Reacia de

imunofluorescen
direct

reacia se bazeaz pe folosirea anticorpilor

specifici marcai cu diferite substane
fluorescente i permite depistarea precoce a
virusurilor.
Anticorp marcat
fluorescent
aplicaii:

pentru diagnosticul:

rabiei
bolii lui Carr
pestei porcine clasice.

Atg
Seciune de esut

Microscop pentru imunofluorescen

Preparatele se acoper cu o pictur de glicerin

neutr, pictura fiind apoi acoperit de o lamel.
Citirea frotiurilor se realizeaz prin examinarea la
microscopul cu flourescen.

Prezena flourescenei specifice n citoplasma unor

celule indic existena virusului, deci un diagnostic pozitiv.

Reacie de imunofluorescen pozitiv pentru virusul

West Nile (familia Flaviviridae)
n cultura celular linia Vero

Metoda
imunohistochimic

Marcajul anticorpilor folosii n reacia

imunohistochimic, este realizat cu o
enzim, mai exact o peroxidaz.
Metoda permite observarea distribuiei
virusului i localizarea sa intracelular n
seciunile de esut, pentru a putea
determina dac distribuia antigenului viral
coincide sau nu cu leziunile prezente

Metoda imunohistiochimic: esut infectat cu

circovirusul porcin tip 2; s-au folosit anticorpii specifici
monoclonali. Aceasta metod permite localizarea
antigenului n seciunile din esuturi.

Metoda
imunocromatografic

Imunocromatografia
se
refera
migraia
complexelor antigen-anticorp printr-un filtru sau
prin migraie lateral de exemplu, folosind
membrana de nitroceluloz.
In cele mai multe situaii, un anticorp cunoscut se
leag de antigenul int.
Complexele antigen-anticorp sunt apoi imobilizate
pe matricea suport (membrana de nitroceluloz)
de ctre un anticorp nemarcat, ataat de matrice.
Verificarea testului include utilizarea martorilor
negativ i pozitiv de asemenea ataai la nivelul
membranei.
Rezultatele sunt observate sub forma unor benzi
sau puncte colorate, deoarece unul dintre anticorpi
este marcat cu aur coloidal sau o alt substan
cromogen.

Reprezentarea schematic a metodei

imunocromatografice
C-linia control, T-linia probei de testat

Imunodifuzia n
gel de agar

principiul metodei se bazeaz pe

realizarea reaciilor antigen-anticorp n
urma difuzrii acestor doi reageni i
formrii, la locul ntlnirii lor, de precipitate
vizibile.
Metoda utilizat este dubla difuziune:

n care antigenul i anticorpul (serul) plasate n 2

godeuri decupate n gel, difuzeaz unul ctre
cellalt i precipit la locul de ntlnire, sub forma
unei linii de precipitare.

Realizarea godeurilor n placa cu gel de agar

Depunerea antigenului i serurilor

AG antigen standard
PS ser pozitiv martor
1,2,3 seruri de cercetat

Testul imunoenzimatic
ELISA
Enzyme-Linked Immunosorbent asSAy

reacia const n determinarea anticorpilor

sau a antigenelor prin intermediul
enzimelor, folosind reacia clasic antigenanticorp.
au fost realizate mai multe variante:

Metoda indirect pentru decelarea anticorpilor;

Metoda direct pentru decelarea antigenelor;
Metoda dublu-anticorp sau sandwich.

Reprezentarea schematic a metodei

imunoenzimatice directe

Metoda
radioimunoenzimatic

Metoda radioimunoenzimatic folosete

analiza
imunoenzimatic,
dar
este
nlocuit de aceasta din ce n ce mai des.
Singura diferen semnificativ este aceea
c agentul folosit pentru marcarea
anticorpilor nu este o enzim ci un izotop
radioactiv, cum ar fi I125 i cantitatea de
complexe antigen-anticorp se msoar
ntr-un scal de msurare a radiaiilor
gama.

Reprezentarea schematic a metodei

radioimunoenzimatice