Curs 22.

Genul Yersinia. Yersinia pestis. Yersinia enterocolitica. Yersinia

pseudotuberculosis
Genul Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa
Genul Yersinia. Yersinia pestis. Yersinia enterocolitica. Yersinia
pseudotuberculosis
1. Definiie. ncadrare
Sunt enterobacterii de dimensiuni mici, cu aspect de bacili sau cocobacili Gram-negativi,
care prezint coloraie bipolar. Nu formeaz spori, pot prezenta structuri de tip capsular.
Sunt aerobi facultativ anaerobi, catalaz-pozitivi, oxidaz-negativi. Majoritatea au drept
gazd natural animalele i pot produce boli (uneori foarte grave) umane.
Genul Yersinia include 11 specii dintre care 3 sunt patogene pentru om: Yersinia pestis
(cauza ciumei), Y. pseudotuberculosis i Y. enterocolitica. Numele Yersinia a fost dat n
onoarea lui Alexander Yersin, care a izolat bacilul pestei, n Hong-Kong, n anul 1894.
2. Caractere generale
2.1. Habitat
Microorganismul poate fi identificat numai la animale (ex. roztoare - obolani) sau la
omul bolnav. Se poate transmite prin plgi mucate, de la o roztoare la alta sau ocazional
la om prin intermediul purecilor. Rezult infecii grave, posibil mortale. n USA, ultimul
caz de transmitere interuman a fost raportat n 1924.
2.2. Caractere morfotinctoriale
Y. pestis este un bacil Gram-negativ, imobil, care prezint o coloraie bipolar. Pe frotiuri
bacilii pot apare att izolai ct i dispui n lanuri scurte i sunt nesporulai. Exist i
forme cocobacilare. n organismele vii i n culturile tinere, prezint un nveli
pseudocapsular.
2.3. Caractere de cultur
Aerob facultativ anaerob, se dezvolt mai rapid pe medii ce conin snge sau fluide
organice i la 30C dar se poate multiplica i pe medii simple. n culturi pe geloz-snge
la 37C coloniile pot fi foarte mici i apar dup circa 24 ore. O inoculare a unor
microorganisme virulente recoltate direct din esutul infectat conduce la apariia unor
colonii de tip S, sau cu aspect mucoid, vscoase i colorate alb-gri. Dup realizarea unor
pasaje n laborator, coloniile devin neregulate i aspre (de tip R); capsula dispare.
2.4. Caractere biochimice
Yersinia pestis are o activitate biochimic relativ sczut i cu un grad de variabilitate.
Este un germen aerob, facultativ anaerob, fermenteaz glucoza i n mod variabil
fermenteaz lactoza. Y. pestis i Y. pseudotuberculosis au caractere biochimice similare.
2.5. Rezistena fa de factori fizici i chimici
Sunt germeni puin rezisteni fa de agenii fizici i chimici, dar n mediul extern pot
supravieui pn la circa 2 sptmni n puroi sau n sput i cteva luni n cadavre.
2.6. Structur antigenic

Yersiniile, la fel ca toate microorganismele Gram-negative, prezint la nivelul peretelui

antigenul O (LPZ, endotoxina).
Y. pestis produce mai multe antigene i toxine care acioneaz ca factori de virulen.
Anvelopa conine o protein (fraciunea I, F-1) care este produs n principal la 37C,
confer proprieti antifagocitare i activeaz complementul. Tipul virulent slbatic de
Y. pestis elaboreaz antigenele proteice V i W care sunt codificate cromozomial sau
plasmidic. Dintre toxinele produse, una este letal pentru animalele de laborator. Toxina
(exotoxin) are structur proteic.
Y. pestis produce i o bacteriocin (pesticin).
Cteva dintre antigenele Y. pestis reacioneaz ncruciat cu antigene ale altor yersinii.
2.7. Rspuns imun
Exist imunitate postinfecioas. Se pot utiliza vaccinuri pentru prevenirea mbolnvirii
(protecia nu este absolut).
2.8. Caractere de patogenitate
Yersinia pestis este un microorganism patogen n special prin multiplicare i prin
invazivitate, rolul patogenic al diferitelor structuri sintetizate n cursul metabolismului
nefiind complet elucidat. Doza infectant este foarte redus, 1-10 bacili sunt suficieni
pentru producerea bolii.
Rolul esenial pare a reveni structurilor care confer proprietile de rezisten la
fagocitoz, spre ex. fraciunea I, proteic, de la nivelul suprafeei celulare, i respectiv
structurii pseudocapsulare (virulena scade n lipsa pseudocapsulei).
Structurile cu rol n virulen (rol dovedit in vitro i pe animalele de experien) sunt
codificate plasmidic sau cromozomial. S-a dovedit implicarea esenial a unor astfel de
structuri genetice, care nu au fost identificate n cazul tulpinilor avirulente. Aceste tulpini
pot fi utile n producerea unor vaccinuri.
Dintre toxinele menionate mai sus, una este letal pentru animalele de laborator (doz de
numai 1 mg n cazul oarecelui). Aceast protein cu GM de 74.000Da, produce blocade
-adrenergice i este cardiotoxic la animale. Rolul su n infeciile umane nu a fost
elucidat.
3. Patogenie i patologie. Principalele afeciuni produse
n cursul prnzului, vectorul se hrnete dintr-o roztoare infectat cu Y. pestis,
microorganismul ajunge n intestinul puricelui i prin intermediul unei coagulaze
blocheaz peristaltismul la nivel gastric. Bacteriile se multiplic. Masa bacterian i
structura fibrinoas blocheaz tranzitul intestinal, puricele nfometat muc din nou i
regurgiteaz microorganismele n animalul mucat. Datorit blocajului intestinal, cu toate
c aspir snge, puricele nu se poate hrni, devine i mai nfometat i pierde selectivitatea
natural pentru roztoarele respective; astfel ajunge s mute gazda uman.
Microorganismul inoculat la om este fagocitat, dar se poate multiplica att intra ct i
extracelular. n scurt timp ajunge la nivel limfatic i apare o inflamaie hemoragic la
nivelul ganglionilor care se hipertrofiaz, suferi o necroz i devin fluctueni. n cursul
invaziei, Y. pestis poate ajunge n torentul sanguin i infecia se poate generaliza. Se
dezvolt leziuni hemoragice i necrotice n toate organele (ex. meningite, pneumonii i
pleuropericardite serosangvinolente). Aceasta este forma de pest bubonic, n care
letalitatea n lipsa tratamentului este de peste 50%.

Pesta pneumonic primar (forma pulmonar) poate apare prin inhalarea de nuclei de
pictur (de obicei de la un pacient care tuete) sau prin embolizri septice la nivel
pulmonar; se manifest prin pneumonie hemoragic, septicemie i deces n peste 90% din
cazuri.
4. Diagnosticul de laborator n infeciile produse de microorganisme din genul
Yersinia
Genul Yersinia include 11 specii dintre care Yersinia pestis (cauza ciumei), Y.
pseudotuberculosis i Y. enterocolitica produc infecii umane. Sunt enterobacterii de
dimensiuni mici, cu aspect de bacili sau cocobacili gram negativi, care prezint coloraie
bipolar. n produsul patologic prezint un pleomorfism accentuat. Nu formeaz spori,
pot prezenta structuri de tip capsular. Sunt aerobi facultativ anaerobi, catalazo-pozitivi,
oxidazo-negativi. Cresc pe medii simple i produc colonii de tip S n 24-48 de ore;
ultimele 2 specii sunt mobile la 22-30 C.
n continuare vom discuta despre yersiniozele cu poart de intrare digestiv, care pot
avea drept ageni etiologici Y. enterocolitica sau Y. pseudotuberculosis. Y. enterocolitica
reprezint o cauz destul de frecvent a BDA, cel puin din datele prezentate n literatura
de specialitate internaional. Poate determina infecii cu caracter invaziv localizate pe
ileonul terminal, cu prinderea ganglionilor mezenterici i apariia unor dureri n fosa
iliac dreapt ceea ce poate conduce la punerea eronat a diagnosticului de apendicit
acut, mai ales la copii. n cazul adulilor s-a dovedit implicarea Y. enterocolitica n
declanarea unor artrite reactive sau a eritemului nodos cu dificulti n ceea ce privete
diagnosticul diferenial. La pacienii cu variate grade de imunodepresie boala enteric
poate fi urmat de manifestri extra-intestinale, uneori n cadrul unei infecii generalizate.
Bolile produse de Y. pseudotuberculosis au o inciden mai redus; pot aprea enterite
subacute, adenopatie mezenteric etc.
Diagnosticul de laborator n yersiniozele cu poart de intrare digestiv este
bacteriologic, direct. n cazul manifestrilor extra-intestinale este indicat diagnosticul
serologic.
1. Recoltarea i transportul produsului patologic trebuie s se realizeze respectnd
regulile cunoscute, n special recoltarea ct mai rapid dup debutul bolii i nainte de
iniierea antibioterapiei. Produsul patologic poate fi reprezentat de materii fecale,
ganglioni recoltai intraoperator, snge etc. n continuare vom discuta diagnosticul unei
BDA. Se poate folosi mediul de transport Cary-Blair.
2. Examinarea microscopic a produsului patologic include realizarea unui preparat
proaspt ntre lam i lamel (nu se efectueaz frotiuri din materiile fecale). Preparatul se
examineaz la microscopul optic cu obiectivul 40x. Vom evidenia prezena celulelor
inflamatorii.
3. Cultivarea pe medii de cultur a produsului patologic se realizeaz n aa fel nct
s se poat obine colonii izolate i respectiv o cultur pur, care se va identifica. n
vederea izolrii Y. pseudotuberculosis sau Y. enterocolitica se pot utiliza diferite medii
selective clasice (MacConkey, ADCL) sau mediul CIN (cefsulodin, irgasan,
novobiocin), eventual cu incubare la temperatura camerei (20-30 C). Exist diferite
metode de mbogire, de ex. inocularea p.p. n tampon fosfat salin cu incubare la 4C

timp de 1-3 sptmni urmat de treceri pe mediile menionate mai sus. Coloniile
suspecte se repic pe mediile multitest clasice sau pe galerii API.
4. Identificarea se va realiza pe baza mai multor caractere:
Caractere morfotinctoriale: Sunt cocobacili sau bacili gram-negativicu cu dimensiuni de
0,5-3 m / 1-2m, posibil pleomorfi
a) Caractere de cultur:
- produc colonii de tip S, de 1-1,5 mm (2-3 mm dup 48 ore)
Pe mediul CIN coloniile sunt semitransparente, cu margini clare i centrul rou
b) Caractere biochimice:
- se pot investiga folosind mediile multi-test clasice sau galeriile API
- fermenteaz glucoza fr producere de gaz, nu fermenteaz lactoza, nu produc H2S
- sunt imobile la 37C i mobile la 22 C, nu produc indol, produc ureaz
c) Caractere antigenice:
- se utilizeaz seruri specifice anti-Yersinia, prin reacii de aglutinare pe lam.
Testarea sensibilitii la bacteriofagi (lizotipia) se poate utiliza n studii epidemiologice
sau n scop de cercetare, fiind rezervat laboratoarelor de referin
d) Alte caractere / teste utilizate n identificare la nivelul centrelor de referin:
- teste biochimice suplimentare
- reacii de aglutinare cu alte seruri imune, pentru tipuri mai puin frecvent ntlnite
- bacteriocinotipia
- tehnici ale biologiei moleculare (digestia endonucleazic a ADN-ului cromozomial,
electroforeza n cmp pulsatil, ribotipia, PCR etc).
5. Este recomandat realizarea antibiogramei (verificarea sensibilitii la antibiotice i
chimioterapice), prin metoda difuzimetric standardizat. Se pot utiliza i sisteme
automate, de exemplu trusa automat ATB G5, cu citire i interpretare dup 18-24 ore
de incubare (21 antibiotice), pentru bacili Gram negativi.
Diagnosticul serologic
Diagnosticul serologic este util n determinarea etiologiei artritelor reactive,
eritemului nodos sau n cazul altor manifestri extra-intestinale. Anticorpii apar la circa
4-7 zile de la debutul bolii, ating valoarea maxim dup circa 14 zile i persist cteva
luni. Se pot practica diferite tehnici, de ex. reacia de aglutinare n tuburi.
Se consider c valoarea titrului semnificativ este 1/160. Este recomandat testarea
serurilor pereche, n dinamic.
Trebuie s fie luat n considerare posibilitatea apariia unor reacii ncruciate,
datorit existenei unor antigene asemntoare la microorganisme din genurile Brucella
sau Salmonella.

Genul Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa

1. Definiie. ncadrare
Familia Pseudomonodaceae are patru genuri, dintre care numai genul Pseudomonas
include specii importante din punct de vedere medical. Genul Pseudomonas cuprinde pe
baza omologiei ARNr cinci grupuri, o parte din speciile incluse anterior n acest gen
aparinnd actualmente genului Burkholderia (B. mallei, B. pseudomallei etc).
Pseudomonas maltophilia a fost redenumit Xanthomonas maltophilia i a devenit
actualmente Stenotrophomonas maltophilia. Cea mai important specie a genului este
Pseudomonas aeruginosa (bacilul piocianic, bacilul puroiului albastru), specie
implicat relativ frecvent n infecii la persoane cu reactivitate sczut, precum i n
infecii nosocomiale (infecii de spital). Pseudomonas aeruginosa reprezint una din
principalele bacterii oportuniste.
n anul 1981 se considera c exist circa 800 de specii de Pseudomonas, contaminnd n
special plantele.
Genul cuprinde bacili aerobi, facultativ anaerobi, nesporulai, Gram-negativi, cu
dimensiuni de 1-5 / 0,5-1 mm, mobili datorit prezenei unuia sau mai multor flageli
(polari).
2. Caractere generale
2.1. Habitat
Microorganism foarte rspndit n natur (agent de putrefacie a materiei organice
animale i vegetale), poate fi pus n eviden la circa 15% dintre persoanele sntoase, la
nivel intestinal, axilar, perineal etc, prefernd zonele cu un grad de umiditate. Poate
contamina obiectele din grupurile sanitare, camera de baie, chiuvetele (n special sifonul
de scurgere) etc. Elaboreaz o piocin (bacteriocin), cu efect inhibitor asupra unor
tulpini din aceeai specie.
43. 2. 2. Caractere morfotinctoriale
Este un bacil Gram-negativ subire, cu dimensiuni ntre 1-5 m / 0,5-1 m, mobil, cu 1-3
cili polari (exist i tulpini neciliate), nesporulat. Uneori prezint capsul.
43. 2. 3. Caractere de cultur
Din punct de vedere nutriional sunt germeni puin pretenioi. Se pot cultiva uor pe
medii simple n condiii aerobe. Unele specii din genul Pseudomonas se pot multiplica la
4C, dar cele mai multe au temperatura optim de multiplicare cuprins ntre 30 i 37C
(Pseudomonas aeruginosa se poate multiplica i la 42C). Posibilitatea cultivrii la 42C
permite diferenierea de celelalte specii.
Pe medii solide formeaz colonii care se pigmenteaz n mod specific, nsoindu-se de
pigmentarea mediului (albastru sau galben-verde). De menionat c pot aprea colonii (de
tip S) cu aspecte diferite, dnd impresia prezenei concomitente de bacterii diferite.
Cultura poate avea un miros aromat, ca al florilor de tei. Tulpinile de Pseudomonas
aeruginosa recoltate de la pacieni cu fibroz chistic formeaz colonii mucoide.
n bulion tulbur mediul, formnd i o pelicul la suprafa, sub care se evideniaz
pigmentul.
2.4. Caractere biochimice

Produce diferii pigmeni, dintre care mai importani sunt piocianina (albastru) i
pioverdina (galben-verzui fluorescent). Este un germen catalaz-pozitiv, degradeaz
oxidativ glucoza, nu fermenteaz lactoza i este oxidaz-pozitiv.
2.5. Rezistena fa de factori chimici i fizici
Este sensibil la cldur, fenol, alcool de 80C, dar rezistent la aciunea compuilor
cuaternari de amoniu.
n spital se selecteaz tulpini rezistente la antiseptice, dezinfectante, antibiotice, tulpini
care pot fi implicate n infecii de spital.
2.6. Structur antigenic
Pseudomonas aeruginosa posed antigenul flagelar H (proteic) i antigenul somatic O
(lipopolizaharidic). Pe baza existenei mai multor factori antigenici O i H, s-au descris
mai multe serotipuri n cadrul speciei, utile n special n investigaii epidemiologice.
2.7. Rspuns imun
Exist un rspuns imun umoral, manifestat prin formarea de anticorpi (opsonine,
aglutinine), ns cu titruri nesemnificative i fr eficacitate protectiv.
2.8. Caractere de patogenitate
Speciile genului Pseudomonas sunt ubicuitare (ntlnite n ap, pe sol, pe plante etc, sau
fac parte din flora microbian uman). Pseudomonas aeruginosa a fost identificat n
diferite soluii apoase, inclusiv soluii dezinfectante sau chiar soluii de antibiotice, avnd
o deosebit capacitate de a supravieui n medii umede. Pseudomonas aeruginosa este un
microorganism oportunist, condiionat patogen.
Dintre factorii de virulen ai bacilului piocianic am putea aminti prezena pililor (care
mediaz ataarea bacterian la celulele epiteliale), producerea unor proteaze (cu efecte
histotoxice), a unei lipaze, sinteza de hemolizine, exotoxine (exemplu exotoxina A, de
circa 20.000 de ori mai toxic dect endotoxina), precum i existena endotoxinei
(lipopolizaharidul din structura peretelui).
Tulpinile de Pseudomonas aeruginosa izolate de la pacieni cu fibroz chistic dein un
glicocalix foarte dezvoltat care mediaz aderena la nivelul mucoaselor respiratorii i
mpiedic opsonizarea. n infeciile cronice, la aceti pacieni, a fost demonstrat trecerea
tulpinilor din forme S n forme de tip M, datorit unor mutaii care au fost identificate
recent (2008).
3. Patogenie i patologie specific. Principalele afeciuni produse
Datorit capacitii de adaptare i supravieuire n diferite medii, precum i datorit
factorilor de virulen enumerai, Pseudomonas aeruginosa poate produce infecii foarte
variate, de la infecii tegumentare superficiale pn la septicemii fulminante. La
persoanele cu reactivitate normal, infeciile sunt de obicei localizate (foliculite, otite,
infecii oculare etc), urmnd contaminrii cu diferite soluii apoase sau dup not n
piscin. Prezena piocianicului ar putea fi semnalat de culoarea albastr verzuie a
pansamentelor. La nivel dermic, procesul infecios poate avea i o evoluie grav, cu
apariia de vezicule care se sparg i se refac pe o baz necrotic. Procesul poate progresa
n profunzime (ecthyma gangrenosum), asemntor cu patologia ntlnit la pacienii
neutropenici la care infecia poate fi produs i de alte microorganisme.
La persoanele spitalizate, cu reactivitate diminuat i supuse unor manevre medicochirurgicale invazive (intubaii, cateterizri etc), precum i la persoanele cu arsuri,

P. aeruginosa poate produce infecii localizate, dar potenialul diseminrii i apariiei

unor complicaii grave (bacteriemie, osteomielit, meningit, endocardit, septicemie)
este foarte important. n lipsa tratamentului adecvat (dificil datorit rezistenei la
antibiotice), evoluia procesului infecios poate fi grav sau deosebit de grav (80% din
septicemiile cu piocianic au evoluie letal). Infecia pulmonar cronic la pacienii cu
fibroz chistic (mucoviscidoz) este produs de un fenotip particularal speciei
Pseudomonas aeruginosa.
4. Diagnosticul de laborator n infeciile produse de microorganisme din genul
Pseudomonas
Genul Pseudomonas face parte din familia Pseudomonodaceae i include mai multe
specii. Pseudomonas aeruginosa (bacilul piocianic, bacilul puroiului albastru)
reprezint specia cea mai important a genului, relativ frecvent implicat n infecii la
persoane cu reactivitate sczut, precum i n infecii nosocomiale (infecii de spital).
Aceti germeni sunt bacili gram-negativi aerobi,oxidazo pozitivi, nesporulai, cu
dimensiuni de 1-5 m / 0,5-1 m, mobili datorit prezenei unuia sau mai multor flageli
(polari).
Datorit capacitii de adaptare i supravieuire n diferite medii, precum i datorit
factorilor de virulen pe care i deine, Pseudomonas aeruginosa poate produce infecii
foarte variate, de la infecii tegumentare superficiale pn la stri de sepsis cu evoluie
fulminant. Prezena piocianicului ar putea fi semnalat de culoarea albastr verzuie a
pansamentelor. La persoanele cu reactivitate normal, infeciile sunt de obicei localizate
(foliculite, otite, infecii oculare etc). La nivel dermic, procesul infecios poate avea i o
evoluie grav, cu apariia de vezicule care se sparg i se refac pe o baz necrotic;
procesul poate progresa n profunzime (ecthyma gangrenosum).
La persoanele spitalizate, cu reactivitate diminuat i supuse unor manevre medicochirurgicale invazive (intubaii, cateterizri etc) precum i la persoanele cu arsuri,
Pseudomonas aeruginosa poate produce infecii localizate, dar potenialul diseminrii i
apariiei unor complicaii grave (bacteriemie, osteomielit, meningit, endocardit,
sepsis) este foarte important. n lipsa tratamentului adecvat (dificil datorit rezistenei la
antibiotice), evoluia procesului infecios poate fi grav sau deosebit de grav. Un fenotip
particularal speciei Pseudomonas aeruginosa produce o infecie pulmonar cronic la
pacienii cu fibroz chistic (mucoviscidoz). Dintre entitile clinice menionate mai sus,
din punct de vedere al diagnosticului de laborator vom discuta infeciile supurative ale
tegumentelor i mucoaselor.
Diagnosticul de laborator este numai bacteriologic, direct, cu urmtoarele etape.
1. Recoltarea i transportul produsului patologic trebuie s se realizeze respectnd o
serie de reguli (ct mai aproape de debutul bolii, nainte ca pacientului s fi primit
antibiotice, ct mai rapid i corect din punct de vedere al tehnicilor utilizate, respectnd
toate normele de asepsie i antisepsie etc). n continuare vom discuta cazul n care p.p.
este reprezentat de puroi. Puroiul trebuie examinat macroscopic, deoarece poate avea un
aspect sugestiv (culoare albastr sau galben-verzui fluorescent).
2. Examinarea microscopic a produsului patologic include realizarea a minim dou
frotiuri din produsul patologic recoltat i transportat corespunztor, care se vor colora cu
7

albastru de metilen (AM) i respectiv Gram. Frotiurile se examineaz la microscopul

optic cu imersie i se noteaz prezena celulelor de la nivel tegumentar (eventual
modificate fa de normal), prezena celulelor inflamatorii (ex. leucocite, piocite) i
prezena bacililor gram-negativi cu cu dimensiuni de 1-5 m / 0,5-1 m, dispui n
lanuri scurte, perechi, izolai.
3. Cultivarea pe medii de cultur a produsului patologic se realizeaz n aa fel nct
s se poat obine colonii izolate i respectiv o cultur pur, care se va identifica.
Pseudomonas aeruginosa se poate dezvolta pe medii de cultur obinuite n 18-24 ore, la
5-42C, cu dezvoltare optim la 30-37C. Se prefer utilizarea unor medii de cultur
selective. Uneori cultivarea se realizeaz pe agar-snge. Pe mediile solide Pseudomonas
aeruginosa formeaz colonii de tip S care se pigmenteaz n mod specific, nsoindu-se
de pigmentarea mediului (albastru sau galben-verde fluorescent). De menionat c pot
aprea colonii (de tip S) cu aspecte diferite, dnd impresia prezenei concomitente a unor
bacterii diferite. Cultura poate avea un miros aromat, ca al florilor de tei sau iasomie.
Pe agar-snge produce hemoliz. n medii lichide, Pseudomonas aeruginosa tulbur
mediul ns n timp duce la apariia unei membrane aderent, cenuie, la suprafaa
acestuia. Dup 18-24 de ore, sub membran se poate evidenia prezena pigmentului
produs.
4. Identificarea microorganismului implicat patogenic se va realiza pe baza mai
multor caractere:
a) Caractere morfotinctoriale: Sunt bacili gram-negativicu cu dimensiuni de 1-5 m / 0,51 m, dispui n lanuri scurte, perechi, izolai, relativ polimorfi. n culturi mai vechi pot
aprea diferite forme (filamentoase, cocoide). Mobilitatea se poate examina pe preparatul
proaspt, ntre lam i lamel.
b) Caractere de cultur:
produc colonii de tip S care se pigmenteaz n mod specific, nsoindu-se de
pigmentarea mediului (albastru sau galben-verde fluorescent). Pot aprea colonii (de tip
S) cu aspecte diferite, dnd impresia prezenei concomitente a unor bacterii diferite.
Coloniile pot prezenta o suprafa iridescent, cu luciu metalic i plaje de autoliz,
degajnd o arom ptrunztoare particular. Pentru stimularea sintezei pigmenilor se
poate folosi repicare pe medii speciale, King F (stimuleaz producerea de fluorescein) i
King P (stimuleaz producerea de piocianin).
Cultura poate avea un miros aromat, ca al florilor de tei sau iasomie.
Pe mediile cu snge produc hemoliz.
Multiplicarea la 42 C poate fi util pentru identificare.
c) Caractere biochimice:
Produce diferii pigmeni, dintre care mai importani sunt piocianina (albastru) i
pioverdina sau fluoresceina (galben-verzui fluorescent).
Este un germen catalazo pozitiv care degradeaz oxidativ glucoza i nu fermenteaz
lactoza (att coloana ct i panta mediului TSI au culoare roie).
Se poate realiza testul de oxidare-fermentare a glucozei.
Bacilul piocianic este oxidazo-pozitiv.
Pentru studii mai aprofundate, n momentul actual anumite laboratoare utilizeaz sisteme
comerciale care verific n acelai timp numeroase caractere biochimice permind nu
8

numai ncadrarea n genul Pseudomonas, dar i identificarea precis a speciei (de

exemplu Rapid NTF, cu identificarea speciei n 4-48 de ore).
d) Caractere de patogenitate:
Se pot studia n anumite situaii (inoculm 4 oareci cu cantiti fixe de germeni cultivai
pe geloz nclinat 2 % i urmrim supravieuirea acestora timp de patru zile).
e) Alte teste ce pot fi studiate n scopul identificrii germenilor:
Testarea caracterelor antigenice
Testarea sensibilitii la bacteriofagi (lizotipia) i respectiv piocinopia se pot utiliza n
studii epidemiologice sau n scop de cercetare, fiind rezervate laboratoarelor de referin.
Teste de biologie molecular (sonde nucleotidice, analiza ADN dup utilizarea de
endonucleaze de restricie, PCR).
5. Antibiograma (verificarea sensibilitii la antibiotice i chimioterapice n vederea
stabilirii tratamentului) este obligatorie i se realizeaz de obicei prin metode
difuzimetrice. Pseudomonas aeruginosa reprezint unul dintre microorganismele care pot
crea dificulti deosebit de mari n alegerea tratamentului etiologic, datorit rezistenei la
foarte multe dintre antibioticele uzuale. Cu toate c anumii autori indic faptul ca bacilul
piocianic ar fi sensibil la mezlocilin, ticarcilin, ticarcilin-acid clavulanic, piperacilin,
piperacilin-tazobactam, imipenem, aztreonam, anumite aminoglicozide, fluorochinolone
sau cefalosporine de generaia a III-a, considerm c principiul care trebuie reinut este
c n orice infecie cu Pseudomonas aeruginosa (atunci cnd s-a dovedit c acest
microorganism este agentul etiologic al infeciei) antibiograma este obligatorie. n
cazul unor infecii grave antibiograma difuzimetric trebuie s fie nsoit de alte
determinri (a se vedea cursul 7a - sem I).

BIBLIOGRAFIE
1. Popa G.L., Popa M.I., Genul Yersinia, n Popa M.I. (coord.), Microbiologie Medical, vol 1 i
vol. 2 - curs UMF Carol Davila, 2010.
2. Popa G.L., Popa M.I., Genul Pseudomonas. Pseudomonas aeruginosa, n Popa M.I. (coord.),
Microbiologie Medical, vol 1 i 2 - curs UMF Carol Davila, 2010.