Sunteți pe pagina 1din 7

1

8. SISTEMUL COMPLEMENT
Complementul este un sistem complex format din peste 30 de componente.
Aceste molecule pot fi solubile sau se gsesc pe suprafaa diverselor celule cu rol imunitar.
Complementul este format din enzime plasmatice capabile s produc liza celular, proteine
reglatoare i receptori membranari specifici CR (complement receptor).
Activitatea biologic a complementului influeneaz att imunitatea nnscut ct i pe cea
adaptativ. Sistemul complement este componenta major efectoare a rspunsului imun umoral.
Denumirea de complement a fost introdus de bacteriologul german Paul Ehrlich, care a
observat c acest sistem este indispensabil pentru aciunea bactericid a anticorpilor.
Proteinele care fac parte din sistemul complement sunt sintetizate n principal de
hepatocite, dar i de monocite, macrofage tisulare, etc.
Componentele circul sub forme inactive cunoscute ca proenzime sau zimogene, i sunt
activate n anumite condiii printr-un mecanism de proteoliz limitat. Proteoliza determin
ndeprtarea unui fragment inhibitor i expune situsul activ al componentei respective.
Activarea complementului se produce n cascad, ntr-o anumit ordine.
Convenional, fragmentele peptidice rezultate n urma activrii sunt denumite prin litere
mici. n cele mai multe cazuri, fragmentul mai mic rezultnd n urma proteolizei este numit a iar
fragmentul cu greutate molecular mai mare b. Exist o excepie de la aceast regul - C2a este
componenta mai mare.
Fragmentele mai mari se leag de cele mai apropiate inte de la locul de activare, iar
componentele mai mici difuzeaz i pot iniia un rspuns inflamator prin legarea de receptori
specifici.
FUNCIILE SISTEMULUI COMPLEMENT
Sistemul complement face legtura ntre imunitatea nnscut i imunitatea adaptativ.
Dup activarea iniial, componente ale complementului interacioneaz, se activeaz n
cascad i ndeplinesc funcii eseniale:
Liza celulelor, bacteriilor, virusurilor.
Opsonizare este realizat n principal de C3b i favorizeaz fagocitoza antigenelor
corpusculate. Prin opsonizare este realizat o recunoatere imunologic nespecific a unor
structuri non-self.
Legarea de receptorii specifici ai complementului aflai pe suprafaa celulelor imune determin
activarea acestora, cu sinteza de diverse molecule imunomodulatoare. Sistemul complement
influeneaz n special inflamaia, care este un mecanism de aprare nespecific (efect
proflogistic prin anafilatoxine).
Cleareance-ul complexelor imune faciliteaz ndeprtarea complexelor imune din circulaie
i transportul la splin i ficat.
Multe din efectele biologice ale complementului depind de legarea fragmentelor de
complement la receptori, receptori care se afl pe suprafaa diferitelor celule. Anumii receptori
pentru complement au un rol important n reglarea activitii complementului prin legarea
componentelor active biologic i degradarea acestora n produi inactivi.
Liza osmotic a antigenelor corpusculate
Complexul de atac al membranei (Mebranary attack complex MAC) este rezultatul final
al activrii sistemului complement. MAC este un complex tubuliform, format din mai multe
componente activate de pe calea comun, care se depune pe suprafaa antigenelor corpusculate i

2
le perforeaz membrana. n celule intr rapid o cantitate important de sodiu, conform gradientului
existent ntre mediul extra i cel intracelular. Ionii de sodiu sunt molecule osmotic active i
determin hiperhidratare intracelular, cu distrugerea antigenului corpusculat. Acest mecanism se
numete liz osmotic.

MAC poate liza:


bacterii
virusuri envelopate
parazii
celule nucleate (rol important pentru eliminarea celulor tumorale)
eritrocite

Calea clasic reprezint un mecanism de aprare specific, deoarece necesit prezena


anticorpilor.
Anticorpii specifici din clasele IgG sau IgM opsonizeaz antigenele corpusculate. Simpla
ataare a anticorpilor pe membran nu are efect de distrugere. Liza se produce prin aciunea
complementului.
Dup recunoaterea antigenelor, n molecula de anticorp (IgG sau IgM) apar modificri
conformaionale care se transmit de la Fab la Fc. Se exteriorizeaz situsul activator pentru
complement de pe fragmentul Fc, care activeaz calea clasic a complementului, cu formarea
MAC.
Complementul i anticorpii au roluri eseniale n aprarea antiviral, mai ales n etapele de
replicare iniiale. Aproape toate virusurile anvelopate pot fi lizate prin activarea complementului,
pentru c anvelopa viral este n general derivat din membrana plasmatic a celulelor infectate i
este susceptibil atacului MAC.
Cale altern i calea lectinei se pot activa fr a necesita prezena iniial a anticorpilor i
sunt mecanisme importante de aprare ale rspunsului imun nnscut.
Sistemul complement este important mai ales pentru aprarea mpotriva bacteriilor
gramnegative. Bacteriile gram pozitive sunt n general rezistente atacului MAC, deoarece prezint
un strat de peptidoglicani, care mpiedic ptrunderea complexului de atac.
Liza celulelor nucleate este important pentru eliminarea celulelor tumorale, care prezint
modificri antigenice i sunt recunoscute ca non-self.
Celulele canceroase pot endocita moleculele de MAC, atunci cnd acestea sunt n numr
mic i pot scpa aciunii litice a complementului. Din acest motiv, pentru liza unei celule tumorale
este necesar atacul simultan cu mai multe molecule MAC, n timp ce doar o singur molecul de
MAC poate liza o hematie.
Opsonizarea
n opsonizare intervin trei componente ale complementului: C3b, C4b i iC3b, cea mai
important fiind C3b.
Spre deosebire de opsonizarea realizat de IgG, recunoaterea non-selfului n cazul
opsoninelor din sistemul complement este nespecific. Funcia de opsonizare se bazeaz pe
proprietatea C3b de a se ataa nespecific de componente membranare. Membranele self au pe
suprafa mai multe sisteme de protecie anticomplement (ex. moleculele DAF, receptori CR1),
care se opun depozitrii. Membranele non-self nu posed aceste sisteme, fiind opsonizate. n plus,
membranele celulelor mamiferelor conin niveluri crescute de acid sialic, care determin

3
inactivarea rapid a componentei C3b care a fost ataat de aceste celule. Din acest motiv, legarea
C3b nu determin formarea MAC.
Structurile nonself - bacteriile, virusurile anvelopate, fungii - au niveluri sczute de acid
sialic n membran, fapt care permite legarea unor cantiti crescute de C3b pentru o perioad mai
lung de timp.
n snge i n lichidele interstiiale exist permanent C3b n concentraie redus, datorit
funcionrii constante a cii alterne.
Celulele fagocitare au pe suprafa receptori pentru complement (CR1, CR3 i CR4) care
pot lega C3b, C4b, respectiv iC3b. Receptorii CR1 leag att C3b ct i C4b. Activarea celulelor
fagocitare de ctre anafilatoxine (n special C5a) determin creterea de aproximativ 10 ori a
numrului de receptori pentru complement.
CR1 este prezent pe: hematii, plachete, PMN neutrofile i eozinofile, monocite, MF, LB,
LTH, celule dendritice, podocite glomerulare. CR1 are mai multe funcii:
Favorizeaz captarea antigenelor corpusculate opsonizate cu C3b de ctre celulele fagocitare.
Favorizeaz aderena complexelor imune solubile care conin C3b pe suprafaa hematiilor, care
le transport la MF din ficat i splin.
Particip la activarea limfocitelor.
Regleaz activarea cascadei complementului pe calea clasic, prin fixarea C3b i C4b pe
suprafaa unor celule, ct i pe calea altern.
Opsoninele direcioneaz antigenul ctre receptorii celulelor fagocitare, cresc capacitatea
de procesare a antigenului i n consecin accelereaz producia de anticorpi.
Clearence-ul complexelor imune
Importana acestui sistem n clearance-ul complexelor imune este observat n cazul
pacienilor cu deficite de sintez pentru diferii factori ai complementului. Lupusul eritematos
sistemic (LES) este o afeciune autoimun complex caracterizat prin prezena n circulaie a unor
cantiti importante de complexe imune i apariia de leziuni n diferite organe, din cauza depunerii
acestor complexe. 90% din persoanele care prezint deficit absolut de C4 dezvolt lupus
eritematos. De asemenea, deficitele de C1 si C2 cresc riscul de apariie a bolii. Deficitul de
complement interfer cu solubilizarea i clearance-ul complexelor imune, ca urmare complexele
persist i se agraveaz leziunile tisulare.
Complexele imune se formeaz n etapa final a rspunsului imun umoral, prin legarea
anticorpilor de antigenele solubile. Complexele trebuie eliminate de ctre MF i neutrofile prin
fagocitoz.
Fiziologic, complexele imune se produc cu exces de anticorpi i formeaz reele. n
ochiurile lor se prinde C3b, produs continuu pe calea altern a complementului. Fixarea covalent
a moleculelor C3b mpiedic legarea fragmentelor Fc ale moleculelor de imunoglobuline i
formarea unor agregate mari i insolubile. Complexele imune formate au dimensiuni relativ mici.
Dac complexele imune se formeaz n esuturi, ele sunt captate de MF locale care au receptori
CR1 pentru C3b.
Atunci cnd se afl n circulaie, complexele imune pot fi captate de hematii, care au pe
suprafa receptori CR1. Acestea le transport la macrofagele din splin i ficat, unde sunt
fagocitate. Eritrocitele exprim pe suprafa un numr relativ redus de receptori pentru
complement (aproximativ 100/hematie vs. 1000/leucocit), dar sunt cele mai numeroase

4
elemente figurate, motiv pentru care transport mai mult de 90% din complexe imune
circulante.
Aciunile proflogistice (proinflamatorii)
Fragmentele de dimensiune mic care se desprind prin proteoliz limitat, n momentul
activrii factorilor C3, C4 i C5 sunt numite C3a, C4a, respectiv C5a. Aceste molecule acioneaz
pe receptori specifici i au efecte proinflamatorii. Atunci cnd se elibereaz cantiti crescute sau
sunt administrate sistemic, pot determina apariia unui sindrom de tip oc anafilactic, cu colaps
vascular. Din acest motiv, aceste fragmente mai sunt cunoscute sub numele de anafilatoxine.
Dintre toate anafilatoxinele, C5a are activitatea biologic cea mai specific i intens.
Toate cele 3 componente determin creterea permeabilitii vasculare i contracia
muchilor netezi.
C3a i C5a au n plus urmtoarele efecte:
Stimuleaz degranularea mastocitelor i bazofilelor, cu eliberarea histaminei.
Au efect intens chemotactic asupra PMN i monocitelor.
Cresc expresia de molecule de adeziune pe membrana celulele endoteliale.
C5a particip i la activarea celulelor fagocitare i cre te capacitatea acestora de a distruge
agenii patogeni.
SCHEMA DE ACTIVARE A CASCADEI COMPLEMENTULUI
Evenimentul central al activrii cascadei complementului este conversia componentei C3 n
fragmentele C3a i C3b. Conversia se face prin proteoliz limitat sub aciunea enzimei numit
C3-convertaza.
C3-convertaza este sintetizat pe calea altern, clasic sau pe calea lectinei. C3-convertaza
are aceleai roluri, indiferent de calea de activare, dar structura este diferit. C3-convertaza care se
formeaz pe calea clasic i pe cea a lectinei este diferit structural de cea de pe calea altern.
Pe toate cele trei ci, formarea C3b duce la activarea factorilor din secvena terminal: C5,
C6, C7, C8, C9. Acetia formeaz MAC (complexul de atac al membranei), cu structur tubular,
care perforeaz membrana antigenului corpusculat.

Calea clasic are urmtoarele caractere:


Este mai recent filogenetic.
Funcioneaza intermitent, numai atunci cnd n mediul intern apar complexe imune
membranare, adic anticorpi IgG sau IgM ataai de membrana antigenelor corpusculate.
Este un mecanism efector al sistemul imun adaptativ.

Calea altern se caracterizeaz prin:


Este mai veche filogenetic.
Funcioneaz permanent, la un nivel bazal sczut.
Produce continuu mici cantiti de C3b.
Face parte din sistemul nnscut.

Calea lectinei:
Reprezint o modalitate de activare a componentelor de pe calea clasic, fr a fi nevoie de
prezena unor anticorpi specifici.

Face legtura ntre calea clasic i calea altern, deci ntre sistemul imun nnscut i cel
adaptativ.
Caracteristicile comune ale cilor de activare a complementului

Cele mai importante caractere de funcionare a sistemului complement sunt:


Proteoliza limitat componentele circul sub forme inactive (proenzime sau zimogene) i
sunt activate n anumite condiii printr-un mecanism de proteoliz limitat. Proteoliza
determin ndeprtarea unui fragment inhibitor (de dimensiuni reduse, numit convenional
a) i expune situsul activ al fragmentului mai mare numit b.
Principiul cascadei dup ce un zimogen se activeaz, enzima activ acioneaz pe alt
zimogen, etc. Exist etape de activare n care exist un proces de amplificare semnificativ a
activrii. De exemplu, o singur molecul de C3-convertaz poate genera mai mult de 2000
molecule de C3b.
Reaciile sistemului complement se desfoar pe membrana celulei int: fragmentul mic a
rmne n faza fluid, iar fragmentul b se depoziteaz pe membrana non-self. Prin depuneri
succesive pe suprafaa membranei se formeaz complexe enzimatice macromoleculare.
Calea clasic de activare a complementului

Calea clasic de activare a complementului este activat de prezena complexelor imune


aflate pe diverse membrane ale antigenelor corpusculate. Etapele activrii implic componentele
C1, C2, C3 i C4, care sunt prezente n plasm n forme inactive.
Din cauza faptului c aceste componente au fost denumite n ordinea descoperirii,
numrtoarea nu reflect ordinea n care se activeaz.
Complementul poate fi activat de IgM i anumite clase de IgG (IgG1, IgG2 i IgG3). Cei
mai puternici activatori ai cii clasice sunt n ordine: IgM, IgG3 i IgG1. IgG 2 activeaz slab
complementul.
Activarea cascadei complementului pe calea clasic poate fi mprit n dou etape:
Etapa de recunoatere a complexului antigen-anticorp
Generarea convertazelor din calea clasic: C3 i C5-convertaza.
Etapa de recunoatere
Interaciunea dintre antigen i anticorp duce la apariia unor modificri conformaionale la
nivelul domeniului constant CH2 aflat pe fragmentul Fc al moleculei de imunoglobulin. Aceste
modificri determin expunerea unui situs de legare pentru componenta C1 a complementului.
C1 este un complex macromolecular format din C1q i cte dou molecule de C1r i C1s,
complex care este stabilizat de ctre ionii de calciu.
C1r i C1s sunt serinproteaze.
C1q se activeaz cnd cel puin dou poriuni globulare s-au legat de anticorpi. Moleculele
de IgM sunt pentamerice, iar legarea de antigen determin modificarea structurii spaiale cu
expunerea a cel puin 3 situsuri de legare pentru C1q.
O molecul de IgG prezint doar un singur situs de legare la nivelul domeniului constant
CH2. Activarea este obinut doar atunci cnd exist dou molecule de IgG suficient de apropiate
(30nm), aflate pe suprafaa unui antigen corpuscular.
Astfel, o singur molecul de IgM poate activa cascada complementului, n timp ce pentru
IgG este necesar prezena a numeroase molecule pentru a asigura o densitate suficient. Pentru
liza unei hematii sunt necesare aproximativ 1000 de molecule de IgG.

6
Legarea C1q la fragmentul Fc determin apariia unor modificri n structura C1r cu
transformarea ntr-o enzim activ, care cliveaz C1s.
Generarea C3 i C5-convertazei
C1s activeaz iniial C4, apoi C2. Prin activarea C4 se formeaz un fragment mai mic C4a
(6 kDa) care se desprinde de la captul aminoterminal al lanului . Fragmentul C4a este un
mediator al inflamaiei i nu particip n mod direct la cascada complementului. Fragmentul C4b
se ataeaz de suprafaa int n vecintatea C1. C4b prezint un situs activ de care se fixeaz C2.
C4b are rol de cofactor, adic fixeaz C2 pe membrana celulei int.
C2 este activat de ctre C1s.
Rezult un complex C4b2b, numit C3-convertaza cii clasice, datorit rolului n
transformarea C3 n form activ. n C3-convertaza cii clasice, C2b este enzima iar C4b este
cofactor.
C3 este componenta central a sistemului complement. C3 se gsete n ser n
concentraiile cele mai mari, de 0,6-1,8 mg/ml.
O singur molecul de C3-convertaz poate genera mai mult de 2000 molecule de C3b,
aceast etap fiind una de amplificare a cascadei complementului.
Depozitarea C3b pe suprafaa antigenelor corpusculate este esenial pentru funcia tuturor
cilor complementului.
Depozitarea C3b pe membrane se poate face n dou moduri:
Dac C3b se depoziteaz ntr-un strat, se produce opsonizarea, care favorizeaz fagocitoza
antigenelor corpusculate de ctre celulele cu receptori CR1, cum sunt MF i neutrofilele.
Dac C3b se depune n complex cu C3-convertaza, se produce un complex trimolecular
C4b2b3b care reprezint C5-convertaza, care mai departe formeaz MAC.
Calea comun de activare a complementului (formarea MAC)
Calea comun este etapa final a tuturor celor 3 ci de activare a complementului.
Aceast cale presupune activarea C5, C6, C7, C8 i C9, activare care se produce secvenial,
cu formarea complexului de atac al membranei. Complexul de atac al membranei antigenelor
corpusculate este format din cte o molecul de C5b, C6, C7, C8 i mai multe molecule (ntre 6 i
18) de C9.
Rezultatul final al celor 3 ci de activare este formarea unui complex macromolecular care
are capacitatea de a activa C5 (C5-convertaza).

Etapele formrii MAC sunt urmtoarele:


Activarea C5 de ctre C5-convertaz. Rezult C5a (cea mai important anafilatoxin) i C5b
care intr n structura MAC. C5b se ataeaz de membrana celulei int.
C5b este o molecul instabil chimic, care se inactiveaz n aproximativ dou minute. C5b este
stabilizat prin legarea C6.
La C5b6 se ataeaz C7. Complexul C5b67 prezint modificri structurale, cu expunerea unor
regiuni hidrofobe, care permit legarea de fosfolipide aflate n membrana int. Prin aceast
interaciune, C5b67 se inser n interiorul stratului fosfolipidic membranar.
C5b67 poate lega factorul C8.
Ultima etap este legarea i polimerizarea componentei C9, o molecul similar structural cu
perforina. C9 se ataeaz la C5b678. Un complex C5b678 poate lega i polimeriza ntre 6 i 18
molecule de C9. Prin activarea C9, sunt exteriorizate situsuri hidrofobe, care permit inserarea
C9 n membrane. Polimerizarea C9 duce la formarea unei structuri tubulare de diametru de

7
aproximativ 70 - 100 . Celula nu-i mai poate menine stabilitatea osmotic, este lizat prin
influxul de ap i ioni de sodiu i pierderea de ali electrolii.