Sistemul MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization

Time -of-Flight Mass Spectrometry) pentru identificarea rapida a

germenilor patogeni
Desorptia laser prin ionizare si detectia ionilor dupa un timp de zbor,
dintr-o matrice suport a analitului (Matrix Assisted Laser
Desorption/Ionization Time-of-Flight - MALDI-TOF), este o tehnica
care a fost dezvoltata de prof. Franz Hillenkamp si dr. Michael Karas
de la Universitatea din Munster, Germania.
Aplicatia este insotita de Perseptive Biosystems (Applied Biosystems)
Voyager DE-PRO. MALDI ofera o analiza de masa rapida si usoara,
utilizand o cantitate minima de proba. Principiul pe care se bazeaza
analiza de masa MALDI poate fi vizualizat in urmatoarea figura.

Figura 1 principiul MALDI

Principiul MALDI
Proba este dispensata intr-o matrice in exces, care va absorbi
puternic raza de lumina incidenta.
Matricea contine cromofori pentru raza laser, iar cum matricea
este in exces molar considerabil, va absorbi toata radiatia laser.
Matricea izoleaza moleculele probei intr-un mediu chimic, ceea ce
imbunatateste probabilitatea ionizarii, fara fragmentare.

Fasciculul laser pulsat, concentrat pe spotul de proba, va cauza

volatilizarea probei si a matricei
Ionii rezultati sunt accelerati in campul electric, iar apoi purtati intrun tub de zbor, unde se separa in functie de masa.
Un dispozitiv de inregistrare la viteza mare va determina timpul de
zbor al ionilor.
Sursa: Finnigan Mat

Figura 2 Principiul spectrometriei de masa MALDI-TOF:

a. Reprezentare schematica a separarii analitilor prin desorptie laser
cu ionizare si detectia ionilor dupa un timp de zbor, dintr-o matrice
suport, in functie de raportul specific masa/sarcina a ionilor.
b. Spectrul de masa caracteristic pentru particule intre 2 si 20 kDa.
c. Spectrul de masa marit pentru particule intre 5 si 8 kDa.

Nature
Reviews
2010) | doi:10.1038/nrc2917

Cancer 10, 639-646 (September

Utilizarea sistemului MALDI-TOF pentru identificarea germenilor

patogeni din cultura este o metoda rapida si sigura, care masoara
prin spectrometrie de masa amprenta moleculara unica a fiecarui
microorganism.
Caracterele specifice ale proteinelor, care se gasesc in fiecare
microorganism, sunt masurate si utilizate pentru identificarea unui
germen patogen specific, prin compararea respectivului pattern
proteic cu o baza de date extensiva, ceea ce duce la identificarea
microorganismului la nivel de specie.
Este o metoda cu o acuratete crescuta, aplicabila unei palete largi de
microorganisme, mult mai rapida decat metodele traditionale, robusta
si usor de utilizat.
O galerie video de prezentare a metodei poate fi accesata cu
urmatorul link:
http://www.bdal.com/library/multimedia/video-material.html