heminic. Hem-enzime


Keilin 1925

Citocromii

Fier-proteine cu localizare mitocondrial


Participani activi la lanul respirator
Unii sunt localizai n microzomi
Se cunosc aproximativ 100 citocromi
Gruparea prostetic: fier-porfirinic
Au structur heminic

Realizeaz transferul reversibil al unui singur electron- prin intermediul


atomului de fier situat n centrul hemului Fe(II) Fe(III).

44

CITOCROMII Structur chimic


Citocromii a
Fier-proteine avnd o structura de tip
protoporfirinic (nucleu tetrapirolic) ce
are la baz pirolul

Denumirea de porfirine (din


limba greac) se datoreaz culorii
purpurii a acestor compui
Porfirin + FIER = HEM
HEMUL reprezint subunitatea
prostetic a numeroase hemoproteine,
printre care i citocromii

pirol

Atomul de fier (Fe2+ sau Fe3) se leag


prin legturi coordinative de cei patru
atomi de azot tetrapirolici.
45

Structuri tridimensionale ale citocromului c


Citocromul c = heteroprotein
globular prezent n mitocondria
de la toate organismele eucariote.
un singur lan polipeptidic format
din 104 de aminoacizi.
40% din structura polipeptidului
este constituit din lanuri de tip
-helix, iar restul de tip , sau plieri
neregulate

46

Mecanism de aciune
Citocromiii a, b, i c sunt prezeni la nivelul membranei mitocondriale i fac
parte din complexele lanului respirator.
Structurile heminice din citocromii a i b nu sunt leagate covalent de partea
proteic.
Potenialele de oxidoreducere ale citocromilor sunt pozitive, ei fiind plasai n
lanul respirator mitocondrial n ordinea cresctoare a potenialelor lor redox.
Transportul electronilor se face pe baza transformrilor redox reversibile ale
atomului de fier heminic:
Citocrom - Fe3+

e-

Citocrom - Fe2+

47

Citocromii P450 i b5
Componente active ale lanului transportor de electroni situat
la nivelul reticulului endoplasmic neted (microzomi).
Citocromii P450 (EC: 1.14.14.1) = o familie multigenic de hemoproteine
cu proprieti diferite de cataliz, de specificitate pentru substrat, i de
sensibilitate la tratamentul cu diferii inductori.
Complexul citocromului cu monoxidul de carbon (CO) este un pigment (P)
cu un maxim de absorbie la 450 nm.
Apoproteina are o mas molecular cuprins ntre 45.000 i 50.000 daltoni.
Multiplicitatea i eterogenitatea citocromilor P450 a necesitat elaborarea
unei nomenclaturi bazat pe procentul de omologie al secvenelor
proteice, aceast nomenclatur fiind adus la zi o dat la doi ani.
n 2009: a 55-a aniversare a descoperirii citocromilor P450, fiind
identificate la om numeroase izoenzime ce prezint un interes
farmacologic i toxicologic.
La om, cele mai implicate enzime n metabolismul medicamentelor sunt
izoformele: CYP3A4, CYP2D6, CYP2C9, CYP1A2, CYP2C19.
48

Citocromii P450 i b5
Citocromul P450 este o oxidaz terminal ntr-un lan multienzimatic
cu funcie mixt n care mai intervin NADPH-citocrom P450 reductaza
i NADH-citocrom b5 reductaza.
Aceti citocromi particip la
1) reaciile de hidroxilare din biosinteza unor molecule endogene:
colesterol, hormoni steroizi, calciferoli, acizi grai hidroxilai, acizi
biliari, aminoacizi aromatici
2) reaciile de metabolizare a compuilor xenobiotici: medicamente,
pesticide, aditivi alimentari
Citocromul P450 are rol de monooxigenaz cu funcie mixt:
Cit. P450
R-H + NADPH + H+ + O2

R-OH + NADP+ + H2O

Capacitatea P450 de a biotransforma numeroase molecule exogene diferite


permite organismelor vii de a se adapta la mediul nconjurtor !!
49

Transelectronaze
Subclasa 1.11 (acceptor de H2O2)

CATALAZA
EC: 1.11.1.6
HEM-ENZIME
Catalaza este prezent n toate celulele aerobe, fiind localizat la nivel
subcelular n mitocondrii i peroxizomi.
n organismul animal, catalaza se gsete n special n ficat i eritrocit, unde
protejeaz hemoglobina de aciunea lezant a speciilor reactive de oxigen.
50

Catalaza (EC: 1.11.1.6) = hem-enzim, cu masa molecular de 250.000


Daltoni, constituit din 18 lanuri polipeptidice notate cu A, B, C i D.
Fiecare caten conine 120 resturi de aminoacizi, n care predomin
acidul aspartic
Catalaza are drept grupare prostatic patru molecule de hem, deci patru
atomi de fier

Catalaza produce reacia de dismutare a peroxidului de hidrogen;


1 mol de catalaz descompune 5 x 106 moli H2O2.

H2O2

H2O2

2H2O + O2
51

Oxidoreductaze cupru-dependente

Transelectronaze cu cupru
(cupru-enzime)

52

Transelectronazele cu cupru sunt oxidaze care transfer electroni de pe


un metabolit pe oxigenul molecular (deci reacioneaz direct cu O2)

Transportul electronilor se face pe baza transformrilor redox reversibile


ale atomului de cupru, mecanismul de aciune fiind:

Cu2+

+ e-

Cu+

Exemple de transelectronaze cu cupru:

uricaza
fenol oxidazele
ascorbat oxidaza
ceruloplasmina
superoxid-dismutaza
53

Uricaza (sau urat-oxidaza, EC: 1.7.3.3; urat:oxigen-oxidoreductaza)


Enzima care transform acidul uric n alantoin la toate mamiferele, cu excepia
primatelor i a omului.
Uricaza recombinat (preparat prin inginerie genetic, ADN recombinat) a fost
studiat i propus de curnd ca posibil medicament n hiperuricemie (gut).
O
H
N

HN
O

1/2 O2
O

N
H

N
H

O
NH2

URICAZA

Acid uric

NH2

H2O

C
H

NH2
C

N
H

Alantoina

CO2
COOH

NH2
2O

COOH
54

Fenilalanin-4-hidroxilaza (EC: 1.14.16.1) este o monooxigenaz care


catalizeaz hidroxilarea fenilalaninei la tirozin.
COOH
COOH
H2 N

H2 N

CH

CH
CH2

CH2

fenil-alanin-4-hidroxilaza
+ NADPH+H+ + O2
L-Fenilalanin

+ NADP+ + H2 O
citocrom P450

acid ascorbic
Cu+

OH

L-Tirozin

Fenol-oxidazele = Enzime care catalizeaz hidroxilarea monofenolilor la difenoli, i


apoi a difenolilor la chinone.
Polimerizarea rapid a acestor chinone conduce mai departe la formarea
pigmenilor colorai (polifenoli), proces ntlnit sub numele uzual de brunificare a
fructelor i legumelor (mere, pere, gutui, cartofi), n prezena oxigenului.
n funcie de substratul catalizat fenol-oxidazele sunt clasificate n tirozinaze (sau
monofenol oxidaze) i catecol-oxidaze (sau difenol oxidaze).
55

Ascorbat oxidaza
(sau ascorbaza, EC: 1.10.3.3; L-ascorbat : O2 oxidoreductaza)
particip la metabolismul oxidativ al acidului ascorbic, cu formarea celor
dou forme vitaminice redox active: acid ascorbic i acid dehidroascorbic.

HO

HO

O
ascorbat oxidaza

HC
HO

Cu+
OH

Acid L-ascorbic

+ H2O

HC

+ 1/2 O2

CH

H2C

HO

CH

H2C

OH

Acid L-dehidroascorbic

56

Ceruloplasmina
Feroxidaz (Fe2+: oxigen oxidoreductaz, EC:1.16.3.1)
este o metal-protein multifuncional
transportor de cupru, agent anti-inflamator, antioxidant plasmatic
captator de radicali liberi
2-glicoprotein ce conine 8 atomi de cupru n molecul.
sintetizat la nivel hepatic
acioneaz ca oxidaz
rol n metabolismul fierului, mpreun cu transferina (care l transport
numai sub form feric)
catalizeaz oxidarea Fe3+ n Fe2+, favoriznd captarea fierului de ctre
transferin i utilizarea sa mai departe n biosinteza hemoglobinei.
Ceruloplasmina

4Fe2+

4H+

O2

4Fe3+

2H2O

57

Superoxid-dismutaza
(SOD, superoxid:superoxid oxidoreductaz; EC: 1.15.1.1)
metal-enzim ce conine Cu2+ i Zn2+, Mn2+ sau Fe2+ (n cazul bacteriilor)
descoperit n 1969 de ctre J. McCord i I. Fridovich
SOD catalizeaz reacia de dismutare a radicalului superoxid:
.-

.-

O2 + O2 + 2H

SOD

H2O2 + O2

Aproximativ 98% din activitatea SOD la nivel sangvin se gsete n hematii.


Activitatea enzimatic SOD este sczut n inflamaii, tumori, cataract, precum i n
58
cursul episoadelor de ischemie a unor organe mari (inim, creier).

S-ar putea să vă placă și