1. A) Le han encargado en su laboratorio que prepare 1 ml de una
solucin stock 2,5mM de dNTPs para realizar las reacciones de PCR. Su laboratorio cuenta con soluciones 0,1 M independientes de cada dNTPs, es decir dATP, dCTP, dGTP y dTTP en tubos diferentes. Calcule el volumen de cada dNTP y la cantidad de agua que necesita para hacer la solucin stock que contenga todos los dNTPs. B) De acuerdo al manual de instrucciones de la TAq polimerasa con la que cuenta su laboratorio, se requiere una concentracin de dNTPs de 0,6 mM por tubo de reaccin de PCR. Calcule el volumen de la solucin stock que Usted prepar para preparar una solucin madre para 5 reacciones de PCR, en que cada reaccin tendr un volumen final de 25 l. 2. Usted es el nuevo/a ayudante en el curso BIO297C y la profesora le encarga que purifique el DNA-MIMIC y prepare las diluciones para un prepaso del prctico. Ud realiz una muy buena extraccin del DNAMIMIC, obteniendo una concentracin de 450ng/L. A) Realice los clculos para hacer 1ml de una dilucin de DNA-MIMIC a la concentracin de 10ng/L. A partir de esta solucin Ud. debe realizar 4 diluciones seriadas (1/10; 1/50; 1/100 y 1/200) de 20 L cada una. B) Indique paso a paso como hara las diluciones seriadas, exponga los clculos y volmenes a tomar de las soluciones y de agua. 3. Cada uno de los partidores que Ud. necesita para la mezcla de reaccin de PCR se encuentran a una concentracin de 0,17mM, esta concentracin es muy elevada para ser utilizada directamente en la reaccin de PCR, por lo que decide hacer una solucin ms diluida de sus primers. A) Cunto volumen necesita de la solucin concentrada para hacer 100 L de una solucin 8M? B) De esta solucin diluida Ud. requiere 7pmol por tubo de reaccin de PCR y tiene que hacer 5 tubos de reaccin a un volumen final 0,03ml, cuntos L necesita de la solucin diluida de primers por tubo?