Despre oameni si soareci utilizati in testele

clinice. Cat de mult semanam cu soarecii? De

ce avem nevoie de ei?

Pentru a dezvolta un nou medicament, acesta trebuie

sa fie testat ntr-o serie de studii clinice la om unde se
evalueaza siguranta si toleranta. Exista diferite tipuri
de cercetare clinica: de tratament, profilaxie, stil de
viata, diagnostic, genetice si epidemiologice. n astfel
de studii de planificare cercetatorii se confrunta cu
anumite intrebari: ce doza initiala trebuie utilizata? Ce
efecte adverse ar putea avea? Exista vreo modalitate
de a obtine informatii despre siguranta unui
medicament nainte de a fi testat pe oameni?
Soarecii au fost folositi cu succes pentru a valida scopurile
medicamentelor, eficacitatea si doza sigura pentru om. In acelasi
timp, soarecii se pot folosi pentru dezvoltarea rapida de tratamente
pentru boli foarte rare, unde numarul redus de pacienti mpiedica
crearea de studii clinice.
Uniunea Europeana a investit 550 milioane EUR n peste 180 de
proiecte care implica modele de soareci, incepand cu 1998 si in mai

2010, Comisia Europeana a organizatun workshop legat de utilitatea

folosirii soarecilor in cercetarile din domeniul sanatatii umane.
Ce fel de soareci sunt utilizati pentru experimente

Ceea ce face soarecele atat de special este similaritatea

genomului sau cu genomul uman (99% din genele umane sunt
gasite la soareci).
Desi exista specii (cum ar fi cainii, porcii si primatele), care sunt chiar
mai strans legate de noi decat soarecii, lucrul cu aceste animale mari
este costisitor si ridica anumite probleme de natura etica. Datorita
dimensiunilor lor reduse si timpului scurt de generare si reproducere,
pastrarea soarecilor este relativ simpla si necostisitoare. n plus,
deoarece acestia au fost utilizati pe scara larga n cercetare de zeci
de ani, cercetatorii inteleg mai bine biologia si genetica soarecilor si
au dezvoltat un numar mare de instrumente si tehnici pentru a-i
studia. Aceste instrumente genetice nu sunt nca disponibile pentru
mamifere mari.
n ultimii ani s-a nregistrat o crestere n utilizarea de soareci
modificati genetic (de multe ori cunoscuti ca modele de soareci
GEMMs), n cercetare si studii preclinice. Unele dintre aceste
modele pot imita o gama larga de boli umane si probleme de
sanatate, cum ar fi cancerul si diabetul. Este singurul model la care
este posibil sa generezi un organism in care o anumita gena a
soarecelui a fost inlocuita cu gena umana asemanatoare. Acest
soarece umanizat va produce si va trai cu versiunea umana a
proteinei. Pot fi creati soareci umanizati avand o versiune mutant a
unei gene umane, cunoscute a fi asociata cu o boala specifica. Un
astfel de model poate fi folosit pentru a testa eficacitatea posibila a
unui medicament.

Soarecii modificati genetic trebuie sa fie validati,

reproductibili, eficienti in raport cu costurile pentru a fi
considerati optimi de catre industria farmaceutica.
Utilizari cu succes

Medicamente impotriva cancerului

Unul dintre exemplele cele mai importante ale modului de utilizare a
modelelor de soareci care pot salva vieti omenesti vine de la
profesorul Pier Paolo Pandolfi de la Harvard Medical School din Statele
Unite. La inceputul carierei sale a descoperit mutatii genetice
responsabile pentru leucemia acuta promielocitara (LAP). APL este un
cancer frecvent la persoanele mai tinere (majoritatea pacientilor au
varsta cuprinsa ntre 15 si 55). Pana de curand, a fost extrem de
dificil de tratat, dar astazi datorita cercetarilor care implica GEMMs,
cei mai multi pacienti sunt complet vindecati.
Medicamente anti-obezitate
Lucrul cu gena leptinei la soareci a demonstrat rolul acestui hormon
in reglarea poftei de mancare si, prin extensie, in prevenirea
obezitatii. In zilele noastre, leptina este folosita ca tratament pentru
persoanele care sufera de un anumit tip de obezitate.
Folosirea terapiei genetice pentru tratamentul diabetului zaharat
Cazurile de diabet zaharat sunt n crestere la nivel mondial, dar
tratamentul ramane dificil. Fatima Bosch de la Universitatea
Autonoma din Barcelona n Spania a dezvoltat un tratament pentru
diabetul zaharat tip 1 la soareci, in care soarecii au fost injectati cu
vectori virali care contin gene sanatoase. Soarecii au fost complet
vindecati. n urma succesului obtinut la soareci, Bosch a continuat sa
dovedeasca eficacitatea acestei terapii genetice la caini. Studiile
clinice pe oameni sunt acum planificate.
Deoarece soarecii se reproduc rapid si tind sa aiba pui mari,
cercetatorii nu trebuie sa astepte mult timp pentru a evalua
rezultatele testelor la urmatoarele generatii, acestea apar n cateva
luni, nu in ani de zile cum s-ar intampla la subiectii umani.
Probleme care apar in testele clinice care utilizeaza soareci
Soarecii nu sunt ntotdeauna modele preclinice fiabile pentru bolile
umane si literatura stiintifica este plina de exemple de medicamente
care au functionat bine la animale, dar s-au dovedit a fi ineficiente n

studiile clinice pe oameni. Aceste esecuri costa milioane de euro

industria farmaceutica.

De exemplu, multi compusi chimici protejeaza soarecii

mpotriva unui accident vascular cerebral n laborator. Dar niciun
medicament neuroprotector nu a fost vreodata eficace in tratarea
accidentelor vascular cerebrale la om. Motivul este faptul ca
biochimia creierului oamenilor este diferita de cea a soarecilor.

Cei mai multi soareci utilizati n cercetare sunt tineri, dar multe
dintre bolile care sunt de mare interes pentru cercetatori (cum ar fi
cancerul si bolile de inima) sunt mai frecvente n randul persoanelor
n varsta. Acest lucru ridica probleme financiare, mentinerea
soarecilor in viata pentru mai mult timp implica costuri. Cu toate
acestea, mbatranirea este o problema importanta in contextul in
care guvernele trebuie sa faca fata provocarii de a ngriji o populatie
mbatranita.

Alte probleme ar fi legate de influenta mediului n care soarecii

traiesc si de variabilitatea genetica. Aplicarea informatiilor culese de
la un organism la o populatie umana diversa este problematica. n
acelasi timp, cercetatorii trebuie sa aiba n vedere faptul ca variatiile
genetice la soareci pot afecta rezultatele

Exista semne de intrebare si asupra dozelor administrate la

soareci care nu pot fi folosite si la oameni. n plus, mai multe modele
de soareci utilizate n cercetare nu au un sistem imunitar deplin
functional, ceea ce nu este cazul la pacientii umani.
Ce se evalueaza mai exact prin studiile preclinice pe animale?

Eficacitatea printr-o explorare sistematica a efectelor posibile

ale unui medicament

Toxicitatea acuta studiul mortalitatii dupa administrarea unei

doze unice de produs la o specie de animale permite determinarea
dozei letale 50, sau LD50, care este doza de care ucide 50% din
animalele tratate ntr-un timp determinat, de exemplu, opt zile.

Toxicitate cronica consecintele administrarii repetate a

produsului investigat, experimentarea se realizeaza la doua sau trei
specii de animale adulte diferite. Cand medicamentul este destinat

unui uz pediatric, o experimentare complementara pe animale tinere

poate fi utila pentru a detecta o posibila toxicitate la copii. Aceste
studii sunt foarte scumpe si sunt efectuate numai atunci cand
produsul ar trebui sa devina un medicament.

Toxicitatea si reproducerea modificari ale activitatii sexuale,

fertilitate si descendenti n cazul n care produsul este luat n timpul
sarcinii.

Efectul asupra urmasilor termenii de teratogen, embriotoxic si

fetotoxic sunt folositi pentru a caracteriza toxicitatea unui compus.

Riscul cancerigen si risul mutagen (riscul mutagen al unui

medicament consta n posibilitatea acestuia de a deteriorara
genomul)
n mod traditional, folosirea datelor de la animale pentru a stabili
doza initiala a unui medicament sau intervalul dintre doze pentru
utilizarea studiile clinice pe oameni a fost n principal, empirica.
Datorita esecului din studiile clinice din cauza dozarii suboptimale si
costului n crestere legat de dezvoltarea de medicamente, companiile
utilizeaza modelarea farmacocinetica / farmacodinamica (FC / FD).
Farmacocinetica (PK) presupune determinarea absorbtiei, distributiei,
metabolismului si proprietatile de eliminare ale unui medicament.
Farmacodinamica (PD) se refera la studiul efectelor biologice ale unui
medicament n organism, inclusiv relatia dintre concentratia
medicamentului si efectele sale. PD implica intrinsec mecanismele de
actiune ale medicamentelor precum si interactiunea dintre
medicamente cu alte molecule din organism. Combinatia PK si PD
ajuta la explicarea relatiei dintre doza de medicament si raspunsul
provenit de la pacienti.
Drepturile animalelor. Cum putem vorbi despre drepturile
soarecilor de laborator?
Asa-numitul trei R ( in engleza replacement, reduction and
refinement ) aplicat animalelor folosite in cercetare nlocuirea,
reducerea si perfectionarea a fost propus pentru prima data de
William Russell, un zoolog, si microbiologul Burch Rex. care au
sustinut ca cei implicati n utilizarea animalelor de laborator au

datoria morala de a cauta nlocuitori pentru experimentele pe

animale ori de cate ori este posibil, de a pastra numarul de animale
utilizate la un nivel minim si de a perfectiona procedurile pentru a
reduce disconfortul si stresul provocate animalelor.
n dreptul european, experimentele pe animale sunt clasificate n
functie de obiectivele lor. n dreptul german acestea sunt clasificate,
de exemplu, ca interventii si tratamente n scopuri experimentale,
pentru continuarea educatiei si formarii profesionale sau pentru
producerea, prepararea, depozitarea sau multiplicarea substantelor,
produselor sau organismelor si sunt reglementate cu strictete. Pentru
aparatorii drepturilor animalelor, termenul de experiment animal
include orice interventie si orice tratament, care este asociat cu
durere, frica si / sau suferinta la animalele respective. n consecinta,
ei cer eliminarea imediata a tuturor experimentelor pe animale.
n 2001, extremisti britanici, aparatori ai drepturilor animalelor, au
invadat universitati japoneze si au furat resursele de laborator; o
persoana a fost arestata si condamnata la nchisoare pentru trei ani.
n Japonia, Legea privind drepturile animalelor a fost revizuita n
2005, subliniind importanta celor 3R n activitatile stiintifice cu
animalele.
Din punctul de vedere al celor care permit experimentele pe animale,
scopul experimentului este mai important decat animalul si
responsabilitatea etica fata de om este mai mare decat cea pentru
animale. Si atunci intrebrea esentiala intr-o cercetare este: Pot
ajunge la scopul meu n timp ce cauzez suferinta animalelor,
folosind mai putine animale sau deloc?

Small-Animal PET: What Is It, and

Why Do We Need It?*

ROLUL GENERAL A PET MICIANIMAL

Cererea de PET mici animale este condus de
importana cercetrii bazate pe model animal. Soarecele
i obolanul gzdui un numr mare de boli umane.

Avantajul principal al mici animale

PET, comparativ cu CT mici animale i RMN, este c ne permite s studiem
procesele fiziologice i moleculare
anomalii care stau la baza bolii, mai degraba decat doar
Imaginea efectele finale ale modificrilor celulare i moleculare.
Imaging de tinte moleculare specifice mici animale
PET permite detectarea mai devreme si caracterizarea bolii,
Evaluarea molecular mai devreme i direct de tratament
efecte, i o nelegere fundamental a bolii
procese.

INFORMATII GENERALE DESPRE PET MICI-ANIMAL

Primele scanere PET mici animale au fost elaborate
20 y n urm (5-10). De atunci, att tehnologia i
baza de utilizatori de PET mici animale au experimentat fenomenal
cretere. n prezent, exist cteva sute smallanimal
Sistemele PET deja instalate. Ca un exemplu de
cretere baza de utilizatori, au existat 20 de prezentari de cercetare care
PET mici animale second hand la Societatea de Medicina Nucleara

reuniune anuala in 2000, iar numrul a crescut la 143 n

2007 (11).

Sisteme PET mici animale s pun n aplicare de date 3-dimensionale

achiziie n modul list (de exemplu, evenimente nregistrate individual fr
diagrame ca histograme) pentru a permite imagine timp de ncadrare
i ofer intrri oprire fiziologice pentru a corecta pentru
micare cardiace i respiratorii. Toate sistemele PET mici animale
folosesc tehnologii detector bazate fotomultiplicatoare, cu excepia
unul, LabPET (Gamma Medica / GE Healthcare),
care utilizeaz semiconductori avalansa fotodiod bazate pe
detectoare (15).

obolani i oareci nu sunt la fel de cooperant ca oameni. Roztoare

Nu rmn printr-o sesiune de formare a imaginii care, de obicei,
dureaz zeci de minute. Anestezie trebuie s fie utilizate pentru cele mai multe
proceduri imagistice. Anestezia este preferabil realizat prin mascarea animalul
cu un amestec de izofluran i
Gazele oxigen. Din cauza trupurile lor mai mici, fiziologic
Condiii de oareci i obolani sunt mai sensibile la mediu
Schimbri i hipotermie timpul procesului de imagistic.
Pentru a justifica fiabilitatea i reproductibilitatea datelor PET,
n special atunci cnd parametri fiziologici cum ar fi fluxul sanguin,
metabolismului substrat, sau organe funcii sunt investigate,
o surs de nclzire (bec, fluxul de aer, sau tampon) trebuie s fie
utilizat pentru a menine temperatura corpului animalului, i vital
semnalizri trebuie monitorizate pentru a verifica homeostazia animalului.
Masa trasor injectat ntr-un animal mic trebuie s fie
suficient de sczut ca stare natural fiziologice ale
animal nu este afectat.

Deoarece activitatea specific trasor (Bq / g) este de obicei fixat,

activitile trasoare permise sunt limitate. De exemplu, a fost
estimat c maxim injectat radioactivitatea
este 5.2 MBq la obolani i 0,3 MBq la oareci (16
, ceea ce reprezint 30 i 2,5 ml, respectiv,
pentru obolani i oareci.
Rezoluia spaial
Rezoluia spaial a unui scaner PET mici animale
depinde 4 factori ai proiectarea sistemului (17): dimensiunea
cristalul detector; sistem de decodare detectoarele, care
determin locaia particular n care fotonii interacioneaz
cu detectorul; pozitroni de gama de circulaie dup ei
emisiilor i nainte de anihilare; i fotonii anihilare "
absena coliniaritate, care este intrinsec anihilarea
fizica. Dup 20 y de cercetare intensiv i
Dezvoltarea (12), cea mai buna rezolutie a raportat pentru smallanimal
Sistemele PET a fost de aproximativ 1 mm n lime maxim
la jumtatea maxim (18).
Factorul avansare principal care duce la foarte
de nalt rezoluie de scanere recente PET mici animale este
utilizarea cristalelor lungi i subiri detectorului, cu latura lung
aliniat cu direcia radial i latura ngust
cu care se confrunt domeniul imagisticii de vedere.
Cele mai multe sisteme PET mici animale folosesc o geometrie cilindric
aa cum este utilizat n PET uman.

EXEMPLE DE MICI-ANIMALE APLICATII PET

Au fost raportate aplicaii ale PET mici animale
ntr-o gam larg de procese biologice (43). Aici ne
prezint exemple de aplicaii PET mici animale din fiecare

a 3 domenii de boli primare: oncologie, cardiologie, i

neurologie
. Aceeai oarecele a fost apoi injectat cu un 124I marcat
derivat al pyropheophorbide-a, care este o imagistica
i terapie fotodinamic agent bifuncional. Deoarece
de lung de njumtire a 124I (4,2 d), un studiu longitudinal
(mai multe scanri n timp) a fost posibil cu aceeai
oarece i acelai agent. Mouse-ul a fost fotografiat la 4
Timpii peste 3 d. Absorbie tumoare relativ la restul
corpul crescut n timp, indicnd faptul c agentul are
potenial promitor ca att un efect terapeutic i o tumoare monitorizare
agent.
Cardiologie
PET Mici-animal nu a fost utilizat pentru a studia cardiace
fiziologie, metabolismul i condiii similare cu cele
n investigaii cardiace umane si de mare de animale. Imaging
tehnici pentru a minimiza efectele de miscare de perete, cum ar fi
achizitii de date dependente, electrocardiograma i corespunztoare
analiza imaginii abordri elaborate pentru om
PET i SPECT cardiologie poate fi folosit pe obolan sau oarece
Imagini. Figura 5 prezint un exemplu de PET mici animale
imagistica funciilor cardiace ale unui obolan normal i un obolan
cu o regiune de infarct miocardic (55).
Imaginile miocardului obolan bolnav demonstra
un defect de absorbie n segmentul anterolateral,
remodelare a muchiului miocard, i o ejecie redus
fraciune. Cu suprimare a fasciculului, imaginea estomparea cauza cardiaca
micare a fost eliminat, iar un contrast mai mare a imaginii i def
definiie se au fost realizate.
Neurologie

De-a lungul anilor, o selecie larg de radiotrasori PET are

fost dezvoltat pentru imagistica creierului, cum ar fi H2
15O pentru msurarea
fluxului sanguin cerebral,
Figura 6 este un exemplu de aplicaie PET mici animale
n Neuropharmacology. Studiul a fost de a cuantifica modul Pglycoprotein
(O pomp de eflux la bariera hemato-encefalic)
i blocada cu ciclosporin A afecta absorbia creier de obolan
de 11C- (R) - (2) -RWAY (59). Figurile 6A i 6B arat o coronal
Imaginea creier de obolan de 11C- (R) - (2) -RWAY absorbia n care
2 regiuni de interes au fost plasate pe hippocampi stanga si dreapta
n referire la atlasului creier de obolan. Regionof-interes
Date timp de activitate ale hippocampi, dobndite
100 minute dup injectare i ncadrate cu neuniform
intervale de timp, au fost apoi utilizate pentru modelarea cinetic. Cifre
6C i 6E arat totale cerebral imaginile controlului

Dou alternative revoluionare bune tocmai au aprut

(60). Primul este activat de un smallanimal minunat de inginerie
Scanner PET care un obolan poate purta (61,62). Cntrire
doar 250 g, inelul detector i front-end electronice de
scanerul sunt montate pe cap de obolan i ataat la un
sistem de mobilitate animal care susine greutatea scanerului
i permite obolanul de a circula liber n jurul unui 40 40 cm
Camera de comportament n timp ce imaginile de PET sunt achiziionate.
al doilea (62) implic un sistem detector PET mici animale care
nconjoar o camer, i o urmrire precis i continu
sistem care permite poziia capului roztoarelor n cadrul
camera de msurat n timp. Animalul colind n
camer n timpul unei sesiuni de imagistica. Pentru reconstrucie a imaginii,

informaiilor de urmrire este utilizat pentru a alinia detectat

Evenimente PET pentru a forma un volum organism animal coerent.
Aceste 2 tehnici noi deschide o fereastra neinvaziv pentru
evaluarea functiei cerebrale si comportamentul ca rspuns la o gam larg de
varietate de intervenii n micare liber, nonanesthetized
roztoare.
(63). Comparativ cu CT, RMN are 3 Advan critic
Tages: contrast superior tesuturilor moi, imagistica simultana
cu mici-animal de companie, i libertatea de radiaiile ionizante.
Aceste avantaje fac integrate PET / RMN i integrat
mici-animal de companie / RMN o tehnologie care permite pentru
crearea unui nou domeniu in imagistica moleculara si celulara
(64,65). Cunoaterea diferite metabolice i funcionale
Parametrii msurai n acelai timp cu anatomie pot
perspective noi deschise n organizarea creierului i
modificrile acesteia in boala (66).

CONCLUZIE
PET mici animale are o sensibilitate rafinat i capacitatea
pentru a oferi cantitative, masuratori in vivo de fiziologie,
ci metabolice, si tinte moleculare adnci n interiorul esutului.
In ultimii 15 y, aceasta tehnica de imagistica a devenit
un instrument deosebit de important in cercetarea biomedicala pe baz de
animale.
Aplicarea PET mici animale a fost
extins n mai multe indicatii clinice suplimentare. Ei
importan a fost mbuntit n continuare prin integrarea cu
alte modalitati de formare a imaginii mici animale, cum ar fi CT si RMN.
Rolul su unic n dezvoltarea de lider sistem PET clinic
va avansa tehnologia PET pentru noi descoperiri incitante.