CONTROL DE CALIDAD

INTERNO
En el Laboratorio Clnico

DAYAN CRCAMO
JACQUELINE FERNANDES
CAMILA VARGAS
Inmunologa Clnica
Docente: Gloria Arismendi
10 / 06 / 2015

INDICE

Introduccin
_____________________________________________________________________________
Pgina 2
Marco Terico
Control de Calidad
Interno__________________________________________________________ Pgina 3
6
Marco Prctico
Metodologa de Trabajo
_____________________________________________________________Pgina 7
Protocolo de Trabajo
________________________________________________________________ Pgina 7
Determinacin de Suero control
cido rico
____________________________________________________________________________
Pgina
Albumina
_____________________________________________________________________________
_ Pgina
Colesterol
_____________________________________________________________________________
_ Pgina
Protena total
__________________________________________________________________________
Pgina
Triglicridos
___________________________________________________________________________
Pgina
Conclusin
________________________________________________________________________________
_ Pgina

Bibliografa
________________________________________________________________________________
Pgina

INTRODUCCIN
En la prctica diaria del laboratorio clnico es esencial y es prioridad
otorgar prestaciones que cumplan con los requisitos de calidad, y
realizar cambios, para establecer una mejora continua de sus procesos.
La implementacin de un sistema d gestin de calidad, es importante
porque permite el desarrollo de estrategias que pueden conducir a, la
identificacin de problemas analticos, con lo cual pueden dirigirse
esfuerzos para la resolucin, limitacin, eliminacin, o prevencin, de
errores en beneficio del laboratorio, y de la comunidad que solicita el
servicio.
Segn lo anterior los laboratorios nacionales, se han adjuntado a un
sistema de gestin de calidad, implementado por el Instituto de Salud
Pblica de Chile, con la finalidad de mejorar la calidad del servicio,
otorgado por estos centros hacia a sus usuarios,
entregndoles a
estos, la confianza de que los resultados entregados de sus respectivos
anlisis biolgicos, sean certeros y fidedignos.
Para ello, se han desarrollado herramientas tecnolgicas, como
informticas, que permiten, planear y controlar la calidad analtica de
los exmenes, asegurando la liberacin de resultados tiles, para el
diagnstico clnico. Para cumplir tales objetivos, se establece tanto un

control de Calidad Externo y un control de Calidad Interno en el

laboratorio que tiene como objetivo, el seguimiento de los procesos pre
analtico, analtico, y post analticos, para el aseguramiento de la
calidad del laboratorio.En el siguiente trabajo se abordara especficamente el control interno
del laboratorio de la seccin de bioqumica clnica, aplicado en un marco
prctico, el cual se bas en el uso de un material de control (hecho en
el laboratorio) para la revisin de diferentes analitos, utilizados en el
laboratorio de docencia de la Universidad Santo Toms.-

MARCO TERICO
Control de calidad Interno
El propsito de control de calidad interno es evaluar el desempeo del
sistema de medicin para liberar los resultados de las muestras de
pacientes procesadas bajo las mimas condiciones de trabajo, permiten
detectar desvos y variabilidad del sistema analtico para tomar acciones
preventivas y apoyar en la mejora del desempeo.
EL proceso ms importante que es evaluado dentro del control interno
de calidad del laboratorio es la etapa analtica y una forma de poder
evaluar el desempeo analtico de los procesos de medicin de analitos
es el uso de materiales de control.
Se define como material de control como un lquido o sustancia
liofilizada de origen humano, animal o qumico que se usan para
monitorear la calidad y consistencia del proceso analtico. El profesional

debe seleccionar el material de control

premisas:

basado en las siguientes

Que se parezcan lo ms posible a muestras de pacientes en

cuanto a su reactividad con el sistema de medicin utilizado.

Se pueden elegir de primera opinin o de tercera opinin siendo

los ltimos ms recomendables como alternativa.

Los controles pueden ser preparados por el propio laboratorio

(pool de sueros normales), este debe realizarse con las
precauciones de estabilidad y seguridad para el personal de
laboratorio.

Se debe seleccionar considerando su estabilidad disponibilidad en

cantidad para mantener un stock por al menos de 6 meses.

El nivel de concentracin del control en lo posible debe estar

comprendido en el intervalo de referencia comprendido en el
intervalo de referencia biolgica normal, bajo o sobre este.

Cuadro 1: Flujograma para el aseguramiento

laboratorio clnico.

de la calidad

analtica en el

Para evaluar los resultados obtenidos desde los controles y analizarlos se

cre un mtodo llamado carta control de Levey Jennings.
Este es un mtodo grafico que muestra los resultados de los controles y
como estos se comportan en un periodo de tiempo determinado.
Los resultados se grafican secuencialmente en el tiempo (eje X), y el
resultado de la medicin (eje Y).
Para realizar la carta control de Levey Jennigs debemos:

Obtener con cada uno de los controles como mnimo 20

resultados en a lo menos 20 das distintos. Si se dispone de
menos tiempo se pueden hacer dos determinaciones diarias
por 10 das consecutivos
y establecer una media
y

desviacin standard provisoria, hasta tener un mes de

resultados.

Eliminar los valores extremos por la prueba de Dixon o

Grubbs u otro que cumpla con el mismo objetivo.

Los resultados obtenidos durante la valoracin de material

control permite calcular la media aritmtica y desviacin
estndar para poder construir la carta control.
o Media

Es la suma de los alores de todas las

observaciones
dividida
por
el
nmero de observaciones

o Desviacin
estndar

Se define como la raz cuadrada de la

varianza. Permite obtener una medida
de la variabilidad de los datos
expresados en la misma unidad de
medida de la variable.

o Coeficiente de
variacin

Expresa la desviacin estndar como

porcentaje de la media.

Se
sugiere
calcular
el
variacin

coeficiente
de
del mtodo al menos
mensualmente para
imprecisin
y
anlisis
de
su

conocer su
posterior
desempeo.

En la carta control de Levey Jenning se deben aplicar las

reglas de Westgard que son una serie de pautas de control
usadas en el procedimiento de control de calidad para
analizar la medicin del control (ver cuadro 2).-

Cuadro 2: Reglas de Westgard y el tipo de error al que

se asocian

MARCO PRCTICO
Se realiz en el laboratorio de docencia de la universidad Santo Tomas,
el control de calidad en bioqumica clnica a travs de material de
control, con el objetivo de poder aplicar los contenidos mencionados en
este trabajo.

Metodologa de trabajo
Se realiz un control de calidad interno en una corrida analtica de varios
analitos utilizando un material de control realizado por el grupo de
trabajo, se analiz los datos obtenidos a travs de la carta de control de
Levy Jenning, y esta a su vez se le aplicaron las reglas de Westgard

para poder ver el comportamiento de nuestro control en un periodo de

tiempo.

Protocolo de trabajo

1. Obtencin de 10 muestras
sanguneas de pacientes sanos y
que se encontraban en ayuno completo. La
obtencin de la muestra se realiza en tubos
sin anticoagulante (tapa roja).

2. Posteriormente se procedi a centrifugar las

muestras sanguneas con el objetivo de
separar los elementos sanguneos y as obtener
suero. La centrifugacin se realiza a 3500
rpm por 5 minutos.
3. Luego de centrifugar y obtener los sueros de
cada muestra, se procedi a extraer el suero residual para
colocarlo en un tubo khan. Los sueros ya separados se
centrifugaron nuevamente para evitar el hallazgo de trazas de
sangre total.

4. Ya obtenido los sueros, en un matraz estril se procedi a colocar

todos los sueros para as lograr mezclarlos de manera
homognea. Despus se dispuso a colocar de manera
equitativo el suero en diferentes tubos, para que
puedan ser utilizados como material de control.
5. Se utiliz este material de control para los siguientes
analitos: Protenas totales, Albumina, cido rico, Colesterol y
Triglicridos.

6. El anlisis bioqumico fue semi automatizado

con la medicin a travs de mtodos
espectrofotomtricos.

Se realizara el detalle de cada analito en la siguiente pauta:

????????????????????????????????????????
???????????????????????????
?????????????????????

DETERMINACIN DE CIDO RICO PARA POOL DE SUERO CONTROL

Es el principal producto del catabolismo de las bases pricas, excretado por la
orina.se forma a partir de la xantina por accin de la xantino oxidasa se
sintetiza principalmente en el hgado y el intestino delgado. El adulto tiene un
contenido de 1,2 gramos en el organismo.

Mtodo Uricasa Enzimtico

Fundamento del Mtodo:

El cido rico es oxidado por la accin de la uricasa, en alantoina y perxido de
hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) la mezcla de diclorofenol
sulfonato (DCFS) y 4 aminoantipirina (4-AA) se condensan por accin del
perxido de hidrgeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la
concentracin de cido rico en la muestra.

Concentracin del estndar: 8 mg/dl

Absorbancia del estndar: 0,146
Longitud de onda: 546 nm
Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico
Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C
Rango de referencia: H: 3,5 7,2 mg/dl // M: 2,6 6
mg/dl

Factor de calibracin=

F . C=

Concentracin estandar
Absorbancia estandar

8 mg/dl
0,146
F.C = 54, 79 mg/dl

CIDO RICO
Lecturas
L1
L2
L3
L4
L5
L6
L7
L8

Absorbancia
0,093
0,090
0,103
0,092
0,081
0,085
0,080
0,082

10

Concentracin
(FC x Abs)
5,09 mg/dl
4,93 mg/dl
5,64 mg/dl
5,04 mg/dl
4,43 mg/dl
4,65 mg/dl
4,38 mg/dl
4,49 mg/dl

L9
L10
L11
L12
L13
L14
L15
L16
L17
L18
L19
L20

0,074
0,073
0,082
0,087
0,088
0,089
0,093
0,074
0,076
0,071
0,079
0,086

4,05
3,99
4,49
4,76
4,82
4,89
5,09
4,05
4,16
3,89
4,32
4,71

Promedio

4,5935

Desviacin estndar:

0,452528
28

Coeficiente de variacin:

9,8514 %

CONCENTRACION g/L

Grafico de Levey Jennings:

LECTURA

11

mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl

SIMBOLOGIA
Promedio
1era desviacin estndar
2da desviacin estndar
Concentracin del pool de
muestras

DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES PARA POOL DE SUERO CONTROL

Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente

distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actan como elementos
estructurales y de transporte aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas,
anticuerpos, factores de coagulacin, etc.

12

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del Mtodo:

Los enlaces peptdicos de las protenas reacciones con el in cprico, en medio
alcalino, para dar un complejo color violeta, con mximo de absorcin a 540
nm, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en
la muestra.

Concentracin del estndar: 4,7 g/dl

Absorbancia del estndar: 1,105
Longitud de onda: 540 nm
Tipo de reaccin: Ascendente
enzimtico

Tiempo de incubacin: 5 minutos a

37C

Rango de referencia: 6,1 7,9 g/dl

Factor de calibracin=

F . C=

Concentracin estandar
Absorbancia estandar

4,7 g /dl
1,105
F.C = 4,25 g/dl

PROTENAS TOTALES
Lecturas

Absorbancia

L1
L2
L3
L4

1,64
1,57
1,59
1,57

13

Concentracin
(FC x Abs)
6,97 g/dl
6,6 g/dl
6,75 g/dl
6,7 g/dl

L5
L6
L7
L8
L9
L10
L11
L12
L13
L14
L15
L16
L17
L18
L19
L20

1,58
1,63
1,62
1,64
1,54
1,48
1,62
1,55
1,55
1,65
1,42
1,45
1,53
1,51
1,57
1,53

6,72 g/dl
6,92 g/dl
6,88 g/dl
6,97 g/dl
6,54 g/dl
6,2 g/dl
6,8 g/dl
6,5 g/dl
6,58 g/dl
7,0 g/dl
6,0 g/dl
6,16 g/dl
6,5 g/dl
6,4 g/dl
6,6 g/dl
6,5 g/dl

Promedio

6,6145

Desviacin estndar:

0,279557
45

Coeficiente de variacin:

4,2264 %

CONCENTRACION g/L

Grafico de Levey Jennings:

LECTURA

14

SIMBOLOGIA
Promedio
1era desviacin estndar
2da desviacin estndar
Concentracin del pool de
muestras

DETERMINACIN DE ALBUMINA PARA POOL DE SUERO CONTROL

La albmina srica constituye ms de la mitad de las protenas sanguneas y

en una forma muy general representa aproximadamente el
50% de la
actividad sinttica del hgado. La albmina humana es una pequea protena
relativamente simtrica y que siendo la principal protena del plasma, es una
molcula altamente soluble, que a pesar de su elevada carga negativa puede

15

ligarse reversiblemente tanto con cationes como con aniones, lo que hace
posible que su situacin plasmtica sea ptima para poder transportar o
inactivar una serie de sustancias como metales pesados, drogas, tinturas,
cidos grasos, hormonas y enzimas. Su principal indicacin se relaciona con su
accin onctica como un excelente expansor del volumen plasmtico. Los
efectos fisiolgicos de la propiedad de ligarse que tiene la albmina a otras
sustancias, pueden ser determinantes para la utilizacin futura de esta
protena.

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del mtodo

La albmina reacciona especficamente sin separacin previa con la forma
aninica de la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon ftalena (BCF), en presencia de
un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de
absorbanciaa 625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la
cantidad de albmina presente en la muestra.
-

Concentracin del estndar: 2,7 g/dl

Absorbancia del estndar:2,57
Longitud de onda: 625 nm
Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico
Tiempo de incubacin: 10 minutos a T
ambiente

Rango de referencia: 3,5 4,8 g/dl

Factor de calibracin=

F . C=

Concentracin estandar
Absorbancia estandar

2 , 7 g /dl
2 ,57
F.C = 1,05 g/dl

16

Albumina
Lectura
L1
L2
L3
L4
L5
L6
L7
L8
L9
L10
L11
L12
L13
L14
L15
L16
L17
L18
L19
L20

Absorbancia (ABS)
3,31
3,35
3,32
3,30
3,33
3,41
3,44
3,39
3,36
3,43
3,38
3,85
3,44
3,37
3,42
3,43
3,36
3,45
3,50
3,52

Concentracin (FC x ABS)

3,47
3,81
3,48
3,46
3,49
3,58
3,61
3,55
3,52
3,6
3,9
3,7
4,62
3,5
3,59
3,6
3,52
3,62
3,67
3,69

Promedio

6,6145

Desviacin estndar:

0,279557
45

Coeficiente de variacin:

4,2264 %

17

CONCENTRACION g/L

Grafico de Levey Jennings:

LECTURA

SIMBOLOGIA
Promedio
1era desviacin estndar
2da desviacin estndar
Concentracin del pool de
muestras

DETERMINACIN DE COLESTEROLPARA POOL DE SUERO CONTROL

El colesterol es un lpido esteroide que se encuentra en los tejidos corporales y
en plasma sanguneo. Las concentraciones mas altas de este lpido las
encontramos en cerebro, hgado, medula espinal y pncreas. Esta constituido
por cuatro carboxilos y posee una cabeza polar formada por el grupo OH y una
porcin apolar.
El colesterol lo obtenemos de forma exgena a travs de la dieta y de forma
endgena sintetizndose en el hgado, es precursor de hormonas y sales
biliares y es uno de los principales componentes estructurales de las
membranas plasmticas de todas nuestras celulas a las que les otorga firmeza.

18

La determinacin de colesterol en forma aislada en una muestra sangunea

tiene utilidad diagnostica limitada, sin embargo, su concentracin ser
indicativo de diversas condiciones clnicas y patolgicas. Se ha visto que el
colesterol es uno de los factores contribuyentes en la formacin de ateromas
dado que las complicaciones aterosclerticas prevalecen en individuos
hipercolesterolemicos, lo cual es un riesgo latente a contraer enfermedad
cardiaca coronaria y como consecuente un infarto agudo al miocardio.
Metodo CHOD PAP colorimtrico
Fundamento:
El Colesterol es oxidado enzimticamente por la colesterol oxidasa (CHOD),
previa hidrlisis enzimtica de los steres mediante una lipasa de origen
fungal. El Agua oxigenada (H2O2) generada en la oxidacin permite la union
oxidativa del fenol con la 4-aminofenazona (4-AF) mediante una reaccin
catalizada por la peroxidasa (POD). El indicador final es la quinonimina roja.
-

Concentracin del estndar: 200 mg/dl

Absorbancia del estndar: 0,328
Longitud de onda: 505 nm
Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico
Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C
Rango de referencia: <200 mg/dl

Factor de calibracin=

F . C=

Concentracin estandar
Absorbancia estandar

2 00 m g /dl
0 ,328
F.C = 610 mg/dl
Colesterol

Lectura

Absorbancia (ABS)

1
2
3
4
5
6

0,276
0,272
0,335
0,273
0,257
0,249

19

Concentracin (FC x
ABS)
168 mg/dl
166 mg/dl
204 mg/dl
167 mg/dl
157 mg/dl
152 mg/dl

7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

0,287
0,231
0,252
0,329
0,254
0,237
0,251
0,241
0,247
0,254
0,277
0,281
0,287
0,266

175
141
154
201
155
145
153
147
151
155
169
171
175
162

Promedio

163,4

Desviacin estndar:

16,59

Coeficiente de variacin:

10,15 %

Grafica de Levey Jennings

20

mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl
mg/dl

CONCENTRACION g/L

LECTURA

SIMBOLOGIA
Promedio
1era desviacin estndar
2da desviacin estndar
Concentracin del pool de
muestras

DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS PARA POOL DE SUERO CONTROL

21

Los triglicridos son lpidos absorbidos en la dieta y tambin producidos en

forma endgena a partir de los carbohidratos. Su medicin es importante en el
diagnstico y manejo de las hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener
origen gentico o ser secundarias a otras tales como nefrosis, diabetes mellitus
y disfunciones endcrinas. El aumento de triglicridos se ha identificado como
un factor de riesgo en enfermedades aterosclerticas.

Metodo GPO PAP Colorimetrico

Fundamento:
Los triglicridos son hidrolizados por una lipasa especfica liberando cidos
grasos y glicerol. El glicerol es fosforilado por la enzima gliceroquinasa y
posteriormente, el glicerol-1-fosfato es oxidado a dihidroxiacetona fosfato por
la enzima glicerol-fosfato oxidasa, generndose perxido de hidrgeno.
Posteriormente, en una reaccin del tipo Trinder, el perxido de hidrgeno
reacciona
con
4-Aminoantipirina
y
el
cido
3,5-Dicloro-2-Hidroxibencensulfnico para producir por medio de la enzima peroxidasa un
compuesto coloreado en cantidad proporcional a la concentracin de
triglicridos presente en la muestra.

Concentracin del estndar: 200 mg/dl

Absorbancia del estndar: 0,264
Longitud de onda: 505 nm
Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico
Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C
Rango de referencia: <150 mg/dl

Factor de calibracin=

F . C=

Concentracin estandar
Absorbancia estandar

200 mg/dl
0, 264
F.C = 757 mg/dl

22

Triglicridos
Lectura

Absorbancia (ABS)

Concentracin
(FC x ABS)

0,114

86 mg/dl

0,143

108 mg/dl

0,133

100 mg/dl

0,109

83 mg/dl

0,101

76 mg/dl

0,131

99 mg/dl

0,127

96 mg/dl

0,111

84 mg/dl

0,097

73 mg/dl

10

0,129

98 mg/dl

11

0,186

140 mg/dl

12

0,127

96 mg/dl

13

0,120

91 mg/dl

14

0,141

107 mg/dl

15

0,156

118 mg/dl

16

0,113

86 mg/dl

17

0,205

155 mg/dl

18

0,095

72 mg/dl

19

0,112

85 mg/dl

20

0,122

92 mg/dl

23

Promedio

118,1

Desviacin estndar:

20,959

Coeficiente de variacin:

21,54 %

CONCENTRACION g/L

Grafica de Levey

Jennings

LECTURA

24

SIMBOLOGIA
Promedio
1era desviacin estndar
2da desviacin estndar
Concentracin del pool de
muestras

CONCLUSIN

En la actualidad en los laboratorios clnicos es indispensable contar con un

sistema de calidad que gestione todos los procesos pre analticos, analticos y
post analticos de las secciones propias de un laboratorios, con el objetivo de
entregar a sus usuarios un servicio confiable.
En base a lo anterior se establecen tanto controles internos como controles
externos siendo el primero el de mayor importancia en la prctica diaria. Y se
define como
El conjunto de operaciones emprendidas por el personal de un laboratorio para
la evaluacin contina de la fiabilidad de su trabajo.

25

En este control interno podemos evaluar nuestros procesos analticos a

travs de materiales controles los cuales pueden ser comerciales o elaborados
por el mismo laboratorio, los cuales tienen como finalidad el verificar si los
proceso realizados son los correctos.
A travs del marco practico se pudo comprobar la importancia de comprender
cada uno de los mtodos utilizados para evaluar el desempeo analticos de las
pruebas bioqumicas, siendo de gran ayuda en el aprendizaje continuo.

BIBLIOGRAFA:

1.- Educacin continuada en el laboratorio clnico/ Control de la calidad interno:

una prctica muy actual ; 2011-2012 Ed Cont Lab Cln; 15: 97-111.
2.- Documentos tcnicos para el Laboratorio clnico; Gua tcnica para control
de calidad de mediciones cuantitativas en el laboratorio clnico, / 2005.
3.- Ricardo Guglielmone (col) ,Verificacin de mtodos en un laboratorio
acreditado y planificacin del control de calidad interno; Acta Bioqum Cln
Latinoam 2011; 45 (2): 335-47

26

27