Tema 16

Procesamiento del RNA

Procesamiento en procariotes
rRNA y tRNA
Procesamiento en Eucariotes
rRNA, tRNA y mRNA

Procesamiento en procariotas
* Las molculas de ARNm prcticamente no experimentan ningn tipo de maduracin en
procariotas.

Tema 16 Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en procariotas
* Las molculas de ARN transferente y ARN ribosmico se originan por escisin de un
mismo transcrito policistrnico.

E. coli:

16 S

23 S

5S

La escisin la realizan enzimas que cortan por sitios muy precisos

Ej. Ribonucleasa P origina los ARNt de E. coli

Tema 16: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en procariotas
* Otros transcritos contienen varios tipos de ARN transferente o varias copias del mismo.
* Otros ARN sufren la adicin de nucletidos al extremo terminal.
* CCA al extremo 3 de los ARNt

A
C
5C3

Tema 16 Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en procariotas
* Otros ARN sufren modificaciones de bases (ARNr).

Procesamiento en Eucariotas

En eucariotas, los precursores del mRNA se procesan y

maduran en el ncleo antes de transportarse al citosol para su
traduccin en protenas

Tema 16. Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
ARNm Es el producto de transcripcin que ms se modifica.
Se modifican ambos extremos 5y 3

Tema 16. Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
* ARNm

Enlace 5- 5 trifosfato

Cadena de ARN

7-metil-guanosina

Cap 0

Cap 1

Cap 2

Tema 16: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
* ARNm
* El extremo 5de la nueva cadena de ARNm se modifica durante la transcripcin.

1) Se libera un fosfato por hidrlisis del 5trifosfato.

2) Formacin de un enlace 5-5-trifosfato entre el extremo 5-difosfato y el
fosfato- de un GTP.
3) Metilacin del N7 de la guanina terminal por la S-adenoasilmetionina.

Casquete cap
cap 00
Casquete

Tema 16. Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
* ARNm
* La mayora de los ARN mensajeros eucariotas contienen una cola de poliadenitalo en el
extremo 3.

Tema 16:
14: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
* ARNm
* La mayora de los ARN mensajeros eucariotas contienen una cola de poliadenilato en el
extremo 3.
* Una endonucleasa especfica reconoce la secuencia AAUAAA y corta los transcritos
primarios.

A continuacin una poli(A) polimerasa aade unos 250 residuos de A al extremo 3.

El donador es ATP

Tema 16: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas

Cul es el papel fisiolgico de estas modificaciones ?

Confieren estabilidad a los ARN mensajeros frente a la accin de fosfatasas y nucleasas.
(Cofia)
* Facilitan y aumentan la efectividad de la traduccin del ARNm. (Cola de poliA)

* Existe una relacin inversa entre la velocidad de degradacin de la cola de poli A y la

vida media de una molcula de ARNm.

Procesamiento en eucariotas
Maduracin del ARN: se escinden los intrones y se empalman los
exones
El pre-ARN mensajero est formado por secuencias codificantes
denominadas exones separados por secucuencias no codificantes
denominadas intrones.

El proceso de eliminacin de los intrones se realiza en el ncleo,

mediante un mecanismo muy complejo denominado splicing.

Procesamiento en eucariotas
Estructura de los intrones
* La secuencia de bases de un intrn es muy variable, entre 50 y 10.000. Todos comienza
con GU y termina con AG.
* En vertebrados la secuencia consenso en el extremo 5es AGGUAAGU y en el extremo
3consiste en 10 pirimidinas (U o C), seguida de una base cualquiera seguida de C, para
acabar con la secuencia AG.

* Todos los intrones poseen una secuencia interna importante que se denomina centro de
ramificacin. Esta secuencia se situ entre 20 y 50 nucletidos secuencia arriba del
sitio de empalme 3.

Procesamiento en eucariotas
Estructura de los intrones
* Las secuencias de los centros de empalme y del centro de ramificacin son las
importantes para el proceso de splicing. El resto de la secuencia del intrn es
irrelevante.
* Mutaciones en estas secuencias dan lugar a procesamientos incorrectos.

-talasemia

(anemia hereditaria)

Esta mutacin puntual da lugar a

un procesamiento en el extremo 3
anmalo cuya consecuencia es la
aparicin de un codn de stop

Procesamiento en eucariotas
Cmo se unen los exones ?
* Rotura del enlace fosfodister entre el exn secuencia arriba y el extremo 5del intrn.

Producida por el ataque del grupo

2-OH de un adenilato del centro de
ramificacin, formdose un enlace
2-5-fosfodister.

Transrsterificacin

Tema 14: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
Cmo se unen los exones ?

El grupo 3-OH del exn 1

ataca el enlace fosfodister
situado entre el intrn y el
exn 2.
Nueva transesterificacin.
No hidrlisis

Procesamiento en eucariotas
Cmo se unen los exones ?

Procesamiento en eucariotas
* En la unin de los exones juega un papel importante los espliceosomas.

* Los espliceosomas son ribonucleoprotenas que reconocen sitios de unin 5y 3de los
exones as como los puntos de ramificacin.

* Estn formados por los snRNAs (small nuclear RNAS) asociados con protenas especficas
que forman las partculas pequeas de ribonucleoprotena nuclear (snRNPs; snurps ).

Procesamiento en eucariotas
* La unin de los exones se inicia con la unin de U1-snRNP al sitio de splicing 5.

* A continuacin se une U2-snRNP al centro de ramificacin.

* Se asocian U1 y U2 acercando los extremos 5y 3del intrn.

Procesamiento en eucariotas

Procesamiento en eucariotas

* Posteriormente se asocia el complejo U4-U5-U6, previamente formado al complejo

U1-U2 y al precursor del ARNm formndose el espliceosoma.

Procesamiento en eucariotas
* U5 interacciona con la secuencia del exn en el centro de unin 5.
* Separacin de bases entre U1 y el centro de unin 5 (ATP) y liberacin de U1.
* Extensin de U5 sobre el centro de unin 5.

* U4 se separa de U6 y este adquiere su actividad cataltica.

* U6 se aparea con las secuencias de unin 5y con U2 apareado con el centro de
ramificacin.
* Ataque del grupo 2-OH del adenilato del centro de ramificacin al centro de unin 5 y
el grupo 3-OH del exn 1 ataca al centro de emplame del exn 2 para unirse.
* Finalmente, U2, U5 y U6 quedan unidos al lazo del intrn y se separan.

Procesamiento en eucariotas
* La unin de los exones se realiza por dos reacciones de trasesterificacin.

Se genera un grupo 3-OH

libre en el extremo 3en el exn 1

Se une el grupo 3-OH con el

grupo fosfato 5del exn 2

Procesamiento en eucariotas
Cmo se unen los exones ?

Algunas molculas pueden sufrir empalmes

alternativos produciendo distintos mRNA

Procesamiento en eucariotas
* ARNt
* Sufren una escisin de una secuencia gua 5.
* Eliminacin de un intrn de 14 nucletidos.
* Sustitucin del extremo terminal 3UU por CCA.
* Varias modificaciones de bases.

Tema 14: Procesamiento post-transcripcional.

Procesamiento en eucariotas
* ARNt