Sunteți pe pagina 1din 33

Universitatea Alexandru Ioan Cuza, Iai

Facultatea de Fizic

Rezumatul tezei de doctorat

Contribuii la studiul rspunsului


organismelor vii la aciunea
radiaiilor X i a electronilor
n cazul expunerii la doze mici de radiaii
Conductor tiinific,
Prof. univ. dr. Tudor Luchian
Doctorand,
Focea Ramona
(cs. Ghioc)
Iai
Septembrie 2012

Universitatea ALEXANDRU IOAN CUZA IAI


n atenia
...
V facem cunoscut c n data de 29 septembrie 2012, ora 12.00, n Sala
FERDINAND, doamna Ramona FOCEA cs. Ghioc va susine, n edin public,
teza de doctorat:
Contribuii la studiul rspunsului organismelor vii la aciunea radiaiilor X i a
electronilor n cazul expunerii la doze mici de radiaii
n vederea obinerii titlului tiinific de doctor n domeniul fundamental tiine
Exacte, domeniul Fizic.
Comisia de examinare a tezei:
Prof. univ. dr. Gheorghe POPA

Preedinte
Facultatea de Fizic
Universitatea Alexandru Ioan Cuza Iai

Prof. univ.dr. Tudor LUCHIAN

Conductor tiinific
Facultatea de Fizic
Universitatea Alexandru Ioan Cuza Iai

Prof. univ. dr. Leontin DAVID

Referent
Facultatea de Fizic
Universitatea Babe Bolyai Cluj Napoca

Prof. univ. dr. Eugen CARASEVICI

Referent
Facultatea de Medicin
Universitatea de Medicin i Farmacie
Gr. T. Popa Iai

Prof. univ. dr. Dorina CREANG

Referent
Facultatea de Fizic
Universitatea Alexandru Ioan Cuza Iai

V invitm pe aceast cale s participai la edina public de susinere a tezei.

*
Doresc s mulumesc n mod deosebit att conductorului meu tiinific,
prof. univ. dr. Tudor LUCHIAN, ct i doamnei prof. univ. dr. Dorina
CREANG, pentru rbdarea i nelegerea cu care mi-au cluzit paii n
acest frumos i vast domeniu, pentru competena i rigoarea sugestiilor
oferite pe durata cercetrilor, precum i pentru sprijinul acordat pentru
elaborarea tezei de doctorat.

*
De asemenea, doresc s mulumesc pentru suportul financiar asigurat,
pe tot parcursul activitii de cercetare tiinific, de Programul Operaional
Sectorial Dezvoltarea Resurselor Umane 2007-2013, cofinanat prin Fondul
Social European, n cadrul proiectului POSDRU/88/1.5/S/47646.

*
Menionez i sprijinul acordat de conducerea Spitalului Clinic Judeean
de Urgene Sf. Spiridon, Iai, care a permis utilizarea instalaiilor de
radioterapie din cadrul Clinicii de Oncologie i Radioterapie pentru studiile
experimentale realizate pe parcursul programului de doctorat.

CUPRINSUL TEZEI:
INTRODUCERE...............................................................................................1
Partea 1 Aspecte teoretice generale
CAPITOLUL I
Stadiul actual al cercetrilor n domeniul dozelor mici de radiaii ionizante
I.1. Motivaie.................................................................................................................................6
I.2.Fenomene fizice ce apar la interaciunea radiaiilor X i electronilor cu substana.................9
I.3.Mecanisme moleculare i celulare induse de aciunea radiaiilor ionizante n
organismele vii.............................................................................................................. ..............20

Partea a 2- a Contribuii personale


CAPITOLUL II
Caracterizarea fasciculelor de radiaii X i de electroni
II.1.Aspecte fizice ce descriu un fascicul de fotoni....................................................................33
II.2.Aspecte fizice ce descriu un fascicul de electroni................................................................40
II.3.Efectuarea practic a testelor de verificare a performanelor fasciculelor de fotoni i
electroni.......................................................................................................................................43

CAPITOLUL III
Investigaii experimentale privind efectele dozelor mici radiaii ionizante asupra
organismelor vegetale
III.1.Introducere...........................................................................................................................53
III.2.Studierea experimental a efectelor dozelor mici de radiaii asupra creterii, dezvoltrii i
fotosintezei la plante....................................................................................................................55
III.3.Studierea experimental a efectelor citogenetice ale expunerii embrionilor vegetali la doze
mici de radiaii ionizante.............................................................................................................61
III.4.Studierea experimental a influenei coninutului de ap asupra organismelor vegetale n
stadii ontogenetice timpurii.........................................................................................................71

CAPITOLUL IV
Investigaii experimentale privind rspunsul unor germeni patogeni la
expunerea cu doze mici de radiaii ionizante...........................................................87
CAPITOLUL V
Studii experimentale privind efectele dozelor mici de radiaii ionizante asupra
unor tipuri de esuturi animale
V.1.Introducere..........................................................................................................................101
V.2.Influena radiaiilor ionizante asupra celulelor sangvine - studiu spectrofotometric asupra
intensitii hemolizei..................................................................................................................103
V.3.Influena expunerii la radiaii asupra activitii catalazei n diferite tipuri de esuturi
animale.......................................................................................................................................109

CAPITOLUL VI Concluzii finale.......................................126


Acknowledgments.....................................................................................................129
Bibliografie................................................................................................................130
Anex: Activitate tiinific.....................................................................................142
5

INTRODUCERE
ncepnd cu primele observaii ale lui Pierre Curie i ale altor
cercettori cu privire la leziunile produse de radiaii pe propriul lor corp,
radiobiologia s-a constituit ca tiina efectelor biologice ale radiaiilor
dezvoltndu-se cu att mai mult cu ct radiaiile au fost i sunt frecvent
utilizate n medicin. Datorit suprapunerii importanei mrite a
utilizrii practice a radiaiilor ionizante i incompletei nelegeri a
relaiilor cauzale, efectul dozelor mici de radiaii ionizante reprezint un
subiect popular de dezbatere, i nu este uor s se discute despre
protecia contra radiaiilor ntr-o manier raional n condiiile limitrii
cunotinelor existente.
Teza de doctorat cu titlul Contribuii la studiul rspunsului
organismelor vii la aciunea radiaiilor X i a electronilor n cazul
expunerii la doze mici de radiaii cuprinde rezultatele obinute
experimental cu privire la efectele expunerii la doze mici de radiaii
ionizante (fotoni X i electroni) asupra mai multor clase de organisme
(vegetal, animal, bacterii).
Teza cuprinde dou pri, o prim parte ce include Capitolul I i
prezint att o serie de repere bibliografice asupra stadiului actual al
cercetrilor din domeniul expunerii la doze mici de radiaii ionizante,
ct i noiuni teoretice asupra modalitilor de interaciune ale radiaiilor
cu substana i asupra efectelor biologice induse de absorbia de energie
emis de radiaii.
Partea a doua prezint contribuiile personale la studiul efectelor
dozelor mici de radiaii ionizante i cuprinde Capitolele II V ale tezei,
urmnd ca la final, Capitolul VI s prezinte principalele concluzii la
care s-a ajuns n urma achiziiei, prelucrrii i interpretrii datelor
experimentale obinute.
Deoarece n orice domeniu este necesar i obligatorie asigurarea
calitii, Capitolul II cuprinde etapele i rezultatele efecturii practice a
testelor de verificare a calitii fasciculelor de radiaii folosite n toate
experimentele ce stau la baza alctuirii acestei teze.
n Capitolul III am utilizat metodele de analiz spectral i de
citogenetic pentru a evidenia efectele dozelor mici de radiaii asupra
unor organisme vegetale n faze timpurii ale dezvoltrii lor, urmrinduse efectele induse la nivelul proceselor de sintez a unor substane
6

importante n procesul de dezvoltare al plantelor, ct i efectele induse


la nivel celular prin observarea modificrii indicelui de diviziune
mitotic i inducerea de aberaii citogenetice la nivel celular.
Motivat de dorina de a obine informaii cu privire la posibilitatea
apariiei efectelor secundare de origine bacterian la pacienii care sunt
radio-tratai, i lund n considerare posibilitatea prezenei germenilor
de S. aureus la nivelul pielii sau n interiorul organelor interne iradiate,
n Capitolul IV am prezentat rezultatele ncercrii de a pune n eviden
efectele secundare ale radioterapiei mediate de ncrcarea microbian a
organelor iradiate. S-au urmrit influena iradierii cu doze comparabile
cu cele utilizate n radioterapie (radiaii X i electroni) asupra rezistenei
micro-organismelor fa de unele antibiotice i asupra modificrii
ritmului de multiplicare celular a culturilor.
Este bine documentat faptul c efectele duntoare ale expunerii
sistemelor biologice la radiaii ionizante sunt, n principal mediate de
generarea n celule a speciilor oxigen reactive, ca rezultat al radiolizei
apei. Stresul oxidativ poate contribui la citotoxicitatea radio-indus i la
modificrile metabolice i morfologice n interiorul organismelor
supuse radioterapiei, n organismele animale sau vegetale supuse
diverselor iradieri accidentale sau controlate cum ar fi n cadrul
experimentelor n spaiul cosmic. Plecnd de la aceast premis, n
Capitolul V am inclus rezultatele experimentale asupra studiului
efectelor expunerii la doze mici de radiaii asupra sngelui (prin
urmrirea gradului de hemoliz n probele iradiate n raport cu cele
neiradiate) i asupra unor eantioane de esuturi animale creier,
muchi, ficat, rinichi, plamn (urmrind starea sistemului antioxidat de
aprare prin msurtori asupra activitii enzimatice a catalazei n
esuturile iradiate n comparaie cu cele neiradiate).
Capitolul VI prezint concluziile tuturor studiilor experimentale
cuprinse n aceast lucrare.
Rezultatele experimentale au fost publicate n reviste de
specialitate i prezentate la o serie de conferine naionale i
internaionale dup cum am artat n ANEXA cu activitatea tiinific
de la finalul lucrrii.

Partea 1 Aspecte teoretice generale


CAPITOLUL I
Stadiul actual al cercetrilor n domeniul dozelor mici de
radiaii ionizante
Radiaiile ionizante au furnizat piatra de temelie pentru imagistica
medical i o mare parte a metodelor de diagnostic i tratament folosite
n spitalele moderne nu ar fi posibil fr radiaii. Iradierea datorat
procedurilor medicale reprezint contribuia major la doza de radiaie
primit de ctre o persoan din surse artificiale de radiaii i reprezint
ntre 10% i 20% din doza total de radiaie pe care o primete o
persoan cu caracteristici medii [1-3].
Una din direciile de cercetare pe care am urmat-o este punerea n
eviden a efectelor dozelor mici de radiaii ionizante, doze mici
concept nou n cercetarea din domeniu att n S.U.A. ct i n rile
europene, introdus n anii ce au urmat accidentului nuclear din Ucraina
(1986). Aadar este vorba despre preocuparea de studiere a efectelor
biologice ale fluctuaiilor temporare ale radioactivitii ambientale dar
pot fi incluse aici i riscurile medicale ale expunerilor profesionale.
I.1. Fenomene fizice ce apar la interaciunea radiaiilor X i
electronilor cu substana
Radiaiile ionizante sunt acele radiaii (electromagnetice sau
corpusculare) care au suficient energie pentru a ioniza atomii
(moleculele) substanei cu care interacioneaz.
n cadrul experimentelor realizate n vederea studiului efectelor
expunerii la doze mici de radiaii am utilizat dou tipuri de radiaii
ionizante:

Radiaii X fac parte din categoria radiaiilor


electromagnetice i sunt considerate ca fiind indirect ionizante,
deoarece ionizarea atomilor (moleculelor) substanei are loc indirect,
prin intermediul particulelor ncrcate secundare eliberate n urma unor
procese specifice de interaciune.
Atunci cnd un fascicul de radiaii X traverseaz materia are loc o
reducere a intensitaii acestuia, numit atenuare, care implic procese
de absorbie, de mprtiere sau o combinaie a celor dou [4].
Fotonii interacioneaz cu substana (n principal n cazul
domeniilor de energie utilizate n practicile medicale) prin trei procese:
8

efect fotoelectric, mprtiere Compton i generare de perechi electronpozitron [5-6].

Electroni -radiaii corpusculare(cu mas de repaus diferit


de zero).
Procesele de interaciune ale electronilor cu substana sunt [7]:
mprtierile coulombiene multiple pe electronii atomici (procese
colizionale inelastice) i interaciunile coulombiene cu nucleele
atomice.
Pe msur ce nainteaz, electronul poate interaciona cu atomii
inducnd excitri sau ionizri, rezultnd o cretere a temperaturii n
funcie de cantitatea de energie transferat mediului. Ionizarea, datorat
expulzrii unui electron, poate induce modificri chimice distructive,
deoarece electronii de valen joac un rol important n formarea
compuilor chimici. Poate de asemenea s existe o emisie de radiaii X
caracteristice.
I.2. Mecanisme moleculare i celulare induse de aciunea
radiaiilor ionizante n organismele vii
Radiobiologia modern combin metode ale fizicii radiaiilor,
biologiei moleculare i celulare, geneticii, citologiei, histologiei,
imunologiei, oncologiei i patologiei. Printre cele mai importante i
impresionante sunt studiile asupra leziunilor de la nivelul ADN-ului i
proteinelor, aberaiilor cromozomiale i apoptozei celulare, asupra
inducerii mutaiilor, a modificrilor cilor de semnalizare, a efectelor la
nivelul ciclului celular i rspunsului imun, precum i pentru observarea
modificrilor asupra speranei de via a organismelor iradiate. Este de
asemenea important distincia ntre efectele radiaiilor asupra celulelor
izolate in vitro, (asupra culturilor de celule) caz n care celulele pot
interaciona doar ntre ele, i efectele asupra esuturilor, efectele asupra
ntregului organism sau efectele asupra unei populaii. Mai apare un alt
fenomen, mai general, care st la baza relaiei neliniare ntre doz i
efect, i anume acela c la doze mici de radiaii sunt activate
mecanismele de aprare, sau aa numitul rspuns adaptativ, precum
repararea ADN-ului, punctele de control de la nivelul ciclului celular,
reaciile sistemului imun i chiar efecte de evoluie ale populaiilor
expuse cronic la radiaii ionizante [8-9].
9

Partea a 2- a Contribuii personale


CAPITOLUL II
Caracterizarea fasciculelor de radiaii X i de electroni
Cunoaterea cu exactitate a parametrilor fizici ce caracterizeaz un
fascicul de radiaii ionizante ce urmeaz a fi folosit n orice domeniu, fie el
industrial, medical sau n cercetare, este foarte important pentru controlul i
eficientizarea utilizri radiaiilor. Domeniul pentru care am efectuat
msurtori dozimetrice, am determinat parametrii ce asigur calitatea
fasciculelor i am verificat concordana acestora cu standardele existente este
cel al radioterapiei, ntruct asigurarea calitii este extrem de important att
pentru tratamentul pacientului, ct i pentru personalul expus profesional,
reducnd probabilitatea de apariie a accidentelor i erorilor.
Capitolul II prezint rezultatele testelor efectuate n vederea controlului
de calitate a performanei fasciculelor de radiaii X i electroni ce au fost
folosite n cadrul studiilor experimentale cuprinse n aceast lucrare. Testele
au fost realizate la Spitalul Clinic Judeean de Urgen Sf. Spiridon Iai, n
cadrul Laboratorului de Radioterapie cu Energii nalte a Clinicii Oncologie
Radioterapie, pentru un accelerator liniar de particule Varian 2100SC. Acest
aparat are mai multe opiuni de tratament, cu energii multiple: fotoni (la
tensiuni de 6 MV i 10 MV) i electroni (la energii de 6 MeV, 9 MeV, 12
MeV i 15 MeV).
n urma msurtorilor dozimetrice am determinat mrimi precum:
distribuia procentual a dozei n profunzime, pe axul central al fasciculului
(Figurile 1 i 2), distribuia dozei n afara axului central al fasciculului de
radiaii i profilul de doz, ceea ce constituie asigurarea asupra corectitudinii
calculelor pentru estimarea dozelor de radiaii absorbite n probele biologice
expuse.
Timpii de iradiere necesari pentru eliberarea dozelor studiate s-au
calculat pentru o distan surs prob (DSP) de 100 cm, folosind urmtoarea
formul [6]:
t = D/ (zmax,10, h)RDF(A, h)PDD(1,5cm, A, h) 0,005029
unde t este timpul de iradiere, D este doza cu care am iradiat probele, (zmax)
este debitul dozei n punctul (la profunzimea z) n care doza este maxim pe
axul central al unui cmp de iradiere de 10x10cm2, RDF(A,h) este factorul
relativ al dozei, PDD(1,5 cm, A, h) este randamentul dozei n profunzime,
pentru un cmp A de iradiere.
10

Fig. 1 Randamentul dozei n profunzime (PDD) msurat pentru


fasciculele de fotoni (curba 1- 6MV; curba 2 10MV)

Fig. 2 Randamentul dozei n profunzime (PDD) msurat pentru


fasciclule de electroni cu energii de 6MeV (curba 1), 9MeV (curba 2),
12 MeV (curba 3), 15MeV (curba 4).

Valorile pentru , RDF i PDD n geometria de iradiere dat


(fascicule de fotoni sau de electroni) s-au obinut n urma procedurilor de
calibrare (conform standardului dozimetric IAEA TRS-398), folosind un
fantom tip 3D Blue Water Phantom, o camer de ionizare plat, tip PTW
Frieburg Markus pentru fasciculul de electroni, o camer de ionizare
cilindric, tip PTW Farmer pentru fasciculul de fotoni i un electrometru de
tip PTW Unidose.
11

CAPITOLUL III
Rezultatele studiilor experimentale privind efectele radiaiilor
ionizante asupra organismelor vegetale
Experimental am realizat studii n vederea observrii efectelor
biologice induse de expunerea la doze mici de radiaii ionizante (fotoni X i
electroni) a unor organisme vegetale n faze timpurii ale dezvoltrii lor. Am
urmrit efectele induse la nivelul procesului de cretere i a celui de biosintez
a unor substane importante n procesul de dezvoltare a plantelor, ct i
efectele induse la nivel celular prin studierea modificrii indicelui de
diviziune mitotic i a inducerii de aberaii genetice la nivel nuclear. Toate
experimentele privind efectele biologice ale aciunii dozelor mici de radiaii
ionizante asupra organismelor vegetale au fost realizate pe acelai material
biologic o specie de plant, cu importan economic i anume Zea mays
(porumbul).

III.3. Studierea experimental a efectelor citogenetice ale expunerii


embrionilor vegetali la doze mici de radiaii ionizante
Obiectiv: punerea n eviden, a modificrilor citogenetice, ca urmare
a expunerii la radiaii X a unor embrioni vegetali rezultai imediat dup
germinarea cariopselor de Zea mays (porumb).
Expunerea la radiaii X s-a realizat prin iradieri unice cu doze de 0,5
Gy, 0,75 Gy, 1 Gy, 2 Gy i respectiv 2,5 Gy.
Investigaiile citogenetice s-au efectuat pe meristeme radiculare din
care s-au prelevat eantioane de esut (din apexul radicular, unde diviziunea
mitotic este cea mai semnificativ), folosind metoda rapid Feulgen [100]
pentru colorarea materialului nuclear, respectiv a cromozomilor.
Asigurarea statistic. Pentru fiecare variant experimental s-au
analizat cte cinci preparate microscopice cu cte zece cmpuri de observaie.
Valorile reprezentnd numrul de celule surprinse n diviziune normal sau cu
aberaii cromosomiale au fost mediate pentru cele cinci preparate i mpreun
cu deviaiile standard au fost considerate pentru reprezentrile grafice. S-a
aplicat testul t-Student pentru evaluarea semnificaiei statistice a diferenelor
dintre martori i probe iradiate fa de pragul de semnificaie de 0,05.
Rezultate i discuii
Pentru cele peste 30000 de celule luate n considerare, principalele
tipuri de aberaii cromozomiale care au putut fi identificate au fost: puni
intercromatidiene (simple sau multiple), ana- telofaze cu cromozomi ntrziai
12

sau expulzai, diviziuni multipolare (reprezentate calitativ i cantitativ n


Figurile 3, 4, 5). n graficele urmtoare sunt prezentate rezultatele cantitative
obinute prin investigarea citogenetic a probelor iradiate n comparaie cu
cele neiradiate.

Fig. 3 Indicele mitotic i indicele de aberaii cromozomiale vs.doza de


radiaii X (y- A.I. (%); x- doza de radiaii X; R- coeficientul liniar de corelaie)

Expunerea la doze mici de radiaii X a determinat o cretere a


frecvenei celulelor n diviziune mitotic pentru 0,5 Gy i 0,75 Gy, cu un
maxim de 9,15 % corespunztor probelor expuse la o doz de 0,75 Gy ceea
ce poate sugera apariia unui efect stimulator a activitii mitotice n urma
expunerii la doze mici (Fig. 3).

Fig. 4 Variaia fazelor diviziunii mitotice la Zea mays, dup expunerea la


radiaii X
Creterea indicelui mitotic pentru acest interval de doze a avut loc prin
acumularea de celule aflate n profaz, frecvena celulelor aflate n celelalte faze ale
diviziunii celulare variind mai puin n comparaie cu martorul (Fig.4). S-a constatat
c scderea indicelui mitotic i durata ntrzierii diviziunii mitotice sunt dependente
de doz. De asemenea s-a demonstrat genotoxicitatea dozelor mici de radiaii X
13

asupra esutului vegetal studiat, deoarece procentajul aberaiilor cromozomiale a


crescut de pn la zece ori fa de cazul probelor neiradiate.

(a) Anafaz normal

(b)Metafaz normal

(c) Ana-telofaz cu cromozomi


retardari

(d)Metafaz cu cromozomi expulzai

(e)Anafaz cu 4 cromozomi
ntrziai i expulzai

(f)Metafaz cu cromozomi expulzai

(g) Ana telofaz cu 2 cromozomi


ntrziai i 1 expulzat

(h) Ana-telofaz trzie cu o punte

Fig. 4 Tipuri de aberaii cromozomiale identificate n urma expunerii la radiaii X a


plantelor de Zea mays aflate n stadii ontogenetice timpurii
14

III.4. Studierea experimental a influenei coninutului de ap


asupra organismelor vegetale n stadii ontogenetice timpurii
Obiectivele studiului. Am urmrit efectele induse la nivelul diviziunii
mitotice i inducerii de aberaii citogenetice la embrioni vegetali de Zea mays
L. (porumb) dezvoltai din cariopse hidratate nainte de iradiere fa de cele
nehidratate; suplimentar am determinat i coninuturile de acizi nucleici.
Materialul biologic. Cariopse selecionate de Zea mays L. (intacte, cu
aspect sntos, de mrime ct mai uniform) cu un genofond uniform - fiind
recoltate de la o singur plant de porumb au fost utilizate pentru producere
de embrioni vegetali a) prin hidratare cu ap distilat timp de 15 ore nainte de
germinare i expuse la radiaii X i electroni accelerai n doze de 0,5 3
6 Gy; b) fr hidratare nainte de germinare i iradiere cu aceleai doze.
Germinarea seminelor (dup iradiere) a avut loc n cutii Petri pe hrtie de
filtru umectat cu ap distilat la ntuneric, pstrndu-se condiii constante de
temperatur i umiditate (ca i la experimentul anterior).
Determinarea coninutului mediu de acizi nucleici s-a realizat
conform metodei Spirin [10].
Analiza spectrofotometric s-a fcut cu ajutorul unui
Spectrofotometru Shimadzu UV, tip 1700 Pharmaspec; citirea extiniilor s-a
realizat n raport cu solventul utilizat pentru extracie (acid percloric 6%).
Rezultate i discuii
Sumarea tuturor celulelor susprinse n profaz, metafaz, anafaz i
telofaz reprezint indicele mitotic (n %) i exprim capacitatea de diviziune
celular, fiind complementar cu procentajul celulelor n repaus mitotic (sau
interfaz); astfel c variaia pozitiv a indicelui mitotic (p<0,05) este
complementar cu variaia negativ a procentajului de celule n interfaz
(Fig. 6) aa cum s-a evideniat la doza de 6 Gy pentru radiaii X.
Influena hidratrii cariopselor de Zea mays asupra ritmului mitozei
const n scderea mic dar constant i semnificativ statistic a indicelui
mitotic fa de martor att la probele expuse la doze mici de radiaii X ct i la
electroni accelerai; complementar s-a nregistrat i creterea procentajului de
celule n repaus mitotic (Fig. 6).
Comparnd totalul aberaiilor induse la cele dou grupe de variante
experimentale care difer prin gradul de hidratare (Fig. 7) se poate vedea c la
expunerea la radiaii X s-a dublat efectul genotoxic pentru dozele de 0,5 Gy i
respectiv de 6 Gy la probele hidratate fa de cele nehidratate (la 3 Gy
15

observndu-se variaii comparabile cu deviaia standard deci fr semnificaie


statistic).

Interfaze (%)

98

Interfaze Umede (%)

Interfaze Uscate (%)

IM Umede (%)

IM Uscate (%)

20
18

96

16

94

14

92

12

90

10

88

86

84

82

80

Indicele Mitotic (%)

100

0
Martor

0,5 Gy X

0,5 Gy E

3 Gy X

3 Gy E

6 Gy X

6 Gy E

Fig. 6 Indicele mitotic (procentajul total al celulelor n diferite faze ale mitozei) i
procentajul celulelor aflate n repaus mitotic (interfaza)
9
8

Total aberatii (%)

7
6
X-uscate
5

X-umede

E-uscate
E-umede

3
2
1
0
0

0.5

Doza (Gy)

Fig. 7 Variaia procentajului mitozelor anormale (aberaiilor cromosomiale) n celule


meristematice radiculare i influena hidratrii cariopselor

n ceea ce privete influena coninutului de ap asupra biosintezei de


acizi nucleici n probele expuse la radiaii X din figura 8 se observ cum
coninutul de acizi nucleici, att ADN (Fig. 8- stnga), ct i ARN (Fig. 8dreapta), este mai puternic influenat n cazul plantelor crescute din cariopse
hidratate naintea expunerii la radiaii - n cazul cariopselor nehidratate
variaiile concentraiilor de ADN i ARN fiind nesemnificative cu exceptia
16

dozei de 3 Gy unde s-a nregistrat stimularea biosintezei de ADN (Fig. 8stnga). Acest lucru poate fi pus n baza efectelor indirecte ale expunerii la
radiaii, prin apariia radicalilor liberi de la radioliza apei contribuind
suplimentar la modificrile biosintezei de acizi nucleici.

Fig. 8 Coninutul relativ (proba n raport cu martorul) de ADN (stnga) i ARN


(dreapta) n cazul probelor de Zea mays dezvoltate din cariopse uscate i hidratate n
urma expunerii n fascicul de radiaii X

Fig. 9 Coninutul relativ (proba n raport cu martorul) de ADN (stnga) i ARN


(dreapta) n cazul probelor de Zea mays dezvoltate din cariopse uscate i hidratate n
urma expunerii n fascicul de electroni

Analiznd efectele expunerii n fascicul de electroni a cariopselor


hidratate se constat o scdere cu pn la 30% pentru doza de 0,5Gy a
biosintezei de ADN (Fig. 9 - stnga) i respectiv de ARN (Fig. 9- dreapta)
urmat de un proces de stimulare al procesului de biosintez la celelalte doze,
coninutul de acizi nucleici ajungnd aproape la nivelul celui din probele
neiradiate [11].

17

CAPITOLUL IV
Investigaii experimentale privind rspunsul unor germeni
patogeni la expunerea la doze mici de radiaii ionizante
n ultimele decenii, cercettorii s-au concentrat asupra modalitilor de
sterilizare a germenilor de Staphylococcus aureus, studiile elaborate fiind tot
mai consolidate, din cauza infeciilor persistente existente n mediile
spitaliceti cauzate de contaminarea cu aceast microorganism subtil. S. aureus
pune de multe ori viaa n pericol, prin generarea de infecii profunde ca
endocardita, bacteremia, pneumonia, astfel nct investigaiile dedicate pentru
inactivarea lui s-au dezvoltat continuu i trebuie s fie continuate prin testarea
de noi metode de sterilizare [12].
Scopul experimentului: ncercarea de a pune n eviden efectele secundare
ale radioterapiei n cazul ncrcrii microbiene a organelor iradiate. S-a
urmrit influena iradierii cu doze comparabile cu cele utilizate n radioterapie
(radiaii X i electroni) asupra rezistenei micro-organismelor fa de unele
antibiotice i asupra modificrii ritmului de multiplicare celular a culturilor.
Materialul microbiologic a fost reprezentat de o tulpin bacterian de
Staphylococcus aureus din colecia de culturi standard americane (ATCC
2592). Culturile microbiene au fost pregtite n ser fiziologic steril, pornind de
la culturile stoc, dup cultivarea acestora timp de 18 ore pe mediu de agaragar, densitatea celular fiind reglat la aproximativ 3x108 CFU /ml (colony
forming units), prin evaluare cu ajutorul curbelor de calibrare.
Expunerea la radiaii ionizante s-a realizat att n fascicule de fotoni ct i
de electroni, cu doze cuprinse ntre 31 Gy i 128 Gy (Fig.10).
Analiza statistic: Toate experimentele descrise anterior au fost repetate de
dou ori, astfel nct, lund n considerare cele 4 replici pentru fiecare variant
experimental (probe i martori), valorile medii i deviaiile standard au fost
calculate din opt valori pentru fiecare caz. Semnificaia statistic s-a
determinat n urma aplicrii testului t- student, considernd p<0,05.
Rezultate i discuii
Rezultatele obinute n urma msurtorilor asupra densitii de celule
(Fig. 11) arat c probele care au fost iradiate pn la 48 minute (62 Gy) au
prezentat o nhibiie a procesului de multiplicare celular n raport cu
martorul.

18

a.

b.

c.

Fig. 10 Imagini ilustrnd expunerea probelor la radiaii X i electroni


(b.- vizualizare a sistemului de laseri utilizai pentru poziionarea identic a tuturor
seturilor de probe;cmpul luminos coincide cu cel de radiaii,
c.- aplicator necesar pentru colimarea fasciculului de electroni)

Fig. 11 Variaia densitii de celule ca msur a ritmului de multiplicare celular n


funcie de doza de radiaii X

Densitatea probelor iradiate ntre 48 i 100 minute, corespunztoare


unor doze cuprinse ntre 62 i 128 Gy, este de asemenea mai mic dect cea a
martorului dar, a prezentat o tendin de cretere pe msur ce timpul de
iradiere a crescut, lucru care poate fi explicat printr-un proces de modificare a
radiorezistenei celulelor supravieuitoare dup 48 minute de iradiere (62 Gy).
Am evaluat influena expunerii la radiaii asupra rezistenei la
antibiotice prin msurarea diametrelor zonelor de inhibiie a creterii
microbiene n medii agarizate pentru ampicilin (A), cloramfenicol (C),
tetraciclin (T), tobramicin (TOB) i ofloxacin (OF) i compararea acestora
cu probele martor.
19

Fig. 12 Variaia diametrului zonelor de inhibiie a eantioanelor de Staphylococcus


aureus pentru cloramfenicol (dreapta) i tetraciclin (stnga) n funcie de doza de
radiaii X

n urma analizei rezultatelor obinute s-au constat urmtoarele: probele


iradiate timp de 24 min. (31 Gy) au prezentat o cretere a diametrului zonei de
inhibiie n raport cu martorul pentru toate cele 5 antibiotice testate. n cazul
cloramfenicolului i tetraciclinei s-a constatat o cretere a diametrelor zonelor
de inhibiie n raport cu probele neiradiate pentru toate cele 5 doze studiate,
putnd astfel concluziona c iradierea a avut ca efect o diminuare a rezistenei
culturilor de Staphylococcus aureus la aceste tipuri de antibiotic (Fig. 12). S-a
ncercat evidenierea unei corelaii liniare ntre variaia diametrelor zonelor de
inhibiie i timpul de iradiere, dei coeficienii de corelaie au fost mici.
Pentru a evalua eficiena sterilizrii n urma expunerii la electroni
accelerai s-a determinat numrul de colonii formate pentru fiecare tip de
prob. Astfel, dup cum arat i figura 13, la doze mici (31 Gy timp de
iradiere de 16 min.) s-a constatat o stimulare a procesului de multiplicare a
bacteriilor, cu pn la 12,5% fa de probele martor.

Fig. 13 Variaia numrului de colonii de S.aureus n funcie de doz


20

Aplicarea dozelor mai mari a determinat o ncetinire a procesului de


multiplicare, conducnd la formarea a doar 7 colonii (de 5 ori mai puine dect n
cazul martorilor) din probele iradiate timp de 68 minunte (128 Gy).
Pentru expunerea la radiaii X, reprezentarea grafic n coordonate logaritmice
sugereaz o curb de supravieuire de tip sigmoidal cu punct de inflexiune. Scderea
densitii de celule evideniat n toate probele iradiate comparativ cu cele neiradiate a
fost semnificativ din punct de vedere statistic (aplicnd t-test a rezultat p< 0,05)(Fig.
14).

Fig.14 Dependena liniar logaritmic a densitii relative de celule


(CD densitate de celule, CD0 - densitatea de celule n probele martor) de doza
absorbit n urma expunerii la radiaii X; graficul are forma unei curbe de
supravieuire de tip sigmoidal cu punct de inflexiune.
Acest studiu, motivat de posibilitatea de a obine informaii despre riscul
efectelor secundare de origine bacterian la pacienii care sunt radio-tratai, lund n
considerare posibilitatea prezenei germenilor de S. aureus la nivelul pielii sau n
interiorul organelor interne iradiate, a condus la rezultate concordante cu unele date
din literatur avnd n vedere c radiosensibilitatea depinde de numeroi factori
ambientali.

CAPITOLUL V
Studii experimentale privind efectele dozelor mici de radiaiilor
ionizante asupra unor tipuri de esuturi animale
Efectele radiobiologice i repercursiunile acestora asupra sntaii n
urma expunerii la doze mari de radiaii gamma sunt bine documentate. De
exemplu, incidena sporit a cancerelor, incluznd leucemia, este cel mai
important efect ntrziat n urma expunerii la radiaii, efect observat la
supavieuitorii bombardamentelor atomice [13]. Totui, n ultimii ani, efectul
21

carcinogenetic al expunerii la doze mici de radiaii este un subiect intens


studiat. Este important investigarea efectelor expunerii la doze mici de
radiaii de tipul celor ce caracterizeaz expunerile profesionale. Datele
experimentale rezultate n urma cercetrilor diverilor autori au artat o
cretere semnificativ fie a frecvenei aberaiilor cromozomiale [14-17] fie a
gradului de deteriorare a ADN-ului [18] din limfocite, n comparaie cu
probele martor neiradiate [19-21].
Efectele nocive ale radiaiilor ionizante n sistemele biologice sunt n
principal mediate prin generarea de specii reactive ale oxigenului (reactive
oxygen species - ROS) n celule, i radicalii eliberai ca urmare a radiolizei
apei [22]. ROS i stresul oxidativ ar putea contribui la citotoxicitatea
radioindus i la schimbri metabolice i morfologice n organismele
pacienilor n timpul radioterapiei, a animalelor incluse n diverse studii
experimentale, sau chiar n timpul iradierilor inerente zborului n spaiu [23].
Acest capitol cuprinde rezultatele experimentale obinute n urma
studiilor realizate n ceea ce privete influena dozelor mici de radiaii
ionizante asupra unor tipuri de esuturi animale (prin studiul activitii
catalazei) ct i asupra celulelor sangvine (prin estimarea spectrofotometric a
intensitii hemolizei). Efecte hemolitice nu au fost notabile la iradieri cu doze
mici cuprinse ntre 0,25 0,5 Gy, att n fascicul de radiaii X ct i n
fascicul de electroni, n comparaie cu efectele induse de expunerea la doze
medii (1 - 6 Gy).

V.3. Influena expunerii la radiaii asupra activitii catalazei


n diferite tipuri de esuturi animale
Catalaza este o enzim antioxidant prezent ntr-o varietate de surse:
plante, fructe, carne sau ficat. Iniial a fost izolat din ficatul de vit i mai
trziu din snge, bacterii i plante [24]. Enzima conine ntr-o molecul 4
grupri de ferihemoprotein. Activitatea catalazei variaz semnificativ la
diferite esuturi, avnd cea mai puternic activitate n ficat i rinichi, i cea
mai sczut n esuturile conjunctive.
Peroxidul de hidrogen (H2O2) este un agent oxidant nociv, produs de
corpul uman n urma oxidrilor i poate avea efecte negative considerabile
asupra metabolismului celular. Catalaza acioneaz n conversia peroxidului
de hidrogen (2H2O2 2H2O + O2) ceea ce permite astfel reglarea unor
importante procese celulare care produc H2O2.
22

Obiectivul studiului: punerea n eviden a influenei expunerii la doze


mici de radiaii ionizante asupra activitii enzimatice a catalazei - ca indicator
al funcionrii sistemului antioxidat de aprare de la nivelul unor eatioane de
esut animal avnd n vedere iradierile practicate pentru conservarea
alimentelor de origine animal.
Materialul biologic
Acest studiu s-a realizat pe diverse tipuri de esuturi proaspt prelevate
de la o pasre curte (creier, rinichi, plmn, ficat i muchi). n msura n care
cantitatea de esut a permis, n cazul acestor probe am efectuat att expuneri n
fascicul de radiaii X ct i n fasciclul de electroni.
Iradierea probelor
Probele de esut au fost expuse la radiaii ionizante (radiaii X i
electroni) produse de un accelerator liniar de particule, tip VARIAN CLINAC
2100SC, cu doze de 0,5 Gy, 1 Gy i respectiv 2 Gy.
Pentru a asigura semnificaia statistic a datelor obinute s-au realizat
cte 3 seturi de probe pentru fiecare doz ct i pentru probele neiradiate, de
control.
Activitatea catalazei s-a determinat utiliznd metoda de analiz n UV
descris de Hugo Aebi [25] ce presupune urmrirea scderii absorbanei
peroxidului de hidrogen la lungimea de und de 240 nm. Pentru aceasta am
folosit un kit de reactivi procurat de la SIGMA ALDRICH (S.U.A.).
Analiza spectrofotometric a scderii absorbanei peroxidului de
hidrogen la 240 nm s-a realizat cu ajutorul unui program ce permite
nregistrarea dinamic. Msurtorile se fac ntr-un interval scurt de timp (60
secunde), ntruct reacia catalitic este foarte rapid. Msurtorile
spectrofotometrice s-au realizat n raport cu soluia buffer, folosind un
spectrofotometru de tip Shimadzu UV, tip 1700 Pharmaspec.
Rezultate i discuii
Expunerea la radiaii X a probelor de creier a condus la o intensificare a
activitii catalazei n acest tip de esut, dup cum este prezentat n figura 15.
Astfel, n probele iradiate cu 0,5 Gy i respectiv 1Gy s-a indus o amplificare
cu pn la 25%, n timp ce n cazul probelor iradiate cu 2 Gy s-a constatat o
activitate a catalazei intensificat de aproape 2,4 ori, n raport cu probele
neiradiate.
n urma analizei datelor experimentale s-a constatat c, dei se
consider c radiaiile X i electronii au aceeai eficacitate biologic relativ
23

(ambele tipuri avnd coeficientul de ponderare a radiaiei WR =1), n cazul


activitii catalazei se induc efecte uor diferite (Fig. 16).

Fig. 15 Variaia activitii catalazei n probele de creier expuse la radiaii X

Astfel, iradierea eantioanelor de creier cu aceeai doz, a determinat o


cretere a activitii catalazei de 2,1 ori (fa de martor) n cazul expunerii n
fascicul de electroni, spre deosebire de probele expuse n fascicul de fotoni,
unde s-a indus o intensificare a activitii catalazei de aproximativ 2,4 ori fa
de martor (p<0,05).

Fig. 16 Influena naturii radiaiilor asupra activitii catalazei n eantioanele de creier


iradiate cu 2 Gy

Alte seturi de probe au fost constituite din eantioane de muchi. Datele


experimentale obinute relev o stimulare a activitii sistemului antioxidant
de aprare n eantioanele de muchi dup expunerea la doze mici de radiaii
la 0,5 Gy activitatea catalazei fiind intesificat cu pn la 20% n raport cu
esutul neiradiat (p<0,05).
Cum arat i figura 17 n cazul expunerilor cu 1 Gy i 2 Gy s-a observat
o uoar diminuare a intensitii activitii catalazei, cu pn la 9% fa de
24

expunerea cu 0,5Gy, meninndu-se totui deasupra nivelului din cazul


probelor neiradiate (p<0,05).

Fig. 17 Variaia activitii catalazei n probele de muchi expuse la radiaii X

n cazul expunerii eantioanelor de muchi n fascicul de electroni s-a


constat aceeai intensificare a activitii catalazei cu pn la 20% n raport cu
martorul (p0,05), n cazul iradierii cu 2 Gy - nivel comparabil cu cel obinut
n urma iradierii cu aceeai doz de radiaii X (Fig. 18).

Fig. 18 Influena naturii radiaiilor asupra activitii catalazei n eantioanele de


muchi iradiate cu 0,5 Gy i 2 Gy

mpotriva stresului oxidativ, celulele sunt echipate cu sisteme


enzimatice i non-enzimatice antioxidante de aprare. Un mecanism major de
aprare mplic enzimele antioxidante precum superoxid dismutaza (SOD) i
catalaza (CAT) care transform moleculele de oxigen active n compui
netoxici. Ficatul are cel mai mare coninut de antioxidani i de enzime
antioxidante ceea ce indic rolul important pe care l joac acesta n
detoxificarea antioxidant [26]. Figura 19 prezint dinamica absorbanei
peroxidului de hidrogen nregistrat la 240 nm pentru extractele obinute n
urma prelucrrii esutul hepatic iradiat cu diferitele doze luate n considerare.
25

Fig.19 Dinamica absorbanei peroxidului de hidrogen la 240 nm, pentru eantioanele


de ficat expuse n fascicul de fotoni X (stnga) i electroni (dreapta)

Fig.20 Variaia activitii catalazei n probele de ficat expuse la radiaii X

Fig. 21 Efectul tipului de radiaie asupra activitii catalazei n eantioanele de ficat


iradiate cu 0,5 Gy i 2 Gy

n urma prelucrrii, datele experimentale obinute au fost reprezentate


schematic n figurile 20 i 21. Urmrind aceste figuri se poate observa o
cretere semnificativ a activitii catalazei de la nivelul esutului hepatic
26

iradiat, n comparaie cu cel neiradiat. O expunere cu o doz mic, de 0,5 Gy,


la radiaii X a determinat o intensificare a procesului antioxidant de aprare
hepatic de circa 2,3 ori n comparaie cu eantioanele neiradiate (p<0,05).
Expunerea cu 2 Gy a determinat triplarea intensitii activitii catalazei n
raport cu eantioanele neiradiate. Aceeai intensificare semnificativ s-a
constatat i n cazul expunerii n fascicul de electroni, determinndu-se
intensificarea procesului antioxidant de aprare din ficat de aproape 3 ori n
raport cu esutul hepatic neiradiat.
CAPITOLUL VI
Concluzii finale
Lucrarea reprezint o sintez a rezultatelor studiilor experimentale
privind influena dozelor mici de radiaii ionizante asupra trei tipuri de
organisme vii (vegetal, bacterii, animal). De asemenea sunt prezentate i
rezultatele efecturii practice a testelor de verificare a performanelor unor
fascicule de radiaii X i electroni, teste absolut necesare pentru asigurarea
calitii i acurateii dozelor eliberate atunci cnd se utilizeaz astfel de
fascicule n orice domeniu, fie medical, industrial sau n cercetare.
VI.1. Concluzii privind efectul dozelor mici de radiaii ionizante asupra
organismelor vegetele
Toate experimentele privind efectele biologice ale aciunii dozelor mici
de radiaii ionizante asupra organismelor vegetale au fost realizate pe acelai
material biologic o specie de plant, cu importan economic i anume Zea
mays (porumb).
1. Concentraiile pigmenilor fotosintetizatori (clorofila a, clorofila b,
carotenoizi) au fost uor afectate de expunerea la radiaii X, nregistrndu-se o
inhibiie a sintezei lor o dat cu creterea dozei. Astfel, o iradire cu 2 Gy a
determinat scderea concentraiei clorofilei A, de la 0,742 mg/g de esut, la
0,624 mg/g de esut, valoare corespunztoare martorilor. Reducerea
pigmenilor fotosintetizatori poate fi atribuit efectului nociv al stresului
oxidativ ndus de radicalii liberi produi de radiaiile ionizante, i pot fi
consumai atunci cnd particip la eliminarea radicalilor liberi i n disiparea
de energie. Scderea lent se poate explica i prin faptul c sistemul
antioxidant de aprare contrabalanseaz efectele destabilizatoare la dozele
studiate.
27

2. n urma analizei citogenetice s-a constatat c indicele mitotic


variaz sensibil cu doza. Astfel, la doze mici (0,5 0,75 Gy) apare un exces
mitotic, iar pentru valori mai mari ale dozelor (1- 2 -2,5 Gy) indicele mitotic
scade deoarece o parte din celule sunt mpiedicate s intre n mitoz la timpul
potrivit. n esen iradierea acioneaz ca un agent sincronizator prin afectarea
selectiv a celulelor care sunt n fazele mai sus menionate i determin
ntrzierea progresiei lor spre mitoz.
3. Datele experimentale rezultate n urma studiilor asupra influenei
condiiilor de iradiere au indicat urmtoarele:
- influena hidratrii cariopselor de Zea mays asupra ritmului mitozei
const n scderea mic dar constant i semnificativ statistic a indicelui
mitotic fa de martor ct i la probele expuse la doze mici de radiaii X i
electroni accelerai; complementar s-a nregistrat i creterea procentajului de
celule n repaus mitotic;
- comparnd totalul aberaiilor induse la cele dou grupe de variante
experimentale care difer prin gradul de hidratare se poate vedea c la
expunerea la radiaii X s-a dublat efectul genotoxic pentru dozele de 0,5 Gy i
respectiv de 6 Gy la probele hidratate; expunerea la electroni accelerai a
probelor hidratate a condus la amplificarea progresiv a efectului genotoxic
spre deosebire de cazul probelor nehidratate;
- se observ un efect de uoar stimulare a procesului de biosintez a
acizilor nucleici, n cazul plantelor rezultate din seminele uscate, pn la
valoarea de 3 Gy a dozei absorbite dup care are loc o inhibiie a procesul de
sintez a ADN i ARN, n timp ce n cazul seminelor hidratate, se constat o
scdere a coninutului de acizi nucleici cu pn la 18% fa de probele
neiradiate;
- n cazul plantelor crescute din cariopsele uscate i iradiate n fascicul
de electroni se observ aceeai tendin de stimulare a procesului de
biosintez al acizilor nucleici ca i n cazul expunerii n fascicul de fotoni, cu
pn la 17% fa de probele neiradiate corespunztor dozei de radiaii de 3Gy
(ARN, p<0,05); urmrind efectele expunerii n fascicul de electroni a
cariopselor hidratate se constat o scdere cu pn la 30% pentru doza de
0,5Gy a biosintezei de ADN.

28

VI.2. Concluzii privind efectul dozelor mici de radiaii ionizante asupra


unor germeni patogeni (S. aureus)
1. n ceea ce privete efectul inhibitor al radiaiilor X asupra
microorganismului S. aureus, datele experimentale obinute au demonstrat c
densitatea relativ de celule (densitatea de celule n probele iradiate/densitatea
de celule n probele neiradiate) din culturile de bacterii studiate a prezentat
scdere progresiv, cu 35 i 75% dup expunerea la doze de 31 Gy i
respectiv 60 Gy, corespunztoare unor timpi de iradiere de 25 min. i
respectiv de 50 min. Densitatea de celule a crescut progresiv n probele
iradiate pe durate de timp mai mari, pentru 65, 85 i 100 min, corespunztor
unor doze de 87, 108, 128 Gy, pstrndu-se totui sub nivelul din probele de
control- ca urmare a adaptrii fiziologice la iradiere.
2. n ceea ce privete rezistena la antibiotice s-au constat urmtoarele:
probele iradiate timp de 24 min. au prezentat o cretere a diametrului zonei de
inhibiie n raport cu martorul pentru toate cele 5 antibiotice testate. Diametrul
zonelor de inhibiie rezultate n urma difuziei antibioticului se dovedete, n
general, a fi crescut cu pn la 15% n cazul probelor bacteriene expuse cu
doze de radiii X (31 i 128 Gy) ce corespund unor timpi de iradiere ntre 25 i
100 min. Creterea diametrului zonelor de inhibiie se traduce ntr-o uoar
diminuare a rezistenei la antibiotice a culturilor de S. aureus studiate.
3. Datele experimentale ce indic rspunsul S. aureus la electroni 6
MeV au sugerat tip special de curb exponenial de supravieuire sau o
curb de tip sigmoidal cu umr "pozitiv", datorit uoarei creteri a densitii
relative de celule de 31 Gy. Nu s-au observat modificri ale rezistenei fa de
antibiotice.
VI.3. Concluzii privind efectul dozelor mici de radiaii ionizante asupra
organismelor animale
1. S-au obinut date experimentale care indic o intensificare a
activitii enzimatice a catalazei n diversele tipuri de esuturi studiate. Astfel,
expunerea la 0,5 Gy a determinat o cretere a activitii catalazei cu procente
cuprinse ntre 20% i 25% n probele de creier, muchi i plmn. Deoarece n
ficat i rinichi coninutul de enzime antioxidante este mai mare, s-au constatat
creteri ale activitii enzimatice a catalazei cu 25% n rinichi i de pn la 2,3
ori n ficat, n comparaie cu eantioanele de esut neiradiate.
2. Expunerea esuturilor la doze de 2 Gy a determinat o i mai mare
intensificare a activitii enzimatice (de pn la 3 ori fa de martori n cazul esutului
hepatic), att n cazul expunerii cu radiaii X ct i n cazul expunerii cu electroni.
29

Bibliografie selectiv
[1] Brenner, D. J., Hall, E. J. (2007) Computed tomographyan increasing source of
radiation exposure N. Engl. J. Med.357 227784.
[2] Mettler, F. A. Jr, Thomadsen, B. R., Bhargavan, M., Gilley, D. B., Gray, J. E.,
Lipoti, J. A., McCrohan, J., Yosizumi, T. T. and Mahesh M. (2008) Medical radiation
exposure in the US in 2006:preliminary results Health Phys.95 502.
[3] Harrison J. (2007) Polonium-210 as a poison J. Radiol. Prot. 27 1740.
[4] Lozneanu, E.,Fizic nuclear, Ed. Universitii Al. I. Cuza , Iai, 2001.
[5] Khan, F. M., The physics of radiation therapy. Williams & Wilkins
Baltimore,1994.
[6] Podgorsak E. B., Radiation Oncology Physics: A Handbook for teachers and
students. International Atomic Energy Agency, Vienna, 2005.
[7] Mihilescu D., Dozimetria radiaiilor ionizante, Ed. Universitii Al. I. Cuza ,
Iai, 2001
[8] Travis La Terre, E., (1989), Review on cell biology, in: Primer on medical
Radiobiology, 2-nd edition, Year Book Medical Publishers inc., Chicago, 2-25.
[9] Cernea, V.I., Elemente de radiobiologie, Ed. Medical Universitar Iuliu
Haieganu, Cluj, 2003.
[10] Spirin, A., (1958).Spectrophotometric determination of total nucleic acids,
Biokhimiya (USSR), 23, 656662.
[11] Focea, R., Ursache (Oprisan), M., Crenag, D.E., Luchian, T., Experimetal
investigation on DNA and RNA content after exposure of maze seeds in X ray and
electrons beams. 11Th National Conference ob biophysics, Book of Abstracts (pg.54),
Sibiu,2011.
[12] Lerouge S, Wertheimer M R, Yahia LH (2001). Plasma sterilization: a review of
parameters, mechanisms, and limitations. Plasmas Polym. 6(3): 175-188.
[13] UNSCEAR (United Nations Scientific Committee on the Effects of Atomic
Radiation) (2008) UNSCEAR 2006 Report to the General Assembly, Volume I: Effects
of Ionising Radiation, United Nations Sales Publication E.08.IX.69 (New York:
United Nations).
[14] Chung, H.W., Ryu, E.K., Kim, Y.J., Ha, S.W. (1996) Chromosome aberrations
in workers of nuclear-power plants Mutat. Res., 350: 307314.
[15] Bonassi, S., Forni, A., Bigatti, P., Canevarollo, N., De Ferrari, M., Lando, C.,
Padovani, P., Bevegni, M., Stella, M., Vecchio, D., Puntoni, R., (1997) Chromosome
aberrations in hospital workers: evidence from surveillance studies in Italy (1963
1993) Am. J. Ind. Med., 31: 353360.
[16] Balakrishnan S., Rao, S.B., (1999) Cytogenetic analysis of peripheral blood
lymphocytes of occupational workers exposed to low levels of ionising radiation.
Mutat. Res., 442: 3742.
30

[17] Sari-Minodier I., Orsire, T., Bellon, L., Pompili, J., Sapin, C., Botta, A., (2002)
Cytogenetic monitoring of industrial radiographers using the micronucleus assay
Mutat. Res., 521: 3746.
[18] Garaj-Vrhovac, V., Kopjar, N., (2003), The alkaline comet assay as biomarker in
assessment of DNA damage in medical personnel occupationally exposed to ionizing
radiation Mutagenesis, 18: 265271.
[19] McKenzie, S. B. Textbook of hematology, Baltimore, 1996.
[20] Samsoondar, J., Indicator of hemolysis, Spectromedical Inc., Patent No.: US
6,689,612 B2, Cambridge (Ca);
[21] Department of Pathology, University of Virginia, Health System.
[22] Kamat, J.P., Boloor, K.K., Devasagayam, T.P.A., Venkatachalam, S.R., (2000)
Antioxidant properties of Asparagus racemosus against damage induced by gradiation in rat liver mitochondria. J. Ethnopharmacol. 71: 425435.
[23] Fang, Y., Yang, S., Wu, G., (2002). Free radicals, antioxidants, and nutrition.
Nutrition 18: 879887.
[24] Deisseroth, A., and Dounce, A.L., (1970).Physiol. Rev., 50: 319-375 .
[25] Aebi, H., Catalase. Methods of Enzymatic Analysis, Bergmeyer, H.U., ed.,
Verlag Chemie (Weinheim: 1973), pp 673-684.
[26] Yousri, R., Noaman, E., El Shawi, O., (2011): Evaluation of anti-oxidant status
and radioprotective activitz of novel anti- cancer drug in mice, J.Cancer Therapy,
2:616-628. 5
ANEXA: ACTIVITATEA TIINIFIC
I. LUCRRI PUBLICATE N REVISTE TIINIFICE COTATE ISI
1. Bacteria response to non-thermal physical factors: A study on
Staphylococcus aureus, Focea Ramona, Poiata Antoniea, Motrescu Iuliana, Nastuta
Andrei, Creanga Dorina and Popa Gheorghe, African Journal of Biotechnology,
vol.11(18):423-4240, martie 2012.
2. S. Aureus response to accelerated electrons and low dose X-rays , R.
Focea, A. Poiata, D.Creanga, T. Luchian, Romanian Journal of Physics, acceptat
spre publicare pentru vol.57/2012, nr. 7-9(http://www.nipne.ro/rjp/accepted_papers.html).
3. In vitro investigation of the effects of high LET radiations upon the cell
cycle progression in Vero cells, Mihai Cosmin Teodor, Voichita Gabriela, Focea
Ramona, Rotinberg Pincu, International Journal of Radiation Biology, acceptat.

31

II.

LUCRRI PUBLICATE N REVISTE BDI / B+ / B (CNCSIS)


1. Low dose X-ray effects on catalase activity in animal tissue, Ramona
FOCEA, Claudia NADEJDE, Dorina CREANGA, Tudor LUCHIAN, Journal
of Physics: Conference Series (JPCS), submitted.
2. Aberrant cell divisions in root meristeme of maize following exposure to
X-rays low doses compared to similar effects of 50 Hz electromagnetic
exposure, R. Focea, G. Capraru, M. Racuciu, D. Creanga, T. Luchian,
European Physical Journal - Web of Conferences, Nr. 24, Editura Societ
Italiana di Fisica, 2012, ISBN:978-88-7438-069-5, pp. 06004.
3. Pathogen germs response to low-dose radiation medical approach,
A. Poiata,R. Focea, D. Creanga, European Physical Journal - Web of
Conferences, Nr. 24, Editura Societ Italiana di Fisica, 2012, ISBN 978-887438-069-5, pp. 06005.
4. Experimental investigations on plant organisms response to the action of
ionizing radiations, Ramona Focea, Dorina Creanga , Bule. Institutului
Politehnic din Iasi, (Secia Matematic, Mecanic teoretic, Fizic), Tomul
LVI(LX), Fasc.4, Editura POLITEHNIUM, 2010, ISBN ISSN 1244-7863, pp.
267-273.
5. The effect of Microwaves exposure magnetite nanoparticles
administration on sunflower young seedlings, Corina Astefanoaei, Manuela
Ursache, Dorina Creanga, Florin Tufescu, Ramona Focea, Buletinul Institutului
Politehnic din Iasi, (Secia Matematic, Mecanic teoretic, Fizic), Tomul
LVI(LX), Fasc.4, Editura POLITEHNIUM, 2010, ISBN ISSN 1244-7863, pp.
275-283.
6. Dose calculation techniques for lung cancer in external beam
radiotherapy, Mihaela Maria Dulcescu, Calin Buzea, Elena Teodora Albulescu,
Ramona Focea, Manuela Oprisan, Catalina Zetiu, Florin Marin, The Annals of
the Dunrea de Jos University of Galai, Mathematics, Physics, Chemistry,
Informatics, Fascicle II, Year III (XXXII), CD cu ISSN 2066-7124, (2009);
7. Study on the possibilities offered by the clinic dosimetry to minimize side
effects on healthy cells and tissues, Ramona Focea, Dorina E. Creang, Analele
Universitii din Bucureti, seria Fizic, acceptat spre publicare
http://anale.fizica.unibuc.ro/index-anale.htm

32

III. LISTA LUCRRILOR PREZENTATE LA COMUNICRI TIINIFICE


NAIONALE I INTERNAIONALE
1. Low dose X ray effects on catalase activity in animal tissue, Ramona FOCEA, Claudia
NADEJDE, Dorina CREANGA, Tudor LUCHIAN, 17th International School On Condensed
Matter Physics Open Problems in Condensed Matter Physics, Biomedical Physics and their
Applications. VARNA, 2-7 septembrie 2012,
2. Experimental investigation on DNA and RNA content after exposure of maize seeds in X-rays
and electrons beams, Ramona Focea, Ursache (Oprisan) Manuela, Dorina E.Creanga, Tudor
Luchian, A XI-a Conf. Nati. de Biofizica, Sibiu, 10-12 noi. 2011,
3. The modulator influence of electromagnetic exposure on the genetic impact of different
irradiation types upon blood cells, R. Focea, I. Popescu, A. Verdes, C. Stefanescu, D. Creanga,
F. Tufescu, A XI-a Conf. Nati. de Biofiz, Sibiu, 10-12 noi. 2011,
4. S.aureus response to accelerated electrons and low dose x-rays, Ramona Focea, Antonia
Poiata, Dorina Creanga, Tudor Luchian, 12thInternational Balkan Workshop on Applied
Physics, Constanta, 6-8 iulie 2011.
5. Study on the effect of low dose X-rays on plant, R. Focea, G. Capraru, D. E. Creanga, T.
Luchian, 12thInternational Balkan Workshop on Applied Physics, Constanta, 6-8 iulie 2011.
6. Aberrant cell divisions in root meristems of maize following exposure to X-rays low doses
compared to similar effects of 50 Hz electromagnetic exposure, R.Focea, M. Rcuciu, G.
Cpraru, D. Creang, The International Conference on Environmental Radioactivity New
Frontiers and Developments, Roma, 24-28 octombrie 2010;
7. Pathogen germs response to low dose radiation medical approach Poiat, A., Focea, R.,
Creang, D., The International Conference on Environmental Radioactivity New Frontiers
and Developments, Roma, 24-28 octombrie 2010;
8. Study on the possibilities offered by the clinic dosimetry to minimize side effects on healthy
cells and tissues, Ramona Focea, Dorina E. Creang, Sesiunea tiinific anual a Facultii
de Fizic, Universitatea Bucuresti, 18 iunie 2010;
9. Image-assisted decision support in conventional radiation therapy planning, C. Gh. Buzea,
C. Zetiu, F. Marin, M. Oprisan, R. Focea, M. Dulcescu, Fizica i Tehnologiile Educaionale
Moderne, ediia XXXIX, Facultatea de Fizic, Univ. Al. I. Cuza", Iasi, 15 mai 2010;
10. Study on radioprotective and radiosensitizer action mechanism - for medical physics
students, Ramona Focea, Dorina E. Creang, Fizica i Tehnologiile Educaionale Moderne,
ediia XXXIX, Facultatea de Fizic, Univ. Al. I. Cuza", Iasi, 15 mai 2010;
11. Dose calculation techniques for lung cancer in external beam radiotherapy,
Mihaela Maria Dulcescu, Calin Buzea, Elena Teodora Albulescu, Ramona Focea, Manuela
Oprisan, Catalina Zetiu, Florin Marin, 1st International Symposium on Applied Physics Materials Science, Environment and Health (ISAP1), Facultatea de tiine, Universitatea
Dunrea de Jos, Galai, 28 - 29 noiembrie 2009;

33