CURS 3

METABOLISMUL BACTERIAN.
CRESTEREA SI MULTIPLICAREA BACTERIILOR.
GENETICA BACTERIANA. MEDIILE DE CULTURA.
Caracteristicile metabolismului bacterian
- este un metabolism unicelular, se desfoar intr-o singur celul;
- este un metabolism necompartimentat, caracteristic procariotelor (lipsa organitelor
citoplasmatice).
- este un metabolism teleonomic, in timpul evolutiei au fost selectate acele ci metabolice i
acele mecanisme de reglare care s-i asigure o eficient maxim;
- se caracterizeaz printr-o mare flexibilitate metabolic, o capacitate crescut de adaptare n
condiii foarte variate de mediu;
- este un metabolism de mare intensitate ceea ce asigur o multiplicare rapid cu timp de
generatie de 20' (celulele de mamifere au timp de generaie de cel puin 24 ore).
Metabolismul bacterian
Metabolismul bacterian este reprezentat de totalitatea proceselor biochimice intracelulare prin
care substratul nutritiv este transformat in energie i constitueni celulari.
Metabolismul bacterian este de dou tipuri:
- metabolism energetic - prin care se asigur respiratia bacterian i este realizat prin reacii
catabolice;
- metabolism de sintez - prin care se asigur sinteza componentelor bacteriene i se realizeaz
prin reacii anabolice i catabolice.
* Metabolismul energetic poate avea dou surse de energie:
- lumina, n cazul bacteriilor fotosintetizante,
- reactii biochimice de oxido-reducere, n cazul bacteriilor chimiosintetizante.
Majoritatea sunt chimiosintetizante.
Clasificare:
a) n functie de natura acceptorului final de hidrogen exist tipuri de respiratii:
Respiratie aerob (oxibiotic):
- acceptorul final este oxigenul atmosferic, 02, iar produsul rezultat este apa.
Acest proces este deservit de mai multe sisteme enzimatice dehidrogenazice: nicotinice,
flavinice, citocromii.
- n urma acestor reactii se elibereaz o cantitate mare de energie.
Respiratie anaerob (anoxibiotic):
- acceptorul final este orice substan anorganic diferit de oxigen, ex. CO 2 sau o substant
organic (fermentaie).
- din punct de vedere energetic, fermentaia este inferioar respiratiei aerobe, ea furnizeaz de
12-19 ori mai puin energie (ATP).
b) n funcie de potenialul redox, bacteriile pot tri n medii cu cantitai variate de oxigen i se
mpart n patru tipuri respiratorii:
1.Bacterii strict aerobe

- aceste bacterii cresc numai n prezena unei cantiti mari de oxigen;

- ele au urmtoarele enzime: catalaz, peroxidaz i citocromi.
2. Bacterii strict anaerobe
- cresc numai n absenta oxigenului, sunt lipsite de enzimele de mai sus ;
- aceste bacterii sunt foarte sensibile la aciunea oxigenului, care le este toxic.
3. Bacterii aerobe, facultativ anaerobe
- au posibilitatea ambelor tipuri de respiratie, n funcie de existena oxigenului.
4. Bacterii anaerobe microaerofile
- tolereaz cantiti mici de oxigen, probabil prin achiziia unor enzime de tip catalazic.
* Metabolismul de sintez
Este suma proceselor metabolice, ce concur la procurarea de materiale convertibile in energie i
componente celulare, necesare creterii i multiplicrii bacteriene.
n functie de modul de procurare a acestor elemente, bacteriile sunt de trei tipuri :
a. Autotrofe: utilizeaz pentru sinteze azotul i carbonul din compui anorganici simpli: CO 2,
NH3, NO2, NO3.
b. Heterotrofe: utilizeaz pentru sinteze azot i carbon din substane organice diferite, produi
de alte organisme, putndu-i sintetiza singure metaboliii eseniali.
Majoritatea bacteriilor sunt in aceast categorie.
c. Parotrofe: sunt bacteriile care nu-i pot sintetiza singure metaboliii esentiali. Ele se dezvolt
numai intracelular.
Ex. Rickettsia prowazeki, agentul tifosului exantematic.
Genetica microbian
Dup modelului lui Watson i Crick (1953), molecula de ADN este reprezentat in lumea
vie, deci i la procariote, de un dublu helix constituit din dou lanuri complementare
polinucleotidice, cu caracter de polimer, format printr-o repetare de unitti
dezoxiribonucleotidice, esterificate.
n fiecare dintre aceste lanuri, elementele caracteristice ale unitilor
dezoxiribonucleotidice, adic bazele azotate, purinice i pirimidinice, sunt orientate ntr-o
succesiune specific de-a lungul unei coloane alctuit printr-o alternant regulat de
dezoxiriboz si grupari fosfat.
Cele dou lanuri sunt meninute fa n fa prin punti de hidrogen (legtur de natur
electrostatic), ce se realizeaz ntre bazele azotate aparinnd celor dou catene.
Legturile de hidrogen (datorit condiiilor stereochimice) se pot realiza numai ntre
bazele structural complementare: adenin i timin, ntre guanin i citozin, aceast situaie
reprezint - principiul mperecherii bazelor - , ea determin complementaritatea celor dou
lanuri din molecula de ADN.
Genotipul este totalitatea informaiei genetice pe care o posed un anumit organism.
Fenotipul este totalitatea caracterelor exprimate de un organism, el poate prezenta
variaii importante, care sunt n mare msur influenate de conditiile de mediu. Modificrile n
fenotip survenite in timpul vietii unui organism nu se transmit descendenilor, n timp ce orice
alterare a genotipului va afecta i descendentii.
Materialul genetic nuclear (cromozomul bacterian este format dintr-un ADN dublu catenar,
helicoidal , care deine informaia pentru funciile vitale ale bacteriei.
Celula bacterian este haploid pentru c are un singur cromozom (un singur lan ADN).
Cromozomul nu este nvelit de membran nuclear, venind n contact cu citoplasma.

 Desfurat cromozomul are o lungime de cca. 1 mm i are o form circular (dimensiuni

imense raportat la dimensiunea celulei).
Prezint ns un arnajament spatial special, realizat printr-o infaurare sau mpachetare", ce
i permite s ocupe n celul un spaiu foarte mic i care explic totodat aspectul de structur
fibrilar pe care l prezint materialul nuclear bacterian.
Componentele unui cromozom
Gena este o mic poriune a genomului, o secven anumit de nucleotide (dispuse liniar), care
codific informaia pentru o protein.
Cistronul este cea mai mic subunitate a genomului, care codific informaia pentru un lan
polipeptidic i poate fi un sinonim al genei.
Codonul este unitatea morfologic format din 3 baze azotate succesive care codific inserarea
uni aminoacid dintr-un lan polipeptidic.
ADN-ul este format din:
- baze purinice: adenin (A) i guanin (G):
- bazc pirimidinice citozin (C) i timin (T).
ARN-ul este format din aceleai baze purinice i pirimidinice, dar timina
(T) este nlocuit cu uracilul (U).
Pe matria de ADN, ARN polimeraza, ADN-depentent, sintetizeaz un ARNm (mesager)
complementar cu portiunea de ADN respectiv, care ia nivelul ribozomilor este decodificat n
proteine.
Materialul genetic extracromozomial
Este format din ADN dublu catenar, helicoidal.
Deine informaii neeseniale pentru bacterie care se pot pierde fr a afecta viata bacteriei,
contribuind la valabilitatea bacterian.
Acest material este reprezentat de:
1. Plasmide propriu-zise, care sunt formaiuni de ADN circular, nu se integreaz in cromozom,
se afl numai n stare autonom. Ele au capacitatea de a se replica autonom.
Se cunosc mai multe feluri de plasmide:
a. Factorul R"de rezistent.
- contine una sau mai multe gene care codific rezistenta fata de unul sau mai multe antibiotice
sau chimioterapice.
- se multiplica independent de ritmul de multiplicare a cromozomului.
b. Factorul col, detine informatia pentru sinteza unor substante cu actiunc antibacteriar
(colicine).
c. Factorul F", este un factor independent n citoplasm.
d. Bacteriofagul, ca factor independent in citoplasma, cnd este inserat in cromozom devine
bacteriofag temperat.
2. Episomii sunt formati din ADN dublu catenar, helicoidal, de form circular.
Se pot gsi n stare autonoma sau integrati n cromozomul bacterian.
Sunt formati din:
a. Factorul F" (fertility factor) care codific sinteza unui canal de conjugare, pilul F Factorul
F" a fost descris la E. Coli (tulpina K12);

b. Bacteriofagul, paraziteaz celula bacteriar, fiind un virus adaptat.

Se poate prezenta sub 2 forme:
(1) forma virulenta, se multiplic pe seama celulei bacteriene i apoi o lizeaz
(2) forma de profag (bacteriofag temperat), acesta se include in genomul bacteriei replicndu-se
odat cu ADN-ul nuclear. Insertia n ADN se face rupndu-se si ADN-ul nuclear si profagul ntrun anumit locus.
Acest profag poate aduce caractere noi bacteriei care l ctig, prin transductie (fenomen de
variabilitate genetic).
3. Secvent de insertie (SI), sunt secvente foarte scurte de ADN, care nu detin informatia
necesar codificrii unei proteine, dar prin inserarea lor n cromozom sau n plasmide i episomi
duc la modificri ale expresiei fenotipice.
Aceste secvente de insertie nu se pot replica autonom.
4. Transpozoni (Tn), sunt secvente de ADN liniar, de dimensiuni superioare secventelor de
insertie, care detin informatia pentru sinteza uneia sau mai multor proteine, n general n legtur
cu rezistenta la antibiotice.
Nefiind n stare autonom nu se poate autoreplica.
Creterea bacteriilor
Este procesul biologic prin care bacteriile i mresc volumul, datorit sintetizrii de noi produi
i acumulrii apei.
Multiplicarea bacteriilor
- aceasta se realizeaz prin diviziune direct i rar prin nmugurire.
- ritmul de diviziune este foarte rapid de 10-20 min.
- exceptie face bacilul Koch care are un timp de 18-20 ore.
Cultura bacterian
Este rezultatul nmulirii germenilor ntr-un mediu favorabil.
Aspectul culturii depinde de: specie, de varsta culturii i de mediul de cultur.
Bacteriile pot fi cultivate pe:
- medii artificiale (acelulare),
- culturi celulare,
- ou embrionat de gin,
- animale receptive (sisteme biologice sensibile -SBS).
Culturile bacteriene pe medii artificiale.
n medii lichide
Determin apariia unei turbiditti (tulburri a mediului apos) dup 18 20 ore n condiii de
crestere specifice bacteriei.
n funcie de aspectul turbiditii culturile pot fi:
Culturi "S" (smooth)
- turbiditate omogen,
- germenii sunt tineri.
- viruleni, care dispersez rapid i uniform.
Culturi "R (rough)

- mediul este limpede.

- germenii se gsesc sub form de grunji (depui pe fundul vasului sau pe pereti).
- tulbur neomogen mediul.
Sunt determinate fie de germeni aviruleni, nepatogeni, sau de germeni patogeni mbtrnite,
care i-au pierdut virulenta.
Uneori creterea n mediile lichide mai poate fi sub form de:
- vl la suprafa, n cazul germenilor aerobi (bacilul tuberculos);
- depozit gros pe fundul vasului n cazul germenilor anaerobi.
Creteren bacteriilor
Pe medii solide
Produsul patologic se nsmnteaz prin diverse procedee de dispersie.
Cultura bacterian apare sub form de colonie dup 4 ore.
Colonia bacterian reprezint totalitatea germenilor rezultati din multiplicarea unei singure celule
bacteriene, ea este o cultur pur, sunt germeni identici genetic (monoclonali).
Aspectul coloniilor
Colonii de tip "S", Smooth = neted.
Coloniile au suprafaa neted, lucioas cu margini drepte, de consisten untoas, cu un diametru
de 1-2 mm, se pot detaa uor, sunt alctuite din germeni virulenti.
Colonii de tip "R", Rough = aspru.
Coloniile au suprafat aspr, rugoas, cu margini neregulnte, crenelate, nu se pot detaa o parte
din colonie cu ansa, ci doar colonia ntreag.
Aceste colonii sunt formate din germeni cu structur antigenic afectat, batrni, aviruleii. n
aceast form nu se mai pot face identificri.
Colonii de tip "M" care au suprafaa neted, mucoas, sunt variante ale coloniilor "S" ale
germenilor cu capsul (Klebsiella).Ele au tendinta de a se confrunta intre ele.
Colonii de tip "G" sunt colonii pitice, ele rezult n urma actiunii antibioticelor asupra formelor
"S" de germeni.
Curba de cretere a bacteriilor
Populaia care rezult prin diviziunea unei bacterii crete n progresie geometric cu raia 2.
Timpul necesar pentru dublarea populatiei se numete timp de dedublare sau timp de generatie.
Dinamica real este caracterizat printr-o curb cu patru faze:
1. Faza de lag
- n primele 2 ore, numrul de indivizi este aproape constant (faza de latent), ea este o faz de
acomodare a germenilor la noile condiii de mediu.
2. Faza de multiplicare exponential sau logaritmic
Este o faz de cretere rapidi a numrului bacteriilor. Dureaz 2-3 ore, curba evolueaz
exponenial pn n momentul n care una dintre substantele nutritive din mediu este consumat
sau/i n mediu se acumuleaz metabolii toxici (factor limitant).
n aceast faz bacteriile au dimensiuni constante, citoplasma intens bazofil i omogen, lipsit
de incluziuni. Bacteriile sunt virulente, antigenele sunt cele mai bine reprezentate.
n aceast faz se recolteaz germenii pentru prepararea vaccinurilor.
3. Faza staionar

Prin consumarea substratului nutritiv, ritmul de diviziune scade, numrul germenilor care mor
devine egal cu cel al germenilor care se divid, deci numrul total al bacteriilor rmne constant.
Aceast faz dureaz 2-3 zile.
n aceast faz se fac identificrile bacteriilor, coloniile sunt bine individualizate.
Bacteriile din colectiile purulente (abcese) se afl n aceasta faz.
4. Faza de declin
Consumarea substratului nutritiv i acumularea de metabolii toxici duce la moartea majorittii
bacteriilor. Celulele rmase vii sunt btrne, i pierd virulenlaa i patogenitatea.
Faza dureaz 2-3 luni. n aceast faz apar sorii.