Metode de sterilizare

Metode de sterilizare

Sterilizarea este operaia de distrugere a microorganismelor prezente ntr-un mediu sau pe

instrumentarul de laborator. Cunoaterea metodelor de sterilizare este necesar pentru
desfurarea corect i reuita oricrei lucrri de microbiologie. Exist numeroase metode.
Alegerea metodei potrivite depinde de natura materialului care va fi sterilizat (sticlrie, cauciuc,
metal).
Clasificarea metodelor de sterilizare se face n funcie de natura operaiilor efectuate:
Metode care utilizeaz ageni fizici: cldura ( uscat, umed), radiaii UV, filtrarea,
ultrasunetele.
Metode care utilizeaz ageni chimici: substane antiseptice, substane dezinfectante.
Metode care utilizeaz cldura uscat: incinerarea, nclzirea la rou, flambarea, sterilizarea
cu ajutorul aerului cald
Metode care utilizeaz cldura umed: fierberea, pasteurizarea, tindalizarea, autoclavarea
Principul metodelor care se bazeaz pe cldur- n cursul operaiei are loc degradarea
proteinelor microbiene pn la calcinarea materialului biologic. Cldura realizeaz distrugerea
formelor vegetative la temperatura de 50- 60 grade C cam n 30 de minute. Dac se crete
temperatura la 70grade C formele vegetative sunt distruse n 10 minute. La 20 grade C cu
cldur umed i la 100 grade C cu cldur uscat sunt distrui sporii.

Incinerarea const n arderea materialului biologic n cuptoare speciale sau crematorii. Prin
aceast metod sunt distruse cadavrele animalelor scoase din exploatare ca i vata i tifoanele
infectate.

nclzirea la rou este folosit pentru ansele bacteriologice care sunt meninute n flacra
becului de gaz pn la rou, mai nti la baza flcrii, apoi la vrf. Ansa se sterilizeaz
obligatoriu nainte i dup utilizare.

Flambarea const n trecerea prin flacra becului de gaz de cteva ori a obiectului care se
sterilizeaz- lame de sticl, pipete gradate, pipete Pasteur, nainte de sterilizare, idem mnerul
ansei i gtul eprubetelor i baloanelor nainte i dup utilizare.

Sterilizarea cu aer cald este cea mai eficient msur de sterilizare cu cldur uscat.
Carbonizarea materiei vii se face n etuve la 180 gardeC timp de o or. Este o metod de
sterilizare complet: se sterilizeaz sticlria de laborator, instrumentarul chirurgical. Nu se pot
steriliza seringile cu armtur metalic i obiectele de cauciuc. Obiectele se pregtesc pentru
sterilizare astfel: sticlria s fie bine splat i perfect uscat. Se mpacheteaz n hrtie de
ambalaj fiecare obiect n parte. Toate eprubetele i baloanele se astup cu dopuri de vat
nvelite n tifon, se leag cu sfoar i li se aplic un capion de hrtie. Pipetele se ambaleaz
individual, sau n cilindrii metalici. Vata, compresele, pansamentele se sterilizeaz n casonete
speciale (cutii de tabl cu perei dubli) peretele intern prezint orificii i peste el se afl o
centur metalic ce astup orificiile dup ncetarea sterilizrii. Controlul sterilizrii la etuv se
face amplasnd pe lng materialele de sterilizat, tubuoare de sticl care conin zaharoz al
crei punct de topire este de 170 grade C Dac zaharoza este caramelizat nseamn c s-a
atins temperatura necesar. Temperatura nu trebuie depit pentru c vata i hrtia ard
producnd substane inhibitoare pentru microorganisme.

Cldura umed are o putere de penetrare mai mare- distruge microorganismele hidratate
n timp mai scurt i la o temperatur mai sczut dect cldura uscat.

Fierberea const n fierberea instrumentelor chirurgicale, seringilor la 100 gradeC timp de

20- 30 minute. Fierberea nu este o metod complet, sporii nu sunt distrui. Se face n
fierbtoare electrice sau cu gaze i se recomand s se foloseasc ap distilat pentru a evita
depunerea srurilor. Se recomand adugarea a 4- 5% carbonat de sodiu sau borax care ridic
cu cteva grade punctul de fierbere i mpiedec ruginirea. Teoretic obiectele sterilizate pot fi
utilizate 24 de ore. Se recomand folosirea lor imediat.

Pasteurizarea este sterilizare incomplet, sunt distruse numai formele vegetative, nu i

sporii. Este folosit la stilizarea laptelui i a berii. Se face prin nclzirea produsului la 56- 90
grade C timp de 30 minute. nclzirea se face pe baie de ap. Produsele astfel sterilizate se

pstreaz ambalate ermetic la 4o grade C pn la momentul folosirii pentru a mpiedeca

germinarea sporilor.

Tindalizarea este o pasteurizare repetat de 3 ori la intervale de 24 de ore. Se face la

sterilizarea mediilor de cultur care conin diferite substane organice: glucide, gelatin, ser
sanguin care se degradeaz la temperaturi mai mari.. n intervalul dintre sterilizri se pstreaz
la temperatura camerei pentru ca sporii rmai nedistrui s evolueze la forme vegetative care
vor fi distruse la viitoarea nclzire. Tindalizarea este o sterilizare complet.

Autoclavarea este sterilizarea cu vapori de ap sub presiune. Este cea mai folosit n
practica microbiologic,. este o sterilizare complet i sigur. Cu vapori de ap sub presiune se
obin temperaturi peste 100 grade C.
La 0,5 atmosfere temperatura este de 115 grade C
La 1 atmosfer temperatura este de 121 grade C
La 2 atmosfere temperatura este de 134 grade C
nclzirea se face timp de 20 de minute. Materialele sterilizate sunt materialele infectate,
culturile microbiene vechi, casonete cu instrumentarul medical, medii de cultur, obiecte din
cauciuc. Sterilizarea se face n autoclav care este un cazan de tabl cu pereii dubli cei interni
prezentnd orificii prin care trec vaporii.

Antisepticele substane care mpiedec multiplicarea microorganismelor. Aceste substane

au n general, aciune microbiostatic, acioneaz n concentraii mici i pentru timp scurt pot fi
aplicate pe esuturi vii. Exemplu. Alcoolul etilic de 70 grade ,KMnO4 0,1%, tinctura de iod, acidul
boric , H2O2 ,detergenii cationici de tip bromocet 0,1%.

Dezinfectanii sunt substane care au n general, aciune microbicid, care distrug microbii
de pe diferite obiecte neanimate. Exemple: formol, fenol, cloramina. Alcoolul absolut de 96
grade este un dezinfectant foarte slab, el acioneaz prin coagularea proteinelor.