Enzime 4 Transferaze 2014

Clasa 2
TRANSFERAZE EC: 2
Transferazele sunt enzime care transfer un radical

sau o grupare funcional de pe un substrat donor
de grupare funcional pe un substrat acceptor.
SA +
SB
SB +
SA
Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase

2. Transferaze
2.1. Enzime care transfer grupri cu un singur atom de carbon
2.1.1. Metiltransferaze
2.1.2. Hidroximetiltransferaze, formiltransferaze i transferazele similare
2.1.3. Carboxiltransferaze i carbamoiltransferaze
2.1.4. Amidinotransferaze
2.2. Enzime care transfer grupri aldehidice sau cetonice
2.3. Aciltransferaze
2.7. Enzime care transfer grupri care conin fosfor
2.3.1. Acetiltransferaze
2.7.1. Fosfotransferaze cu o grupare alcool ca acceptor
2.7.2. Fosfotransferaze cu o grupare carboxil ca
2.3.2. Aminoaciltransferaze
acceptor
2.4. Glicoziltransferaze
2.7.3. Fosfotransferaze cu o grupare cu azot ca
2.4.1. Hexoziltransferaze
acceptor
2.4.2. Pentoziltransferaze
2.7.4. Fosfotransferaze cu o grupare fosfat ca acceptor
2.4.99. Enzime care transfer alte grupri glicozil
2.7.5. Nucleotidiltransferaze
2.7.8. Transferaze pentru alte grupri cu fosfat
2.5. Enzime care transfer grupri alchil sau aril
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot substituite
2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche
2.6.1. Aminotransferaze (transaminaze)
2.8. Enzime care transfer grupri care conin sulf
2.8.1. Sulfurtransferaze
2.6.3. Oximinotransferaze
2.8.2. Sulfotransferaze
2.8.3. CoA-transferaze
2.6.99. Enzime care transfer alte grupri cu azot
COFACTORII TRANSFERAZELOR
COFACTORII TRANSFERAZELOR CARE TRANSFER

GRUPRI CU UN SINGUR ATOM DE CARBON
(EC 2.1)
Cofactorii metiltransferazelor (EC 2.1.1)
Cofactorii metiltransferazelor (EC 2.1.1)
Acidul tetrahidrofolic (FH4)

Cobalamina (vitamina B12)
Acidul tetrahidrofolic cofactor enzimatic
OH
O
5
4
3
H2N
N
B
10
C NH
H2
NH CH CH2 CH2 COOH

COOH
Acid paraaminobenzoic
Pterina
2-amino-4-hidroxi-6-metil-pterid
pteridina
Acid folic (F)
Acid glutamic
OH
O
5
4
3
H2N
N
B
10
C NH2
H2
NH2 CH CH2 CH2

COOH
Acid paraaminobenzoic
COOH
Acid glutamic
Pterina
2-amino-4-hidroxi-6-metil-pterid
pteridina
Acid pteroic
Acid folic (F)
2 NADPH+H+
dihidrofolat reductaza
2 NADP+
OH
4
3
H
N
5
H2N
N1
N
H
O
9
10
CH2 NH
H
CH2
NH
CH
CH2 CH2 COOH
COOH
Acid 5, 6, 7, 8 - tetrahidrofolic (FH4)
Forma redus a
acidului folic
Acidul tetrahidrofolic particulariti structurale i

funcionale
Acidul folic este format dintr-un nucleu pteridinic substituit (pterina), unit
printr-o punte metilenic de acidul para-aminobenzoic, legat la rndul su
printr-o legtur peptidic de acidul glutamic.
Pteridina este rezultatul asocierii a dou nuclee condensate:

pirimidinic (nucleul A) i pirazinic (nucleul B).
Biosinteza acidului tetrahidrofolic are loc cu participarea enzimei

tetrafolat: NADP+ oxidoreductaza (EC 1.5.1.3, cunoscut i sub numele de
dihidrofolat-reductaz, tetrahidrofolat dehidrogenaza, sau folicreductaza) care realizeaz, n dou etape, conversia acidului folic la acid
5,6,7,8 tetrahidrofolic(FH4)
Formele active ale acidului tetrahidrofolic

FH4 poate participa la transferul gruprilor cu un atom de carbon
pe care le leag la N5 i/sau N10
FH4 poate lega resturi metil, metilen, formil sau formimino => forme active
ale FH4.
Acceptorii acestor grupri sunt o gam variat de biomolecule.
H3C
HN 10
N5
HN 10
N
N 10
N
5
N 10
N
H
N5-formil-FH4
NH
CH HN10
N
5
N5-N10-metilen-FH4
H
5
N5-metil-FH4
H2C
N5-formimino-FH4
N10-formil-FH4
Acidul tetrahidrofolic (FH4) este transportor pentru gruparea metil sub

form de N5-metil-FH4.
Donorul de grupare metil este metionina, care este mai nti activat sub
form de sulf-adenozil metionin (SAM).
Deci, procesele de metilare sunt dependente att de SAM, ct i de FH4, ele

fiind procese importante n biosinteza a numeroase biomolecule eseniale
din organismul uman : colin, fosfatidilcoline, adrenalin, tocoferoli,
timin (din structura ADN) etc.
Mecanismul de aciune al metiltransferazelor

Presupune existena:
Unui donor de grupri metil METIONINA
Unor substane acceptoare de grupri metil: etanolamin,
noradrenalin, uracil, etc
Are loc n 3 ETAPE:
1. Activarea metioninei donorul principal de grupri metil
2. Transferul gruprilor metil pe acidul tetrahidrofolic (FH4)
3. Metilarea diferitelor substrate
1. Activarea metioninei
NH2
N
N
CH3
metionin
adenozil
transferaza
S
CH2
CH2
H2N CH
COOH
L-metionina
+ ATP
H3C
+
S
CH2
CH2
O
+
CH2
H2N CH
fosfat (Pi)
pirofosfat (PPi)
OH OH
COOH
Sulf-adenozil-metionina (SAM)
("CH3" metil activat)
Sulf-adenozil metionina (SAM) = forma activat a metilului CH3
2. Transferul gruprilor metil active pe acidul tetrahidrofolic (FH4)

acid N5-metil-tetrahidrofolic
sau
acid N10-metil-tetrahidrofolic
NH2
N
N
H3C
+
S
N
CH2
+ FH4
CH2
OH
CH2
H2N CH
NH2
OH
COOH
Sulf-adenozil-metionin (SAM)
CH2
CH2
CH2
H2N CH
OH
OH
COOH
Sulf-adenozil-homocistein
SAM reacioneaz cu FH4 i rezult acid N5-metil sau N10-metil-tetrahidofolic,

adevratul transportor al gruprii CH3.
Din reacie rezult i sulf-adenozil-homocisteina, care se va scinda ulterior n
L-homocistein i adenozin, sub aciunea unei hidrolaze.
3. Metilarea diferitelor substrate

Acizii N5-metil-tetrahidrofolic sau N10-metil-tetrahidrofolic transfer
grupri CH3 pe substratul acceptor, cu refacerea moleculei de FH4.
3 S-adenozil
homocistein
3 SAM
H2C OH
Metiltransferaza
H2C NH2
3 N5-metil-FH4
Fosfatidiletanolamine
OH
OH
OH
+
H2C
CH3
CH3
Fosfatidil coline (lecitine)

N5-metil
-FH4
FH4
S-adenozil
homocisteina
OH
OH
Noradrenalin-N-metil transferaza
EC: 2.1.1.28
HC OH
H2C NH2
Noradrenalin
+ FH4
CH3
Colin
Etanolamin
"CH3"
SAM
H2C
HC OH
H2C NH CH3
Adrenalin
Transformarea
noradrenalinei n
adrenalin
Formarea timinei.
N5-N10-metilen-tetrahidrofolatul realizeaz metilarea uracilului din structura
ARN cu formarea timinei, care intr n structura acizilor deoxiribonucleici (ADN).
FADH2
O
HN
O
+ N5, N10-metilen-FH4
N
H
Uracil
(ARNt)
(ARN)
FAD
O
CH3
HN
ribotimidil-sintaza
folat dependent
EC 2.1.1.74
+ FH4
O
N
H
Timin
(ADN)
Interconversia glicocol serin, deci transferul gruprilor hidroximetil se

realizeaz cu intervenia N5-N10-metilentetrahidrofolatului, proces catalizat de
glicin-hidroximetil transferaza (EC 2.1.2.1.)
CH2
CH2
NH2
COOH
Glicocol
N5-N10-metilentetrahidrofolat
PLP
+ H2 O
hidroximetiltransferaza
H2 N
OH
CH
COOH
L-Serina
FH4
Cobalamina (vitamina B12)

Cofactorii enzimatici derivai de cobalamine:
5-deoxiadenozil
cobalamina i
metilcobalamina.
Formele biologic
active ale
vitaminei B12
Nucleu corinic - conine n

centrul su un atom de cobalt
(Co) trivalent i
hexacoordinat. Acesta se
leag de 5-deoxiadenozin
(cu formarea unei legturi
speciale cu atomul de cobalt)
sau de o grupare metil (-CH3).
Metilcobalamina cofactor pentru metil-transferaze

H3C
SH
CH2
CH2
N5-metil-FH4
H2N
Metionin-sintaza
EC 2.1.1.13
CH
COOH
L-Homocisteina
Cobalamina
metilcobalamina
S
CH2
CH2
FH4 + H2N CH
COOH
L-Metionina
Intervine ca metil transferaz n refacerea metioninei i a acidului

tetrahidrofolic (FH4)
Interconversia homocistein-metionin se realizeaz prin cooperarea
acidului N5-metil-tetrahidrofolic cu coenzima cobalaminic.
Se nchide ciclul metilului activat
Acizii folici se afl ntr-o strns relaie metabolic cu vitamina B12 !

2. Transferaze
acceptor
acceptor
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot substituite
Cofactorii enzimelor care transfer grupri

aldehidice sau cetonice (EC 2.2.)
Tiamin pirofosfatul (TPP) cofactor enzimatic
Tiamin pirofosfatul (TPP)

forma activ a vitaminei B1
6
1
H 3C
N
2
N
3
CH 2
+
3' N
HC
NH 2
4'
CH 3
OH
'
2
S
1'
5'
CH 2 CH2 O
P
O
OH
O
P O
O
Enzima
TPP - cofactor enzimatic pentru enzime din 2 clase diferite:

transferaze, subclasa transferaze ale gruprilor aldehidice i cetonice (EC 2.2)
liaze, subclasa liaze carbon-carbon (EC 4.1), care catalizeaz reacii de
decarboxilare ale -cetoacizilor, eseniale pentru metabolismului intermediar.
6
1
H 3C
N
2
N
3
CH2
N
HC
NH 2
4'
CH3
2'
OH
5'
S
1'
CH2 CH2 O
P
O
atom de carbon reactiv
proton disociabil
OH
O
P O
O
Enzima
TPP cofactor pentru TRANSFERAZE

1. TRANSCETOLAZE (EC 2.2)
Reacii din ciclul pentozo-fosfat de degradare a glucozei:
CH2 -OH
O
CH2 OH
C=O
HO CH
HC
HC OH
H2 C
HC
HC
PO3 H2
Xilulozo-5-fosfat
(5C)
C=O
TPP
H
OH
Transcetolaza
OH
EC 2.2.1.1
OH
CH2 O PO3 H2
Ribozo-5-fosfat
(5C)
HO CH
Mg2+
HC
O
OH
HC
OH
HC
OH
C
HC
H
OH
H2 C O PO3 H2
CH2 O PO3 H2
Sedoheptulozo-7-fosfat
(7C)
Gliceraldehid3-fosfat
(3C)
CH2 -OH
CH2 -OH
C=O
TPP
HO CH
HC
HC
HC
O
OH
OH
OH
HC
Transaldolaza
H
OH
H2 C O PO3 H2
CH2 O PO3 H2
Gliceraldehid3-fosfat
Sedoheptulozo-7-fosfat
(7C)
(3C)
EC 2.2.1.2
Mg2+
O
C
HC
C=O
H
OH
HC
OH
H2 C
HO CH
+
PO3 H2
Eritrozo-4-fosfat
(4C)
HC
OH
HC
OH
H2 C O
PO3 H2
Fructozo-6- fosfat
(6C)
Calea pentozo-fosfailor este o cale alternativ de degradare a glucozei

n celul, dependent de tiamin.
TPP cofactor pentru LIAZE

Subclasa liaze carbon-carbon (EC 4.1)
decarboxilarea anaerob (simpl) a acidului piruvic;
decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic ;
decarboxilarea oxidativ a acidului -cetoglutaric.
TPP;
CH3
piruvat decarboxilaza
C=O
CH3
NADH + H+
CHO
COOH
acid piruvic
alcool etilic
Mg2+
CO2
acetaldehida
NAD+
acid acetic
Decarboxilarea simpl a acidului piruvic (numai la unele microorganisme - Saccharomyces)
Mecanismul decarboxilrii simple a acidului piruvic

+
Enzim
CH 3
+
C=O
COOH
2'
carbanion
HO
CH 2
CH 2
PP
Acid piruvic
(substrat)
H 3C
TPP - Enzim
Enzim
H 3C
COOH
CH
CO 2
HO
Enzim
derivat - Hidroxietil - TPP
Acid piruvic activat

Complex [ES]
(lactilderivat)
CH 3 CHO
Acetaldehid
TPP - Enzim
Decarboxilarea oxidativ a -cetoacizilor

(piruvic i -cetoglutaric)
TPP
acid
lipoic
Acid piruvic
E1
E2
Acetil~SCoA + NADH + H+ + CO2
FAD
NAD+
COOH
CH2
CH2
E1
complex multienzimatic !
E3
Go' = - 33,44 kJ/mol (- 8,0 kcal/mol)
E2
COOH
TPP Acid lipoic; HS-CoA

NAD+
C O
COOH
Acid -cetoglutaric
CH2 + NADH + H + + CO2
FADH2
O
E3
CH2
~ SCoA
Succinil~SCoA
Go' = -7,2 kcal/mol

2. Transferaze
acceptor
acceptor
2.6. Enzime care transfer grupri care conin azot
substituite

28
2.3 ACIL TRANSFERAZE
29
2.3 ACIL TRANSFERAZE

Catalizeaz transferul radicalilor acil R
de la substrate donoare (acizi organici)

la diferii acceptori, substane cu structuri diferite
Cofactorii pentru aciltransferaze sunt:
coenzima A
acidul lipoic
ACP (acyl carrier protein) enzim din complexul multienzimatic
ce intervine n biosinteza acizilor grai.
Coenzima A
HS-CoA
CH3
O
C ~ SCoA
Acetil~SCoA
O
C ~ SCoA
Acil~SCoA
30
Coenzima A (HS-CoA) = coenzima acilant sau acetilant

cisteamin
O C
NH
adenin
CH2 CH2 SH
NH2
CH2
rest de
-alanin
CH2
NH
O C
1
N
2
CH
OH
CH3
C
O
CH2 O
4
CH3
ac. 2,4-dihidroxi
3,3-dimetil butiric
P O
O
P O
OH
OH
N
CH2
O
Ribozo-3-fosfat
Pirofosfat
OH
O P OH
3fosfo-ADP-pantoil -alanil-cisteamina
OH
31
Coenzima A (HS-CoA)
NH CH2 CH2 SH
O C
NH2
CH2
CH2
NH
O C
CH
CH3
C CH2 O
OH
CH3
O
O
N
5
P O P O CH2
O
OH
OH 4
3
Acid pantotenic (vitamina B5)
N
1
2
OH
O P OH
OH
32
Coenzima A (HS-CoA)
R
O
C ~ S CoA
O
H3 C C ~ SCoA
coenzima acilant sau acetilant

O
~C
O C NH CH2 CH2
SH
CH2
O C
OH
C
CH3
CH2 O
O
O
P O P O CH2
OH
CH3
NH2
N
N
CH3
CH
~C
legtur
tioesteric
macroergic
CH2
NH
sau
OH
OH
O P OH
OH
33
Exemple de ACETIL-TRANSFERAZE
Biosinteza acetilcolinei (mediator chimic n sistemul nervos central)
O
CH3
HO
CH2
CH2
Colin
+
N
CH3
CH3
CH3
CH3
C ~ SCoA
Colinacetilaz
H3C
HS-CoA
CH2
Acetilcolin
CH2
CH3
CH3
(EC:2.3.1.6) Acetil~SCoA: colin O-acetil transferaz
34
Reacia de acetilare a unor compui care intervin n sinteza

glicozaminoglicanilor din matricea extracelular
EC : 2.3.1.3 Acetil~SCoA : D-glucozamin N-acetiltransferaza
CH2 OH
CH2 OH
O
O
OH
OH
SCoA
+
O
CH3
OH
NH2
OH
OH
D-glucozamina
N-acetil-D-glucozamina
D-glucuronat
CH2-OH
COOH
4
O
OH
O
3
OH
NH C CH3
CH2-OH
COOH
OH
HSCoA
O
N-acetil D-glucozamina
1
2
Acid hialuronic
Keratan sulfai
Dermatan sulfai
OH
OH
NH
O
H3C
1
3
OH
OH
NH
H3C
Dizaharidul din structura acidului hialuronic35
Coenzima A cofactor al tiokinazelor (clasa LIGAZE)

Exemplu: Activarea ACIZILOR GRAI -dou ETAPE:
1.
NH2
PPi
O
R
ATP
N
R
OH
H2C O
OH
OH OH
acil adenilat (acil activat)
acid gras
EC: 6.2.1.3 acid organic: HS-CoA ligaza (AMP forming) (tiokinaze)

2.
O
acil-adenilat
HS-CoA
+ ATP + HS-CoA
OH
AMP
O
C
Acil ~SCoA
Reacia global
C ~ SCoA
C ~ SCoA + AMP + PPi
Acil ~SCoA
36
Acetil coenzima A intermediar metabolic bogat n energie

Acetil
O
H3 C C ~ SCoA
SCoA
Legtur tioesteric macroergic
(Go = - 7,5 kcal/mol)
O
O C NH CH2 CH2
CH2
S ~ C CH
3
O C
CH2
NH
NH2
CH3
CH
OH
CH3
CH2 O
O
O
N
P O P O CH2
O
OH
OH
O
OH
O P OH
OH
37
ACIDUL LIPOICtransportor de
grupri acil
Rest de lizin din proteina

enzimatic
H2C
H2
C
H2
C
CH
C
H2
H2
C
HN
C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH

C 1 H
C
H2
O
S
S
Acid lipoic legat de proteina enzimatic
(forma oxidat)
O
R
Prin ruperea punii

disulfurice, acidul lipoic are
capacitatea de a transporta
i o grupare acil
OH
Acid gras
H2C
H2
C
CH
S
SH
Acil
transportul concomitent
de hidrogen i de
grupri acil
H2C
H2
C
SH
HN

H
C
O
HSCoA
Acil~SCoA
O
CH
SH
HN

H
C
O
Acid lipoic legat de proteina enzimatic

(forma redus)
38
Acyl-carrier-protein HS-ACP
(protein transportoare de grupri acil)
Rol specific n transferul gruprii acil, n biosinteza acizilor grai
ACP are o structur similar coenzimei A
HS-ACP reprezint proteina central a complexului enzimatic denumit
acid gras sintetaza
O C NH CH2 CH2 SH
Lan polipeptidic al ACP (77 aminoacizi)
CH2
CH2
O
CH
CH3
C CH2 O
OH
CH3
OH
NH
O C
C O
P O CH2 CH
Rest de serin (poziia 36)

NH
39

2. Transferaze
acceptor
acceptor
substituite

40
Glicoziltransferazele (EC 2.4)

- catalizeaz transferul unui rest de monoglucid
(hexoze, pentoze) de pe un donor pe un acceptor
DONORI
esteri fosforici ai glucidelor, oligo, polizaharidele
ACCEPTORI
H3PO4
monozaharidele
oligozaharidele
diferii agliconi
41
Ageni de glicozilare cu rol de transportori de

monozaharide n form activat
Denumire
UTP uridin trifosfat
Rol
Activarea i transportul glucozei i galactozei
GTP guanozin trifosfat Activarea i transportul manozei i a manozaminei

ATP adenozin trifosfat Activarea i transportul diferitelor hexoze, pentoze
CTP citidin trifosfat
Activarea colinei
CDP-colina este implicat n biosinteza lecitinelor
Retinil-fosfat
Coenzim pentru enzimele care transfer manoz i

manozamin
Este vitamina A activat
Dolicol-monofosfat
Dolicol-difosfat
Transportul monozaharidelor i oligozaharidelor sub

form aminat: glucozamina, galactozamina i
manozamina
42
Ageni de glicozilare - derivai ai nucleotidelor purinice i

pirimidinice ce conin n molecula lor legturi fosfat macroergice
O
HN
uracil
HO
P ~O
P ~O
OH
OH
OH
O
O
CH2
O
riboz
UTP (uridin trifosfat)
OH
OH
Rol n activarea i transportul glucozei i galactozei

43

OH
N
HO
P ~O
P ~O
OH
OH
H2N
N
guanin
OH
CH2
O
riboz
GTP (guanozin trifosfat)
OH
Rol n activarea i transportul manozei i a manozaminei
OH
44

NH2
N
HO
P ~O
P ~O
OH
OH
OH
N
O
adenin
CH2
O
riboz
ATP (adenozin trifosfat)
OH
Rol n activarea i transportul diferitelor hexoze, pentoze
OH
45

NH2
N
citozin
HO
P ~O
P ~O
OH
OH
OH
O
O
CH2
O
riboz
CTP (citidin trifosfat)
OH
OH
Rol n activarea colinei

CDP-colina este implicat n biosinteza lecitinelor
46
Exemple de glucozil transferaze (EC:2.4)

n MUCHI
FICAT
FOSFORILAZA EC : 2.4.1.1
1-4 -D glucan : ortofosfat -D glicozil transferaza
are loc deci scindarea glicogenului n molecule de glucoz componente + transferul

unui rest de glucoz pe molecula de H3PO4. Procesul se numete FOSFOROLIZ !
( 1 - 4 -D-glucoz )
n
(1-6)
H3PO 4
Glicogen
fosforilaz
( 1 - 4 -D-glucoz )
+ - D glucoz - 1 - fosfat
n-1
(1-6)
47
Exemple de glucozil transferaze

Glicogen- sintaza EC : 2.4.1.11
UDP-glucoz + ( 1 - 4 -D-glucoz ) n-1

( 1 - 6 )
Denumirea sistematic
UDP glucoza : glicogen 4 -D glucozil transferaza
glicogen sintaza
Glucoza activat sub form de UDP-glucoz
este transferat la o molecul de preglicogen cu (n-1) molecule de -D glucoz.
GLICOGENOGENEZA
UDP + ( 1 - 4 -D-glucoz ) n
( 1 - 6 )
Reacii preliminare:
glucoz
glucoz - 6- fosfat + ADP
+ ATP
glucoz - 1- fosfat
glucoz - 6- fosfat
glucoz - 1- fosfat
+ UTP
UDP-glucoz
+ Pi
48
Exemple de glucozil transferaze

Lactoz sintaza (sintetaza) EC : 2.4.1.22
Denumirea sistematic
UDP galactoza : D-glucoza 4 -D galactotransferaza
UDP galactoz +
-D-glucoz
Agent de glicozilare
Acceptor
lactoz sintaza
n glandele
mamare !
Biosinteza lactozei din
galactoz activat sub
form de UDPgalactoz i glucoz
UDP + Lactoz
Etape preliminare de activare
galactoz + ATP
hexokinaz
izomeraz
galactoz - 6- fosfat
galactoz - 1- fosfat + UTP
galactoz - 6- fosfat + ADP

galactoz - 1- fosfat
galactoziltransferaza
UDP-galactoz + Pirofosfat
49
Ageni de glicozilare
O
CH2
OH
Rol de coenzim pentru

enzimele care transfer
manoz i manozamin
OH
Este vitamina A activat !

Retinil-fosfat
Retinil fosfatul este transportor de manoz, fiind coenzim pentru

glicoziltransferaze, care intervin n sinteza unor glicoproteine cu rol major n
organism, cum ar fi anticorpii sau glicoproteinele de grup sangvin.
50
Retinil fosfatul cofactor pentru glicozil transferaze i

transportor de manoz
Manoza +
GDP - manoza
GTP
n biosinteza
glicoproteinelor (care au
n structur manoza)
+ Pi
O
CH2
OH
GDP - manoza
OH
Retinil-fosfat
GDP
6 CH2OH
5
4
O
OH
OH
Retinil-fosfat-manoza
1
PROTEINE
OH 3
Manoz
OH
GLICOPROTEINE (cu manoz)

51

2. Transferaze
acceptor
acceptor
substituite
52
Enzime care transfer grupri cu azot EC: 2.6

Aminotransferaze EC: 2.6.1
53
Aminotransferaze EC: 2.6.1

(sau transaminaze)
Enzime care transfer grupri amino NH2 de la un substrat donor
(de regul un aminoacid) la un acceptor (un cetoacid) cu formarea
unui nou aminoacid i unui cetoacid nou.
Cofactorii transaminazelor sunt formele biologic active ale vitaminei

B6 reprezentate de piridoxal-5-fosfat (PLP) i piridoxamin-5-fosfat ce
rezult prin fosforilarea piridoxalului i a piridoxaminei cu ATP
O
CHO
HO
CH2
CH2-NH2
O
CH2
HO
O
H3C
Piridoxal -5-fosfat
(PLP)
H3C
P O
O
N
Piridoxamin- 5-fosfat
54
Mecanismul de aciune
O
NH
CH
C
apoenzima
proteinic
(CH2)4
N
4'CH
HO
5'
CH2
H3C
+
N
H
Piridoxal fosfatul (PLP) i legtura de tip aldiminic cu restul de lizin al

proteinei enzimatice (apoenzim)
55
Mecanismul de aciune
a
Natura apoenzimei imprim

specificitatea de substrat
Apoenzima va antrena specific
ruperea uneia din legturile atomului
de carbon din poziia => reacii de:
R1
O
b
N
4' C
O
5'
HO
CH2
H3C
+
N
H
transaminare (a)
decarboxilare (b)
transfer de radicali ( c)
Formarea complexului de tip baz Schiff

ntre aminoacid (substrat) i cofactorul
piridoxal-fosfat (PLP).
56
PLP funcie de cofactor enzimatic

Piridoxal-fosfatul intervine n toate transformrile neoxidative ale aminoacizilor :
transaminri, decarboxilri, racemizri, scindri ale legturilor i
1. Transaminarea aminoacizilor
1. Decarboxilarea aminoacizilor (liaze)
1. Izomerizarea aminoacizilor (D-aminoacizi
L-aminoacizi)
57
Reacia general a transaminrii

R1
CH
R2
COOH +
HN22
NH
COOH
O
PLP
R2
CH
COOH +
R1
HN
NH22
Aminoacid 1
-Cetoacid 2
COOH
O
Piridoxal
fosfat
Aminoacid 2
Piridoxamin
fosfat
-Cetoacid 1
Gruparea NH2 nu se gsete liber ci este n permanen legat

58
de un substrat !!
Mecanismul transaminrii ETAPA I

H
O
CH2
HO
R1
H3C
H2O
N
H
COOH
NH2
Enzim - piridoxal fosfat
Aminoacid 1
R1
R1
COOH
N
H
HO
CH2
izomerizare
CH2
HO
CH2
H3C
N
H
N
H
Baz Schiff II
Baz Schiff I
(ALDIMIN)
+ H2O
CH2
R1
COOH
Cetoacid 1
NH2
CH2
HO
Transiminare
Tautomerizare
Hidroliz
H3C
COOH
H3C
N
H
Enzim - piridoxamin fosfat

59
Mecanismul transaminrii - ETAPA a-II-a

CH2
NH2
CH2
HO
H2O
H3C
R2
COOH
N
H
Enzim - piridoxamin fosfat
Cetoacid 2
R2
R2
COOH
izomerizare
CH2
CH2
HO
CH2
H3C
COOH
HO
H3C
N
H
N
H
Baz Schiff I
Baz Schiff II
+ H2O
H
R2
COOH
O
CH2
HO
NH2
Aminoacid 2
H3C
N
H
60
Enzim - piridoxal fosfat
Exemple de reacii de transaminare
H2 N
COOH
COOH
COOH
CH2
CH2
CH2
CH2
CH
COOH
AST (GOT)
CH2
C O
PLP
COOH
CH2
CH
H2 N
COOH
COOH
COOH
Acid L-aspartic
Acid -cetoglutaric
Acid oxalilacetic
Acid L-glutamic
COOH
COOH
CH3
H2 N
CH
COOH
L-Alanina
CH3
CH2
ALT (GPT)
CH2
PLP
COOH
Acid -cetoglutaric
COOH
CH2
CH2
+
H2 N
CH
COOH
Acid piruvic
Acid L-glutamic
61
Transaminazele markeri biochimici de lezare celular

Enzime intracelulare (mitocondrii i citosol), n mod normal
se gsesc n cantiti mici n snge
Afeciunile care lezeaz celulele unor organe determin
eliberarea lor n snge
Se determin mpreun dar au semnificaie biochimic
diferit:
AST marker de lezare miocardic
ALT marker de lezare hepatic
62
PLP cofactor al unor LIAZE (EC 4).

Decarboxilarea aminoacizilor
PLP
aminoacid decarboxilaz
CH
NH2
CO 2
Aminoacid
Aminoacidul
Acid glutamic
Dihidroxifenilalanina
(DOPA)
Triptofanul
5-Hidroxitriptofanul
Tirozina
Histidina
Serina
Arginina
Lizina
Ornitina
Treonina
Acid aspartic
Cisteina
COOH
Produsul de decarboxilare
CH2 NH2
Amin
"biologic activ"
Funcia biologic
-Aminobutiric (GABA)
Dopamina
Neuromediator
Neuromediator
Triptamina
Serotonina
Tiramina
Histamina
Etanolamina
Agmatina
Cadaverina
Putresceina
Propanolamina
-Alanina
Cisteamina
Neuromediator
Neuromediator
Neuromediator
Hormon tisular
Constituent al fosfolipidelor *
Produs de putrefacie
Constituent al vitaminei B12
Constituent al coenzimei A i al ACP
Constituent al coenzimei A i al ACP
63
PLP-cofactor al unor liaze

Aminoacid
amin biogen + CO2
COOH
H2C
C1O2
CH2
PLP
CH
H2N
1
COOH
C4O2
CH2
H3C
COOH
Acid L-glutamic
CH
COOH
-alanin
NH2
PLP
glutamat decarboxilaza
EC 4.1.1.15
COOH
CH2
CH2
CH2
H2N CH
-alanin
NH2
Acid L-aspartic
COOH
CH2 COOH
CH2
CO 2
NH2
Acid -aminobutiric
(GABA)
64
PLP-cofactor al unor liaze

COOH
H2N CH
CH2 CH2
PLP
CH2
histidin decarboxilaza
EC 4.1.1.22
NH2
NH
NH
CO 2
L-Histidin
H2C
H2 N
OH
Histamin
PLP
serin decarboxilaza
CH
COOH
L-Serin
Fosfatidilserine
CO 2
H2C
OH
H2C
NH2
Etanolamin
PLP
EC 4.1.1.65
Fosfatidiletanolamine + CO2
65
PLP cofactor n reaciile de deshidratare i desulfurare ale

aminoacizilor (tot LIAZE)
COOH H2O
H2N
CH
PLP
Serin dehidrataza
CH3
H2 C OH
NH3
L-Serina
COOH
H2N
CH
H2 C
H2O
H2O
COOH
O
Acid piruvic
PLP
L-cistein hidrogen
sulfid liaza (EC 4.4.1.15)
H3 C
COOH
O
Acid piruvic
SH
L-Cisteina
NH3
H2S
66
PLP n reaciile de izomerizare ale aminoacizilor

(racemizare i epimerizare)
CH3
HC
NH2
PLP
alanin racemaza
(EC 5.1.1.1)
HC OH
HC
NH2
COOH
D-treonin
H2N
CH
COOH
COOH
D--alanin
CH3
CH3
L--alanin
CH3
PLP
treonin racemaza
(EC 5.1.1.1.6)
HC OH
H2 N
CH
COOH
L-treonin
67

2. Transferaze
acceptor
acceptor
substituite

68
EC: 2.7. FOSFOTRANSFERAZE
Trifosfaii nucleozidelor purinice sau pirimidinice, precum i ali derivai

fosforilai ndeplinesc un rol de cofactori, pe lng enzimele denumite kinaze.
Aceti ageni de fosforilare pot fi considerai cosubstrate.
69
CARACTERISTICI:
-
compui macroergici: prin hidroliza legturilor macroergice se

elibereaz energia biochimic necesar biosintezei diferiilor
compui organici endogeni
rezervoare energetice celulare
se formeaz, se consum, i se regenereaz n cursul

proceselor metabolice
rol de cofactori ai enzimelor denumite kinaze
pot fi considerai cosubstrate = donori de grupri fosfat
fosfotransferazele se clasific n funcie de molecula

acceptoare de grupri fosfat
70
ATP COFACTOR ENZIMATIC

legturi fosfat anhidridice,
macroergice
NH2
N
HO
P~O
P~O
OH
OH
OH
Adenin
N
O
CH2
legtur N-glicozidic
O
Riboz
legtur fosfat esteric
OH
OH
AMP (acid adenilic)

ADP
71
ATP
- Intervine n 4 tipuri de reacii de transfer
1. Transfer de grupri ortofosforice (Pi)

2. Transfer de grupri pirofosforice (PPi) DIFOSFOTRANSFERAZE
3. Transfer de AMP pe un acceptor
4. Transfer de adenozil pe un acceptor

legturi fosfat anhidridice,
macroergice
NH2
N
HO
P~O
P~O
OH
OH
OH
Adenin
N
O
CH2
legtur N-glicozidic
O
Riboz
legtur fosfat esteric
OH
OH
AMP (acid adenilic)

ADP
72
ATP
1. Transfer de grupri ortofosforice (Pi)
HEXOKINAZA (EC: 2.7.1.1)
GLUCOKINAZA (EC: 2.7.1.1)

O
6
OH
OH
O OH
Mg2+
ATP
CH2
CH2OH
OH
ADP
OH
OH
OH
- D-Glucoz
OH
OH
OH
Glucoz 6-fosfat
73
RIBOKINAZA (EC: 2.7.1.15)

ATP: riboza 5 fosfotransferaza
PIRIDOXAL-KINAZA (EC: 2.7.1.35)
ATP: piridoxal 5-fosfotransferaza
FLAVINKINAZA (EC: 2.7.2.6)
Riboflavinkinaza
FLAVIN + ATP FMN + ADP
GLICEROLKINAZA
ATP: glicerol 3-fosfotransferaza
CH2 OH
ATP + CH OH
CH2 OH
glicerolkinaza
EC : 2.7.1.30
CH2 OH
Glicerol
CH OH O
+ ADP
CH2 O P OH
OH
Glicerol 3-fosfat
74
CREATINKINAZA
ATP: creatin N- fosfotransferaz
COOH
ATP
COOH
creatinkinaza
CH2
EC : 2.7.3.2
N
H3C
NH2
CH2
N
H3C
Creatina NH
NH
ADP
N ~P - OH
OH
Fosfocreatina
2. Transfer de grupri pirofosforice (PPi) - DIFOSFOTRANSFERAZE

TIAMIN PIROFOSFOKINAZA
ATP: tiamin pirofosfotransferaza
tiamin pirofosfokinaz
(EC: 2.7.6.2)
Tiamin
ATP
Tiaminpirofosfat (TPP)
AMP
Mg2+
75
2. Transfer de grupri pirofosforice (PPi) - DIFOSFOTRANSFERAZE
RIBOZO-FOSFAT PIROFOSFOKINAZA (EC: 2.7.6.1)

ATP:riboz 5-fosfat 1-pirofosfotransferaz
ATP
O
HO P O H2C
OH
HO P O H2C
OH
HO
OH
AMP
O P O P OH
OH
OH
HO
OH
OH
5-fosfo-ribozil-1-pirofosfat
(PRPP)
(precursor n biosinteza purinelor, NAD+, NADP+)
76
4. Transfer de adenozil pe un acceptor
Metionin adenoziltransferaza (EC:2.5.1.6)

ATP:L-metionin S-adenozil transferaza
NH2
H2 O
S-CH3
(CH2)2
H2N
CH3
+
+ ATP
L-metionin
N
H2C
(CH2)2
CH
COOH
H2N
+ Pi
+ PPi
CH
OH
OH
COOH
Sulfadenozil metionin
(SAM)
"CH3" metil activat
77

2. Transferaze
acceptor
acceptor
substituite

78
2.8. ENZIME CARE TRANSFER GRUPRI SULFAT

COFACTORII SULFOTRANSFERAZELOR (EC: 2.8.2)
Coenzima: PAPS
3-fosfoadenozin 5-fosfosulfat
NH2
N
N
N
O
HO
S
O
adenin
O
O
P
OH
HO
5'
CH2 O
O
O
P
1'
3'
O
riboz
OH
OH
PAPS (3'-fosfo adenozin 5'-fosfosulfat)

("sulfat activ")
79
Formarea sulfatului activ-(PAPS) are loc cu ajutorul energiei furnizat de

ATP, n mai multe etape:
Sulfotransferaz
a.) ATP
Sulfat anorganic
Adenozin5'-fosfat
5-fosfosulfat
Adenozin
(APS)
(APS)
Pirofosfat
Pirofosfataz
b.) Pirofosfat
c.) APS
2 Fosfat anorganic
ATP
ATP- kinaz
3'-Fosfoadenozin 5'-fosfosulfat (PAPS) +
ADP
Sulfatare
n biosinteza esterilor sulfurici a compuilor organici (reacia de sulfatare
reacie de eliminare)
n biosinteza unor compui endogeni biologic activi N- sulfatai i O- sulfatai:
heparin, keratan sulfat, dermatan sulfat i condroitin sulfat
80
Exemple de biocompui N-sulfatai i O-sulfatai:
Dizaharide cu esteri sulfurici

din structura proteoglicanilor
Structura keratansulfatului
Structura heparinei
81
Structura dizaharidului component al heparinei
82

Enzime 4 Transferaze 2014

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Enzime 4 Transferaze 2014

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Clasa 2

Transferazele sunt enzime care transfer un radical

Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase

COFACTORII TRANSFERAZELOR CARE TRANSFER

Cofactorii metiltransferazelor (EC 2.1.1)

Acidul tetrahidrofolic (FH4)

Acidul tetrahidrofolic cofactor enzimatic

NH CH CH2 CH2 COOH

Acid folic (F)

NH2 CH CH2 CH2

Acid folic (F)

CH2 CH2 COOH

Acid 5, 6, 7, 8 - tetrahidrofolic (FH4)

Acidul tetrahidrofolic particulariti structurale i

Pteridina este rezultatul asocierii a dou nuclee condensate:

Biosinteza acidului tetrahidrofolic are loc cu participarea enzimei

Formele active ale acidului tetrahidrofolic

Acidul tetrahidrofolic (FH4) este transportor pentru gruparea metil sub

form de sulf-adenozil metionin (SAM).

Deci, procesele de metilare sunt dependente att de SAM, ct i de FH4, ele

timin (din structura ADN) etc.

Mecanismul de aciune al metiltransferazelor

2. Transferul gruprilor metil active pe acidul tetrahidrofolic (FH4)

SAM reacioneaz cu FH4 i rezult acid N5-metil sau N10-metil-tetrahidofolic,

3. Metilarea diferitelor substrate

Fosfatidil coline (lecitine)

Interconversia glicocol serin, deci transferul gruprilor hidroximetil se

Cobalamina (vitamina B12)

Nucleu corinic - conine n

Metilcobalamina cofactor pentru metil-transferaze

Intervine ca metil transferaz n refacerea metioninei i a acidului

Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase

Cofactorii enzimelor care transfer grupri

Tiamin pirofosfatul (TPP)

TPP - cofactor enzimatic pentru enzime din 2 clase diferite:

atom de carbon reactiv

TPP cofactor pentru TRANSFERAZE

Calea pentozo-fosfailor este o cale alternativ de degradare a glucozei

TPP cofactor pentru LIAZE

Decarboxilarea simpl a acidului piruvic (numai la unele microorganisme - Saccharomyces)

Mecanismul decarboxilrii simple a acidului piruvic

derivat - Hidroxietil - TPP

Acid piruvic activat

Decarboxilarea oxidativ a -cetoacizilor

Acetil~SCoA + NADH + H+ + CO2

TPP Acid lipoic; HS-CoA

CH2 + NADH + H + + CO2

Go' = -7,2 kcal/mol

Clasificarea transferazelor n subclase i subsubclase

2.7.9. Fosfotransferaze cu acceptori pereche

2.3 ACIL TRANSFERAZE

2.3 ACIL TRANSFERAZE

de la substrate donoare (acizi organici)

Coenzima A (HS-CoA) = coenzima acilant sau acetilant

Acid pantotenic (vitamina B5)

coenzima acilant sau acetilant

(EC:2.3.1.6) Acetil~SCoA: colin O-acetil transferaz

Reacia de acetilare a unor compui care intervin n sinteza

Dizaharidul din structura acidului hialuronic35

Coenzima A cofactor al tiokinazelor (clasa LIGAZE)

EC: 6.2.1.3 acid organic: HS-CoA ligaza (AMP forming) (tiokinaze)

C ~ SCoA + AMP + PPi

Acetil coenzima A intermediar metabolic bogat n energie

Rest de lizin din proteina