Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CURS 9 Bacteriologie
CURS 9 Bacteriologie
BACTERII INTESTINALE
Familia Enterobacteriaceae
Generalitti
Familia Enterobacteriaceae este alctuit din numeroose specii,
- de bacili Gram negativi, nesporulai,
- mobili, cu cili peritrichi, sau imobili,
- care se cultiv uor pe medii de cultur simple, fermenteaz glucoza cu sau fr producere de gaz,
- reduc nitratii n nitriti.
- sediul obinuit al acestor germeni este intestinul uman sau animal.
Familia cuprinde 5triburi, mprtite pe baza caracterelor biochimice.
Tribul 1 - genul ESCHERICHIA
- genul SHIGELLA
Tribul 2 - genul SALMONELLA
- genul ARIZONA
- genul CITROBACTER
Tribul 3 - genul KLEBSIELLA
- genul SERRATIA
- genul ENTEROBACTER
Tribul 4 - genul PROTEUS
- genul PROVIDENCIA
Tribul 5 - genul YERSINIA
Genurile Shigella i Salmonella sunt intotdeauna patogene. Celelalte genuri sunt saprofite, conditionat patogene, cu
excepia speciei Yersinia pestis care este intotdeauna patogen.
Genul ESCHERICHIA
Face parte din familia Enterobacteriaceae, sunt saprofite sau condiionat patogene.
Cea mai important specie este Escherichia coli.
n caz de boal aceasta poate fi pus n evident n: snge, urin, puroi, fecale, etc..
Caractere morfologice i tinctoriale
Sunt bacili Gram negativi, lungi de 2-3m i groi de 0,5m, ciliai, ceea ce face ca majoritatea s fie mobili, ei nu
sunt sporulai
Caractere de cultur
Nu sunt germeni pretenioi, cresc abundent pe mediile de cultur obinuite: bulion simplu, apa peptonat, geloza
nutritiv.
Formele S tulbur uniform bulionul i dau natere la colonii netede, bombate, cu margini regulate, cu diametrul
de 2-3 mm pe mediile gelozate.
Formele "R" cresc n bulion care se depun la fundul eprubetei si dau colonii rugoase cu margini neregulate, pe
mediile solide. Se pot folos i mediile slab diferentiate:
Pe mediul AABTL (agar albastru de bromtimol lactoz) formeaz colonii galbene deoarece fermenteaz lactoza,
Pe mediul Levine (geloz lactozat cu eozin i albastru de metilen) coloniile au o culoare negricioas cu luciu
metalic spre deosebire de alte Enterobacteriaceae care au o culoare roz-palid..
Caractere biochimice
Sunt bacterii aerobe, facultativ anaerobe.
Ei posed un bogat echipament enzimatic:
- fermenteaz lactoza,
- produc indol,
- nu descompun ureea,
- decarboxileaz lizina,
- nu lichefinz gelatina i pot avea
- activitate hemolitic i dermonecrotic.
Rezistent
Bacilii coli rezist timp ndelungat n mediul exterior, ei sunt omori prin nclzire la 60C, timp de 40-60 min.
Sunt sensibili la actiunea substantelor dezinfectante: cloramin, fenol, formol, sublimat.
1
Sunt sensibili la actiunea streptomicinei, cloramfenicolului, la unele sulfamide, aminoglicozide, qhinolone, dar
sunt rezistenti la penicilin.
Unii colibacili sintetizeaz substane care distrug alte specii bacteriene, colicine.
Structura antigenic
Au o structur antigenic complex legat de existenta celor trei antigene.
Dup schema Kauffmann-White, pe baza antigenelor au fost clasificate n:
- grupuri serologice (O") i
- tipuri serologice (H" i K").
- O" (166 serogrupuri),
- K"- 98 sertipuri (A, B, L, Vi),
- H" (53 serotipuri);
Antigenul solubil este endotoxina care se elibereaz dup moarte bacteriei.
Patogenie
Cei mai multi colibacili nu sunt patogeni.
Virulenta i toxicitatea bacteriilor patogene sunt legate de prezena Ag K i a unor toxine (enterotoxina, neurotoxina
etc.) precum i producerea hemolizinei i factorului citotoxic necrotizant.
Boala la om: n anumite conditii E. coli poate s dea natere la diferite afeciuni locale sau generale:
- afeciuni genitourinare (85 % patotipuri uropatogene datorat unor adezine, hemolizine, aerobactinei, care au
receptori pe tractul urinar),
- infectii intestinale.
Sunt 6 patotipuri diareigene:
ETEC(enterotoxigen),
EHEC (enterohemoragic),
EIEC (enteroinvaziv),
EAggEC (enteroagregativ),
EPEC(enteropatogen),
DAEC (enteroaderent difuz).
Mai poate genera: endocardite, meningite, septicemii. Rspunsul imun este slab,
Tratament
Se face conform antibiogamei.
Se mai poate administra ser anticolibacilar sau se prepar un autovaccin din tulpina izolat de la pacient.
Tratamentul cu bacteriofagi poate da rezultate bune mai ales cnd el este aplicat local.
Diagnosticul de laborator
Const n izolarea i identificarea colibacililor din produsele patogene.
Recoltarea se face n funcie de produsele patogene.
Hemocultura
n strile septicemice se recolteaz n condiii de perfect sterilitate, sngele, care se nsmneaz la patul
bolnavului n bulion 1/10, mediul astfel nsmntat este introdus la termostat la 37 C.
Dup 24 h, dac bulionul se tulbur, se face o trecere pe un mediu gelozat, dac se izoleaz germenele, se va trece
la identificarea lui.
Diagnosticul de laborator
Coprocultura
- Materiile fecale sunt nsmnate prin dispersie pe medii solide diferentiale care s conina lactoz i un indicator
de pH.
- Apoi se va trece la identificarea biochimic i serologic a tulpinei.
Urocultura
- Dup ce se recolteaz urina n condiii aseptice, se nsmneaz pe mediile solide amintite, apoi se va trece pe
mediile politrope, pentru identificare, dup care se va face antibiograma.
Genul SHIGELLA
Germenii din acest grup produc dizenteria bacilar.
Bacilii dizenterici sunt gsii n materiile fecale ale bolnavilor de dizenterie i ale purttorilor. De asemenea se pot
gsi n unele alimente contaminate, ape poluate.
Caractere morfo-tinctoriale
Sunt bacili Gram negativi, imobili i nu sunt capsulai.
Caractere de cultur i metabolism
- Bacilii dizenterici cresc uor pe mediile de cultur simple.
2
Caractere de cultur
> Sunt germeni aerobi, facultativi anaerobi.
> Cresc pe medii de cultur simple (bulion, ap peptonat, geloz nutritiva).
> Cresc sub forme S" care tulbur uniform mediile lichide i formeaz colonii netede, rotunde, lucioase pe medii
solide; sau sub form R", care sedimenteaz n mediile lichide i dau natere la colonii zbrcite, cu margini
neregulate, pe medii solide.
Structura antigenic
Prezint toate tipurile de antigene.
1. Antigene somatice O , pe baza acestui antigen genul este mparit n 65 de grupuri serologice.
2. Antigene flagelare H", pe baza acestui antigen, grupurile serologice au fost mprtite n tipuri serologice.
Acest antigen prezinta dou faze:
- faz specific ce are 90 de fractiuni (a, b, c..z, z1, z2, z3..),
- faza nespecific, ce are doar 7 fraciuni, dar n acest caz nu poate fi determinat specia.
Salmonella typhi
Este cea mai patogen specie, i sintetizeaz totdeauna un flagel din proteine specifice, de aceea poate identificat.
Kauffman i White au stabilit c Salmonella cu Ag O" = 9 sau 12 i cu Ag"H" = d, este Salmonella typhi, iar cu
Ag"H"= g sau m este Salmonella enteritidis.
Acest fapt are mare importan practic deoarece cu ajutorul serurilor imune specifice se poate pune diagnosticul.
Antigenul solubil este endotoxina, ea are un rol patogen mult mai important la salmonelele cu caracter invaziv,
deoarece sunt puse n circulaie, ducnd la generalizare (febra tifoid).
Caractere de patogenitate
Toate salmonelele sunt patogene, prin multiplicare i endotoxinogenez, iar cele ce prezint i o pseudocapsul
(Ag Vi") au i caracter de invazivitate.
La om salmonelozele sunt sub dou forme principale:
- Boli septicemice, cu evolutie grav i mortalitate ridicat, cum sunt febra tifoid (produs de bacilul tific) i
febrele paratifoide A. B i C (produse de bacili parotidici A, B i C).
- Boli localizate, mai ales la nivelul tubului digestiv (toxiinfectiile alimentare i enteritele), cu o durat mai scurt i
de o gravitate mai redus.
Imunitatea
Fotii bolnavi de febr tifoid i parotifoid dobndesc o imunitate destul de solid, care poate dura toat viata.
Imunitatea n toxiinfeciile alimentare i a enteritelor este slab.
Imunitatea antitifoparatifoidic se poate dobndi i in mod artificial, prin vaccinare.
Diagnosticul de laborator in infectiile tifo-paratifoidice este bacteriologic i imunologic
Diagnosticul bacteriologic
Produsele patologice care se examineaz sunt: sngele, mduva oaselor, materiile fecale, urina, bila, lichidul din
petele lenticulare, n cazuri letale i sngele din mduv, fragmente din organe (ficat, splin, ganglioni mezenterici.
Alegerea produselor patologice se face n funcie de cazul studiat (bolnav, sau purttor sntos).
n prima sptmn de boal, germenii pot fi gsii in snge i n mduva oaselor (hemoculturile sunt pozitive
peste 90% ), iar 60% in materiile fecale.
n sptmna a doua pot fi depistai si n urin la 30%.
n sptmna a 3 a si a 4 a, hemoculturile suni pozitive doar 40%, n timp ce coproculturile vor fi pozitive n
proportie de 80%.
La convalescenti sau la purttori, produsele de cercetat sunt materiile fecale, bila i urina.
Coprocultura
La bolnavi se recolteaz 4-5 g de materii fecale, care se introduc ntr-un recoltor steril, dac este diareic se
recolteaz n aceast stare dac este consistent se omogenizeaz cu SF steril, dac bolnavul este constipat, se
recolteaz dupa o clism cu ap fiart i rcit.
Fotilor bolnavi de febr tifoid i contaciilor li se administreaz o doz unic de sulfat de sodiu i sulfat de
magneziu (cte 15 g) dizolvate in 200-250 ml apa, apoi se recolteaza materiile fecale trei zile consecutiv.
Dup recoltare vasele se dezinfecteaz cu o solutie de clorur de var 10%, sau se sterilizeaz.
Dac probele trebuie transportate ele se fac n medii de transport de un personal instruit.
Fiecare prob se nsmnteaz n mediul de mbogire cu selenit de sodiu sau mediul Mller-Kouffmann.
Dup incubare la 370C 18-24h, se trece dup mediile de mbogire (selenit) pe mediile selective i anume mediul
A.D.C.L (mediul Leifson) sau pe mediul cu bil Istrati-Meitert.
4
Inoculai la animale de laborator (iepure, oarece, cobai) produc n cteva zile o septicemie mortal.
Imunitatea este slab.
Tratamentul
Se face dup antibiogram, dar pentru c apar tulpini rezistente se completeaz cu autovaccin i bacteriofagi
specifici.
Genul YERSINIA
Sunt enterobacteriacee cu morfologie cocobacilar, imobile la 37 C i mobile la 22-30C (numai Y. pestis este
imobil).
Cresc pe medii uzuale, fermenteaz glucoza cu producere de gaz, dar nu acidific lactoza (cu exceptia Y.pestis).
Au o intens activitate ureazic, nu produc H2S, lizindecarboxilaz i fenilalanindezaminaz, nu cresc pe medii cu
citrat (Simmons).
Genul Yersinia cuprinde 3 specii:
Yersinia pestis,
Yersinio enterocolitica i
Yersinia pseudotuberculosis.
Y.pestis este totdeauna patogen pentru om, celelalte sunt conditionat patogene.
Generaliti
Sunt gemeni patogeni pentru obolan se dezvolt n focare naturale, se transmit de la un animal la altul prin purici
(vectori), sau prim muctur de obolan (direct).
La om se transmite prin muctura obolanului sau nteptura puricelui.
Boala pe care o face omul este PESTA sau CIUMA ea face parte din bolile pestilentiale cu mortalitate de 95 % i
contagiozitate toarte mare.
Diagnosticul este bacteriologic de urgen
Caractere morfologice i tinctoriale
Sunt cocobacili Gram negativi, cu tendin la coloratie bipolar, cu lungimea de 1-2 m i limea de 0,3-0,5 m,
sunt dispui n lanuri scurte, prezint o capsul, sunt nesporulai, sunt imobili.
Caractere de cultur
Y.pestis crete uor pe mediile de cultur, dar temperatura optim este 28-33 0 C, pe geloz simpl timp de 48 h,
colonii de 1-2 mm (la 24h de 0,1-0,2 mm), rotunde, cu margini uor franjurate, la nceput gri cu centrul glbui i
bombat (plrie chinezeasc), iar pe AABTL sunt lactozo negative, colonili albastru-verzui.
Celelalte specii de Yersinia, dezvolt la 370C n 24 h colonii de 1-1,5 mm, la 48h ating 2-3 mm.
Caractere de rezistent
Este puin rezistent n mediul exterior, rezist 2-3 sptmni n produsele patologice, dar 1 an pe cadavre.
Este distrus de dezinfectante.
Este sensibil la: tetraciclin, cloramfenicol, streptomicin.
Caractere antigenice
Prezint antigene somatice: de perete O", capsular K' i antigene solubile, endotoxina, care se elibereaz dup
moartea bacteriei.
Caractere de patogenitate
Se manifest prin multiplicare i invazivitate date de antigenul capsular.
Y.pestis
D pesta sau ciuma, care se manifest mai nti prin aparitia unei vezicule, la locul nepturii, apoi ajunge n
ganglionii limfatici, apare o adenopatie (bubon pestos), daca aprarea este slab, germenii se vor multiplica n snge,
pot da o septicemie (pesta) cu evoluie foarte rapida, mortalitatea n pesta bubonic este de peste 75 %.
Infectia poate ajunge n pulmon, apare pesta pulmonar, n acest caz bolnavul este contagios prin picturile Pflgge.
Y.pseudotuberculosis
Ajunge la om prin alimente i poate s produc enterite subacute nsoite de adenopatie mezenteric.
Y. enterocolitica
Ajunge la om prin alimente i poate da la copii: enterite, sindromul dureros al fosei iliace drepte; iar la adult
artritele reactive i eritemul nodos.