Sunteți pe pagina 1din 16

LUCRARE DE DIZERTATIE

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN


INDUSTRIA LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN
BIOLUMINISCENTA
Coordonatori:
Sef lucrari Dr. Stelian Baraitareanu
Conf. Dr. Mihaela Popp
Masterand:
Popazu (Romanciuc) Claudia

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Cuprins

Partea I-a

STUDIU BIBLIOGRAFIC
* Detectia ATP prin bioluminiscenta
* Utilizarea metodei ATP/bioluminscenta la monitorizarea igienei suprafetelor
* Utilizarea metodei ATP/bioluminscenta la monitorizarea igienei ( calitatii microbiologice ) apei ca materie prima
* Utilizarea metodei de detectia a ATP prin bioluminiscenta la monitorizarea igienei laptelui crud, pasteurizat, ESL
(Extending Shelf Life) si UHT

Partea a II-a

CERCETRI PERSONALE: Studiu comparativ intre metoda microbiologica si ATP /bioluminiscenta in monitorizarea
starii de igiena a unor suprafete din spatiul de productie / ambalare intr-o fabrica de lactate
* CONCLUZII
* Bibliografie

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

INTRODUCERE

Sistemele pentru siguranta alimentelor : mai proactive si mai preventive


HACCP: Analiza Riscului si Punctelor Critice de Control (Hazard Analysis and Critical Control Point )
. In Romania: SR ISO 22000/2005: Sisteme de management al sigurantei alimentelor
Cerinte pentru orice organizatie din lantul alimentar
-comunicare interactiva;
-sistem de management al riscurilor;
- programe preliminare;
- principii HACCP.
Sistem HACCP eficace= metode rapide de analiza pentru:
-monitorizare parametrii de control
-validarea performantelor sistemului prin teste microbiologice

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

IGIENA SUPRAFETELOR CARE VIN IN CONTACT DIRECT CU ALIMENTUL


element esential in producerea de alimente sigure, de calitate

eficace = fara urme de produs


spalre cu detergenti
neeficace = cu urme de produs = substrat

nutritional pentru MO

IGIENIZARE
eficace = fara MO
dezinfectie
neeficace = MO prezente

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

METODE DE
MONITORIZARE A
STARII DE IGIENA

METODELE CLASICE:
inoculare in placi cu AGAR

Metoda ATP

AVANTAJE

DEZAVANTAJE

identific microflora

72 ore pentru rezultate

bine documentate

rezultatele pot fi variabile

nivelul de contaminare poate


fi cuantificat

nu iau in considerare si alte


tipuri de reziduuri

Rezultate rapide (cateva


minute)

Nu identifica microflora

Ia in considerare si alte tipuri


de reziduuri

Nu se poate face distinctie


intre tipurile de reziduuri

nivelul de contaminare poate


fi cuantificat

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

BIOLUMINISCENTA : proces biologic de producere a luminii de catre organismele vii

in celulele vii
Reziduurile de alimente contin ATP
sub forma libera

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Igienizare completa in 4 pasi:


1-prespalare -apa la 40 C, 2 minute;
2-spalarea cu solutie NaOH 1%, la 70C, timp de 25 minute;
3-clatirea cu apa la 25 C
4-dezinfectie cu acid peracetic, 250ppm;
Planul de experiment :
Procedura A: numai pasul 1
Procedura B: pasul 1+4
Procedura C: ciclul complet.
Procedurile de igienizare A-C s-au aplicat in zile diferite, pe parcursul a 4 luni.

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Rezultate si discutii I
Limitele admise pentru fiecare loc de recoltare sunt stabilite intern, de catre echipa HACCP a fabricii de lactate, in
functie de diferite criterii dintre care cel mai important este gradul de pericol pentru siguranta alimentara si legislatia in
domeniu.
In cazul analizei ATP, limita admisa de 10 URL si toate rezultatele 10 URL sunt considerate negative. Pentru analiza
ATP nu exista limite maxim admise legiferate.
In cazul analizelor NTG, limitele admise pentru tancul de lapte crud si pentru tancul de standardizare s-au stabilit intern
iar pentru celelalte puncte de recoltare s-au preluat limitele din legislatie [Ordin MS 976/1998].
Asa cum se poate observa in toate cele trei tabele, toate rezultatele analizelor probelor recoltate inainte de a se aplica
orice procedura de igienizare sunt in afara limitelor admise, atat in cazul analizelor NTG cat si in cazul analizelor ATP.
Acest lucru demonstreaza faptul ca, in 100% din cazuri, acolo unde a existat contaminare microbiana am avut si rezultat
ATP pozitiv (>10URL), datorat atat incarcaturii microbiene cat si reziduurilor de produs lactat care contine si ATP nonbacterian. In cazul punctelor de recoltare 3-6, fiind vorba despre suprafete care in timpul procesului de productie trebuie
sa fie aseptice, valorile NTG inainte de aplicarea unei proceduri de igienizare depasesc cu putin limita admisa in timp ce
valorile ATP sunt comparabile cu cele de la punctele de recoltare 1 (lapte crud) si 2 (lapte caruia i s-a aplicat o
pasteurizare joasa). Obtinerea unor valori mari pentru ATP si mici pentru NTG in acest caz se datoreaza faptului ca pe
suprafetele respective exista o cantitate mare de produs lactat pasteurizat ramas de la lotul precedent (care contine ATP
non-bacterian) dar o incarcatura microbiana mica.

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Rezultate si discuti-II.
Procedura de igienizare A :
Chiar daca valorile NTG si ATP au scazut , nu s-au plasat in limitele admise. Acest lucru demonstreaza ca aceasta
procedura nu este eficienta nici pentru a indeparta contaminarea microbiana nici in cazul indepertarii urmelor de produs
lactat.
Procedura de igienizare B :
Valorile rezultatelor analizelor NTG au scazut simtitor in comparatie cu procedura A, unele dintre ele fiind in limitele
admise (puncte de recoltare 2-6) altele nu (punct de recoltare 1) (tabel 16). Acest lucru demonstreaza ca aceasta
procedura nu este 100% eficienta in combaterea contaminarii microbiene.
In cazul analizelor ATP toate valorile obtinute au fost in afara limitelor admise, chiar daca , pe acelasi punct de recoltare,
prin analiza NTG s-au obtinut valori in limitele admise (tabel 16, pct. 3 si 5 de recoltare). Aceste rezultate se pot
explica prin absenta bacteriilor viabile pe suprafetele respective ( efect datorat cel mai probabil dezinfectantului) si
prezenta de reziduuri de produs lactat steril (care contin ATP nonmicrobian). Deci, chiar daca dezinfectia a fost eficienta
in unele cazuri, indepartarea tuturor resturilor de prodius lactat nu s-a realizat pentru nici un punct de recoltare, acestea
putand deveni suport de crestere pentru o eventuala post-contaminare microbiana
Procedura de igienizare C:
Toate valorile obtinute, atat pentru NTG cat si pentru ATP s-au incadrat in limitele admise in proportie de 100%.,
demonstrand eficienta procedurii de igienizare atat in indepartarea resturilor de produs lactat cat si la dezinfectie.

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

PROCEDURA A

Nr. punct de
recoltare

Locul recoltarii

Rezultate probe recoltate inainte de aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

ATP (RLU)

Rezultate probe recoltate dupa aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

ATP (RLU)

>300(foto 1)

8623

>300

3562

>300

5593( vezi foto15)

>300

2698

254

8002

39 (vezi foto 7)

845

148 (vezi foto 6)

3596

37 (vezi foto 8)

821 (vezi foto 13)

9 (vezi foto 5)

8236

659

2563

767 (vezi foto 14)

8056

659

10

6658

776

cuva umplere masina ambalat


(limite admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

10

3698

356

14

8065

822 (vezi foto 17)

capete de dozare masina ambalat


(limite admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

3911

299

11

8220

698

tanc lapte crud (limite admise:


NTG<10cfu/cm2; ATP20RLU)

tanc standardizare (limite admise:


NTG<10cfu/cm2; ATP20RLU)

tanc aseptic de umplere (limite


admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)
linie aseptica de ambalare (limite
admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

PROCEDURA B
Nr. punct
de
recoltare

Locul recoltarii

Rezultate probe recoltate inainte de aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

ATP (RLU)

Rezultate probe recoltate dupa aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

ATP (RLU)

tanc lapte crud (limite


admise: NTG<10cfu/cm2;
ATP20RLU)

>300

6694

39

1654

>300

4023 ( vezi foto16)

48

1123

tanc standardizare (limite


admise: NTG<10cfu/cm2;
ATP20RLU)

165 ( vezi foto4)

7694

14

423

236

5110

256

tanc aseptic de umplere


(limite admise:
NTG<1cfu/cm2; ATP10RLU)

2658

<1

59

5698

<1(vezi foto 2)

59 (vezi foto 12)

linie aseptica de ambalare


(limite admise:
NTG<1cfu/cm2; ATP10RLU)

6894

125

4986

<1

67

cuva umplere masina


ambalat (limite admise:
NTG<1cfu/cm2; ATP10RLU)

8214

<1

136

9123

<1

110

capete de dozare masina


ambalat (limite admise:
NTG<1cfu/cm2; ATP10RLU)

10

6524

98

7499

<1

69

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

PROCEDURA C
Nr. punct de
recoltare

Locul recoltarii

Rezultate probe recoltate inainte de aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

tanc lapte crud (limite admise:


NTG<10cfu/cm2; ATP20RLU)

tanc standardizare (limite admise:


NTG<10cfu/cm2; ATP20RLU)

tanc aseptic de umplere (limite


admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)
linie aseptica de ambalare (limite
admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

cuva umplere masina ambalat


(limite admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

capete de dozare masina ambalat


(limite admise: NTG<1cfu/cm2;
ATP10RLU)

ATP (RLU)

Rezultate probe recoltate dupa aplicarea procedurii


NTG ( cfu/cm2)

ATP (RLU)

>300

9658

<1

10

>300

6532

<1

10 (vezi foto 9)

200

5648

<1

166

6894

<1

7 (vezi foto 10)

5656

<1

10

11

7546

<1

6568

<1

10

10

6689

<1

10

3945

<1

12

5055

<1

5565

<1

8496

<1

10

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Tabel 8. Rezultate obinute la tratamentul suprafeelor

NTG

ATP

Tratamentul
suprafetelor
testate

numa
r
prob
e

fara igienizare

36

36

36

procedura A

12

12

12

procedura B

12

12

procedura C

12

12

12

Nr.
crt.

rez. in
limite

rez. peste
limite

rez. in
limite

rez. peste
limite

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Concluzii-I
1-In cazul probelor recoltate inainte de aplicarea celor trei proceduri de igienizare testate precum si in
cazul probelor recoltate dupa aplicarea procedurii de igienizare A, exista o corelatie de 100% intre
analizele NTG si analizele ATP. Rezultatele NTG se explica prin prezenta incarcaturii microbiene pe
suprafetele testate, iar valorile foarte mari ale ATP se datoreaza prezentei reziduurilor de produs lactat
in cantitati relativ mari si incarcaturii microbiene (ATP nonmicrobian si ATP microbian).
2-In cazul aplicarii procedurii de igienizare B, din totalul de 12 probe analizate 7 au avut rezultate NTG
negativ in timp ce rezultatul ATP a fost pozitiv. Acest lucru demonstreaza ca pe aceste suprafete nu mai
exista incarcatura microbiana (NTG negativ), dar exist totusi urme de produs lactat steril, purtator de
ATP nonmicrobial (ATP pozitiv). Analizele de ATP pozitive in cele 7 cazuri si NTG negativ indica faptul
ca procedura B este eficienta in cazul contaminarii microbiene dar nu si in cazul reziduurilor de produs
lactat.

METODE MODERNE DE MONITORIZARE A IGIENEI IN INDUSTRIA


LAPTELUI -DETECTIA ATP PRIN BIOLUMINISCENTA

Concluzii.-II
3-La aplicarea procedurii C toate rezultatele pentru NTG si ATP sunt in limitele admise, fapt ce
dovedeste ca aceasta procedura este eficienta pentru ambele scopuri: indepartarea urmelor de produs si
a contaminarii microbiene. Rezultatele analizelor NTG si ATP au fost n corelaie de 100%.
4-Testul NTG a fost util la aprecierea dac suprafata testata are sau nu contaminare microbiana, dar nu
a dat nici un indiciu despre prezenta reziduurilor de produs lactat steril, care poate deveni sursa de
hrana pentru o eventuala contaminare minora a acelei suprafete.
5-Testul ATP a permis atat detectarea contaminarii microbiene, cat si a prezentei reziduurilor de produs
lactat pe aceste suprafete. Aceste rezultate, alturi de rapiditatea obtinerii rezultatelor, fac din testul
ATP un instrument valoros in cadrul planurilor HACCP din industria lactatelor.