1

MICROBIOLOGIE
Curs 1/12.03.2012
SCURT ISTORIC AL MICROBIOLOGIEI
Microbiologia este tiina care se ocup cu studiul organismelor de dimensiuni reduse
care nu pot fi vizibile cu ochiul liber. Acestea sunt reprezentate de alge, fungi, virusuri,
viroizi, bacterii, prioni.
Etapele dezvoltrii microbiologiei ca tiin
1. Etapa intuitiv (din antichitate pn n prima jumtate a sec. al XVII-lea)
n aceast perioad se admite intuitiv existena microorganismelor. Se elaboreaz
teoria contagiunii care susine c bolile sunt provocate de particule numite seminaria
organisme vii capabile de multiplicare.
2. Etapa descoperirii bacteriilor i studierii acestora (a doua jumtate a sec. al XVIIIlea prima jumtate a sec. al XIX-lea)
Se fac primele studii privind morfologia bacterian i se ncearc clasificarea
bacteriilor. Se descoper microscopul, iar Ferdinand Cohn introduce termenul de bacterie i
scoate bacteriile din regnul animal i le introduce n regnul vegetal datorit existenei
peretelui celular. Se inhib teoria generaiei spontanee care susinea c procesele
microbiologice se datoreaz forelor divine.
3. Etapa dezvoltrii microbiologiei ca tiin
Aceast etap este marcat de apariia lui Louis Pasteur i Robert Koch. L.Pasteur
chimist la baz, este considerat printele microbiologiei. Contribuii importante:
- A demonstrat natura microbian a fermentaiilor.
- A studiat fermentaia vinului i a berii.
- A analizat fermentaia lactic, butiric si a descoperit bacteriile anaerobe.
- A demonstrat c vinul nclzit la 600C i prelungete perioada de conservabilitate,
procedeu cunoscut azi sub denumirea de pasteurizare, cu aplicaii largi n industria
alimentar.
- A demonstrat natura microbian a infeciilor. Bolile sunt produse de
microorganisme capabile de multiplicare. Bolile se transmit de la un organism la altul pe
diferite ci. A demonstrat c n cazul oilor moarte de antrax prezena bacteriilor nu reprezinta
o consecin a bolii, ci acestea reprezint chiar cauza acesteia.
- A pus bazele metodelor de sterilizare. Chirurgul englez Joseph Lister a introdus n
medicin principiile asepsiei elaborate de Pasteur.
- A demonstrat c apariia microorganismelor nu este una spontan. Dezvoltarea
acestora pe un anumit substrat nutritiv se datoreaz contaminrii cu microorganisme
existente n ap, sol, aer, diverse suprafee.
- A descoperit vaccinul mpotriva antraxului i vaccinul antirabic. Se studiaz i se
descoper toxinele bacteriene. Charles Eduard Chamberland a descoperit filtrele bacteriene i
a inventat autoclavul.

Robert Koch este considerat al doilea ntemeietor al microbiologiei, dar fr a avea

geniul lui Pasteur. Contribuii importante:
- A elaborat principiile pe baza crora un microorganism este considerat agentul
etiologic al unei boli. De aici rezult postulatele lui Koch care se refera la:
- indivizii bolnavi sau mori trebuie s prezinte aceleai simptome clinice,
iar microorganismele n cauz trebuie s se regaseasc n cazul ambelor categorii;
- microorganismele s se poata izola n culturi pure;
- prin inoculare la animale sensibile s produc o infecie identic sau
asemanatoare cu infecia natural.
- A reuit izolarea microorganismelor n culturi pure. O cultur pur se obine atunci
cnd pe un substrat nutritiv se devolt o singur specie microbian. Exemplu: n cazul
pacienilor cu salmoneloz, n fecalele acestora, salmonela coexista cu mai multe specii
microbiene. Pentru a stabili agentul etiologic al bolii este necesar izolarea n culturi pure.
Acest lucru a fost posibil odata cu introducerea mediilor solide pe suprafaa crora se
dezvolt coloniile bacteriene.
- Studiul reaciei alergice i a tuberculinei, substana revelatoare folosit pentru
stabilirea diagnosticului de tuberculoz la om.
- A elaborat numeroase vaccinuri i a studiat agentii etiologici ai diferitelor boli.
4. Etapa contemporan a dezvoltarii microbiologiei
S-au adus contribuii importante privind studiul microorganismelor si proceselor
fiziologice ale acestora.
S-au descoperit noi grupe de microorganisme i s-a facut ncadrarea taxonomic a
acestora.
S-a introdus n practica medical utilizarea unor grupe noi de antibiotice si
chimioterapice.
S-au nregistrat progrese privind genetica bacterian.
In paralel cu dezvoltarea microbiologiei ca tiin s-a dezvoltat i imunologia.
I. Mecinikov este considerat printele imunologiei. A descoperit fenomenul de
fagocitoz prin studierea digestiei la echinoderme. A subliniat faptul c la nivelul tubului
digestiv exist celule care au capacitatea de a ngloba particule strine, nedigerabile sau
microorganisme. Aceste celule au fost denumite fagocite.
S-a dezvoltat i virusologia n paralel cu microbiologia i imunologia. Dimitri
Ivanovski este cel care a studiat microorganismele din sol i a demonstrat rolul acestora n
fertititate. Este cel care a descoperit virusurile filtrabile.
In ara noastr se remarc contribuia lui Victor Babe considerat ntemeietorul colii
de microbiologie romneti. A colaborat cu Mecinikov i a elaborat primul tratat de
bacteriologie din lume. A adus contribuii importante n dezvoltarea seroterapiei. A
descoperit corpusculii Babes-Ernst. A elaborat numeroase vaccinuri i a studiat agenii
etiologici ai unor boli.
Cantacuzino a nfintat institutul care-i poart numele, a elaborat numeroase vaccinuri
i a adus contribuii importante n domneniile microbiologiei, imunologiei i virusologiei.

MICROBIOLOGIE
Curs 2/26.03.2012
Morfologia i biologia celulei bacteriene
Lumea vie a fost mprit n regnul animal i regnul vegetal, iar unitatea funcional a
lumii vii este celula.
In cadrul microorganismelor exista 4 diviziuni:
1. Protozoarele organisme care aparin regnului animal unicelular, cu organizare de
tip eucariot;
2. Fungii/miceti organisme care aparin regnului vegetal, unicelulare, cu organizare
de tip eucariot;
3. Bacterii prezint o structur rudimentar fiind mult mai simple dect cele doua
menionate anterior; prezint un tip de organizare procariot. Peretele celular
prezinta o structur chimic special i sunt ncadrate n regnul procaryota;
4. Virusuri organisme submicroscopice cu structura rudimentar. Prezint un
material genetic format din ARN sau ADN. Nu prezint echipament enzimatic,
motiv pentru care paraziteaz obligatoriu celule vegetale/animale. Sunt ncadrate n
cel de-al patrulea regn VIRA. Pe lng aceast categorie se pot aduga viroizii i
prionii care reprezint agenii infecioi ai plantelor i animalelor, despre care nu se
cunosc multe.
Termenul de bacterie a fost introdus n 1872 de ctre Ferdinand Cohn, moment n care
s-a ncercat i o prima clasificare a acestora.
In natur bacteriile exist sub dou forme:
- celula vegetativ este identic cu bacteria, prezentnd toate caracteristicile
speciei;
- sporul bacterian care reprezint o form de rezisten a bacteriei la condiiile de
mediu nefavorabile i pentru care funciile vitale se gsesc n stare dormant.
Bacteriile nu au reticul endoplasmatic, mitocondrii i aparat Golgi, structuri care se
ntlnesc la tipul de organizare eucariot.
Materialul genetic e format dintr-un singur cromozom alctuit dintr-o molecula mare
de ADN i fragmente extracromozomale numite plasmide, aceastea reprezentnd 1% din
materialul genetic.
Bacteriile nu prezint structuri interne delimitate de membrane. Unele specii prezint
la suprafa cili sau fimbrii.
Bacteriile prezint echipament enzimatic propriu, hrnirea se realizeaz prin absorbia
substanelor nutritive i poate fi de tip chimiotrof sau fototrof.
In cazul bacteriilor implicate n patologia animal i uman hrnirea e de tip
chimiotrof, iar n cazul celor implicate n patologia vegetal hranirea e de tip fototrof.

Inmulirea se realizeaz de regul prin diviziune simpl, mai rar prin nmugurire sau pe
cale sexuat.
Structuri caracteristice tuturor celulelor bacteriene: membrana, citoplasma, nucleu.
Acestea formeaz protoplastul; nveliul bacterian este prezent la majoritatea speciilor
de bacterii.
Structura caracteristic anumitor specii bacteriene : capsula, cilii sau flagelii, pilii sau
fimbriile.
Formele de existen ale bacteriilor:
1. Coc sferic sau oval
2. Bacil sub form de bastona
3. Vibrioni sub form de bastona curbat
4. Spirochet
Formele intermediare :
-forma cocoid : doi coci legai
-cocobacil:

un coc i un bacil legat

MICROBIOLOGIE
Curs 3/02.04.2012
Formele asismetrice:
-forma bombat la una sau la ambele extremiti: -form de mciuc
-form de haltera
-forma lanceolat
-forma renifer.
Gruparea bactreriilor reprezint un criteriu important pentru dentificare i rezult n
urma nedezlipirii celulelor sau neseparrii lor n urma diviziunii directe.
1. Gruparea diplo: - diplococi
- diplobacili
In cazul diplobacililor acetia
sunt aezai unul dup
altul sau se pot grupa n unghiuri asemanatoare litere V (bacilul rujetului).
2. Gruparea strepto: - streptococi
- streptobacili
Au asezare n lan.
3. Gruparea tetrada apare n cazul cocilor (cate 4 coci):
4. Gruparea sarcina doua tetrade suprapuse:
5. Gruparea n litere chinezeti este caracteristic bacililor:
6. Gruparea palisad (grilaj) este caracteristic bacililor. Acetia sunt aezai n paralel
asemenea dinilor unui pieptene:
7. Gruparea stafilo este caracteristic cocilor, acetia fiind aezai sub forma de
ciorchine de strugure (stafilococus aureus):

8. Gruparea sub form de filament:

9. Gruparea ramificat:

Dimensiunea bacteriilor
Bacteriile prezint o lungime medie de 1 8 m. Exist i bacterii cu lungimea de 15
m i grosime de 0.1 - 0.2 nm. Exist o corelaie strns ntre lungime i grosime genurile
Clostridium i Bacillus (cereus, subtilis).
Constantele fizice ale bacteriilor
Acestea se refer la suprafa, greutate i volum. Aceste valori variaz de la o specie la
alta, iar n cadrul aceleiai specii prezint valori constante, de regula, raportul
suprafa/greutate i suprafa/volum este mult mai mare n cazul bacteriilor comparativ cu
celulele animale superioare.
Structura celulei bacteriene
Celula bacterian este format din: - nveli sau perete celular
- continut
- organite (numai la anumite specii)
Inveliul. Scheletul biochimic este format dintr-un strat dublu de fosfolipide. Prezint
o structur elastic, nu are rezisten mecanic, iar din punct de vedere biochimic intervine n
reglarea presiunii osmotice i reprezint sediul proteinelor enzimatice care pot migra ctre
interiorul sau exteriorul celulei.
Rolurile peretelui celular:
-reprezint un filtru care permite ptrunderea selectiv a substantelor nutritive,
facilitnd i eliminarea metaboliilor;
-separ celula de mediul n care se gsete;
-joac rol de barier osmotic;
-intervine n diviziune i sporogenez.
Mezozomii reprezint invaginri sau plieri ale peretelui celular ctre interiorul celulei.
O celul bacterian poate avea 1 sau 2 mezozomi. Are form tubular sau vezicular.
Din punct de vedere funcional au rol asemntor mitocondriilor de unde i denumirea
de condrioizi.

MICROBIOLOGIE
Curs 4/07.05.2012
Coninutul celulei bacteriene
Este reprezentat de citoplasm, n care, pe lng alte structuri exist i material
genetic.
Materialul genetic sau materialul nuclear este alctuit dintr-o molecula dublu catenar
de AND cu o lungime cuprins ntre 1000-1400 nm i o grosime de 2 nm. Prezint aprox.
aceeai form cu celula bacterian i reprezint 5 16% din volumul acesteia. Se leag de
membrana citoplasmatic i se coloreaz prin metode speciale. Materialul genetic contine i
molecule mici de AND bicatenar numite plasmide. Totalitatea plasmidelor formeaz
plasmonul. Plasmidele mai sunt cunoscute sub denumirea de AND extracromozomal.
Materialul genetic are rol n autoreplicare, heteroreplicare, determinarea caracterelor
genetice ale celulei bacteriene i transmiterea lor ereditara.
Autoreplicarea - molecula de AND dublu catenar se desface, iar clivajul este urmat
de alipirea imediata a catenelor complementare.
Heteroreplicarea intervine n sinteza unor proteine funcionale numite enzime.
Citoplasma reprezint un sistem coloidal, complex, fin granular, format din
substane nutritive, glucide, lipide, proteine, sruri minerale i ap. Are consistena unui gel.
Nu prezint o organizare bine definit ca cea a celulei eucariote, nu are reticul endoplasmatic
(RE). Este alcatuit din material genetic i structuri granulare, incluziile, vacuolele. La
celulele mbtrnite citoplasma se retract, iar cantitatea de AND se reduce, cu formare de
structuri granulare cu vacuole.
Structura fin granular se datoreaz prezenei unui numr foarte mare de molecule de
ARN ribozomal cunoscute sub denumirea de ribozomi sau granulele lui Palade. Reprezint
80-90% din total ARN citoplasmatic i reprezint sediul sintezei proteinelor. In citoplasm
exist i ARN de transfer care reprezint 10-20% din total ARN.
Incluziile sunt formaiuni cu caracter inert alctuite din polimeri organici sau
anorganici i reprezint probabil rezerve de substane nutritive.
Magnetozomii sunt incluzii care conin Fe i se ntlnesc la bacteriile acvatice.
Cromatoforii reprezint aparatul fotosintetic ntalnit la bacteriile fotosintetizante.
Vacuolele conin lichid sau gaz, n special N (azot) i intervin n reglarea presiunii
osmotice fa de mediul extern.
Pigmenii reprezint criterii de identificare a speciilor, iar semnificaia lor biologica nu
este pe deplin cunoscut.

Citoplasma este sediul metabolismului celular. La acest nivel au loc acumulrile de

substane nutritive din mediile de cretere, sintezele celulare, procesele de dezasimilaie i
transformare calitatitiv care condiioneaz alte fenomene cum ar fi creterea i
multiplicarea.
Organitele celulare La anumite specii bacteriene, pe suprafaa celulelor exist
organite celulare. Acestea sunt reprezentate de cili sau pili. Cilii sau flagelii sunt filamente
cilindrice, flexibile cu o lungime de cteva ori mai mare decat cea a celulei bacteriene, o
grosime cuprins ntre 0,01 0,02 m. Sunt vizibili numai la microscopul electronic. Toate
bacteriile care prezint cili sunt mobile. In practic se pun n eviden prin preparate
proaspete (examinare ntre lam i lamel) se pune o picatur de lichid ntre lam i lamel
sau examinare pe medii semisolide proaspete, n cazul n care se formeaz colonii difuzibile
care se dezvolt n film continuu (fenomen de roire).
In funcie de prezena i numrul cililor, bacteriile se mpart n:
- atricha = fr cili;
- monotricha = un singur cil la una din extremiti (pseudomonas aeruginosa);
- amfitricha = 2 cili situai cte unul la o extremitate a bacteriei;
- lafotricha = mai muli cili situai la o extremitate a celulei bacteriene;
- peritricha = mai muli cili situai pe toat suprafaa celulei bacteriene (E.Colli,
Proteus mirabilis i unele specii ale genului Clostridium).
La bacteriile gram pozitive gram (+), coloraie albastru-violet cilii sunt alctuii din
2 discuri, iar la bacteriile gram negative gram (-), coloraie roie - din 4 discuri.
Discurile prezint urmtoarea terminologie:
- discul M = disc de membrana sau disc rotor;
- discul S = disc submembranar sau disc stator;
- discul P = disc din stratul peptidoglicanic;
- discul L = disc din membrana extern.
Cele 4 discuri sunt unite printr-un ax transversal. Intre ax i filament exist carligul sau
articulaia flexibil.
Din punct de vedere chimic, cilii sunt alctuii dintr-o proteina cunoscut sub
denumirea de flagelin, cu o structura asemntoare miozinei.
Rol: intervin n locomoie, cu ajutorul cililor bacteriile invadeaz esuturile i sunt
dirijate ctre substanele nutritive (fenomen cunoscut sub denumirea de chimiotactism
pozitiv) i ndepartate de substanele nocive (chimiotactism negativ).
Prezena cililor este determinat genetic, dar anumii factori de mediu induc variaii
fenotipice (Listeria monocytogenes i Yersinia enterocolitica sunt mobile la temperatura de
20 250C i imobile la 370C.
Pilii sau fimbriile sunt apendici filamentoi mai scuri dect cilii. Exist mai multe
categorii de pili: I, II, III, IV, V si F. In ultimul timp s-a sugerat c categoriile de la I la V s
fie denumite fimbrii, iar tipul F s fie denumit pil (pil propriu-zis, pil sexual sau pil donor).
Fimbriile i pili sunt diferiti din punct de vedere chimic; fimbriile sunt alctuite din
subuniti proteice, iar tipul F este alctuit dintr-o fosfoglicoprotein pilina.
Pilii sunt aezati pe toat suprafaa celulei bacteriene, apar mai rar la bacteriile gram
(+) i mai des la cele gram (-).
Au funcii diferite:
categoriile I V ndeplinesc urmtoarele roluri:

- mresc gradul de vitalitate al bacteriilor i determin o rezisten mai mare la

fagocitoz;
- mresc aderena celulelor bacteriene la epitelii;
- au rol n procesul de hemaglutinare;
- formeaz membrane la suprafaa mediilor lichide.
tipul F intervine n fenomenul de conjugare al bacteriilor.
Morfologia i biologia sporului bacterian
Forma de spor se ntlnete la anumite specii bacteriene (gen Bacillus, Clostridium,
specia de coc Sporosarcina ureae). Sub aceast form bacteriile pot rezista perioade lungi
(zeci de ani) n condiii nefavorabile.
Dintr-o singur celula vegetativ se formeaz un singur spor. Mai rar 2 spori (bacterii
bisporulate).
Etapele sporogenezei (reprezint procesul de transformare a celulei vegetative n spor):
- etapa I pregatirea celulei pentru sporogenez (contopirea materialului genetic,
segmentarea acestuia i reorganizarea celor 2 cromozomi);.
- etapa II formarea presporului;
- etapa III evoluia separata a celor 2 segmente;
- etapa IV maturarea sporului.

10

MICROBIOLOGIE
Curs 5/14.05.2012
Maturarea sprorului reprezint un proces prin care acesta capat proprieti
caracteristice:
-formarea nveliurilor sporale;
-formarea unor compui chimici caracteristici sporului;
-sporul capat o rezisten mai mare la aciunea factorilor de mediu comparativ cu
celula vegetativ;
-intensitatea proceselor metabolice scade foarte mult.
Comparativ cu celula vegetativ, sporul prezint dimensiuni mai mici: L = 1,5 2 ;
transversal 1,2 .
Structura sporului bacterian (de la interior spre exterior)
Inima sporului format din sporoplasm (corespunztoare citoplasmei celulei
vegetative) i nucleoplasm sau material nuclear format din AND.
Membrana intern delimiteaz sporoplasma i formeaz uneori mezozomi. Este
cunoscut i sub denumirea de intin.
Cortexul nveli gros format din peptidoglicani cu capacitate electro-optica redus.
Inveliurile sporale sau exina sau tunicile sporale au structur plurilamelar.
Exosporium este prezent numai la anumite celule bacteriene.
Apendicii sporali au form de tuburi turtite, situai la una din extremitile sporului
bacterian, cu funcie biologic incomplet cunoscut.
Corpii parasporali se ntlnesc numai la anumite celule bacteriene i prezint caractere
de patogenitate pentru insecte la anumite specii cum ar fi Bacillus subtilis, Bacillus
megatherium.
Caracteristicile biologice i fizico-chimice ale sporului
Sporul reprezint o form dormant a bacteriei la nivelul cruia nu au loc schimburi de
substane nutritive cu mediul extern, motiv pentru care nu crete i nu se multiplic.
Activitatea metabolic la nivelul sporului este redus.
Prezint o rezisten mai mare la aciunea factorilor externi datorit coninutului mai
mic n ap (40-50%) comparativ cu celula vegetativ (80-90%).

11

Sporul conine o cantitate mai mic de ap liber, ioni de P i K. De asemenea,

prezint concentraii ridicate de ioni de Ca, Mg, Mn, cistein, proteine structurale i enzime
litice (glucozodehidrogenaza). Enzimele sporale au greutate molecular mai mic i sunt
termorezistente.
Impermeabilitatea fa de colorani motiv pentru care se coloreaz numai prin
metode speciale.
Termorezistena: rezist cteva zeci de minute sau chiar ore la 120 0C cldur umed i
1800C caldur uscat. Termorezistena variaz n funcie de specia bacterian precum i de
condiiile de mediu n care a avut loc sporogeneza. Astfel, bacteriile care sporuleaz pe medii
cu un coninut bogat n ioni de Ca sunt mai rezistente la temperatur dect cele care
sporuleaz pe medii nutritive srace n ioni de Ca.
Rezistena la uscciune.
Rezistena la anumii agenti chimici: alcool, cloroform, glicerin (glicerina favorizeaz
dezvoltarea microbian).
Germinarea
Reprezint procesul prin care sporul bacterian se transform n celul vegetativ. Are
loc n 2 faze:
1. iniierea geminrii sporul i mrete volumul ca urmare a absorbiei unei cantiti
mari de ap. Inveliurile sporale, la unele specii, se lizeaz, iar la altele se dezintegreaz.
2. dezvoltarea post germinativ celula vegetativ capt proprieti caracteristice.
Germinarea i sporogeneza sunt determinate genetic, ele gsindu-se sub controlul a 50
de gene. Cele 2 procese sunt influenate de factorii de mediu astfel:
-sporogeneza este influenat de temperatur, uscciune, absena substanelor nutritive,
creterea densitii pe unitatea de volum sau pe suprafaa de mediu nutritiv, prezena
oxigenului n cazul bacteriilor anaerobe;
-germinarea este influenat de anumii factori: ocul termic, pH-ul cuprins ntre 6 i 8;
prezena substanelor nutritive ioni de Ca, Na, K, -alanina, etc.
Infeciile provocate de bacteriile care sporuleaz sunt considerate, n general,
neeradicabile, iar n industria alimentar aceste specii ridic probleme privind maturarea i
conservarea produselor.