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b) ESPECFICOS:
i)
2. FUNDAMENTO TERICO
2.1.
15
2.2.
15
2.3.
15
15
Escherichia
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter
1 Vibrio Cholerae
2 E. Coli
2.4. CONTEO
BACTERIANO
4 Shiguella
3 Salmonella
15
producir las colonias, ya que se necesitan como mnimo veinticuatro horas o ms.
Por otra parte, no es cien por ciento fiable porque generalmente las colonias
crecen unidas en cadenas o en grupos.
OJO: Nosotros usaremos como rango sugerido 30-300 UFC
a.1 Unidades Formadoras de Colonias: Unidades Formadoras de Colonias es un
valor que indica el grado de contaminacin microbiolgica de un ambiente.
Expresa el nmero relativo de microorganismos de un taxn determinado en un
volumen de un metro cbico de agua.
UFC es el nmero mnimo de clulas separables sobre la superficie, o dentro, de
un medio de agar semi-slido que da lugar al desarrollo de una colonia visible del
orden de decenas de millones de clulas descendientes. Las UFC pueden ser
pares (diplococos), cadena (estreptococos) o racimos (estafilococos), as como
clulas individuales Unidad formadora de colonias.
Una dilucin hecha con bacteria y agua peptonada se coloca en el plato de agar
(Cuenta de plato agar para muestras alimenticias o Agar trypticase de soja para
muestras clnicas) y expandida en el plato siguiendo este patrn.
SE MIDE : UFC/ml
3. MATERIALES
Tres frascos de dilucin y dos
esptulas
OTROS MATERIALES:
-AGUA DESTILADA
-PERA
-AUTOCLAVE
15
-HORNO
-GUANTES DE ASBESTO
-TERMMETRO
-FSFOROS
CANASTILLAS
CANASTA
PEPTONA
15
4.
PROCEDIMIENTO
1) PREPARACIN DEL MEDIO DE CULTIVO
1.1)
Se desea preparar una muestra de 135 ml de agar nutritivo, para luego
ser distribuidos en nueve (09) tubos de prueba. Tres (03) tubos de agar
nutritivo para cada grupo.
Se sabe que: Concentracin del agar: 23g/L
TUBOS DE PRUEBA (09)
COCINILLA ELCTRICA
Por regla de tres simple: 23g --------- 1 L
X---------- 135 ml
X=3.105 g es la masa de agar que se debe pesar para preparar 135 ml.
1.2)
1.3)
5 PASO 1.2
6 PASO 1.3
1.4)
15
Luego los tubos son colocados en una canastilla para ser llevados al
autoclave aproximadamente 1 h.
7 PASO 1.5
8 PASO 1.4
2) PREPARACIN
ESTRIL(agua destilada + peptona)
DEL
AGUA
DE
DISOLUCIN
2.1)
2.2)
2.3)
2.4)
15
15
11 Paso i. y ii.
iii.
Extraemos 1 ml y 0.1 ml
de muestra con una
pipeta
12 Muestra de
agua
13 Agua de
disolucin
(99ml)
10-1
10-2
15
iv.
v.
Cuando se tienen listas las placas, moverlas circularmente para que exista
una distribucin uniforme de la mezcla
Una vez lista las nueve placas con muestra de agua (3 por cada grupo), las
colocamos en forma invertida en la incubadora durante 48 horas aprox. Y
esperamos los resultados.
5. RESULTADOS
GRUP
O
MUESTRA
1 BAO FIA
ESTANQUE DE
3 ARQUITECTURA
5 LAVADERO DE
PLATOS DEL
TEATRO
PLACAS
PLACAS GRUPO 3
FECH
A
HORA T (C)
16/09/20
14
11:00
a.m.
16/09/20
14
16/09/20
14
11:22
a.m.
12:00
a.m.
19
21
18.5
GRUPO 1
15
PLACAS GRUPO
GRU
PO
MUESTRA
1
ml
287
DILUCIN
10101
2
ml
ml
118
(*)
UFC/
ml
BAO FIA
287
LAVADERO DE
PLATOS DEL
TEATRO
46
11
13
46
ESTANQUE DE
ARQUITECTURA
42
420
OBSERVACIN
-Tamao:
0.1mm<x<3mm
-Tiempo de incubacin:
>24 hrs (52 hrs)
-Color: crema
Tamao:0.5mm<x<3m
m
-Tiempo de
incubacin:52 hrs 22
min
-Color: crema
-Tamao: x>0.5mm
-Tiempo de incubacin:
53 hrs
-Color: amarillo
6. OBSERVACIONES
En la placa del grupo 1 (10-2 ml) se observa una distribucin anormal de las
colonias de bacterias, lo cual no debe ocurrir ya que es la placa de menor
concentracin. Esto se debe a que el frasco de dilucin no era estril.
Se observa que el tiempo de incubacin es promedio 52 horas en los tres
grupos, esto sugiere que exista en algunas placas una mala distribucin de las
colonias, ya que el tiempo normal de incubacin es 24 horas en el que las
bacterias forman 100 generaciones.
7. CONCLUSIONES
15
8. RECOMENDACIONES
Realizar cuidadosamente la extraccin de la muestra de agua, cerrarlo
hermticamente para evitar la intrusin de otros microorganismos.
Al momento de pasar el agar nutritivo a las placas no olvidar foguear la
boquilla de los tubos de prueba para as mantenerlo estril.
Por precaucin usar los guantes de asbesto al usar el autoclave y el horno
y la cocinilla elctrica.
No olvidar lavar con desinfectante los materiales.
9.
ANEXOS
15
15
10. BIBLIOGRAFA
http://www.upct.es/~minaeees/analisis_microbiologico_aguas.pdf
15
http://cdam.minam.gob.pe:8080/bitstream/123456789/109/3/CDAM0000012
-3.pdf
La calidad del agua potable en el Per, SUNASS/ pg. 43-49
Reglamento de la calidad del agua para consumo humano / MINSA,
Direccin General de Salud Ambiental/ Lima Per/ 2011/ ANEXO I, pg.
38.
http://www.psa.es/webesp/projects/solarsafewater/documents/libro/02_Capi
tulo_02.pdf
http://www.ecured.cu/index.php/Calidad_del_Agua
http://es.wikipedia.org/wiki/Formaci%C3%B3n_de_colonias_(Unidad)