Sunteți pe pagina 1din 45

Sisteme de transport la int

(vectorizate) Prelegerea nr.10


Vectorizarea (transportul la int)
presupune:
1. Realizarea activitii poteniale
maxime a substanei medicamentoase;
2. Optimizarea disponibilitii n
vecintatea receptorilor farmacologici
specifici;
3. Protejarea deopotriv a substanei
medicamentoase i a organismului.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

OBIECTIVE ALE TERAPIEI MEDICAMENTOASE LA INT


SPECIFICITATE
DE ACIUNE

PENETRAREA
CELULAR

PROTEJARE DE
INACTIVARE
MEDICAMENT LIBER
24.11.2014

MEDICAMENT
LEGAT DE VECTOR
Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Cerine fa de transportori (vectori)


Selectarea se face n funcie de capacitatea
lor de a realiza o legtur suficient de stabil
cu SM (evitarea eliberrii premature), dar
totodat i reversibil la nivelul locului de
aciune (eliberarea SM).
Specificitate pentru organul int
(recunoaterea intei);
Biodegradabili;
Mrimea particulelor transportoare s fie de
ordinul microi nano Transportorii macromoleculari
trebuie
1*10-6
1*10-9s
posede selectivitate pentru int (transport
tisular, celular i intracelular)
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

CLASIFICAREA TRANSPORTORILOR DE MEDICAMENTE


GENERAIA
INTA
DIAMETRUL
EXEMPLE

II

III

ESUT
> 1m

ESUT

CELULE
< 1m

MICROSFERE
MICROCAPSULE
PENTRU
CHEMOEMBOLIE

PRINCIPIU

24.11.2014

EMBOLIZARE

< 1m

1*10-9

PASIV
ACTIV
LIPOZOMI LIPOZOMI,
NANOSFERE,
NANONANOCAPSFERE
SULE
MAGNETICE
NANO
SAU
CAPSULE TERMOSENSIBILE

ANTICORPI
MONOCLONALI

AFINITATE
PENTRU
SRE

RECUNOATEREA INTEI

GHIDAJ
DIN
EXTERIOR

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

LIPOZOMI,
NANOCAPSULE,
NANOSFERE
PILOTATE DE
ANTICORPI
MONOCLONALI

Biofarmacie i farmacocinetic

Vectori medicamentoi (carriers):


microparticule
Microsfere

Mediu de dispersie cu
temperatur sczut

Amestec
topit
Cear

Ulei de
silicon

Alcool
cetilic

Ap distilat

Solidificare
Dispersare
Fuziune la cald a materialului suport
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Evaporarea solventului
Substana activ

Solvent
Polimer

Suspensia SM n
polimer

Ap distilat +
Emulgator

Emulsionare

Evaporare
Solidificare

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Microcapsule

Soluia apoas a SM

nveli de
polimer
Soluia de polimer
n solvent organic

24.11.2014

Nucleu de
SM
Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Transportori din prima generaie


Microsfera

Citostatic
Tumoare

Citostatice:
Cis platina;
Adriamiacina;
Metotrexat;
Schema chemoembolizrii cu microsfere
biodegradabile ncrcate cu citostatic,
administrate intraarterial (artera hepatic)
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Fluorouracil
Biofarmacie i farmacocinetic

Nanoparticule - vehicule pentru medicamente

TRANSPORTORI DE GENERAIA II
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

LIPOZOMI
Lipozomii sunt vezicule sferice avnd
peretele alctuit dintr-un strat dublu de
molecule fosfolipidice i o cavitate
central coninnd o soluie apoas.
Clasificare:

Unilamelari mici (diametrul 25-50 nm);


Unilamelari mari (diametrul 0,2-1 m)
Multilamelari (diametrul 100-150 nm)
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Materiile prime (de baz) utilizate la prepararea


lipozomilor

1. Fosfolipide
fosfatidilcoline de origine natural
(lecitine de glbenu de ou sau soia)
sau sintetice (dipalmitoil
fosfatidilcolina)
fosfatidilserine (confer sarcin
negativ)
2. Stearilamina (confer sarcin pozitiv)
3. Colesterol (reduce permeabilitatea
lipozomilor)
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Structura lipozomilor

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Componentele posibile ale lipozomilor

Strat protector
mpotriva distrugerii
imune

ADN

Peptide
mesagere

SM
cristalizat n
faza apoas
24.11.2014

Faza lipidic
bilamelar

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Substana activ
liposolubile

Biofarmacie i farmacocinetic

Celule protectoare i celule ieite de sub control

n cazul cnd apar


celule
canceroase
celulele
protectoare ( Tlimfocite) atac
celulele
transformate i le
distrug.

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Structura membranei celulare

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Posibiliti de interaciune a lipozomilor cu celulele

1. Adsorbie
stabil:
Specific
Nespecific
2. Endocitoz
3. Fuziune
4. Transfer lipidic
Adsorbie specific
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Avionul militar F 117 Stealth (invizibil)


pentru radare

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Structura lipozomilor Stealth (invizibil)

RDG peptide acid arginin-glicin-aspartic peptide-matrie


extracelulare

Lipozom conjugat cu Polietilenglicol (PEG)


24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Mecanismul de aciune al lipozomilor STEALTH


Celule tumorale

Spaiu interstiial
tumoral

Endoteliu sntos

Lipozomi Stealth

Endoteliu tumoral

Datorit nveliului specific hidrofilic (PEG, poloxameri,


poloxamine etc.) lipozomii Stealth (doxorubicin) sunt invizibili
pentru macrofagi i au o durat lung de circulaie sanguin, timp
necesar pentru difuziune n spaiul interstiial tumoral provocnd
alterarea i distrugerea endoteliului tumoral
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Virozomi
intirea celulelor imune: Virozomii sunt
bazai pe lipozomi constituii din
amestec de fosfolipide care servesc
drept gazd pe suprafaa lor a
proteinelor virusului INFLUENZA:
Haemagglutinin i Neuraminidase.
Aceste proteine confer virozomilor
proprieti de a fuziona cu celulele
sistemului imun stimulnd acest sistem
de a produce anticorpi
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Virozomi (imunolipozomi)

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Virusul pandemic A/H1N1


Virusul pandemic A/H1N1 virus modificat genetic
1. Deriv antigen modificri punctate a proteinei virusale de
baz Hemaglutinina (H) contribuie la nptrunderea virusului
n celula uman i Neuraminidazei (N) responsabil de ieirea
virusului nou din celua gazd.
2. Deplasare antigen se molipsesc i animalele, psrile
Pandemiile: H2N2 gripa asiat 1957-1958; H3N2 gripa
honcong 1968-1969; H1N1 2009; (1918-1920)

Virusul gripal A
24.11.2014

Virusul gripal A/H1N1


Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Mecanismele
de aciune ale
virozomilor cu
celulele
sistemului
imunitar

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Imunolipozomi ataai de celula tumoral

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

NIOSOMI (non-ionic surfactant vesicule)

Estradiol;
Vasopresin;
Doxorubicin;
Metotrexat

Surfactani ne-ionici: Dicetil fosfat;


Polisorbat 80; 60 sau 20;
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

NANOPARTICULE (90-150 nm)


NANOCAPSULE

SM este dizolvat,
dispersat sau adsorbit
pe suprafa
Se folosesc 2 tipuri de
polimeri:
Non biodegradabili
(alchilmetacrilaii);
Biodegradabili
(alchilcianoacrilaii)

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Prepararea nanocapsulelor prin polimerizarea


micelar
Medicament

Surfactant

Splare

Monomeri:
alchilmetacrilai
Iradiere UV
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Nanosfere (polimerizarea alchilcianoacrilailor)

Nanosfere: 50-500 nm

Polimerizarea
anionic

Emulsionare

Resuspendare
ultrasonic

CN

Surfactant
CH2=C

Medicament

COOR

Alchilcianoacrilai polimerizeaz
spontan la temperatura camerei
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Quantum
Cuantum;
mrime
cuantic
dot - punct;
pictur

A vial of anti-cancer nano ships glows red under a


black light. The particles glow red because they
contain fluorescent "quantum dot" nanoparticles
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Nanocristale (puncte cuantice)


Punctele cuantice prezint cristale de material semi-conductor de
dimensiuni nanometrice, cu proprieti fluorescente. Aceste particule,
fiind acoperite cu alte materiale, asigur deispersia i previn
scurgerea metalelor grele toxice, utilizate n diagnostic.

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Nanocapsule cu cisplatin

Cis-diamindiclorid platina
Are aciune antineoplazic , se leag de grupele
nucleofile ale ADN din celula tumoral, produce
legturi ncruciate cea ce contribuie la apoptoz i
inhibiia creterii.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Nanocapsule lipofile cu cisplatin


1 Suspensie apoas de particule
de cisplatin (rou) ncrcate
pozitiv i neutre (negru) (1);

2 - Congelarea suspensiei i
formarea de agregate cu lipozomi
ncrcai negativ (2,3,4);
3 - Formarea de agregate
acoperite cu lipide (nanocapsule)
(5);
4 Acapararea prin endocitoz a
nanocapsulelor, destabilizarea lor
i eliberarea intracelular a
cisplatinei (6);

Analiza sub microscopul electronic


al interaciunii celul tumoralnanocapsule
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Aciunea citotoxic a cisplatinei asupra celulei


tumorale este de 1000 ori mai mare dect la
medicamentul liber
Aplicaii terapeutice ale nanosferelor i nanocapsulelor:
1. Tratamentul unor cancere:
Nanosfere cu doxorubucin n tratamentul leucemiei;
Nanosfere cu doxorubucin n tratamentul cancerului hepatic a
condus la concentraii de 18 ori mai mari dect la medicamentul
liber;
2. Tratamente antiinvecioase:
Nanosfere cu ampicilin au produs un efect de 120 ori mai mare
n tratamentul infeciei cu Salmonella tiph. fa de ampicilina
liber
3. Alte utilizri:
Nanocapsule cu insulin protecie fa de enzime;
Nanocapsule cu indometacin protecia mucoasei stomacale de
aciunea ulcerogen a preparatului
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Anticorpi monoclonali (generaia 3 de


transportori
Antigen- substan, care introdus n
organism, poate produce anticorpi (anti
contra; gennan a nate; fr.)

Anticorp- protein a serului sanguin


secretat de ctre plasmocite, provenite din
limfocite de tip B (globule albe care intervin
n imunitatea celular) ca reacie la
introducerea n organism a unei substane
strine (antigen).
Sinonime: imunoglobulina; gamaglobulina
Clon () ansamblu de indivizi (bacterii,
celule, virusuri etc.) care provin dintr-un
individ unic.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Schema unui anticorp

COOH

COOH
Resturile
Lysyl
distribuite pe
peretele
moleculei
anticorpului

Lanuri de
legtur
disulfidice

-S-S-

NH2
NH2
24.11.2014

Locurile posibile
de legtur a
Medicamentului
Lector-Prof.univ. Eugen Diug

NH2

NH2

Biofarmacie i farmacocinetic

Funcia Anticorpilor Monoclonali


O imunoglobulin este capabil s se fixeze
pe antigenul care a provocat sinteza sa; ea
primete denumirea de anticorp.
Imunoglobulinele neutralizeaz antigenele i
le mpiedic s se reproduc.

Antigenele sunt distruse n continuare de


complement (sistem enzimatic) sau de ctre
celulele fagocitare (macrofage, limfocite T
etc.) care se fixeaz la rndul lor pe
imunoglobuline.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Schema de formare a anticorpilor monoclonali

Celule
mielome

Anticorpi
Celule B

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Algoritmul de formare al anticorpilor monoclonali (ACM)


1. Injectarea celulelor tumorale la
oareci pentru stimularea formrii
de celule B, care v-or produce
diferite tipuri de anticorpi
antitumorali (imunizarea)

2. Colectarea celulelor
mielomice imortalizate

3. Fuzionarea celulelor B cu celulele mielomice


pentru formarea de anticorpi productori de
celule hibride
4. Selectarea hibridomelor (celulelor hibride).
Clonarea acestor celule pentru producerea a unei
anumite cantiti de anticorpi monoclonali
5. Izolarea anticorpilor
monoclonali pentru cultivare

24.11.2014

ACM produse biologice care


(ataeaz) se aga de anumite
antigene de pe suprafaa celulei
maligne

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Posibile interaciuni ale ACM cu celula tumoral


1 AMC despuiat (nud)

3 intire n mai
multe trepte

2 imunoconjugate

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Mecanisme de aciune ale ACM n cazul


cancerului
Direct, prin stimularea sistemului imun
al gazdei, cruia i indic
(semnalizeaz) ce celul s atace;
Blocheaz receptorii pentru factorii de
cretere;
Acioneaz ca purttor (vehicul) al unei
substane citotoxice, pe care o
ataeaz direct pe int celula
malign.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Printre cei mai cunoscui ACM se numr:

RITUXIMAB (rituxan) tratamentul


limfoamelor nonhodjkiniene;

CETUXIMAB (erbitux) n cancerul


colorectal;

TRASTUZUMAB (herceptin) tratarea


cancerului de sn la pacientele care prezint
pe suprafaa celulei maligne receptori HER 2
n exces.

(obs., terminaia mab vine de la Monoclonal


Antibody)
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

inte pentru anticorpi monoclonali

CD20 este inta pentru anticorpi monoclonali (MAB)


rituximab , ibritumomab tiuxetan i tositumomab ,
care sunt toi agenii activi n tratamentul tuturor
celulelor B limfoame i leucemii .
Anti-CD20 mAb Ofatumumab ( Genmab ) a fost
aprobat de FDA in octombrie 2009 pentru tratarea
leucemiei limfocitare cronice .
CD20 este antigenul limfocitelor de tip B reprezentnd o fosfoprotein activatglicozilat ataat pe suprafaa tuturor
celulelor B care ncep formarea lor la faza
pro-B i creterea progresiv pn la
maturitate.
La om CD20 este codificat de gena
MS4A1
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

inte pentru anticorpi monoclonali


HER2 (receptorul pentru factorul de
cretere epidermal 2), de asemenea,
cunoscut sub numele de Neu, ErbB-2,
CD340 (cluster de difereniere 340) sau
p185, este o protein care la om este
codificat de gena ERBB2.
HER2 este un component al receptorului
factorului de cretere (EGFR / ErbB)
epidermal. Amplificarea sau supraexpresia acestei gene sa dovedit a juca
un rol important n dezvoltarea i
progresia de anumite tipuri agresive de
cancer de sn. n ultimii ani, proteina a
devenit un biomarker important i int
de tratament pentru aprox. 30% dintre
pacientii cu cancer de sn.

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Mecanisme de aciune ale preparatului Rituximab


ADCC (antibody-dependent cellmediated cytotoxicity): ADCC
(citotoxicitate dependent de anticorpi
celulari): celule naturale ucigase, celulele
T, ataate de AMC i macrofagii recunosc
i ucid anticorpii ca celule int, ceea ce
duce la liza celulelor
CDC (citotoxicitate dependent
de complement): Legarea
specific ACM de membrana
celulei i traversarea prin
canale, ca rezultat Retuxanul
ptrunde n celul i produce
liza acestora.

Apoptosis: Legarea AMC de


celule care semnalizeaz
distrugerea lor.
24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic

Cetuximab (Erbitux) este inhibitor al receptorului factorului de crestere


epidermic (RFCE) utilizat pentru tratamentul cancerului colorectal
metastatic i a cancerului capului si gatului. Cetuximab este un
anticorp monoclonal himeric (oarece/om) administrat prin perfuzie
intravenoas, care este fabricat i distribuit n Statele Unite de ctre
companiile farmaceutice Bristol-Myers Squibb i Eli Lilly and Company
i n Europa de ctre compania de medicamente Merck KGaA.

24.11.2014

Lector-Prof.univ. Eugen Diug

Biofarmacie i farmacocinetic