Determinarea

indicelui de
refracie al unui
lichid prin metode
refractometrice
1. Noiuni introductive
Fenomenul de schimbare brusc a direciei de propagare a unei raze de lumin, atunci
cnd strbate limita de separare dintre dou medii cu densiti diferite, se numete
refracie.
Legile ce stau la baza fenomenului de refracie sunt:
1) Raza incident, raza refractat i normala la suprafa n punctul de inciden sunt
coplanare (Figura 1);

n1
n2
r

Figura 1. Refracia unei raze de lumin la limita de separaie dintre dou medii diferite

2) Raportul dintre sinusul unghiului de inciden i sinusul unghiului de refracie

este o constant:

sin i
n21
sin r

(1)

Constanta n21 reprezint indicele de refracie relativ al mediului mai refringent

(2) n raport cu mediul mai puin refringent (1).
Din punct de vedere optic, se consider mai dens, acel mediu n care lumina se
propag cu vitez mai mic. Valoarea indicelui de refracie relativ a dou medii este
egal cu raportul vitezelor de propagare a luminii n cele dou medii:
v
n21 1
v2

(2)

Indicele de refracie al unui mediu n raport cu vidul (n vid lumina avnd vitez
maxim) poart denumirea de indice de refracie absolut:
c
n1
v1

n2

n
n21 2
n1

c
v2

(3)

In consecin, indicele de refracie relativ a dou medii este dat de raportul

indicilor de refracie absolui ai mediilor respective.
Deoarece densitatea optic a aerului este foarte apropiat de cea a vidului,
indicele de refracie relativ al unui mediu fa de aer este practic egal cu indicele de
refracie absolut (indicele de refracie absolut al aerului este
n = 1,00027).

Valoarea indicelui de refracie al unei substane depinde de urmtorii parametrii:

temperatur (msurtorile se efectueaz, de obicei, la 20C);
lungimea de und a radiaiei utilizate; indicele de refracie scade odat cu
creterea lungimii de und. De aceea, valoarea indicelui de refracie trebuie
nsoit i de valoarea lungimii de und la care s-a efectuat msurtoarea. Se pot
folosi: radiaia galben a sodiului (numit linia D); radiaia roie (notat C);
radiaia albastr (F); radiaia violet a hidrogenului (G) etc. Indicele de refracie
va purta, ca indice inferior, litera corespunztoare radiaiei folosite.

presiune (n special n cazul gazelor);

starea de agregare a substanei.

Din aceast cauz, este necesar ca, la indicarea valorii indicelui de refracie al
unei substane s fie date i condiiile n care s-au efectuat msurtorile.
Deoarece indicele de refracie depinde de mai muli factori, s-a definit o alt
mrime care s caracterizeze substana, indiferent de condiiile fizice n care se fac
msurtorile. S-a introdus astfel, refracia molecular R, mrime fizic caracteristic
fiecrei substane refringente. Fizicienii H. Lorentz i
L. Lorentz au dedus expresia
acestei mrimi fizice ca fiind:

n2 1 M

n2 2

(4)

unde M este masa molecular a substanei, iar este densitatea acesteia.

Refracia molecular este o mrime aditiv, cu alte cuvinte refracia molecular a
unui amestec de substane este egal cu suma refraciilor moleculare ale componentelor
sistemului, dac acestea nu interacioneaz chimic ntre ele.
Refracia atomic RA caracterizeaz atomul aflat ntr-un anumit tip de legtur
chimic i depinde de numrul de ordine Z i de configuraia orbitalilor de valen.
Relaia de definiie a acestei mrimi fizice este:
RA

n2 1 A

n2 2

(5)

unde A este masa atomic.

Cunoaterea valorii refraciei atomice ajut la stabilirea structurii moleculare. In
Tabelul 1 sunt redate cteva valori ale refraciilor unor atomi.
Tabelul 1. Refracii atomice ale unor atomi cu diferite legturi chimice, determinate
pentru lungimea de und a sodiului (D = 589.3 nm)
Atomul

RA

Legtura

RA

>C<

2.418

Cl (C)

5.967

>C=

3.284

O = (C)

2.221

3.617

(C) O (H)

1.525

1.1

(C) O (C)

1.643

In cazul soluiilor, valoarea indicelui de refracie depinde de natura solventului i

de concentraia soluiei.
Fiind o constant de material, indicele de refracie se utilizeaz n practica
farmaceutic pentru identificarea unor substane i pentru determinarea gradului de
puritate al acestora. In medicin, metodele refractometrice se folosesc pentru
determinarea concentraiei proteinelor din serul sanguin.

2. Determinarea indicelui de refracie

2.1. Noiuni teoretice

Aparatele utilizate pentru msurarea indicelui de refracie poart denumirea de

refractometre. In construcia acestora, este folosit fenomenul de reflexie total a luminii.
In conformitate cu legea a doua a refraciei, o raz de lumin care trece dintr-un
mediu mai dens ntr-unul mai puin dens, se deprteaz de normal (Figura 2.a). La
creterea unghiului de inciden, are loc o cretere a unghiului de refracie, n proporie
mai mare dect cel de inciden. Astfel, pentru o anumit valoare l a unghiului de
inciden, denumit unghi limit, unghiul de refracie atinge valoarea de 90. Razele ce
cad pe suprafa sub un unghi de inciden mai mare dect unghiul limit sufer
fenomenul de reflexie total, ntorcndu-se n mediul optic mai dens.
Dac razele de lumin se propag dintr-un mediu mai puin dens spre un mediu
optic mai dens (Figura 2.b), se constat c unghiul maxim format de raze n mediul mai
dens are valoarea l a unghiului limit corespunztor celor dou medii. Peste acest unghi,
n mediul doi, nu mai ptrund raze luminoase. Dac ntr-un punct al suprafeei de
separaie cad raze de lumin din toate direciile posibile, atunci n mediul mai dens se vor
propaga raze sub forma unui con cu vrful n punctul considerat, avnd o deschidere
egal cu 2l.

Figura 2. Reprezentarea schematic a refraciei pentru cazul n care: a) razele de lumin

se propag dintr-un mediu optic mai dens ntr-unul mai puin dens; b) razele de lumin se
propag dintr-un mediu optic mai puin dens ntr-unul mai dens
Scriind legea a doua a refraciei n cazul unghiului de inciden limit, se obine:
sin 90
n21
sin l

sin l

sau

n
1
n
n2
21
1

(6)

Din aceast relaie, se observ c valoarea unghiului limit depinde doar de

indicele de refracie relativ al celor dou medii.
Refractometrele construite pe baza acestui fenomen permit determinarea indicelui
de refracie al unei substane, msurnd valoarea unghiului limit.

2.2. Refractometrul Abb

Refractometrul Abb este unul dintre cele mai des utilizate aparate pentru msurarea
indicelui de refracie al substanelor aflate n stare lichid, cu precizie de pn la a patra
zecimal. Prile componente principale ale refractometrului Abb (Figura 3) sunt
urmtoarele:
- blocul de prisme (1 i 2);
- luneta de observaie (3);
- compensatorul cu rozet (7);
- luneta de citire (4).

Figura 3. Reprezentarea schematic a refractometrului Abb

a) Blocul de prisme reprezint partea component principal a refractometrului Abb.
Acesta este alctuit dintr-o prism de msur 1 i o prism de iluminare 2, confecionate

din sticl flint cu indicele de refracie n=1,75. Unite dup feele ipotenuz (care nu se
ating), prismele formeaz un bloc paralelipipedic (Figura 4). Fiecare prism este fixat
ntr-o carcas metalic, prin care circul un curent de ap, furnizat de un termostat.
Blocul de prisme poate fi rotit n jurul unui ax orizontal, cu ajutorul tamburului 5. Prisma
de iluminare poate fi rotit i separat, n jurul muchiei M, acionnd butonul 8.
Lichidul de studiat se introduce n spaiul liber dintre feele ipotenuz ale celor
dou prisme.
In faa prismei de iluminare, este fixat o surs de lumin S. Faa ipotenuz a
acestei prisme, fiind mat, difuzeaz lumina, care o strbate n toate direciile. Razele de
lumin strbat stratul de lichid i ptrund n prisma de msur.
Datorit reflexiei totale, razele ce ptrund n prisma de msur vor face, cu
normala la faa ipotenuz a acesteia, un unghi cel mult egal cu unghiul limit. In
consecin, din fiecare punct al feei ipotenuz a prismei de msur, vor pleca raze de
lumin, aflate n interiorul unui con cu deschiderea 2l, avnd axa perpendicular pe faa
ipotenuz, n punctul considerat.

Figura 4. Reprezentarea schematic a

blocului de prisme

b) Luneta de observaie este alctuit dintr-un sistem de lentile convergente, avnd rolul
de a capta razele emergente din prisma de msur. Luneta fiind reglat pentru infinit,
toate razele paralele cu o direcie dat se vor ntlni ntr-un punct din planul focal al
obiectivului lunetei. In cmpul vizual al lunetei, se distinge o zon luminoas i o zon
ntunecat.
Limita de separaie dintre cele dou zone corespunde razelor cu nclinare maxim
fa de normala la suprafaa prismei. Acest limit de separaie poate fi deplasat, rotind
blocul de prisme.
In ocularul lunetei, se afl dou fire reticulare, care se intersecteaz n centrul
cmpului vizual (Figura 3.b).
c) Compensatorul este intercalat ntre blocul de prisme i luneta de observaie, fiind
alctuit din dou prisme Amici, identice. Compensatorul are rolul de a recombina lumina
6

dispersat n prisma de msur, obinndu-se astfel o limit de separaie net ntre zona
ntunecat i cea luminoas. Compensatorul se regleaz n poziia corect, manevrnd
rozeta 7 (Figura 3).
Compensatorul este asfel confecionat nct dac, pentru iluminare, se folosete
lumin alb, se obine valoarea indicelui de refracie corespunztore liniei galbene a
sodiului.
d) Luneta de citire este legat solidar cu luneta de observaie i servete pentru citirea
valorii indicelui de refracie al substanei studiate. In cmpul vizual al lunetei, se afl un
fir reticular, orizontal, n faa cruia se deplaseaz o scal gradat direct n valori ale
indicelui de refracie (Figura 3.a). Iluminarea scalei se realizeaz cu ajutorul unei prisme
cu reflexie total (9). Scala gradat se deplaseaz sincron cu blocul de prisme, manevrnd
tamburul 5.

2.3. Determinarea indicelui de refracie pentru soluii de

NaCl de concentraii diferite
Inainte de efectuarea determinrilor indicilor de refracie ai soluiilor de analizat, trebuie
verificat dac aparatul este reglat corect. Pentru aceasta, se utilizeaz ap distilat, al
crei indice de refracie, la 20C, trebuie s fie 1,3331. In caz contrar, se va calcula
corecia corespunztoare sau se va regla aparatul.
Se manevreaz corpul lunetelor spre nainte (n sensul sgeii), pn la refuz.
Acionnd butonul 8, se separ corpul celor dou prisme. In aceast situaie, suprafaa
mat a prismei de iluminare se afl n poziie orizontal.
Feele celor dou prisme se cur cu o bucat de tifon, umezit cu alcool. Pe
suprafaa mat, se depun, cu o pipet, cteva picturi din lichidul de analizat.
Meninnd faa mat a prismei de iluminare n poziie orizontal, se nchide
corpul prismelor i se fixeaz sistemul optic n poziia de lucru (fest).
Se orienteaz oglinda 10 astfel nct prismele s primeasc o cantitate maxim de
lumin.
Privind n ocularul lunetei, se regleaz poziia acestuia astfel nct imaginea
obinut s fie clar. Se rotete tamburul 5, pn ce limita de separaie dintre cele dou
zone ale cmpului vizual se afl la intersecia firelor reticulare.
Se manevreaz rozeta compensatorului, pn ce dispare coloraia limitei de
separaie.

In continuare, se privete n luneta de citire. Se regleaz poziia prismei (9) pentru

iluminare maxim a cmpului vizual. Rotind ocularul lunetei, se obine imaginea clar a
scalei gradate. In dreptul firului orizontal, se citete valoarea indicelui de refracie, cu trei
zecimale. A patra zecimal se aprroximeaz n funcie de poziia firului reticular ntre
dou diviziuni succesive.
Se va msura indicele de refracie pentru patru soluii de NaCl, cu concentraii de
1, 2, 3, i, respectiv, 4%. Pentru fiecare substan, se efectueaz cel puin trei determinri,
calculnd valoarea medie a citirilor efectuate. Rezultatele obinute vor fi prezentate sub
forma unui tabel, urmnd ca n final s se reprezinte grafic dependena n = f(c).
Dup fiecare determinare, suprafeele prismelor se terg bine cu ap distilat i
apoi cu alcool.
Determinarea indicelui de refracie
cNaCl (%)

n
-

n n n

n
1,3340

1,3330

c (%)

3. Determinarea refraciei molare

In Tabelul 2 sunt prezentate masele moleculare i densitile ctorva substane uzuale
ntlnite n laborator i n practica farmaceutic. Se va calcula refracia molar (formula
(4)), determinnd n prealabil indicii de refracie corespunztori, cu ajutorul
refractometrului Abb.
Tabelul 2. Masa molecular i densitatea pentru diferite substane
Substana

(g/cm3)

M (u.a.m.)

CH3 - COOH

1.049

60.03

CH3 - COO CH3

0.792

58.05

C6H6

0.879

78.05

C6H5 CH3

0.87

92.13

C2H5 - OH

0.789

46.05

CHCl3

1.48

119.38

CH3 - OH

0.792

32.05

H2O

18

Determinarea refraciei molare

Substana

nD

RM

H2O

4. Aplicaii n controlul medicamentelor

4.1. Identificarea i caracterizarea soluiilor i produselor
medicamentoase
Produsele medicamentoase (simple sau complexe), aflate n stare lichid, pot fi
caracterizate cu ajutorul valorilor indicilor de refracie. In acelai timp, indicele de
refracie poate oferi informaii asupra gradului de puritate a unei anumite substane,
cantiti mici de impuriti prezente ntr-un anumit produs determinnd modificri
importante ale valorii indicelui de refracie. In Tabelul 3, sunt prezentate valorile indicilor
de refracie ai ctorva solveni i produse farmaceutice, larg utilizate.
Tabelul 3. Indicele de refracie corespunztor anumitor solveni i produse farmaceutice,
determinat la t = 20C i D = 5893
Substana
Aetheroleum Eucalypti
Aetheroleum Lavandulae
Aetheroleum Menthae
Aetheroleum Pini montanae
Aetheroleum Thymi
Aceton
Acid acetic
Benzen
Salicilat de metil
Sirupus belladonae
Sirupus Codeini 0,2%
Sirupus Simplex

nD
1,4580 - 1,4700
1,4580 - 1,4640
1,4600 - 1,4710
1,4750 - 1,4780
1,4900 - 1,5000
1,3589
1,3718
1,5014
1,5369
1,4416 - 1,4496
1,4490 - 1,4570
1,4464 - 1,4532

4.2. Determinri cantitative

10

Trasnd curba de variaie n=f(c) pentru o serie de soluii etalon ale unei anumite
substane farmaceutice, se poate determina valoarea unei concentraii necunoscute
corespunztoare aceleiai substane, dup ce n prealabil se determin indicele de
refracie al acelei soluii.

4.3. Determinri de structur

Refracia molecular R (calculat cu ajutorul formulei (4)) poate oferi informaii asupra
structurii substanelor, deoarece valorile acesteia depind de particularitile de structur
(natura legturilor) (Tabelul 4).
Tabelul 4. Valorile refraciei moleculare R, determinate la =5893 , pentru cteva
legturi structurale
Legtura

R (cm3)

Legtura

R (cm3)

CH
CC
C=C
C=O
CS
C=S
CN
C=N
CC (ciclopropan)
CC (ciclohexan)

1,676
1,296
4,170
3,320
4,610
11,910
1,570
3,760
1,490
1,270

CC (aromatic)
CCl
CO (alcool, eter)
CO (ester)
OH
NH
N=N
NN
N=O

2,688
6,510
1,540
1,460
1,660
1,760
4,120
1,990
4,000

5. Determinarea concentraiei proteinelor din serul

sanguin
Lichidele biologice, soluii apoase complexe, n care se gsesc numeroi ioni (n special,
radicali proteici), sunt caracterizate de valori ale indicelui de refracie mai mari dect cel
corespunztor apei. In mod normal, indicele de refracie al serului sanguin este cuprins
ntre 1,3487 i 1,3517, n timp ce pentru urin indicele de refracie variaz ntre 1,33 i
1,34. Valorile normale sunt raportate la temperatura de 17,5C. In cazul apariiei anumitor
afeciuni ale organismului, valoarea indicilor de refracie caracteristici lichidelor
biologice se pot modifica semnificativ, oferind informaii asupra afeciunilor
intervenite. Astfel, de exemplu, n cazul ocului anafilactic, indicele de refracie al
11

serului sanguin nregistreaz, n primele ore, o scdere dup care revine la valorile
normale. Pe baza determinrii valorilor indicilor de refracie ai lichidelor biologice, se
poate aprecia coninutul n proteine (proteinemia) al acestora. Modul de conversie a
valorilor indicilor de refracie n valori ale coninutului n proteine (exprimat n g/100 ml)
este prezentat n Tabelul 5. Determinarea indicilor de refracie ai lichidelor biologice
reprezint, n consecin, o metod de a obine informaii preliminare asupra gradului
de sntate a pacienilor.
Tabelul 5. Coninutul de proteine (proteinemia), evaluat pe baza valorilor indicelui de
refracie corespunztor temperaturii de 17,5C
Indicele de refracie, n
1,33705
1,33743
1,33781
1,33820
1,33858
1,33896
1,33934
1,33972
1,34010
1,34086
1,34124
1,34162
1,34199
1,34237
1,34275
1,34313
1,34350
1,34388
1,34426
1,34463
1,34500
1,34537
1,34575
1,34612
1,34650
1,34687
1,34724
1,34761
1,34798

Coninutul de proteine n
ser sanguin (g/100 ml)
6,2
8,6
10,8
13,0
15,2
17,4
19,6
21,8
24,0
28,4
30,6
32,8
35,0
37,2
39,4
41,6
43,8
46,0
48,1
50,3
52,5
54,7
56,8
59,0
61,2
63,4
65,5
67,7
69,8

12

Coninutul de proteine n
saliv, urin (g/100 ml)
7,7
9,7
11,8
13,0
15,9
17,0
20,1
22,1
24,2
28,3
30,4
32,4
34,5
36,5
38,6
40,7
42,7
44,8
44,8
46,8
48,9
51,0
55,0
57,0
59,0
61,1
63,1
65,1
67,1

1,34836
1,34873
1,34910
1,34947
1,34984
1,35021
1,35058
1,35095
1,35132
1,35169
1,35205

72,0
74,2
76,9
78,5
80,6
82,8
84,9
87,1
89,2
91,4
93,5

69,1
71,2
73,2
75,2
77,2
79,2
81,2
83,2
85,2
87,2
89,2

Pentru determinarea indicelui de refracie al serului sanguin se va utiliza

refractometrul Abb, modul de lucru fiind acelai cu cel descris anterior. Pentru fiecare
prob de ser sanguin se vor efectua cte trei determinri, valoarea folosit pentru calculul
proteinemiei fiind media celor trei valori individuale. Rezultatele obinute vor fi trecute
ntr-un tabel de date experimentale, apreciindu-se n final coninutul n proteine.
Determinarea indicelui de refracie al serului sanguin, precum i al coninutului n
proteine
Indicele de refracie
Proba

valoarea 1

valoarea 2

valoarea 3

media

Proteine
(g/100 ml)

13

De reinut!

Valoarea indicelui de refracie al unei substane depinde de urmtorii parametrii:

temperatur (msurtorile se efectueaz, de obicei, la 20C)
lungimea de und a radiaiei utilizate; indicele de refracie va purta, ca indice
inferior, litera corespunztoare radiaiei folosite
presiune (n special n cazul gazelor)
starea de agregare a substanei

Valoarea indicelui de refracie al unei substane va fi nsoit de parametrii fizici n

care s-au efectuat msurtorile.

In cazul soluiilor, valoarea indicelui de refracie depinde de:

natura solventului
concentraia soluiei
n practica farmaceutic, indicele de refracie se utilizeaz pentru:
identificarea unor substane
determinarea gradului de puritate al preparatelor farmaceutice
determinri de concentraie

14