Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Pesta pneumonic primar (forma pulmonar) poate apare prin inhalarea de nuclei de
pictur (de obicei de la un pacient care tuete) sau prin embolizri septice la nivel
pulmonar; se manifest prin pneumonie hemoragic, septicemie i deces n peste 90% din
cazuri.
4. Diagnosticul de laborator n infeciile produse de microorganisme din genul
Yersinia
Genul Yersinia include 11 specii dintre care Yersinia pestis (cauza ciumei), Y.
pseudotuberculosis i Y. enterocolitica produc infecii umane. Sunt enterobacterii de
dimensiuni mici, cu aspect de bacili sau cocobacili gram negativi, care prezint coloraie
bipolar. n produsul patologic prezint un pleomorfism accentuat. Nu formeaz spori,
pot prezenta structuri de tip capsular. Sunt aerobi facultativ anaerobi, catalazo-pozitivi,
oxidazo-negativi. Cresc pe medii simple i produc colonii de tip S n 24-48 de ore;
ultimele 2 specii sunt mobile la 22-30 C.
n continuare vom discuta despre yersiniozele cu poart de intrare digestiv, care pot
avea drept ageni etiologici Y. enterocolitica sau Y. pseudotuberculosis. Y. enterocolitica
reprezint o cauz destul de frecvent a BDA, cel puin din datele prezentate n literatura
de specialitate internaional. Poate determina infecii cu caracter invaziv localizate pe
ileonul terminal, cu prinderea ganglionilor mezenterici i apariia unor dureri n fosa
iliac dreapt ceea ce poate conduce la punerea eronat a diagnosticului de apendicit
acut, mai ales la copii. n cazul adulilor s-a dovedit implicarea Y. enterocolitica n
declanarea unor artrite reactive sau a eritemului nodos cu dificulti n ceea ce privete
diagnosticul diferenial. La pacienii cu variate grade de imunodepresie boala enteric
poate fi urmat de manifestri extra-intestinale, uneori n cadrul unei infecii generalizate.
Bolile produse de Y. pseudotuberculosis au o inciden mai redus; pot aprea enterite
subacute, adenopatie mezenteric etc.
Diagnosticul de laborator n yersiniozele cu poart de intrare digestiv este
bacteriologic, direct. n cazul manifestrilor extra-intestinale este indicat diagnosticul
serologic.
1. Recoltarea i transportul produsului patologic trebuie s se realizeze respectnd
regulile cunoscute, n special recoltarea ct mai rapid dup debutul bolii i nainte de
iniierea antibioterapiei. Produsul patologic poate fi reprezentat de materii fecale,
ganglioni recoltai intraoperator, snge etc. n continuare vom discuta diagnosticul unei
BDA. Se poate folosi mediul de transport Cary-Blair.
2. Examinarea microscopic a produsului patologic include realizarea unui preparat
proaspt ntre lam i lamel (nu se efectueaz frotiuri din materiile fecale). Preparatul se
examineaz la microscopul optic cu obiectivul 40x. Vom evidenia prezena celulelor
inflamatorii.
3. Cultivarea pe medii de cultur a produsului patologic se realizeaz n aa fel nct
s se poat obine colonii izolate i respectiv o cultur pur, care se va identifica. n
vederea izolrii Y. pseudotuberculosis sau Y. enterocolitica se pot utiliza diferite medii
selective clasice (MacConkey, ADCL) sau mediul CIN (cefsulodin, irgasan,
novobiocin), eventual cu incubare la temperatura camerei (20-30 C). Exist diferite
metode de mbogire, de ex. inocularea p.p. n tampon fosfat salin cu incubare la 4C
timp de 1-3 sptmni urmat de treceri pe mediile menionate mai sus. Coloniile
suspecte se repic pe mediile multitest clasice sau pe galerii API.
4. Identificarea se va realiza pe baza mai multor caractere:
Caractere morfotinctoriale: Sunt cocobacili sau bacili gram-negativicu cu dimensiuni de
0,5-3 m / 1-2m, posibil pleomorfi
a) Caractere de cultur:
- produc colonii de tip S, de 1-1,5 mm (2-3 mm dup 48 ore)
Pe mediul CIN coloniile sunt semitransparente, cu margini clare i centrul rou
b) Caractere biochimice:
- se pot investiga folosind mediile multi-test clasice sau galeriile API
- fermenteaz glucoza fr producere de gaz, nu fermenteaz lactoza, nu produc H2S
- sunt imobile la 37C i mobile la 22 C, nu produc indol, produc ureaz
c) Caractere antigenice:
- se utilizeaz seruri specifice anti-Yersinia, prin reacii de aglutinare pe lam.
Testarea sensibilitii la bacteriofagi (lizotipia) se poate utiliza n studii epidemiologice
sau n scop de cercetare, fiind rezervat laboratoarelor de referin
d) Alte caractere / teste utilizate n identificare la nivelul centrelor de referin:
- teste biochimice suplimentare
- reacii de aglutinare cu alte seruri imune, pentru tipuri mai puin frecvent ntlnite
- bacteriocinotipia
- tehnici ale biologiei moleculare (digestia endonucleazic a ADN-ului cromozomial,
electroforeza n cmp pulsatil, ribotipia, PCR etc).
5. Este recomandat realizarea antibiogramei (verificarea sensibilitii la antibiotice i
chimioterapice), prin metoda difuzimetric standardizat. Se pot utiliza i sisteme
automate, de exemplu trusa automat ATB G5, cu citire i interpretare dup 18-24 ore
de incubare (21 antibiotice), pentru bacili Gram negativi.
Diagnosticul serologic
Diagnosticul serologic este util n determinarea etiologiei artritelor reactive,
eritemului nodos sau n cazul altor manifestri extra-intestinale. Anticorpii apar la circa
4-7 zile de la debutul bolii, ating valoarea maxim dup circa 14 zile i persist cteva
luni. Se pot practica diferite tehnici, de ex. reacia de aglutinare n tuburi.
Se consider c valoarea titrului semnificativ este 1/160. Este recomandat testarea
serurilor pereche, n dinamic.
Trebuie s fie luat n considerare posibilitatea apariia unor reacii ncruciate,
datorit existenei unor antigene asemntoare la microorganisme din genurile Brucella
sau Salmonella.
Produce diferii pigmeni, dintre care mai importani sunt piocianina (albastru) i
pioverdina (galben-verzui fluorescent). Este un germen catalaz-pozitiv, degradeaz
oxidativ glucoza, nu fermenteaz lactoza i este oxidaz-pozitiv.
2.5. Rezistena fa de factori chimici i fizici
Este sensibil la cldur, fenol, alcool de 80C, dar rezistent la aciunea compuilor
cuaternari de amoniu.
n spital se selecteaz tulpini rezistente la antiseptice, dezinfectante, antibiotice, tulpini
care pot fi implicate n infecii de spital.
2.6. Structur antigenic
Pseudomonas aeruginosa posed antigenul flagelar H (proteic) i antigenul somatic O
(lipopolizaharidic). Pe baza existenei mai multor factori antigenici O i H, s-au descris
mai multe serotipuri n cadrul speciei, utile n special n investigaii epidemiologice.
2.7. Rspuns imun
Exist un rspuns imun umoral, manifestat prin formarea de anticorpi (opsonine,
aglutinine), ns cu titruri nesemnificative i fr eficacitate protectiv.
2.8. Caractere de patogenitate
Speciile genului Pseudomonas sunt ubicuitare (ntlnite n ap, pe sol, pe plante etc, sau
fac parte din flora microbian uman). Pseudomonas aeruginosa a fost identificat n
diferite soluii apoase, inclusiv soluii dezinfectante sau chiar soluii de antibiotice, avnd
o deosebit capacitate de a supravieui n medii umede. Pseudomonas aeruginosa este un
microorganism oportunist, condiionat patogen.
Dintre factorii de virulen ai bacilului piocianic am putea aminti prezena pililor (care
mediaz ataarea bacterian la celulele epiteliale), producerea unor proteaze (cu efecte
histotoxice), a unei lipaze, sinteza de hemolizine, exotoxine (exemplu exotoxina A, de
circa 20.000 de ori mai toxic dect endotoxina), precum i existena endotoxinei
(lipopolizaharidul din structura peretelui).
Tulpinile de Pseudomonas aeruginosa izolate de la pacieni cu fibroz chistic dein un
glicocalix foarte dezvoltat care mediaz aderena la nivelul mucoaselor respiratorii i
mpiedic opsonizarea. n infeciile cronice, la aceti pacieni, a fost demonstrat trecerea
tulpinilor din forme S n forme de tip M, datorit unor mutaii care au fost identificate
recent (2008).
3. Patogenie i patologie specific. Principalele afeciuni produse
Datorit capacitii de adaptare i supravieuire n diferite medii, precum i datorit
factorilor de virulen enumerai, Pseudomonas aeruginosa poate produce infecii foarte
variate, de la infecii tegumentare superficiale pn la septicemii fulminante. La
persoanele cu reactivitate normal, infeciile sunt de obicei localizate (foliculite, otite,
infecii oculare etc), urmnd contaminrii cu diferite soluii apoase sau dup not n
piscin. Prezena piocianicului ar putea fi semnalat de culoarea albastr verzuie a
pansamentelor. La nivel dermic, procesul infecios poate avea i o evoluie grav, cu
apariia de vezicule care se sparg i se refac pe o baz necrotic. Procesul poate progresa
n profunzime (ecthyma gangrenosum), asemntor cu patologia ntlnit la pacienii
neutropenici la care infecia poate fi produs i de alte microorganisme.
La persoanele spitalizate, cu reactivitate diminuat i supuse unor manevre medicochirurgicale invazive (intubaii, cateterizri etc), precum i la persoanele cu arsuri,
BIBLIOGRAFIE
1. Popa G.L., Popa M.I., Genul Yersinia, n Popa M.I. (coord.), Microbiologie Medical, vol 1 i
vol. 2 - curs UMF Carol Davila, 2010.
2. Popa G.L., Popa M.I., Genul Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa, n Popa M.I. (coord.),
Microbiologie Medical, vol 1 i 2 - curs UMF Carol Davila, 2010.