www.referat.

ro

Analiza microbiologica a apei

microbiologica consta in aplicarea metodelor si tehnicilor microbiologice pentru
observarea, izolarea si identificarea microorganismelor existente in produsele examinate
in scopul stabilirii sau absentei microorganismelor nocive pentru sntatea
consumatorului sau pentru conservarea valorii alimentare a produselor.
Pentru efectuarea analizei microbiologice, probele de analizat trebuie sa reflecte
condiiile microbiologice existente in momentul recoltrii si sa reprezinte fidel lotul din
care provin. Prin lot se nelege cantitatea de produse realizate in condiii tehnologice
uniforme, intr-o arja, schimb de producie sau intr-o perioada limitata de timp.
Recoltarea probelor se face in mod aseptic, folosind in acest scop ustensile
sterile, recipiente pentru colectare sterilizate, evitnd orice contaminare externa. Vasele
destinate analizei microbiologice trebuie sa fie curate, uscate, sterile, cu o capacitate
adecvata, cu posibilitatea de a fi acoperite incit sa previn contaminarea cu
microorganisme din aer. Tehnica de recoltare depinde de natura produsului. Pentru
analiza microbiologica a apei de la robinet, nainte de recoltare se las sa curg apa
cteva minute pentru a elimina microflora stagnanta pe conducta, dup care se nchide
robinetul, se flambeaz gura acestuia si apoi se face recoltarea propriu-zisa.
Transportul probelor se face cat mai repede pentru ca in perioada dintre recoltare
si momentul analizei sa nu se produc nici moartea microorganismelor existente, nici
multiplicarea microorganismelor prezente in momentul recoltrii. Se considera ca prin
pstrarea probelor in condiii de refrigerare o perioada de 24 maxim 36 ore din
momentul recoltrii, nu se produc modificri semnificative ale microflorei la majoritatea
alimentelor.
Analiza microbiologica
Apa folosita in industria alimentara trebuie sa ndeplineasc condiiile de
potabilitate, sub raportul unor indici organoleptici, fizico-chimici, bacteriologici,
biologici, ale cror valori limita sunt prevzute de normative sanitare in standardul de
stat.
Prin intermediul apei, se cunoate ca pot fi transmise epidemii hidrice ( febra
tifoida, paratifoida, dezinteria, etc).
Prin urmare indicatorii bacteriologici au un rol important in aprecierea calitii
apei. Aprecierea strii de igiena a apei presupune: determinarea numrului total de
germeni si a bacteriilor coliforme.

1. Determinarea numrului total de germeni

Numrul total de germeni reprezint numrul de colonii care se dezvolta in urma
insamantarii de 1cm3 de apa in mediu de cultura, dup 48 ore de termostatare la 37C.
In cazul in care se considera ca apa reprezint un grad ridicat de contaminare mai
mare se fac insamantari din diluii (schema I) coloniilor se face din placile cu 30-300
colonii.

2. Determinarea bacteriilor coliforme

Sursa cea mai importanta de poluare bacteriana a apei o constituie reziduu-rile,
excrementele umane si animale, care pot conine germeni patogeni, de aceea in analiza
apei se urmrete detectarea polurii fecale-folosind indicatorii coliformii.
Metoda pentru determinarea bacteriilor coliforme include teste prezumtive, de
confirmare, bazate in primul rnd pe capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza cu
producere de acid lactic, CO2, H2, in timp de 48 ore la 35C.
Testul prezumtiv consta in inocularea probei in mediu nutritiv cu lactoza (BCLP
bulion de carne cu lactoza si plutitor), mediu de imbogatire favorabil nmulirii att a
bacteriilor coliforme cat si a altor bacterii care folosesc lactoza ca sursa de carbon.
Testul de confirmare, consta in inocularea culturilor din eprubetele pozitive ale
testului prezumtiv pe medii selective (BBLVP- bulion bila cu lactoza verde briliant si
plutitor) care inhiba dezvoltarea bacteriilor nsoitoare si asigura nmulirea bacteriilor
coliforme.
Din grupul coliform, cel mai frecvent este intalnit genul Escherichia cu specia
Escherichia coli, care indica o contaminare fecala recenta.
Tehnica de lucru.
Din proba si diluii succesive de inoculeaz cate 1ml in cate trei eprubete cu
BCLP. Se termostateaza la 37C timp de 24-48 ore. Se nregistreaz eprubetele pozitive
( mediu tulbure, bule de gaz in plutitor, pH acid) iar eprubetele negative sunt din nou
termostatate timp de 24 ore si se nregistreaz din nou eprubetele pozitive.
Pentru confirmare , din eprubetele pozitive se recolteaz cate o ansa si se
inoculeaz eprubete cu BBLVP; dupa incubare la 37C timp de 48 ore, in condiiile in
care se produc din nou gaze in plutitor, tulburare, virajul culorii indicatorului verde
briliant de la verde la galben, nseamn ca in apa (produsul analizat) sunt prezente
bacteriile coliforme.
Calcul si interpetare
Folosind, metoda titrului, in functie de numarul eprubetelor pozitive se stabileste cifra
caracteristica si din tabelul lui Mac Crady (tabel I), corespunzator ciferi caracteristice se
noteaza numarul probabil de coliformi. Pentru a calcula numarul probabil de
coliformi/cm3 produs analizat, valoarea din tabel se inmulteste cu factorul de dilutie
corespunzator primei cifre din cifra caracteristica. Numarul de coliformi admisi intr-o
100 ml apa conform SR EN ISO 9308 - 1 / 2004 este de 0

Tabel I tabel Mac Crady ( metoda celor 3 tuburi)

Cifra caracteristica
000
001
010
011
020
100
101
102
110
111
120
121
130
200
201
202
210
211
212
220
221

Numar
microorganisme
0.0
0.3
0.3
0.6
0.6
0.4
0.7
1.1
0.7
1.1
1.1
1.5
1.6
0.9
1.4
2.0
1.5
2.0
3.0
2.0
3.0

de Cifra caracteristica
222
223
230
231
232
300
301
302
310
311
312
313
320
321
322
323
330
331
332
333

Schema I Determinarea numarului total de germeni

Numar
microorganisme
3.5
4.0
3.0
3.5
4.0
2.5
4.0
6.5
4.5
7.5
11.5
16.0
9.5
15.0
20.0
30.0
25.0
45.0
110
140

de

Schema II Determinarea bacteriilor coliforme

Powered by http://www.referat.ro/
cel mai tare site cu referate