6.

IMUNOGLOBULINELE I RIU
Imunoglobulinele sunt glicoproteine specializate n recunoaterea moleculelor non-self. Se
gsesc sub dou forme, circulant i de membran:
Forma circulant este reprezentat de moleculele de anticorpi, care se gsesc n snge, lichidul
interstiial i secreii. Anticorpii sunt sintetizai de plasmocite, celule care provin din LB activate
n urma contactului cu antigenul.
Forma membranar este reprezentat de monomeri de imunoglobuline, fixai pe suprafaa LB.
Aceste molecule intr n alctuirea receptorilor pentru antigen ai limfocitelor B (B-cell receptors BCR). Au rol de de activare a LB.
Imunoglobulinele solubile (anticorpii) sunt proteine care migreaz pe electroforez n
principal n fraciunea gamaglobulinelor. Imunoglobulinele nu migreaz exclusiv n fraciunea .
Exist clase importante de imunoglobuline care se regsesc n fraciunile i ale electroforezei.
Cele mai multe antigene cu care organismul vine n contact au o structur complex. n
general, pentru un anumit antigen, sistemul imun va genera mai multe tipuri de anticorpi, care vor
recunoate diferii epitopi. Fiecare anticorp recunoate specific un anumit epitop, de care se leag cu
o poriune care are structur complementar cu a epitopului. Aceast poriune se numete paratop,
situs de legare sau situs combinativ.
Structura anticorpilor
Similar altor molecule proteice, imunoglobulinele au o organizare spaial complex,
caracterizat prin structur primar, secundar, teriar i cuaternar. Toate imunoglobulinele au o
structur asemntoare, reprezentat de o unitate tetracatenar. Planul de organizare al domeniilor
imunoglobulinelor se regsete n multe alte proteine, de exemplu la unii receptori de suprafa.
Proteinele care conin cel puin un domeniu imunoglobulinic constituie superfamilia
imunoglobulinelor.
Toate tipurile de anticorpi au structur comun, fiind alctuii din 4 lanuri peptidice: dou
lanuri identice uoare (L) i dou lanuri identice grele (H).
Lanurile uoare au o greutate molecular de aproximativ 25 000 de daltoni iar lanurile grele
de aproximativ 50 000 de daltoni.
Fiecare lan uor este legat de un lan greu printr-o punte disulfidic i prin diferite alte
legturi noncovalente.Astfel se formeaz un heterodimer H - L. Heterodimerii sunt legai ntre ei de
asemenea prin puni disulfidice i legturi noncovalente.
Numrul de legturi disulfidice i aezarea acestora difer n funcie de familia de
imunoglobuline.
Structura imunoglobulinelor este strns legat de funciile pe care acestea trebuie s le
ndeplineasc. Pe de o parte, anticorpii se leag n mod specific de antigene, iar pe de alt parte pot
forma legturi cu o varietate de molecule efectoare i celule.
Papaina este o enzim care scindeaz molecula de imunoglobulin n trei fragmente:
1

dou fragmente identice care au capacitatea de a lega antigene. Acestea au fost denumite Fab
fragmente antigen binding. Aceste fragmente sunt alctuite dintr-un lan uor L i captul N terminal al unui lan greu H, legate prin puni disulfurice. Fragmentele Fab conin situsul
combinativ, format din regiunile variabile VH i VL. Un anticorp cu structur de monomer are 2
fragmente Fab, deci i 2 situsuri de legare, care permit anticorpului s lege dou molecule de
antigen.
un fragment Fc - fragment cristalizabil, care nu prezint capacitate de legare a antigenelor. Acest
fragment este alctuit din resturile lanurilor H. Fragmentul Fc este diferit n funcie de familia de
imunoglobuline.

Exist dou tipuri de lanuri uoare L: i . Nu exist diferene funcionale ntre anticorpii
care au lanuri fa de cei cu lanuri , iar motivul pentru care exist aceast variaie nu este
cunoscut. Aceste dou tipuri de lanuri intr n alctuirea tuturor claselor majore de imunoglobuline.
La oameni, raportul cantitativ ntre lanurile i este de 2 la 1.
n schimb, diferenele structurale existente ntre lanurile grele H sunt definitorii pentru
ncadrarea imunoglobulinelor n anumite clase i influeneaz semnificativ funcia acestora.
Exist 5 izotipuri majore de lanuri grele H: , , , , . Pe baza deosebirilor existente n
structura lanurilor grele H au fost descrise 5 clase de imunoglobuline: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
Situsul combinativ
Primii 100 de aminoacizi ale capetelor N-terminale ale lanurilor H i L prezint o
variabilitate marcat ntre anticorpi cu specificitate diferit. Aceste segmente sunt denumite regiunile
variabile V: VL pentru lanurile uoare i VH pentru lanurile grele.
Specificitatea diferit a anticorpilor este datorat acestei regiuni variabile. Asocierea dintre
VH i VL creeaz o zon de legare a antigenelor. Aceasta fost denumit situs combinativ sau situs de
legare a antigenului. n interiorul regiunii variabile exist cte 3 poziii numite hipervariabile. Acestea
constituie locul de legare cu antigenul i au fost denumite regiuni determinante ale
complementaritii (CDR - Complementary Determining Regions). Sistemul imun este capabil s
produc anticorpi mpotriva unei repertoriu vast de antigene prin generarea de imunoglobuline care
prezint CDR specifice pentru fiecare antigen.
Situsul combinativ pentru antigen este o cavitate mic format prin plicaturarea (ndoirea)
domeniilor VH i VL. Antigenul intr n aceast cavitate i angajeaz legturi cu domeniile V prin
complementaritate, pe principiul cheie-broasc.
Secvenele de aminoacizi care nu stabilesc legturi cu antigenul formeaz regiunea suport
FR (framework region).
CDR
n lungimea fiecrui lan polipeptidic a domeniilor VH i VL exist cte trei mici segmente,
numite CDR, formate fiecre din 5-10 aminoacizi.
CDR sunt aezate la distane mari una fa de alta pe parcursul secvenei primare de
aminoacizi a domeniilor VH i VL, dar ele sunt aduse una lng alta prin plicaturare. Structura
spaial a situsului combinativ este foarte important. Dac se separ lanurile H i L, fiecare dintre
domeniile VH i VL pierde capacitatea de recunoatere a antigenului. Structura spaial a CDR este
meninut de regiunea FR a situsului combinativ.

CDR realizeaz contactele cu epitopii. Aceste contacte sunt punctiforme. CDR sunt aezate n
vrful unor plicaturi care intr n interiorul situsului combinativ. Secvenele de aminoacizi din CDR
sunt complementare cu structura epitopilor.
Totalitatea celor ase segmente CDR formeaz paratopul sau situsul de legare pentru antigen.
El recunoate epitopul.
FR
Regiunea suport sau schelet, denumit FR (framework region) cuprinde restul secvenelor de
aminoacizi din domeniile VH i VL care nu se leag cu antigenul, dar care formeaz pereii situsului
combinativ. FR nu particip la contactul cu antigenul, dar aeaz optim n spaiu CDR prin
plicaturarea buclelor VH i VL. Plicaturarea VH i VL contribuie mult la specificitatea situsului
combinativ.
n organism se sintetizeaz o varietate extrem de mare de molecule de imunoglobuline,
estimat la circa 106 variante posibile. Variabilitatea structural se realizeaz printr-un proces de
recombinare a genelor care codific lanurile de imunoglobuline, n special regiunile variabile. n
cursul diferenierii precursorilor de limfocite B, n mduva hematogen, n nucleul acestor celule
acioneaz o enzim specific numit recombinaza, care reunete aciunile de endonucleaz i ligaz.
Recombinaza elimin unele fragmente din genele V, V i VH i aduce n apropiere cte dou
fragmente de gen, care se asociaz aleator. Dup pierderea de material genetic sunt alturate dou
segmente de gen care erau iniial situate la distan. n final se alipesc segmentul genic V de
segmentul C i rezult o gen funcional pentru un tip de imunoglobulin. Fiecare LB care va da
natere unei clone cu o anumit specificitate antigenic are cte o gen funcional care codific
lanuri H i L diferite de ale altor clone. Prin asocierea ntmpltoare a unui lan uor cu un lan greu
apare o diversitate foarte mare de combinaii posibile a domeniilor V, deci a situsurilor combinative
pentru antigen.
Regiunile constante ale lanurilor H i L seamn destul de mult ntre ele, indiferent de clasa
anticorpilor.
Funciile anticorpilor
Anticorpii rezultai n urma activrii rspunsului imun umoral au un rol esenial n
ndeprtarea antigenelor solubile i n distrugerea antigenelor corpusculate.
Legarea anticorpului de antigen se realizeaz prin intermediul fragmentului Fab, n timp ce
fragmentul Fc este responsabil de funciile biologice ale anticorpilor. Fragmentul Fc are capacitatea
de a activa molecule efectoare ale sistemului imun i de a fi recunoscut de ctre unele celule
imunocompetente. Efectele biologice ale fragmentului Fc sunt:
- Activeaz sistemul complement pe calea clasic;
- Se ataeaz de suprafaa unor celule cu rol imun (monocite, macrofage, neutrofile, eozinofile,
NK) i favorizeaz astfel fagocitoza microorganismelor sau procesul de ADCC distrugere a
unor celule int;
- Ajut trecerea transplacentar, de la mam la ft, a moleculelor de IgG.
-

Funciile principale ale anticorpilor sunt:

Neutralizarea antigenelor - este eficient n cazul toxinelor bacteriene, virusurilor i bacteriilor

care se gsesc n mediul extracelular. Prin legarea anticorpilor de acestea este mpiedicat
ataarea antigenelor de receptorii celulelor int.
Opsonizarea - favorizeaz fagocitoza antigenelor de ctre macrofage i polimorfonucleare
neutrofile. Aceste celule prezint pe suprafaa receptori pentru fragmentul Fc, numii FcR. Aceti
receptori permit legarea complexelor antigen / anticorp pe suprafaa macrofagelor i neutrofilelor.
Legarea mai multor complexe imune pe suprafaa fagocitelor determin iniierea unui semnal de
transducie intracelular care are drept rezultat fagocitoza acestora. Fagocitoza este un proces
complex, prin care agentul patogen este internalizat i devine inta unor mecanisme de distrugere
care determin liza agentului patogen.
Activarea complementului - este o proprietate pe care o posed moleculele de IgM i IgG.
Citotoxicitatea celular dependent de anticorpi (ADCC) - permite distrugerea celulelor proprii
ale organismului care au fost infectate cu virusuri sau cu bacterii intracelulare. Celulele infectate
viral produc proteine virale care servesc replicrii virusului. Unele dintre aceste molecule sunt
expuse pe suprafaa celulei respective. Moleculele virale sunt recunoscute ca nonself, se va
declana un rspuns imun umoral, cu producerea de anticorpi care se fixeaz pe aceste molecule
de suprafa. Celulele natural killer (NK), care au un rol important n rspunsul imun celular,
prezint receptori pentru fragmentul Fc. Astfel, anticorpii direcioneaz celulele natural killer (dar
i alte celule monocite, macrofage, neutrofile, eozinofile) ctre celulele infectate viral, cu liza
acestora din urm.

Colaborarea ntre anticorpi i complement duce la ndeprtarea sau distrugerea antigenelor

prin intermediul a trei mecanisme principale:
Anticorpii se fixeaz pe membrana bacteriilor i determin activarea complementului. Sistemul
complement este un sistem enzimatic care se activeaz n cascad i care determin liza osmotic a
antigenelor corpusculate (bacterii, celule) prin perforarea membranei.
Activarea local a sistemului complement de ctre anticorpi determin apariia unor cantiti
crescute de molecule de C3b. Acestea au la rndul lor capacitatea de opsoniza antigene i
promoveaz fagocitoza.
Eritrocitele prezint receptori pentru C3b. Molecule de C3b au capacitatea de a se ataa de
complexele imune. Complexele imune care nu pot fi fagocitate local sunt transportate de ctre
eritrocite la ficat sau splin, unde macrofagele locale fagociteaz complexele imune fr distruge
eritrocitele care au avut rol de transport.
Caracterele principale ale claselor de imunoglobuline
Clasa Greutatea
molecular
IgG 150 000 Da

IgA

Concentraia
seric
8-16 mg/ml

320 000 Da
1,4-4 mg/ml
(forma dimeric)
IgM 900 000 Da
0,5-2 mg/ml

% din
Ig serice
80%

Activarea complementului
++

13%

Funciile
majore
Aprarea antiviral,
antibacterian i
contra toxinelor
bacteriene n snge i
interstiiu
Aprarea mucoaselor

5- 10%

Ac aglutinani i

+++

IgD
IgE

185 000 Da
200 000 Da

sub 0,04 mg/ml sub 1%

17-450 ng/ml 0,002%

lizani contra bacteriilor

Funcie de BCR
Aprarea antiparazitar
Rol n anafilaxie

Imunoglobulinele G
Imunoglobulinele G (IgG) reprezint aproximativ 80% din totalul imunoglobulinelor
plasmatice (8-16 g/l). Sunt distribuite egal n sectorul intravascular i interstiial.
Moleculele de IgG sunt formate din dou lanuri grele i dou lanuri uoare sau . Exist
4 subclase de IgG, pe baza diferenelor existente la nivelul lanurilor : IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4.
Moleculele de IgG au greutatea molecular de circa 150 kDa. Au n general o durat de via
lung, de circa 3-4 sptmni. Excepie fac moleculele din subclasa IgG3, care triesc mai puin de o
sptmn (5-7 zile).
Toate subtipurile de IgG sunt caracteristice pentru rspunsul imun umoral secundar, care
apare la al 2,3,.. n contact cu antigenul. Sinteza lor este indus de IL-4, produs de LTH2.
Principalele caracteristici funcionale ale subclaselor de IgG sunt:
IgG activeaz sistemul complement (cu excepia IgG4);
IgG au capacitatea de a trece prin placent (cu excepia IgG2) i au un rol important n protejarea
ftului n primele luni de via;
IgG (mai ales IgG1 i IgG3) au rol important n opsonizare, pentru c prezint afinitate crescut
pentru receptorii Fc de pe suprafaa celulelor fagocitare.
Imunoglobulinele M
Imunoglobulinele M (IgM) reprezint ntre 5 i 10% din totalul imunoglobulinelor serice.
Forma monomeric de IgM se afl pe suprafaa limfocitelor B i intr n structura BCR.
Plasmocitele secret IgM circulante sub form de pentameri. Monomerii sunt aranjai astfel
nct fragmentele Fc se afl n centru iar cele 10 situsuri de legare al antigenului se afl la periferia
moleculei. Fiecare pentamer este format prin legarea monomerilor prin legturi disulfurice, legturi
care se constituie ntre anumite zone ale lanurilor grele, situate nspre captul C-terminal. n plus,
molecula de IgM conine un lan suplimentar polipeptidic numit lanul J (joining), care este necesar
pentru polimerizarea monomerilor.
Cele mai importante caracteristici funcionale ale IgM sunt:
IgM sunt mai eficiente dect IgG n activarea complementului.
IgM sunt mai eficiente dect IgG n neutralizarea toxinelor i particulelor virale.
IgM au capacitatea de aglutinare a hematiilor, bacteriilor i particulelor virale.
IgM prezint 10 situsuri de legare pentru antigen. O molecul de IgM poate lega n mod teoretic 10
molecule de antigen, cu condiia ca acestea s fie de dimensiuni reduse. De obicei o molecul de IgM
are capacitatea s lege 5 molecule de antigen.
IgM este clasa de imunoglobulin care este produs n timpul rspunsului imun primar.
IgM nu trec prin placent.

 Din cauza moleculei mari, IgM se gsete n concentraii reduse n lichidul interstiial, pentru c
difuzeaz cu greutate. n schimb, prezena lanului J permite moleculei de IgM s traverseze
structurile epiteliale prin transport activ. IgM se gsete n secreii i pe suprafaa mucoaselor, unde
are un rol accesor important pe lng IgA.
Imunoglobulinele A (IgA)
IgA este clasa de imunoglobuline predominant n secreiile exocrine: lapte matern, saliv,
lacrimi, mucusul tracturilor digestiv, bronic i genitourinar.
n ser, IgA reprezint 10-15% din totalul Ig.
n snge IgA circul n principal sub forma de monomeri. n secreiile mucoase IgA exist sub
form de dimeri (IgAs).
Moleculele de IgAs conin un lan polipeptidic J i o component secretorie, de asemenea de
natur peptidic. Lanul polipeptidic J este identic cu cel care se gsete n pentamerii de
imunoglobulin M. Componenta secretorie este sintetizat de celulele epiteliale.
-

Mecanismele de protecie ale IgAs la nivelul mucoaselor sunt multiple:

mpiedic colonizarea bacterian, prin mai multe mecanisme:
o IgAs sunt molecule hidrofile. Fixarea anticorpilor pe suprafaa bacteriilor determin
acoperirea acestora cu un nveli hidrofilic care mpiedic ataarea la suprafaa
mucoaselor organimului uman.
o IgAs au capacitatea de a aglutina bacteriile.
o Bacteriile acoperite de IgAs sunt oprite n stratul de mucus, datorit interaciunilor
componentei secretorii a IgAs cu moleculele de mucin.
Neutralizeaz particulele virale.
Neutralizeaz enzimele i toxinele bacteriene.
Au o serie de aciuni sinergice cu factori ai sistemului de aprare nnscut: lactoferina,
peroxidaz, lizozimul.
IgAs au un rol important n meninerea relaiei simbiotice cu bacteriile comensale din cavitatea
oral. Exist multe tipuri de IgAs dirijate contra antigenelor exprimate de bacteriile comensale i
care mpiedic trecerea acestora prin mucoas, n esuturi.
Componenta secretorie a IgAs are urmtoarele roluri:
Stabilizeaz imunoglobulinele mpotriva degradrii de ctre enzimele proteolitice din secreii.
Interacioneaz cu moleculele de mucin i determin meninerea IgAs n stratul de mucus.
Imunoglobulinele E (IgE)

IgE este o clas de imunoglobuline cu efecte biologice importante, cu toate c se gsete n

cantiti reduse n plasm - 0, 3 micrograme / ml.
Lanul greu epsilon este format din cinci domenii, unul variabil i patru constante. Molecula
de IgE nu are o zon balama i din aceast cauz este foarte rigid.
IgE au rol n aprarea antiparazitar i intervin n reacia de hipersensibilitate de tip 1, care
este responsabil pentru o varietate de afeciuni alergice, de la forme uoare (rinit alergic, urticarie)
pn la astmul bronic alergic i ocul anafilactic.

IgE sunt anticorpi citofili, adic dup ce sunt sintetizai de ctre plasmocite nu rmn n
plasm i n lichidul extracelular, ci se ataeaz prin receptori specifici pe suprafaa mastocitelor din
esuturi i bazofilelor din snge. Mastocitele i bazofilele posed un bogat echipament enzimatic i de
mediatori ai inflamaiei, care se afl n granulaiile citoplasmatice. Legarea antigenului de
imunoglobulinele E care se afl deja fixate pe suprafaa acestor celule declaneaz degranularea
celulelor i eliberarea mediatorilor inflamaiei n esuturi, cu apariia manifestrilor alergice.
RSPUNSUL IMUN UMORAL PRIMAR I SECUNDAR

Cele mai importante celule implicate n rspunsul imun umoral sunt:

limfocitele B - sunt celulele care se activeaz i se transform n plasmocite.
limfocitele T helper (n principal subtipul LTH2) - contribuie n mod esenial la activarea
limfocitelor B.

Rspunsul imun umoral primar este rspunsul imun care apare la primul contact cu un
antigen. Rspunsul primar are o faz de laten (4-5 zile), necesar recunoaterii antigenului de
ctre clona specific (selecie clonal), proliferrii acestei clone (expansiune clonal) i
diferenierii n plasmocite sau limfocite B cu memorie. Un limfocit B activat sufer aproximativ
10 diviziuni, dup care se transform n plasmocit sau celul de memorie.
Faza de laten este urmat de o etap de sintez susinut de anticorpi, n care
concentraia seric a acestora crete exponenial i atinge un nivel maxim, care persist o perioad
variabil. Dup aceast faz de platou, concentraia anticorpilor ncepe s scad treptat i se
stabilizeaz la un nivel variabil, n funcie de particularitile antigenului.
Durata acestor etape este dependent n principal de tipul de antigen. Rspunsul imun
umoral primar poate dura de la cteva zile pn la cteva sptmni. Antigenele corpusculate
induc un rspuns mai rapid dect antigenele solubile.
Clasa de imunoglobuline sintetizat n timpul rspunsului imun umoral primar este IgM.
Ulterior are loc un fenomen de comutare izotipic, adic clona de plasmocite oprete sinteza de
IgM i ncepe s produc IgG, cu aceeai specificitate antigenic.
Limfocitele B cu memorie au o durat de via variabil, n funcie de tipul de antigen i
de particularitile persoanelor respective. Unele limfocite B persist toat viaa.
Rspunsul imun umoral secundar se produce la un nou contact cu antigenul, cu condiia
existenei limfocitelor B cu memorie pentru antigenul respectiv.
Nu exist rspuns imun secundar pentru antigenele timoindependente, pentru c nu se
formeaz limfocite B cu memorie.
Rspunsul imun secundar are o perioad de laten mai redus (2-3 zile); n cursul lui se
sintetizeaz predominant molecule de IgG, cu afinitate crescut pentru antigen.
Titrul de IgG este mult crescut fa de titrul IgM, pentru c la cooperarea cu APC particip
LTH2 mature i numeroase, care stimuleaz intens clona de plasmocite.
Durata titrului protectiv de imunoglobuline din RIU secundar este mult mai mare dect n
RIU primar, datorit n principal LTH i LB de memorie.

Caracteristicile comparative ale rspunsului imun umoral primar i secundar

Caracteristica
Tipul de limfocite B
Perioada de laten
Timpul dup care se atinge
concentraia maxim de
anticorpi
Intensitatea rspunsului imun

Rspuns primar
LB naive
4 - 7 zile
7 - 10 zile

Rspuns secundar
LB cu memorie
1 - 3 zile
3 - 5 zile

variabil n funcie de antigen

de aproximativ 10 - 1 000 ori

mai mare dect cea din
rspunsul imun primar
Tipul de antigen care poate
att antigene timoindependente doar antigene timodependente
declana rspunsul imun
ct i timodependente
Afinitatea anticorpilor pentru sczut
crescut
antigen