PRACTICA FARMACEUTIC

Progrese n tehnologia de fabricare

a vaccinurilor abordri i
reglementare
ADVANCES IN MANUFACTURING TECHNOLOGY OF VACCINES
APPROACHES AND REGULATION
Biol. pr. Mirela Tavakol
Agenia Naional a Medicamentului i a Dispozitivelor Medicale (ANMDM)

Vaccinarea a reprezentat pentru omenire un

instrument crucial pentru combaterea, inerea sub
control i eradicarea unor boli infecioase grave.
Descoperirea si introducerea practicii vaccinrii au
nsemnat reducerea esenial a mortalitii asociate
mbolnvirilor cu agenii patogeni pentru care au fost
obinute vaccinuri. De exemplu, conform datelor
Organizaiei Mondiale a Sntii (OMS), vaccinurile
mpotriva tuberculozei, difteriei, tetanosului, pertussis,
poliomielitei, rujeolei, hepatitei B i Hib contribuie
anual la prevenirea a 2,5 milioane de decese.

DE LA VACCINURI CONVENIONALE LA
VACCINURILE MODERNE
Vaccinurile pot fi ncadrate n multe tipuri, n funcie de
modalitatea de obinere, reflectnd evoluia n
decursul timpului a tehnologiei de fabricare a
vaccinurilor. Astfel, vaccinurile pot conine
microoorganisme ntregi, vii atenuate sau inactivate.
Vaccinurile vii atenuate au fost primele vaccinuri
utilizate. Acest tip de vaccinuri este obinut prin
cultivarea microorganismelor n condiii suboptimale
sau prin pasaj succesiv n culturi, tehnici ce determin
atenuarea virulenei n condiiile meninerii capacitii
de a induce rspunsul imun. Este cazul vaccinului
poliomielitic (Sabin), tifoidic oral, rujeol-rubeoloreion, vaccinul BCG, vaccinul mpotriva febrei galbene
etc. Dei caracterizate printr-o eficacitate foarte
ridicat, vaccinurile vii atenuate au dezavantajul
riscului de apariie a mutaiilor, respectiv de reversie la

virulen, precum i contraindicaia n cazul

persoanelor imunocompromise.
O alt categorie de vaccinuri o constituie vaccinurile
care conin microorganisme ntregi, ns inactivate prin
metode chimice sau fizice. Din aceast categorie fac
parte vaccinurile mpotriva hepatitei A, vaccinul
poliomielitic (Salk), vaccinul gripal etc. Acest tip de
vaccinuri are avantajul unei stabiliti mai ridicate, ns
eficacitatea este mai redus i necesit rapeluri.
Un alt tip de vaccinuri este cel reprezentat de
anatoxine toxine bacteriene tratate chimic pentru
a-i pierde toxicitatea, n contextul meninerii
imunogenitii. Exemple de anatoxine sunt anatoxina
tetanic sau anatoxina difteric.
Deoarece vaccinurile convenionale au ridicat pe
parcursul timpului dificulti determinate n principal
de complexitatea preparatului vaccinal utilizat i
manifestate prin reacii adverse, s-a impus rafinarea
tehnologiilor de fabricare a vaccinurilor, n sensul
concentrrii eforturilor asupra obinerii unor vaccinuri
care s conin antigene nalt purificate, eliminnd
astfel riscul accidentelor post-vaccinale care decurg din
reversia la virulen, a reaciilor de tip autoimun sau a
reaciilor alergice. De asemenea, dezvoltarea
tehnologiilor de fabricare a urmrit cunoaterea la
nivel molecular a antigenelor care declaneaz
rspunsul imun din partea organismului pentru a
reproduce prin sintez unele antigene (vaccinuri

Adresa de coresponden:
Biol. pr. Mirela Tavakol, Agenia Naional a Medicamentului i a Dispozitivelor Medicale (ANMDM), Str. Aviator Sntescu nr. 48,
Sector 1, Bucureti

22

Vol. 7, Nr. 1, An 2014

CERCETARE TIINIFIC
polipeptidice) sau a obine antigene proteice prin
tehnologia ADN recombinant.

VACCINURILE SUBUNITARE
Vaccinurile subunitare conin exclusiv anumii
determinani antigenici ai microorganismelor
patogene. Vaccinurile subunitare sunt obinute fie
plecnd de la procese de cultivare convenional, fie
prin tehnologia ADN recombinant. Vaccinurile
subunitare deriv din vaccinurile coninnd ageni
infecioi inactivai, mbuntind ns aspectele de
eficacitate i siguran ale acestora din urm.
Determinanii antigenici inclui n vaccin stimuleaz n
mod eficient rspunsul imun, iar prezena unui numr
redus de molecule provenite din microorganismul
patogen reduce riscul de apariie a reaciilor adverse.
Vaccinurile subunitare conin n principal structuri de
suprafa ale patogenilor, aa cum este cazul vaccinului
mpotriva hepatitei B, care conine antigenul Australia,
antigen de suprafa (AgHBs). Tot antigene de
suprafa sunt i hemaglutinina i neuraminidaza,
glicoproteine de suprafa coninute n vaccinurile
gripale subunitare. Tot structuri de suprafa, ns de
natur polizaharidic (antigene capsulare), sunt
coninute i n vaccinurile mpotriva Haemophilus
influenzae, Streptococcus pneumoniae sau Neisseria
meningitidis. Deoarece acest tip de structuri sunt slab
imunogene, pentru obinerea unor vaccinuri cu
eficacitate adecvat, antigenele sunt conjugate cu
molecule proteice (de exemplu, cu anatoxin tetanic).
Astfel, una dintre provocrile obinerii vaccinurilor
moderne este reprezentat de faptul c un nivel nalt
de purificare al antigenelor conduce uneori la
pierderea imunogenitii, necesitnd cuplarea cu un
carrier proteic sau cu o sare de aluminiu. Utilizarea
adjuvanilor este ns asociat cu apariia reaciilor
locale la locul de vaccinare. De asemenea, durata
imunitii conferite prin vaccinare este mai redus
dect n cazul vaccinurilor vii.
Vaccinurile obinute prin tehnologia ADN recombinant
sunt produse prin modificare genetic, ADN-ul care
codific pentru molecula int fiind introdus de obicei
prin intermediul unei plasmide sau a unui vector viral,
ntr-un microorganism sau linie celular adecvat, n
care ADN-ul este exprimat i tradus la protein.
Produsul dorit este ulterior recuperat prin extracie i
purificare. n acest mod a fost obinut vaccinul
mpotriva hepatitei B, pe celule de Saccharamyces
cerevisiae. Cerinele de calitate pentru vaccinurile
obinute prin tehnologia ADN recombinant sunt
stipulate n monografia specific din Farmacopeea
European.

Vaccinurile ADN reprezint cea mai recent direcie de

dezvoltare n fabricarea de vaccinuri. Inocularea
intramuscular sau intradermic a vaccinurilor
constituite din plasmide ADN conduce la internalizarea
ADN-ului n celule, la exprimarea antigenului codificat
de acesta i n final la instalarea unui rspuns imun
antigen-specific. ADN-ul injectat este reprezentat
practic de o plasmid plus un promotor care asigur
sinteza proteinei imunogene.
Pn n prezent nu exist nici un vaccin ADN de uz
uman autorizat, acest tip de vaccin aflndu-se nc n
investigaie clinic. Astfel, se afl n dezvoltare
vaccinuri ADN n care antigenele ce urmeaz s fie
exprimate de plasmidele obinute prin tehnici de
inginerie genetic, aparin virusurilor gripale, HIV,
agentului patogen al tuberculozei, malariei i antigene
ale virusului Ebola. Avantajul acestui tip de vaccin
rezid n faptul c stimuleaz att imunitatea umoral,
ct i cea celular. De asemenea, acest tip de vaccinuri
este stabil i nu impune meninerea n condiii
controlate (refrigerat), aa cum este cazul pentru
vaccinurile convenionale. Spre deosebire de
vaccinurile vii atenuate, n cazul vaccinurilor ADN nu
sunt prezente riscurile care decurg dintr-o potenial
atenuare neadecvat a tulpinilor vaccinale. Alte
avantaje ale acestei noi tehnologii sunt reprezentate de
faptul c plasmidele utilizate sunt uor de fabricat n
cantiti mari, iar imunitatea conferit este pe termen
lung.
Dezavantajele identificate pn n prezent n ceea ce
privete vaccinurile ADN sunt legate de faptul c acest
tip de vaccinuri este limitat la imunogene proteice, dar
i de alte poteniale riscuri care urmeaz a fi evaluate i
aduse sub control prin metode specifice (risc mutagen,
risc de determinare a rezistenei la antibiotice la
recipient etc.).

REGLEMENTAREA VACCINURILOR
Conform legislaiei europene n vigoare, urmtoarele
produse pot fi considerate medicamente biologice:
proteine recombinante, anticorpi monoclonali,
produse derivate din snge, produse imunologice
(vaccinuri, seruri, toxine), alergeni i medicamente
obtinute prin tehnologii avansate (medicamente
pentru terapie genic i terapie celular). n plus,
numeroase alte produse sunt considerate, de
asemenea, medicamente biologice, pe baza unor
considerente tiinifice, acestea ntrunind criteriile
legale ale originii biologice i complexitii acestora.
CMDh (Grupul de coordonare a procedurilor de
recunoatere mutual i descentralizat pentru
medicamente de uz uman) a elaborat i publicat un
Vol. 7, Nr. 1, An 2014

23

PRACTICA FARMACEUTIC
document care listeaz aceast categorie de produse
tratate n mod inconstant ca produse biologice.
Vaccinurile fac parte din categoria medicamentelor
biologice i, n consecin, se supun reglementrilor
specifice.
Organismul responsabil pentru autorizarea vaccinurilor
obinute prin tehnologia ADN recombinant este
Agenia European a Medicamentului (European
Medicines Agency EMA). EMA este, ntre altele,
responsabil pentru autorizarea i a altor medicamente
obinute prin procese biotehnologice, aa cum sunt
metodele tip hibridoma i de obinere a anticorpilor
monoclonali, dar i de expresie controlat a genelor
care codific proteine biologic active n organisme
procariote i eucariote, inclusiv celule mamaliene
transformate.
Agenia European a Medicamentului este
responsabil pentru evaluarea tiinific a
medicamentelor dezvoltate de companiile
farmaceutice i pentru care se intenioneaz utilizarea
n Uniunea European. Pe site-ul EMA exist
disponibile ghiduri specifice pentru produsele
biologice. n ceea ce privete vaccinurile ADN, exist de
asemenea disponibile pe site-ul EMA ghiduri specifice,
n prezent aflndu-se n curs de actualizare ghidul
referitor la aspectele de calitate, non-clinice i clinice
pentru produsele obinute prin transfer genic
(CPMP/BWP/3088/99).
Ghidurile sunt instrumente complementare
monografiilor i capitolelor generale ale Farmacopeei
Europene sau ale altor farmacopei, constituind
instrumentul tiinific de baz folosit ca referin n
scopul asigurrii calitii medicamentelor. Ghidurile
sunt disponibile pe site-urile oficiale ale EMA
(www.ema.europa.eu), ale Conferinei Internaionale
pentru Armonizare (International Conference on

Harmonization - ICH) (www.ich.org), OMS

(www.who.int) sau n volumul 3A al Rules Governing
Medicinal Products in the European Union Eudralex.
n plus fa de cele menionate, din punct de vedere al
asigurrii unei caliti adecvate a medicamentelor
imunologice i a produselor derivate din snge, aceste
categorii de medicamente sunt supuse procedurii de
eliberare oficial a seriei (Ocial Control Authority
Batch Release OCABR), procedur aplicat n statele
membre ale Uniunii Europene sub coordonarea
Directoratului European pentru Calitatea
Medicamentului (EDQM). Aceast procedur
presupune verificarea lot de lot, prin testare de
laborator, a conformitii produsului cu specificaiile
aprobate n cadrul autorizrii. n acelai timp, se
realizeaz analiza tendinelor pentru parametrii testai
n timpul produciei i eliberrii seriei. Necesitatea
testrii suplimentare de ctre autoritatea competent
a seriilor de produse imunologice i derivate din snge
decurge, esenial, din variabilitatea acestor tipuri de
produse, complexitatea procesului de fabricaie, dar i
a metodelor de control. Aceste aspecte constituie
numai o parte din fundamentul procedurii de eliberare
a seriei, procedur ce confer o siguran suplimentar
asupra calitii medicamentelor imunologice.

CONCLUZIE
Progresele remarcabile nregistrate n tehnologia de
fabricare a vaccinurilor precum i apariia de noi
vaccinuri moderne au impus, ntre altele, revizuirea
abordrii din punct de vedere al reglementrii
vaccinurilor i au deschis noi perspective din punct de
vedere al aplicabilitii principiilor vaccinrii.
Introducerea de noi vaccinuri n programele de
imunizare naionale s-a reflectat, conform OMS, n
datele statistice care demonstreaz succesul n ceea ce
privete controlul bolilor prevenibile prin vaccinare.

BIBLIOGRAFIE
1. V. Lazr, C. Chifiriuc, R. Cernat, D. Bulai, D.
Stewart-Tull. Imunobiologie, Editura Univ.
din Bucureti, 2006
2. Jonathan A. McCullers, MD, Jerey D.
Dunn. Advances in vaccine technology and
their impact on managed care, PharmD,
MBA, P&T, Vol. 33 No. 1, January 2008
3. Christin Andersson. Production and
delivery of recombinant subunit vaccines,
Department of Biotechnology, Royal

24

Vol. 7, Nr. 1, An 2014

Institute of Technology (KTH), Stockholm,

Sweden, 2000
4. Farmacopeea European, ediia 8.0, 2014,
Products of recombinant DNA technology,
01/2008:0784.
5. Annex to Regulation (EC) no 726/2004 of
the European parliament and of the Council
of 31 March 2004 laying down community
procedures for the authorisation and
supervision of medicinal products for

human and veterinary use and establishing

a European Medicines Agency, amended.
6. http://www.ema.europa.eu
7. http://ec.europa.eu/health/documents/
eudralex/index_en.htm
8. http://www.who.int/immunization/
monitoring_surveillance/routine/
coverage/en/