SINTEZA REZULTATELOR

TESTAREA PROPRIETATILOR ANTIOXIDANTE,

ANTIPROLIFERATIVE SI PROAPOPTOTICE ALE
EXTRACTULUI POLIFENOLIC DIN AFINE PE CULTURI
CELULARE TUMORALE

Proiect TE_168/2010
Cod 109

10.12.2011

Obiectivele

O1 - Caracterizarea extractelor din punct de vedere al compoziiei

O2 - Dozarea compuilor bioactivi
O3 - Evaluarea in vitro a activitii antioxidante
Introducere
Interesul n antioxidani naturali, n special cei provenii din fructe i vegetale, a crescut
n ultimii ani. Afinele conin concentraii mari de polifenoli, n special antociani, acizi fenolici,
taninuri, carotenoide, vitamine A, C i E, acid folic i minerale ca i calciu, seleniu i zinc (Pineli
i alii, 2011). Afinele sunt consumate datorit utilizrii lor n tratarea afeciunilor biliare, a
tusei, tuberculozei i diabetului (Martineau i alii, 2006). Afinele conin concentraii mari de
antociani i compui fenolici cu activiti antioxidante in vitro mai mari comparativ cu alte fructe
(Wang i Jiao, 2000). Coninutul n compui fenolici ai afinelor este influenat de diferenele
genetice, de tipul cultivarului dar i de gradul de maturare la recoltare (Zadernowski i alii,
2005). Metodele folosite pentru determinarea activitii antioxidante pot fi clasificate n dou
grupe mari: metode bazate pe transfeul unui singur electron (SET) i cele prin care se transfer
atomi de hidrogen (HAT). Dintre metodele SET cele mai folosite sunt ABTS/TEAC (Trolox
equivalent antioxidant activity), FRAP (Ferric reducing ability), CUPRAC (Cooper reduction) i
DPPH (2,2-diphenylpicrylhydrazil radical scavenging activity). Metodele ORAC (oxygen radical
absorbance capacity) i TRAP (total radical-trapping antioxidant parameters) fac parte din
grupul metodelor HAT. Datorit diferenelor existente ntre mecanismele de aciune ale acestor
metode, o singur metod aplicat nu va reflecta antioxidanii prezeni n sistem (Li i alii,
2009).
Scopul acestui proiect este testarea efectului antioxidant al extractului de polifenoli totali
si respectiv de antociani i efectul proapoptotic al acestora asupra celulelor tumorale (ovariene i
de sn).
Etapa corespunztoare acestui an urmrete caracterizarea extractele de afine obinute din
soiuri de cultur i din flora spontan din punct de vedere al compoziiei n antociani,
antocianidine i carotenoide. Separarea i caracterizarea compuilor s-a fcut folosind
cromatografia lichid de nalt performan (HPLC-DAD). In paralel, s-a investigat polifenolii
totali, flavonoidele totale i antocianii totali folosind metode spectrofotometrice. S-a msurat
activitatea antioxidant pentru toate soiurile de afine luate in analiz folosind trei metode SET i
anume ABTS, FRAP, DPPH i o metod HAT ORAC.
S-au luat n analiz trei soiuri de afine de cultur (Vaccinium corymbosum), Eliot,
BlueCop i Duke i dou soiuri de afine culese din flora spontan ( Vaccinium myrtillus, Lot 1 i
Lot 2).

Material i metode
a) Extracia compuilor fenolici. Extracia s-a fcut folosind metanol acidulat cu HCl. Dup centrifugare
la 3500 rpm, reziduul s-a reextras pan la decolorare complet [El-Sayed i Hucl, 2003].
b) Separarea i dozarea antocianilor folosind HPLC-DAD. Separarea s-a facut pe o coloan Luna
Phenomenex C-18 (5m, 25 cm x 4.6 mm). Fazele mobile utilizate au fost: solventul A- acid formic (4.5%) n ap
bidistilat iar solventul B a fost acetonitril. Sistemul de eluare folosit a fost urmtorul : 10% B, 0-9 min; 12% B, 9-

17 min; 25% B 17-30 min; 90% B, 30-50 min; 10% B, 50-55 min.
c) Separarea i dozarea antocianidinelor folosind HPLC-DAD. S-a fcut prin aceeai metod ca i pentru
separarea antocianilor
d) Extracia carotenoidelor. Carotenoidele s-au extras folosind un amestec de solveni metanol:eter de
petrol:acetat de etil (1:1:1), sub agitare continu, pn la decolorarea complet a materialului [Breithaupt i
Schwack, 2000].
e) Separarea i dozarea carotenoidelor folosind HPLC-DAD. Identificarea i separarea carotenoidelor sa fcut pe o coloan cromatografic Zorbax ODS (250 x 4.6 mm, 3.5 m). Faza mobil folosit a fost: amestec de
acetonitril:ap (9:1) (solvntul A) i acetat de etil (solventul B). Gradientul ncepe cu 15 % B la 50 % B n 16 minute.
Procentul solventului B continu izocratic pn la minutul 60. Cromatogramele s-au nregistrat la 450 nm.
f) Determinarea concentraiei n polifenoli totali. S-a realizat folosind metoda Folin-Cioclteu modificat
[Singleton i alii, 1999]. Dup ce extractele au fost oxidate cu ajutorul reactivului Folin-Cioclteu, neutralizate cu
Na2CO3 i inute la ntuneric 90 minute, absorbana a fost citit la 750 m.
g). Determinarea coninutului n antociani totali. S-a realizat printr-o metod de pH-diferenial [Giusti i
Wrolstad, 2001]. Dup dizolvarea probelor n KCl i acetat de sodiu, dup diluia corespunztoare cu soluie tampon
de pH=1, s-au msurat absorbantele la 520 i 700 nm.
h). Determinarea coninutului n flavonoide totale. S-a folosit metoda colorimetric descris de Kim i
alii, 2003. Absorbana a fost citit la 510 nm dup adugare de NaNO 2 5% i AlCl3 5%.
i) Testarea activitii antioxidante folosind metoda DPPH. S-a realizat dup metoda descris de BrandWilliams i alii., 1995. S-a preparat o soluie proaspt de DPPH n methanol. Dup adugarea probelor de afine,
absorbana a fost citit la 515 nm, timp de 30 minute.
j) Testarea activitii antioxidante folosind metoda FRAP. S-au amestecat TPTZ, tampon acetat i clorura
feric iar dup adugarea FRAP-ului amestecul s-a incubat timp de 3 minute. Apoi s-au adugat probele de afine i
absorbana a fost citit imediat la 593 nm folosind un cititor de microplci Biotech [Benzie i Strain, 1996].
k) Testarea activitii antioxidante folosind metoda ORAC. Fiecrei probe de afine i s-a adugat o
soluie de fluorescein n tampon fosfat (pH=7.4) i au fost inute la 37 C timp de 30 de minute. Reacia s-a iniiat
prin adugare de 2,2-azobis-2-amidinopropan (AAPH) iar fluoresecna a fost msurat cinetic la 485 nm i 535 nm
[Huang i alii, 2002].
l) Testarea activitii antioxidante folosind metoda TEAC. Probele de afine si standardul de Trolox s-au
combinat cu o soluie de ABTS .+ (obinut prin reacia dintre ABTS i persulfat de potasiu la ntuneric timp de 1216 ore). Dup 6 minute de incubare la 30 C s-a citit absorbana la 734 nm [Arnao i alii, 2001]. Rezultatele s-au
exprimat ca micromoli echivaleni Trolox/ g prob.

Rezultate i discuii
Dup extracia compuilor fenolici din afine, s-a folosit cromatografia lichid de nalt
performana pentru separarea, identificarea i dozarea antocianilor i ai antocianidinelor
existente. Cromatogramele aferente sunt prezentate n Figura 1. Concentraiile antocianilor
identificai sunt prezentate n Tabelul 1.

Fig. 1. Profilul antocianilor i a antocianidinelor existente n soiul Bluecrop

Tabel 1. Concentraiile antocianilor individuali din afine (exprimai n mg/100 g fruct)
Compus

Delphinidin3-galactozida
Delphinidin3-glucozida
Cianidin3-galactozida
Delphinidin3-arabinozida
Cianidin3-glucozida
Petunidin3-galactozida
Petunidin3-glucozida
Peonidin3-galactozida
Petunidin3-arabinozida
Peonidin3-glucozida
Malvidin3-galactozida
Malvidin3-glucozida
Malvidin-3arabinozida

Timp de
retenie

Maximele
absorbanei

Vaccinium myrtillus

Vaccinium corymbosum

Lot 1

Lot 2

Bluecrop

Elliot

Duke

9.2

217; 277; 523

113.6711

73.438.1

53.297.2

ND

ND

10.6

217; 277; 523

119.8614

87.148.2

24.532

53.627

23.692.4

12.4

217; 279; 518

91.8510

37.954.3

9.961.8

ND

ND

13.01

217; 277; 529

66.649.2

76.358.8

31.782.6

41.075.1

13.641.1

14.4

217; 279; 518

96.4811

43.346.1

2.080.4

3.090.6

0.11

15.09

217; 277; 524

38.365.2

17.530.9

28.542.5

ND

ND

16.9

217; 278; 521

146.2718

85.197.8

25.142.5

21.351.9

8.180.9

19.4

217; 278; 520

8.711.3

ND

ND

125.7912

37.114.3

20.3

217; 277; 525

12.801.9

9.661.2

12.701.9

ND

ND

22.4

217; 278; 521

108.8112

28.912.2

54.377.5

120.9

12.141.1

25.3

217; 278; 527

119.5312

39.004.3

37.972.6

67.459

27.552.4

27.4

217; 277; 528

17.513.2

6.041.1

34.752.5

ND

ND

29.5

217; 277; 528

urme

urme

ND

ND

ND

n Vaccinium myrtillus, petunidin-3-glucozida i delfinidin-3-glucozida au cea mai mare

concentraie din totalul antocianilor prezeni (15.6% i 16.9%; 17.3 i 12.7% respectiv). n
Vaccinium corymbosum, peonidin-3-galactozida reprezint antocianul major n Elliot i Duke
(40.3% i 30.3 %) dar n varietatea BlueCrop peonidin-3-glucozida este absent, antocianul
major fiind reprezentat de peonidin-3-glucozida (17.3 %).
Profilul carotenoidelor din Lotul 1 din flora spontan este prezentat n Figura 2.
Carotenoidele s-au identificat n acord cu spectrele UV-VIS comparate cu datele de literatur i
co-eluie cu standarde. Luteina, -cryptoxanthina i -carotenul au fost principalele carotenoide
identificate n afine. Compoziia cantitativ a carotenoidelor identificate este prezentat n
Tabelul 2.

Tabel 2. Concentraia carotenoidelor

identificate n probele de afine (g/100 g)

Vaccinium
corymbosum
Elliot
Bluecrop
Duke
Vaccinium
myrtillus
Lot 1
Lot 2

Lutein
g/100 g

cryptoxanthin
g/100 g

carotene
g/100 g

20115bc
22019ab
18325c

50.2d
70.3c
urme

441.2c
501.6b
322d

24554a
23545a

100.6b
120.6a

624.1a
604.6a

Fig. 2. Cromatograma HPLC corespunztoare carotenoidelor din afine

Variaia n carotenoide totale n toate probele analizate a fost ntre 215 317 g/100
g. Cel mai mare coninut n carotenoide s-a gsit n Lotul 1 din flora spontan iar cel mai mic n
varietatea Duke. Dintre toate carotenoidele separate i identificate, luteina a avut cea mai mare
concentraie, urmat de -caroten i -cryptoxantina. S-au obinut diferene semnificative
(p<0.05) ntre concentraiile aferente luteinei n varietile Elliot i Duke comparativ cu celelalte
soiuri luate n analiz. n literatura de specialitate exist puine date referitor la compoziia n
carotenoide a afinelor. Rezultatele obinute sunt n concordan cu cercetri anterioare n care sau gsit valori ale carotenoidelor n afine de cultur de 290 g/100 g (Marinova i Ribarova,
2007).
Determinarea concentraiei n polifenoli, flavonoide i antociani totali
Datele comparative referitoare la coninutul afinelor n polifenoli, flavonoide i
antociani totali sunt prezentate n Tabelul 3.
Tabel 3. Coninutul n polifenoli, flavonoide i antociani totali din fructele de afine studiate
Polifenoli totali

Flavonoide totale

Antociani totali

GAE mg/100 g

mg QE/100 g

C3GE mg/100 g

Vaccinium corymbosum
Elliot

526.3 26d

92.82 8.4a

163.40 16.4c

Bluecrop

652.27 30c

103.18 10.2a

160.76 13.9c

Duke

424.84 20e

84.33 8b

100.58 13.5d

Vaccinium myrtillus

Lot 1

819.12 36a

110.36 12.3a

300.02 27.9a

Lot 2

672.59 30b

112.50 15a

252.23 18b

Pentru polifenolii totali acidul galic a fost utilizat ca i standard iar rezultatele (exprimate
ca i echivaleni de acid galic) au fost exprimate ca valori medii deviaia standard a trei probe
paralele. Valorile pentru polifenolii totali n probele de afine analizate au fost ntre 424.84 819.12 mg GAE/100 g. Lotul 1 corespunztor afinelor din flora spontan au artat cea mai mare
concentraie n polifenoli totali la 819.12 echivaleni acid galic /100 g urmat de Lotul 2 din flora
spontan (672.59 mg GAE/100g). Dintre soiurile cultivate, soiul BlueCrop a avut cea mai mare
concentraie n polifenoli totali (652.27 mg GAE/100 g) iar cea mai mic s-a nregistrat pentru
soiul Duke (424.84 mg GAE/100g). Diferene semnificative s-au obinut pentru toate soiurile de
afine luate n analiz (p<0.05).
Datele referitoare la coninutul n polifenoli totali obinute sunt comparabile cu cele
existe n literatura de specialitate. Giovanelli i Buratti, 2009 au raportat valori ntre 251-310 mg
GAE/100 g pentru afinele de cultur i ntre 577 i 614 mg GAE/100 g pentru afinele din flora
spontan.
Coninutul n flavonoide totale variaz ntre 84.33 mg QE/100 g n varietatea Duke la
112.5 mg QE/100 g n Lotul 2. Pentru celelalte soiuri de afine, datele obinute au fost: Lotul 1
(110.36 mg QE/100 g), Bluecrop (103.18 mg QE/100 g), Elliot (92.82 mg QE/100 g) i Duke
(84.33 mg QE/100 g). Nu s-au nregistrat diferene semnificative ntre soiurile Elliot, BlueCrop,
Lot 1 si Lot 2 (p<0.05).
Cel mai mare coninut n antociani totali s-a obinut n Lotul 1 (300.02 mg/100g), urmat
de Lotul 2 (252.23 mg/100g), Elliot (163.4 mg/100g), Bluecrop (160.76 mg/100g) iar cea mai
mic concentraie n antociani totali s-a obinut pentru soiul Duke (69.58 mg/100g). S-au obinut
diferene semnificative (p<0.05) ntre Lotul 1, Lotul 2 i Duke. Procentul de antociani totali din
polfenoli totali este ntre 23 % i 37 % ceea ce este n concordan cu datele raportate de ali
autori [Giovanelli i Buratti, 2009]. Datele obinute de noi pentru antocianii totali se ncadreaz
ntre valorile obinute de ali autori [Dragovi-Uzelac i alii].
Evaluarea in vitro a activitii antioxidante
Pentru msurarea activitii antioxidante totale ale extractelor din afine, s-au folosit patru
metode diferite. Tabelul 4 include valorile medii le activitii antioxidante obinute
Tabel 4. Activitatea antioxidant pentru fructele de afine folsind patru metode complementare diferite (FRAP,
ABTS, ORAC, DPPH)
FRAP

ABTS

M Fe2+/g

TE mol /g

Vaccinium
corymbosum

ORAC
TE mol/g

DPPH
scavenging
activity (%)

Elliot

50.74 1.9c

36.46 4.26c

38.051.56a

43.48 1.9d

Bluecrop

60.39 1.6b

37.96 2.98bc

37.04 1.7a

46.64 1.65c

Duke

33.03 2.54d

24.33 3.76d

34.85 1.3b

29.96 1.38e

Wild 1

73.71 3.2a

56.65 3.79a

38.49 1.01a

59.79 1.24a

Wild 2

64.87 2.9b

43.08 2.3b

37.78 0.89a

49.93 1.6b

Vaccinium
myrtillus

Valorile obinute pentru activitatea antioxidant folosind metoda ORAC nu sunt diferite
semnificativ ntre probe (34.85-38.49 mol TE/g). Rezultatele obinute sunt similare cu cele
obinute de Prior i alii, 1998 (17-37.1 mol TE/g) i mai mici decat valorile raportate de You i
alii, 2011 (44-55 mol TE/g). Pentru varietatea Duke, valorile obinute de noi 34.85 mol TE/g
sunt comparabile cu cele obinute de Wang i alii, 2009 (40.4 mol TE/g) and Moyer i alii.,
2002 (32.6 mol TE/g).
Metoda ABTS se bazeaz pe abilitatea antioxidant a extractelor de a reaciona cu
cationul ABTS+ generat n sistem. n contrast, metoda FRAP msoar abilitatea extractelor de a
reduce complexul cu cationul feric la cationul feros. Valorile medii obinute pentru ABTS i
FRAP sunt date n Tabelul 4. Afinele din Lotul 1 au avut cea mai mare activitate antioxidant
bazat pe metodele FRAP i ABTS (73.71 M Fe2+/g i 56.65 mol TE/g). Cea mai mic
activitate antioxidant folosind ambele meode s-a obinut pentru varietatea Duke. Ordinea
obinut prin ambele metode, FRAP i ABTS, a fost urmtoarea: Lot 1>Lot 2>Bluecrop>Elliot
>Duke. Valorile obinute prin metoda FRAP difer semnificativ ntre Lotul 1, Lotul 2, Bluecrop
i Duke (p<0.05). In metoda ABTS, s-au obinut diferene semnificative ntre Lotul 1, Lotul 2,
Elliot i Duke (p<0.05). Nu au fost obinute diferene semnificative ntre soiurile Elliot i
Bluecrop.
Valorile obinute prin metoda FRAP (33.03-73.71 M Fe2+/g) au fost mai mari decat cele
obinute de Koca and Karadeniz, 2009 (7.41-13.69 mol/g pentru afinele de cultur i 34.4557.92 mol/g pentru afinele din flora spontan).
Procentele de inhibiie folosind metoda DPPH sunt prezentate n Tabelul 4. S-au obinut
diferene semnificative ntre toate varietile de afine analizate, cu cea mai mare valoare pentru
Lotul 1 (59.79 %) iar cea mai mic pentru soiul Duke (29.96 %). Datele obinute sunt n
concordan cu datele obinute de ali autori: 34.13 % de inhibiie pentru afinele din flora
spontan (Li i alii, 2009) i 28 % de inhibiie (Ogawa i alii, 2008).
60

Inhibition (%)

50
E

40

Wild 1
Wild 2

30

BC
D

20
10
0
0

10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

Time (min)

Fig. 3. Cinetica activitii antioxidante ale extractelor din afine folosind metoda DPPH
7

Concluzii
S-au identificat 13 antociani i 4 antocianidine n soiurile de afine luate n analiz
n afinele din flora spontan petunidin-3-glucozida i delfinidin-3-glucozida
reprezint antocianii majoritari n timp de n afinele de cultur peonidin-3galactozida reprezint antocianul major
Luteina, -cryptoxanthina i -carotenul au fost principalele carotenoide
identificate n afine. Cel mai mare coninut n carotenoide s-a gsit n Lotul 1 din
flora spontan iar cel mai mic n varietatea Duke.
Afinele din flora spontan au avut o concentraie mai mare de polifenoli,
flavonoide i antociani totali comparativ cu afinele de cultur
S-au testat patru metode antioxidante referitor la activitatea antioxidant in vitro
i toate aceste metode au evideniat cea mai mare activitate antioxidant pentru
afinele culese din flora spontan

Publicaii realizate pe tematica proiectului

1. Andrea BUNEA, Dumitria O. RUGIN, Adela M. PINTEA, Zoria SCONA,
Claudiu I. BUNEA, Carmen SOCACIU, Comparative Polyphenolic Content and
Antioxidant Activities of Some Wild and Cultivated Blueberries from Romania, Not
Bot Horti Agrobo, 2011, 39(2):70-76 Print ISSN 0255-965X; Electronic 1842-4309
Factor de impact 0.483
2. Zoria SCONA, Dumitrita RUGIN, Floricua RANGA, Adela PINTEA, Andrea
BUNEA, Preliminary Data Regarding Phenolic Acid Content in Some Wild and
Cultivated Blueberries, Bulletin UASVM Animal Science and Biotechnologies, 68(12)/2011- Revist indexat n baz de date internaional

Comunicari la simpozioane internaionale

1. Andrea Bunea, Dumitria Rugin, Raluca Pop, Adela Pintea, Sanda Andrei, Claudiu
Bunea, Constantin Bele- Carotenoids and fatty acids profile and their quantification in
some wild and cultivated blueberries from Romania, 4-P470, Abstract publicat n
Chemicke Listy, 2011- Factor de impact 0.236
2. Simpozionul International USAMV Cluj, oct 2011 1 prezentare oral

Bibliografie

Pineli, L.L.O., Moretti, C.L., Santos, M.S., Campos, A.B., Brasileiro, A.V., Cordova, A.C., Chiarello, M.D. (2011).
Antioxidants and other chemical and physical characteristics of two strawberry cultivar at different ripeness stages.
J Food Compos Anal, 24,11-16.
Martineau, L.C., Couture, A., Spoor, D., Benhaddou-Andaloussi, A., Harris, C., Meddah, B., Leduc, C., Burt, A.,
Vuong, T., Le, P.M., Prentki, M., Bennett, S.A., Arnason, J.T., Haddad, P.S. (2006). Anti-diabetic properties of the
Canadian lowbush blueberry Vaccinium angustifolium Ait. Phytomedicine, 13, 612-623.
Wang, S.Y., Jiao, H. (2000). Antioxidant activity in fruits and leaves of blackberry, raspberry and strawberry varies
with cultivar and developmental stage. J Agric Food Chem, 48, 140-146.
Zadernowski, R., Naczk, M., Nesterowicz, J. (2005). Phenolic acid profiles in some small berries. J Agric Food
Chem, 53, 2118-2124.
Li, W., Hydamaka, A.W., Lowry, L., Beta, T. (2009). Comparison of antioxidant capacity and phenolic compounds
of berries, chokecherry and seabuckthorn. Cent Eur J Biol, 4, 499-506.
El-Sayed, M.A.A., Hucl, P. (2003). Composition and stability of anthocyanins in blue-grained wheat. J Agric Food
Chem, 51, 2174-2180.
Singleton, V.L., Orthofer, R., Lamuela-Ravents, R.M., Lester, P. (1999). Analysis of total phenols and other
oxidation substrates and antioxidants by means of Folin-Ciocalteu reagent. Meth Enzymol, 299, 152-178.
Giusti, M.M., Wrolstad, R.E. (2001). Characterization and measurement of anthocyanins by UV-Visible
spectroscopy. John Wiley & Sons, Inc., New York.
Kim, D.O., Jeong, S.W., Lee, C.Y. (2003). Antioxidant capacity of phenolic phytochemicals from various cultivars
of plums. Food Chem, 81, 321-326.
Brand-Williams, W., Cuvelier, M.E., Berset, C. (1995). Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity.
Food Sci Technol, 28, 25-30.
Benzie, I.F.F., Strain, J.J. (1996). The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of antioxidant
power: the FRAP assay. Anal Biochem, 239, 70-76.
Arnao, M.B., Cano, A., Alcolea, J.F., Acosta, M. (2001). Estimation of free radical-quenching activity of leaf
pigment extracts. Phytochem Anal, 12, 138-143.
Huang, D., Ou, B., Hampsch-Woodill, M., Flanagan, J.A., Prior, R.L. (2002). Highthroughput assay of oxygen
radical absorbance capacity (ORAC) using a multichannel liquid handling system coupled with a microplate
fluorescence reader in 96-well format. J Agric Food Chem, 50, 4437-4444.
Giovanelli, G., Buratti, S. (2009). Comparison of polyphenolic composition and antioxidant activity of wild Italian
blueberries and some cultivated varieties. Food Chem, 112, 903-908.
You, Q., Wang, B., Chen, F., Huang, Z., Wang, X., Luo, P.G. (2011). Comparison of anthocyanins and phenolics in
organically and conventionally grown blueberries in selected cultivars. Food Chem, 125, 201-208.
Prior, R.L., Cao, G., Martin, A., Sofic, E., McEwan, J., OBrien, C., Lischner, N., Ehlenfeldt, M., Kalt, W., Krever,
G., Mainland, C.M. (1998). Antioxidant capacity as influenced by total phenolic and anthocyanin content, maturity
and variety of Vaccinium species. J Agric Food Chem, 46, 2686-2693.
Wang, C.Y., Chen, C.T., Wang, S.Y. (2009). Changes of flavonoid content and antioxidant capacity in blueberries
after illumination with UV-C. Food Chem , 117, 426-431.
Moyer, R.A., Hummer, K.E., Finn, C.E., Frei, B., Wrolstad, R.E. (2002). Anthocyanins, phenolics and antioxidant
capacity in diverse small fruits: Vaccinium, Rubus and Ribes. J Agric Food Chem, 50, 519-525.
Koca, I., Karadeniz, B. (2009). Antioxidant properties of blackberry and blueberry fruits grown in the Black Sea
Region of Turkey. Sci Hortic, 121, 447-450
Ogawa, K., Sakakibara, H., Iwata, R., Ishii, T., Sato, T., Goda, T., Shimoi, K., Kumazawa, S. (2008). Anthocyanin
composition and antioxidant activity of the crowberry (Empetrum nigrum) and other berries. J Agric Food Chem,
56, 4457-4462
Marinova, D., Ribarova, F. (2007). HPLC determination of carotenoids in Bulgarian berries. Journal of Food
Composition and Analysis, 20, 370-374.
Breithaupt, D.E. , Schwack, W., 2000. Determination of free and bound carotenoids in paprika (Capsicum annuum
L.) by LC/MS. Eur Food Res Technol 211, 52-55

Cluj-Napoca, 10.12.2011

Director de Proiect,
Sef.lucr. dr. Andrea Bunea