Compoziia medie pe clase de substane

i elemente globale a microorganismelor

Limitele de mai sus depind de natura

substratului limitativ din mediul de cultur
(sursa de azot sau sursa de carbon)

Surse de C i energie
Surse de azot i proteine
Sruri minerale
Precursori
vitamine
1. Surse
de C ii
energie
- Monozaharide: glucoz, xiloz
- Dizaharide: zaharoz, melas, lactoz, maltoz
- Polizaharide: amidon, dextrin, inulin, celuloz din turb i
apele bisulfitice
- Alcooli: metanol, etanol, polialcooli
- Acizi carboxilici: acetic, succinic
- Grsimi i acizi grai
- Hidrocarburi: metan, n-butan, n-pentan,alte n-parafine
- Deeuri din industria laptelui i industria alimentar: zer, tre,
fin de cereale

Glucoza
Este foarte mult utilizat
ca surs de C i energie,
precum i ca precursor

Se folosete la producerea antibioticelor,

steroidelor, aminoacizilor, acizilor organici
mono- i dicarboxilici, polizaharidelor microbiene,
heteropolizaharidelor

Surse comerciale: sirop de glucoz 32-40%,

glucoz solid cu 65-67%, glucoz cristalizat 99100%
Poate genera uneori efecte nedorite, de tipul
inhibiiei de substrat; n aceste cazuri se reduce
concentraia glucozei n mediul de cultur n
etapa de cretere sau se folosete un glucid cu
vitez lent de metabolizare lactoza de ex.care elibereaz glucoza n concentraii departe
de valoarea inhibitorie

Dizaharide
Zaharoza

Lactoza

Lactoza subprodus n industria brnzeturilor (soluie

tehnic 70-75%); folosit la obinerea etanolului, drojdiei de
panificaie, proteinelor monocelulare, acid citric. n stare pur
se folosete la obinerea penicilinei
Utilizare:
Melasa
Drojdia de bere
Alcool etilic
Acid citric
Ali acizi
Aceton
Butanol
Vitamine
Aminoacizi

Alte surse de carbon i energie

Amidon alctuit din dou componente:
amiloz (M = 90 000 - 200 000)
amilopectin (M = 1 000 000 6 000 000)
folosit la fabricarea etanolului, glucozei, acetonei, butanolului

Alcool metilic i etilic, hidrocarburile inferioare:

obinerea proteinelor monocelulare
Acizii grai i derivaii lor: au rol de surs de carbon
i energie, dar i de tensioactivi: formeaz emulsii,
ncapsuleaz materialele hidrofobe, reduc spumarea,
modific permeabilitatea celular, favorizeaz reacii
chimice n celule

2. Surse de azot i proteine

Azot anorganic: azot amoniacal, NH4+, sub form de diverse sruri (Cl-, PO43-,
SO42-, NO3-)
Azot organic: aminoacizi i proteine din surse naturale (extract de porumb,
fin de soia, arahide, orez, lucern), uree, hidrolizat de drojdii
Componenii naturali sau naturali modificai aduc, pe lng azot n mediul de
cultur, i grsimi i minerale
Proporiile de proteine i natura fragmentelor de aminoacizi din acestea depind
puternic de sursa folosit

Exemple de componeni cu aport de azot ai

mediilor de cultur, % masic

(A metionin B cistein C - lizin)

3. Sruri minerale
Srurile minerale din componena mediilor de cultur
depind de rolurile ndeplinite de ionii coninui:
- Cele aflate n compoziia produilor de biosintez: P,
S, Cl
- Cele coninute n biomas: Mg, P, S, Cl, Ca, Fe
- Cele cu rol de regulator al presiunii osmotice i
permeabilitii celulare: MgCl2, NaCl, KCl etc.
- Modificatori de pH: NaH2PO4 (acidifiant), CaCO3
(neutralizant al aciditii)
- Intermediari ai reaciilor redox: Fe(CN)6
- Ageni de complexare i precipitare: SO42-, HPO42-,
CO32- Cofactori enzimatici: Mg2+, Mn2+, Co2+, Fe2+, Fe3+,
Zn2+, Mo2+

4. Precursori i vitamine
PRECURSORI
Compui organici sau anorganici care intervin ca
molecule intermediare n biosintez
Pot dirija biosinteza ctre un anumit produs sau
pot accelera procesele de biosintez
Se adaug treptat, pentru a preveni procesele
inhibitorii
VITAMINE
Sunt coenzime ale sistemelor enzimatice cu
activitate precis n metabolismul celular
Sunt implicate att n etapa de cretere a biomasei
ct i n cea de elaborare a produsului urmrit

STERILIZAREA MEDIILOR DE CULTUR

Sterilizarea este procesul de distrugere sau
ndeprtare a microorganismelor patogene sau
apatogene din substane, preparate, spaii nchise,
obiecte etc.
Sunt absolut necesare, pentru a asigura atingerea
unor randamente mari de obinere a produsului
urmrit
n cazul infectrii, pe de o parte contaminantul
consum din substrat, pe de alta, e posibil ca prin
aciunea sa, sau prin produii biosintetizai de
acesta, s distrug microorganismul productor
Metoda de sterilizare se alege n funcie de
proprietile fizico-chimice ale materialelor
supuse sterilizrii, pentru a evita modificrile lor
calitative

METODE DE STERILIZARE
TERMICE:

Sterilizare cu aer cald la 140-200oC (uscat)

Sterilizare cu vapori de ap la 120-140oC (umed)
Sterilizare prin nclziri repetate la 70-100oC (pasteurizare)
Flambare

FIZICE:

Filtrare prin umpluturi fibroase

Filtrare prin materiale poroase
Filtrare prin membrane
Utilizarea radiaiilor UV, IR, raze X, ,

CHIMICE:
Tratare cu oxid de etilen, formaldehid, fenol,
ozon etc.

PREPARRI ASEPTICE:

STERILIZAREA TERMIC

STERILIZAREA TERMIC
- Viteza

de distrucie a microorganismelor este descris

de o ecuaie logaritmic de tipul:

dN

kN
dt

N numr de microorganisme viabile / mL de mediu

k constanta vitezei de distrucie termic, min-1
t timpul de sterilizare, minute

2.303 N 0
t
lg
k
N

2,303/k reducere zecimal (timpul necesar pentru

diminuarea de 10 ori a numrului de microorganisme)

STERILIZAREA TERMIC
Este folosit cel mai frecvent n procesele
industriale
Inconveniente:
- Denaturarea proteinelor i inactivarea lor
- Denaturarea vitaminelor i a unor factori de
cretere
- Supranclziri care iniiaz reacii de oxidare a
fenolilor i acidului ascorbic, de polimerizare a
aldehidelor nesaturate, caramelizarea glucidelor,
condensarea grupelor aldehidice din zaharuri
reductoare cu grupe aminice libere, rezultnd
baze Schiff (toxice pentru majoritatea
microorganismelor) etc.

STERILIZAREA TERMIC
Viteza de distrucie termic este puternic
dependent de temperatur
Ecuaia Arrhenius:

rst k0 e
Ecuaia Eyring:

kB
k Te
h

Ea
RT

H *
S *

RT
R

Distrucia termic a sporilor de E.coli

n ct timp se reduce de 1000 de ori populaia de E.coli la 56 oC?

Distrucia termic a sporilor de

R. stearothermophilus

STERILIZAREA TERMIC
Etapele sterilizrii

Instalaie de sterilizare termic

n regim continuu

STERILIZAREA TERMIC UMED

Este mai eficient dect cea uscat
Punctul termic mortal: temperatura la care sunt
omorte toate celulele unei specii, n timp de 10
minute
Timpul termic mortal: timpul de expunere la o
anumit temperatur, necesar pentru a distruge
toate celulele sporulante
Timpul termic mortal scade semnificativ cu
creterea temperaturii
n procesele practice se alege regimul de
sterilizare rapid la temperaturi ridicate; aceasta
asigur un grad sporit de siguran i o mai bun
conservare a calitilor nutritive ale mediilor de
cultur

STERILIZAREA TERMIC UMED

Timpul termic mortal pentru sporii
unor microorganisme n sterilizare termic umed

Sterilizarea aerului
Principalele specii de bacterii i spori din aer

Sterilizarea prin metode fizice

Filtrare: aplicat cnd preparatele sunt labile
termic. Materiale filtrante: ceramici poroase
JenaG5, azbest-celuloz (Seitz, Filtrasic),
membrane polimerice, filtre de profunzime, filtre
absolute HEPA (High Efficiency Particulate Air)
microfibre de sticl
Cu radiaii: aplicat la sterilizarea produselor i a
aerului din boxele sterile

Sterilizarea aerului
Procedee termice: nsui filtrul absolut
trebuie sterilizat nainte de folosire
Filtrare prin:
Fibre de sticl cu diametrul de 5-18 m permite
sterilizarea avansat a unor debite ridicate de aer;
dezavantaj: manipulare complicat i neplcut,
anularea eficienei n cazul umezirii
Membrane de nitrat de celuloz: pori cu
diametrul liber sub 0,2 m
Teflon (rezistent pn la 300oC, hidrofob)
Poliamid (nylon)

Preparari aseptice