Explorați Cărți electronice
Categorii
Explorați Cărți audio
Categorii
Explorați Reviste
Categorii
Explorați Documente
Categorii
COALA DOCTORAL
TEZ DE DOCTORAT
REZUMAT
Conductor de doctorat,
Prof. Univ. Dr. LAURENIU MOGOANT
Student doctorand,
LILIANA NI-TEFNESCU (STREBA)
CRAIOVA
2013
Investete n oameni !
FONDUL SOCIAL EUROPEAN
Programul Operaional Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane
2007 2013
Axa prioritar 1
Educaia i formarea profesional n sprijinul creterii
economice i dezvoltrii societii bazate pe cunoatere
Domeniul major de intervenie 1.5
Programe doctorale i postdoctorale n sprijinul cercetrii
Titlul proiectului
"Creterea calitii i vizibilitii rezultatelor cercetrii tiinifice a
doctoranzilor cu frecven prin acordarea de burse doctorale"
Contract nr: POSDRU/107/1.5/S/82705
Beneficiar
Universitatea de Medicin i Farmacie din Craiova
CUPRINS
INTRODUCERE
STADIUL CUNOATERII
1. Anatomia i histologia intestinului gros
1.1 Date de anatomie topografic i descriptiv a intestinului gros
1.2 Structura histologic a intestinului gros
1.3 Vascularizaia i inervaia intestinului gros
2. Cancerul colorectal
2.1 Epidemiologie
2.2 Etiopatogenie
2.3 Morfopatologie
2.4 Stadializarea cancerului colorectal
2.5 Diagnosticul cancerului colorectal
2.6 Evoluie, complicaii i factori de prognostic n cancerul colorectal
3. Opiuni terapeutice n cancerul colorectal
3.1 Profilaxia CCR
3.2 Strategii terapeutice n funcie de stadiu
3.3 Tratamentul chirurgical
3.4 Chimioterapia adjuvant
CONTRIBUII PERSONALE
Obiectivele studiului
4. Studiul clinicostatistic al carcinoamelor colorectale
5. Studiul histologic al carcinoamelor colorectale
6. Studiul imunohistochimic al carcinoamelor colorectale
7. Studiul endomicroscopic al carcinoamelor colorectale
CONCLUZII FINALE
CUVINTE CHEIE
carcinom colorectal, morfometrie, imunohistochimie, analiz fractal de imagine,
endomicroscopie confocal laser
STADIUL CUNOATERII
CONTRIBUII PERSONALE
63,66 ani 13,4. Nu am putut observa ns diferene semnificative n ceea ce privete distribuia
vrstelor n funcie de sex (test t Student, P=0,17). Am studiat n continuare repartiia lotului de
pacieni n funcie de mediul de provenien, observnd o repartiie aproximativ egal a
pacienilor ntre urban i rural (81 pacieni din mediul urban versus 88 pacieni din mediul rural,
raport 1,09:1). Astfel, pacienii provenii din mediul urban au avut o vrst medie de 58 ani
11, n timp ce pacienii din mediul rural au avut o medie a vrstelor de 66 ani 14 (test t Student,
P < 0,0001).
Am observat o diet necorespunztoare n 76 cazuri. Un numr de 73 pacieni (22 femei,
51 brbai) au recunoscut consumul de alcool n exces (peste 4g alcool pe zi, minim patru zile
pe sptmn). Efectund indicele de mas corporal am observat c un total de 68 pacieni
(40% din lotul studiat) suferea de obezitate (BMI > 30); 79 pacieni (dintre care 66 cu probleme
de diet i 51 pacieni obezi) aveau de asemenea diabet zaharat tip II (41 brbai, respectiv 38
femei). Diverii factori familiali i afeciuni polipozice familiale au fost ntlnite la un total de
56 pacieni (35 brbai, 21 femei).
Am ntlnit un risc statistic semnificativ crescut n cazul pacienilor cu diet
necorespunztoare (RR=6,83; CI95% =3,16 11,21), la pacienii obezi (RR=4,11; CI95%=2,72
8,12), la pacienii cu consum de alcool n exces (RR=6,11; CI 95% 3,84 10,96) i la pacienii
fumtori (RR=5,97; CI 95% 1,38 7,92).
n ceea ce privete tipul histologic, un total de 134 cazuri prezentau adenocarcinom
colonic (79,2% din totalul pacienilor, 78 brbai i 56 femei), 28 carcinom coloid (16,56%, 16
brbai respectiv 12 femei), 6 pacieni carcinom cu celule n inel n pecete (3 brbai, respectiv
3 femei) i un brbat carcinom scuamos. Am identificat un total de 88 carcinoame bine
difereniate (52% din lotul studiat, 48 brbai i 40 femei), 49 carcinoame moderat difereniate
(29%, 29 brbai i 20 femei), 25 carcinoame slab difereniate (14,8%, 16 brbai, respectiv 9
femei) i doar 7 nedifereniate (4,1%, 5 brbai i 2 femei). Majoritatea tumorilor au fost
identificate la nivelul colonului sigmoid (66 cazuri, 39%), urmate de cele situate la nivelul
colonului descendent (41 formaiuni, 24,3%), transvers (28 cazuri, 16,5%), tumorile cecale (18
cazuri, 10,7%) i la nivelul colonului ascendent (16 cazuri, 9,5%).
Am identificat 34 pacieni (20,11% din lotul studiat) cu metastaze ganglionare (28
brbai i 6 femei). Metastazarea la distan n diferite organe majore a fost de asmenea ntlnit
la un total de 19 pacieni (11,24% din lotul studiat). n ordinea numeric, am identificat 11
metastaze hepatice (6 brbai, 5 femei), 4 pulmonare (3 brbai i o femeie), dou osoase
(ambele la pacieni de sex masculin) i dou renale.
ale tumorii. Lumenele glandulare au fost fie largi, pline cu detritusul descris anterior, alteori
redus ca dimensiuni, pn la absena complet a acestuia n unele cazuri. Am putut observa
prezena multiplelor atipii celulare n toate tipurile de adenocarcinoame, indiferent de forma
glandelor.
Aceste particulariti ne-au orientat n continuare n analiza fractal a formei i a
dimensiunii nucleilor celulari tumorali, care s-au aflat n deplin corelaie cu gradul de
difereniere tumoral, dar i cu tipul histologic.
Am urmrit dispoziia cromatinei nucleare n coloraia standard HE, cuantificnd astfel
aberaiilw de form i de dimensiune ale celulelelor maligne. n urma analizei datelor, am
observat variabilitatea sczut a valorilor, cu o deviaie standard foarte sczut, majoritatea
valorilor fiind constant crescute n cazul imaginilor nregistrate din zonele tumorale. S-au putut
totui observa diferene semnificative ntre diferitele grade de difereniere (p<0,001). Am
identificat diferene semnificative ntre DF celor trei tipuri distincte adenocarcinoamele fr
secreie de mucus n exces, carcinoamele cu secreie excesiv de mucus extracelular i
carcinoamele cu secreie de mucus intracelular crescut (test ANOVA cu 2 grade de libertate,
P < 0,0001). Post-testul Bonferroni ne-a demonstrat c aceste diferene au rmas valabile
indiferent de tipurile luate n calcul.
Dispunerea cromatinei nucleare a relevat diferene structurale majore n cazul nucleilor
modificai malign, cu o DF medie net mrit n cazul adenocarcinoamelor dar numai moderat
crescut n cazul carcinoamelor cu celule n inel cu pecete, datorit formei particulare pe care
nucleii acestora le capt prin acumularea intracelular de secreie mucoas. Analiza statistic
a datelor prin testul ANOVA a relevat diferena important a mediilor corespunztoare fiecrei
serii de valori (p<0,0001).
DF a nucleilor celulelor aparinnd infiltratului inflamator au avut valoarea median
1,151 (minimul 1,101; maximul 1,189), cele normale 1,202 (minimul 1,215 maximul 1,231) pe
cnd cele maligne 1,302 (minimul 1,256 maximul 1,378). Calculele statistice au relevat
diferene semnificative ntre valorile medii ale DF ale nucleilor tumorali, comparativ cu cei ai
celulelor proprii sau cu cele ale infiltratului inflamator (test ANOVA, p<0,0001). Am obinut o
serie de valori ale DF corespunztoare complexitii conturului acestor elemente proliferative,
semnificative deci nu att pentru aria ocupat, ct mai ales pentru gradul de entropie prezent n
imagine
REZULTATE
Aspectul endomicroscopic a fost concludent pentru un adenocarcinom slab difereniat,
neputndu-se identifica structuri glandulare normal constituite. Zonele de au prezentat glande
cu lumen alungit, cu epiteliu pseudostratificat sau cu forme celulare aberante i secreie
mucoas abundent. Nu am observat vase de snge bine delimitate, iar resturile celulare au fost
abundente n majoritatea cmpurilor optice investigate. Lacurile de fluorescein sodic au
indicat rupturi vasculare n teritoriul tumoral, odat cu invazia neregulat a celulelor maligne.
Nucleii celulelor malignizate era mrit de volum, iar raportul ntre nucleu i citoplasma
delimitat de zonele intercelulare.
Am cuantificat DF pe un lot semnificativ de minim 10 imagini per caz investigat prin
eCLE, rezultnd astfel un numr total de 184, respectiv 272 valori. n urma analizei datelor
referitoare la structurile glandulare, am observat variabilitatea sczut a valorilor, cu o deviaie
standard foarte sczut, majoritatea valorilor fiind constant crescute n cazul imaginilor
nregistrate din zonele tumorale. Statistica Mann-Whitney a demonstrat i aici diferene
semnificative ntre valorile medii atribuite DF pentru zonele tumorale i cele rezultate din
zonele de mucoas normal (p<0,0001). Am observat diferene ntre distribuia mediilor pentru
ambele sisteme endomicroscopice testate.
CONCLUZII
Cancerul colorectal reprezint o problem major de sntate public n ntreaga
lume, cu predilecie n rile industrializate. Putem vorbi despre o grup populaional cu risc
crescut familial, prin existena afeciunilor genetice multiple care constituie leziuni premaligne
pentru cancerul de colon. Exist o multitudine de factori de risc externi asociai cu
carcinogeneza CCR, cei mai importani fiind legai de diet, consumul excesiv de alcool sau
fumat. Un diagnostic corect i rapid poate asigura anse mult sporite pacienilor cu CCR.
Analiza fractal de imagine prin calcularea DF reprezint o unealt extrem de util
n caracterizarea i clasificarea tipurilor de carcinoame colorectale. Analiza dispunerii
cromatinei nucleare prin metoda calculrii DF poate cuantifica precis dimensiunea nucleilor
celulelor maligne ntlnite att n tipurile diferite, ct i n toate gradele de difereniere ale
carcinoamelor colorectale studiate de noi.
Studierea formei nucleilor celulelor maligne prin analiz fractal de imagine aduce
un plus important de informaie n clasificarea morfometric a principalelor trei tipuri de
carcinoame colorectale. Este posibil caracterizarea complex a morfologiei stromei tumorale
prin cuantificarea cantitativ a imaginilor bazat pe analiz fractal.
9
10
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. Center MM, Jemal A, Ward EM. International trends in colorectal cancer incidence
rates. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2009; 18(16):1688-94.
2. Zavoral M, Suchanek S, Zavada F, Dusek L, Muzik J, Seifert B, Fric, P. Colorectal
cancer screening in Europe. World J. Gastroenterol. 2009; 15:59075915.
3. Lynch HT, Chapelle A. Hereditary colorectal cancer. N Engl J Med. 2003; 348:919
932.
4. Dahm CC, Keogh RH, Spencer EA, Greenwood DC, Key TJ et al. Dietary fiber and
colorectal cancer risk: a nested casecontrol study using food diaries. J Natl Cancer Inst.
2010; 102:614626.
5. Lucendo J.A., Guagnozzi D. Colorectal cancer surveillance in patients with
inflammatory bowel disease: What is new?. World J Gastrointest Endosc. 2012; 16;
4(4): 108116.
6. Fleming M, Ravula S, Tatishchev SF, Wang HL. Colorectal carcinoma: pathologic
aspects. J Gastrointest Oncol, 2012; 3:153-73.
7. Puppa G, Sonzogni A, Colombari R, Pelosi G. TNM staging system of colorectal
carcinoma: a critical appraisal of challenging issues. Arch Pathol Lab Med. 2010;
134(6):837-52.
8. Macrae AF, Young PG. Neoplastic and nonneoplastic polyps of the colon and rectum.
In: Yamada T., ed. Textbook of Gastroenterology, Fifth Edition, 2009. Blackwell
Publishing. ISBN: 978-1-405-16911-0, pag. 1611-1639.
9. Cross SS. Fractals in pathology. J Pathol, 1997; 182:1-8.
10. Cross SS. The application of fractal geometric analysis to microscopic images. Micron,
1994; 25:101-113.
11. Jeon SR, Cho WY, et al. Optical biopsies by confocal endomicroscopy prevent additive
endoscopic biopsies before endoscopic submucosal dissection in gastric epithelial
neoplasias: a prospective, comparative study. Gastrointest Endosc. 2011;74(4):772-80.
12. Sanduleanu S, Driessen A, Gomez-Garcia E, Hameeteman W, de Brune A, Masclee A.
In vivo diagnosis and classification of colorectal neoplasia by chromoendoscopy-guided
confocal laser endomicroscopy. Clin Gastroenterol Hepatol 2010; 8: 371-378.
11