Material

Y Mtodos

1600 gdurante 20 min .

1,5 ml en tubos de ensayo de

polipropileno estriles y se congel
a -15 C.

Para evaluar la linealidad, la precisin y la

sensibilidad del ensayo con sangre total de
DBS tambin obtuvimos, utilizando EDTA
como anticoagulante, a partir de un paciente
con una VL de plasma de 4,2 10 5 copias /
mL.

Se
deja
secar
a
temperatura ambientes y
se almacenaron a 2-8 C
hasta su anlisis en bolsas
de plstico

Se prepararon diluciones seriales sobre

una base de 5, de 1: 5 a 1:15 625

Se utiliz como un diluyente y se

aplico para el secado y preservacin

Linealidad fue evaluada por tres ensayos.

El VL se cuantific en la
muestra DBS puro y en los
seis
diluciones
en
serie
preparadas a partir de ella

Tres
repeticiones
de
todas
las
concentraciones utilizadas fueron probados,
y los ensayos se realizaron en diferentes
das, por lo que los resultados podran ser
utilizados para analizar la precisin y
determinar la sensibilidad.

Para el procesamiento de la muestra DBS

dos manchas se cortaron

(equivalente a 100 l)

se colocaron en un tubo
de
ensayo
de
polipropileno estril

Ms tarde, 1 ml se recuper a
partir del contenido del tubo de
ensayo, para su anlisis

Se aadieron para la elucin

de sangre para 2 h, a 2-8 C;

Un total de 1,2 ml
de
la
solucin
reguladora
TrisEDTA

El CobasAmpliprep / CobasTaqman

Esta prueba, centradas en las regiones gag y LTR

del genoma del VIH-1, para su amplificacin y
deteccin, y con una sensibilidad de 20 copias. se
llev a cabo en la plataforma para la PCR en tiempo real