PRACTICA No. 1.

DETECCIN Y CUANTIFICACIN DE PROTEINAS

Nombre del alumno:

Fecha: 28 de abril del 2014

RESUMEN:Las protenas desempean un papel importante dentro de la clula, tanto

estructural
como
funcional
(enzimas,
glicoprotenas,
lipoprotenas,
hormonas,
neurotransmisores). Para extraerse la ovoalbmina de huevo y la casena de la leche se
tuvieron que desnaturalizar agitndola y agregando cido actico hasta llegar a su punto
isoelctrico (posteriormente se lav con etanol para eliminar los residuos de lpidos)
respectivamente suministrando a ambas calor; para su cuantificacin se utiliz el mtodo
de Biuret y el espectrofotmetro de haz simple a una longitud de onda de 540 nanmetros
para medir las absorbancias de las muestras patrn (peptona de casena y albumina srica
o BSA) y de las muestras problema (casena y ovoalbmina extradas). Realizndose una
curva de calibracin para encontrar las concentraciones de las protenas extradas.
INTRODUCCIN: El espectrofotmetro es
un instrumento que permite comparar la
radiacin absorbida o transmitida por una
solucin que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia. Determina la cantidad
de concentracin en una solucin de
algn compuesto utilizando frmulas (Ley
de LambertBeer)1. La ovoalbmina es la
principal protena de la clara del huevo,
pertenece a la superfamilia protenica de
las serpinas posee cerca de 385
aminocidos.
La
casena
es
una
fosfoprotena (un tipo de heteroprotena)
presente en la leche y en algunos de sus
derivados (yogur o queso).
OBJETIVO: Extraccin y cuantificacin de
protenas por espectrofotometra.
PROCEDIMIENTO: Primero se realiz la
extraccin de las protenas del huevo y la
leche (ovoalbmina y casena) luego se
desnaturalizaron, se prepararon diluciones
de las muestras patrn (peptona de
casena y BSA) y muestras problema
(casena y ovoalbmina) y se les agreg 2
ml del reactivo de Biuret2, luego se
midieron sus absorbancias a una longitud
de onda de 540 nm. Se realizaron curvas
de calibracin para cada protena
extrada.

RESULTADOS

DISCUSIN:

O vo albu mina

0.04

0.03
0.02
0.01
concentracion mg/ml

0.05

absorbancia 540 nm

caseina de la leche
concentracion mg/ml

absorbancia 540 nm

Como se puede observar en las grficas

se obtuvo una concentracin intermedia
entre las muestras patrn de 0.042 mg/ml
en el caso de la ovoalbmina y en la
casena de 0.371 mg/ml.

CONCLUSIONES: De acuerdo a los

resultados las concentraciones de las
protenas extradas son relativamente
altas demostrando que tanto el mtodo
de extraccin como el de cuantificacin
son viables a utilizar.
BIBLIOGRAFIA:1. Harris,
Daniel.
Anlisis Qumico Cuantitativo. Segunda
Edicin. Revert S.A. Espaa (1999); 2.

Camacho Garrido, Salvador. Prcticas de

biotecnologa, P.2-4,