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Maura Fiallos
Laboratorio de Ingeniera Gentica, Facultad de Ciencia e Ingeniera en Alimentos,
Universidad Tcnica de Ambato
Resumen
En la prctica se cuantific por medio del Nanodrop la cantidad de ADN
genmico de levaduras presente en las muestras de extraccin obtenidas
mediante el mtodo de Hoffman. El equipo utilizado midi la concentracin
de ADN en ng/l con una relacin 260/280 de
de
cubetas
convencionales
basados
en
instrumentos
para
la
Para
Nanodrop
ADN genmico
Agua ultrapura
la
prctica
se
utiliz
un
Thermocientific
Nanodrop
2000
Tabla#1
Resultados de concentracin y pureza
Cdigo
Conc. (ng/l)
260/280
260/280
CC038
2042.3
1.83
1.97
CC037
3383.9
1.89
1.49
2274
2499.9
2.01
1.89
CC039
3333.0
1.78
1. 66
La
concentracin
pureza
del
ADN
fue
obtenida
mediante
pb
hasta
aproximadamente
50.000
pb
(variando
las
indica
el
la
relacin
entre
la
absorbancia
260nm/230nm?
El valor de la lectura a 230nm (longitud de onda mnima) est
influenciado por la cantidad de sales presentes en la muestra en
relacin a los 260nm de absorbancia de los cido nucleicos. (Acosta,
2013)
Conclusin
Se realiz la cuantificacin del ADN en el Nanodrop donde se
obtuvieron valores altos de concentracin de ADN de entre un rango
de 2000 a 3400 ng/l lo cual da la idea de una correcta extraccin del
material gentico y eficaz para realizar otros procesos moleculares
como PCR. En cuanto a la pureza de las muestras se estableci
empleando los rangos 260/280 nm donde los valores de 1.8 a 2.0 son
considerados como ADN puro para el rango libre de protena,
carbohidratos o ARN. En las muestras obtenidas solo 2 mostraron en
la segunda relacin valores menores a 1.8 lo que dio la idea de una
ligera contaminacin por protenas o carbohidratos. En general la
cuantificacin se encuentra entre los rangos esperados concluyendo
que se obtuvo ADN genmico de alta calidad.
Bibliografa
Universidad Nacional de Quilmes, 2010. Introduccin a la Biologa Molecular
y Celular TP5: Extraccin de ADN disponible en:
https://ibcmunq.files.wordpress.com
Saltos N, 2012. Extraccin de ADN genmico y amplificacin de la regin
ITS por PCR en el ascomicete marino disponible en:
http://repositorio.ug.edu.ec